GLUCOSA EN AYUNO Y POSTPRANDIAL

Práctica Núm. 1

Introducción.

La glucosa es la principal fuente de energía para el metabolismo celular. Se

obtiene fundamentalmente a través de la alimentación, y se almacena
principalmente en el hígado, el cual tiene un papel primordial en el
mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre (glucemia). Para que esos
niveles se mantengan y el almacenamiento en el hígado sea adecuado, se
precisa la ayuda de la insulina, sustancia producida por el páncreas. Cuando la
insulina es insuficiente, la glucosa se acumula en sangre, y si esta situación se
mantiene, da lugar a una serie de complicaciones en distintos órganos. Esta es
la razón principal por la que se produce aumento de glucosa en sangre, pero
hay otras enfermedades y alteraciones que también la provocan.

Por tanto, la determinación de glucosa en sangre (glucemia) es útil para el

diagnóstico de numerosas enfermedades metabólicas, fundamentalmente de la
diabetes mellitus. También es necesaria esta prueba, una vez diagnosticada la
diabetes, para controlar la dosis de insulina que se debe administrar para
tratarla.

la diabetes mellitus es una enfermedad que incapacita al cuerpo para

metabolizar o usar eficazmente los carbohidratos, las proteínas y las grasas.
Cuando comemos, los alimentos (especialmente carbohidratos y frutas) se
convierten en glucosa. Todas las células del cuerpo necesitan glucosa para
vivir, pero la glucosa no puede penetrar en las células sin la intervención de la
insulina, esto es debido a su falta de producción o la poca producción de
insulina la cual se lleva a cabo en las células Beta, que están ubicadas en el
extremo del páncreas.

Cuanta más cantidad de glucosa haya en la sangre, más se eliminará por la

orina. La determinación en orina es menos exacta y menos útil que la
determinación en sangre.
 CASO CLINICO

Paciente masculino de 54años de edad, acude a consulta por

presentar mucosa oral seca, nicturia y pérdida de peso.

AHF: Madre con hipertensión arterial sistémica. Padre falleció

secundaria a una neumonía, hermana menor con lupus eritematoso
sistémico.
APNP: No refiere actividades deportivas alguna, rutina de trabajo.
APP: Tabaquismo positivo desde hace 25a, 10 cigarros por día,
cada fin de semana 8-10 cervezas, sin llegar a embriagarse;
toxicomanías: Cocaína ocasional (cada 15 días). Dislipidemia desde
hace seis meses, tomó tratamiento un mes, suspendiéndolo sin
recomendación medica. Fracturas, trasfusiones, cirugías y
hospitalizaciones negadas.

PA: Poliuria: presenta aumento en la frecuencia y volumen de la

orina durante el día 7-8 durante el día; de dos meses de evolución.
Polifagia: incremento en el apetito, se refiere tener necesidad de
bocadillos entre comidas. Nicturia: de igual tiempo de evolución
refiriendo una frecuencia de 6 micciones durante la noche.
Disminución de peso en el ultimo mes, aproximadamente 8
kilogramos, a pesar del aumento en la ingesta diaria. Disuria:
durante las últimas 2 semanas, ocasional; y no en todas las
micciones, esta es la primera ocasión que la presenta.
Exploración física: Paciente masculino de edad aparente mayor a
la cronológica; alerta, posición libremente escogida, cooperador,
sonriente, marcha adecuada, constitución robusta, conformación
brevilinea con perdida de la turgencia de la piel con evidente perdida
de tejido adiposo; en general la piel y tegumentos irregularmente
hidratados, con acantosis nigricans localizada en cara posterior de
cuello, axilas y región inguinoescrotal.
Cabeza: Ojos: pupilas reactivas, fondo de ojo sin alteraciones; con
leve disminución de la agudeza visual; amígdalas hiperemicas e
hipertróficas, obstrucción II/IV; membranas timpánicas opacas.
Tórax: Presenta coloración de la piel homogénea, con escaso vello
en tórax en cara anterior y amplexación sin alteraciones; se escucha
claro pulmonar; vibraciones vocales palpables; con murmullo
vesicular presente en cara anterior y en el espacio
interescapulovertebral. Precordio hiperdinamico, con choque de la
punta palpable, ruidos cardiacos bien audibles, taquicardia leve,
90/minuto, 2do ruido levemente reforzado. No se escuchan soplos.
Abdomen: globoso a expensas de panículo adiposo, con cicatriz
umbilical central, sin cicatrices visibles, vello central escaso; Se
auscultan peristalsis bien audible; a la palpación se encuentra
blando, depresible, sin despertar dolor, por percucuion se detecta
hepatomegalia 3-2-2 cm por abajo del reborde costal; resto al
parecer sin alteraciones.
Se le solicita smac, cardiaco con PSA y lab. Reporta:

