Monografía KiaraLeticia

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE NICARAGUA, MANAGUA
RECINTO UNIVERSITARIO RUBN DARO

FACULTAD DE CIENCIAS E INGENIERAS
DEPARTAMENTO DE QUMICA
MONOGRAFA PARA OPTAR AL TTULO DE LICENCIADO EN
QUMICA INDUSTRIAL
TTULO: OBTENCIN DE BIOETANOL A PARTIR DE LA CORONTA

(OLOTE) DEL MAZ VARIEDAD HS-5, POR EL MTODO DE
HIDRLISIS CIDA DILUIDA - FERMENTACIN SEPARADA,
LABORATORIOS DE QUMICA UNAN-MANAGUA, I-II SEMESTRE
2015
Autoras:
Bra. Kiara Yanibeth Montiel Centeno

Bra. Leticia del Carmen Romero Castro
Tutor:
PhD. Danilo Lpez Valerio
Asesora Metodolgica:
MSc. Mara Nathalia Gutirrez Arias
Managua, Diciembre 2015

NDICE
DEDICATORIAS i
AGRADECIMIENTOS ii
DECLARACIN DE AUTENTICIDAD iii
OPININ DEL TUTOR Y ASESOR METODOLGICO iv
RESUMEN v
ABSTRACT vi
CATULO I: ASPECTOS GENERALES
1.1 Introduccin 1
1.2 Objetivos 2
1.2.1 Objetivo general 2
1.2.2 Objetivos especficos 2
1.3 Planteamiento del problema 3
1.4 Justificacin 4
1.5 Antecedentes 5
CAPTULO II: MARCO DE REFERENCIA
2. MARCO DE REFERENCIA
2.1 Origen 7
2.2 Generalidades de la planta del maz (Zea Mays, L) 8
2.3 Produccin de maz en ciclo agrcola 2014/15 8
2.3.1 Produccin mundial en el ciclo agrcola 2014/15 8
2.3.2 Produccin de Centroamrica en el ciclo agrcola 2014/15 9
2.3.3 Produccin de maz en Nicaragua, ciclo agrcola 2014/15 9
2.4 Generalidades de la variedad de maz HS-5 10
2.4.1 Factores edafoclimticos para el cultivo de maz variedad HS-5 10
2.4.2 Mtodos de siembra 11
2.4.3 Crecimiento y fases de desarrollo 11
2.4.4 Descripcin botnica 12
2.4.4.1 Taxonoma 12
2.4.4.2 Morfologa 13
2.4.5 Requerimientos nutricionales del maz 16
2.4.6 Malezas que afectan el cultivo de maz 17
2.4.7 Insectos y plagas 17
2.4.8 Enfermedades 18
2.4.9 Cosecha 18
2.5 Residuos agroindustriales generados en la postcosecha del maz 19
2.6 Estructura y composicin qumica del olote del maz 20
2.6.1 Componentes del material lignocelulsico del olote del maz 21
2.6.1.1 Componentes estructurales 21
2.6.1.2 Componentes secundarios 25
2.7 Bioetanol 26
2.7.1 Clasificacin de acuerdo al tipo de materia prima 27
2.7.2 Produccin mundial de bioetanol 27
2.7.3 Proceso para la obtencin de bioetanol 29
2.7.3.1 Reduccin del tamao 30
2.7.3.2 Pretratamiento 30
2.7.3.2.1 Pretratamientos fsicos 31
2.7.3.2.1.1 Pretratamiento mecnico 31
2.7.3.2.1.2 Pretratamiento trmico 31
2.7.3.2.2 Pretratamientos fsico-qumicos 32
2.7.3.2.3 Pretratamiento qumico 33
2.7.3.2.4 Pretratamientos biolgicos 34
2.7.4 Hidrlisis cida 35
2.7.5 Fermentacin 39
2.7.5.1 Mecanismo de fermentacin 42
2.7.5.2 Microrganismos relacionados con la produccin de bioetanol 43
2.7.5.2.1 Levaduras 44
2.7.5.2.1.1 Saccharomyces cerevisiae 46
2.7.5.2.1.2 Pichia stipitis 47
2.7.5.3 Factores que afectan el desempeo de los microorganismos en la
produccin de bioetanol 47
2.7.6 Caractersticas fsico-qumicas del bioetanol 49
2.7.7 Usos y aplicaciones del etanol lignocelulsico 49
2.7.7.1 Combustible 50
2.7.7.2 Uso industrial 51
2.7.7.3 Industria de bebidas 51
CAPTULO III: HIPTESIS
Hiptesis 53
CAPTULO IV: DISEO METODOLGICO
4. DISEO METODOLGICO 53
4.1 Descripcin del mbito de estudio 53
4.2 Tipo de estudio 53
4.3 Poblacin y muestra 54
4.3.1 Poblacin 54
4.3.2 Muestra 54
4.3.2.1 Criterios de Inclusin 55
4.3.2.2 Criterios de exclusin 55
4.4 Variables y operacionalizacin 55
4.4.1 Variables independientes 55
4.4.2 Variables dependientes 55
4.4.3 Operacionalizacin de las variables 56
4.5 Material y mtodo 58
4.5.1 Materiales para recolectar informacin 58
4.5.2 Materiales para procesar la informacin 59
4.5.3 Mtodo 60
CAPTULO V: ANLISIS Y DISCUSIN DE LOS RESULTADOS
5. ANLISIS Y DISCUSIN DE LOS RESULTADOS 70

5.1 Caracterizacin fisicoqumica de la coronta del maz Variedad HS-5 70
5.2 Variables operacionales 72
5.2.1 Hidrlisis cida diluida 72
5.2.2 Fermentacin separada 74
5.2.3 Anlisis del proceso general 77
CAPTULO VI: CONCLUSIONES 80
CAPTULO VII: RECOMENDACIONES 81
BIBLIOGRAFA 82
INDICE DE ANEXOS
Anexo 1 Zonificacin ecolgica del cultivo del maz 1

Anexo 2 Caractersticas agronmicas de variedades de maz
2
recomendados en Nicaragua
Anexo 3 Mtodos de siembra en Nicaragua 3
Anexo 4 Morfologa de la planta de maz 5
Anexo 5 Requerimientos nutricionales del maz 7
Anexo 6 Principales malezas que afectan el cultivo del maz 9
Anexo 7 Plagas y enfermedades que atacan el cultivo del maz 13
Anexo 8 Enfermedades que afectan el cultivo del maz HS-5 16
Anexo 9 Caractersticas que debe presentar la mazorca para la
18
recoleccin mecanizada
Anexo 10 Estructura y composicin qumica del material lignocelulsico 22
Anexo 11 Caractersticas del etanol de primera y segunda generacin 26
Anexo 12 Ventajas y desventajas de los diferentes tipos de pretratamiento
27
para materiales lignocelulsicos
Anexo 13 Mtodos fsicos y qumicos para la detoxificacin de sustancias
32
inhibidoras
Anexo 14 Ruta metablica de la produccin de etanol en S. Cerevisiae 34
Anexo 15 Entrevista realizada a productores de finca Montiel 35
Anexo 16 Sistema de muestreo 38
Anexo 17 Mtodo Taguchi 42
Anexo 18 Mtodo de anlisis para la caracterizacin fsico qumica de
43
coronta de maz
Anexo 19 Cuantificacin de azcares reductores totales segn el mtodo
54
Miller cido 3,5-dinitrosalicilico (DNS)
Anexo 19.1 Cuantificacin de la concentracin de azcares reductores
71
totales en las muestras hidrolizadas
Anexo 20 Proceso de obtencin de bioetanol a escala de laboratorio 76
Anexo 21 Usos de la lignina 78
Anexo 22 Resultados de los anlisis en la caracterizacin fsico qumica
80
de la coronta de maz variedad HS-5
Anexo 23 Variables operacionales 83
Anexo 23.1 Resultados del anlisis del porcentaje de alcohol mediante
94
anlisis cromatogrfico
Anexo 24 Glosario 120
NDICE DE FIGURAS
Figura 2.1 Estructura de la coronta de maz 15

Figura 2.2 Alcoholes cinamlicos 24
Figura 2.3 Fermentacin alcohlica 42
Figura 2.4 Las tensiones medioambientales potenciales en la S.
cerevisiae durante la fermentacin para producir etanol
45
Flujograma Proceso de obtencin de Bioetanol a partir de la coronta de
68
4.1 maz variedad HS-5
FIGURAS DE ANEXOS
Figura 4.1 Morfologa de la planta de maz 5

Figura 4.2 Hojas de la planta de maz 6
Figura 4.3 Pednculo de maz 6
Figura 4.4 Brctea o tuza de maz 6
Figura 4.5 Coronta (olote) 6
Figura 4.6 Granos de maz 6
Figura 9.2.1 Recoleccin del maz despus de separarlo de la planta 19
Figura 9.2.2 Residuos de maz que quedan en el campo despus de la
19
recoleccin de la mazorca
Figura 9.2.3 Extraccin manual de la tuza 19
Figura 9.2.4 Extraccin manual del grano de maz 20
Figura 9.2.5 Residuo agroindustrial (olote) que es generado despus de
20
la extraccin manual del grano de maz
Figura 9.2.6 Extraccin mecnica del maz 21
Figura 9.2.7 Residuos generados (tuza y olote) en la extraccin mecnica 21
Figura 10.1.1 Vista general de la estructura y composicin qumica de la
22
biomasa
Figura 10.1.2 Estructura primaria de la celulosa 22
Figura 10.1.3 Unidad de celulosa mostrando los grupos ms voluminosos
23
en posicin ecuatorial y los hidrgenos en la axial
Figura 10.1.4 Fibrilla elemental o micela 23
Figura 10.1.5 Estructura de una microfibrilla 23
Figura 10.1.6 Representaciones de Hawort de las principales hexosas
24
presentes en la hemicelulosa
Figura 10.1.7 Representaciones de Hawort de las principales pentosas
24
Figura 10.1.8 Representaciones de Hawort de las principales pentosas
24
Figura 10.1.9 Subestructuras de la lignina donde muestran enlaces tipo ter
25
-O-4 y formas condensadas
Figura 14.1 Ruta metablica de la produccin de etanol en
34
S. cerevisiae
Figura 16.2.1 Tipo de envase y material anexo 41
Figura 16.2.2 Seleccin y recoleccin de la coronta 41
Figura 16.2.3 Recoleccin final 41
Figura 18.1 Muestras de coronta en desecacin para determinar
43
humedad
Figura 18.2 Cenizas de coronta 44
Figura 18.3.1 Sistema de reflujo para extraccin de la muestra lquida 45
Figura 18.3.2 Medicin de pH 45
Figura 18.4.1 Etapa inicial de la extraccin Soxhlet h 47
Figura 18.4.2 Etapa Final de la extraccin con Soxhlet 5 h 47
Figura 18.4.3 Sistema de filtracin al vaco 47
Figura 18.4.4 Secado de las muestras a Temperatura ambiente 47
Figura 18.5 Cenizas sin extractivos 48
Figura 18.6.1 Extraccin a reflujo 50
Figura 18.6.2 Celulosa hmeda 50
Figura 18.6.3 Celulosa seca 50
Figura 18.7.1 Extraccin a reflujo con H2SO4 51
Figura 18.7.2 Reposo durante 12 h 51
Figura 18.7.3 Filtracin en Gooch 53
Figura 18.7.4 Lignina seca 53
Figura 19.1 Reactivo DNS 56
Figura 19.2 Solucin Stock de Glucosa [1g/L] 56
Flujograma Preparacin de las soluciones para la curva de calibrado

57
19.1
Flujograma Procedimiento para la cuantificacin de la concentracin de los
71
19.1.1 azcares reductores totales en las muestras hidrolizadas
Flujograma Proceso de obtencin de bioetanol a escala de laboratorio
76
20.1
NDICE DE TABLAS
Tabla 2.1 Principales pases productores de Maz a nivel mundial en el

8
ciclo agrcola 2014/15
Tabla 2.2 Produccin de maz en Centroamrica en el ciclo agrcola
9
2014/15
Tabla 2.3 Produccin de maz en Nicaragua, ciclo agrcola 2014/15 9
Tabla 2.4 Taxonoma de la planta de maz 12
Tabla 2.5 Elementos nutritivos necesarios para el maz 16
Tabla 2.6 Enlaces aromticos en las cadenas polimricas de la lignina 25
Tabla 2.7 Datos de investigaciones realizadas sobre componentes
26
principales de la estructura de la coronta de maz
Tabla 2.8 Porcentajes de Azcares Reductores en coronta de maz 36
Tabla 2.9 Comparacin de las propiedades fsico-qumicas del bioetanol
49
y la gasolina
Tabla 4.1 Diseo de experimento (Mtodo Taguchi) 61
61
Tabla 4.2 Valores de las Variables operacionales con niveles alto y bajo
Tabla 5.1 Caracterizacin fsico-qumica de materia prima coronta de
72
maz variedad HS-5
Tabla 5.2 Porcentajes de Azcares Reductores Totales 74
Tabla 5.3 Porcentajes de conversin de azcares reductores totales y
77
rendimiento de bioetanol
Tabla 5.4 Porcentaje de rendimiento y conversin para el proceso global
79
TABLAS DE ANEXO
Tabla 1.1 Zonificacin ecolgica del cultivo del maz (Zea Mays L) 1
Tabla 2.1 Caractersticas agronmicas de variedades de maz
2
recomendados en Nicaragua
Tabla 6.1 Principales malezas que afectan el cultivo de maz 9
Tabla 6.2 Control qumico de malezas en el cultivo de maz 11
Tabla 7.1 Plagas del suelo que afectan el cultivo de maz 13
Tabla 11.1 Caractersticas del etanol de primera y segunda generacin 26
Tabla 12.1 Ventajas y desventajas de los diferentes tipos de
27
pretratamiento para materiales lignocelulsicos
Tabla 12.2 Tipos de inhibidores y sus efectos sobre el proceso 31
Tabla 13.1 Mtodos fsicos y qumicos para la detoxificacin de
32
sustancias inhibidoras
Tabla 16.1 Ficha Informativa de las etiquetas en las muestras 39
Tabla 19.1 Volmenes y concentraciones para la curva de calibracin 56
Tabla 19.2 Longitud de onda en rango 588.0 a 413.0 nm con sus

60
respectivas absorbancias
Tabla 19.3 Datos espectroscpicos usados para construir la curva de
63
calibracin
Tabla 19.4 Datos estadsticos usados para la determinacin de las
incertidumbres asociadas a la recta de calibracin con cido 65
3,5 dinitrosaliclico (DNS) para la Glucosa 70
Tabla 19.5 Distribucin t de Student
Tabla 19.1.1 Resultados de las lecturas para los ocho experimentos 72
Tabla 19.1.2 Error en las concentraciones para los 8 Experimentos 75
Tabla 22.1.1 Porcentaje de humedad 80
Tabla 22.1.2 Porcentaje de Cenizas con extractivos 80
Tabla 22.1.3 pH 80
Tabla 22.1.4 Extractivos Totales 81
Tabla 22.1.5 Porcentaje de Cenizas sin extractivos 81
Tabla 22.1.6 Porcentaje de Celulosa 81
Tabla 22.1.7 Porcentaje de Lignina 82
Tabla 22.1.8 Porcentaje de Hemicelulosa 82
Tabla 23.1 Datos experimentales en el proceso de Hidrlisis cida
84
diluida y fermentacin separada
Tabla 23.2 Diseo de experimento Taguchi 86
Tabla 23.3 Totales de los factores y sus niveles 87
Tabla 23.4 Anlisis de varianza (ANOVA)
88
Tabla 23.5 Anlisis de varianza para los factores significantes en la
90
variable respuesta
Tabla 23.6 Promedio del nivel 1 y 2 en cada factor 91
Tabla 23.7 Efecto de cada factor significante 92
Tabla 23.8 Variables respuestas con su valor promedio estimado 93
NDICE DE GRFICAS
Grfico 2.1 Desarrollo del mercado mundial de etanol 28

Grfico 2.2 Distribucin regional de la produccin y el uso mundial de
28
bioetanol en 2022.
Grfica 5.1 Efecto de los factores sobre el porcentaje de los azcares
75
reductores
Grfica 5.2 Efectos de los factores sobre el porcentaje de conversin de
78
los azcares reductores en Bioetanol
Grfica 5.3 Efecto de los factores sobre el porcentaje de conversin en el
80
proceso global
Grfica 5.4 Efecto de los factores sobre el porcentaje de Rendimiento en
80
el proceso global
Grfica 19.1 Curva de Absorbancia para definir la longitud de onda de
63
trabajo
Grfica 19.2 Curva de Calibracin de la glucosa
64
NDICE DE DIAGRAMAS
Diagrama 2.1 Produccin de Bioetanol a partir de biomasa 29

Diagrama 4.1 Diagrama de equipos para la obtencin de bioetanol a partir
69
de la coronta de maz
ABREVIATURAS
ACS: Grado reactivo analtico
ADP: Adenosin difosfato
AFEX: Explosin de fibra con amonaco
AGROMER: Agropecuaria Mercantel S.A. Es una empresa fundada en 2005. Joven,

dinmica y profesional dedicada a la asistencia y ejecucin de una amplia variedad de
servicios agrcolas.
ANOVA: Anlisis de varianza
ATP: Adenosin trifosfato
CA: Concentracin de cido
CO: Monxido de carbono
CO2: Dixido de carbono
DEKALB: Es un programa que proporciona al agricultor semilla de maz hbrido para

la produccin.
DNS: cido 3,5-dinitrosalicilico
EF: Efecto
EFMC: Efecto en masa de coronta
EFT0: Efecto en la temperatura
EFtH: Efecto en tiempo de hidrlisis

e1: Error uno
e2: Error dos
E-1: Experimento uno
E-2: Experimento dos
E-3: Experimento tres
E-4: Experimento cuatro
E-5: Experimento cinco
E-6: Experimento seis
E-7: Experimento siete
E-8: Experimento ocho
E5: Mezcla de 5 % de etanol y 95 % de gasolina
FAO: Organizacin de las Naciones Unidas para la Alimentacin y la Agricultura
G.L: Grados de libertad
ha: Hectreas
H2SO4: cido sulfrico
HS-5: Hbrido del surco nmero cinco.

HMF: Hidrximetil furfural
H2O2: Perxido de hidrgeno
HRP: Horseradish peroxidasa
INTA: Instituto Nicaragense de Tecnologa Agropecuaria
Kg: Kilogramo
LHW: Agua lquida a alta temperatura
Lb: libras
Lip: Lignina peroxidasa
MAGFOR: Ministerio Agropecuario y Forestal.
MC: Masa de coronta
MC1: Promedio de masa de coronta uno
MC1: Masa de coronta uno
MC2: Promedio de masa de coronta dos
MC2: masa de coronta dos
MmL: miles de millones de Litros
MnP: Manganeso peroxidasa
mL: Mililitros
ML: Masa de levadura
MTBE: Metil terbutil ter

mz: Manzana
m/v: Relacin masa-volumen
N1: Nivel uno
N2: Nivel dos
NAD+ : Nicotinamida Adenina Dinucletido (forma abreviada)
NADH: Nicotinamida Adenina Dinucletido
OCDE: Organizacin para la Cooperacin y Desarrollo Econmicos
Om-85: Mtodo organizado en 1985
PFK: Fosfofructoquinasa
pH: Potencial de hidrgeno
Pi: Piruvato o fsforo inorgnico
qq: Quintales
RED: Directiva de Energa Renovable
RFS2: Renewable Fuel Standard
SSMC: Sumatoria de cuadrados en masa de coronta
SSe1: Sumatoria de cuadrados error uno
SSe2: Sumatoria de cuadrados error dos

T0: Temperatura
tH: Tiempo de hidrlisis
tF: Tiempo de fermentacin
TAPPI: Asociacin tcnica de la industria de la celulosa y el papel, (Technical

Assosiation of the pulp and paper industry)
1G: Primera Generacin
2G: Segunda Generacin
% p/p: Porcentaje peso-peso
% R: Porcentaje de rendimiento
% X: Porcentaje de conversin
% AR: Porcentaje de azucares reductores
% AR est: Porcentaje de azcares estimado

Obtencin de bioetanol a partir de la coronta (olote) del maz variedad HS-5, por el mtodo de Hidrlisis cida
diluida - fermentacin separada, laboratorios de Qumica UNAN-Managua, I-II semestre 2015
DEDICATORIA
A Dios:
Por ser mi fuerza, mi gua e iluminarme como el sol, con sabidura y gracia, para
atravesar esta trayectoria de mi vida, culminando con la realizacin de este trabajo, en
el que aprend a superar los altibajos y a forjarme con la armadura de la fe, hoy puedo
ver los frutos del arduo trabajo realizado en mi formacin profesional, por eso afirmo:
Del poder de tus hechos estupendos hablan los hombres, y yo publicar tu grandeza. Salmos 145:6.
A mis padres:
Sr. Javier Montiel Salinas y Sra. Arely Centeno Hudiel, por su apoyo incondicional
en todas las reas de mi vida, nunca olvidar sus palabras de nimo, han marcado en
su hija el mejor ejemplo a seguir, mis logros son sus logros, los amo.
A mis hermanas:
Mayela y Ariana Montiel, quienes me llenan de afecto incondicional y son mi
inspiracin para alcanzar mis metas.
Kiara Yanibeth Montiel Centeno
Bra. Kiara Montiel, Bra. Leticia Romero

i
DEDICATORIA
A Dios:
Por brindar salud, inteligencia, sabidura a mi familia y a m, por darme fuerzas en el

quehacer diario y permitirme culminar una de mis metas, como es ser licenciada en
Qumica Industrial.
Familiares:
Por su confianza y apoyo incondicional. Sobre todo, a mis padres Pablo Romero y
Reyna Isabel Castro, por instruirme desde mi infancia en mi educacin, pues por
ellos tuve la oportunidad de penetrar en el bello y maravilloso mundo del saber. A mis
hermanas Yaritza y Arelis a las que siempre he tratado de darles un buen ejemplo.
Profesores:
Los que me han transmitido el pan de la enseanza, mismos que a la vez me

inculcaron valores ticos, cvicos y morales desde mi preescolar hasta culminar mi
carrera.
Amig@s:
A tod@s mis amigos y amigas que siempre estuvieron en las buenas y las malas a mi
lado, por sus nimos, alegras y conocimientos compartido. En especial a Ftima
Leiva, Escarleth Sequeira, Kiara Montiel e Ixzel Olivas Siles, pues ms que amigas
son cmo hermanas para m.
Leticia del Carmen Romero Castro

i
AGRADECIMIENTO
Estoy infinitamente agradecida con Dios por darme sabidura, guiarme por el camino
de la rectitud y ayudarme hacer este sueo una realidad.
Mis padres que estuvieron en todo momento brindndome su infinito apoyo.
Mi abuelita Edelia Centeno, mi segunda madre, siempre me extendi su mano para

apoyarme y sus palabras las llevo marcadas en mi mente y corazn.
Mi tutor Dr. Danilo Lpez Valerio por haberme apoyado, no solo en la realizacin de esta
investigacin, sino que a lo largo de mi formacin profesional, cambiando mis
esquemas y ayudndome a encontrar el verdadero sentido de mi carrera, ms que mi
profesor del que he aprendido los paradigmas de la vida es mi amigo.
Mi asesora metodolgica MSc. Mara Nathalia Gutirrez por ayudarnos con la estructuracin
metodolgica de este trabajo y por brindarnos sus conocimientos desde segundo ao.
Mi compaera de tesis Leticia Romero Castro quien ms all que una amiga es mi hermana.
Mis familiares y amigos por sus palabras de nimo que fueron determinantes en esta labor,
sobretodo a mi primo Luis Armando.
Docentes del departamento de Qumica quienes me brindaron el pan de la enseanza.
Don Alejandrito, profesor Omar, profesor Jorge Pitty, Csar Canizales e Irving por su
contribucin en el desarrollo de esta investigacin.
En fin todas las personas que de una forma u otra contribuyeron en la realizacin de
este trabajo y formacin profesional.
Kiara Yanibeth Montiel Centeno

ii
AGRADECIMIENTO
En primera instancia agradezco a DIOS por la vida, por todo lo que he recibido y por
lo que an est por llegar, por dirigir mis pasos, por esos momentos de tristeza,
angustia, desesperacin, donde pareca que todas las puertas se cerraban pero t
siempre me distes la fuerza para levantarme. Te agradezco por este anhelo, por tu
palabra y por tu perdn. A nuestra madre santsima por estar siempre intercediendo
ante su hijo amado por m y por cada uno de sus hijos.
Pablo Romero, Reyna Isabel Castro gracias por ser siempre seres ejemplares, por ser
no solo mis padres sino tambin mis amigos, por su amor incondicional, por apoyarme
siempre en mis metas. A mis hermanas Arelis y Yaritza por su apoyo, por sus palabras
de aliento, por tener siempre la confianza en su hermana mayor y por ser una de mis
mayores fuerzas. Y a mis dems familiares les agradezco por cuidarme, apoyarme,
quererme porque yo s que la alegra de este logro no es solo mi alegra sino que de
todos ustedes tambin.
A los profesores por transmitirme sus conocimientos a lo largo de mi formacin
acadmica, por el apoyo cientfico y moral que recib de todos aquellos que desde un
inicio confiaron en m, en especial a:
PhD. Danilo Lpez Valerio, por su apoyo incondicional y desinteresado en el trascurso
de mi carrera y en esta investigacin, por su amistad, por ser esa persona que siempre
me da nimos y por mostrarme el ser de mi carrera.
MSc. Mara Natalia Gutirrez por su asesoramiento metodolgico no solo en esta
investigacin sino en otros trabajos realizados en el transcurso de mi carrera.
MSc. Rosa Mara por que cmo directora del departamento de Qumica siempre nos
mostr su apoyo, por sus consejos como persona y porque siempre ha credo en
nosotras.
Gracias tambin a los profesores Omar, Alejandro y Cesar Canizales por brindarnos
su ayuda en esta investigacin. MSc. Gerardo Mendoza por instruirme, por sus
consejos, por su cario y por apoyarme siempre.
A mis amig@s y dems personas, por sus palabras de nimo, sobre todo a Irvin
Alemn por su tiempo y a mi compaera de tesis mi hermana, mi amiga Kiara Montiel
porque a pesar de los obstculos no nos dimos por vencida.
Leticia del Carmen Romero Castro

ii

FACULTAD DE CIENCIAS E INGENIERA
DECLARACIN DE AUTENTICIDAD
Kiara Yanibeth Montiel Centeno y Leticia del Carmen Romero Castro, con nmero de
carnet 10-04505-6 y 10-04398-9, respectivamente; estudiantes de la Universidad
Nacional Autnoma de Nicaragua, Managua (UNAN-Managua), al haber cursado y
aprobado el pensum de la carrera Licenciatura en Qumica Industrial, declaramos en
honor que el trabajo monogrfico titulado: Obtencin de bioetanol a partir de la
coronta (olote) del maz variedad HS-5, por el mtodo de Hidrlisis cida diluida-
fermentacin separada, laboratorios de Qumica UNAN-Managua, I-II semestre
2015, escrito aqu es de nuestra autora, no ha sido previamente presentado por
ningn otro autor con o sin nivel acadmico o profesional y hemos consultado y citado
las referencias bibliogrficas que se incluyeron en el documento.
___________________________ _________________________
Kiara Yanibeth Montiel Centeno Leticia del C. Romero Castro

Bra. Aspirante al ttulo Lic. Qumica Bra. Aspirante al ttulo Lic. Qumica
Industrial Industrial
Managua, Noviembre del 2015

iii
OPININ DEL TUTOR Y ASESOR METODOLGICO
Managua, Noviembre de 2015
MSc. Rosa Mara Gonzlez

Dir. Dpto. de Qumica
UNAN-MANAGUA
El trabajo realizado por las Bachilleres Kiara Yanibeth Montiel Centeno y Leticia del
Carmen Romero Castro, titulado Obtencin de bioetanol a partir de la coronta (olote)
del maz variedad HS-5, por el mtodo de hidrlisis cida diluida- fermentacin
separada, laboratorios de Qumica UNAN-Managua, I-II semestre 2015, para optar al
ttulo de Licenciatura en Qumica Industrial, se ha llevado a cabo con autonoma
investigativa, iniciativa y liderazgo.
Cabe mencionar que esta investigacin dar pauta a continuar en el campo de fuentes
alternas de energa, prioridad indispensable ante el agotamiento del recurso fsil y
contaminacin desproporcionada, adems abrir las puertas a otros temas
relacionados a la industria energtica, basada en el aprovechamiento de los residuos
agroindustriales. Adems es la base para la innovacin de nuevos proyectos de inters
nacional.
Por tanto hacemos constar que las Bras. Montiel y Romero, han realizado esta
investigacin, fortaleciendo sus habilidades de anlisis, adems de invertir recursos
econmicos y horas de trabajo. Por tanto avalamos a las Bras. antes mencionadas
para que realicen los trmites de presentacin y defensa del trabajo.
Sin ms le saludamos cordialmente.
PhD. Danilo Lpez Valerio. Ing MSc. Mara Nathalia Gutirrez

Tutor Asesora

iv
RESUMEN
Palabras Claves: coronta, hidrlisis, azcares reductores, fermentacin,

bioetanol.
El presente trabajo tuvo como objetivo obtener bioetanol a partir de la coronta del
maz variedad HS-5, sta fue recolectada en la finca Montiel, municipio de El Jcaro,
departamento de Nueva Segovia, posteriormente se caracteriz mediante anlisis
fisicoqumico, siguiendo los procedimientos de la norma TAPPI. La coronta presenta
en su composicin 0.2020 % de humedad, 0.1140 % de cenizas, 0.3627 % de
extractivos totales, 36.7052 % de celulosa, 19.7272 % de lignina y 43.5676 % de
hemicelulosa respectivamente.
La implementacin del diseo experimental Taguchi con arreglo ortogonal L8,

permiti la combinacin y optimizacin de las variables en los procesos de hidrlisis y
fermentacin, teniendo como resultado: 20 gramos de celulosa, 7% concentracin de
cido sulfrico, 1.5 horas y 100 0C para el tiempo y temperatura en la hidrlisis. El
efecto sobre la variable repuesta fue 38 % de azcares reductores totales cuantificados
mediante el mtodo espectrofotomtrico DNS.
As mismo, en la etapa de fermentacin se optimizaron las variables masa de

levadura 12% y tiempo de fermentacin 8 das, generando el producto final Bioetanol
que se identific mediante anlisis Cromatogrfico, las variables repuestas fueron de
24 % de conversin y 30 % de rendimiento para el proceso general.

