Practica Coombs

FACULTAD: CIENCIA DE LA SALUD.
CURSO:BANCO
SANGRE
HEMOTERAPIA
DE
Y
TEMA:
PRUEBA
DE
COOMBS DIRECTA E INDIRECTA
DOCENTE: LIC. VARGAS VICTOR
ALUMNA: SULCA GONZALES JHENY.
RAMIREZ VERNAL GEORGE
SARAVIA TASAYCO DAVID
SECCIN: LC8M1
INTRODUCCION
La prueba de Coombs (tambin conocida como prueba de anti globulina) es

un examen de sangre que se usa en inmunologa y hematologa. Este anlisis
puede detectar la presencia de anticuerpos en suero que reaccionan con
antgenos en la superficie de los glbulos rojos. Hay dos tipos distintos de la
prueba de Coombs: el directo y el indirecto. La prueba de Coombs
directa detecta anticuerpos ya unidos a la superficie de los glbulos rojos, y
la prueba de Coombs indirecta detecta anticuerpos libres que pueden
reaccionar in vitro con glbulos rojos que tienen antgenos especficos.
PROCEDIMIENTO DE LA PRCTICA
PRUEBA DE COOMBS DIRECTA:
La prueba de coombs directa permite detectar anticuerpos o complemento unidos a los

hemates. Es decir, que nos ayuda a saber si un paciente esta sensibilizado con anticuerpos
o complementos de tipo IgG o C3d, respectivamente, y tiene o podra tener una reaccin
auto hemoltica.
FUNDAMENTO: Esta prueba se usa para determinar si hay complemento o anticuerpos
ya fijados a los eritrocitos tomados directamente del paciente. Estas clulas, alcanzadas de
una venopuncin, se lavan y se agrega el reactivo de Coombs. Los anticuerpos del reactivo
se unen a IgG, IgM, o complemento que est unido a la superficie de los Glbulos rojos.
Estos se aglutinan, produciendo grupos de clulas que indican un resultado positivo.
PROCEDIMIENTO:
FASE DE LAVADO DE GLOBULOS ROJOS
En la fase de lavado se trata

de
eliminar
cualquier
sustancia que pueda interferir
con
una
reaccin
falso
positivo.
Este lavado de GR se debe de
realizar por 4 veces a 3500
rpm por 2 min.
FASE DE ANTIGLOBULINA
Glbulos rojos
Agregar 1
de GR 5%
+
gota
En esta fase ya se encuentran los GR

prcticamente limpios y se procede a
suspender al 5% y agregar el reactivo de
AGH (IgG C3d).
La centrifugacin ayuda a eliminar el
potencial Z de los GR y hacer posible la
observacin de la aglutinacin.
Centrifugar
inmediatamente a
Resultado
Negativo=
Se
observa
solucin homognea como una nube.
Resultado Positivo= Se observa un botn
compacto y el fondo transparente.
RESULTADO
NEGATIVO
PRUEBA DE COOMBS INDIRECTA:
RESULTADO
POSITIVO
FUNDAMENTO: Se detectan anticuerpos especficos de ciertos antgenos que no

