BIOMOLECULAS
BIOMOLECULAS
BIOMOLECULAS
INTEGRANTES:
ARREGOCES ROBERTO
CORREA JAUN MIGUEL
FERREIRA KAROLAY
MONTENEGRO HANNER
PEREZ ANDRES
BIOLOGIA GENERAL
LAB. FISIOLOGIA VEGETAL
RESUMEN
En el siguiente informe se encuentra plasmada la experiencia del estudio y
reconocimiento de biomoleculas que llevamos a cabo en el laboratorio de fisiologa
vegetal, lo cual determinamos la presencia bio-compuestos que hacen parte de los
tejidos vegetales, verificamos las propiedades ms notorias de las biomoleculas a partir
de reacciones qumicas utilizando diferentes tipos de reacciones y soluciones teniendo
en cuenta la composicin y su funcin como lo es la reaccin de Fehling, la reaccin de
Benedict, el reactivo Lugol, el compuesto cido ntrico, Sudan III, etc. Para llevar a
cabo esta prctica tuvimos de igual forma como referencia variedad de productos que
son usados en la vida diaria como la papa, el huevo, aceite de cocina, maz, etc. Y como
elementos de apoyo o tambin llamados elementos necesario de laboratorio como
bistur, microscopio, beaker, etc. Pero todo con la finalidad de determinar la presencia
y cmo actan las biomolculas.
PALABRAS CLAVES: amiloplastos, lpidos, protenas, almidn, reactivo.
ABSTRAC
In the following report it is embodied the experience the study and recognition of
biomolecules we carried out in the laboratory of physiology vegetal, which we
determine the presence biomolecules that are part of plant tissues, we verify the most
notable properties of biomolecules from chemical reactions using different types of
reactions and solutions taking into account the composition and function as is the
Fehling. The reaction Benedict, Lugol reagent, nitric acid compound, Sudan III, etc. to
carry out this practice had equally as a reference variety of products that are used in
everyday life such as potatoes, egg, cooking oil, corn, etc. but everything in order to
determine the presence and how the act biomolecules.
KEY WORDS: amyloplasts, lipids, protein, starch, reagent.
INTRODUCCION
La materia viva est constituida por C, H, O, N, S y P. De los ms de 100 elementos
qumicos, solo cerca de 26% se encuentran en forma natural en las plantas y animales. Los
elementos que se encuentran en abundancia y son esenciales para la vida son: carbono,
hidrogeno, oxigeno, nitrgeno, fosforo y azufre, todos ellos constituyen alrededor del 92%
del peso seco de los seres vivos. BIOCOMPUESTOS: Resultan de la unin de los
bioelementos, de acuerdo con su composicin pueden ser: BIOCOMPUESTOS
INORGNICOS y BIOCOMPUESTOS ORGANICOS. Bio-compuestos inorgnicos:
Entre los ms importantes estn: el agua, las sales Minerales, funciones Reguladoras del PH
(Boyer R, 2000).Bio-compuestos Orgnicos: Los ms importantes de la biosfera (zona de
aire, tierra y Agua del planeta ocupada por seres vivos) Son los carbohidratos, los lpidos,
las protenas y los cidos nucleicos. Carbohidratos: Son molculas que almacenan energa y
constituyen una gran variedad de componentes estructurales de la clula, estn formados
por carbono, hidrogeno y oxgeno. Los carbohidratos de acuerdo con las Molculas de
azcar que contienen se clasifican en: Monosacridos, Disacrido, Polisacridos (Bohinski
R.1998).Los Carbohidratos son conocidos por el papel que desempean en el metabolismo
energtico. Algunos de estos compuestos (glucosa y sus derivados) sirven como
combustible de consumo inmediato por los organismos, mientras que otros compuestos
(almidn, glucgeno) son depsitos qumicos que sirven para para satisfacer las
necesidades energticas futuras en las plantas y en los animales. Como las protenas,
algunos carbohidratos desempean funciones estructurales proporcionando los armazones
