PRACTICA #1

EXAMEN A SECRECIN ESPERMATICA.

OBJETIVO:
Efectuar la determinacin de las caractersticas, usos y anlisis de los
espermatozoides; adems de identificar sus parmetros y alteraciones, a partir de
una muestra de lquido seminal.

FUNDAMENTO:
Este estudio desde el punto de vista bioqumico conlleva una determinacin
analtico-clnica de gran importancia en los estudios de infertilidad en el hombre,
as como de sus
propiedades del semen, tanto de la produccin de
espermatozoides como de la funcin de las glndulas sexuales.
Dicho esto, el anlisis que se realiza al lquido seminal es con el propsito de
diagnosticar la presencia de algn problema de fertilidad entre otros.

GENERALIDADES:
Biologa del semen:

Anatoma:

a)
b)

Testculos.

Vas seminales.
c) Glndulas accesorias
d) Pene.

Citologa espermtica:
a) Cabeza.
b) Cuello.
c) Flagelo.
Fisiologa:
a) Eyaculacin.
b) Movilidad del espermatozoide.

 Patologa:
a) Esterilidad de la pareja.
b) Azoospermia.

ANATOMIA:

El aparato reproductor masculino est formado por varios rganos que segn su
funcin que se podran clasificar en cuatro grupos:
a) Los testculos: tienen una doble funcin, por una parte producen los
espermatozoides mediante un proceso llamado espermatognesis y por otra
ejercen una importante regulacin endocrina, tanto a nivel reproductor como
sobre otros rganos y funciones de nuestro cuerpo.
b) Las vas seminales, que tambin son dobles hasta su conexin con la prstata:
transportan los espermatozoides a lo largo del sistema reproductor.
c) Las glndulas accesorias: aportan una serie de sustancias vitales para la
funcin reproductora porque forman el lquido seminal, y adems tienen una
funcin nutritiva o reguladora.
d) El pene: deposita el semen en la vagina.
A) TESTCULOS:
Los testculos se hallan en la regin perineal, tras la base del pene, en el interior
de la bolsa escrotal. El escroto no tiene grasa y sus msculos reaccionan al calor
extendiendo o contrayendo la piel. Las dos gnadas (testculos) no ocupan el
mismo nivel, ya que en la mayora de los hombres el testculo izquierdo baja un
poco ms que el derecho.
Estn suspendidos de su extremo inferior por el cordn espermtico y estn
desprovistos de adherencias en la mayor parte de su superficie exterior, por lo que
resultan mviles en todos los sentidos, pudiendo contraerse y ascender hacia el
anillo inguinal.
El escroto y el hecho de que estn alojados fuera del abdomen, hacen que se
mantenga la temperatura unos dos grados centgrados por debajo de la
temperatura corporal. Esto ser de vital importancia para el mantenimiento de la
espermatognesis. El testculo y el epiddimo estn envueltos por la tnica
albugnea, que es una capa fibrosa de tejido conjuntivo blanco, denso y elstico.
Los conductos o tbulos seminferos son los conductos productores de los
espermatozoides. Se encuentran dentro de los lobulillos testiculares (hay entre
200 y 300 por testculo) formados por los septos testiculares, que parten desde la
tnica albugnea y se unen en el mediastinum testis. Cada lobulillo contiene de 1-4
tbulos seminferos productores de espermatozoides. Los tbulos seminferos
desembocan a travs de los tbulos rectos en las cavidades denominadas rete
testis en el mediastinum testis. En cuanto a la vascularizacin, los testculos estn
irrigados por las arterias espermticas (la arteria deferencial y la arteria funicular).
Del drenaje sanguneo estn encargadas las venas espermticas y cuando se
obstruyen producen el varicocele. A partir de la pubertad, los tbulos seminferos,

