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    Cinetica KM

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    Anahi Pereda Castellanos
    El documento presenta tres ejercicios de cinética enzimática. El primero determina la Km y Vmáx de la hidrólisis de GPNA catalizada por α-quimiotripsina. El segundo analiza la hidrólisis de penicilina por β-lactamasa y calcula su Km y Vmáx. El tercero estudia el efecto de un inhibidor sobre β-lactamasa y determina los valores de Km y Vmáx con y sin inhibidor.

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    El documento presenta tres ejercicios de cinética enzimática. El primero determina la Km y Vmáx de la hidrólisis de GPNA catalizada por α-quimiotripsina. El segundo analiza la hidrólisis de penicilina por β-lactamasa y calcula su Km y Vmáx. El tercero estudia el efecto de un inhibidor sobre β-lactamasa y determina los valores de Km y Vmáx con y sin inhibidor.

    Descripción original:

    hidrolisis km y vmax

    Título original

    Cinetica Km

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    EJERCICIOS DE CINETICA

    La hidrolisis de N-glutaril L-fenilalanina p-fenilalanina (GNPA) para dar


    p-nitroanilida y N-glutaril, L-fenilalanina es catalizada por la enzima
    -quimiotripsina.
    A un pH y temperatura determinada los datos cinticos obtenidos fueron los siguientes:
    [GPNA] 10-4 M
    v/mmol L-1 min-1

    2.5
    2.1

    5
    3.73

    10
    5.9

    15
    7.10

    Grafique y calcule la Km y Vmx.


    Resultados:
    1/ [GPNA] 10-4 M
    -1

    0.4
    -1

    1 / [v/mmol L min ]

    0.476

    0.2

    0.1

    0.067

    0.268

    0.169

    0.141

    Y=mx + b
    Y= 1.0121x + 0.0696

    Vmx= 1/b
    Vmx = 1/0.0696
    Vmx =14.3

    1/Km = b/m
    1/Km = 0.0696/1.0121
    1/Km = 0.0687
    Km =1/0.0687
    Km = 14.5

    2.-La penicilina se hidroliza con ello se inactiva por la penicilinasa (-lactamasa),


    enzima proveniente de las bacterias. La masa de esta enzima staphylococcus aureus es
    29.6 kd. La cantidad de penicilina hidrolizada en un minuto de disolucin de 10 mL
    que contiene 10-9 g de penicilina purificada se midi como funcin de la concentracin
    de penicilina.
    [penicilina] 1
    M
    V0 Cantidad 0.11
    hidrolizada

    10

    30

    50

    0.25

    0.34

    0.45

    0.58

    0.61

    Resuldados:
    1/[penicilina] M
    1/ V0 Cantidad
    hidrolizada

    1
    9.0909

    0.3333
    4

    Y = 7.6245x + 1.4586
    Vmx = 0.685
    Km = 5.22

    0.2
    2.94

    0.1
    2.22

    0.0333
    1.72

    0.02
    1.63

    3.-La -lactamasa se puso en contacto con un inhibidor obteniendo los siguientes


    resultados.

    V0 (mol /min)

    1/V0 (mol /min)

    [s] M
    s/ inhibidor
    c/inhibidor

    3
    10.4
    4.1

    1/[s] M
    0.3333
    1/sin inhibidor 0.096
    1/con inhibidor 0.244

    5
    14.5
    6.4
    0.2
    0.069
    0.16

    10
    22.5
    11.3
    0.1
    0.044
    0.088

    Sin inhibidor

    Con inhibidor

    Vmx = 1/0.0218

    Vmx =1/0.0224

    Vmx=45.8 mol /min

    Vmx=44.6 mol /min

    Km=1/(0.0218/0.2258)

    Km=1/(0.0224/0.6567)

    Km=10.35

    Km=29.31

    30
    33.8
    22.6

    90
    40.5
    33.8

    0.033
    0.029
    0.044

    0.011
    0.025
    0.029

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