para las paredes celulares de plantas, bacterias y las cubiertas del exoesqueleto en los
artrpodos. Los carbohidratos se encuentran combinados covalentemente con las protenas
y los lpidos complejos sobre las superficies celulares donde actan como marcadores para
el reconocimiento de otras biomolculas (Boyer R.2000).Los Lpidos estn formados por
carbono, hidrogeno y oxgeno, proporcionalmente tienen mucho menos oxigeno que los
carbohidratos. Son de consistencia oleosa, algunos son slidos como el tocino, y otros
lquidos como el aceite de oliva. Las molculas de Los lpidos estn formadas por glicerina
y cidos grasos, No son solubles en agua pero se disuelven fcilmente en disolvente
orgnicos (solventes no polares) como ter, cloroformo y benceno. Sirven para almacenar
energa y tambin tienen funciones estructurales en los organismos. Algunos lpidos polares
que contienen nitrgeno y fsforo, son componentes importantes de las membranas
biolgicas, las cuales estn constituidas por lpidos y protenas formando barreras
moleculares alrededor de las clulas y sus orgnulos.Los lpidos se clasifican en dos grupos
Lpidos simples, Lpidos Compuestos (Bohinski R. 1998). Las Protenas son compuestos
orgnicos formados por Carbono, Hidrogeno, oxgeno y nitrgeno, Adems pueden
contener azufre, fosforo, hierro u otros elementos. Dentro de la gran variedad de protenas
se encuentran las enzimas, las hormonas y las protenas de almacenamiento como las que se
encuentran en los huevos de las aves y en las semillas de los vegetales, Protenas de
transporte de gases como la hemoglobina, contrctiles como la Actina y la miosina, de los
msculos y muchas otras de funciones estructurales. Las funciones de las protenas son
muchas debido a la gran cantidad de ellas que existen en los seres vivos.Las unidades
bsicas de las protenas son los aminocidos, molculas pequeas de cidos carboxlicos
que poseen un grupo amino (NH2) el cual se encuentra unido al carbono adyacente al grupo
carboxilo(COOH). Dos aminocidos pueden unirse entre s, formando un dipptido, al
unirse los aminocidos por medio de enlaces peptdicos se forman tripeptidos, tetrapptidos
o polipptidos, segn tengan tres, cuatro o ms aminocidos. Para estructurarse una
Protena debe unirse muchsimos aminocidos, formando una larga cadena poli- peptdicas.
No existe un criterio definido para clasificar las protenas, De acuerdo con su composicin
se pueden agrupar en: protenas simples, protenas Conjugadas (Boyer R, 2000).
El reactivo de Fehling, tambin conocido como Licor de Fehling, es una disolucin
descubierta por el qumico alemn Hermann von Fehling y que se utiliza como reactivo
para la determinacin de azcares reductores. Sirve para demostrar la presencia de glucosa,
as como para detectar derivados de sta tales como la sacarosa o la fructosa.
OBJETIVOS:
Determinar la presencia de carbohidratos, lpidos, protenas y cidos nuclecos en
muestras de tejidos vegetales.
Verificar algunas propiedades de las biomolculas mediante algunas reacciones
bioqumicas.
Diferenciar los cambios de conformacin de algunas protenas cuando son afectadas
por la temperatura, pH y sales.
MATERIALES
NECESARIOS
Microscopio
Porta objetos
Cubre objetos
Pipeta
Pinzas de madera
Tubos de ensayos
Gradillas
BIOLGICOS
Azcar
Papa fresca
Maz molido
Huevos fresco
REACTIVOS
Felhing A y B
Benedict
Solucin de glucosa
(10%)
Solucin de sacarosa
(10%)
Lugol
Hidrxido se sodio (30%)
Sulfato de cobre (30%)
Sudan III
cido ntrico
Azul de metileno
Cloruro de sodio
cido clorhdrico
Agua destilada
Acetona
MTODOS
MONOSACARIDO (GLUCOSA)
Reaccin de Fehling:
Tomamos dos tubos ensayo, previamente marcados con los nmeros 1 y 2 respectivamente.