Glucosa = 326 mg/dL en ayunas leucocitos 11,000 TGO = 240 U/L

Triglicéridos = 867 mg/dL plaquetas de 287,000 TGP = 456 U/L
LDL = 428 mg/dL
HDL = 42 mg/dL PSA = 3.0
EGO: glucosa positiva (++++), estereasa leucocitaria positiva y leucocitos
de 10-15 por campo.

Objetivo:
Que el alumno determine las concentraciones de
glucosa en suero en condiciones de ayuno y postprandial con el
método de la glucosa oxidasa, para explicar los resultados
obtenidos con los valores normales de referencia de la técnica para
poder sugerir una posibilidad diagnostica.

FUNDAMENTO

La glucosa oxidasa convierte la glucosa en peróxido de hidrógeno y

ácido D-glucónico. La peróxidasa cataliza la oxidación del peróxido
de hidrógeno a 4-aminofenazona con la subsecuente unión con el p-
hidroxibencensulfonato. El producto final es un c hidroquinoleína el
cual absorbe a 500 nm. La intensidad del color es directamente
proporcional a la concentración de la glucosa.

GLUCOSA POSPRANDIAL: En la persona no diabética, los valores

de glucosa posprandial no exceden de 145 mg/dl, por el método
de glucosa oxidasa o hexocinasa; los niveles aumentan
moderadamente en personas mayores de 50 años.

Preguntas exploratorias

1.- ¿Qué interpretación clínica le da a los resultados que se

proprocionan en el caso clínico?
R: Con respecto a los datos ofrecidos en el caso clinico, la
interpretación es de Diabetes Mellitus Tipo 1.

2.- Menciona 3 complicaciones de la Diabetes:

R: Hipertension, Ateroesclerosis, Enfermedad vascular periferica,
Retinopatias etc.

3.- Explica la diferencia entre Diabetes Mellitus tipo 1 y 2.

R: Diabetes tipo I.- generalmente se diagnostica en la infancia, pero
muchos pacientes son diagnosticados cuando tienen más de 20
años. En esta enfermedad, el cuerpo no produce o produce poca
insulina y se necesitan inyecciones diarias de esta hormona.
Dibetes tipo II.- Es mas común que el tipo 1 y corresponde a la
mayoría de todos los casos de diabetes. Generalmente se presenta
en la edad adulta, aunque se está diagnosticando cada vez más en
personas jóvenes. El páncreas no produce suficiente insulina para
mantener los niveles de glucemia normales, a menudo, debido a que
el cuerpo no responde bien a la insulina.

4.- Escriba los nombres de los cuerpos cetónicos más importantes.

R.-Cetona, Acenocetona y Oxinitrato.

5.- De acuerdo a tus conocimientos que otro examen de laboratorio

solicitarías para dar seguimiento del control de la alteración del
metabolismo de la glucosa.
R: la Pospandrial o la curva de tolerancia a la glucosa.

6.- Explique en que consiste la glucogénesis y en donde ocurre.

R: es la formación glucógeno a partir de la glucosa de los alimentos.
El glucógeno se forma por un mecanismo con la siguiente
secuencia, llevado acabo en el higado.