v
ABSTRACT
Keywords: cob, hydrolysis, reducers sugars, fermentation, ethanol
The goal of This reseach was to obtain bioethanol from the cob corn type HS-5.
This type of cob corn was collected on Montiel farm which is located in El Jcaro
municipality Nueva Segovia deparment. Then, it was characterized through a
physicochemical taking into account the procedure of TAPPI. Each cob corn contains
0.2020% of moisture, 0.1140 % of ash, 0.3627 % of extracts, 36.7052 % of cellulose,
19. 7272 % % and 43.5676 % of lignin and respectively hemicellulose.
The implement of the experimental design in accordance with L8 orthogonal

Taguchi allowed the combination and optimization of the variables in the hydrolysis and
fermentation process; getting as a result 20 grams of cob corn, 7 % sulfuric acid
concentration, 1.5 hours and 100 0C for time and temperature hydrolysis. The effect on
response variable was 38 % of the total reducing sugars quantified through the
spectrophotometric DNS method.
Similary, in the fermentation stage the variables were optimzad yeast dough 12
% and fermentation time 8 days. As a result, it was obtained the final product bioethanol
which was identified through the chromatographic analysis; the variables responses
were 24 % of conversion and 30 % of yield overall process.

vi
CAPTULO I:
ASPECTOS GENERALES
1.1 INTRODUCCIN
La dependencia y uso irracional de los combustibles fsiles, se han convertido

en temas de preocupacin a nivel mundial, dado que estos son recursos no renovables
tendientes a agotarse, adems los precios de las tecnologas de extraccin son altos,
de igual forma los precios son voltiles en el mercado internacional y la contaminacin
ambiental provocada por los gases de efecto invernadero es indiscriminada.
Ante tal situacin, la comunidad cientfica busca alternativas para solucionar esta
problemtica, mediante el uso de materias primas agroindustriales para la produccin
de biocombustibles. Cabe mencionar que Nicaragua, caracterizado por ser un pas
agroindustrial genera toneladas de diversos residuos sin valor agregado. Tal es el caso
de la coronta (olote) de maz que se ha utilizado nicamente como combustible
artesanal.
Por lo tanto, en esta investigacin se presenta la alternativa de obtener bioetanol

a partir de la coronta de maz variedad HS-5, mediante el mtodo de hidrlisis cida,
fermentacin separada, que consiste en el uso de cido sulfrico para la destruccin
del material lignocelulsico. El procedimiento a seguir desde la primera etapa es el
siguiente: seleccin y recepcin de materia prima, lavado, secado, pesado, reduccin
del tamao, tamizado, hidrlisis cida, neutralizacin, filtracin, fermentacin,
desgasificacin, destilacin y almacenamiento.
Mediante el diseo de experimento Taguchi, se controlaron las condiciones

ptimas de las variables operacionales en dicho proceso, siendo estas: masa de
coronta 20 g, concentracin de H2SO4 7 %, temperatura 100 0C, tiempo de hidrlisis
1.5 h, masa de levadura 12 % y tiempo de fermentacin 8 das, teniendo como variable
repuesta 24 % de Conversin, con lo que se produciran 5, 783, 834.59 barriles anuales
de bioetanol, capaz de cubrir la demanda energtica anual de Nicaragua en 53%,
favoreciendo la economa nacional con mejoras en las divisas e incremento en el
producto interno bruto.
Bra. Kiara Montiel, Bra. Leticia Romero 1

1.2 OBJETIVOS
1.2.1 Objetivo general
Obtener Bioetanol a partir de la coronta (olote) del maz variedad HS-5, por el
mtodo de hidrlisis cida diluida - fermentacin separada, laboratorios de
Qumica UNAN-Managua, I-II semestre 2015.
1.2.2 Objetivos especficos
1. Caracterizar la coronta del maz variedad HS-5 mediante anlisis fsico-qumico

de humedad, cenizas, extractivos totales, pH, porcentaje de celulosa, lignina y
hemicelulosa, para la obtencin de bioetanol.
2. Determinar las condiciones ptimas de las variables operacionales, masa de

coronta, concentracin de cido Sulfrico, temperatura, tiempo de hidrlisis,
cantidad de levadura saccharomyces cerevisiae y tiempo de fermentacin, en el
proceso de hidrlisis cida diluida - fermentacin separada para la obtencin de
bioetanol.
3. Identificar el etanol obtenido en el proceso de fermentacin mediante el anlisis

cromatografa de gases.
4. Calcular el porcentaje de conversin y rendimiento del bioetanol obtenido a partir

de la coronta del maz variedad HS-5.

1.3 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
En la actualidad, Nicaragua presenta serios problemas econmicos, en relacin

a los precios transitorios de los combustibles fsiles, causados por el desajuste entre
la oferta y la demanda, especulacin financiera y condiciones geopolticas y militares
de los pases productores del petrleo, dado que estos tienen el dominio de los
precios. Por lo tanto los pases dependientes, deben regirse de acuerdo al mercado
internacional con el fin de solventar sus necesidades.
Cabe sealar que el petrleo es un recurso no renovable, tendente a agotarse

por el incremento de la demanda de los pases industrializados y nuevas economas
emergentes, lo que conlleva a polmicas financieras y volatilidad en los precios del
crudo y sus derivados. Adems el uso irracional de los combustibles fsiles causa
daos en la salud y al medio ambiente, por las emisiones de gases de combustin,
que contribuyen al efecto invernadero, lluvia cida, daos en la capa de ozono y al
aumento del calentamiento global.
Hoy da la comunidad cientfica trabaja en la sustitucin parcial del petrleo y

sus derivados. Tal es el caso del bioetanol obtenido a partir de materias primas con
alto porcentaje de celulosa y azcares como los residuos agroindustriales del maz,
caa de azcar, paja de trigo, entre otros.
En relacin con el sector agrcola, Nicaragua se ha visto afectada por la

generacin de cantidades de biomasa sin valor agregado. Tal es el caso del olote de
maz que se estima aproximadamente en 3, 207,050 toneladas producidas anualmente
(MAGFOR, Censo Agrcola 2014/2015, 2015), por lo tanto es importante considerar la
transformacin de sta en bioetanol como alternativa para la generacin de
combustibles sustituto de la gasolina usado en un porcentaje 90/10, 90/5.

1.4 JUSTIFICACIN
Basados en la idea de sustituir combustibles fsiles como fuente de energa

verde, surge la utilizacin de nuevas materias primas tales como los residuos
agroindustriales, que no compitan con la seguridad alimentaria, para la transformacin
en combustible como, el bioetanol, surgiendo como base energtica de la
bioeconoma, el cual brinda parcialmente independencia en la produccin de energa,
lo cual no ocurre con el petrleo, materia prima no disponible en la mayora de los
pases del mundo.
Por otro lado, el uso de los residuos del maz como el olote (coronta), le dar
valor agregado a esta materia prima que durante aos no ha sido utilizada, ms que
para combustible en los hogares, donde la generacin de utilidades es mnima en
comparacin con la alternativa de producir bioetanol, adems contribuye a disminuir la
contaminacin ambiental generada por la combustin de estos.
En lo que se refiere a la seleccin de la coronta variedad HS-5 como parte de los

residuos del maz que se generan en el ciclo agrcola, se ha considerado la opinin de
productores, con respecto a la utilidad de los residuos, tales como el aprovechamiento
de la tuza, en alternativa para alimentar el hato ganadero y la elaboracin de
artesanas, as mismo la caa distribuida en la parcela, se transforma en abono
orgnico. Con respecto a la variedad es una de las que ha tenido mayor auge
agronmico en los ltimos aos por los altos rendimientos.
El desarrollo de esta investigacin es necesario e importante, porque dar valor

agregado a una materia prima residual utilizndola para la obtencin de
biocombustible amigable con el medio ambiente. Este proceso tecnolgico requiere de
equipos de menor costo en comparacin con los utilizados en la explotacin petrolera.
La produccin de bioetanol mejorar el nivel econmico del pas generando empleos
y ahorrando divisas que pueden destinarse a diversos proyectos econmicos y
sociales.

1.5 ANTECEDENTES
Los estudios cientficos realizados a los residuos agroindustriales del maz (Zea
Mays L) para la obtencin de bioetanol estn limitados, las investigaciones se han
centrado al anlisis de otras biomasas como cscaras de frutas, paja de trigo, bagazo
de caa, aserrn, entre otros. Es importante mencionar, que algunos pases
industrializados como Estados Unidos, Brasil y la India han iniciado operaciones en
industrias dedicadas a la produccin de bioetanol obtenido a partir del grano de maz,
pero sin considerar la seguridad alimentaria.
En el 2010 el grupo de investigadores: Clarense S. Yah, Sunny E. Iyuke,

Enmanuel I. Unuabonah, de la universidad de Witwatersrand Sudfrica, escuela de
ingeniera qumica y metalurgia trabajaron en Optimizacin de Temperatura para
la produccin de Bioetanol de olote de maz usando levaduras mixtas. Los
resultados obtenidos sealaron que la temperatura y tiempo ptimo para la
fermentacin de azcares fue aproximadamente de 25 0C y 50 h, y con la combinacin
de (S. Cerevisiae y P. Stipitis) se obtuvo 1 mL de Bioetanol por 11.9 mg de masa
alimentada (Yah, Sunny, & Unuabonah, 2010).
Tres aos ms tarde, Bellido Dez Carolina, trabaj en la universidad de

Valladolid Espaa, escuela Ingeniera Industrial, en la tesis doctoral titulada
Obtencin de bioetanol 2G a partir de hidrolizados de paja de trigo;
fermentacin de los penta y hexa carbohidratos con pichia stipitis. Encontr a
partir de la paja de trigo, segn la secuencia pretratamiento (explosin de
vapor/ozonlisis), sacarificacin y fermentacin separadas (SHF) rendimientos en
etanol sobre el terico de 86,9% y 79,7 % y productividades de etanol en 120 horas de
0,11 g/Lh y 0,10 g/Lh para el material explotado y ozonizado (Bellido, 2013).
En 2013 los investigadores: Jhon Alexander Crdoba, Eduardo Salcedo, Ramn

Rodrguez y Ezequiel Delgado, de la universidad de Guadalajara-Mxico, estudiaron
Caracterizacin y valoracin qumica del olote. Siguiendo las siguientes normas

de la Technical Assosiation of the pulp and paper Industry (TAPPI) encontraron: 2.0 %
de Cenizas (TAPPI 211, 1993), 15.8 % de lignina klason (TAPPI 222, 1998), 45 % de
hemicelulosas (Timell, 1961) y 50 % de -Celulosa (TAPPI 9m, 1954) (Crdoba,
Salcedo, Rodrguez , & Delgado, 2013).
En el mismo estudio, tambin se determin el contenido de carbohidratos a partir

de hidrolizados hidrotrmicos de hemicelulosa mediante cromatografa HPLC, con una
columna Aminex HPX-87P, 300 mm x 7.8 mm. En el proceso hidroltico se trataron
muestras de 0.5 g de olote a 160, 230 y 300oC en tiempos de 30, 45 y 60 min. Los
resultados de las lecturas fueron: glucosa (41%), xilosa (35%) y en menor proporcin
arabinosa (Crdoba, Salcedo, Rodrguez , & Delgado, 2013).
En el mismo ao, los investigadores Juliana da Silva, Rubens Chaves y Vanessa

Cunha, de la Universidad Federal de Viosa Minas Gerais Brasil, trabajaron en:
Extraccin, Adicin y Caracterizacin de hemicelulosas de mazorcas de maz
para desarrollo de las propiedades de los papeles. La composicin de
carbohidratos de coronta se estableci mediante cromatografa de intercambio
aninico de alta resolucin, despus de hidrlisis con H2SO4 al 3% en autoclave
(100 C, 3 h). Se encontr Glucosa 47.1 %, Xilosa 28 %, Arabinosa 5.4 %, Galactosa
2.2 % y Manosa 0.2 % (Da Silva, Chaves , & Cunha, 2013).
En Nicaragua los registros de investigaciones que sealan la temtica en la

obtencin de bioetanol estn limitados, excepto la empresa Nicaragua Sugar Estates
Limited (NSEL) del ingenio San Antonio, que se dedica a la produccin y exportacin
de bioetanol a partir de jugo de caa de azcar y melaza, desde 2006, actualmente
cuenta con capacidad instalada de produccin de 340,000 Litros al da (Pellas, 2014).

CAPTULO II:
MARCO DE REFERENCIA
2. MARCO DE REFERENCIA
2.1 Origen
La historia del maz se pierde en el tiempo, desde cundo se ha cultivado y cul

es su origen, son temas sujetos a especulacin, lo que confirman los investigadores
es que la planta de maz es conocida desde tiempos antiguos y es originaria de
Amrica de donde se considera nativa, algunas referencias que evidencian la
antigedad de la planta se sustentan en descubrimientos arqueolgicos encontrados
en Mxico, como el descubrimiento de mazorcas de maz de dos centmetros de
longitud a la que se le atribuye antigedad de 5 mil aos y polen fosilizado con una
edad de 80 mil aos (Beadle, 2000).
Se han mencionado dos lugares como posible origen del maz, estos son: a) Los
valles altos del Per, Ecuador y Bolivia, b) La regin Sur de Mxico y Amrica Central,
segn (Valvoliv & Spender , 2000) sealan como centro primario las reas de Mxico
y Centro Amrica y como secundario Brasil, Per y Bolivia. Contrario a esto (Reaves,
2001) considera que los centros primarios estn en Sur Amrica y los secundarios en
Mxico y Centro Amrica.
En el marco regional, no se encontraron datos que muestren el origen del maz

en Nicaragua, pero si se encontraron datos que hacen referencia al mejoramiento de
este cultivo, los cuales muestran que a partir de los aos cincuenta se comienza a
experimentar en el cultivo para su manejo agronmico por su importancia en la dieta
nacional (Alvarado, 2003).
Los datos que reporta el origen del maz variedad HS-5 estn limitados, lo que
se sabe hasta ahora es que esta variedad es un hbrido cultivado por primera vez en
Guatemala y luego fue distribuido a los pases Centro Americanos destacndose por
tener altos rendimientos en la produccin (Quiroz, 2011).

2.2 Generalidades de la planta del maz (Zea Mays, L)
El maz (Zea Mays, L), es una planta monocotilednea que pertenece a la familia
de las Poceas (Gramneas), tribu Maydeas, a la subespecie Zea. En Nicaragua este
cultivo se siembra todo el ao, en cinco pocas; la primera (Mayo-Junio), postrern
(Julio), postrera (Agosto-Septiembre), apante (Noviembre-Febrero) y riego
(Noviembre-Diciembre) en la etapa postcosecha se obtienen residuos agroindustriales
como el tallo, olote o coronta, hojas, pednculo, eje de espiga y la brctea conocida
como tuza (INTA, 2015).
2.3 Produccin de maz en ciclo agrcola 2014/15
La mayora de los pases a nivel mundial producen maz, por ser un cultivo que
forma parte de la dieta alimentaria, pero hay que tener en cuenta que las producciones
anuales no son constantes por diversos factores como; el clima, plagas, enfermedades
entre otros.
2.3.1 Produccin mundial en el ciclo agrcola 2014/15
A nivel mundial son cinco los pases que alcanzaron la mayor produccin de
maz, en la cosecha 2014/15, a la vanguardia se encontr EE.UU que super a China
con una diferencia significativa del 60 %. En la siguiente tabla se muestran los
principales pases productores del maz a nivel mundial.
Tabla 2.1 Principales pases productores de maz a nivel mundial en el ciclo agrcola
2014/15
Principales productores (Miles de T.M)1
EE.UU China Brasil U. Europea Ucrania
1 2 3 4 5
361,091,000 215,500,000 75,000,000 74,160,000 28,450,000
Fuente: (Bonilla, 2015)
1 (T.M) Toneladas Mtricas

2.3.2 Produccin de Centroamrica en el ciclo agrcola 2014/15
A nivel centroamericano, el Salvador obtuvo la mayor produccin de maz en la

cosecha 2014/15, con una diferencia de 1% con relacin a Guatemala que obtuvo el
segundo lugar, en tanto Nicaragua, tuvo una produccin baja con una diferencia
notable de 13.5%, dato que se explica por la afectacin fenmeno del nio el cual
provoc la sequa y la prdida de miles de hectreas, tal produccin se muestra en la
tabla 2.2 (FAO, 2015).
Tabla 2.2 Produccin de maz en Centroamrica en el ciclo agrcola 2014/15

Principales productores (quintales)
Salvador Guatemala Nicaragua Honduras Costa Rica
1 2 3 4 5
20,000,000 19,000,000 2,700,000 2,000,000 1,985,457
Fuente: (FAO, 2015)
2.3.3 Produccin de maz en Nicaragua, ciclo agrcola 2014/15
Segn, el censo que realiz el ministerio Agroforestal (MAGFOR) por cada regin
del pas, en rea de siembra de primera, se mostr que la regin atlntica obtuvo los
mayores rendimientos de produccin, seguido por la regin norte central, quedando
en ltimo lugar la regin del pacfico, tal como se muestra en la tabla 2.3.
Tabla 2.3 Produccin de maz en Nicaragua, ciclo agrcola 2014/15

Regiones rea (mz) Produccin (qq)
Pacfico 12, 954 745,615
Norte Central 22,330 958,485
Atlntico 20,941 995,900
Total del pas 916,225 2,700,000
Fuente: (MAGFOR, 2015)
Se observa en la tabla 2.3 las variaciones en cuanto a la produccin de una regin

con otra. En Anexo 1 se presenta la aptitud de siembra por regin y poca del ao.

2.4 Generalidades de la variedad de maz HS-5
La variedad de maz HS-5 es el hbrido con mayor auge agronmico actual en

Nicaragua, por los beneficios que ofrece al agricultor, por ejemplo, el rendimiento
marca la tendencia para la eleccin de esta semilla, as tambin la resistencia a plagas
y enfermedades. En Anexo 2 se presenta comparacin con otras variedades
nacionales.
2.4.1 Factores edafoclimticos para el cultivo de maz variedad HS-5

2.4.1.1 Adaptacin y suelo
Se siembra en latitudes que oscilan desde los 55 norte a los 40 sur y alturas
entre 0 y 1,800 metros sobre el nivel del mar. Es un cultivo intermediario de 110 a 115
das para cosecharlo (INTA, 2015). El maz HS-5 se adapta a una amplia variedad de
suelos donde puede producir buenas cosechas si se emplean tcnicas de cultivo
apropiadas. En general, los suelos idneos son los de textura media (francos), frtiles,
bien drenados, profundos y con elevada capacidad de retencin para el agua (Flores,
2012).
El maz HS-5 crece bien en suelos con pH entre 5.5 y 7.8 fuera de estos lmites
suele aumentar o disminuir la disponibilidad de ciertos elementos y se produce
toxicidad o carencia. Cuando el pH es inferior a 5.5 a menudo hay problemas de
toxicidad por aluminio y manganeso, adems carencia de fsforo y magnesio; con un
pH superior a 8 (o superior a 7 en suelos calcreos) tiende a presentarse carencia de
hierro, manganeso y zinc. Los sntomas en el campo de un pH inadecuado, en general
se asemejan a bajos rendimientos de la produccin (Flores, 2012).
2.4.1.2 El agua
La demanda de agua para este cultivo es de 500 a 800 mm de lluvia, bien

distribuidos para un crecimiento normal. La reduccin del rendimiento de grano en los

primeros 30 das depende de diferentes variables, germinacin y humedad superficial

del suelo. Las etapas crticas del cultivo de maz van de la floracin masculina a la
etapa de grano lechoso. En esta etapa, la mazorca se puede perder por
marchitamiento de la planta y falta de agua hasta en 50% del potencial de rendimiento
(INTA, 2010).
2.4.1.3 El Clima
El maz HS-5 requiere una temperatura de 25 a 30 C, necesita bastante

luminosidad, en climas hmedos su rendimiento es ms bajo. Para que se produzca
la germinacin en la semilla, la temperatura del suelo debe situarse entre los 15 a 20
C. A partir de los 30 C pueden aparecer problemas serios debido a mala absorcin
de nutrientes minerales y agua. Las plantas de la variedad HS-5 presentan buena
superficie foliar que se traduce en una gran capacidad para la fotosntesis, pero
tambin para la evapotranspiracin, por eso es una planta muy sensible a altas
temperaturas y a la falta de humedad en el suelo (Ortas, 2008).
2.4.2 Mtodos de siembra
La variedad de maz HS-5 se puede sembrar en cinco pocas al ao: la primera,

postrern, postrera, apante y Riego, en cada una de estas se pueden implementar los
mtodos de siembra manual, mecanizada o con traccin animal y traccin motriz
(Anexo 3).
2.4.3 Crecimiento y fases de desarrollo
2.4.3.1 Fase vegetativa
Las semillas de la variedad HS-5 germinan y se forman las plntulas; se expande

el follaje e inicia la capacidad fotosinttica del cultivo, la cual controla la produccin de
biomasa y el tamao final de la mazorca, que ocupa el 40% del peso total (INTA, 2010).

2.4.3.2 Fase reproductiva
El perodo va de uno o dos das, entre la emisin de polen y la salida de los

estigmas en la floracin, ambos aspectos hacen que la polinizacin y la produccin de
polen sea sensitiva al estrs ambiental (INTA, 2015).
2.4.3.3 Fase llenado de grano
Comienza despus de la polinizacin y determina el peso final del grano de la

mazorca. El peso del grano est relacionado con la duracin y la cantidad de radiacin
interceptada durante esta fase y es afectada por falta de agua. El llenado tiene tres
fases:
1. Fase de arresto el grano comienza a formarse, dura de 12 a 20 das

2. Fase lineal de acumulacin de materia seca, tiene una duracin de 35 das
3. Fase de acumulacin lenta, tiene una duracin de 7 a 14 das y concluye con la
aparicin de la capa negra y la madurez fisiolgica (INTA, 2015).
2.4.4 Descripcin botnica
2.4.4.1 Taxonoma
Tabla 2.4 Taxonoma de la planta de maz
Taxonoma de la planta maz (Zea Mays, L)

Reino Plantae
Sub Reino Tracheobionta
Clase Liopsida
Sub Clase Commelinidae
Orden Poales
Familia Poaceae
Sub Familia Panicoideae
Tribu Maydeae
Gnero Zea
Especie Mays
Fuente: (Valladares, 2010)

2.4.4.2 Morfologa
La forma general de la planta es inconfundible y est constituida por un eje central

o tallo, sostenida por un sistema radicular fibroso y compacto, del eje pueden
producirse brotes basales, presenta ramificaciones laterales que forman la mazorca la
cual constituye la inflorescencia masculina y en la parte superior se encuentra
dispuesta la espiga siendo esta la inflorescencia femenina (Salgado & Murillo, 2012)
en Anexo 4 figura 4.1 se observa imagen con la morfologa completa de la planta de
maz.
Sistema radicular
El sistema radicular para la variedad HS-5 es abundante y fibroso, est

constituido por tres tipos de races; las seminales que tienen su punto de partida en la
misma semilla, son temporales y desaparecen al ser reemplazadas por las
permanentes; siendo estas las responsables de la nutricin de la planta durante todo
su ciclo vegetativo, las races principales, laterales y capilares, son unicelulares de vida
corta y no reemplazables, finalmente existe un sistema de races areas que surge de
los lados del tallo ms cercanos a la superficie del suelo, este se conoce con el nombre
de races nodales, emergen despus del surgimiento de la panoja (Bonique, 2012).
Tallo
El tallo es el eje central de la planta, son cilndricos en la base y ovalados hacia

el pice, su longitud va desde 0.5 hasta los 3 metros, un tamao ptimo con resistencia
al vuelco. Es importante mencionar que el tallo est formado por una sucesin de
nudos y entrenudos que puede tener entre 8 y 24, en direccin opuesta y alterna se
encuentran las yemas, cada yema representa potencialmente una mazorca de la que
normalmente para la variedad HS-5 se desarrollan de dos a tres dando como
resultados mayores rendimientos del grano entero y de residuos agroindustriales
(Sandoval & Alvarado, 2011).

Hojas
Surgen del nudo y envuelve al tallo, est compuesta por: la vaina que envuelve
el entrenudo del tallo, la lgula que es una estructura en forma de collar y ejerce funcin
de proteccin, se encuentra situada entre la vaina y la lmina donde esta puede medir
hasta 1.5 m de longitud y 0.1 m de ancho. En anexo 4 figura 4.2 se muestra la hoja.
Adems estn dispuestas a lo largo del tallo en posicin alterna, son ssiles y de
forma lanceolada. La primera hoja que emite la planta es en forma redondeada y no
se considera una hoja verdadera (Conde, 2005).
La variedad HS-5 tiene de 5-15 hojas, pero a medida que esta crece puede perder
de tres a cinco por diversos factores, como enfermedades foliares las cuales se
presentan de la parte baja hacia el pice de la planta, provocando bajos niveles de
azcar, seguido de la susceptibilidad de la planta (Rojas, 2003).
Flores
La planta de maz es monoica y tiene sus flores dispuestas en inflorescencias

separadas, la masculina o panoja y la femenina o espiga. Las flores masculinas tienen
una apariencia ms o menos compacta, segn esta variedad, se encuentra ubicada
en la parte superior del tallo y aparecen antes que las femeninas, en cambio las
femeninas se encuentran dispuestas sobre un eje esponjoso que forma la espiga.
La panoja est formada por un raquis central y presenta ramificaciones, donde

estn dispuestas en pares las espiguillas, una es ssil y la otra pedicelada. Antes de
aparecer la panoja, la ltima hoja toma una posicin vertical, cada panoja bien
desarrollada puede producir de 2 a 5 millones de granos de polen.
La inflorescencia masculina (mazorca) es una ramificacin lateral modificada,

compuesta por un raquis central esponjoso, donde estn insertas las flores femeninas.
Al momento de la fertilizacin solo una es fecundada y la otra es abortada. De cada
vulo, se proyecta un estigma, los cuales aparecen frescos hasta el momento de la

fecundacin que se marchitan y se desprenden de la mazorca en formacin, cada

mazorca bien formada puede producir de 600-1000 granos. La mazorca est formada
por tallo corto lateral que presenta una zona de nudos y entrenudos de donde surge la
brctea o cobertura de la mazorca (Bucardo, 2008).
Fruto
El fruto o mazorca est constituido por cuatro partes: pednculo, brcteas, olote
(coronta) y granos o caripsides.
1. Pednculo: tambin conocido como pedicelo, es lo restante del rgano de

adhesin del grano de maz con el olote o coronta, constituye aproximadamente el 1
% del peso seco del grano. Est compuesto de clulas en forma de estrellas,
arregladas en una estructura esponjosa bien adaptada para una rpida absorcin de
humedad. Entre la punta y la base del germen hay un tejido azul conocido como hilar,
que aparentemente funciona como mecanismo de sellado cuando el grano llega a su
madurez fisiolgica (Trevor, 2000) (Anexo 4 figura 4.3).
2. Brcteas: Es la envoltura del fruto tambin conocida como tuza, de color

amarillento y consistencia fibrosa, la mazorca de maz variedad HS-5 contiene hasta
cincuenta unidades de tuza, que miden 12 cm de ancho, 22 cm de largo y 0.1 mm de
dimetro, esto favorece el grano y la coronta de la pudricin por exceso de agua (Anexo
4 figura 4.4).
3. Coronta: Es el centro de la mazorca, tambin conocido como olote, como puede

observarse en la imagen 2.1, est formado por la mdula
(A) de color blanco, su consistencia no es tan rgida y es
rica en azcares, el raquis (B) est despus de la mdula,
su consistencia es rgida y fibrosa, el color de esta variedad
es blanco, contiene celulosa, hemicelulosa y lignina, (C) es
Figura 2.1 Estructura de la la coronta a la que se suma A y B, luego est (D) que es
coronta de maz toda la mazorca.

4. Granos o caripsides: Se encuentran a razn de 600 1,000 unidades por

mazorca, dispuestos en hileras en la coronta, con un promedio de 14 y pueden ser
dentados o semi dentados, tambin cristalinos u opacos para esta variedad. Estn
constituidos por cuatro partes principales que son el endospermo, pericarpio (cscara),
germen y pilorriza (Anexo 4 figura 4.6).
2.4.5 Requerimientos nutricionales del maz
El maz de variedad HS-5 es una planta con capacidad de crecimiento rpido y

alta produccin que requiere cantidades considerables de nutrientes. En el cuadro
siguiente se presentan las necesidades de algunos elementos nutritivos para lograr
altos rendimientos de grano entero, as tambin, residuos agroindustriales
aprovechables como la coronta.
Tabla 2.5 Elementos nutritivos necesarios para el maz

Elemento Kg/Ha
2
Nitrgeno 187
2
Fsforo 38
2
Potasio 192
2
Calcio 38
2
Magnesio 44
2
Azufre 22
Zinc 0.3
Boro 0.2
Hierro 1.9
Magnesio 0.3
Molibdeno 0.001
Fuente: (Flores, 2012)
2 Nutrimentos que se absorben en mayores cantidades (macroelementos) y elementos secundarios.