En el primero agregamos 5 ml de agua destilada, y al segundo le agregamos 5 ml de
solucin de glucosa, a cada tubo se le agregaron 20 gotas de soluciones de Fehling A y B,
agitamos, observamos lo ocurrido, luego calentamos los tubos con un mechero hasta
ebullicin observando el resultado.
Reaccin de Benedict:
Tomamos dos tubos de ensayo y procedimos a agregar al primero 5 ml de agua destilada, y
al segundo 5 ml de la solucin de glucosas, a cada tubo se aade 3 cc de reactivo de
RESULTADOS
MONOSACARIDO (GLUCOSA)
Reaccin de Fehling
Cuando le aplicamos la reaccin de Fehling al tubo que contena agua destilada esta se
torn azul claro; cuando le agregamos Fehling al tubo que contena glucosa al 10% esta se
torn azul oscuro.
Cuando calentamos el tubo que contena la solucin de Glucosa y que se le aplico Fehling, se
observ que cambi a color verde, naranja y por ultimo marrn con un intervalo de 5 segundos cada
uno a diferencia que a temperatura ambiente se mantuvo de color azul.
El tubo control se mantuvo en su color pero presento unas pequeas partculas suspendidas.
Reaccin de Benedict
Cuando aplicamos Benedict al tubo control con agua destilada se torna azul claro, a
diferencia del tubo que contena glucosa que se torn azul oscuro a temperatura ambiente
luego de agitar.
Al colocarlo a punto de ebullicin el tubo testigo permaneci en su color pero presento
unas partculas suspendidas.
El tubo que contena glucosa cambio de azul a verde, y de verde a naranja.
DISACARIDO (SACAROSA)
Reaccin de Fehling
Cuando le agregamos al tubo que contena sacarosa este se torn azul oscuro y al colocarlo
a ebullicin se torn verde y de verde paso a naranja oscuro.
El tubo control se torn azul claro al tener contacto con la solucin de Fehling, al estar en
ebullicin se torn azul oscuro y en su interior se podan observar partculas suspendidas.
RECONOCIMIENTO DE LIPIDOS
Saponificacin:
El aceite al entrar en contacto con el hidrxido de sodio a temperatura ambiente nunca se
mezcl, al entrar a punto de ebullicin el aceite quedo arriba y el hidrxido de sodio quedo
abajo con partculas suspendidas quedando una mezcla heterognea.
REACCION CON SUDAN III
Cuando agregamos Sudan III al tubo que contena agua destilada logramos observar que el
Sudan III no es soluble en agua formndose as una mezcla heterognea, quiere decir que
en esta muestra no hubo presencia de lpidos por lo que el Sudan III no es soluble en
solventes utilizados para su disolucin.
Al momento que le agregamos Sudan III al tubo que contena aceite de cocina pudimos
observar que se obtuvo un mezcla homognea y si hubo presencia de lpidos por lo que el
Sudan III es soluble en los lpidos.
DETERMINACION DE PROTEINAS
Prueba 1.
Tubo 1: Agregamos acido al agua destilada y pudimos observar que no se altera nada, no
se obtiene ningn cambio.
Tubo 2: Cuando agregamos cido ntrico a los 5ml de clara de huevo que se tena de
referencia, pudimos notar que la protena sea el huevo se desnaturaliza.
Prueba 2.
Tubo1. Se calent suavemente en un mechero.
Notamos que la clara de huevo se coagulo porque perdi su solubilidad, se ve de color
blanca.
Tubo 2. Se aadi 4 ml de acetona.
Notamos que la protena pierde su estructura llegando a precipitarse.