7.- Explique la diferencia entre glucólisis y glicógenolisis

R:La glucolisis es la formacion de 2 moleculas de piruvato y ATP,
apartir de la glucosa , y la glicogenolisis es la liberacion de glucosa
apartir del glucogeno.

8.- ¿Cuál es la indicación que se da al paciente para la prueba de

glucosa postprandial?
R: El desayunar 2 hrs antes de la obtención de la muestra de
sangre.

DESARROLLO DE LA PRÁCTICA.

MATERIAL POR EQUIPO

REACTIVO POR GRUPO
1 Gradilla
8 Tubos de ensayo de 13 x 100 mm Reactivo de glucosa
1 Pipeta automática de 1.0 ml Calibrador de glucosa 100 mg/dL
1 Pipeta automática de 10 ul Patrón de Glucosa 200 mg/dl
1 Pipetor
1 Reloj o cronómetro EL ALUMNO TRAERA EL DIA DE
2 jeringas de 5 ml. desechables LA PRACTICA (equipo)
Puntas para pipeta de 1.0 ml desechables 1 paciente en ayunas o suero
Puntas para pipeta de 10 ul desechables 1 paciente que tome alimentos 2 hrs.
Torundas con alcohol y secas antes de venir al lab.
Ligadura de látex
Gasas y papel absorbente

MATERIAL POR GRUPO

1 centrífuga
1 Espectrofotómetro
1 Termoblock

TOMA DE MUESTRA.

1.- Identificación del paciente. Tubos de recolección de muestra

(limpio y seco) etiquetado.

2.- Comprobar que el paciente acude a la toma de muestra en

condiciones requeridas

3.- Informar al paciente sobre el procedimiento a realizar para

eliminar en lo posible su tensión

4.- Pedir al paciente que se siente

5.- Preparar el material de recolección de muestra con su

identificación, torniquete, material de asepsia, jeringa (aguja estéril y
dispositivo para fijar aguja en caso de extracción al vacío).

6.- Pedir al paciente cierre el puño para tener venas más palpables.
Seleccionar la vena adecuada para la punción. Realizar asepsia con
torunda con alcohol en espiral hacia fuera.

7.- Aplicar torniquete a 5 Cm por arriba de la zona de punción. Fijar

la vena por encima y debajo de la zona de punción con ayuda de los
dedos pulgar y medio o índice y pulgar.

8.- Introducir la aguja con suavidad y rapidez en un ángulo aprox. de

15° con el bisel hacia arriba siguiendo la dirección de la vena con la
aguja. Si utiliza jeringa, tirar hacia atrás del émbolo con tensión lenta
y uniforme a medida que la sangre fluye (si lo hace rápido puede
hemolizar la muestra o colapsar la vena). Si usa tubo de vacío sujete
la aguja en su lugar y encaje suavemente el tubo en el dispositivo,
una vez lleno retire suavemente.

9.- Cuando la sangre empieza a fluir, suelte el torniquete. Una vez

hecha la extracción indicar al Paciente que relaje el puño. Colocar
suavemente sobre el punto de punción una torunda de algodón
estéril y seco. Extraer la aguja de un solo movimiento e indicar al
paciente que flexione el brazo para que siga presionando el punto
de punción con el algodón.

10.- Deslice la muestra por las paredes del tubo de ensayo con
cuidado. Colocar el tubo sobre la gradilla y dejar coagular,
centrifugar y separar el suero. Evitar la Hemólisis.

11.- Observar el suero. Las muestras turbias o ictéricas requieren

de un blanco de muestra para determinar su concentración de
glucosa. (al final del método se dan instrucciones de su preparación).

DETERMINACION DE GLUCOSA EN AYUNAS Y POSPRANDIAL

1.- Etiquetar o numerar 5 tubos como se indica y agregar:

PROBLEMAS
BLANCO CALIBRADOR** ESTANDAR** (Tubo 4)
(Tubo 1) (Tubo 2) (Tubo 3) (Tubo5)
Reactivo de color 2.0 ml. 2.0 ml. 2.0 ml. 2.0 ml.