La demanda de Nitrgeno, Fsforo, Azufre y en general de los macroelementos

para la planta, est en dependencia de la edad, tambin de la cantidad que se aplique
en funcin de la fertilidad que tenga el suelo, ligado a las veces que han sembrado y
aplicaciones anteriores (Anexo 5).
2.4.6 Malezas que afectan el cultivo de maz
Una maleza es cualquier planta que constituye un peligro, molestia o causa daos
al hombre, animales o, en este caso, al cultivo de maz. El desarrollo del cultivo de
maz en los primeros 30 das es crtico, por lo que se debe asegurar que crezca libre
de la competencia de malezas, pues se estima que stas son causantes del 10 al 84%
de la reduccin en su rendimiento. Es importante distinguir entre malezas de hojas
anchas y gramneas porque difieren en su reaccin a herbicidas y mtodos de control.
En el cuadro 6.1 Anexo 6 se muestran algunas malezas que afectan al cultivo de maz
y los mtodos para combatirlas (Flores, 2012).
2.4.7 Insectos y plagas
Desde el momento de la siembra, el maz est expuesto a los ataques de

numerosas insectos y plagas, entre los factores principales que favorecen o dificultan
la aparicin de plagas y enfermedades en el cultivo estn: condiciones de clima,
labores preparatorias del terreno, rotacin de cultivos y el control de malas hierbas,
entre otros.
La variedad de maz HS-5 en su caracterizacin se considera que es tolerante a

la reaccin ante las plagas, sin embargo existe diversidad de insectos y plagas que
atacan el cultivo; as se tiene el grupo de los gusanos cortadores, barrenadores, etc y
son los que causan ms dao; luego estn los gusanos, gallinas ciegas, barrenadores
del grano y gorgojos. en orden de importancia, les sigue el grupo de insectos que
actan como vectores de virus, microplasmas, bacterias y hongos; en algunas zonas
del pas pueden provocar la prdida completa del cultivo, (Anexo 7) (Mendoza, 2012).

2.4.8 Enfermedades
La variedad de maz HS-5 se ve principalmente afectada por enfermedades

foliares que generalmente aparecen despus del periodo de fructificacin, dentro de
estas se encuentran: la roya comn, mancha foliar y mancha caf, (Anexo 8). Por otro
lado, si se hace referencia a la planta en general, la enfermedad a la que esta variedad
es susceptible, es al achaparramiento, de tal forma que si la planta es pequea la
mazorca y el olote materia prima para la obtencin de bioetanol tambin se ver
afectados por el tamao.
2.4.9 Cosecha
En Nicaragua los agricultores implementa dos mtodos para preparar la mazorca

antes del corte con fines de reducir la humedad del grano, primero doblan la mitad de
la planta y despus cortan aproximadamente la mitad de la misma, dejando 0.20 m
entre la mazorca y el extremo final, prctica conocida como despunte, con el objetivo
de reducir porcentaje de humedad en la mazorca, lo que permite el desgrane y
almacenamiento sin causar deterioro en su calidad. En la mayora de los casos, el
maz se deja doblado en el campo por ms tiempo, especialmente cuando el clima
favorece el secado de grano.
Para realizar la prctica de dobla y corte denominada tapisca puede variar

dependiendo de las condiciones climticas de cada localidad, del ciclo vegetativo del
cultivo, como del establecimiento innato del cultivo de relevo. Por lo general entre los
110 a 115 das del cultivo. La cosecha se debe realizar lo antes posible, despus de
la madurez fisiolgica, para evitar prdidas por pudricin, causadas por hongos;
infestacin por plagas (gorgojos, termitas, etc) o cualquier otro factor que perjudique
la produccin.
En el momento de la cosecha, los agricultores sacan de forma manual la

mazorca, reuniendo varios grupos en toda la parcela. En la planta quedan algunos

residuos como la caa, hojas y brctea. Los granos se retiran de la mazorca

manualmente o mecanizado. En el Anexo 9 seccin 9.1 se muestran algunas
caractersticas que debe tener la mazorca para la recoleccin mecanizada y en la
seccin 9.2 se muestran detalles de la extraccin del grano manual y mecanizada.
2.5 Residuos agroindustriales generados en la postcosecha del maz
Se conoce como residuos agroindustriales del maz a los desechos que se

generan a partir de la produccin de dicho grano, siendo estos: coronta (olote), brctea
(tuza), pednculo, tallo y hojas. Al final de la produccin el punto de inters para los
agricultores es el grano, pero la biomasa no tiene valor agregado, en la actualidad, la
brctea y los restrojos que quedan dispersos en la parcela son utilizados como
alimento bovino, sin embargo, es importante sealar que esto no provee las
condiciones nutricionales ideales para el hato ganadero.
As mismo de un 100 % de coronta generada, nicamente el 10 % se ha utilizado

como combustible en los hogares, donde las mujeres campesinas recogen la coronta
en la postcosecha y la almacenan para todo el ao, el otro 90 % tiene dos destinos
finales, el primero es combustin a cielo abierto en el campo si el agricultor implementa
la tcnica de limpieza y quema, en segunda instancia est la descomposicin orgnica
(Salgado S. , 2013).
En consecuencia el residuo coronta se ha convertido en un problema para el

medio ambiente, porque el proceso de combustin a cielo abierto se generan gases
como el CO2 y el CO causantes del efecto invernadero, por otro lado, si no se
implementa la tcnica de quema, al final dejan el residuo para su posterior
descomposicin, la cual tarda hasta tres aos para la humificacin y compostaje, pero
en el transcurso de este tiempo provoca algunas plagas como el gusano y la gallina
ciega que afectan las futuras plantaciones.

Anualmente en Nicaragua se siembran aproximadamente 916,300 mz de maz

de diferentes variedades, cabe sealar que no hay un registro que tipifique la cantidad
de maz de cada variedad sembrada por regin, se conoce que la mayora de los
agricultores prefieren la variedad HS-5 por su alto rendimiento.
En una manzana de terreno, se siembran como mximo 40,000 plantas de maz,

de las que se obtienen 1.1 toneladas de grano y 17.5 toneladas de residuo seco,
incluyendo hojas, brctea (tuza), coronta, pednculo y tallo. La diferencia en grano
producido con residuo generado es notable con 63% respetivamente (Salgado S. ,
2013).
Con respecto a la coronta (olote) del maz, este representa el 15 % del peso total
de la biomasa generada para la variedad HS-5. Cada planta tiene hasta tres mazorcas
e igual unidades de olote, con un peso promedio de 26.2 g, por lo tanto cada planta
genera 78.6 g, una manzana de siembra equivale a 3.5 toneladas y de manera general
en Nicaragua se generan 3, 207,050 toneladas de coronta por cada ciclo agrcola.
2.6 Estructura y composicin qumica de la coronta del maz
La biomasa o residuo agroindustrial coronta del maz es rico en material

lignocelulsico, biopolmero ms abundante de la corteza terrestre. La estructura y
composicin qumica de los materiales lignocelulsicos son el factor clave que
afecta la eficiencia de la produccin de bioetanol durante los procesos de conversin.
Es importante sealar que la composicin tpica de la biomasa lignocelulsica se
puede definir con una proporcin en peso del 48% C, 6% H y 45% O2, siendo la materia
inorgnica el componente minoritario (Galbe & Salvetti, 2012).
La industria de la produccin del etanol utiliza el trmino biomasa celulsica,

porque es la materia prima para la obtencin de la glucosa de cuya fermentacin se
obtiene el etanol, pero la celulosa no es un material fcilmente accesible como es el

almidn o el azcar, porque se encuentra ntimamente unida a otras materias como

la lignina o las sustancias pcticas.
La celulosa se encuentra en las paredes de las clulas de la coronta,

ampliamente distribuida en el raquis y la mdula. Pero dentro de su composicin
qumica tambin se encuentra el material que no lignifica, estos presentan paredes
pectocelulsicas (Casillas, 2010).
Las paredes lignocelulsicos son estructuras de mayor complejidad y difcil

accesibilidad a algunos componentes como se observa en la figura 10.1.1 del anexo
10, estas forman los materiales lignocelulsicos el cual est constituido por los tejidos
del raquis y la mdula de la coronta. Adems presentan una pared celular constituida
por un entramado de microfibrillas de celulosa formando capas recubiertas de
hemicelulosa y sobre las que se deposita la lignina.
2.6.1 Componentes del material lignocelulsico de la coronta del maz
Los componentes de los materiales lignocelulsicos se clasifican en:

componentes estructurales y componentes secundarios.
2.6.1.1 Componentes estructurales
Los componentes estructurales forman tres polmeros, la celulosa, la lignina y la

hemicelulosa. Del total de compuestos que forman los materiales lignocelulsicos casi
la mitad son celulosa y un 20 % lignina. Cabe sealar que la unin entre celulosa y
lignina puede producirse generalmente a travs de la hemicelulosa como se muestra
en la figura 10.1.1 del anexo 10. En paredes no lignocelulsicas aparece otro
componente formado por sustancias pcticas (pectina).

Celulosa
La celulosa es un homopolmero lineal de elevado peso molecular y grado de

polimerizacin; entre 200 y hasta 10,000 unidades en estado nativo de -D-
glucopiranosa unidas por enlace glicosdico o de tipo ter entre el carbono 1 y 4 (,
14). As mismo la celulosa es el componente principal de las paredes celulares de
los vegetales y el polmero mayoritario del planeta, tiene una estructura fibrosa, es
blanca, muy estable y resistente al ataque qumico, tambin a la traccin mecnica
(Bidlack, Malonge, & Benson, 2000).
Debido al carcter asimtrico de este enlace, tambin puede considerarse a la

celulosa como un poliacetal del dmero celobiosa (4-O--D-glucopiranosil--D-
glucosa), que no existe de forma natural, solo puede obtenerse por la hidrlisis parcial
de la celulosa. El enlace glicosdico se forma por la reaccin del grupo OH
hemiacetlico del carbono anomrico (el carbn 1) de la -D-glucopiranosa con el
grupo OH del carbono 4 de otra -D-glucopiranosa. Uno de los extremos de cada
cadena presenta en este carbono 1 un grupo aldehdico de carcter reductor, en la
figura 10.1.2 del Anexo 10 se presenta la estructura primaria de la celulosa.
La conformacin piranosa, donde los carbonos y oxgeno son tetradricos y la

forma ms estable es la de silla, presenta los grupos CH2OH, OH y los enlaces
glicosdicos en posicin ecuatorial y los hidrgenos en posicin axial. El hecho de que
los grupos OH salgan lateralmente, permite a la celulosa formar uniones
inter e intramoleculares por puentes de hidrgeno dando lugar a las fibrillas
elementales, figura 10.1.3 en anexo 10.
Las fibrillas elementales o micelas estn formadas entre unas 40 y 100 cadenas
de celulosa donde se presentan zonas con una estructura cristalina, que le confiere a
la celulosa alta resistencia y otras regiones amorfas que le otorgan elasticidad. La
presencia de regiones amorfas en la fibrilla elemental permite mejor penetracin de
reactivos qumicos, por tanto mayor reactividad. Los disolventes penetran mejor en el

material y las enzimas del tipo de las celulosas trabajan mejor si aumenta la proporcin
de estas zonas. A esta prdida de zonas cristalinas y aumento de regiones amorfas se
le suele distinguir como prdida de cristalinidad (anexo 10 figura10.1.4).
Las microfibrillas que forman las paredes celulares de los vegetales y que se
orientan de distinta forma, segn las capas estn formadas a partir de las fibrillas
elementales. Adems, esta estructura que presenta los grupos OH formando puentes
de hidrgeno en estructura con forma de cinta presenta los hidrgenos en su
superficie, resultando hidrofbica como se observa en la figura 10.1.5 del anexo 10.
(Bidlack, Malonge, & Benson, 2000).
Hemicelulosa
La hemicelulosa forma cadenas ramificadas de menor grado de polimerizacin

que la celulosa, por lo tanto no tienen zonas cristalinas. Adems, los puentes de
hidrgeno son menos eficaces, haciendo de la hemicelulosa polisacridos ms
accesibles al ataque de reactivos qumicos. Los monmeros que constituyen la
hemicelulosa son principalmente monosacridos y derivados de las osas como los
cidos urnicos. Los monosacridos que se encuentran principalmente en la celulosa
son cinco: tres hexosas: glucosa, manosa y galactosa y dos pentosas: xilosa y
arabinosa, (anexo 10 figura 10.1.6). (Bidlack, Malonge, & Benson, 2000).
Lignina
La lignina es un polmero aromtico de estructura tridimensional bastante

compleja, muy ramificada y amorfa, formada por la condensacin de precursores
fenlicos unidos por diferentes enlaces, dicho polmero presenta las siguientes
funciones:
Proteger a la celulosa del ataque microbiano

Conferir resistencia e impermeabilidad al material
Mantener unidas las fibras celulsicas

La sntesis de lignina es un proceso de polimerizacin cuyos precursores son los

alcoholes p-hidroxicinamlicos, como se observa en la figura 2.2.
Figura 2.2 Alcoholes cinamlicos
Los alcoholes p-hidroxicinamlicos se distinguen por los sustituyentes del anillo

aromtico, tal que: El alcohol p-cumarlico no presenta sustituyentes del anillo
aromtico y forma las unidades de hidroxifenilo o unidades H. El alcohol coniferlico
con un metoxilo en la posicin tres del anillo aromtico forma las unidades de guayacilo
o unidades G. Por ltimo el alcohol sinaplico con metoxilos en las posiciones 3 y 5
forma las unidades de siringilo o unidades S. (Bidlack, Malonge, & Benson, 2000).
La polimerizacin de la lignina ocurre mediante una etapa enzimtica donde los

alcoholes p-hidroxicinamlicos se oxidan por la accin de peroxidasas en la pared
celular dando radicales fenxido. Cabe sealar que la variedad de enlaces y
estructuras del polmero lignina son debidas a la diversidad de reacciones de
acoplamiento (al azar) entre las distintas formas resonantes de los radicales fenxido.
En los anillos aromticos como en las cadenas proplicas de la estructura de la

lignina se encuentran tres enlaces principales, en la tabla 2.6 se presentan.

Tabla 2.6 Enlaces aromticos en las cadenas polimricas de la lignina
Enlace tipo ter Enlace carbono-carbono Enlace tipo Ester
Forman grupos de Van a conducir a una Se producen en la

tipo no condensado. Son lata condensacin de la cadena proplica y son
las ms frecuentes, el 40- lignina, que no pueden poco frecuentes.
60% de las unidades de producirse en el anillo
lignina estn formadas por aromtico de las unidades
enlace -o-4, (imagen tipo S (por los grupos
10.1.9 en anexo 10) metoxilos). Los ms
frecuentes (5-20%) son las
uniones de los carbonos
de la posicin 5 del anillo
aromtico.
Fuente: estructurada por autoras
2.6.1.2 Componentes secundarios
Son componentes generalmente de menor proporcin y se clasifican en dos

tipos; por un lado componentes de bajo peso molecular, hidrosolubles o extrables en
solventes orgnicos que se denominan extractos y por otro materias minerales que en
los anlisis se estiman como cenizas (Bidlack, Malonge, & Benson, 2000).
De igual forma en su estructura molecular la lignina del olote de maz presenta

diversos componentes solubles en agua y disolventes orgnicos denominados
extractivos, tales como: terpenos, resinas y fenoles etc.
Terpenos: se consideran polmeros del isopreno y estn relacionados con los

alcoholes terpnicos y algunas cetonas
Resinas: Amplia variedad de compuestos no voltiles como grasas, cidos grasos,
alcoholes, resinas cidas, fitoesteroides y otros compuestos neutros
Fenoles: como los taninos que son polifenoles derivados de cido glico y de la
catequina

Otros: Entre los que se encuentran hidratos de carbono de bajo peso molecular,
alcaloides y lignina soluble.
Cabe mencionar que en la estructura de la lignina tambin se encuentran

componentes insolubles como las cenizas que son principalmente carbonatos,
oxalatos y minerales.
En la tabla 2.7 se presentan componentes principales de coronta segn diversos

investigadores.
Tabla 2.7 Datos de investigaciones realizadas sobre componentes principales de la

estructura de la coronta del maz
% % %
Refencias
Celulosa Hemicelulosa Lignina
(Negret & Cheng, 2010) 36.8 30.6 23.1
(Syawala, Wardiyati, & Maghfoer, 2013) 29.85 32.67 12.74
(Ramrez, 2009) 36 23 17
(Cuervo, Folch, & Quiroz, 2009) 45 35 15
(Crdoba, Salcedo, Rodrguez , &
50 33.6 15.8
Delgado, 2013)
Fuente: Estructurada por autoras
2.7 Bioetanol
El bioetanol o alcohol tiene como frmula qumica CH3CH2OH, denominado

etanol de biomasa. Esto es combustible lquido compuesto por alcohol etlico anhdrido
desnaturalizado, obtenido por la destilacin del producto de fermentacin de materias
primas vegetales ricas en azcares, almidones o biomasa (material lignocelulsico).

2.7.1 Clasificacin de acuerdo al tipo de materia prima
El bioetanol, se clasifica en primera y segunda generacin, se representan por

las siglas (1G, 2G), el primero es obtenido a partir de materias primas que poseen alto
contenido de azcares simples y fermentables, como la glucosa, fructosa, galactosa y
sacarosa, entre las ms importantes incluyen caa de azcar, melazas y azcar de
remolacha (Balat, 2014), mientras que el bioetanol de segunda generacin (2G) es el
producido a partir de biomasa lignocelulsica.
En efecto, el uso del bioetanol 2G ha tenido creciente inters global por muchos
factores, uno de los principales es el aprovechamiento de la materia prima residual,
entre otros que lo diferencian del 1G (Anexo 11).
2.7.2 Produccin mundial de bioetanol
La produccin mundial de etanol 1G se vio afectada en 2012, por primera vez

desde el ao 2000, debido a las disminuciones en Estados Unidos de Amrica y Brasil.
Con la reduccin de los precios de maz y azcar prevista en 2013-2014, se anticipa
el aumento de la produccin en ambos pases. (OCDE/FAO, 2013).
En 2022, se prev que la produccin mundial de etanol aumente en casi 70%

respecto a la media de 2010-2012 y llegue a 168 miles de millones de Litros (MmL)
(Grfica 2.1). Se espera que Estados Unidos de Amrica, Brasil y la Unin Europea
sigan siendo los tres principales productores (Grfica 2.2). La produccin y el uso en
Estados Unidos de Amrica y la Unin Europea estn impulsados principalmente por
las polticas vigentes (es decir, RFS2 y la Directiva de Energa Renovable RED,
respectivamente). (OCDE/FAO, 2013).
El creciente uso del etanol en Brasil est relacionado con el desarrollo de la

industria de combustible flexible y la demanda de importaciones de Estados Unidos de

Amrica para cumplir el mandato de biocombustible avanzado, as como para su

aumento en los mnimos de mezcla. (OCDE/FAO, 2013).
Grfica 2.1 Desarrollo del mercado mundial de etanol
Fuente: (OCDE/FAO, 2013).
Grfica 2.2 Distribucin regional de la produccin y el uso mundial de bioetanol en

2022.
Fuente: (OCDE/FAO, 2013).

Cabe sealar que en 2012, la produccin de etanol se vio estancada en los

pases en desarrollo, debido a la reduccin de la oferta en Brasil, pero parcialmente
compensada por otros pases en desarrollo, en los que se observaron aumentos
(Argentina, India, frica y otros pases de Amrica del Sur). (OCDE/FAO, 2013).
Se proyecta que la produccin de etanol en los pases en desarrollo aumente de

42 Mml en 2012 a 72 Mml en 2022, con Brasil representando 80% de este aumento
de la oferta y una gran parte del resto proveniente de China, en donde menos de la
mitad de su produccin de etanol se consume en el mercado de los combustibles, el
resto se consume en forma de alcohol en muchos productos alimentarios y no
alimentarios. El crecimiento en China seguramente provendr de la yuca y el sorgo, ya
que no se permite el uso de maz para la produccin de etanol. (OCDE/FAO, 2013).
2.7.3 Proceso para la obtencin de bioetanol
Por lo que se refiere al proceso de obtencin de bioetanol de segunda

generacin, mantiene la consecucin de las siguientes etapas: reduccin de tamao,
pretratamiento, hidrlisis de celulosa y hemicelulosa, fermentacin, recuperacin y
purificacin del bioetanol. Estas etapas pueden llevarse a cabo mediante distintas
configuraciones de proceso y dentro de cada una de ellas existen mltiples alternativas
(Benito, 2013). El siguiente diagrama representa de manera general la forma de
producir etanol a partir de biomasa.
Diagrama 2.1 Produccin de etanol a partir de biomasa
Fuente: Propio

2.7.3.1 Reduccin del tamao
Este procedimiento se realiza con un molino, para reducir el tamao de la

muestra, lograr la apertura del material fibroso y aumentar el rea de contacto entre el
material lignocelulsico y los reactantes que se emplean en el pretratamiento e
hidrlisis de la muestra.
2.7.3.2 Pretratamiento
El pretratamiento es una etapa crucial en el proceso de obtencin de bioetanol,

debido a la compleja estructura de la biomasa lignocelulsica. La finalidad es mejorar
la digestibilidad de los materiales lignocelulsicos. Las propiedades fisicoqumicas y el
comportamiento de cada materia prima es diferente, por lo que es necesario aplicar el
pretratamiento adecuado, dependiendo del tipo de biomasa (Hendriks, 2009),
(Karagoz, 2012).
Un tratamiento considerado bueno y efectivo debe cumplir con los siguientes
objetivos:
Provocar la solubilizacin o redistribucin de la lignina

Disociar el revestimiento que la lignina y la hemicelulosa forman alrededor de la
celulosa con el fin de aumentar la accesibilidad del cido.
Alterar las caractersticas estructurales de la celulosa como la cristalinidad y el grado
de polimerizacin
Ser efectivo para una variedad de materias primas
Asegurar la recuperacin de los componentes de la biomasa lignocelulsica:
celulosa, hemicelulosa y lignina
Evitar la formacin de productos de degradacin y compuestos potencialmente
inhibitorios
Evitar la degradacin de azcares
Evitar la necesidad de pasos previos de preparacin de la materia prima
Ser efectivo para grandes cargas de slido

Tener un coste moderado, tanto en la inversin como en la operacin, ya que se ha

estimado que el pretratamiento representa aproximadamente el 33 % del coste total
del proceso. (Alvira, 2010), (Lynd, 2000), (Sun, 2002).
As mismo, se han propuesto y desarrollado variedad de tecnologas de

pretratamiento de biomasa lignocelulsica que pueden ser clasificadas en cuatro
grupos: mtodos fsicos: mecnico y trmico, fsico-qumicos, qumicos y biolgicos.
(Sun, 2002).
2.7.3.2.1 Pretratamientos fsicos
2.7.3.2.1.1 Pretratamiento mecnico
a) Trituracin mecnica: Molienda para reduccin de partcula del tamao de

malla inferior a 40 mm, tiene un efecto mnimo en los rendimientos de la hidrlisis, as
como la tasa de hidrlisis de la biomasa (Chang, 2000).
b) Ultrasonido: Es una tcnica empleada para extraer lignina y hemicelulosa, en

estudios realizados, emplearon este mtodo a 25 C y diferentes perodos de tiempo
entre 10 a 60 min, donde el mejor tiempo de residencia fue de 30 min, sin embargo, el
efecto sobre la biomasa es muy superficial comparado con mtodos como el
pretratamiento con perxido de hidrgeno H2O2.
2.7.3.2.1.2 Pretratamiento trmico
En este tipo de pretratamiento, la materia prima es calentada en un rango de 150-

180 C, donde la hemicelulosa y la lignina son solubilizadas (Bobleter, 2000).
Temperaturas superiores a 180 C solubiliza la hemicelulosa (Beall, 2002). Durante los
procesos trmicos una parte de la hemicelulosa es hidrolizada y forma cidos, estos
son asumidos como catalizadores para hidrolizar la hemicelulosa (J.N, 2003). Las
clasificaciones para este pretratamiento son la explosin por vapor y agua lquida a
alta temperatura.

a) Explosin por vapor: La materia prima se somete a temperaturas entre 160-

260 C, mediante la inyeccin directa de vapor saturado, por un intervalo de tiempo
entre 1 y 10 minutos, seguidamente se lleva el producto a una rpida descompresin
hasta presin atmosfrica, como resultado se obtiene biomasa con alteraciones fsicas
(desagregacin y ruptura de las fibras), qumicas (despolimerizacin y rotura de
enlaces) y una celulosa ms accesible a la hidrlisis. Las variables a controlar en este
tipo de procedimiento son la temperatura, el tiempo de residencia, el tamao de
partcula y la humedad (Duff S.J.B., 2004).
b) Agua lquida a alta temperatura (LHW): En este proceso se somete la

biomasa al efecto de agua caliente a una temperatura entre 170-230 C por un tiempo
de 46 min. El objetivo de este pretratamiento es solubilizar la hemicelulosa de la
celulosa para hacerla ms accesible y evitar la formacin de inhibidores, el pH debe
mantenerse entre 4 y 7 para minimizar la formacin de monosacridos y productos
de degradacin que pueden seguir catalizando la hidrlisis del material celulsico
durante el pretratamiento (Kohlmann, 2004).
2.7.3.2.2 Pretratamientos fisicoqumicos
a) Proceso de explosin de fibra con amonaco (AFEX): El pretratamiento con

amonaco se realiza con cargas de amonaco en torno a 1:1 (amonaco kg/kg peso de
biomasa seca) a temperaturas que van desde la temperatura ambiente con una
duracin de 10 a 60 das, hasta temperaturas de 120 C, con una duracin de varios
minutos (Alizadeh, 2005). Tambin se da un aumento de seis veces para la hidrlisis
y un rendimiento de 2,5 veces para el etanol.
b) Explosin con CO2: Se lleva a cabo con alta presin y altas temperaturas de
hasta 200 C, con duracin de varios minutos. Este pretratamiento produce lquidos
que pueden ser cidos, los cuales hidrolizan especialmente la hemicelulosa. El CO2
tambin se aplica como CO2 supercrtico (35 C, 73 bares), este incrementa el
rendimiento de glucosa en 50-70% para el bagazo de caa de azcar (Zheng, 2000),

el 14% de pino amarillo y el 70% de lamo (Kim, 2001). Esto es probablemente

causado por el aumento del tamao de poros.
2.7.3.2.3 Pretratamiento qumico
a) Oxidacin hmeda: Un pretratamiento oxidativo consiste en la adicin de un

compuesto oxidante, como el perxido de hidrgeno o cido peractico a la biomasa
que est sumergida en el agua. Durante el pretratamiento oxidativo puede tener lugar
reacciones como sustitucin electroflica, el desplazamiento de cadenas laterales,
rompimientos de vnculos de alquil, aril, ter o de ncleos aromticos (Hon, 2001).
b) Tratamientos con ozono: El ozono ha sido utilizado para degradar la lignina

y la hemicelulosa. Se lleva a cabo a condiciones de presin y temperatura ambiente.
La degradacin es esencialmente limitada a atacar la lignina y hemicelulosa aunque la
celulosa tambin es afectada (Sun y Cheng, 2002).
c) Prehidrlisis con lcalis: Se lleva a cabo con NaOH diluido donde se

sumerge el material lignocelulsico a 60 C por 24 horas, en esta etapa tienen lugar
reacciones como solvatacin y saponificacin, esto provoca un estado de inflamacin
de la biomasa, lo que la hace ms accesible para enzimas y bacterias. Disoluciones
de lcalis fuertes dan lugar a hidrlisis alcalina, degradacin y descomposicin de
polisacridos y rompimiento de radicales finales. Es importante sealar que la prdida
de polisacridos es causada principalmente por el rompimiento de radicales finales y
reacciones hidrolticas (Fengel, 2000).
d) Tratamiento con solventes orgnicos: En el proceso, un compuesto

orgnico o acuoso se mezcla con un cido inorgnico que pueden ser HCl o H2SO4,
este se utiliza para romper el interior de la lignina y puentes de hemicelulosa. Se
emplean disolventes orgnicos como metanol, etanol, acetona, etilenglicol,
trietilenglicol y alcohol tetrahidrofurfurlico, as tambin cidos orgnicos como oxlico,
acetilsaliclico y saliclico puede ser utilizados como catalizadores en el proceso. Cabe

mencionar que a temperaturas altas por encima de 185 C, el uso de catalizadores es

innecesario para la deslignificacin (Snchez O. C., 2005).
2.7.3.2.4 Pretratamientos biolgicos
En este tratamiento el material lignocelulsico se somete a la accin de

determinadas enzimas o microrganismos, como los hongos de la podredumbre blanca,
marrn o blanda. El objetivo es degradar la lignina y la hemicelulosa, eliminando las
barreras que protegen la celulosa, hacindola ms accesible al posterior ataque
enzimtico, por lo que generalmente se hace necesario hacer primero un tratamiento
con hongos y posteriormente con las enzimas.
a) Tratamiento con hongos: Utiliza microorganismos como hongos de

podredumbre marrn, blanco y suave para degradar lignina y hemicelulosa en los
materiales de desecho. La podredumbre marrn ataca la celulosa, mientras que la
podredumbre blanca y suave ataca tanto la celulosa como la lignina. Hongos de
pudricin blanca (basidiomicetos) son los ms eficaces para el pretratamiento biolgico
de materiales lignocelulsicos (Fan L.T., 2000) .
b) Tratamiento con biosolventes orgnicos: Emplea solventes orgnicos y

hongos, el primero para permitir la accin de hidrlisis en la hemicelulosa y el segundo
para la descomposicin de la red de lignina. Se han realizado estudios con etanol como
solvente y podredumbre blanca para la degradacin de lignina en madera, los hongos
usados fueron Ceriporiopsis subvermispora, Dichomitus squalens, y Coriolus
versicolor. As pues el pretratamiento biolgico puede ahorrar el 15% de la electricidad
necesaria en la hidrlisis, el etanol puede ser reutilizado y es amigable con el medio
ambiente (Itoh, 2003).
En Anexo 12 se muestra una tabla con las ventajas y desventajas de los

pretratamientos.

