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Neuroscience

受体激活的测量通过荧光素酶活性:哺乳动物的嗅觉受体的高通量分析

Published: June 2nd, 2014

DOI:

10.3791/51640

1Monell Chemical Senses Center

创建的气味嗅觉受体激活的独特和重叠的图案,让一个家庭的约1,000名鼠和400人的受体识别数以千计的气味的。加臭剂的配体已经公布人类受体1-11少于6%。这种缺乏数据的部分原因是由于功能上的困难表达这些受体在异源系统。在这里,我们描述了用于表达大多数嗅觉受体家族中Hana3A细胞,然后用荧光素酶报告基因分析嗅觉受体活化的高通量评估的方法。此法可用于(1)屏幕对嗅觉受体面板的气味的面板; (2)通过剂量反应曲线确定气味/受体相互作用;和(3)中的受体的变体比较受体的激活水平。在我们的样本数据,328的嗅觉受体进行了筛选对26的气味。气味/受体对具有不同的反应得分均选择位泰德和剂量反应测试。这些数据表明,一个屏幕是丰富对加臭剂/受体对,将通过剂量反应实验, 受体具有一种加臭剂善意响应的有效方法。因此,这种高通量荧光素酶测定法是表征嗅觉受体 - 一个基本朝向气味编码在哺乳动物嗅觉系统的一个模型的步骤的一种有效方法。

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