desarrollan una pared gruesa y compleja llamada epitelio germinal, compuesta por
dos tipos de clulas: o Las clulas germinales, que proliferan y se diferencian en
espermatozoides. Manual de Laboratorio para el Anlisis del Semen 4 o Las
clulas de Sertoli, que sostienen a las clulas germinales e intervienen en su
nutricin. Una lmina basal separa el epitelio seminfero del intersticio gonadal. El
intersticio gonadal est formado por tejido conjuntivo, tejido linftico, por capilares
sanguneos y por clulas de Leydig productoras de testosterona. Las clulas de
Sertoli se caracterizan por:
Se extienden radialmente hacia la luz tubular; su citoplasma emite prolongaciones
que rodean las clulas germinales.
Forman la barrera hematotesticular.
Protegen las clulas germinales y las nutren.
Proporcionan apoyo mecnico para las clulas germinales.
Eliminan clulas espermticas degeneradas.
Sintetizan protenas relacionadas con la funcin reproductora. Las clulas
germinales tienen distinto grado de diferenciacin dependiendo de la zona del
epitelio germinal en donde se localicen:
En la zona basal, estn las espermatogonias y espermatocitos primarios.
En la zona adluminal se diferencian hacia espermatocitos secundarios y
espermtides. La barrera hematotesticular: o Est formada por las clulas de
Sertoli a travs de complejos de unin.
Acta de barrera entre la luz del tubo y el espacio intersticial. Esta barrera es
dinmica, permite la migracin de espermatocitos de la zona basal a la adluminal,
y es infranqueable por clulas perteneciente al sistema inmunitario como son los
linfocitos.
Las espermatogonias y espermatocitos primarios se encuentran en la zona basal,
por fuera de la barrera.
Los espermatocitos secundarios y espermtides se encuentran en el
compartimento adluminal, dentro de la barrera.
La barrera asla el espermatozoide, para que no sea reconocido como propio por
el sistema inmune. La termorregulacin se consigue mediante los siguientes
mecanismos:
La presencia de receptores de la temperatura en la piel del escroto activa grandes
glndulas sudorparas adrenrgicas.
Hay una actuacin muscular que regula la cercana de los testculos al cuerpo.
Biologa del Semen 5 o Por ltimo hay una regulacin sangunea, de forma que la
sangre arterial que entra en los testculos se enfra por la sangre venosa que sale
de ellos.

B) VAS SEMINALES:
Las vas seminales estn constituidas por: tubos rectos, rete testis, conductos
eferentes, epiddimo, conductos deferentes, ampolla deferencial y el conducto
eyaculador.
Los extremos terminales de los tbulos seminferos, revestidos slo por clulas
de Sertoli, se estrechan y forman los tubos rectos, los cuales unen el tbulo
seminfero con la rete testis.
La rete testis es una red de delicados tbulos, situado en el hilio del testculo,
mediastino testicular, que lleva los espermatozoides desde los tbulos seminferos a
los vasos eferentes. En la rete testis el lquido seminal se reabsorbe, concentrando
los espermatozoides.
Los conductos eferentes unen la rete testis con la cabeza del epiddimo.
La luz de los tubos se reviste de dos tipos celulares:
Clulas ciliadas, altas: arrastran el contenido celular en direccin al epiddimo.
Clulas no ciliadas, bajas: realizan procesos de endocitosis.
El epiddimo es un conducto altamente contorneado, entre el testculo y vaso
deferente. Tiene forma de media luna, y se divide en cabeza, cuerpo y cola.
El epiddimo est tapizado por:
Un epitelio pseudoestratificado que produce la absorcin de casi el 90% de lquido
testicular.
Por la musculatura lisa que produce movimientos peristlticos para transportar los
espermatozoides.
Aparte de las funciones de transporte y servir de va, el epiddimo:
Produce la maduracin de los espermatozoides y la concentracin de estos al
reabsorber lquido. Esta absorcin se produce a nivel de la cabeza del epiddimo.
Aumenta la movilidad de los espermatozoides a travs de la Protena de avance
de movilidad.
Acta almacenando los espermatozoides (unos 42 das).
Destruye los espermatozoides tras larga abstinencia sexual. Por ejemplo en
vasectomas.
La va seminal contina con los conductos deferentes. Estos ltimos
transportarn el semen durante el coito desde la cola del epiddimo hasta la ampolla
deferencial.
La ampolla deferencial es una dilatacin del conducto deferente, que almacena
espermatozoides durante el coito. Est situada antes del conducto eyaculador.
El conducto eyaculador:

Perfora la prstata a nivel del veru montanum.

La ltima porcin desemboca en la uretra.

La normalidad es fundamental para una buena eyaculacin.

C) GLNDULAS ACCESORIAS.
Las glndulas accesorias se refieren a: las vesculas seminales, la prstata, las
glndulas bulbouretrales de Cowper y las glndulas uretrales de Littr. Vierten a
las vas seminales el 80% del volumen del eyaculado. Contribuyen de esta forma
muy decisivamente a la formacin del plasma seminal, cuya funcin es ser: medio
nutritivo, vehculo de transporte y proteccin del tracto urinario.
Las vesculas seminales estn situadas en la base de la prstata y unidas a ella
por su extremo inferior. Cada una est asociada al deferente y al conducto
eyaculador. El eyaculado que segregan se caracteriza por:

Constituye entre el 50-70% del lquido seminal de un eyaculado.