2.7.4 Hidrlisis cida
La hidrlisis cida es un proceso qumico en el que se utiliza un cido prtico que

puede ser cido sulfrico o cido clorhdrico para catalizar la escisin de los enlaces
qumicos de la hemicelulosa a travs de una reaccin de sustitucin nuclefila con la
adicin de agua, este mtodo tiene por objetivo convertir la masa viscosa obtenida en
el pretratamiento en azcares en forma de oligmeros para despus convertir los
azcares oligomricos en azcares monomricos como la glucosa y xilosa.
a) Hidrlisis cida diluida
Proceso qumico til para la conversin del material hemicelulsico en azcares

reductores, en este las condiciones de presin y temperatura son altas y el tiempo en
el que se da la reaccin es en un rango de 1 a 4 horas lo que facilita el proceso
continuo. Se emplea una solucin de cido mineral que puede ser H2SO4 o HCl con
concentraciones de 1-10 % en un reactor de flujo continuo, con relacin m/v 1:10 -
1:30 y temperaturas de aproximadamente 50 - 215 0C (Balat, 2010).
La hidrlisis cida diluida ocurre en dos fases con el fin de aprovechar las
diferencias entre la celulosa y la hemicelulosa. La primera fase se realiza a bajas
temperaturas para aumentar al mximo el rendimiento de la hemicelulosa, en la
segunda fase se incrementa la temperatura para lograr la hidrlisis de la celulosa, los
rendimientos experimentales actuales para estas dos son de 89% para la manosa,
82% para el galactosa y tan solo el 50% para la glucosa cuando el rendimiento terico
mximo es de 90% en la conversin a bioetanol (Jorgensen, Kristensen, & Felby,
2007).
El desafo consiste en proponer mtodos de hidrlisis cida que incremente el

porcentaje de rendimiento de la glucosa a por lo menos un 70%. Para permitir una
adecuada penetracin del cido en los procesos continuos rpidos, deben reducirse
el tamao de la partcula de la materia prima en rango de 2-6 milmetros. En la tabla

2.9 se muestran referencias del porcentaje de azcares reductores en coronta del

maz, obtenido por el mtodo de hidrlisis cida diluida.
Tabla 2.8 Porcentajes de azcares reductores en coronta del maz

Porcentajes (%)
Componente (Da Silva, Chaves , (Crdoba, Salcedo, (Dongen &
& Cunha, 2013) Rodrguez, & Delgado, 2010)
Delgado, 2013)
Glucosa 47.1 41 34
Xilosa 28.0 35 28
Arabinosa 5.4 No reporta 2.4
Galactosa 2.2 No reporta 0.8
Manosa 0.2 No reporta 0.1
Fuente: Recopilado por autoras
b) Hidrlisis cida concentrada
Este proceso emplea H2SO4 concentrado en el rango de 10-30% en el

pretratamiento, para liberar la hemicelulosa, en la fase subsecuente la biomasa se
seca empleando cido sulfrico concentrado (70-90%). Los tiempos de la reaccin son
generalmente ms largos que los de la hidrolizacin cida diluida (Taherzadeh &
Karimi, 2007). Este proceso proporciona una conversin completa y rpida de la
celulosa y la hemicelulosa, los factores que hacen viable este proceso consisten en
perfeccionar la recuperacin de los azcares y los cidos empleados.
Comparado con el mtodo de hidrlisis cida diluida la degradacin de la glucosa

ofrece un porcentaje de rendimiento cercano al 100%; este proceso ofrece ms
potencial para reducir costos, sin embargo, el ambiente y problemas de corrosin y el
alto de consumo cido son las principales desventajas del mtodo (Taherzadeh &
Karimi, 2007).

Cabe sealar que la hidrlisis cida es uno de los mtodos ms empleados en la

industria de produccin de bioetanol, porque tiene la ventaja de separar los azcares
monomricos de las hemicelulosas, pero tiene la desventaja de generar algunos
compuestos inhibidores, por lo que se hace necesario someter el hidrolizado a un
proceso posterior de detoxificacin para eliminar todas las sustancias que pudieran
formarse por las concentraciones del cido y altas temperaturas, de igual manera se
busca como evitar la formacin de otras sustancias durante el proceso de fermentacin
que afecte el proceso de produccin de etanol.
Existen distintas clasificaciones que agrupan este tipo de sustancias inhibidoras:

productos de la degradacin de azcares, productos de la degradacin de la lignina,
componentes derivados de la estructura lignocelulosa y por ltimo iones de metales
pesados (Cantarella, Cantarella, & Gallifuoco, 2004).
Por otro lado (Oliva , 2014) los clasifica en tres grupos: derivados del furano
(generados a partir de la hidrlisis de hemicelulosa), cidos alifticos de bajo peso
molecular (degradacin de furanos) y derivados fenlicos (provenientes de la
degradacin de la lignina). Cualquiera de estas clasificaciones es vlida, ya que renen
todos los compuestos txicos conocidos en este tipo de proceso.
Es importante sealar que el ms reconocidos es el furfural, formado a partir de

la degradacin de las pentosas (xilosa y arabinosa) y el hidroximetil furfural (HMF),
formado como consecuencia de la degradacin de las hexosas (glucosa, manosa y
galactosa) (Oliva, 2014). En la tabla 12.2 del anexo 12 se presentan los efectos
negativos que provocan los compuestos txicos sobre los microorganismos
fermentadores y el proceso.
A causa de los daos que pueden provocar las sustancias inhibidoras en el

proceso de fermentacin, se han estudiado mtodos de detoxificacin que estn
clasificados segn el tipo de sustancias y acciones que las constituyen, por lo cual

varios autores los agrupan en fsicas, qumicas y biolgicas (Oliva, 2014) (Mussatto &
Robeto, 2004).
Si bien es cierto, existen diversas opciones de detoxificacin, sin embargo la

eleccin del mismo depende de factores como: a) tipo de hidrolizado para la hidrlisis,
b)pretratamiento empleado para la hidrlisis, c) organismo fermentador, d) costo de
operacin de la tcnica de detoxificacin elegida (Mussatto & Robeto, 2004).
Haciendo referencia para los mtodos biolgicos, estos involucran el uso de

enzimas y microorganismos especficos que actan sobre los compuestos txicos
cambiando su composicin (Mussatto & Robeto, 2004). Para el caso de la
detoxificacin con enzimas se encuentran principalmente el uso de peroxidasas y
lacasas. Las primeras transforman primordialmente fenoles y aminas aromticas,
estas son de gran efectividad e incluyen enzimas tales como horseradish peroxidasa
(HRP), lignina peroxidasa (LiP) manganeso peroxidasa (MnP), entre otras y son
producidas por distintos microorganismos en especial de tipo fngico.
En cuanto a los microorganismos empleados para la detoxificacin se encuentran

tanto de tipo bacteriano como fngico. Para el caso de los fngicos existen
investigaciones como (Nichols, Sharma, & Mowery, 2008), donde emplean una cepa
aislada de Coniochaeta de maz despus de pretratamiento cido- diluido. En el caso
del uso de bacterias (Okuda, Soneura , & Nimoniya, 2008) utilizan una cepa de
Ureibacills thermosphaericus, para detoxificar hidrlizados de madera pretratado con
cido diluido.
Por otro lado, se tienen los mtodos de detoxificacin fsicos y qumicos como:
tratamientos con hidrxidos, Overliming, evaporacin, carbn activado, resinas de
intercambio inico, extraccin, nanofiltracin y electrodilisis, sin embargo los de
mayor difusin son el overliming y los tratamientos de neutralizacin con hidrxidos,
no slo por sus resultados exitosos en reduccin de inhibidores y altos rendimientos
en fermentacin, sino por su costo que resulta bajo frente a metodologas como la

nanofiltracin y resinas de intercambio inico (Mussatto & Robeto, 2004), en el anexo

13 se muestran detalles sobre los mtodo.
2.7.5 Fermentacin
La fermentacin consiste en transformar los azcares liberados en la etapa de

hidrlisis cida en etanol y dixido de carbono, por medio de microorganismos
adecuados, principalmente levaduras. Estos microorganismos pueden ser cepas
naturales que metabolicen azcares de seis carbonos, cepas naturales que consumen
tanto azcares de seis como de cinco carbonos. En esta etapa se consideran tres
factores importantes que garantizan la obtencin de altos rendimientos de producto y
estos son: el sustrato, las condiciones de operacin y el microorganismo fermentador
(M.E, 2010).
As pues el sustrato se describe como el resultado de un pretratamiento que se

efecta sobre la materia prima original. En esta etapa, una alta cantidad de azcares
asimilables son liberados de los componentes principales de la materia prima
convirtindose en el sustrato que ha de consumir el microorganismo fermentador. Para
materiales lignocelulsicos, este hidrolizado est compuesto principalmente por
pentosas (en mayor medida xilosa) y por hexosas (en mayor medida glucosa) (M.E,
2010).
Las condiciones de operacin son de mucha importancia para que aseguran la

reproduccin del microorganismo de forma ms eficiente. Los factores importantes en
esta parte del proceso son la temperatura, el medio de fermentacin, el pH y la
velocidad de agitacin. A pesar que en muchos casos las condiciones de operacin y
de crecimiento microbiano son parecidas entre varias cepas, algunos microorganismos
como los genticamente modificados pueden tolerar condiciones ms extremas que
las cepas convencionales haciendo de estos casos excepcionales y mucho ms
difciles de adquirir (M.E, 2010).

Cabe sealar que la fermentacin puede llevarse a cabo de dos maneras:

simultnea a la sacarificacin de los materiales celulsicos -Sacarificacin y
Fermentacin Simultnea- (SFS) (Wingren & Roslander, 2005) o de manera
independiente a la hidrlisis -Hidrlisis y Fermentacin Separada- (HFS) (Pejo, 2009).
a) Sacarificacin y Fermentacin Simultnea (SFS)
Uno de los avances ms importantes relacionados con el proceso global de

produccin de etanol a partir de biomasa lignocelulsica ha sido la implementacin y
desarrollo del proceso conocido como sacarificacin y fermentacin simultneas
(SFS), en el que la hidrlisis y la fermentacin tienen lugar simultneamente en un
mismo reactor.
En el proceso de SFS la glucosa liberada durante la hidrlisis es directamente

metabolizada a etanol por las levaduras. Esta continua eliminacin de la glucosa del
medio minimiza la inhibicin por producto final sobre la actividad de las celulasas
(Ballesteros , 2006) lo que se refleja en rendimientos de hidrlisis ms altos, necesidad
de menores dosis de enzima o cido, reduccin del tiempo total de proceso y
productividades de etanol ms altas (Alfani & Gallifuoco, 2000).
As pues, el proceso de SFS se presenta como un mtodo viable y eficiente para

la produccin de etanol celulsico ya que puede ser empleado con gran variedad de
materias primas y con diferentes tecnologas de pretratamiento. no obstante tambin
muestra algunos inconvenientes, puesto que las condiciones ptimas de pH y
temperatura en las etapas de hidrlisis y fermentacin son diferentes, se deben fijar
unas condiciones de compromiso entre ambas.
Es importante sealar, que el pH ptimo para la hidrlisis se encuentra alrededor

de 1 - 4. En cambio, el pH para la fermentacin, dependiendo del microorganismo,

suele ser 5 o superior. En cuanto a la temperatura ptima, la de la hidrlisis se

encuentra alrededor de 50 C, mientras que la mayora de microorganismos
fermentadores tiene su ptimo de temperatura entre los 30-37 C. En este contexto, el
empleo de levaduras termotolerantes como Kluyveromyces marxianus capaces de
crecer y fermentar a temperaturas superiores a 40 C, ms cercanas a la temperatura
ptima de la hidrlisis, aparece como una alternativa muy prometedora (Pejo M. E.,
2010).
b) Hidrlisis y Fermentacin Separada (HFS)
La configuracin comnmente empleada en el proceso de produccin de etanol

a partir de biomasa lignocelulsica implica un proceso secuencial en el que la hidrlisis
de la celulosa y la fermentacin de la glucosa se realizan en dos reactores diferentes.
En este proceso, denominado hidrlisis y fermentacin separadas (HFS), la fraccin
rica en celulosa es primeramente hidrolizada a glucosa. Una vez completada la
hidrlisis y separado el residuo de lignina, la glucosa resultante es fermentada y
convertida a etanol. La utilizacin de un medio lquido rico en glucosa hace posible la
recirculacin de los microorganismos tras la fermentacin.
Por lo tanto, la principal ventaja en este tipo de procesos es que cada etapa
puede ser llevada a cabo en sus condiciones ptimas de pH y temperatura. Esto
permite realizar la hidrlisis a temperaturas alrededor de 50 C, posteriormente se
realiza la fermentacin a temperaturas entre 30-37 C, donde se encuentra el ptimo
para la mayora de microorganismos etanolognicos (Jrgensen & Kristensen, 2007).
La principal desventaja en la HFS se debe a que la acumulacin de la glucosa y

celobiosa en la etapa de hidrlisis inhibe a las celulasas implicadas en el proceso,
obtenindose, por lo tanto, bajos rendimientos de sacarificacin cuando es un proceso
hidroltico enzimtico (Stenberg & Bollk, 2000).

2.7.5.1 Mecanismo de fermentacin
La gluclisis es la primera etapa de la fermentacin (Reaccin 2.1), lo mismo que

en la respiracin celular y al igual que esta necesita de enzimas para su completo
funcionamiento. A pesar de la complejidad de los procesos bioqumicos una forma
esquemtica de la reaccin qumica de la fermentacin alcohlica puede describirse
como una gliclisis de tal forma que se ve como participa inicialmente una molcula
de hexosa:
Reaccin (2.1)
C6H12O6 + 2 Pi + 2 ADP 2 CH3-CH2OH + 2 CO2 + 2 ATP + 25.5 kcal
La fermentacin alcohlica, desde el punto de vista energtico, es una reaccin

exotrmica, libera cierta cantidad de energa y produce gran cantidad de CO2. El
producto es un piruvato segn la siguiente reaccin.
Reaccin (2.2)
C6H12O6 2 CH3COCOO + 2 H2O + 2H+
La reaccin qumica se describe como la reduccin de dos molculas de

Nicotinamida Adenina Dinucleotido (NAD+) de NADH (forma reducida del NAD+) con
un balance final de dos molculas de ADP, que se convierten en ATP (adenosin
trifosfato). Tambin se encuentran en trazas el cido succnico, el glicerol y el cido
fumrico.

Figura 2.3 Fermentacin alcohlica
Fuente: (S.A, 2015)
En primer lugar el piruvato se descarboxila mediante la accin de la piruvato

descarboxilasa para dar como producto final acetaldehdo, liberando por ello dixido
de carbono (CO2) a partir de iones del hidrgeno (H+) y electrones del NADH. Tras
esta operacin el NADH sintetizado en la reaccin bioqumica catalizada por el GADHP
se vuelve a oxidar por el alcohol deshidrogenasa, regenerando NAD+ para la
continuacin de la gluclisis y sntesis al mismo tiempo de etanol.
Adems se considera que el etanol va aumentando de concentracin durante el

proceso de fermentacin y debido a que es un compuesto txico, cuando su
concentracin alcanza aproximadamente un 12% de volumen, las levaduras tienden a
morir (C.F, 2010).
2.7.5.2 Microrganismos relacionados con la produccin de bioetanol
En muchos procesos de fermentacin, la oxidacin de azcares simples bajo

condiciones anaerobias involucra dos fases: la oxidacin de la glucosa y el

metabolismo de piruvato. El metabolismo de la glucosa ocurre de la misma manera en

la respiracin aerbica y anaerbica, sin embargo, si el oxgeno no est disponible
para su uso como aceptor externo de electrones (como ocurre en la aerobiosis) o el
microorganismo no tiene la capacidad de utilizar componentes inorgnicos, la molcula
portadora de electrones NAD+ debe ser regenerada donando electrones hacia
componentes orgnicos intermediarios (Bai, 2008).
Teniendo en cuenta las diferentes alternativas bioqumicas para la fermentacin

de los azcares, se presenta a continuacin una descripcin de la ruta de biosntesis
de produccin de etanol mediante dos tipos de levaduras.
2.7.5.2.1 Levaduras
Las levaduras son cuerpos unicelulares, generalmente de forma esfrica, con

tamao entre los 2 a 4 m. La principal va metablica de este tipo de microorganismo
en la produccin de etanol es la gluclisis o va EMP, a travs de la cual una molcula
de glucosa es metabolizada y dos molculas de piruvato son producidas. Bajo
condiciones anaerobias, el piruvato es posteriormente reducido a etanol con emisiones
de CO2 obtenindose un rendimiento estequiomtrico terico de 0.511g de etanol y
0.489g de CO2 por 1g de glucosa metabolizada (Kosaric, 2001).
En la gluclisis se producen dos molculas de ATP, los cuales son empleados

para llevar a cabo la biosntesis de las clulas de la levadura, lo cual involucra una
variedad de biorreacciones que requieren energa. Adems, la produccin de etanol
est estrechamente ligada al crecimiento celular del microorganismo, lo que significa
que la biomasa se obtiene como un subproducto (Chandraraj, 2004).
Es importante mencionar que sin el consumo continuo de ATP por parte del
microorganismo que est en crecimiento, el metabolismo glucoltico se vera
interrumpido inmediatamente, debido a la acumulacin intracelular de ATP, causando

una inhibicin a la fosfofructoquinasa (PFK), una de las enzimas de regulacin ms

importantes en la gluclisis. El mecanismo de produccin de etanol a partir de glucosa
en las levaduras se presenta en Anexo 14, figura 14.1 (Chandraraj, 2004). El
microorganismo tradicional ms usado para la fermentacin alcohlica es la
Saccharomyces cerevisiae.
Cabe sealar que adems del etanol y CO2 se producen tambin varios derivados
durante la fermentacin, produciendo glicerol a un nivel aproximado de 1.0 % (p/v),
tambin se producen otros derivados como cidos orgnicos y alcoholes pesados a
bajos niveles. La produccin de estos derivados as como el crecimiento de clulas de
levadura, junto con la inevitable generacin de algunos intermedios glicolticos en las
rutas metablicas correspondientes, disminuyen el rendimiento de etanol en alguna
magnitud (Ingledew, 2000).
En la industria, el rendimiento del etanol es calculado respecto al total del azcar

en el sistema de fermentacin sin la deduccin del azcar residual, puede ser tan alto
como su valor terico (90-93%) (Ingledew, 2000). Por consiguiente, el azcar residual
debe controlarse a niveles muy bajos; por ejemplo, no ms de 2 g/L y 5 g/L son
empleados para reducir el azcar residual y el azcar total, respectivamente, en la
produccin de etanol de materiales lignocelulsicos.
Durante la fermentacin del etanol, las clulas de levadura padecen varias

tensiones. Algunas son medioambientales como la deficiencia de nutrientes,
temperatura alta y contaminacin, mientras los otros son del metabolismo celular de la
levadura como la acumulacin de etanol y su inhibicin correspondiente al crecimiento
celular y produccin de etanol en la levadura. La figura 2.5 resume algunas de estas
tensiones.

Figura 2.4 Las tensiones medioambientales potenciales en la S. cerevisiae durante

la fermentacin para producir etanol
Presin
Osmtica
Sulfito Azcar 25 % p/v
> 100 mg/L Etanol
cido Lctico Clula de la Temperatura

>0.8 % (p/v) levadura 35-38 0C
cido actico
pH <5.3
> 0.05 % (p/v)
Ion sodio
>500 mg/L
Fuente: Propio
2.7.5.2.1.1 Saccharomyces cerevisiae
Es el microorganismo usado frecuentemente para fermentar azcares a bioetanol

en los procesos industriales, ha demostrado ser robusta en la fermentacin de los
hidrolizados lignocelulsicos (Galbe & Zacchi, 2002). La S. cerevisiae puede fermentar
hexosas fcilmente, pero apenas la xilosa en el hidrolizado de la lignocelulosa, porque
a la S. cerevisiae le faltan enzimas que convierten la xilosa a xilulosa (Tian, Zang, Pan,
& Yuan, 2008). Sin embargo, esta levadura puede fermentar la xilulosa (Shi & Jeffries,
2010).
Es importante mencionar que la masa de levadura Saccharomyces cerevisiae

necesaria para optimizar el proceso fermentativo, corresponde a un rango de 12-14%
del 100 % de azcares Reductores presentes en el sustrato, de acuerdo a lo indicado
por (Hidalgo , 2010), no puede haber un exceso ni carencia de la misma, porque incurre

en costos para el primer caso y bajos rendimientos para el segundo. As mismo el

tiempo de fermentacin es de 5 a 15 das de acuerdo a la cantidad de sustrato presente
en la muestra.
2.7.5.2.1.2 Pichia stipitis
Contrariamente a la S. cerevisiae la P. stipitis puede utilizar L-arabinosa y D-

xilosa naturalmente y fermenta eficazmente la xilosa a etanol, ha sido considerada
para la fermentacin de los hidrolizados de hemicelulosa a etanol. Se han desarrollado
varios mutantes con las capacidades de fermentacin ms altas y la utilizacin de
xilosa mejorada. Sin embargo La P. stipitis es incapaz de crecer en condiciones
anaerbicas y es ms sensible al etanol e inhibidores que la S. cerivisiae (Hahn-
Hagerdal, Galbe, & Gorwa-Grauslud, 2006).
2.7.5.3 Factores que afectan el desempeo de los microorganismos en la

produccin de bioetanol
Los procesos fermentativos, requieren de condiciones de operacin que

garanticen el buen desempeo de los microrganismos. El manejo de estos presenta
ciertas dificultades, especficamente en las condiciones de medios de cultivos y del
proceso de fermentacin a nivel industrial. As mismo los factores ms importantes que
afectan el desempeo de una cepa en un proceso de fermentacin y la manera como
a partir de estos fenmenos se generan criterios en la seleccin de microorganismos
que optimicen la produccin de etanol, son: inhibicin por producto, temperatura y
aireacin.
a) Inhibicin por producto
A raz del inters generado en la produccin de etanol a altas concentraciones,

se ha visto como este factor afecta el desempeo de los microrganismos
fermentadores causando inhibicin en el crecimiento microbiano y la reduccin en el

rendimiento producto/sustrato. En general, una concentracin de etanol mayor al 6%

(p/v) tiene un efecto inhibitorio sobre todos los microorganismos. La mayora de las
cepas toleran una concentracin de 5.5 % de etanol en el medio de cultivo (Sridhar ,
2004).
b) Temperatura
La composicin y la estructura de la membrana plasmtica y la concentracin de

fosfolpidos se obstruyen cuando la bacteria alcanza una temperatura de 40 oC, lo cual
conlleva a una prdida de la integridad de la membrana. Posteriormente, la elevada
temperatura resulta en la acumulacin de etanol dentro de la clula, lo cual tiene un
significativo efecto en la viabilidad de las clulas (Sridhar , 2004).
En el caso de levaduras como las especies del gnero Saccharomyces la

velocidad de produccin de alcohol incrementa de forma estable hasta los 30 oC y de
forma suave hasta los 36 oC, pero disminuye a temperaturas superiores a los 37 C.
Algunas cepas son capaces de crecer a temperaturas por encima de los 37 oC y son
comnmente nombradas como termoflicas, mientras que otras tienen una
temperatura mxima superior a los 45 oC y son comnmente llamadas termotolerantes.
c) Condiciones de aireacin
Muchos microrganismos, tanto levaduras como bacterias, crecen en condiciones

anaerbicas y el oxgeno en exceso tiene un efecto negativo sobre la produccin de
etanol porque inhibe el consumo de sustrato y el crecimiento microbiano. A bajas
concentraciones de sustrato, las velocidades de crecimiento y el rendimiento de
biomasa son independientes de la presencia de oxgeno. De forma opuesta, a altas
concentraciones de sustrato, decrecen los parmetros de crecimiento (Chandraraj,
Concise Encyclopedia of bioresource, 2004).

2.7.6 Caractersticas fisicoqumicas del bioetanol
Por sus propiedades fsico-qumicas, el bioetanol se considera un sustituto de la

gasolina en los motores de ciclo Otto, en la tabla 2.9 se muestran las caractersticas
fsico qumicas que hacen posible la utilizacin del bioetanol y se compara con la
gasolina.
Tabla 2.9 Comparacin de las propiedades fsico-qumicas del bioetanol y la gasolina
Parmetro Unidad Etanol Gasolina

Frmula - CH3-CH2OH CnHm (n=4/12)
Peso molecular Kg/mol 46.07 100/105
Estado de agregacin - Lquido Lquido
Oxgeno % en peso 34.80 0
Densidad kg/m3 789 720/780
Solubilidad en agua % 100 0.1
Calor latente de vaporizacin kJ/kg 850 330
Temperatura de ebullicin 0C 78 30/215
Temperatura de fusin 0C -114 -
Poder calorfico inferior KJ/kg 28.225 43.500
Relacin aire/combustible - 9.0 14.5
estequiomtrica
Presin de vapor kPa 15-17 49-65
Temperatura de ignicin 0C 420 220
Acidez pKa 15.9 NP
Punto de inflamabilidad 0C 13 -43
Lmite de explosividad % 3.3 a 19 1.2 a 7.6
Fuente: Recopilado por autoras
2.7.7 Usos y aplicaciones del etanol lignocelulsico
El bioetanol lignocelulsico, tiene mltiples aplicaciones, as pues, el mercado del

alcohol puede subdividirse en tres, de acuerdo a sus destinos fundamentales como:
combustible, uso industrial y bebidas alcohlicas.

2.7.7.1 Combustible
Usos del etanol como biocarburante
Existen tres formas de utilizar el etanol como biocarburante. La ms utilizada de

estas es cuando el bioetanol se emplea en mezclas con gasolina convencional para
sustituirla como carburante en mayores o menores proporciones; no sustituye
totalmente a la gasolina, ya que esta le da a la mezcla estabilidad y resta volatilidad.
Las mezclas pueden ser E5, E10, E20 y hasta E95 (PC., 2012), indicando en nmero
el porcentaje de etanol empleado en la mezcla: en medida que se aumenta el
contenido de etanol en la mezcla se reduce el impacto contaminante, ya que libera
menos CO2.
Otra manera de poder utilizar bioetanol como combustible es modificar las

caractersticas del motor del vehculo para usar mezclas con mayor contenido de
etanol. La tercera estrategia es utilizar el bioetanol como aditivo sustituyendo el metil
terbutil ter (MTBE) que es un aditivo utilizado para incrementar el nivel de octanaje
en la gasolina comn pero que es altamente contaminante.
Brasil es el principal pas pionero en la produccin y utilizacin de bioetanol como

combustible carburante, en 1975 el gobierno brasileo inici el programa Pro-alcohol
para desarrollar el uso de alcohol etlico como combustible, as poda ser utilizado para
reemplazar MTBE, a diferencia de este, el etanol es menos agresivo con el medio
ambiente ya que hace que la gasolina aumente su grado de biodegradabilidad.
De 1,975 a 2,000 Brasil produjo aproximadamente 5.6 millones de vehculos con

motores a prueba de etanol, aparte de los automviles con motor capaz de aceptar
etanol, el gobierno aprob la mezcla de etanol con gasolina en un 25% en cada litro
de gasolina (Moawad, 2012). El aspecto positivo de esta mezcla es que se evita la
emisin de 110 millones de toneladas de dixido de carbono en la atmsfera.

De acuerdo con la Agencia para el Aceite de Brasil, en 2007, se han producido

492 toneladas de caa de azcar y una porcin de este material se utiliz para generar
8.4 mil millones de litros de etanol puro y 13.9 millones de litros de etanol hidratado.
Es as como Brasil est a la vanguardia de desarrollo de biocombustibles como fuente
de energa alternativa renovable, as como Estados Unidos y algunos pases asiticos
(Masiero, 2011).
2.7.7.2 Uso industrial
Se usa como principio activo en la industria farmacutica y de cosmticos, es un

buen disolvente puede usarse como anticongelante y en la fabricacin de
medicamentos. (s.a, Industria del etanol, s.f). (s.a, Alcohol Etlico, 2015)
Disolvente industrial. (s.a, Los principales usos y aplicaciones del alcohol etlico ,
2011)
En la industria qumica como compuesto de partida en la sntesis de diversos
productos, como disolvente de barniz y pinturas. (s.a, Industria del etanol, s.f)
En la industria de elaboracin de perfumes, como materia prima para la
elaboracin de los mismos. (s.a, Industria del etanol, s.f). (s.a, Los principales
usos y aplicaciones del alcohol etlico , 2011).
Antisptico: Se usa en toallitas mdicas comunes y en la mayora de los geles
antibacterianos desinfectantes para manos a una concentracin de
aproximadamente 62% v / v como un antisptico. Es eficaz contra la mayora
de bacterias, hongos y virus, pero no es eficaz contra las esporas bacterianas.
(s.a, Alcohol Etlico, 2013)
En la medicina. (J. E. lvarez Gmez., 2011)
2.7.7.3 Industria de bebidas
Es el principal constituyente psicoactivo en las bebidas alcohlicas, con efectos

depresivos sobre el sistema nervioso central. Tiene un modo de accin complejo y
afecta mltiples sistemas en el cerebro. Es metabolizado por el cuerpo como un
nutriente que aporta energa. (s.a, Alcohol Etlico, 2013).

CAPTULO III:
HIPTESIS
HIPTESIS
El porcentaje de conversin y rendimiento de bioetanol obtenido a partir de la

coronta de maz variedad HS-5 podra ser ms efectivo, mediante la optimizacin y
control de las variables operacionales: masa de coronta, concentracin de cido,
temperatura, tiempo de hidrlisis, masa de levadura y tiempo de fermentacin.

CAPTULO IV:
DISEO METODOLGICO
4. DISEO METODOLGICO
4.1 Descripcin del mbito de estudio
El estudio para la obtencin de bioetanol a partir del olote del maz, se desarroll
en los laboratorios 101, 107 y Tecnologa Farmacutica del departamento de qumica,
laboratorios ubicados en el pabelln no 1 y 11 de la Universidad Nacional Autnoma
de Nicaragua. As mismo, se realizaron ensayos para la cuantificacin de azcares
reductores en el laboratorio de Anlisis Fsico Qumico de Alimentos LAFQA, ubicado
en el pabelln no 3 de la misma. Por otro lado, se desarrollaron pruebas
cromatogrficas para la cuantificacin de alcohol, en el laboratorio de operaciones
unitarias, Facultad de Ingeniera Qumica, Universidad Nacional de Ingeniera (UNI).
4.2 Tipo de estudio
La presente investigacin es descriptiva y experimental (Piura, 2008), la cual

tiene como propsito fundamental establecer relaciones entre dos o ms variables, se
desarrolla con el tipo de diseo experimental cuantitativo, permitiendo la manipulacin
y control de las condiciones operacionales en el proceso de hidrlisis cida diluida y
fermentacin separada para la obtencin de bioetanol, lo que da lugar a la
cuantificacin de azcares reductores mediante espectrofotometra Uv-Vis, as como
la identificacin de bioetanol con la tcnica analtica cromatografa de gas, as mismo
este estudio pertenece al rea tecnolgica procesos industriales y a la lnea de
investigacin energas renovables.