Tubo 3. Se aadi 1 ml de cido clorhdrico.
Notamos que la protena cambia de color y que el cido desnaturalizo la protena.
DISCUSION DE RESULTADOS
MONOSACARIDO (GLUCOSA)
REACCION DE FEHLING
Mediante esta prctica de laboratorio notamos que el tubo que contena glucosa se torn
azul al tener contacto con el Fehling a temperatura y al colocarla a punto de ebullicin
cambio de azul a marrn debido a que el Licor de Fehling, en presencia de glucosa o de algn
otro monosacrido, al calentarse, adquiere color anaranjado.
La glucosa se oxida y reduce los iones cpricos que pasan a cuprosos combinndose a la vez con
iones hidroxilo, formando hidrxido cuproso (amarillo), que por el calor se convierten en oxido
cuproso.
La glucosa se vuelve visible mediante el reactivo de Fehling, que contiene xido de cobre en
solucin alcalina. El xido de cobre se reduce a xido cuproso, de color pardo rojizo, al reaccionar
con la glucosa o con otros azcares reductores anlogos, como lo es la glucosa misma. El motivo es
que sobra oxgeno, que resulta al ser detectado por el reactivo de Fehling, haciendo susceptible la
glucosa a la oxidacin (Boyer R, 2000).
REACCION DE BENEDICT:
Vemos que se forma un precipitado azul oscuro que se fue tornando marrn anaranjado. El
fundamento de esta reaccin es similar a la de Fehling con glucosa, lo nico diferente es
que utilizamos un reactivo ms suave como el carbonato sdico (Boyer R. 2000).
El Benedict es un reactivo utilizado para el reconocimiento de azucares reductores, como la
glucosa, la solucin A est compuesta por carbonato de sodio anhidro y agua; la solucin B
est compuesta por sulfato de cobre (II) pentahidratado y agua. La solucin A se mezcla
con la solucin B para obtener la solucin Beneditc (Franco C. 2002).
SACAROSA (REACCION DE FEHLING)
Esta reaccin se debe a que la sacarosa es un disacrido de glucosa y fructuosa unidos por
un enlace alfa y beta glusidico. La sacarosa es un disacrido no reductor, cuando se
hidroliza genera 2 monosacridos reductores que son la glucosa y la fructosa. (Boyer R,
2000).
El licor de Fehling se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de los aldehdos.
ste se oxida a cido y reduce la sal de cobre en medio alcalino a xido de cobre, formando
un precipitado de color rojo. (Boyer R, 2000).
El reactivo de Fehling sirve para demostrar la presencia de glucosa, as como para detectar
derivados de sta tales como la sacarosa o la fructosa. (Boyer R, 2000).
REACCION DE LA PAPA ANTE EL LUGOL:
El reactivo de Lugol es una solucin de yodo en agua destilada, y se utiliza para evidenciar
la presencia de almidn en la papa. El yodo forma con los polisacridos de alto peso
molecular como almidones, glucgeno y dextrinas un compuesto de inclusin que absorbe
en el espectro visible, en la gama del amarillo y naranja, por lo que estos compuestos
resultan de color azul o violeta. La papa, como todos los vegetales, almacena glucosa en
forma de almidn, por lo que al reaccionar con Lugol da un color marrn oscuro. Esto se
debe a que el almidn es un homopoliosido no reductor insoluble en agua fra, constituido
por glucosa; est formado por dos tipos de molculas: la amilosa y amilo pectina que al ser
expuesto al yodo se torna de este color (Callen J. 2000).