Forma parte de la segunda porcin del eyaculado.
Es un lquido mucoide, viscoso y amarillento, de pH alcalino.
Es rico en fructosa y otras sustancias nutritivas. Contiene otras sustancias
como prostanglandinas y fibringeno.

La prstata est situada en la base de la vejiga, rodeando la primera porcin de la

uretra. Su parnquima glandular constituye una glndula tubuloalveolar. El lquido
prosttico nutre y protege al espermatozoide y se caracteriza por:
Constituye entre un 15 y un 30% del volumen final de ste.

Forma parte de la primera porcin del eyaculado.

Es un lquido opalescente, de pH 6.5.
Es rico en cido ctrico, fosfatasas cidas, zinc, manganeso y calcio.

Las glndulas bulbouretrales o glndulas de Cowper: son glndulas del tamao

de un guisante y situadas a ambos lados del bulbo uretral. Vierten de manera
gradual a la uretra, ante la estimulacin ertica, actuando como lubricante de sta
ante el paso del semen a gran velocidad.El lquido seminal que segregan es:

Un lquido claro, viscoso y mucoide.

Rico en galactosaminas, galactosa, cido oxlico y mucoprotenas.

Las glndulas uretrales de Littre estn situadas a lo largo de la uretra, vierten un

fluido viscoso, que acta limpiando y lubricando la uretra, favoreciendo el paso de
los espermatozoides.

D) PENE:
El pene est formado por tres grandes cilindros de tejido erctil, rodeados por una
vaina elstica. Cada cilindro se rellena de sangre durante la excitacin sexual.

Los dos cilindros superiores, llamados cuerpos cavernosos, son los

responsables de la rigidez e incremento de volumen y longitud durante la
ereccin.
El cilindro inferior, llamado cuerpo esponjoso, acaba en el glande. La uretra
atraviesa el cuerpo esponjoso. Durante la ereccin se mantiene ms blando
que los cuerpos cavernosos.

 CITOLOGA ESPERMTICA:
El espermatozoide maduro es una clula altamente diferenciada. Est formado
por:

Cabeza, que contiene el ncleo y aporta la informacin gentica.

Pieza intermedia, que contiene las mitocondrias, fuente de energa.

Flagelo, que proporciona la movilidad necesaria para el traslado al lugar de

fecundacin y asegura la adecuada orientacin de la cabeza para penetrar las
cubiertas del ovocito.

A) CABEZA:
La cabeza del espermatozoide es de forma oval al observarla frontalmente,
y piriforme cuando la observacin es lateral, siendo ms gruesa en la base
y adelgazando hacia la punta. Su tamao aproximado oscila entre 3,7 y 4,7
micras de longitud y 2,5 a 3,2 micras de anchura, por 1 a 1,5 micras de
espesor. La razn longitud/anchura vara entre 1,3 y 1,8. En la cabeza del
espermatozoide se sitan el ncleo y el acrosoma, recubiertos ambos por la
membrana plasmtica.
El ncleo ocupa la mayor parte de la cabeza. Es una masa de DNA
haploide que se fusionar con el ncleo del ovocito en el momento de la
fecundacin. Su cromatina se ha condensado intensamente a fin de
disminuir el volumen de la cabeza, lo que facilita la movilidad del
espermatozoide a travs de los diferentes fluidos y estructuras que debe
atravesar. Adems protege al genoma de daos durante el trayecto.
El ncleo est delimitado por una membrana doble, la membrana
nuclear.
A nivel de insercin del flagelo, el ncleo est ligeramente deprimido
formando la foseta de implantacin.
El acrosoma es una estructura membranosa, situada entre el ncleo y la
membrana plasmtica, adopta la forma de capuchn. Est envuelto por la
membrana acrosmica:
La porcin adherida a la envoltura nuclear por su parte interna es la
membrana acrosmica interna.
La membrana plasmtica por su parte externa, membrana acrosmica
externa.