4.3 Poblacin y muestra
4.3.1 Poblacin
Para determinar la poblacin se realiz una entrevista a nueve productores de la

finca Montiel ubicada en el municipio de El Jcaro departamento de Nueva Segovia, de
acuerdo a los resultados de la entrevista (Anexo 15), se seleccion la produccin del
agricultor nmero 1 por altos rendimientos que obtuvo en la cosecha, por tal razn, se
considera como poblacin 408,600 gramos de residuo agroindustrial olote del maz
variedad HS-5, generados de 1.5 manzanas sembradas en el ciclo agrcola 2014/2015
de dicho productor.
4.3.2 Muestra
Las muestras se seleccionaron por medio del muestreo aleatorio simple (anexo
16), el cual consisti en la seleccin al azar de 8 muestras de 60 gramos de coronta
de maz variedad HS-5, que se encontraron a granel despus de la extraccin
mecanizada del grano, se almacenaron en bolsas de polietileno y se transportaron al
laboratorio en donde se tomaron 35 gramos de cada una de las 8 muestras, se
trituraron y tamizaron para luego tomar 138 gramos para la caracterizacin fisco-
qumica y 120 gramos para desarrollar el proceso de obtencin de bioetanol.
Cabe mencionar que las 8 muestras representan las ocho corridas

experimentales que resultaron mediante el diseo de experimento Taguchi, tomando
un porcentaje representativo de 58.3 % de cada muestra para hacer una mezcla y
partir de ah para la toma de las diferentes proporciones para las etapas posteriores
(caracterizacin y proceso).

4.3.2.1 Criterios de Inclusin
Coronta (olote) del maz variedad HS-5

Coronta (olote) del ciclo agrcola 2014-2015
4.3.2.2 Criterios de exclusin
Pudricin del olote (coronta) por Nigrospora, Stenocarpella maydis,

Micoplasma helicoidal o Spiroplasma.
Coronta (olote) de maz con perforaciones provocadas por Gusano cogollero
(Spodoptera frugiperda).
Muestras que presentaban suciedad y materia extraa
Tiempo de permanencia del olote en el campo despus de la cosecha (mayor
de 3 meses).
4.4 Variables y operacionalizacin
4.4.1 Variables Dependientes
Porcentaje de rendimiento (% R)
Porcentaje de conversin (% X)
4.4.2 Variables Independientes
Cantidad de materia prima (coronta de maz)

Concentracin de cido sulfrico
Temperatura de hidrlisis
Tiempo de hidrlisis
Cantidad de levadura
pH de la fermentacin
Tiempo de fermentacin

4.4.3 Operacionalizacin de las variables
Variables Concepto Indicadores Valores
Dependientes
Masa en gramos de bioetanol obtenido

20-90%
Porcentaje de experimentalmente, dividido entre la masa de ROH experimental
conversin masa en gramos de coronta %X = x100
masa alimentada
alimentada, multiplicada por cien.
Masa en gramos de bioetanol obtenido

experimentalmente, dividido entre la masa de ROH experimental
Porcentaje de %R = x100
masa terica de bioetanol terico, masa terica de ROH 20-90%
rendimiento
multiplicado por cien.
Independientes
Masa en gramos de coronta del maz,

Cantidad de
variedad HS-5 tomando diferentes 10 y 20
materia prima Masa
proporciones de acuerdo al diseo de gramos
(coronta de maz)
experimento.
Porcentaje de cido sulfrico presente

en un volumen de solucin capaz de
provocar el rompimiento en la
Concentracin de
estructura del material lignocelulsico y
cido sulfrico Porcentaje volumen 4,7 %
la posterior conversin en azcares
H2SO4
reductores.
Nivel Trmico al cual se someten los 90,100 0C

Temperatura de
residuos de coronta de maz para Grados Celsius (0C)
hidrlisis
acelerar el proceso de hidrlisis.
Momento necesario para provocar el

Tiempo de rompimiento de los enlaces qumicos 1.5, 2
Horas
hidrlisis del material lignocelulsico con el horas
efecto de la concentracin del cido y la
temperatura.
Medio de cultivo de Sustancia

Cantidad de
fermentada unicelular que produce
Levadura
enzimas capaces de provocar la Porcentaje masa volumen
Saccharomyces 12, 14 %
fermentacin alcohlica de la glucosa
cerevisiae
hidrolizada.
Coeficiente que mide el grado de

acidez o basicidad para controlar la
pH de la
actividad microbiolgica de la cido 5.5-6.5
fermentacin
Saccharomyces cerevisiae en el
proceso fermentativo
Magnitud fsica que permite medir la

Tiempo de
duracin con la cual se da la conversin Das 6, 8 das
fermentacin
de azcares reductores en alcohol.

4.5 Material y mtodo
4.5.1 Materiales para recolectar informacin
Para la elaboracin de este documento se llev a cabo revisin bibliogrfica,

fundamentada en artculos cientficos, tesis de grado, libros de texto, todos ellos
enfocados en la obtencin de bioetanol y temas afines a la materia prima coronta del
maz (olote).
De la revisin bibliogrfica se realizaron resmenes de artculos cientficos y otros

documentos relacionados al tema, sin dejar de mencionar el uso de las fichas de
contenido: cita textual y parfrasis, stas necesarias para el enfoque de antecedentes
y marco terico. Tambin se estructuraron tablas e ilustraciones, con el fin de explicar
y presentar un documento tcnico cientfico donde se presentan los principales pases
productores de maz, descripcin botnica, componentes de la estructura del olote,
propiedades fsico-qumicas del bioetanol y gasolina, elementos nutritivos necesarios
para el maz, as tambin los tipos de inhibidores y sus efectos sobre el proceso.
Por lo que se refiere a las figuras, estn representadas en el documento con

mayor frecuencia en el marco de referencia en donde se muestran ilustraciones como
la fermentacin alcohlica, las tensiones medioambientales potenciales en la S.
Cerevisiae durante la fermentacin para producir etanol, por otro lado dentro del marco
de referencia y anexos tambin se muestran una serie de figuras que muestran la
estructura del olote de maz, plagas y enfermedades, hasta una galera de fotografas
que muestran el proceso agronmico para tener la materia prima utilizada en esta
investigacin.
Se utilizaron censos agrcolas a nivel mundial, Centroamrica y Nicaragua

divulgados por la Organizacin de las Naciones Unidas para la Agricultura y la
Alimentacin (FAO) y el Ministerio Agroforestal (MAGFOR), los que fueron de inters,
puesto que permitieron interpretar la produccin de maz en el ciclo agrcola 2014/15.

Los grficos de barra y de pastel tambin fueron de utilidad para la representacin

resumida de la cuantificacin y cualificacin de la produccin mundial de bioetanol,
segn la Organizacin para la Cooperacin y el Desarrollo Econmico y la
Organizacin de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentacin
(OCDE/FAO). Por otro lado tambin se realiz la entrevista para recolectar
informacin, puede observarse en anexo 15 y diseo metodolgico en seleccin de la
poblacin y muestras del estudio.
Tambin se usaron etiquetas y libreta de campo para anotar los datos de

muestreo, as mismo se elaboraron tablas para recopilar los datos de experimentacin,
en el proceso de hidrlisis, cuantificacin de azcares reductores y fermentacin. De
igual forma fueron necesarias curvas de calibracin para la cuantificacin de los
azcares reductores y etanol.
4.5.2 Materiales para procesar la informacin
Para el procesamiento de los datos se utiliz tablas para resumir los resultados
experimentales, como los de referencia bibliogrfica. Por otro lado se usaron tambin
las siguientes herramientas informticas:
Minitab 16: Programa utilizado para realizar el diseo de experimentos y

procesamiento de los datos experimentales
Office Word 2010: Software utilizado para el procesamiento de textos, elaboracin
y edicin del documento
Office Excel 2010: Software para la realizacin de clculos de resultados y
elaboracin de grficos, curva de calibracin y clculo de errores
Office Paint 2010: Necesario para realizar modificaciones en algunas ilustraciones
del marco terico y anexos
Office Visio 2010: Herramienta para elaborar los diagramas de bloques y equipos.

4.5.3 Mtodo
Para el desarrollo de las etapas de esta investigacin, se realizaron ensayos

analticos de acuerdo a los objetivos planteados; la primera parte es la caracterizacin
de la materia prima, la cual se efectu bajo las referencias de las Normas TAPPI
(Technical Assosiation of the pulp and paper Industry). La Asociacin Tcnica de la
Industria de la Celulosa y el papel, sociedad no gubernamental fundada en 1915 con
sede en Atlanta EEUU. TAPPI cubre tres campos principales: celulosa y papel,
empaques de corrugado y empaques de papel sinttico, institucin reconocida por la
estandarizacin de mtodos en este campo.
Cabe mencionar que la materia prima en estudio (coronta del maz) en su

estructura qumica est constituida principalmente por material celulsico, lo que hace
que los mtodos estandarizados por las normas TAPPI sean los indicados para la
realizacin de los anlisis con resultados confiables.
Los parmetros que se consideraron en la cuantificacin analtica para la

caracterizacin fsico qumica de la coronta de maz son los siguientes; Determinacin
de: Humedad (TAPPI T 211 om-85), Cenizas con extractivos (TAPPI T 211 om-85),
pH (TAPPI T 252om-90), Extractivos Totales (TAPPI, 264 om-88), Cenizas sin
extractivos (TAPPI T 211 om-85), % Celulosa (Mtodo de Kurschner y Hoffer) y %
Lignina Klason (TAPPI T 222 om-88). (Procedimientos en Anexo 18).
Respecto a la obtencin de bioetanol a partir de la coronta de maz variedad HS-

5, se utiliz el mtodo de hidrlisis cida diluida y fermentacin separada, el cual puede
resumirse en tres etapas fundamentales: pretratamiento de la muestra, hidrlisis cida
donde el material lignocelulsico es convertido en azcares reductores totales,
cuantificados mediante el mtodo de Miller cido 3,5- dinitrosaliclico (DNS)
(procedimiento en Anexo 19), luego se someti a un proceso fermentativo para
convertir los azcares reductores en alcohol, seguido de anlisis Cromatogrfico para
la determinacin y cuantificacin de etanol.

Cabe sealar que este mtodo se desarroll a escala de laboratorio. Se

implement el diseo de experimento Taguchi, (Anexo 17) reconocido en
investigaciones de alto nivel por estudiar todas las interacciones entre factores. Por lo
que respecta a este estudio, se relacionaron todas las variables operacionales del
proceso definiendo dos niveles, uno bajo y otro alto, las corridas experimentales fueron
ocho, a continuacin se muestra el diseo de experimento.
Tabla 4.1 Diseo de experimento (Mtodo Taguchi)
N0 A B C D E F % AR
1 1 1 1 1 1 1 32
2 1 1 1 2 2 2 29
3 1 2 2 1 1 2 36
4 1 2 2 2 2 1 32
5 2 1 2 1 2 1 36
6 2 1 2 2 1 2 35
7 2 2 1 1 2 2 35
8 2 2 1 2 1 1 36
Fuente: Propia (elaborado en Minitab 16)
Tabla 4.2 Valores de las Variables operacionales con niveles alto y bajo
Variables operacionales Unidad de medida Niveles

Alto (2) Bajo (1)
A Masa de coronta Gramos (g) 20 10
B Concentracin de cido sulfrico Porcentaje (%) 7 4
C Temperatura de hidrlisis Grados Celsius (0C) 100 90
D Tiempo de hidrlisis Horas (H) 2 1.5
E Porcentaje en masa de levadura % m/v 14 12
F Tiempo de fermentacin Das 6 8
Fuente: propia

Materiales
Materiales Marca Capacidad/Tamao Clase/Tolerancia

Matraces Volumtricos Pyrex 500 mL Clase A/ 0.40 mL
Matraces Volumtricos Pyrex 250 mL Clase A/0.12 mL
Matraces Volumtricos Pyrex 100 mL Clase A/0.10 mL
Pipetas Volumtricas Pyrex 10 mL Clase A/0.1 mL
Pipetas Volumtricas Pyrex 5 mL Clase A/0.05 mL
Probetas volumtricas Pyrex 5 mL Clase A/0.1 mL
Micro pipetas Comecta 100 L Cod.5904017/0.8 L
Micro pipetas Comecta 500 L Cod.080942 /0.8 mL
Micro pipetas Comecta 5000 L Cod.5904015/0.8 L
Probetas volumtricas Pyrex 25 mL Clase A/ 0.02 mL
Buretas Pyrex 50 mL Clase A/0.05 mL
Beakers Pyrex 50 mL Clase A/ 0.05 mL
Beakers Pyrex 600 mL Clase A/0.05 mL
Beakers Pyrex 1,000 mL Clase A/0.05 mL
Matraz erlenmeyer Pyrex 500 mL Clase A/0.05 mL
Matraz erlenmeyer Pyrex 1000 mL Clase A/0.05 mL
Kitazato Pyrex 250 mL 0.05 mL
Termmetro Fisher -10 a 260 0C 1 0C
Kits de destilacin Pyrex 24/40 Cod. 6949
Tubos de ensayo Pyrex 16 x 150 mm -
Vidrio reloj Pyrex 5 cm de dimetro
Agitadores de vidrio - 20 cm -
Esptulas Stainless Fisher 10 cm -
Embudo Buchner POBEL 250 mL -
Tamiz - #3 -
Tapones de hule - # 4, 5, 6,8, 9 -
Pepel filtro Fisher -
Papel kraft - - -
Guantes de nitrilo CAPLIN Talla mediana -
POINT
Papel Aluminio Fans - -
Papel toalla Nevax 100 hojas dobles -
Tijera - Mediana -
Libreta de campo Scribe Mediana -
Bolsas de polietileno Ziploc 26.8 x 24.1 x 6.6 -

Equipos
Nombre Modelo Marca

Horno Conterrm J.P.Selecta
Mufla F62735 Thermolyne
Planchas de calentamiento 29064 BUNSEN
Bao Mara 3000916 J.P SELECTA
Campana de gases OR-ST 1200 Burdinola
Centrfuga Digicen 21 Ortoalresa
Balanza Analtica Adventure AR0640 Ohaus
Desecadores de Vidrio - Pyrex
pHmetro Basic 20+ Crison
Bomba KNF 391629
Frigorfico Industrial Stocklow G J.P.Selecta
Espectrofotmetro Lambda EZ 201 Perkin Elmer
Cromatgrafo de gases 7890 Agilent
Laptop INSPIRON 14R DELL
Reactivos
Nombre del Reactivo Frmula Grado Marca
Qumica
ACS, para anlisis
cido Sulfrico 96.7 % H2SO4 J.T. Baker
de metales trazas
cido Clorhdrico
HCl Pureza media Fisher
HCl 10 %
Levadura _ Puro Fleischmann
Hidrxido de amonio NH4OH ACS Merck
Agua destilada H2O _ _

Procedimiento
1. Seleccin y recepcin de materia prima
La coronta del maz variedad HS-5 se recolect en el campo, donde se realiza

la extraccin mecanizada del grano, se seleccion de acuerdo a los criterios de
inclusin y exclusin y al sistema de muestreo establecido (Anexo 16).
2. Lavado de materia prima
Las muestras de coronta se sometieron a un sistema de lavado con agua del

grifo, para eliminar impurezas y material extrao.
3. Secado
Despus de lavarse las muestras se procedi a eliminar el exceso de humedad,

utilizando un horno elctrico con un nivel trmico de 70 0C durante 6 horas.
4. Reduccin del tamao
La coronta de maz lavada y seca se tritur en un molino de discos hasta un

tamao de partcula de 3 mm, con el fin de aumentar la superficie de contacto,
favoreciendo los rendimientos en la hidrlisis, porcentaje de azcares reductores y
producto terminado, en este punto se tomaron las muestras para la caracterizacin
fsico qumica.
5. Pesado
Como punto de control se pes la cantidad de material que entr al proceso,

haciendo uso de balanza analtica, se pesaron cantidades de muestra de acuerdo a lo
indicado en el diseo de experimento (10 y 20 gramos), los datos de la masa sirven
como referencia para la determinacin de porcentajes de rendimiento y conversin.

6. Hidrlisis cida diluida
Las muestras de coronta se trataron con cido sulfrico al 7 y 4 % segn el nivel

de trabajo en relacin al diseo de experimento, estos se sometieron a temperaturas
de 90 y 100 0C durante 1.5 y 2 horas, la cantidad de H2SO4 adicionado a la biomasa
fue en relacin 1:15 m/v.
Este proceso correspondi a hidrlisis cida diluida, utilizando bajas

concentraciones de cido y altas temperaturas, el producto de la reaccin es el
desdoblamiento en la estructura del material hemicelulsico en monmeros como la
D-glucosa y Xilosa principalmente. En el hidrolizado se obtiene un lquido que
corresponde a los azcares reductores y un slido que es la lignina y celulosa que no
reaccion, los slidos se separan del extracto azucarado mediante filtracin con fibra
de vidrio. La lignina se destina para otros fines de inters que se detallan en anexo 21.
7. Neutralizacin
Las muestras hidrolizadas se neutralizaron (reaccin 4.1) con solucin de

hidrxido de sodio al 7 y 4 % para regular el pH a un nivel 5.3 y luego iniciar el
proceso fermentativo, esto favorece el metabolismo celular de la levadura
Saccharomyces cerevisiae, de igual modo la produccin de etanol.
En esta etapa finaliz el proceso de hidrlisis, por lo tanto se tomaron muestras

del hidrolizado para realizar anlisis de azcares reductores totales, mediante el
mtodo espectrofotomtrico de Miller cido 3,5 dinitrosaliclico (DNS) (Anexo 19.1).
H2SO4 + 2NaOH Na2SO4 + 2H2O Reaccin (4.1)

8. Fermentacin
La fermentacin se efectu separada de la hidrlisis, para esto fue necesario

preparar un cultivo de levadura patata Dextrosa (YPD) al 12 y 14 % del peso total de
los azcares reductores totales cuantificados en cada muestra. El medio se prepar
con levadura saccharomyces cerevisiae (microrganismo capaz de metabolizar la
glucosa en alcohol) y como medio nutritivo peptona y glucosa, todos disueltos en agua
destilada, la relacin masa de levadura, peptona, glucosa fue (1:2:2), luego las
muestras se esterilizaron en el autoclave a 1210C por 15 minutos, en seguida se
colocaron en una plancha de agitacin magntica a 220 rpm por 18 horas (Correa &
Mendoza, 2015).
El hidrolizado se someti a fermentacin anaerbica tomando en cuenta

condiciones operacionales en el proceso como: porcentaje de inculo de levadura 12
y 14 %, tiempo de fermentacin 6 y 8 das de acuerdo a los niveles postulados en el
diseo experimental, as mismo las muestras se agitaron cuatro veces al da durante
10 minutos para liberar el CO2, el proceso fermentativo se realiz a temperatura
ambiente.
9. Desgasificacin
Uno de los productos en la reaccin de fermentacin es el CO2, tericamente 100

gramos de glucosa produce aproximadamente 50.4 g de bioetanol y 48.8 g de Dixido
de Carbono (Kosaric, 2001), el cual tiene que ser separado del sistema en el proceso
fermentativo y aprovecharlo para otros fines. Para lo cual se coloc una manguera en
la parte superior del montaje de fermentacin, el CO2 se deposit en un Becker con
agua.
10. Destilacin
Pasados los 6 y 8 das se detuvo el proceso fermentativo, luego mediante

destilacin simple se procedi a separar el bioetanol producido del material hidrolizado

que no reaccion, en esta operacin se control cuidadosamente la temperatura,

teniendo en cuenta el punto de ebullicin del bioetanol (78 0C). En Anexo 20 diagrama
ilustrativo del proceso a escala de laboratorio.
11. Almacenamiento
Finalmente el producto terminado se almacen en frascos de plsticos,

asegurando que estuvieran bien sellados, para evitar volatilizacin del producto. En
este punto se tomaron muestras de bioetanol para analizarlas mediante cromatografa
de gases, para identificacin y cuantificacin del alcohol etlico.

Flujograma 4.1 Proceso de obtencin de bioetanol a partir de la coronta de maz

SELLECCIN Y RECEPCIN DE
MATERIA PRIMA (CORONTA DE
MAZ)
INSPECCIN DE MATERIA
PRIMA
CLASIFICACIN DE MATERIA
NO
PRIMA
- VARIEDAD HS-5
- TIEMPO DE RESIDENCIA EN MATERIA PRIMA CORONTA ANLISIS DEL % DE
CAMPO MENOR DE 2 MESES DE MAZ HUMEDAD
SI LAVADO
SECADO 70 0C
% EXTRACTIVOS TOTALES
% CELULOSA
% HEMICELULOSA
REDUCCIN DEL TAMAO CARATERIZACIN FSICO-
3mm QUMICO DE MATERIA PRIMA % LIGNINA KLASON
% CENIZAS
pH
PESADO
HIDRLISIS CIDA DILUIDA LIGNINA
ANLISIS QUMICO DEL

NEUTRALIZACIN AZCARES REDUCTORES
HIDROLIZADO
FERMENTACIN
DESGACIFICACIN
ANLISIS QUMICO AL
DESTILACIN ALCOHOLES (ETANOL )
PRODUCTO TERMINADO
ALMACENAMIENTO
Fuente: Propia

Diagrama 4.1 Diagrama de equipos para la obtencin de bioetanol a partir de la

coronta de maz
Transporte de Recepcin e
materia prima Inspeccin
Almacenamiento
Lavado
Molienda
Secado
Tamizado
H2SO4
Levadura
Pesado
NaOH
NaOH
Hidrlisis
BIOETANOL CO2
Lignina a planta de
Neutralizacin
tratamiento
Destilacin
Almacenamiento Fermentacin
Fuente: Propia

CAPTULO V:
ANLISIS Y DISCUSIN DE LOS
RESULTADOS
5. ANLISIS Y DISCUSIN DE LOS RESULTADOS
La organizacin y anlisis de los resultados se fundamentan en los objetivos de

estudio.
5.1 Caracterizacin fisicoqumica de la coronta del maz variedad HS-5
La caracterizacin de la materia prima, coronta del maz variedad HS-5, se llev

a cabo usando la metodologa mostrada en la seccin 4.4.2, anexo 18. Para cada
anlisis se realizaron cinco rplicas, los resultados promedios se presentan en la tabla
5.1 y las repeticiones en anexo 22.
Tabla 5.1 Caracterizacin fsico-qumica de materia prima coronta del maz variedad
HS-5
N0 Caracterstica Valor promedio Desviacin estndar
1 % Humedad 0.2020 0.0084

2 % Cenizas con extractivos 1.9560 0.0328
3 pH 5.5660 0.1053
4 % Extractivos totales 0.3627 0.0301
5 % Cenizas sin extractivos 0.1140 0.0054
6 % Celulosa 36.7052 1.4954
7 % Lignina 19.7272 0.9000
8 % Hemicelulosa 43.5676 2.0575
En la tabla 5.1 se observa que la composicin de la coronta, corresponde en

mayores porcentajes a la celulosa y hemicelulosa, estos resultados tienen una
diferencia de 10 % con los observados por (Negret & Cheng, 2010), esta se debe
probablemente a la variedad de maz y a las labores agronmicas, cabe esperar que
este porcentaje contribuya a la mayor obtencin de azcares reductores tales como
glucosa y xilosa, por tanto mayores cantidades de alcohol.

As mismo (Cuervo, Folch, & Quiroz, 2009) reporta 80 % de material

hemicelulsico, similar al 80.3 % obtenido de la coronta del maz variedad HS-5; se
espera resultados de azcares reductores similares.
Por otro lado, se encontr que la cantidad de lignina, polmero aromtico de

estructura tridimensional compleja, ramificada y amorfa coincide con los registrados
por (Ramrez, 2009) quien reporta 17 %, de igual manera son semejantes a los datos
publicados por (Crdoba, Salcedo, Rodrguez , & Delgado, 2013) con una diferencia
del 1.2 % en comparacin con los reportados en este estudio, a diferencia de lo que
reporta (Syawala, Wardiyati, & Maghfoer, 2013) con una diferencia significativa de 6.3
%, esto se atribuye a la variedad de coronta.
Con respecto a la composicin de la coronta de zea Mays L referente a su

contenido de Celulosa (36.7052 %), Hemicelulosa (43.5676 %) y Lignina (19.7272 %),
permite establecer, que este residuo agroindustrial tiene concentraciones adecuadas
en estas fracciones, siendo las dos primeras fuentes importantes de carbohidratos,
hidrolizables para obtener azcares simples, tiles como sustrato en procesos
biotecnolgicos orientados a la produccin de alcohol, por encontrarse dentro del
rango (25-60% de celulosa, 1-45 % de hemicelulosa, 1-25% de lignina) de materiales
lignocelulsicos segn (Negret & Cheng, 2010).

5.2 Variables operacionales
5.2.1 Hidrlisis cida diluida
a) Efectos de los factores sobre el porcentaje de azcares reductores totales
Los factores analizados mediante la aplicacin del diseo de experimento

Taguchi, con arreglo ortogonal L8, en el proceso de hidrlisis cida diluida fueron:
masa de coronta, concentracin de cido sulfrico, temperatura y tiempo de
hidrlisis, la variable repuesta de estos factores es el porcentaje de azcares
reductores y totales, determinados mediante el mtodo cido 3,5 dinitrosaliclico
(DNS), estos se muestran en la tabla 5.2
Tabla 5.2 Porcentajes de azcares reductores totales
g/g de Azcares % de Azcares

N0 Experimento 3
Reductores Totales Reductores Totales3
E-1 2.5350 32
E-2 2.2950 29
E-3 2.9280 36
E-4 2.5760 32
E-5 5.8482 36
E-6 5.6118 35
E-7 5.6661 35
E-8 5.7188 36
Porcentaje de azcares reductores totales estimado= 384
El % promedio de los azcares reductores totales estimado corresponde a 38,

este valor presenta diferencia significativa del 45 % en relacin con lo que reporta
(Da Silva, Chaves , & Cunha, 2013) y 38 % a lo presentado por (Crdoba, Salcedo,
Rodrguez, & Delgado, 2013), esta diferencia se atribuye a la optimizacin y control
3 Procedimiento de Clculo en Anexo 19.1, mtodo espectrofotomtrico DNS (valores finales en

Anexo 23 Tabla 23.1)
4 % Azcares reductores totales estimado, usando ANOVA en anexo 23 (seccin 23.1.1)

de las variables operacionales en el proceso hidroltico, sin embargo hay similitud

con el 34 % publicado por (Dongen & Delgado, 2010).
En la grfica 5.1 se muestran los efectos de los factores sobre la conversin

de azcares reductores en el proceso hidroltico, sometidos a proceso fermentativo
para la produccin de Bioetanol.
Grfica 5.1 Efecto de los factores sobre el porcentaje de los azcares reductores
Grfica de efectos principales para Medias

Medias de datos
Masa de coronta [H2SO4]
35
34
Media de Medias
33
32
10g 20g 4% 7%
Temperatura Tiempo de Hidrlisis
35
34
33
32
90C 100C 1.5h 2h
En la grfica 5.1 se observa, que los factores masa de coronta, concentracin

de cido sulfrico, temperatura y tiempo de hidrlisis tienen mayor inclinacin, por
lo tanto mayor efecto sobre la variable repuesta % de azcares reductores totales.
Para la optimizacin de la masa de coronta se considerar el nivel 2

correspondiente a los 20 gramos que representan el 80.2728 % del peso total del
material hemicelulsico, que se ve afectado positivamente con la influencia del

factor temperatura en el nivel 2 (100 0C), provocando el rompimiento de los enlaces

-1,4-O glucosdicos de los polmeros del material hemicelulsico degradndose
en monmeros de glucosa, xilosa, arabinosa (Azcares Reductores Totales).
Por otro lado se considera trabajar con el nivel bajo (1.5 h) para el factor tiempo
de hidrlisis, puesto que la reaccin qumica de la degradacin del material
hemicelulsico se da en tiempos cortos, en caso contrario los azcares reductores
se degradan en subproductos como furfural e hidroximetilfurfural que causan
efectos negativos en el proceso fermentativo (Oliva, 2014).
Con respecto al factor concentracin de cido sulfrico se observa que tiene

efecto sobre la variable repuesta, pero con el fin de reducir costos e impacto
ambiental, puede fijarse un valor intermedio del nivel 1 y 2 estimado como el 5 %.
5.2.2 Fermentacin separada
b) Efectos de los factores sobre el porcentaje de conversin y rendimiento

de bioetanol
La conversin y el rendimiento de bioetanol son las variables repuesta en el

proceso fermentativo, se consideran todas las condiciones operacionales: masa de
coronta, concentracin de cido, temperatura y tiempo de hidrlisis, como variable
respuesta el porcentaje de azcares reductores totales, por lo cual, en la
fermentacin entran los azcares reductores. Se manipulan las variables masa de
levadura saccharomyces cerevisiae y tiempo de fermentacin para tener como
repuesta la produccin de bioetanol. En la tabla 5.3 se presentan los resultados del
% de conversin y rendimiento.

