Avaliação in vitro do efeito de vesículas extracelulares derivadas de Células Tronco Mesenquimais (CTMs) geneticamente modificadas para superexpressar IGF-1 no crescimento de neuritos após estresse oxidativo

Resumo

Lesão raquimedular (LRM) se refere à lesão da coluna vertebral, e tem consequências devastadoras para o bem-estar físico, financeiro e psicossocial dos pacientes. As complicações clínicas incluem perda da mobilidade, disfunção urinária, sexual e reprodutiva, espasticidade, perda de sensibilidade e, paradoxalmente, dor neuropática. A dor impacta fortemente no estado de saúde e qualidade de vida desses pacientes, considerando não apenas sua severidade e duração, mas o perfil refratário ao tratamento farmacológico. O tratamento da LRM inclui cirurgia, terapias farmacológicas paliativas e reabilitação, que induzem apenas discretas melhorias clínicas. Nesse contexto, nosso grupo de pesquisa tem demonstrado ao longo dos últimos dez anos, tanto em condições experimentais quanto clínicas, o potencial terapêutico de células tronco mesenquimais (CTMs) na lesão raquimedular e dor neuropática. Em um desses estudos publicado anteriormente por nosso grupo, utilizando modelo experimental de LRM foi observado que CTMs modificadas geneticamente para superexpressar fator de crescimento semelhante a insulina (IGF-1) - citocina envolvida no desenvolvimento neural e reparo de lesões - promoveu um aumento na expressão de genes antioxidantes e protegeu contra a perda de mielina. Avanços do conhecimento na área de terapia celular indicam que as vesículas extracelulares (VE) derivadas de CTM (VE-CTM), preservam as propriedades terapêuticas dessas células. A utilização terapêutica de VE contorna os riscos e limitações associados às terapias com células vivas, e possui perfil intrínseco para o desenvolvimento de produtos terapêuticos. Entretanto, o desenvolvimento de produtos baseados em VE-CTM requer a superação de obstáculos como o baixo rendimento e produção em condições xeno-free e GMP (Good Manufacturing Practices). Com base no exposto acima, a presente proposta foi delineada para desenvolver um produto terapêutico off-shelf à base de VE-CTM humanas, produzidas em escala otimizada e condições xeno-free e GMP, investigar seu perfil de estabilidade, e validar suas propriedades terapêuticas pré-clínicas na lesão raquimedular e dor neuropática. Paralelamente serão realizados estudos experimentais (in vitro e in vivo) para avaliar o potencial terapêutico de VE derivadas de CTM modificadas geneticamente para superexpressar citocinas. Dados desse projeto, poderão ser aplicados na geração de um produto de terapia celular avançada alogênico, disponibilizando uma abordagem terapêutica inovadora para o tratamento de pacientes com lesão raquimedular e dor neuropática refratária. (AU)