El acrosoma se forma a partir del aparato de Golgi y contiene una gran

concentracin de hidratos de carbono y enzimas lisosmicas como la
hialuronidasa. Hay tambin una enzima proteoltica llamada acrosina. El
papel de estas enzimas en la fecundacin es el facilitar el reconocimiento y
penetracin del espermatozoide a travs de las envolturas del ovocito. Para
ello es necesario que se produzcan una serie de cambios en el
espermatozoide, conocidos como capacitacin, y que culminan en un
proceso de modificacin del acrosoma en la llamada reaccin acrosmica.
El lquido seminal impide la capacitacin por su accin decapacitante. Es
por ello que dicho proceso, indispensable para una correcta fecundacin del
ovocito, se produce en el tracto genital femenino donde el espermatozoide
se libera del lquido seminal.
La membrana plasmtica recubre estrechamente el acrosoma y la regin
postacrosmica. Delimita una escasa cantidad de citoplasma. En la zona
donde parece unirse con la membrana nuclear se define una depresin, el
anillo posterior. Este anillo parece dividir la cabeza en dos partes.
Hacia delante se encuentra la membrana temporal, que participa
activamente en la reaccin acrosmica al fusionarse con la membrana
acrosmica externa.

Hacia atrs se extiende la zona de membrana estable.

B) CUELLO:
El cuello es la unin entre la cabeza y el flagelo y es una zona compleja y de
gran importancia, que soporta algunas estructuras esenciales:

La pieza conectiva que tiene un denso capitel.

La placa basal, adaptada en su forma a la fosa de implantacin.

A partir del capitel se extienden hacia atrs 9 densas columnas segmentadas

de 1 a 1,5 micras de largo, que forman una especie de embudo, y se continan
en sus extremos con las nueve fibras externas densas del flagelo.
El centriolo proximal est situado bajo la placa basal y a la entrada de ese
embudo, pero formando un ngulo de 70-80 grados con el eje del flagelo.
Posee la estructura tpica de nueve tradas tubulares. El par central de
microtbulos del axonema flagelar puede llegar por delante hasta el interior de
la pieza de conexin, incluso hasta el centriolo proximal. Generalmente en los
espermatozoides maduros falta el centriolo distal, el orientado segn el eje del
flagelo, pero residuos de sus nueve tripletes pueden estar unidos a la cara
interna de las columnas segmentadas.
En la regin del cuello, y por fuera de la pieza de conexin pueden encontrarse
algunas mitocondrias orientadas longitudinalmente, que a veces emiten
prolongaciones que se extienden entre las columnas segmentadas.

C) FLAGELO:
El flagelo es una larga estructura filiforme de aproximadamente 50 m de
longitud. Est recubierto por una vaina fibrosa en su primera fraccin y
luego solo por la membrana flagelar. Posee una constitucin interna comn
a la mayora de los flagelos del reino animal. En el eje est el axonema
formado por dos microtbulos centrales nicos, rodeados por nueve pares
de microtbulos regularmente distribuidos. Son los microtbulos A y B. Esta
estructura se conoce como axonema 9+2. Cada microtbulo A posee dos
brazos en gancho formados por la protena dineina, la cual puede hidrolizar
las molculas de ATP, produciendo la energa necesaria para impulsar el
espermatozoide. Pero el flagelo de los espermatozoides humanos se
diferencia de otros en que el axonema est rodeado por nueve fibras
densas externas, lo que lo convierte en un modelo 9+9+2. Se considera que
el axonema es el componente motor y que las fibras densas externas son
estructuras que dan firmeza al flagelo.
El flagelo se diferencia en tres regiones:
La pieza intermedia mide de 5 a 7 m. El axonema est en esta regin
rodeado por las fibras densas. Se caracteriza por una vaina de
mitocondrias orientadas circularmente y dispuestas extremo con
extremo para formar una espiral cerrada. Las mitocondrias producen la
energa necesaria para el movimiento en forma de ATP.
La pieza principal mide unas 45 m de longitud. El axonema conserva el
mismo aspecto en todo el trayecto pero las fibras densas se modifican,
disminuyendo progresivamente de dimetro y desapareciendo en un
orden bien establecido, as por ejemplo las fibras 3 y 8 se incorporan a
las columnas longitudinales de la vaina fibrosa.

La pieza terminal est formada slo por el axonema, recubierto por la

membrana flagelar. Adems el axonema pierde su disposicin circular
para hacerse desordenada.