Tabla 5.3 Porcentajes de conversin de azcares reductores totales y rendimiento

de bioetanol
N0 Experimento Porcentaje de Porcentaje de

Conversin (%X)5 Rendimiento (%R)6
E-1 42 84
E-2 28 56
E-3 46 91
E-4 31 61
E-5 39 78
E-6 35 70
E-7 39 77
E-8 32 64
Porcentaje de Conversin estimado= 397
Porcentaje de Rendimiento estimado= 797
En la tabla 5.3 se observa que el experimento tres en comparacin con los

dems experimentos tiene mayor porcentaje de rendimiento y conversin de
azcares reductores totales en alcohol, esto confirma el alto contenido de azcares
obtenidos en el proceso de hidrlisis.
En la grfica 5.2 se representan los efectos de los factores sobre el porcentaje

de conversin de azcares reductores en bioetanol en la etapa de fermentacin.
5 % X=masa experimental de Bioetanol / masa de azcares reductores x100 (valores en anexo 23

tabla 23.1)
6 % R= masa experimental de Bioetanol / masa terica de bioetanol referente a los azcares
reductores totales x 100 (valores en anexo 23 tabla 23.1)

7 % X, % R estimado en la etapa de fermentacin, procesado con ANOVA en anexo 23 (seccin
23.1.2)

Grfica 5.2 Efectos de los factores sobre el porcentaje de conversin de los

azcares reductores en bioetanol

Medias de datos
Masa de Levadura Tiempo de Fermentacin

39
38
Media de Medias
37
36
35
34
12% 14% 6das 8das
La grfica 5.2 indica que el nivel bajo (12%) del factor masa de levadura
saccharomyces cerevisiae ejerce efecto positivo sobre la conversin de azcares
reductores en bioetanol, dado que el aumento en la masa del inculo representa
mayor cantidad de clulas, utilizando azcares reductores a un ritmo constante,
resultando un aumento general en la velocidad de utilizacin de estos, los que
pueden transformarse en cido actico (Pejo M. E., 2010), por lo tanto el tiempo
ptimo de fermentacin corresponde al nivel 2 (8 das).
Por otro lado la optimizacin de los factores masa de levadura nivel 1 (12 %)
y tiempo de fermentacin (8 das), se resume en trminos econmicos.

5.2.3 Anlisis del proceso general
c) Efecto de los factores sobre la conversin y rendimiento del proceso global

El porcentaje de conversin y el porcentaje de rendimiento son las variables
repuestas en el proceso general (hidrlisis cida fermentacin separada) para la
obtencin de bioetanol, a partir de la coronta de maz variedad HS-5, los resultados
se muestran en la tabla 5.4.
Tabla 5.4 Porcentaje de rendimiento y conversin para el proceso global
Porcentaje de Porcentaje de
N0 Experimento
Conversin (%X)8 Rendimiento (%R)9
E-1 11 13
E-2 6 8
E-3 13 17
E-4 8 10
E-5 11 14
E-6 10 12
E-7 11 14
E-8 9 12
Porcentaje de Conversin estimado= 2410
Porcentaje de Rendimiento estimado= 3010
En la tabla 5.4 se observa que el experimento 3 presenta mayor porcentaje de

conversin y rendimiento en relacin a los dems experimentos. Esto se debe
principalmente al arreglo de las variables operacionales para la optimizacin y
control del proceso global. En las grficas 5.3 y 5.4 se presentan los efectos de los
factores sobre el porcentaje de conversin y rendimiento.
8 % X=masa experimental de bioetanol / masa de coronta alimentada x100 (valores en anexo 23

tabla 23.1)
9 % R= masa experimental de bioetanol / masa terica de bioetanol (referente al porcentaje de
material hemicelulsico) x 100 (valores en anexo 23 tabla 23.1)

10 % X, % R estimado en la etapa de fermentacin, procesado con ANOVA en anexo 23 (seccin
23.1.2)

Grfica 5.3 Efecto de los factores sobre el porcentaje de conversin en el proceso

global

Medias de datos
Masa de coronta [H2SO4] Temperatura
11
10
Media de Medias
8
10g 20g 4% 7% 90C 100C
Tiempo de Hidrlisis Masa de Levadura Tiempo de Fermentacin
11
10
8
1.5h 2h 12% 14% 6das 8das
Grfica 5.4 Efecto de los factores sobre el porcentaje de rendimiento en el proceso

global

Medias de datos
Masa de coronta [H2SO4] Temperatura

14
13
12
Media de Medias
11
10
1 2 1 2 1 2
Tiempo de Hidrlisis Masa de Levadura Tiempo de Fermentacin
14
13
12
11
10
1 2 1 2 1 2

En las grficas 5.2 y 5.3 se observa que los factores, masa de coronta, masa
de levadura, concentracin de cido sulfrico, tiempo y temperatura de hidrlisis,
son los que presentan mayor incidencia en las variables respuestas porcentaje de
conversin y rendimiento en el proceso global, para la obtencin de bioetanol, a
deferencia del tiempo de fermentacin, que tiene menor significancia. Mismos
efectos observados en el control de las etapas individuales del proceso.
Se establecen las condiciones ptimas de las variables operacionales en la

obtencin de bioetanol a partir de la coronta de maz variedad HS-5 por el mtodo
de hidrlisis cida diluida-fermentacin separada: masa de coronta 20 g,
concentracin de cido sulfrico 7%, temperatura de hidrlisis 100 oC, tiempo de
hidrlisis 1.5 h, masa de levadura 12 % y tiempo de fermentacin 8 das.
As mismo, mediante anlisis de varianza se determin el ajuste de dichas

variables, teniendo como resultado 24 % de conversin y 30 % de rendimiento para
el proceso global, destacando que el porcentaje de conversin super el 8.40 %
reportado por (Yah, Sunny, & Unuabonah, 2010), con diferencia significativa de 15.6
%, sin embargo el porcentaje de rendimiento es menor en comparacin con el 86.9
% y 79.7% publicado por (Bellido, 2013), esto probablemente por los
pretratamientos de explosin de vapor y ozonlisis que recibi la muestra de Bellido,
tambin por el uso de levadura Pichia Stipitis capaz de fermentar hexosas y
pentosas en dicha muestra.

CAPTULO VI:
CONCLUSIONES
Con base al anlisis de resultados de la caracterizacin de la coronta y la

transformacin de esta a bioetanol, se observaron los principales efectos de los
procesos de hidrlisis cida-fermentacin separada resultando que:
1. Las caractersticas fisicoqumicas de la coronta del maz variedad HS-5 son: %

humedad 0.2020, % cenizas 0.1140, % extractivos totales 0.3627, pH 5.5660, %
celulosa 36.7052, % lignina 19.7272, % hemicelulosa 43.5676.
2. Las condiciones ptimas de las variables operacionales son: masa de coronta

20 g, concentracin de H2SO4 7 %, temperatura 100 0C, tiempo de hidrlisis
1.5 h, masa de levadura 12 % y tiempo de fermentacin 8 das.
3. Mediante anlisis Cromatogrfico se identific la presencia de bioetanol con

tiempo de retencin de 2.413 minutos.
4. Con la optimizacin de las variables se obtiene 24 % de conversin y 30 % de

rendimiento para el proceso global, equivalente a producir 5, 783,834.59 barriles
de bioetanol anuales con los 3, 207,050 toneladas de residuo generado, esto
compensa en 53 % la demanda anual de hidrocarburos en Nicaragua.

CAPTULO VII:
RECOMENDACIONES
Con base a las conclusiones de este estudio se recomienda:
1. Incrementar los niveles de temperatura por encima de los 100 0C en la etapa de

hidrlisis para aumentar el porcentaje de conversin y rendimiento.
2. Usar cultivo de levaduras mixtas (Pichia Stipitis, Saccharomyces Cerevisiae) en

el proceso de fermentacin, para convertir todos los azcares reductores en
alcohol.
3. Cuantificar los azcares reductores especficos (glucosa, xilosa, manosa,

arabinosa)
4. Evaluar otros tipos de hidrlisis (trmicas a condiciones supercrticas) con el fin

de mitigar la contaminacin ambiental provocada por la hidrlisis cida.
5. Utilizar la lignina generada en el proceso para obtener otros productos de inters

industrial (hidrocarburos aromticos).
6. Realizar este estudio a todos los residuos agroindustriales del maz (brctea, hoja
y caa).

.
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ANEXOS
Anexo: 1
1.1 Zonificacin ecolgica del cultivo de maz
Tabla 1.1 Zonificacin ecolgica del cultivo del maz (Zea Mays L)
poca de
Regin Aptitud Localidad
siembra
ptima Jalapa, Jcaro, Quilal Primera
San Fernando, Estel, Pueblo Nuevo, Primera y
I Buena
Casa Blanca Postrera
Regular Condega, Somoto, Ocotal, Yal Primera
Chichigalpa, Posoltega, El Viejo,
Buena Primera
Chinandega
II
La paz Centro, El Sauce, Nagarote,
Regular Primera
Somotillo
III Regular Zambrano Primera
Masaya, Nindir, Las pilas, Los Altos,
ptima Primera
Cofrada
IV
Nandaime, Tola, Diriamba, Nancim,
Buena Primera
Veracruz, Ometepe, San Marcos
Postrera y
V Buena Nueva Guinea, El Caracol, Yolaina
Apante
Pantasma, Sucal, Samulal, San Dionicio,
VI ptima Primera
Wiwil.
Fuente: (Loasiga, 2007)

Anexo: 2
2.1 Caractersticas agronmicas de variedades de maz en Nicaragua
Tabla 2.1 Caractersticas agronmicas de variedades de maz recomendados en
Nicaragua
Das a
Das
Variedades cosecha Rendimiento Regin
a Procedencia
e hbridos (ciclo qq/mz recomendada
flor
vegetativo)
Mejoradas
NB-100 45 95 40-50 II,III,IV P.N.M
NB-6 56 110 60-70 II, III, IV P.N.M
NB-12 56 110 55-65 II,III,IV,IV P.N.M
NB-30 50 100 45-50 II,III, IV P.N.M
Hbridos
B-833 65 130 70-80 I, V, VI DEKALB

HS-5 57 115 80-85 I, V, VI AGROMER
Fuente: (Loasiga, 2007)

Anexo: 3
3.1 Mtodos de Siembra en Nicaragua
Esta prctica agrcola se hace de acuerdo al sistema de produccin que tiene

cada regin. Es importante mantener la estructura fsica, qumica y biolgica del
suelo, que determinan la fertilidad, erosin, infiltracin y almacenamiento de agua,
as como el desarrollo y proliferacin de las malezas y el crecimiento del sistema.
La labranza se puede realizar de forma manual, al espeque, con animales de tiro e
implementos sencillos o de forma motorizada, con tractores e implementos ms
complejos en su construccin y operacin (INTA, 2015).
3.1.1 Labranza Manual o con espeque
Esta se efecta especialmente en terrenos con pendientes mayores al 20%,

utilizando para ello el chuzo o espeque para hacer un hueco en el suelo y depositar
la semilla. El distanciamiento entre surco oscila entre 0.80 a 0.90 cm y; entre
posturas, 0.40 a 0.50 m, depositando 2 semillas en cada una de ellas, para obtener
una densidad de 50,000 plantas por hectrea (43,750 plantas/mz). La poblacin
ptima para una produccin satisfactoria es 65,000 plantas/ ha (45,000 plantas/mz)
que se obtiene con un distanciamiento entre surco de 0.8 m a 0.40 cm entre postura
y dos plantas por postura (INTA, 2015).
3.1.2 Mecanizada o con traccin animal
Este mtodo se utiliza en terrenos de topografa plana a semiplana, donde

tanto la preparacin del suelo como la siembra pueden ser mecanizadas. Se puede
tambin realizar la preparacin de suelo (arado, rastra) con maquinaria; luego,
surcar con bueyes y sembrar en forma manual, dejando un distanciamiento entre
surco de 0.80 a 0.90 cm, y 0.40 a 0.50 cm entre postura, depositando 2 semillas en
cada una.

Cuando las reas son ms grandes, la siembra se efecta con maquinaria,

con un distanciamiento entre surco igual que el anterior, la sembradora deposita de
10 a 12 semillas por metro lineal, efectuando posteriormente un raleo para dejar un
distanciamiento entre plantas de 0.20 a 0.25 cm. En ambos sistemas, la densidad
puede variar entre 50,000 a 60,000 plantas por hectrea (35,000-40,000
plantas/mz).

Anexo: 4
4.1 Morfologia del maz
Figura 4.1 Morfologa de la planta de maz
Fuente: Estructurado por autoras

Figura 4.2 Hojas de la planta de maz Figura 4.3 Pednculo de maz
Fuente: (Morfologa del maz , 2012) Fuente: (Ciclo del maz, 2012)
Figura 4.4 Brctea o tuza de maz Figura 4.5 Coronta (olote)
Fuente: (Montiel, Fotografa tomada en Finca Montiel, 2015)
Figura 4.6 Granos de maz
Fuente: (Variedades y razas del maz , 2014) Fuente: (Cardoza, 2006)

Anexo: 5
5. Requerimientos Nutricionales del Maz
5.1 Nitrgeno
La demanda de Nitrgeno aumenta conforme la planta se desarrolla; cuando

se aproxima el momento de la floracin, la absorcin de este elemento crece
rpidamente, en tal forma que al aparecer las flores femeninas, la planta ha
absorbido ms de la mitad del total extrado durante todo el ciclo. Los hbridos de
alto rendimiento en grano necesitan unos 30 kilogramos de Nitrgeno por cada
tonelada de grano producida (Marenco, 2010).
5.2 Fsforo
Aunque la cantidad de Fsforo en la planta de maz es baja en comparacin

con el Nitrgeno y el Potasio, este es un elemento importante para la nutricin del
maz y las mayores concentraciones se presentan en los tejidos jvenes. Tambin
este elemento es importante para el desarrollo radicular. La cantidad de Fsforo
extrada por las plantas en condiciones normales de cultivos es aproximadamente
10 kilogramos por tonelada de grano cosechado (Marenco, 2010).
5.3 Potasio
Este micronutriente es esencial en los procesos metablicos, juega un rol clave

en la fotosntesis, promueve la sntesis, translocacin y el almacenamiento de
carbohidratos y optimiza la regulacin hdrica en los tejidos vegetales. Estas
mltiples funciones del potasio hacen que sean numerosos los efectos positivos de
la fertilizacin potsica: promocin del crecimiento radicular, aumento en la
resistencia a la sequa y bajas temperaturas, disminucin a la incidencia de plagas

y enfermedades, reduccin de la tendencia al vuelco, todos estos efectos explican

por qu el potasio aumenta el rendimiento y la calidad del cultivo (Imas, 2012).
5.4 Fertilizacin
El maz es muy exigente en elementos nutritivos, comparado con otros

cultivos, por lo que en un plan de fertilizacin se debe tomar en cuenta los resultados
del anlisis qumico del suelo y su recomendacin, esto le garantiza suplir de los
elementos nutritivos necesarios a la planta y evitar gastos innecesarios. El mtodo
de aplicacin del fertilizante ms recomendable es por postura e incorporado;
aunque existen otros, tales como: postura superficial y en banda. Para mejores es
indispensable que exista buena humedad en el suelo. De no contar con el anlisis
de suelo se recomienda uno de los planes siguientes (Imas, 2012).
5.4.1 Para suelos de textura fina (francos y franco-arcilloso)
Aplicar 325 kg/ha de frmula 16-20-0 (5 qq/mz) a la siembra, u ocho das

despus de siembra, como primera fertilizacin: la segunda, hacerla con 253 kg/ha
(4 qq/mz) de Sulfato de Amonio o 116 kg/ha (180 lb/mz) de Urea, a los 30 das
despus de siembra.
5.4.2 Para suelos de textura gruesa (arenosos)
Aplicar como primera fertilizacin, 325 kg/ha de frmula 16-20-0 (5 qq/mz) a

la siembra, o hasta ocho das despus de la siembra. Una segunda fertilizacin a
los 30 das despus de siembra con 130 kg/ha (2 qq/mz) de Sulfato de Amonio. En
una tercera fertilizacin, 45 das despus de la siembra, se deben aplicar 65 kg/ha
(1 qq/mz) de Urea.

Anexo: 6
6.1 Principales malezas que afectan el cultivo de maz
Tabla 6.1 Principales malezas que afectan el cultivo de maz
Tipo de maleza Gnero y Especie Nombre Comn
Baltimore recta
Flor amarilla
Bidens pilosa
Mozote, mozote negro
Flor amarilla, hierba de chucho

Melampodium divaricatum
Physalis sp Tomatillo, farolito
Amaranthus spinosus Bledo o gisquilite

Hoja ancha
Ageratum conyzoides Santa Luca, mejorana
Euphorbia hirta Golondrinilla, hierba de sapo
Boerhavia erecta Palo de leche
Ipomoea sp Campanilla
Portulaca oleracea Verdolaga
Sida sp Escobilla
Zacate amargo, pasto de

Eleusine indica
gallina
Digitaria sanguinalis Salea

Hoja angosta
(gramneas)
Ixophorus unixetus Zacate de agua
Cynodon dactylon Pasto bermuda, barrenillo
Sorghum halepense Zacate Johnson


6.2 Control de malezas

6.2.1 Mecnico
Consiste en realizar labores manualmente (con cuma, azadn) o mecanizada

(con cultivadora adaptada a un tractor), dependiendo del tipo de terreno. Si las
malezas se combaten mecnicamente, se deben efectuar dos limpias durante los
primeros 30 das de crecimiento del cultivo, en forma superficial, sin daar el sistema
radicular del cultivo (Flores, 2012).
6.2.2 Qumico
Consiste en aplicar herbicidas solos o mezclados inmediatamente despus de

la siembra (pre siembra) o pos emergencia, cuando las malezas tengan dos o tres
hojas. Este control tiene la ventaja de evitar daos al sistema radicular de las plantas
(Flores, 2012).
En la siguiente tabla se presentan algunos herbicidas con sus respectivas

dosis, que pueden ser utilizados en el control de malezas en el maz, con sus
respectivas dosis. Al aplicar estos productos, se debe ser tener cuidado, ya que sus
dosis varan con la edad de las malezas, tipo de suelos, contenido de materia
orgnica, as como de las condiciones climticas del lugar (temperatura, viento y
otras) (Flores, 2012).

Tabla 6.2 Control qumico de malezas en el cultivo de maz

Dosis
Herbicida o poca de Malezas
Producto Observacin
mezcla aplicacin controladas
Comercial
Pre emergente Dicotiledneas y Aplicar antes que emerja el cultivo y malezas. Su

0.5-1.0
Diuron a cultivos y gramneas accin es menor en suelos con alto contenido de
kg/mz
malezas anuales P2O5. No usar en suelos livianos tiene accin total.
Dicotiledneas y Aplicar antes que emerja el cultivo y malezas. Su

0.7-1.0 Pre emergente
gramneas accin es menor en suelos con alto contenido de
Alachlor (4 EC) L/mz a cultivos y
anuales P2O5. No usar en suelos livianos y percola. Tiene
malezas
accin total.
Pre emergente
y pre siembra Gramneas Acta por va al suelo. Tiene residualidad en el suelo
1.5-2.5 anuales
Alachlor (4EC) incorporada por un perodo de 6 a 10 semanas.
L/mz
Gramneas
Pendimethalin difciles de Tiene accin residual en el suelo; se requiere de
500 1.5-2.5 Pre emergente controlar y humedad de campo en el suelo para activarse.
L/mz algunas Preferible usar solo en el sistema convencional.
dicotiledneas
Basagran Post Ciperceas y Acta por va al follaje, efectivo en estados

1.5-2.5
emergente a Dicotiledneas tempranos de dicotiledneas.
L/mz

cultivos y
malezas
Post
Acta por va del follaje. Es sistmico, efectivo en
Glifosato 1.0-2.0 emergente Todo tipo de
cero labranzas y se deben esperar cinco das para
35.6% L/mz a la maleza y malezas
sembrar.
Pre al cultivo
1.5-3.0
Glifosato 24% Idem Glifosato Idem Glifosato Idem Glisofato
L/mz
Cuando las malezas estn pequeas y el maz tenga
una altura de 15 cm, dirigir la aplicacin dentro de
surco para evitar contacto con el cultivo. Evitar
0.25-1.0 Post Dicotiledneas
2,4-D Amina acarreo por el viento hacia cultivos susceptibles.
L/mz emergente y Ciperceas
Evitar el uso del equipo de aspersin del 2,4-D para
aplicaciones de insecticidas y fungicidas en cultivos
susceptibles.
Post
2,4-D 1.0-1.5 emergente a Dicotilednea
Idem 2,4-D Amina
+Dicamba L/mz cultivos y y Ciperceas
malezas
Dicotilednea,
Fenoxiacetico Post Ciperceas,
1.0 kg/ha Idem 2,4-D Amina
80 SP emergente Ipomoea
(Bejucos)

Anexo: 7
7.1 Plagas y enfermedades que atacan el cultivo de maz
Tabla 7.1 Plagas del suelo en el cultivo de maz
Nombre comn Nombre cientfico Dao Control
Tratar la semilla
Se alimentan de
con insecticidas
- Gallina ciega las races y base
- Phyllophaga spp como:
- Chorontoco del tallo por lo que
- Anomala spp carbosulfan en
- Oruga, gusano causan la
- Ciclocephala spp dosis de 225
blanco marchitez y
- Lygirus sp gramos/25
- Joboto muerte de la
libras de semilla
planta
Se alimentan de Imidacloprid en
las races y base dosis de 136 g/30
- Gusano de - Metanotus sp del tallo, causan Libras de semilla
alambre Aeolus sp la marchitez y Thiodicard 1 L/46
muerte de la kg de semilla. 250
planta cc/25 lb de semilla
Los productos
anteriores son
especficos para
Daa los granos usarse en
prximos a tratamiento
- Blapstinus sp
germinar y las a la semilla, pero
- Piojo de zope - Ulus sp
races de las puede utilizarse
- Epitragus sp
plntulas se productos
doblan y mueren granulados al
suelo como
foxim, 64/ha (100
lb/mz)
-Gusano Se alimentan de
12 a 18 kg/ha.
- Cuerudo las races y base
- Agrotis sp Clorpirifos, 9-13
- Tierreros, del tallo, causan
- Feltia sp kg/ha (15-20
hacheros la muerte de la
lb/mz)
y cortadores planta
Fuente: (Alvarado, 2007)

7.2 Insectos y plagas de follaje
A continuacin, se presentan los principales insectos y plagas que atacan el

follaje y que son de inters econmico en el cultivo de maz variedad HS-5
7.2.1 Gusano cogollero (Spodoptera frugiperda)
Es una plaga universal de importancia econmica, dependiendo de algunos

factores como la edad de la planta, estadio de plaga, condicin del clima, as es la
severidad del ataque. Cuando el clima es caliente y seco, las larvas completamente
desarrolladas, que han cado al suelo antes de convertirse en pupas, empiezan a
alimentarse en la base de la planta, cercenando el tallo tierno. En perodos de
sequa su presencia y accin puede ser fatal.
Dao: corta el tallo cuando las plantas recin

emergen y cuando estn bien desarrolladas, la
desfolian; puede atacar la flor masculina, lo cual provoca
interrupcin del proceso normal de polinizacin. Tambin
ataca perforando la mazorca tierna por lo que se conoce
como gusano elotero.
Fig 7.111 (Trujillo, 2013)

7.2.2 Tortuguillas (Diabrotica sp, Acalymma sp, Cerotoma sp, Colaspis sp)
Dependiendo de su densidad poblacional puede

tener poca o mucha importancia, especialmente como
adultos en las plntulas y como larvas en las races.
11 Daos causados en el follaje por los gusanos cogolleros llegan hacer muy evidentes
12 Larvas de tortuguilla

Dao: Los adultos comen el follaje, pueden daar los

estigmas de la flor femenina (jilote), afectando la
polinizacin, lo cual provoca un mal llenado de grano en la
mazorca; las larvas o gusanos pueden taladrar las races, lo
que puede resultar en tallos deformados (curvos o
inclinados).
13
7.2.3 Chicharrita del maz, cigarrita (Dalbulus maydis)
Dao: Los adultos y ninfas chupan la savia en la base

de las hojas y pueden causar amarillamiento, pero su
principal afectacin estriba en que son transmisores de los
virus que provocan el achaparramiento y el rayado fino del
maz. La mayor incidencia de estos problemas se da en
zonas bajas.
14
7.2.4 Gusano medidor (Mocis latipes), falso medidor (Trichoplusia ni)
Esta plaga tiene importancia relativa, ya que su aparicin es espordica y

localizada; cuando aparece puede provocar serios daos al follaje como
perforaciones.
13 Tortuguilla alimentndose de los mrgenes foliares

14 Chicharrita adulta (Dalbulus maidis) transmisora del virus de achaparramiento

Anexo: 8
8.1 Enfermedades que afectan el cultivo de maz Variedad HS-5
8.1.1 Roya comn (Puccinia sorghi)
Enfermedad ampliamente difundida,

alcanza mayor importancia cuando las plantas
se acercan a la floracin. Se le puede
reconocer por las pstulas pequeas y
pulverulentas, en ambos lados de la hoja
(Mendoza, 2012).
Fuente: (Mendoza, 2012).
8.1.2 Mancha foliar por Curvularia (Curvularia lunata)
Enfermedad causada por hongos, los
cuales producen manchas pequeas necrticas
o clorticas con una aureola de color claro. La
enfermedad est generalizada en las zonas
maiceras, clidas y hmedas, donde puede
causar daos considerables en la variedad en
estudio (Mendoza, 2012).
Fuente: (Mendoza, 2012).

8.1.3 Mancha caf (Physoderma maydis)
Ocurre en lugares con precipitacin pluvial

y temperaturas altas; ataca las hojas, los tallos y
algunas veces hasta las brcteas de la mazorca.
El control para esta enfermedad no se ha
establecido; aunque se han realizado
investigaciones para ello, slo se tienen trabajos
relacionados con la resistencia gentica. (Mendoza, 2012).

8.1.4 Achaparramiento del maz (Micoplasma helicoidal o Spiroplasma)
Es una enfermedad transmitida por la

chicharrita del maz (Dalbulus maydis), cuyo
sntoma se manifiesta, como su nombre lo indica,
por el enanismo o achaparramiento de la planta.
Esta enfermedad provoca tambin el

acortamiento de los entrenudos, ramificacin
excesiva de las races, proliferacin de mazorcas
estriles lo que reduce la produccin y en casos
severos, la planta muere. Se recomienda sembrar
hbridos resistentes a la enfermedad (Mendoza,
2012).
8.1.5 Pudricin de mazorca por Nigrospora
La variedad en estudio es resistente a esta

enfermedad, sin embargo en la siguiente imagen se
muestran los daos que causa en otras variedades
de maz por ejemplo el maz amarillo. Las mazorcas
se disecan (momifican) y tienen poco peso; los
granos se manchan y se desprenden fcilmente del
olote. Esta enfermedad es una de las que afecta
directamente la coronta.

Anexo: 9
9.1 Caractersticas que debe presentar la mazorca para la recoleccin
mecanizada
1. Altura de insercin de la mazorca no debe ser muy alta. Si esta es muy alta, los
rodillos de la mquina debern de recorrer una gran longitud de tallos, pudiendo
producir atascos
2. Homogeneidad en la altura de insercin
3. Dureza del tallo en la regin donde se asienta la mazorca, lo que facilita su
ruptura
4. Espesor y cobertura de las brcteas
5. Grosor de la mazorca.
9.2 Extraccin del grano manual y mecanizado
9.2.1 Extraccin manual
Esta operacin consta de dos etapas, la primera consiste en la extraccin

manual de la tuza con la ayuda de un cuchillo hacen una insercin desde la capa
externa de la mazorca atravesando la brctea (tuza) hasta la capa ms interna de
esta, luego ejercen fuerza y extraen la tuza y algunos residuos de pelaje, de tal
forma que la mazorca queda lista para la segunda etapa.
La segunda etapa consiste en la aporrea de la mazorca para finalmente extraer

el grano, es esta operacin fsica se hace uso de una hamaca de nylon la cual es
sujetada de cuatro extremos firmes y dentro de la hamaca se introducen las
mazorcas y con un pedazo de madera firme dan golpes a las mazorcas, y por los
orificios de la hamaca salen los granos que caen en una tela, en la hamaca quedan
nicamente las corontas que luego los almacenan es sacos de polietileno o son
desechados. En las imgenes siguientes se ilustra esta operacin.

Figura 9.2.1 Recoleccin del maz despus de separarlo de la planta
Fuente: Capturada por autoras en Finca Montiel
Figura 9.2.2 Residuos de maz que quedan en el campo despus de la

recoleccin de la mazorca
Figura 9.2.3 Extraccin manual de la tuza de maz

Figura 9.2.4 Extraccin manual del grano de maz
Figura 9.2.5 Residuo agroindustrial (coronta) que es generado despus de la

extraccin manual del grano de maz
9.2.2 Extraccin mecanizada
Esta forma de recoleccin del maz, es realizada por los grandes productores
que siembran en terrenos planos, los cuidados que se deben tener son: que el grano
haya alcanzado la madurez fisiolgica, que tenga el 20% de humedad o menos,
planto limpio de malezas; ambiente seco a fin de que la tuza se separe fcil y no
transmita humedad al grano, en las siguientes imgenes se presenta el desgrane
mecnico.