necesariamente estn presentados en los glbulos rojos del paciente, pero puede estar en
glbulos rojos de otras personas. Si se mezcla suero tomado de un paciente que contiene
estos anticuerpos con glbulos rojos que s muestran estos antgenos especficos, los
glbulos rojos se van a cubrir con anticuerpo. Una vez cubiertas, las clulas se van a
aglutinar despus de una exposicin al reactivo de Coombs. En el diagnstico
de eritroblastosis fetal, el suero tomado de la madre Rh- no reacciona con su propia sangre,
sino con la de su feto Rh+. El suero de la madre, que contiene anticuerpos especficos del
factor Rh, se mezcla con glbulos rojos Rh+. Los anticuerpos del suero se unen a las
clulas. Luego, se agregan anticuerpos antihumanos para aglutinar los glbulos rojos. Se
puede diluir el suero y hacer la prueba repetidas veces, para cuantificar los anticuerpos en el
suero.
Muestras de
sangre de los
pacientes
Se prepar una
suspensin al
5% de
eritrocitos
previamente
lavados con
solucin salina
En los tubos
colocar 1gota
de la
suspensin al
5% y agregar
el coombs
Y centrifugar
a 3500rpm X
Codificacion
Donador nro
6
Donador nro
4
Donador nro
2
Con
respecto a
la lectura
de los
tubos de
clasifico en
cruces
(hasta 4)
de acuerdo
Observacin
despus de
la
FASE SALINA
T Amb.
C.I.S
(15min)
ALB 22%
2 got
F.PROTEICA
37C
(20min)
4+
4+
4+
4+
LAVAR
4
VECES
X 2 min
Don.
4+
0
0
Don.
Don.
AGH
CCC
PRUEBA GLOBULAR
Codificacin
ANTI A
ANTI B
ANTI D
INTERPRETACIO
N
Recepto nro 1
O Rh+
Donador nro
2
O Rh+
Donador nro
4
O Rh+
Donador nro
6
B Rh+
PRUEBA
GLOBULA
R
CODIFICACIN ANTI
A
DISCUSIN:
Recepto nro 1
0
Donador nro 2
0
Donador nro 4
0
Donador nro 6
0
ANTI
B
0
0
0
4+
ANTI
D
4+
3+
4+
4+
INTERPRETACIO
N
O Rh+
O Rh+
O Rh+
B Rh+
Los resultados obtenidos en la prctica fueron tanto positivo como negativo. Al iniciar la
prctica pudimos observar las caractersticas macroscpicas de las muestras, una de ellas
presentaba un plasma normal de color amarillento clsico y limpio; en cambio, la otra
muestra presentaba una turbidez color rojiza, lo que nos haca pensar que esa muestra
estaba realizando una hemolisis de sus glbulos rojos. Estas caractersticas nos ayudan a
tener una idea de lo que nos podra salir en nuestro resultado.
La muestra positiva nos indica de que el paciente esta sensibilizado, es decir, que el
paciente ha producido anticuerpos contra sus propios glbulos rojos y que mediante el uso
de un reactivo, que es producido comercialmente, que es especifico contra los anticuerpos o
tambin llamados globulinas humanas o complemento, se va a producir la unin y mediante
la reduccin del potencial Z por la centrifugacin (3500 rpm x 15) se lograra la
aglutinacin y se evidenciara con la formacin de un botn compacto en el fondo del tubo.
La lectura se hace de forma lenta y con movimiento de vaivn para intentar desprender el
botn del fondo del tubo ante una luz incidente.
El resultado negativo nos demuestra que el glbulo rojo del paciente no cuenta con
anticuerpos unidos a su membrana por lo tanto no se observa aglutinacin. La observacin
de este resultado se ve como una nube que llega a cubrir toda la solucin.
CONCLUSIONES:
Mediante el uso de la prueba de coombs directa podemos discriminar si un paciente
puede tener anticuerpos contra sus propios glbulos rojos y nos ayuda a poder
brindar una sangre ms segura. Con este resultado se podra tomar decisiones con el
tipo de tratamiento que se le brindara al paciente con la finalidad de causarle
complicaciones en la transfusin sangunea. Esta prueba tambin es til para
determinar una EHRN mediante el uso del suero de la madre, la cual tendra
anticuerpos contra los glbulos rojos del neonato.
La prueba de Coombs indirecta busca anticuerpos que estn flotando en la sangre.
Estos anticuerpos podran actuar contra determinados glbulos rojos, si se detecta
algn anticuerpo, debe procederse a una prueba de identificacin de anticuerpos
para conocer cul de ellos est presente. Al verificar la compatibilidad entre donante
y receptor, y en el caso de que se detecten anticuerpos, se realiza una prueba de
Coombs indirecta modificada. Es importante que la sangre del donante no contenga
los antgenos frente a los cuales el receptor presenta ya anticuerpos.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
Procederes de Banco de Sangre. Ministerio de Salud Pblica. Grupo
Nacional de Hematologa y Banco de Sangre.

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