 FISIOLOGA:

a)

EYACULACIN:

En la fase de excitacin sexual los cilindros se llenan de sangre y se produce

la ereccin. El glande, que aumenta su tamao casi al doble, est provisto de
abundantes terminaciones nerviosas sensitivas. El meato urinario se dilata y
hay una elevacin parcial de los testculos y un engrosamiento de la tnica y
piel testicular. Cuando la excitacin sexual alcanza la fase de meseta vierten
las glndulas de Cowper, los testculos aumentan de tamao, rotan
anteriormente y el escroto se engruesa.
En el momento del orgasmo el esfnter interno de la vejiga se contrae, las
vesculas seminales se contraen tambin, lo mismo que los conductos
deferentes, el esfnter erctil y la glndula prosttica. Estas contracciones
fuerzan al lquido seminal a fluir a travs de la uretra al contraerse tambin el
propio pene. La actividad contrctil est bajo control de las fibras
adrenrgicas. La ereccin depende sin embargo de impulsos parasimpticos.
En el epiddimo slo la regin distal de la cola experimenta una marcada
contraccin bajo el estmulo de las fibras adrenrgicas de los nervios
hipogstricos. Esto evita el paso significativo de espermatozoides inmaduros
durante la eyaculacin.
En resumen, se distinguen distintas fases del eyaculado:
El preeyaculado, en la cual vierten las secreciones de las glndulas
bulbouretrales y glndulas de Littre. Su funcin ser la de lubricar la
uretra como preparacin de la eyaculacin.
Primera fraccin del eyaculado, donde vierten las secreciones de la
prstata que contribuye al eyaculado con un porcentaje entre el 15 y el
30% del volumen final y las procedentes del testculo y epiddimo que
aportan entre un 5 y un 10%.
Por ltimo, la segunda fraccin la constituyen las secreciones
procedentes de las vesculas seminales que aportan entre un 50 y un
70% del volumen final.
A continuacin se detallan los componentes bioqumicos de cada fraccin:

1) Marcador de la prstata. (1 Fraccin del eyaculado)

Citrato: es el anin principal y acta como quelante de cationes. Existe
una estrecha correlacin entre las concentraciones de zinc y citrato.
Zinc: es un catin especfico del plasma seminal dotado de poder
bactericida. Su papel sera estabilizar la condensacin de la
cromatina. Es transportado por el citrato y las protenas.
Fosfatasa cida: es una enzima activa en la desfosforilacin de los
steres ortofosfricos. La isoenzima hallada en el esperma es
especfica de la prstata.

2)Marcadores del epiddimo (1 Fraccin del eyaculado)

L-carnitina

Est en dos formas en el esperma: L-carnitina y acetilcarnitina.

Desempea un papel en la adquisicin de la movilidad progresiva, es un
transportador de cidos grasos.
Es el marcador del cuerpo y la cola del epiddimo, pero no es secretada por
las clulas de la cabeza. Existe una pequea secrecin extraepididimaria
del orden del 15 al 20%.

1,4 glucosidasa neutra

Es una hidrolasa que est en dos formas en el esperma: una forma cida
de origen prosttico y una neutro epididimaria.
En el epiddimo desempeara un papel en la maduracin de los
espermatozoides.
Slo es segregada en el cuerpo del epiddimo. Existe una dbil secrecin
extraepididimaria, inferior al 10%.

C: Marcador de las vesculas seminales. (2 Fraccin del eyaculado)

La fructosa es el marcador ms especfico segregado en ellas. Es sintetizada por
las clulas epiteliales a partir de la glucosa sangunea. Es la fuente de energa de
los espermatozoides. Su secrecin es andrgeno-dependiente.

b) MOVILIDAD DEL ESPERMATOZOIDE:

La movilidad es uno de los parmetros ms importantes en la evaluacin de una
muestra de semen. Un espermatozoide inmvil es incapaz de atravesar el moco
cervical femenino y mucho menos las envolturas del ovocito.
El proceso evolutivo en la adquisicin de la movilidad de los espermatozoides, es el
que sigue:

Los espermatozoides en el testculo son inmviles o con poca movilidad, debido

probablemente a la inmadurez de la membrana plasmtica.
En la cabeza y porcin proximal del cuerpo del epiddimo siguen siendo inmviles
o tienen movimientos vibratorios muy dbiles. Algunos tienen un batido flagelar
vigoroso, pero sin efecto progresivo.
En la parte media del cuerpo predomina este movimiento flagelar vigoroso, pero
son pocos los espermatozoides con movimiento progresivo.

