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    Ejercicios Del Práctico de PCR

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    Manuel Eduardo Peña Zúñiga
    El documento presenta tres ejercicios de cálculos relacionados con la preparación de reactivos para realizar reacciones de PCR. El primer ejercicio involucra calcular los volúmenes necesarios de cada dNTP y agua para preparar una solución stock de dNTPs. El segundo ejercicio implica calcular el volumen de la solución stock necesario para preparar una solución madre para cinco reacciones de PCR, así como realizar diluciones seriadas de ADN. El tercer ejercicio consiste en calcular los volúmenes necesarios para diluir

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    Ejercicios Del Práctico de PCR

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    Manuel Eduardo Peña Zúñiga
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    El documento presenta tres ejercicios de cálculos relacionados con la preparación de reactivos para realizar reacciones de PCR. El primer ejercicio involucra calcular los volúmenes necesarios de cada dNTP y agua para preparar una solución stock de dNTPs. El segundo ejercicio implica calcular el volumen de la solución stock necesario para preparar una solución madre para cinco reacciones de PCR, así como realizar diluciones seriadas de ADN. El tercer ejercicio consiste en calcular los volúmenes necesarios para diluir

    Descripción original:

    PCR ejercicicos

    Título original

    ejercicios+del+práctico+de+PCR

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    Ejercicios de clculos

    1. A) Le han encargado en su laboratorio que prepare 1 ml de una


    solucin stock 2,5mM de dNTPs para realizar las reacciones de PCR.
    Su laboratorio cuenta con soluciones 0,1 M independientes de cada
    dNTPs, es decir dATP, dCTP, dGTP y dTTP en tubos diferentes. Calcule el
    volumen de cada dNTP y la cantidad de agua que necesita para hacer la
    solucin stock que contenga todos los dNTPs.
    B) De acuerdo al manual de instrucciones de la TAq polimerasa con la
    que cuenta su laboratorio, se requiere una concentracin de dNTPs de
    0,6 mM por tubo de reaccin de PCR. Calcule el volumen de la solucin
    stock que Usted prepar para preparar una solucin madre para 5
    reacciones de PCR, en que cada reaccin tendr un volumen final de 25
    l.
    2. Usted es el nuevo/a ayudante en el curso BIO297C y la profesora le
    encarga que purifique el DNA-MIMIC y prepare las diluciones para un
    prepaso del prctico. Ud realiz una muy buena extraccin del DNAMIMIC, obteniendo una concentracin de 450ng/L.
    A) Realice los clculos para hacer 1ml de una dilucin de DNA-MIMIC a la
    concentracin de 10ng/L. A partir de esta solucin Ud. debe realizar
    4 diluciones seriadas (1/10; 1/50; 1/100 y 1/200) de 20 L cada una.
    B) Indique paso a paso como hara las diluciones seriadas, exponga los
    clculos y volmenes a tomar de las soluciones y de agua.
    3. Cada uno de los partidores que Ud. necesita para la mezcla de reaccin
    de PCR se encuentran a una concentracin de 0,17mM, esta
    concentracin es muy elevada para ser utilizada directamente en la
    reaccin de PCR, por lo que decide hacer una solucin ms diluida de
    sus primers.
    A) Cunto volumen necesita de la solucin concentrada para hacer
    100 L de una solucin 8M?
    B) De esta solucin diluida Ud. requiere 7pmol por tubo de reaccin de
    PCR y tiene que hacer 5 tubos de reaccin a un volumen final
    0,03ml, cuntos L necesita de la solucin diluida de primers por
    tubo?

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