2 .- Precaliente en baño Maria a 37º C por 5 minutos. Pasado este tiempo

agregue a cada tubo lo siguiente.

Agua destilada 20 ul. ---- ---- ----

Calibrador ---- 20 ul.
Estándar ---- 20 ul. ----
Suero problema ---- ---- ---- 20 ul.

3.-. Mezcle bien e incube los tubos a 37º C por 10 minutos

4.- Coloque a cero el espectrofotómetro a 500 nm. con el blanco de

reactivo

5.- Leer y registrar las absorbancias en orden: Calibrador, estándar

(control) y muestras. Escurrir la celda bien, (de preferencia enjuague
con agua dest.) después de cada lectura. El producto final de la
reacción se mantiene estable 30 minutos después de desarrollado el
color, lea en este lapso.

6.- Cálculos de la concentración de glucosa

Abs. Probl. ÷ Abs. Calibrador x 100 mg/dL = ______ mg/dl

 VALORES DE REFERENCIA: Suero/plasma: 70 – 110 mg/dl

PREPARACION DE BLANCO DE MUESTRA:

1. En un tubo de ensayo agregue 1.0 ml. de cloruro de sodio al

0.9% y 10 ul de muestra
2. Coloque a cero el espectrofotómetro con solución salina a 500
nm.
3. Leer y registrar la absorbancia del blanco de muestra
4. Reste la absorbancia del blanco de muestra a la absorbancia
de la muestra medida en el paso 5. Use este valor para el
cálculo de la concentración.

NOTAS:

*Los volúmenes indicados en la metodología varían, es determinante el

volumen que requiere la celdade lectura de la absorbancia.

**Deben preguntar al docente si incluirán calibrador y patrón o sólo

uno de ello en todas las prácticas que realizarán a lo largo de este
semestre. Para una mejor valoración del paciente se incluyen patrones
altos y bajos.

RESULTADOS (mapa cognitivo)

A término de la práctica entregará para acreditar su trabajo individual

Reporte en forma ordenada. Incluya cálculos. Si los resultados no son los esperados
debe revisar los datos clínicos del paciente para buscar que pudo interferir en el
desarrollo de la reacción sobre todo de glucosa postprandial.

P1= .351-.042 / .603 X 100mg/dl= 51.24 mg/dl

P2= .556-.042 / .603 X 100mg/dl= 85.24 mg/dl

ESTANDAR= .673-.042 / .603 X 100mg/dl= 104.64mg/dl

DISCUSION DE RESULTADOS.
(considera lo que investigaste del caso clínico, lo que sabes de teoría y
correlaciona con los resultados obtenidos en esta práctica aplicando criterio
médico para sugerir un diagnóstico)

Los pacientes que colaboraron en esta practica no presentaban sintomas de

señal de diabetes o de alteraciones en la glucosa como por ejemplo: poliuria,
polifagia, polidipsia, etc. Asi como también por la elevación de la glucosa o los
bajos niveles de la misma. Los resultados obtenidos en las pruebas fueron
normales.

CONCLUSIÓN

Es muy imporante conocer como obtenemos nuestra fuente de energia, ya que

es base para nuestra vida, y como medicos es de suma importancia no nomas
conocer esto, sino mas afondo para asi poder tratar con patologias referentes
a estas vias como lo son la diabetes mellitus, que hoy en dia son muy
frecuentes y que se esperan que sigan siendo pronunciadas en un futuro.
Con respecto a las pruebas realizadas en el laboratorio es necesario conocer el
procedimiento de ellas axial como sus valores normales para poder detectar
una anomalia en ellas y solucionarla.

BIBLIOGRAFIA CONSULTADA.

BIOQUIMICA
Robert Roskoski, Jr
McGrawl-Hill Interamericana.

Medline.

http://vsearch.nlm.nih.gov/vivisimo/cgi-bin/query-meta?v
%3Aproject=medlineplus&query=glucosa