La madurez en el movimiento se alcanza en la parte distal del cuerpo del

epiddimo, donde los espermatozoides adquieren la capacidad de progresar
eficazmente.
El camino que debe recorrer el espermatozoide desde la eyaculacin es largo,
atravesando el canal cervical y ascendiendo hasta las trompas. Cuando llega al
ovocito todava debe atravesar las diferentes barreras celulares que lo rodean antes
del contacto clula-clula. Esto se consigue gracias al flagelo, que dota al
espermatozoide de movimiento. En el plasma seminal se mueve a una velocidad que
flucta entre 10 y 60 micras/segundo. El flagelo produce un movimiento ondulatorio,
batiendo aproximadamente 10 veces por segundo. Esta batida se propaga desde la
base del flagelo en direccin a la cabeza, lo que lo conduce hacia delante. Pero si
analizamos el movimiento podemos apreciar un avance tipo sacacorchos, por lo que la
cabeza va girando durante el avance. Esto ser fundamental para poder atravesar las
diferentes estructuras del ovocito.
La importancia de la protena dinena se pone de manifiesto en personas que
presentan el sndrome de Kartagener. Sus espermatozoides carecen de esta protena
y padecen una esterilidad por ausencia total de movimiento de los espermatozoides.
El movimiento del flagelo se produce cuando los brazos de dinena de un par de
microtbulos se deslizan sobre el par contiguo, pareciendo que caminasen. Esto
producira torsiones y angulaciones que al irse propagando por toda la longitud y al
resto de tubos explicara el movimiento ondulatorio. Es lo que se conoce como
Hiptesis de deslizamiento de microtbulos.

 PATOLOGA:
a) Esterilidad de la pareja:
Segn el 5 manual de OMS, la esterilidad no debe tratarse como un problema
individual, sino que es un problema de pareja.

Se entiende por estril la pareja que tras 12 meses de relaciones

sexuales sin mtodos anticonceptivos, no queda gestante.
Infrtil es aquella pareja que presenta incapacidad para llevar a trmino
las gestaciones. Se embarazan, pero abortan.

Hoy da la situacin ms frecuente entre las parejas que acuden a la consulta

es de subfertilidad, y se entiende como una probabilidad disminuida de
conseguir un hijo vivo. Cuando se estudian las causas se pueden encuadrar en
cuatro tipos: factor femenino, factor masculino, factor mixto y la esterilidad de
causa desconocida. El factor masculino oscila en estos aos en unas cifras en
torno al 35%.
En consecuencia, la exploracin de la pareja y la bsqueda de las causas de
subfertilidad masculina son imperativas. Es imposible concebir el abordaje de
la pareja estril sin este estudio, lo que ocurra hasta muy recientemente. El
estudio del espermiograma permite orientar hacia una subfertilidad de origen
masculino. Muchos otros exmenes como las concentraciones hormonales, la
bioqumica seminal, el cariotipo sanguneo, las pruebas de interaccin
mocoesperma (prueba de Hhner, prueba de penetracin cruzada in vitro), la
leucospermia o incluso exmenes an ms especializados, como el examen
por microscopia electrnica de los espermatozoides, la prueba hmster, el
estudio del movimiento, confirman eventualmente un etiologa sospechosa en
el espermiograma.
Cualquiera que fuere su grado de especializacin, la buena ejecucin de todos
estos exmenes ser esencial para lograr una actuacin teraputica adaptada
y eficaz.
En efecto, las tcnicas de asistencia mdica a la procreacin (IIC:
inseminaciones intracervicales, IIU: inseminaciones intrauterinas, FIV:
fecundacin in vitro, ICSI: Inyeccin intracitoplasmtica de espermatozoides)
permiten ahora ampliar los lmites de la teraputica.

B) AZOOSPERMIA:
Es la ausencia de espermatozoides en 2 espermiogramas practicados con 2
meses de intervalo, segn las recomendaciones de la OMS.
Las azoospermias pueden tener un origen:

Secretor, no obstructivo. No hay espermatozoides por falta de funcionalidad

de la espermatognesis, o sea, porque no hay fabricacin de
espermatozoides.
Excretor, obstructivo. con funcin secretora conservada. Hay produccin de
espermatozoides, pero existe una imposibilidad de salida debido a una
obstruccin bilateral en las vas seminales. Las azoospermias excretoras
pueden ser congnitas o adquiridas.

La importancia de un diagnstico correcto es fundamental para poder abordar el

tratamiento exclusivamente en el hombre (hormonal, quirrgico) o en la pareja
(biopsia testicular para ICSI).

 MATERIAL:
Material biolgico: Lquido seminal.

Material:
a)
b)
c)
d)
e)
f)
g)

Caja petri.
Aplicador de madera.
Jeringa de 5ml.
Pipeta graduada.
Portaobjetos.
Cubreobjetos.
Pipeta para glbulos blancos.

Equipo:
a) Microscopio.
b) Cmara de Neubauer.

Reactivos:
a) Solucin de Macomber y Sanders; Bicarbonato de sodio 5.0 gr,
formol 1 ml, agua destilada 100%. Disolver todo completamente.
b) Papel pH.
c) Eosina al 5%.
d) Colorante giemsa, fucsina bsica o cristal violeta.