La amilasa, el componente del almidn de cadena lineal, forma hlices donde se juntan las
molculas de yodo, formando un color azul oscuro a negro. La amilo pectina, el
componente del almidn de cadena ramificada, forma hlices mucho ms cortas, y las
molculas de yodo son incapaces de juntarse, obtenindose un color entre naranja y
amarillo. Al romperse o hidrolizarse el almidn en unidades ms pequeas de carbohidrato,
el color azul-negro desaparece. En consecuencia, esta prueba puede determinar el final de
una hidrlisis, cuando ya no hay cambio de color constituyendo una evidencia experimental
ampliamente utilizada (Beaker J; Allen Garland)
OBSERVACION DE AMILOPLASTOS
Los amiloplastos se dejan ver en el microscopio debido al azul de metileno que usamos ya
que este deja verlos pues los amiloplastos son incoloros y el azul de metileno funciona
como un fijador de tejidos (Callen J. 2000).
REACCION DE SUDAN III
Esta reaccin se debe a que el Sudan III pertenece al grupo de colorantes indiferentes, que
son aquellos que no tienen afinidad por estructuras cidas o bsicas. Son insolubles en
el agua y tien aquellas sustancias que tienen un poder de disolucin superior al del lquido
empleado para preparar la solucin colorante.
Los colorantes para grasas son ms solubles en las propias grasas que en el medio en el que
van disueltos. As, al baar la grasa con la solucin del colorante, ste tiende a disolverse
en la grasa que se va cargando del colorante. Por regla general estos colorantes siempre van
en solucin alcohlica o bien en una mezcla de alcohol/acetona o alcohol/agua. (Callen J.
2000)
DETERMINACION DE PROTEINA
Ante el cloruro de sodio La solubilidad de las protenas es sensible a la composicin y al
pH del medio, as como a la presencia de otros solventes. Asimismo, las protenas
presentan comportamiento de electrolitos simples en solucin, por lo que son susceptibles a
la concentracin inica del medio. Las sales neutras ejercen efectos pronunciados sobre la
solubilidad de las protenas globulares. A baja concentracin, las sales incrementan la
solubilidad de muchas protenas, fenmeno que recibe el nombre de solubilizaran por
salado. Las sales de los iones divalentes, MgCl2 y el (NH4)2SO4, son mucho ms eficaces
en la solubilizaran de las protenas que las sales de iones monovalentes, NaCl, NH4Cl y
Kcal. La capacidad de las sales neutras para influir en la solubilidad de las protenas est en
funcin de su fuerza inica, que constituye una medida, tanto de la concentracin como del
nmero de las cargas elctricas existentes en los cationes y los aniones aportados por la sal.
(Callen J.2000)
CONCLUSIN
Con esta prctica de laboratorio aprendimos a manipular Distintos reactivos y aplicarlos
para reconocer las distintas estructuras biomoleculares que se encontraban en cada uno de
los materiales orgnicos. De igual manera aprendimos como se comportaban estos en las
diferentes reacciones a conocer, las cuales nos exigan algunos mtodos de precaucin al
momento de utilizar ciertos materiales qumicos. Pudimos notar cmo cambia su color, y
textura en algunas, debido a los cambios qumicos se presentan por los electrones presentes
en cada biomolculas.
PREGUNTAS COMPLEMETARIAS
A) cul es la composicin qumica del reactivo de Fehling A y B?
R// El Fehling A est compuesto por sulfato de cobre II pentahidratado y agua, y la
solucin B est formada por sal de rochelle, hidrxido de sodio y agua (Franco A, 2002).
BIBLIOGRAFIA
Editorial Addison
Wesley
BOYER R; 2000 Conceptos En Bioqumica, Editorial Thomson Editores S.A, Mxico 694
Pg.
CALLEN J; 2000, Biologa Celular de Las Molculas a Los Organismos, Primera Edicin,
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Cultural S.A.; Enciclopedia Alfa Temtica tomo I (biologa) y tomo III (qumica), editorial
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FRANCO A; 2002, Preparacin de Reactivos y Soluciones Para Trabajo de Laboratorio,
primera edicin, Editorial pice, Bogot, 69 Pg.
VILLE, C. 1996. Biologa Octava Edicin. Editorial McGraw Hill. 960 pg.