Figura 9.2.6 Extraccin mecnica del maz
Puede observarse en las imgenes que hay diferencia entre la extraccin

manual y mecanizada, en la primera los residuos tuza y olote se separan en dos
cmulos, mientras que en la mecanizada la mazorca se deposita en la tolva del
tractor y hay una separacin, por la parte inferior sale el grano de maz y por un tubo
superior salen los residuos tuza y olote.
Figura 9.2.7 Residuos generados (tuza y olote) en la extraccin mecnica

Anexo: 10
10.1 Estructura y composicin qumica del material lignocelulsico
Figura 10.1.1 Vista general de la estructura y composicin qumica de la biomasa
Fuente: (Bidlack, Malonge, & Benson, 2000)
Figura 10.1.2 Estructura primaria de la celulosa

Figura 10.1.3 Unidad de celulosa mostrando los grupos ms voluminosos en

posicin ecuatorial y los hidrgenos en la axial
Figura 10.1.4 Fibrilla elemental o micela
Figura 10.1.5 Estructura de una microfibrilla
Fuente: (Ballesteros, Negro, & Oliva, 2006)

Figura 10.1.6 Representaciones de Haworth de las principales hexosas presentes

en la hemicelulosa
Figura 10.1.7 Representaciones de Haworth de las principales pentosas

Figura 10.1.8 Representaciones de Haworth de las principales pentosas


Figura 10.1.9 Subestructuras de la lignina donde muestran enlaces tipo ter -O-4
y formas condensadas

Anexo: 11
11.1 Caractersticas del etanol de primera y segunda generacin
Tabla 11.1 Caractersticas del etanol de primera y segunda generacin
Primera Generacin (1G) Segunda Generacin (2G)
Almidones (papa, yuca, maz y trigo) y

Celulosas (madera, aserrn, pastos y
azcares (caa de azcar, melazas,
residuos agrcolas como la coronta de
remolachas y sorgo dulce)
maz)
Caractersticas Caractersticas
Pueden utilizarse mezclados con un Es una de las materias primas ms

bajo porcentaje de combustibles prometedoras para la produccin de
convencionales biocombustibles
La productividad de la biomasa es ms
elevada en un entorno tropical y los
costos de produccin de
Es la forma ms sencilla para el sector
biocombustibles, son
del transporte
comparativamente bajos en algunos
pases en desarrollo
El uso de cosecha de material

Los consumidores sufren celulsico no compite con los precios
consecuencias importantes en el precio de la alimentacin, son bajos los costos
de su canasta familiar a menos que se de la materia prima; el uso de tierras
planifique adecuadamente la marginales para el crecimiento de la
produccin de biocombustibles materia prima, menos fertilizante y
menos uso de agua
El etanol producido de los jugos de la
caa de azcar o del maz reduce los El etanol celulsico reduce los gases
gases efecto invernadero en un 14% de efecto invernadero en 89%.
Fuente: (Madrigal, 2005)

Anexo: 12
12.1 Ventajas de los tipos de pretratamientos
Tabla 12.1 Ventajas y desventajas de los diferentes tipos de pretratamiento para

materiales lignocelulsicos
PRETRATAMIENTO FSICO
PRETRATAMIENTOS MECNICOS
Mtodo Ventajas Desventajas
La reduccin de tamao de A pesar de no producirse
partculas lleva a un aumento de inhibidores (como furfural y HMF),
superficie especfica y una la molienda es ideal para la
reduccin del grado de produccin de bioetanol, sin
polimerizacin (DP). embargo, esta operacin requiere
de alto consumo energtico por lo
El incremento del rea superficial tanto econmicamente no es
especfica, reduce DP, este es un viable (Fan L.T. G. M., 2000).
Trituracin factor que incrementa los
mecnica rendimientos de la hidrlisis entre Teniendo en cuenta las
el 525% (dependiendo de la clase necesidades de alta energa de
de biomasa, clase y duracin de la molienda y el continuo aumento
molienda). de los precios de la energa, es
probable que la molienda no sea
As mismo disminuye el tiempo de el pretratamiento ms viable.
digestin entre el 2359% donde
se incrementa la velocidad de la
hidrlisis
El efecto sobre la biomasa es muy

Ultrasonido superficial.
PRETRATAMIENTOS TRMICOS
Aumenta la hidrlisis de la Destruccin de una parte de los
Explosin de celulosa de 80 al 100% xilanos de las hemicelulosas
Alta concentracin de slido Incompleta rotura de la matriz
vapor
Reduccin del tamao con lignina-carbohidratos
menor gasto energtico

Despolimerizacin baja de la Generacin de inhibidores que

celulosa y recuperacin fcil de afectan el proceso de
esta por lavado fermentacin
La lignina inalterada se puede Debe combinarse con H2SO4,
extraer,reporta un incremento SO4 o CO2 para mejorar la
en la digestibilidad enzimtica eficiencia
de la biomasa despus de este Existe el riesgo de produccin
pretratamiento. de compuestos fenlicos
soluble
Puede darse la condensacin y
precipitacin de compuestos
soluble de lignina haciendo la
biomasa menos digestible,
reduciendo la produccin de
etanol (Hendriks, 2009).
Se recuperan la mayora de las Debido a las bajas
pentosas concentraciones se reduce el
Hidrlisis de la hemicelulosa de riesgo de degradacin de
Agua 80 al 100%
caliente productos como furfural y la
Baja o nula formacin de
lquida inhibidores condensacin y la precipitacin de
presurizada Respecto al pretratamiento con compuestos de lignina (Hendriks,
(LHW) vapor, este tiene la ventaja de 2009).
solubilizar productos de
hemicelulosa y lignina en
concentraciones ms bajas.
PRETRATAMIENTOS FSICO-QUMICOS
No se producen inhibidores No se solubiliza la
No requiere pequeos hemicelulosa
tamaos de partcula para La composicin del material
Proceso de aumentar su eficiencia. sometido a este proceso
explosin de prcticamente no cambia
fibra con Slo es aplicable y efectivo
amoniaco hasta un 90% en materiales
(AFEX) con contenidos de lignina
menores a 15%
Requiere recuperacin del
amoniaco.
Es ms barato que la explosin Rendimientos relativamente bajos
Explosin con amoniaco comparados con la explosin por
con CO2 No origina los compuestos vapor y el proceso AFEX.
inhibitorios que se originan

durante la explosin por vapor

(Zheng Y. Z., 2000).
PRETRATAMIENTOS QUMICOS
cidos concentrados: se cidos concentrados:
obtienen rendimientos de hidrlisis Requiere altos volmenes de
superiores al 90%. cido
Altos costos de la recuperacin
del cido
cidos diluidos: bajo consumo
Los efectos corrosivos de los
de cidos; hidrlisis del 80-100% cidos concentrados conllevan
de la hemicelulosa; la temperatura a altas inversiones en los
alta favorece la hidrlisis de la equipamientos
celulosa. Es necesaria una costosa
etapa de neutralizacin antes
de la fermentacin
Existe el riesgo de formacin
Prehidrlisis de inhibidores.
cida
cidos diluidos:
Requiere altas temperaturas para
alcanzar rendimientos aceptables
de conversin de celulosa a
glucosa.
A pesar de las temperaturas altas

y tiempos de residencia cortos
que generan mximos
rendimientos en glucosa, tan slo
han logrado el 60% en torno al
rendimiento terico.
Tratamientos La eliminacin efectiva de la Altos costos por la cantidad de
lignina ozono requerido.
con ozono
No origina productos inhibidores
No genera productos de Durante un pretratamiento
Oxidacin degradacin como el furfural, y oxidativo se pierden cantidades
hmeda HMF. considerables de azcares,
porque no es un proceso

selectivo. As tambin se forman

los compuestos solubles de
lignina, lo que puede dar lugar a la
inhibicin en la conversin
posterior de hemicelulosa en
etanol (Hendriks, 2009).
Tratamiento Solubilizacin de la lignina e Para reducir costos y evitar
con hidrlisis de la hemicelulosa casi problemas en la posterior etapa
solventes total. de fermentacin, se deben
orgnicos reciclar los solventes.
PRETRATAMIENTOS BIOLGICOS
Bajo requerimiento energtico, La tasa de hidrlisis es demasiado
Tratamiento
produccin del proceso a lenta.
con hongos
condiciones ambientales.
Fuente: (Fan L.T., 2000)

Tabla 12.2 Tipos de inhibidores y sus efectos sobre el proceso
Clasificacin Efectos Observaciones

Reduccin de la Los efectos producidos por el HMF
tasa especfica de son menores que el furfural, pero
crecimiento son los mismos. El furfural inhibe la
Disminucin de la
alcohol deshidrogenasa,
productividad
volumtrica y induciendo la formacin de
especfica de acetaldehdo.
Furfural e
etanol En anaerobiosis el furfural se
hidroximetilfurfural
Disminucin de la degrada a alcohol furfurlico y
(HMF) produccin de furoico.
biomasa
Producen daos
en la membrana
plasmtica celular
Inhiben la accin
de enzimas.
Descenso del El mecanismo de inhibicin de
rendimiento del estos es an confuso. Existen
etanol teoras tales como:
cidos alifticos:
Disminucin de la
- cido 4-hidroxibenzoico Del acoplamiento acumulacin
produccin de
- cido vainllico biomasa intracelular de aniones.
- cido sirngico Reduccin de la
- cido actico tasa especfica de
crecimiento
Muerte celular.
Dao en la Son los ms txicos para los
membrana microorganismos. Su efecto
plasmtica celular inhibitorio es an desconocido; al
Descenso del
parecer afecta la clula alterando
rendimiento en
Compuestos fenlicos: su especificidad. Se cree que
etanol
- Vainillina Disminucin de la actan de manera similar que los
- Siringaldehdo produccin de alifticos.
- Guayacol biomasa
Reduccin de la
tasa especfica de
crecimiento
Muerte celular
Fuente: (Snchez, Gitierrez, Muoz, & Rivera, 2010)

Anexo: 13
13.1 Mtodos fsicos y qumicos para la detoxificacin de sustancias inhibidoras
Tabla 13.1 Mtodos fsicos y qumicos para la detoxificacin de sustancias inhibidoras
Microorganismos que
Mtodo Descripcin Componentes que degrada
degrada
Emplea hidrxidos de cualquier tipo, Furfural, HMF, cido actico. En E.Colli, Z.mobilis, P.Stipitis,
por ejemplo Hidrxido de Sodio e baja proporcin los azcares S.ceresviceae
Tratamiento con
Hidrxido de Potasio, con la adicin fermentables
hidrlisis
de estas bases se regula el pH para
la fermentacin cuyo valor es de 5-6
Ca(OH)2, pH= 9-10.5, luego el pH es cido actico, furfural y S. ceresviceae
Overliming ajustado a 5.5-6.5 con H2SO4 o HCl compuestos fenlicos recombinante y E. colli
recombinante
Debe realizarse a pH bajo. Es poco Furfural, cido actico y cido S.ceresviceae; P.stipitis
Evaporacin efectivo frmico. No elimina HMF, cido
levunlico y compuestos fenlicos
Carbn Su efectividad depende del tipo de Algunos iones de metales y S.ceresviceae
activado material a tratar compuestos orgnicos
Obtenido a partir de madera de abeto Furfural, HMF y derivados S.ceresviceae
Carbn vegetal
a 600 0C fenlicos
Resinas de Se emplean tanto catinicas Fenoles, seguido de furanos y Z.mobilis,
intercambio como aninicas (mejores a pH cidos alifticos. Recombinante Y S.
inico 10). Tienen alto costo. Ceresviceae.

Son minerales naturales o sintticos, Metales txicos:

de estructura tridimensional. Poseen cromo, cobalto,
Utilizacin de alto intercambio inico, notable Nquel.
zeolitas superficie especfica y lugares
activos que permiten actividad
cataltica.
cido actico, furfural, vainillina, S. ceresviceae;
Solventes Orgnicos (dietil ter, etil
acetato, 3:1 Fase orgnica: Tasa cido hidroxibenzoico, y P. stipitis
Extraccin fase acuosa volumtrica compuestos fenlicos de bajo
peso molecular. Remocin de
furanos
Emplea membranas (NF o NK), cido actico P. stipitis
operadas bajo presin y retienen
Nanofiltracin
solutos de bajo peso molecular (1000
daltons).
Fuente: (Lamac & Brush, 2002)

Anexo: 14
14.1 Ruta metablica de la produccin de etanol
Figura 14.1 Ruta metablica de la produccin de etanol en S. cerevisiae
Fuente: (Sierra , Contreras , & Guerrero, 2012)

Anexo: 15
UNAN-MANAGUA
FACULTAD DE CIENCIAS E INGENIERIAS
15.1 Entrevista realizada a productores de Finca Montiel
En pro de la realizacin del trabajo monogrfico estudiantes de la carrera

Qumica Industrial de la Universidad Nacional Autnoma de Nicaragua UNAN-
Managua, le solicitan responder las siguientes preguntas, en base a su experiencia
como productor en el ciclo agrcola 2014/2015 y los ciclos anteriores.
1. Qu cantidad de maz sembr y en cunto espacio de terreno?

2. Qu semilla eligi para la siembra?
3. De acuerdo a qu criterios seleccion la semilla?
4. En qu mes del ao inici la siembra?
5. Cules fueron las plagas y enfermedades que afectaron el sistema de siembra?
6. Qu insecticidas utiliz en todo el proceso productivo? Explquelo por etapas
7. Cul fue el sistema de fertilizacin que us?
8. Qu parte de la planta result ms afectada por las plagas y enfermedades?
9. Se redujo la produccin de este ao en relacin a los aos anteriores?
10. Qu cantidad de maz cosech en este ciclo agrcola?
11. Qu tipo de extraccin del grano realiz: (manual o mecnica)?

Tabla 15.1 Resultados de la entrevista realizada a productores de Finca Montiel
Productor Productor Productor Productor Productor Productor Productor Productor Productor

N0 Caracterstica
1 2 3 4 5 6 7 8 9
Cantidad de maz
70 lb/1.5 15 lb/0.5
1 sembrada/espaci 8 lb/1/4 mz 18 lb/3/4 mz 10 lb/1/4 mz 20 lb/0.5mz 20 lb/1/4 mz 40 lb/1.5 mz 30lb/0.5mz
mz15* mz
o de terreno
2 Tipo de semilla HS-5 HS-5 2G HS-5 HS-5 Catacama HS-5 HS-5 HS-5 HS-5
Criterios de A su alcance
Rendimiento Rendimiento Rendimien No hubo
3 seleccin de Rendimiento Rendimiento Rendimiento no tuvo Rendimiento
Altura baja Altura baja to criterio
semilla prioridad
Mediados de Finales
4 Mes de siembra Finales Mayo 15 de Mayo Finales Mayo 18 de Mayo 10 de Junio Inicio Junio 15 de Mayo
Mayo Mayo
Plagas y
Gusano
enfermedades Gusano
5 Gusano Gusano Gusano Gusano Gusano Aves Gusano Gusano
que afectaron el medidor
Hormigas
cultivo
1.glifosato y
1. (2,4-D) 2,4- 1.Gramox
herbalade
1.Gramoxone diclorofenoxia one,Glifos
(preparacin 1.Gramoxon, 1.Herbicida, 1.Gramoxo
,Glifosato 1.Gramoxon 1.Gramoxon ctico. ato
del terreno) Glifosato Glifosato e, herbicida
(preparacin e, herbicida e, herbicida (Preparacin (preparaci
(preparacin (preparacin (preparaci
del terreno) (preparacin (preparacin del terreno). n del
2.MTD del terreno) del terreno) n del
6 Insecticidas del terreno) del terreno) terreno)
(plaga) terreno)
2. 2.Cemebn
2. Cipermitrina 2.Cambn
Cipermitrina 2.Cipermitrin 2.Cipermitri (hormiga) 2.
3.Carben- (plaga). (semilla 2.Cipermitri
(plaga). a (plaga) na (plaga) Cipermitri
dazim hormiga) na (plaga)
3. Cipermitrina na (plaga).
(hongo)
(gusano).
15 mz= manzanas unidad de medida de terreno

1.Inicio 1.Inicio 1.Inicio 1.Inicio 1. 1.Inicio

1. Completo 1. Completo 1. Completo
7 Fertilizacin 2.Refuerzo 2.Refuerzo 2.Refuerzo 2.Refuerzo Completo 2.Refuerzo
2. Urea 2. Urea 2. Urea
3.Urea 3.Urea 3.Nitro Extn 3.Nitro Extn 2. Urea 3.Urea
Parte de la planta Tallo,
Mazorca Olote, tallo, Mazorca Mazorca Mazorca Mazorca
8 con mayor Tallo mazorca Olote
(grano). raz (grano) (tuza) (grano) (grano)
afectacin (olote)
14 qq 10 qq
Comparacin de 75 qq*16 8 qq 10 qq 12 qq 14 qq 6 qq 60 qq (2014/201 (2014/2015
Produccin ciclo (2014/2015) (2014/2015) (2014/2015) (2014/2015) (2014/2015) (2014/2015) (2014/2015) 5) )
9
(2014/2015) 80 qq 10 qq 30 qq 20 qq 25 qq 17 qq 100 qq 35 qq 18 qq
(2014/2013) (2014/2013) (2014/2013) (2014/2013) (2014/2013) (2014/2013) (2014/2013) (2014/2013) (2014/201 (2014/2013
3) )
Tipo de
10 extraccin del Mecnica Manual Manual Manual Manual Manual Manual Manual Manual
grano
16 qq= quintales equivalente a 100 libras

Anexo: 16
16.1 Sistema de muestreo
16.1.1 Sistema de muestreo aleatorio simple
16.1.1.1 Objetivo de muestreo
Recolectar muestras de olote (coronta) de maz variedad HS-5, considerado

como un residuo agrcola de la finca Montiel en el ciclo agrcola 2014/2015.
16.1.1.2 Razn para efectuar el muestreo
Las muestras se recolectaron para obtener bioetanol a partir de material

lignocelulsico de la coronta del maz, la materia prima y el producto obtenido se
someti a diversas pruebas analticas y de control de calidad como porsentaje de
material lignocelulsico, azcares reductores, rendimiento y conversin.
16.1.1.3 Caractersticas a evaluar
El proceso para la obtencin de bioetanol es controlado en todas las etapas,

se inicia con el control de calidad desde el muestreo, considerando la recoleccin
de la materia prima, posteriormente el producto obtenido es sometido a pruebas
analticas y de control de calidad, como la determinacin de azcares reductores,
conversin y rendimiento etc.
16.1.1.4 Punto de muestreo
Departamento de Nueva Segovia, municipio El Jcaro, comarca El Natoso,

Finca Montiel, productor nmero 1.
16.1.1.5 Nmero de Muestras
Se recolectaron 8 muestras de coronta de 60 gramos cada una, el nmero 8

corresponde a las corridas experimentales a realizar de acuerdo al diseo de
experimento por el Mtodo Taguchi.

16.1.1.6 Tipo de envase
Bolsas de polietileno de baja densidad y colorantes, de tamao 16.5 cm x 14.9

cm.
16.1.1.7 Material anexo
Para colectar las muestras se utiliz: una tijera metlica con agarre de hule
para cortar los restos de tuza que tena la coronta, pana plstica para depositar las
muestras recolectadas, etiquetas, balanza, marcadores, cinta mtrica. Asi tambien
el equipo de proteccin para el muestreador fue: gabacha, botas, guantes de ltex,
y mascarilla.
16.1.1.8 Instrucciones para la toma de muestras
En primera instancia se prepar las bolsas para el muestreo con las etiquetas,
dejando libre el espacio para marcar en el campo la hora del muestreo. La
informacion de las etiquetas de muestreo se presenta a continuacin.
Tabla 16.1 Ficha Informativa de las etiquetas en las muestras

Identificacin CO-1 (Coronta, muestra 1)
Fecha de muestreo 10/01/2015
Lugar de muestreo Finca Montiel, Natoso, Jicaro, Nueva Segovia
Hora de muestreo 4:06 pm
Descripcin gentica Coronta HS-5 de Zea Mays L
0
N de experimento 1
Temperatura de toma de 25 0C
muestra
Parmetros analizar Caracterizacin Qumica y proceso hidrlitico
y fermentativo
Nombre y firma del Kiara Yanibeth Montiel Centeno
muestreador
Fuente: Propio
Para realizar el muestreo se hizo una entrevista a nueve agricultores de la

Finca Montiel considerada como la poblacin en estudio, de acuerdo a los

resultados de la entrevista, se eligi al productor nmero 1 con las mejores

condiciones de calidad y rendimiento en la produccin para realizar el estudio. De
70 libras de maz variedad HS-5 que sembr este agricultor en 1.5 mz de terreno,
obtuvo aproximadamente 10, 125 libras de residuo slido seco y 900 lb de coronta
que representan el 8.8 % del peso total de residuos slido.
En un rea de 10 m2, donde se encontraba la poblacin coronta de maz se

recolecaron las 8 muestras aleatoria de varias posiciones del rea y a profundidades
de 5, 50, 100 y 200 centmetros, las muestras se tomaron con las manos las cuales
estaban protejidas con guantes de ltex y se depositaron en las bolsas de polietileno
con contenido de 60 gramos cada una de las 8 muestras.
16.1.1.9 Preservacin y transporte de la muestra
Colocar la muestra en una caja de cartn a temperatura ambiente.
15.1.1.10 Anlisis de la muestra
% Celulosa
% Hemicelulosa
% Lignina
%Humedad
%Azcares Reductores
pH
% Rendimiento
% Conversin a Bioetanol
16.1.1.10 Desecho de la muestra
Del 100 % de la muestra qued un remanente de 54 % (el cual se almacen

en sobres de celulosa para posteriores anlisis).

16.2 Muestreo de coronta de maz

Figura 16.2.1 Tipo de envase y materia anexo
Figura 16.2.2 Seleccin y recoleccin de la coronta
Figura 16.2.3 Recoleccin final

Anexo: 17
17.1 Mtodo Taguchi
La idea de disear productos y procesos cuyo desempeo sea insensible a las

condiciones ambientales (robustez del sistema) y realizar esto en las etapas de
diseo a travs del uso de Diseo de Experimentos ha sido la piedra angular de la
metodologa Taguchi (s.a, Mayo,2007). Las fortalezas de la metodologa de Taguchi
son las siguientes:
Enfatiza en la calidad durante la etapa del diseo del proceso

Reconoce la importancia relativa de los factores que influyen en el desempeo
de los productos o procesos
Enfatiza en la reduccin de la variabilidad, por medio del uso de la funcin de
prdida y de la razn seal-ruido (existiendo una para cada objetivo que se
quiera lograr con el experimento)
Se concentra en el concepto de diseo de parmetros que sirvan para disminuir
la variabilidad en el desempeo de los productos
El modelo de Taguchi enfatiza la importancia de evaluar el desempeo bajo

condiciones de campo como parte del proceso de diseo y el hecho que la variacin
funcional en el desempeo est influenciada por los factores de ruido los cuales
varan en el ambiente en el que los procesos o productos estn funcionando (s.a,
Mayo,2007).
La filosofa Taguchi est basada en un modelo aditivo de los efectos principales

para la cual, la presencia de interacciones es algo indeseable y en caso que en el
proceso se encuentre una relacin de este tipo esta es tomada como parte del error
experimental (s.a, Mayo,2007).

Anexo: 18
18.1 Mtodos de anlisis para la caracterizacin fsico qumica de coronta de
maz variedad HS-5
18.1.1 Determinacin del porcentaje de Humedad (TAPPI T 211 om-85)
a) Materiales
Balanza analtica 0.1 mg

Horno 105 0C 30C
Desecador
b) Mtodo
Lavar las cpsulas de porcelana y llevarlas a peso constante

Pesar 1 g de coronta en las cpsulas el peso se anota como Ph
Secar la muestra en un horno a 1050C durante 24 horas
Dejar enfriar en el desecador
Cuando las cpsulas y muestras estn fras, anotar el peso como Ps
c) Expresin de los resultados
Se expresa como gramos de agua/gramos de materia hmeda
Ecuacin 18.1
Ph Ps
H
Ph
Donde:
Ph: Peso hmedo

Ps: Peso seco Fig 18.1. Muestras de coronta en
desecacin para determinar humedad

18.1.2 Determinacin del porcentaje de Cenizas con Extractivos (TAPPI T 211

om-85)
a) Materiales
Crisol de cermica
Mufla
Balanza analtica de 0.1 mg
b) Mtodo
Pesar 2 gramos de coronta en un crisol de peso conocido P 0

Introducir la muestra en una mufla calentndose lentamente hasta 100 0C,
aumentar la temperatura paulatinamente hasta 575 25 0C para carbonizar
toda la muestra
Cuando el residuo cese de carbonizarse djese que se calcine durante 3 h
ms, hasta que no haya partcula negra en el residuo
Enfriar el crisol a temperatura ambiente en un desecador
Pesar y anotar el peso Pc.
El contenido de cenizas se calcula como:
Ecuacin 18.2
Pc
% Cenizas x 100
Po
Dnde:
Pc = Peso de las cenizas (g)

Fig. 18.2 Cenizas de coronta
P0= peso anhidro de la muestra (g)

18.1.3 pH (TAPPI T 252 om-90)
El potencial de iones Hidrgeno se determina en las muestras de coronta con

extractivos.
a) Materiales
Matraz de ebullicin de 250 mL Pyrex 24/40

Vidrio reloj
Esptula
Refrigerante Pyrex 24/40
Fig 18.3.1 Sistema de
Mangueras reflujo para extraccin de
la muestra lquida
Manta calefactora
Termostato
Perlas de ebullicin
b) Mtodo
Mtodo de Agua Caliente.

Fig 18.3.2 Medicin de pH
Pesar 10 g de muestra (coronta de
maz)
Colocar los 10 g de muestra dentro de un matraz de ebullicin de 250 mL
Adicionar 100 mL de agua destilada y mezclar
Montar el equipo de reflujo y someterlo a este proceso durante 3 horas
Al finalizar las 3 horas, remover y tapar la solucin dejndola enfriar hasta 25
0C 10C.
Medir el pH con el pHmetro durante 3 minutos.

18.1.4 Preparacin de la muestra determinacin de porcentaje de extractivos

totales (TAPPI, 264 om-88)
a) Materiales
Balanza analtica
Vidrio de reloj
Beacker de 100 mL Pyrex, Clase A/0.05 mL
Probeta de 100 mL Pyrex, Clase A/1.0 mL
Baln de fondo redondo de 500 mL Pyrex, 24/40
Soxhlet BOWEL 24/40: baln, refrigerante, mangueras, pinzas, soporte
universal
Embudo Buchner
Matraz Kitazato de 250 mL Pyrex
Bomba succionadora al vaco
Mangueras
b) Reactivos
Agua destilada
Etanol (CH3CH2OH) 99.8 % ACS Merck
Benceno (C6H6) 99.7 % ACS Merck
c) Mtodo
Pesar 10 gramos de muestra molida y tamizada

Medir en una probeta 100 mL de etanol y 300 mL de benceno.
Depositarlos en un baln de 500 mL
Extraer solubles en Soxhlet por 6 horas con 400 mL de etanol-benceno (1:2
v/v) 100 mL de etanol y 300 mL de benceno.

Armar el montaje del equipo, depositando los 10 gramos en el dedal, iniciar

la extraccin durante 6 horas, con un sifoneo cada hora.
Cambiar el baln por otro de 500 mL que contenga 400 mL de etanol
Iniciar la extraccin con etanol durante 5 horas
Cambiar el baln por otro de 500 mL que contenga 500 mL de agua
destilada caliente e iniciar la extraccin por una hora
Sacar la muestra y realizarle un lavado al vaco con 500 mL de agua
destilada caliente
Se observar que habr un cambio de color del agua que sale del lavado
esta debe ser casi transparente
Dejar secar la muestra al aire libre.
Fig 18.4.1 Etapa inicial de la extraccin Fig 18.4.2 Etapa final de la

Soxhlet h extraccin con Soxhlet 5 h
despus
Fig 18.4.3 Sistema de filtracin al vaco Fig 18.4.4 Secado de las muestras
a temperatura ambiente

18.1.5 Cenizas sin Extractivos (TAPPI T 211 om-85)
a) Materiales
Vidrio reloj
Esptula
Balanza analtica
Mufla
Crisoles de porcelana
b) Mtodo
Pesar 2 gramos de coronta sin extractivos en un crisol de peso conocido P 0

Introducir la muestra en una mufla calentndose lentamente hasta 100 0C,
aumentar la temperatura paulatinamente hasta 575 250C para carbonizar
toda la muestra
Cuando el residuo cese de carbonizarse djese que se calcine durante 3 h
ms, hasta que no haya partcula negra en el residuo
Enfriar el crisol a temperatura ambiente en un desecador
Pesar y anotar el peso Pc.
El contenido de cenizas se calcula como:
Pc
% Cenizas x 100 Ecuacin 18.3
Po
Dnde:
Pc = Peso de las cenizas (g) Fig 18.5 Cenizas sin extractivos
P0= peso anhidro de la muestra (g)

18.1.6 Determinacin de Celulosa (Mtodo de Kurschner Y Hoffer)
a) Materiales
Balanza analtica
Vidrio de reloj
Esptula
Beacker de 100 mL Pyrex Clase A/0.05 mL
Matraz Erlenmeyer Pyrex de 250 mL, Clase A/0.05 mL
Probeta de 25 mL Pyrex, Clase A/0.02 mL
Plancha de calentamiento
Condensador
Mangueras
Termmetro -10 a 210 0C 1 0C
Crisoles Gooch
b) Reactivos
Etanol (CH3CH2OH) 99.8 % ACS Merck

cido ntrico (HNO3) 65 % para anlisis
Acetato de sodio (C2H3NaO2) 99.5 % Merck
Agua destilada
c) Mtodo
Se toma 1 gramo de materia anhidra libre de extractos, luego se coloca en

un matraz, al mismo aadir 20 mL de etanol y 5 mL de cido ntrico
concentrado
Hervir en bao mara a reflujo durante 30 minutos. La solucin se pasa por
un filtro Gooch de porosidad media y peso conocido

Desechar el lquido y el slido someter a una segunda digestin durante 30

minutos con 25 mL de etanol-cido ntrico
Realizar una decantacin como en la etapa anterior y efectuar una tercera
digestin con 100 mL de agua destilada por una hora. La muestra se filtra
en el Gooch, se lava con agua destilada caliente y posteriormente con 100
mL de solucin saturada de acetato de sodio y por ltimo con 500 mL de
agua destilada caliente
El residuo se seca en un horno elctrico a una temperatura de 105 3 oC
Cuando el residuo se seca se procede a enfriarlo en un desecador de cristal
sobre slica gel
Pesar el residuo.
d) Expresin de los Resultados
El porcentaje de celulosa se calcula con la siguiente ecuacin:
Ecuacin 18.4
POR
% Celulosa x100
PO
Dnde:
POR = Peso seco del residuo (g)

Po = Peso anhidro de la muestra (g)

Fig 18.6.1 Extraccin a reflujo Fig 18.6.2 Celulosa hmeda
Fig 18.6.3 Celulosa seca
18.1.7 Determinacin de lignina (TAPPI T 222 om-88)

a) Materiales
Probeta 250 mL Pyrex
Baln aforado 250 mL Pyrex Clase A/0.12 mL
Termmetro -10 a 210 0C 1 0C
Beacker 100 mL Pyrex Clase A/ 0.05 mL
Vidrio reloj
Matraz Erlenmeyer 250 mL Pyrex
Varilla de agitacin
Plancha de calentamiento
Refrigerante 24/40
Baln de fondo plano 250 mL Pyrex 24/40
Mangueras
Crisoles Gooch
Horno

b) Reactivos
cido sulfrico 96.7% ACS J.T Baker

Hielo
Agua destilada
c) Mtodo
Pesar 1g de coronta anhdrido

Preparar una solucin de cido sulfrico al 72 %
A una muestra de 1 gramo del material libre de extractos se le agrega 15
mL de cido sulfrico al 72 %, mantenindose en agitacin en bao mara
a 20 1 oC
Transferir a un matraz con 360 mL de agua destilada para diluirlo hasta
alcanzar una concentracin de cido del 3 %
Hervir a reflujo por 4 horas para asegurar un volumen constante de agua
Decantar la solucin manteniendo el matraz en una posicin inclinada hasta
que el material esta finalmente dividido. Durante 12 horas
Se filtra a travs de un crisol tipo Gooch de porosidad fina
Lavar con agua caliente para eliminar el cido
Secar en un horno elctrico a 105 3 oC hasta alcanzar un peso constante.
d) Expresin de los resultados
peso seco de lignina (g)