TECNICA:

ANALISIS MACROSCOPICO:
El anlisis macroscpico incluye:
Aspecto: Se debe observar el coagulo presente al momento de recibir la muestra.
Licuefaccin. El semen debe ser licuado normalmente dentro de los primeros 30
minutos despus de la eyaculacin. Una muestra licuada debe adaptarse a la
forma del recipiente de coleccin. Una muestra que no se licua indica una
disfuncin de la prstata o prdida de la primera fraccin del eyaculado.
Volumen. El volumen se mide transfiriendo el semen del vaso de muestra
biolgica hacia una jeringa. El volumen normal del semen es de 1.5 a 5.0ml
considerndose como promedio 3.5ml. Cualquier aumento o disminucin de los
lmites normales indicara una patologa.
Viscosidad. Puede determinarse mientras se pasa la muestra liquidificada del
vaso de muestra biolgica a una caja petri y observar si es posible que pase gota
a gota sin formar un flujo continuo. Si es as la viscosidad se considera norma.
Una viscosidad disminuida se observa cuando la gota de semen cae con rapidez
y una viscosidad aumentada es cuando la muestra presenta filancia(filamentos).
Estas muestras presentan alto contenido de mucus .
Color. Se refiere al color de la muestra en general. Una muestra normal es
homognea y varia de color blanco amarillento al blanco grisceo.
Un color amarillo intenso se observa en casos de abstinencia sexual prolongada o
tambin puede indicar una piosprmia( presencia de gran cantidad de leucocitos)
originada por una infeccin, un color rojizo o parduzco indicara una hemospermia
(presencia de sangre)
Olor. El olor normal del semen es mohoso o a blanqueador (cloro).
El olor ftido es anormal y se produce en procesos infecciosos
pH. Se evala distribuyendo una porcin de semen sobre una tira de papel pH.
Dentro de los primeros 30 segundos el color debe ser uniforme y se compara con
la plantilla de calibracin.
El pH del semen es ligeramente alcalino entre 7.2 y 7.8, pH mayor puede indicar
alguna infeccin

 EXAMEN MICROOSCOPICO:
Para el anlisis microscpico se recomienda utilizar un microscopio con contraste
de fases para muestras que no son teidas y campo claro para muestras teidas.
El anlisis microscpico incluye:
Movilidad. Se homogeneiza la muestra, se coloca una gota de lquido seminal en
un portaobjetos de 25 x 75 Mm. se utiliza un cubreobjetos de 22 x 22 para que la
muestra tenga una profundidad de 20 m.
Se evalan 200 espermatozoides mnimo de acuerdo a las siguientes categoras:
a = Movilidad progresiva rpida.
b = Movilidad progresiva lenta.
c = Movilidad no progresiva.
d = Inmviles.

El resultado se expresa en porcentaje.

Aglutinacin. La aglutinacin es la adherencia de los espermatozoides entre s.

Puede ser Cabeza con cabeza, cola con cola y cabeza con cola
Se evalan 10 campos centrales y se evalan los espermatozoides aglutinados. El
resultado se expresa en porcentaje.

Viabilidad. En un portaobjetos se coloca una gota de lquido seminal y una gota

de eosina al 5% en solucin fisiolgica y se cubre con el cubreobjetos Se evalan
200 espermatozoides con un objetivo de 100x, en los campos centrales, los
espermatozoides no teidos (vivos) y espermatozoides teidos (muertos). El
resultado se expresa en porcentaje.
Espermatozoides muertos coloreados

0- 5%

Espermatozoides vivos inmviles no coloreados

Hasta 40%

Espermatozoides vivos mviles no coloreados

Hasta 60% o ms

Recuento de espermatozoides: La concentracin espermtica se evala en un

Hemocitometro utilizando un lquido diluyente especial denominado solucin de
Macomber y Saunders cuya composicin es la siguiente: Bicarbonato, formol y
agua
destilada.
En esta solucin el formol tiene el objetivo de inmovilizar a los espermatozoides y
el bicarbonato hacer fluido el moco para que la disolucin pueda homogeneizarse.
Con una pipeta de recuento de glbulos blancos se aspira semen homogeneizado
hasta la marca 0.5 y luego de disolucin hasta la marca 11. El nmero de
espermatozoides contados en la cmara de Neubauer se debe multiplicar por
50,000 ya que el resultado se expresa como No. De espermatozoides por cc .. Los
valores normales son de 20 a 150 millones de espermatozoides/CC.

Morfologa: La evaluacin de la morfologa espermtica es el parmetro ms

discutido a nivel mundial para conseguir criterios de uniformidad.

Primeramente se realizan los frotis de las muestras de semen. Para la tincin de

los frotis se utiliza la tcnica de Papanicolaou la cual es la ms utilizada porque
permite distinguir la regin acrosomal y post-acrosomal de la cabeza, la pieza
media y la cola del espermatozoide. Cuando la tincin est bien realizada se
observa la cabeza teida de azul claro en la regin acrosomal y azul oscuro en la
zona postacrosomal. La pieza media de color rojizo y el flagelo de color azul. Las
gotas citoplasmicas se tien de color verde.

Un espermatozoide normal tiene las siguientes dimensiones:

Cabeza ovalada = 4-5 m, Pieza media= 6-8 m y el flagelo= 45 m. Los
defectos se clasifican como:
Defectos de Cabeza: Grande, pequea, acintada, piriforme, amorfa, vacuolaza,
doble etc.
Defectos de Pieza Media: Cuello doblado, insercin asimtrica, pieza media
gruesa o irregular etc.
Defectos de la Cola: Corta, mltiple, rota doblada, irregular etc.
Gotas Citoplsmicas: Mayores de un medio de la superficie de la cabeza.
Para el conteo de la morfologa se contemplan los espermatozoides normales y
los que tienen diferentes defectos. Se cuentan un mnimo de 200 espermatozoides
y el resultado se expresa en porcentaje para las diferentes categoras.

Otras Clulas presentes en el Semen. Finalmente se evalan leucocitos,

eritrocitos, epiteliales, inmaduras, bacterias y residuo que se encuentran en el
semen.
Resultados:
VALORES DE REFERENCIA

VARIABLES MACROSCPICAS

VALOR DE REFERENCIA

Volumen

2 ml o ms

Color

Grisceo a ligeramente amarillento

Coagulo

Presente

Licuefaccin

5-60 minutos

Viscosidad

Normal

pH

7.2-8.0

VARIABLES MICROSCPICAS

VALOR DE REFERENCIA

Concentracin

>20 x 10 6 espermatozoides/ml

Cuenta total

>40 x 10 6 espermatozoides/ml

Motilidad

>50% (categoras a y b)

ndice de Motilidad

> 25% (categora a)

Viabilidad

> 0.5 %

Morfologa

>75% vivos

Leucocitos

>15%

Eritrocitos

< 1 x 10 6 /ml

Epiteliales

< 1 por campo

Clulas inmaduras

< 1 por campo

Bacterias

< 5 por campo

Aglutinacin

Escasas
< 10%

Conclusin:

Es importante realizar un anlisis de semen mediante lineamientos estandarizados ya que as nos

permitir tener nivel de calidad en dichos anlisis.
As como resolver problemas serios con eficiencia que se presentan casos severos por ejemplo:
Cuando alguna pareja resulta infrtil referidas de una clnica a otra y los resultados de los anlisis
de semen entre los laboratorios involucrados son diferentes. Es decir entre laboratorios un paciente
puede ser clasificado como normal en uno y anormal en otro.
Por todo esto, es fundamental que el personal del laboratorio que se encarga del anlisis de semen,
participe en programas de educacin continua, mediante talleres terico-prcticos para el anlisis
de semen, foros de discusin y retroalimentacin y participacin en programas de control de calidad
externo.

Bibliografa:
1.- Baker D.J., Paterson M.A., Klassen J.M. 1994. Semen evaluations in the clinical laboratory. How well are
they being performed?. Lab Med. 25. 509-514.
2. - Clements, S., Cooke I.D., Barrat C.L.R. 1995. Implementing comprehensive quality control in the
andrology. Hum Reprod. 10:8 2096-2106.
3. - Keel B., Quinn P., Schmidt C.F., Serafy N.T.Jr, Serafy N.T. Sr., Shalue T.K. 2000. Results of the American
Association of Bioanalysts national proficiency testing programme in andrology. Hum Reprod. 15:3:680-686.
4. - Mortimer D. 1994. Practical Laboratory Andrology. Oxford University Press. Oxford.
5.- Organizacin Mundial de la Salud. 2002. OMS Manual del laboratorio para el examen del semen humano y
de la interaccin entre el semen y el moco cervical. 4 a edicin. Panamericana. Espaa.
6.-Castilla J.A. 2001. Control de Calidad en el laboratorio de Androloga. Rev. Iber Fert. 18:4, Jul-Agos.29-33.