% Lignina x 100 Ecuacin 18.5
Peso anhidro de la muestra (g)

Fig 18.7.1 Extraccin a reflujo con H2SO4 Fig 18.7.2 Reposo durante 12 h
Fig 18.7.3 Filtracin en Gooch Fig 18.7.4 Lignina seca
18.1.8 Hemicelulosa
Para la determinacin del contenido de hemicelulosa es necesario haber

calculado el porcentaje de celulosa y lignina, sustituir en la siguiente ecuacin.
Ecuacin 18.6
% Hemicelulosa 100 (% celulosa+ % lignina)

Anexo: 19
19.1 Cuantificacin de azcares reductores totales segn el mtodo Miller
cido 3,5-dinitrosaliclico (DNS)
a) Reactivos
Tartrato de sodio y potasio (KNaC4H4O6.4H2O)/ sal de Rochelle 99.8 %

ACS Merck
Hidrxido de sodio (NaOH) 99 % Merck
cido 3,5 dinitrosaliclico (DNS) 99.9% MERCK
Agua destilada
b) Materiales y equipos
1 matraz volumtrico de 100 mL Pyrex con tapn Clase A/0.10 mL

1 micro pipeta de 100 l, 200 l, 500 l. 1000 l, 5000 l
Frasco de vidrio mbar
Papel Kraft
2 Vasos precipitado de 100 mL y 250 mL Pyrex Clase A/0.05 mL
15 Vasos de precipitado de 50 mL Pyrex Clase A/0.05 mL
1 Bao Mara
Hielo
1 Gradilla plstica forrada con plstico negro
1 Esptula
40 Tubos de ensayo de16 x150 mm
1 Plancha de calentamiento
1 Plancha de agitacin
1 Espectrofotmetro
Centrfuga
Varilla de agitacin
Cronmetro

c) Procedimiento
Preparacin de la solucin de DNS
1. Se disolvieron 1.6 g de NaOH en 20 mL de agua destilada en un vaso precipitado

de 250 mL, se disolvi con agitacin magntica, posteriormente se adicion 30
mL de agua destilada y se procedi a disolver en intervalos 43.8 g de tartrato de
sodio y potasio.
2. Luego se disolvieron 1 g de DNS en 20 mL de agua destilada en un vaso de
precipitado de 100 mL previamente forrado con papel kraft. Se tap y se mantuvo
en agitacin por 16 horas aproximadamente.
3. Se mezcl la solucin del tartrato de sodio y potasio con la solucin de DNS y
se afor a 100 mL con agua destilada. La solucin present color naranja
translucido.
4. Se trasvas la solucin a un frasco de vidrio mbar previamente forrado con papel
Kraft y se mantuvo en un lugar fresco y protegido de la luz, la solucin se us
despus de las 14 horas de preparada. La vigencia del reactivo es
aproximadamente dos meses.
Curva de Calibracin
1. Se prepar una solucin Stock de glucosa a una concentracin de 1g/L en un

baln aforado de 100 mL
2. Se prepar una serie de diluciones de concentraciones 0.02 g/L, 0.04 g/L, 0.06
g/L, 0.08 g/L, 0.10 g/L en tubos de ensayo, dispuestos en una gradilla
previamente forrada con plstico negro, con el objetivo de que la reaccin se
haga en la oscuridad, en cada tubo se deposit solucin madre de Glucosa, ms
agua y el reactivo generador de color DNS en relacin 1:1 hasta completar 1 mL,
agitar con agitacin centrifuga con 900 rpm 2 minutos, los volmenes son los
siguientes:

Tabla 19.1 Volmenes y concentraciones para la curva de calibracin
[g/L] Glucosa
Blanco 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10
Vol (mL)
Glucosa 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5
Agua 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0
DNS 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Proceso Paso 3
H2O (paso 4) 4 4 4 4 4 4
(Aforo final) 5 5 5 5 5 5
Fuente: Propia
3. Se colocaron los tubos con las soluciones durante 5 minutos en bao mara e
inmediatamente, se pasaron los tubos a un bao de hielo durante 5 minutos (la
soluciones transparentes cambiaron a un color amarillento hasta rojizo)
4. Posteriormente se adicion 4 mL de agua destilada, se agit en la centrfuga a
900 rpm por 2 minutos y se dej en reposo durante 10 minutos
5. Luego se procedi a leer la absorbancia a 540.5 nm
6. Se grafic la absorbancia en funcin de la concentracin (g/L). Mediante
regresin lineal se encuentra la ecuacin correspondiente a la grfica elaborada.
Se utiliz esta curva estndar para determinar la concentracin de glucosa en las
muestras problema.
Figura 19.1 Reactivo

DNS Figura 19.2 Solucin Stock de Glucosa [1g/L]

Flujograma 19.1 Procedimiento en la preparacin de las soluciones en los tubos

de ensayo para la curva de calibrado
Paso N0 1: Adicin de la Solucin Stock (Glucosa 1 g/L)
Solucin Stock Glucosa 1 g/L
0 mL 0.1 mL 0.2 mL 0.3 mL 0.4 mL 0.5 mL
Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5 Tubo 6

Blanco 0.02 g/L 0.04 g/L 0.06 g/L 0.08 g/L 0.10 g/L
Fuente: Propia, elaborado con ChemSketch y Visio 2013
Paso N0 2: Adicin de Agua Destilada y Desionizada
Agua Destilada y Desionizada
0.5 mL 0.4 mL 0.3 mL 0.2 mL 0.1 mL 0 mL


Paso N0 3: Adicin de Reactivo desarrollador de color cido 3,5 dinitrosaliclico

(DNS)
DNS
0.5 mL 0.5 mL 0.5 mL 0.5 mL 0.5 mL 0.5 mL

Paso N0 4: Agitacin Centrfuga (900 rpm 2 minutos)
Paso N0 5: Bao Mara (5 minutos)

Paso N0 6: Bao de hielo (5 minutos)
Paso N0 7: Adicin de Agua Destilada y Desionizada (Aforo final)
Agua Destilada y Desionizada
4 mL 4 mL 4 mL 4 mL 4 mL 4 mL

Paso N0 7, 8, 9, 10: Agitar con la centrfuga (900 rpm 2 minutos), Distinguir la

gama de tonalidades, dejar en reposo por 10 minutos, Leer con el
espectrofotmetro

Curva de Absorbancia
Antes de realizar la curva de calibrado fue necesario encontrar la absorbancia

de trabajo en el espectrofotmetro Perkin Elmer para el mtodo DNS, para lo cual
se tom la solucin preparada de mayor concentracin 0.10 g/L, los datos obtenidos
fueron los siguientes.
Tabla 19.2 Longitud de onda en rango 588.0 a 413.0 nm con sus respectivas
absorbancias
Longitud de onda Absorbancia Longitud de onda Absorbancia
( (nm) ( (nm)
588.0 0.660 549.0 1.845
587.0 0.680 548.0 1.863
586.0 0.698 547.0 1.876
585.0 0.720 546.0 1.889
584.0 0.741 545.0 1.898
583.0 0.762 544.0 1.904
582.0 0.786 543.0 1.911
581.0 0.810 542.0 1.914
580.0 0.836 541.0 1.916
579.0 0.863 540.0 1.916
578.0 0.892 539.0 1.915
577.0 0.920 538.0 1.910
576.0 0.950 537.0 1.908
575.0 0.982 536.0 1.903
574.0 1.012 535.0 1.897
573.0 1.045 534.0 1.890
572.0 1.078 533.0 1.881
571.0 1.111 532.0 1.872
570.0 1.146 531.0 1.859
569.0 1.181 530.0 1.847
568.0 1.214 529.0 1.836
567.0 1.251 528.0 1.822
566.0 1.288 527.0 1.807
565.0 1.323 526.0 1.791
564.0 1.361 525.0 1.772
563.0 1.400 524.0 1.752

562.0 1.436 523.0 1.732

561.0 1.475 522.0 1.708
560.0 1.514 521.0 1.683
559.0 1.552 520.0 1.657
558.0 1.589 519.0 1.624
557.0 1.626 518.0 1.593
556.0 1.660 517.0 1.560
555.0 1.694 516.0 1.519
554.0 1.726 515.0 1.479
553.0 1.753 514.0 1.439
552.0 1.781 513.0 1.389
551.0 1.806 512.0 1.341
550.0 1.826 511.0 1.291
510.0 1.230 468.0 0.000
509.0 1.173 467.0 0.001
508.0 1.113 466.0 0.002
507.0 1.042 465.0 0.001
506.0 0.974 464.0 0.000
505.0 0.902 463.0 0.000
504.0 0.817 462.0 -0.001
503.0 0.738 461.0 0.000
502.0 0.653 460.0 0.000
501.0 0.558 459.0 0.001
500.0 0.470 458.0 0.001
499.0 0.382 457.0 0.001
498.0 0.290 456.0 0.000
497.0 0.206 455.0 0.000
496.0 0.133 454.0 0.000
495.0 0.075 453.0 0.001
494.0 0.009 452.0 0.002
493.0 -0.076 451.0 0.002
492.0 0.068 450.0 0.001
491.0 0.029 449.0 -0.001
490.0 0.019 448.0 0.003
489.0 0.012 447.0 0.001
488.0 0.008 446.0 0.002
487.0 0.005 445.0 0.002
486.0 0.005 444.0 0.001
485.0 0.005 443.0 0.003

484.0 0.004 442.0 -0.001

483.0 0.002 441.0 0.000
482.0 0.002 440.0 0.001
481.0 0.001 439.0 0.001
480.0 0.001 438.0 -0.001
479.0 0.002 437.0 0.000
478.0 0.000 436.0 -0.002
477.0 0.001 435.0 0.001
476.0 0.002 434.0 0.001
475.0 0.000 433.0 -0.001
474.0 0.002 432.0 -0.001
473.0 0.000 431.0 0.000
472.0 0.000 430.0 -0.001
471.0 0.000 429.0 0.000
470.0 0.002 428.0 0.000
469.0 0.000 427.0 0.003
426.0 0.002 412.0 0.000
425.0 0.000 411.0 0.000
424.0 -0.001 410.0 -0.001
423.0 0.001 409.0 -0.001
422.0 -0.003 408.0 0.001
421.0 0.000 407.0 0.000
420.0 0.000 406.0 -0.001
419.0 0.001 405.0 -0.001
418.0 0.001 404.0 -0.002
417.0 0.000 403.0 0.000
416.0 0.001 402.0 -0.001
415.0 0.000 401.0 0.000
414.0 0.000 400.0 -0.004
413.0 0.002
Fuente: Propia

Grfica 19.1 Curva de Absorbancia para definir la longitud de onda de trabajo
Curva de Absorbancias Longitud de Onda

2.200 mxima=540.5 nm
2.000
1.800
1.600
Absorbancia
1.400
1.200
1.000
0.800
0.600
0.400
0.200
0.000
-0.200 0.0 100.0 200.0 300.0 400.0 500.0 600.0 700.0
Longitud de onda () (nm)

Fuente: Propia
De acuerdo a lo observado en el grfico se tom la decisin de trabajar con la

longitud de onda de 540.5 nm, puesto que es la longitud de onda mayor.
Curva de Calibracin
Las lecturas de las absorbancias se realizaron por cuadruplicado obteniendo
los siguientes resultados.
Tabla 19.3 Datos espectroscpicos usados para construir la curva de calibracin
Absorbancias
[Glucosa ] g/L
Lectura 1 Lectura 2 Lectura 3 Lectura 4
0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000
0.020 0.121 0.121 0.121 0.121 0.121
0.040 0.257 0.257 0.257 0.257 0.257
0.060 0.437 0.437 0.437 0.437 0.437
0.080 0.575 0.574 0.574 0.575 0.575
0.100 0.727 0.727 0.727 0.727 0.727
Fuente: Propia

Grfica 19.2 Curva de Calibracin de la Glucosa
Curva de Calibracin DNS

0.8
y = 7.37x - 0.0127
0.7 R = 0.9988
0.6
Absorbancia (nm)
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0.000 0.020 0.040 0.060 0.080 0.100 0.120
-0.1
[Glucosa] (g/L)
Fuente: Propia
A continuacin se muestran los datos estadsticos usados para la

determinacin de las incertidumbres asociadas a la recta de calibracin con cido
3,5 dinitrosaliclico (DNS) para la Glucosa.

Tabla 19.4 Datos estadsticos usados para la determinacin de las incertidumbres asociadas a la recta de calibracin con
cido 3,5 dinitrosaliclico (DNS) para la Glucosa
[g/L] xi yi xi yi xi2 xi - (xi - 2 yi - (yi - 2 (xi - (yi -

0.000 0.000 0.0000 0.0000 -0.0500 0.0025 -0.3558 0.1266 0.0178
0.020 0.121 0.0024 0.0004 -0.0300 0.0009 -0.2348 0.0551 0.0070
0.040 0.257 0.0110 0.0016 -0.0100 0.0001 -0.0808 0.0065 0.0008
0.060 0.437 0.0262 0.0036 0.0100 0.0001 0.0812 0.0066 0.0008
0.080 0.575 0.0460 0.0064 0.0300 0.0009 0.2192 0.0480 0.0066
0.100 0.727 0.0727 0.0100 0.0500 0.0025 0.3712 0.1378 0.0186
0.30 2.135 0.1583 0.0220 -0.1300 0.0070 -0.9462 0.3806 0.0516
0.050 0.3558 0.0264 0.0036 -0.0216 0.0012 -0.1577 0.0634 0.0086
Fuente: Propia

Frmulas estadsticas para tratamiento de datos (Miller & Miller, 2002)
- Media Aritmtica Ecuacin 19.1
- Desviacin estndar Ecuacin 19.2
- Lmite de confianza de la Ecuacin 19.3

media
Mtodos de Mnimos Cuadrados
- Ecuacin de la recta y a bx Ecuacin 19.4

Ecuacin 19.5
- Pendiente de la recta
- Ordenada en el origen Ecuacin 19.6
- Coeficiente de correlacin Ecuacin 19.7
- Errores aleatorios en y Ecuacin 19.8

- Desviacin estndar de la Ecuacin 19.9

pendiente
- Desviacin estndar del Ecuacin 19.10

intercepto
- Desviacin estndar de la Ecuacin 19.11

concentracin de la muestra
X0
- Lmite de confianza de la LCb (95%) t ( n2) sb Ecuacin 19.12

pendiente
- Lmite de confianza de LCa (95%) t ( n2) s a Ecuacin 19.13

ordenada en el origen
- Lmite de confianza para un LCxo(95%) t ( n2) s x 0 Ecuacin 19.14

valor X0

Donde:
Abreviatura Significado
a Intercepto
b Pendiente de la recta
x Concentracin de la muestra
Puntos sobre la recta de regresin calculada
correspondientes a los valores individuales de x, es decir los
valores de y ajustados
Sy/x Desviacin de la absorbancia
Sb Desviacin de la pendiente
Sa Desviacin del intercepto
r Coeficiente de regresin
se obtiene para un nivel de confianza deseado y (n-2) grados
t
de libertad
n Nmero de muestras
m Anlisis replicados
Clculos
Ecuacin de la recta de calibrado
- Coeficiente de Correlacin
0.0516
r2
(0.0070)(0.3806)1/ 2
r 2 0.9988
- Pendiente
0.0516
b
0.0070
b 7.37

- Intercepto
a 0.3558 7.37(0.050)
a 0.0127
Clculo de los errores asociados a la recta de calibrado
- Errores aleatorios en y
0.3806
sy / x
4
sy/ x 0.3085
- Desviacin estndar de la pendiente
0.3085
sb
0.0070
sb 3.6873
- Desviacin estndar del intercepto
0.0220
s a 0.3085
6(0.0070 )
s a 0. 2233

Lmites de confianza de la recta de calibrado
- Lmite de confianza de la pendiente

LCb (95%) t ( n2) sb
LCb (95%) (2.78)(3. 6873)
LCb (95%) 10.2507
b 7.37 10.2507
- Lmite de confianza de ordenada en el origen

LCa (95%) t ( n2) s a
LCa (95) (2.78)(0.2233)
LCa (95) 0.6208
a 0.0127 0.6208
Tabla 19.5 Tabla Distribucin t student
Valor de t para un intervalo de confianza 90 % 95% 98% 99%

de valor crtico de /t/ para valores de P 0.10 0.05 0.02 0.01
de nmero de grados de libertad
1 6.31 12.71 31.82 63.66
2 2.92 4.30 6.96 9.92
3 2.35 3.18 4.54 5.84
4 2.13 2.78 3.75 4.60
5 2.02 2.57 3.36 4.03
6 1.94 2.45 3.14 3.71
7 1.89 2.36 3.00 3.50
8 1.86 2.31 2.90 3.36
9 1.83 2.26 2.82 3.25
10 1.81 2.23 2.76 3.17
12 1.78 2.18 2.68 3.05
14 1.76 2.14 2.62 2.98
16 1.75 2.12 2.58 2.92
18 1.73 2.10 2.55 2.88
20 1.72 2.09 2.53 2.85
30 1.70 2.04 2.46 2.75
50 1.68 2.01 2.40 2.68
1.64 1.96 2.33 2.58
Fuente: (Miller & Miller, 2002)

Anexo 19.1
19.1 Cuantificacin de la concentracin de azcares reductores totales en

las muestras hidrolizadas
El procedimiento que se sigui para cuantificar la concentracin de los

azcares reductores totales fue el mismo con el cual se construy la curva de
calibrado, con la diferencia que se sustituy la solucin de Glucosa por cada una de
las ocho muestras hidrolizadas, para la preparacin de la muestra se midi un
mililitro de los hidrolizados, se aforaron con agua destilada y desionizada en balones
de 50 mL, el factor de dilucin (FD) aplicado fue 1:50, la cuantificacin de realiz
por duplicado y las lecturas por triplicado.
Flujograma 19.1.1 Procedimiento para la cuantificacin de la concentracin de los

azcares reductores totales en las ocho muestras hidrolizadas
Imagen 19.1.1.1 Imagen 19.1.1.2

Soluciones FD 1:50 Imagen 19.1.1.3
Muestras Hidrolizadas Preparacin de la muestra
1. Hidrolizado 0.5 mL
2. DNS 0.5 mL
1. Agua 4 mL
Imagen 19.1.1.6 Imagen 19.1.1.5 Imagen 19.1.1.4

Adicin de Agua Bao de hielo 5 min Bao Mara 5 min

Se observan
diferencias de
Imagen 19.1.1.8 Imagen 19.1.1.7 tonalidades entre un
Centrifugacin Reposo 10 min experimento y otro
Imagen 19.1.1.9 Cuantificacin

espectrofotomtrica
Tabla 19.1.1 Resultados de las lecturas para los ocho experimentos
N0 Exp. N0 muestras Absorbancias [AR g/g]

1 2 3
B.1 0.000 0.000 0.000 0.000
Blanco 0.000 0.000
B.2 0.000 0.000 0.000 0.000
1.1 0.111 0.111 0.111 0.111
1 0.112 2.5350
1.2 0.113 0.113 0.112 0.113
2.1 0.119 0.119 0.119 0.119
2 0.120 2.2950
2.2 0.120 0.121 0.121 0.121
3.1 0.129 0.129 0.128 0.129
3 0.129 2.9280
3.2 0.127 0.127 0.129 0.128
4.1 0.123 0.123 0.123 0.123
4 0.123 2.5760
4.2 0.122 0.123 0.122 0.122

5.1 0.112 0.112 0.112 0.112

5 0.113 5.8482
5.2 0.113 0.113 0.113 0.113
6.1 0.125 0.134 0.126 0.128
6 0.126 5.6118
6.2 0.123 0.123 0.123 0.123
7.1 0.133 0.133 0.133 0.133
7 0.125 5.6661
7.2 0.116 0.116 0.116 0.116
8.1 0.117 0.117 0.117 0.117
8 0.122 5.7188
8.2 0.126 0.126 0.126 0.126
Clculo de la concentracin de azcares reductores totales en las muestras

hidrolizadas
Ecuacin 19.2.1 Concentracin de azcares Reductores
Azcares Reductores otales Absorbancia Intercepto

Pendiente
Ejemplo del clculo para el experimento N0 1
E - 1 0.112 + 0.0127
7.37
E - 1 0.0169 g/L
La concentracin calculada mediante el mtodo de los mnimos cuadrados se

multiplica por dos factores de dilucin, el primero 1:50 corresponde a la preparacin
de la solucin donde se diluy 1 mL de muestra hidrolizada y se afor a 50 mL con
agua destilada y desionizada, el segundo factor corresponde a la preparacin de la
muestra en los tubos de ensayo, del cual se tom 0.5 mL de la primera dilucin y se
afor en 5 mL con la adicin de los reactivos DNS y agua.
50 mL 5 mL
E - 1 0.0169 g / L

1 mL 0.5 mL

E - 1 8 . 4500 g/L
A partir de esta concentracin se calcula la concentracin de azcares
reductores totales en los 300 mL de hidrolizados.

E - 1 0.3 L 8.4500 g / L

E - 1 2.5350 g de azcares reductores en todo el hidrolizado
Gramos de azcares reductores totales en 8.0273 g de material hemicelulsico=

2.5350 g.
De 10 gramos de coronta que entraron al proceso hidroltico 8.0273 g
corresponden al material hemicelulsico, de lo cual se obtuvieron 2.5350 g de
azcares reductores totales. Para realizar el clculo porcentual se dividen los
gramos de azcares reductores totales presentes en cada muestra entre la masa
del material hemicelulsico multiplicada por cien.
2.5350 g
E - 1 x100 32%
8.0273 g
Clculo del error en las concentraciones
Ejemplo para el experimento N01
0.3085 1 1 (3.7896 0.3558) 2

s x0
7.37 3 6 (7.37) 2 (0.0070 )
s x0 0.1511
LCsxo(95%) t ( n2) s x 0
LCsxo(95%) (2.78)(0.1511)
LCsxo(95%) 0.4201

Tabla 19.1.2 Error en las concentraciones para los 8 experimentos
N0 [AR] Sx0 LC 95%

Exp
1 2.5350 0.1511 0.4201
2 2.2950 0.1351 0.3755
3 2.9280 0.1773 0.4929
4 2.5760 0.1538 0.4276
5 5.8482 0.3744 1.0408
6 5.6118 0.3584 0.9964
7 5.6661 0.3621 1.0066
8 5.7188 0.3656 1.0164

Anexo: 20
20.1 Proceso de obtencin de bioetanol a escala de laboratorio
Lavado Secado Molienda Pesado
Slido (Lignina) Filtracin Hidrlisis
Lquido (Azcares
Reductores)

Neutralizacin Medicin de pH Anlisis de azcares reductores Preparacin de la levadura
Destilacin Desgasificacin Fermentacin Mezcla de sustrato e inculo
Producto destilado Identificacin de Alcoholes

Anexo: 21
21.1 Usos de la lignina
La lignina es actualmente una fuente renovable y valiosa de una gran variedad

de compuestos aromticos e hidrocarburos en general que pueden ser aprovechados
de diversas maneras en la industria qumica (Domine, 2013). Aunque existen ciertas
aplicaciones directas de la lignina para la produccin de ligno-sulfonatos, carbones,
resinas polimricas y como aditivos en adhesivos, el uso de los compuestos
aromticos que poseen debera ser mucho mayor, siendo este un campo muy
promisorio a nivel industrial y que seguramente crecer aceleradamente en los
prximos aos. (Castillo, 2012)
Una de las fuerzas impulsoras de este crecimiento ser sin duda el estudio y
desarrollo de nuevos procesos qumicos, catalticos y biolgicos de despolimerizacin
de la lignina, con el objetivo de mejorar y optimizar la degradacin selectiva de la
lignina para producir de manera eficiente y competitiva los compuestos qumicos
deseados. (Castillo, 2012)
En general, existen tres tipos diferentes de lignina que provienen de los tres
procesos qumicos mayoritariamente utilizados para la produccin de pasta de papel,
y que son: lignina tipo sulfito, kraft y soda. A stos puede aadirse un cuarto tipo que
es la lignina tipo Organosolv, especialmente desarrollada en los ltimos aos. Cada
uno de estos tipos de lignina posee sus propiedades especficas de resistencia a la
temperatura y a los tratamientos cidos, as como distintos contenidos de cenizas,
azcares y azufre, con sus ventajas y desventajas a la hora de utilizarlas como materia
prima para nuevos productos. (Domine, 2013)
Existe lignina aislada y disponible para uso industrial, puede ser aprovechada
para producir los correspondientes derivados aromticos como productos qumicos de
alto valor aadido, o tras los correspondientes tratamientos de hidrogenacin e

hidrodesoxigenacin de sus derivados para llegar a la obtencin de componentes,

aditivos y fracciones de biocombustibles. (Domine, 2013)
Se han descrito distintos procesos de despolimerizacin de la lignina estudiados

y en vas de desarrollo para la obtencin de compuestos de inters. Cada uno posee
sus ventajas competitivas, como por ejemplo el uso de catalizadores slidos
reciclables y recuperables, as tambin sus desventajas a nivel de aplicabilidad.
(Domine, 2013)
En lo que destacan, por sus posibilidades de aplicacin a gran escala la hidrlisis

bsica, la despolimerizacin oxidativa, la pirlisis cataltica, la hidrogenlisis/
hidrogenacin y la hidrodesoxigenacin. Mientras que los dos primeros son ms
adecuados para la obtencin de compuestos aromticos especficos (vainilla, guayacol
y derivados), los tres restantes apuntan a la produccin directa de mezclas de
compuestos que puedan ser mezclados (o utilizados) en combustibles de automocin.

Anexo: 22
22.1 Resultados de los anlisis en la caracterizacin fsico qumica de la
coronta de maz variedad HS-5
Tabla 22.1.1 Porcentaje de humedad
Muestra de coronta % Humedad

Muestra 1 0.2000
Muestra 2 0.2100
Muestra 3 0.2100
Muestra 4 0.2000
Muestra 5 0.1900
- Media 0.2020
Desviacin estndar 0.0084
Tabla 22.1.2 Porcentaje de cenizas con extractivos
Muestra de coronta % cenizas con extractivos

Muestra 1 1.9500
Muestra 2 1.9700
Muestra 3 2.0000
Muestra 4 1.9100
Muestra 5 1.9500
- Media 1.9560
Tabla 22.1.3 pH
Muestra de coronta pH
Muestra 1 5.7400
Muestra 2 5.4900
Muestra 3 5.4800
Muestra 4 5.5400
Muestra 5 5.5800
- Media 5.5660

Tabla 22.1.4 Extractivos totales
Muestra de coronta % Extractivos Totales

Muestra 1 0.3105
Muestra 2 0.3638
Muestra 3 0.3782
Muestra 4 0.3844
Muestra 5 0.3767
X- Media 0.3627
Tabla 22.1.5 Porcentajes de cenizas sin extractivos
Muestra de coronta % Cenizas sin extractivos

Muestra 1 0.1100
Muestra 2 0.1200
Muestra 3 0.1200
Muestra 4 0.1100
Muestra 5 0.1100
X- Media 0.1140
Tabla 22.1.6 Porcentaje de celulosa
Muestra de coronta % Celulosa

Muestra 1 36.7044
Muestra 2 36.9456
Muestra 3 36.3184
Muestra 4 34.6900
Muestra 5 38.8678
X- Media 36.7052

Tabla 22.1.7 Porcentaje de lignina
Muestra de coronta % Lignina

Muestra 1 18.4938
Muestra 2 20.7528
Muestra 3 19.4250
Muestra 4 19.5102
Muestra 5 20.4542
X- Media 19.7272
Tabla 22.1.8 Porcentaje de hemicelulosa (No experimental, clculo mediante

frmula)
Muestra de coronta % Hemicelulosa

Muestra 1 44.8018
Muestra 2 42.3016
Muestra 3 44.2566
Muestra 4 45.7998
Muestra 5 40.6780
X- Media 43.5676

Anexo: 23
23.1 Variables operacionales
En la tabla 23.1 se presentan los resultados del proceso de hidrlisis cida y fermentacin separada
Tabla 23.1 Datos experimentales en el proceso de hidrlisis cida diluida y fermentacin separada
Caracteres E-1 E-2 E-3 E-4 E-5 E-6 E-7 E-8

HIDRLISIS CIDA DILUIDA
[H2SO4] (%) 4 4 7 7 4 4 7 7
Relacin m/v 1:15 1:15 1:15 1:15 1:15 1:15 1:15 1:15
Tiempo de Hidrlisis (h) 1.5 2 1.5 2 1.5 2 1.5 2
Temperatura de Hidrlisis (0C) 90 90 100 100 100 100 90 90
Masa inicial de coronta (g) 10.0000 10.0000 10.0000 10.0000 20.0000 20.0000 20.0000 20.0000
Masa de Material hemicelulsico (g) 8.0273 8.0273 8.0273 8.0273 16.0546 16.0546 16.0546 16.0546
Masa de lignina (g) 1.9727 1.9727 1.9727 1.9727 3.9454 3.9454 3.9454 3.9454
Masa de corota despus de hidrolizar (g) 5.0600 4.9000 5.1700 5.1000 11.0000 12.0800 10.6000 10.6800
Volumen de cido antes de hidrolizar (mL) 150 150 150 150 300 300 300 300
Volumen de hidrolizado/filtrado (mL) 118 120 120 120 239 245 243 244
Rendimiento slido (%)17 51 49 52 51 55 60 53 53
Rendimiento lquido (%)18 79 80 80 80 80 82 81 81
Volumen del NaOH (mL) 182 135 185 160 445 352 363 381
Volumen del neutralizado (mL) 300 255 305 280 684 597 606 625
Densidad del neutralizado (g/mL) 0.9804 0.9840 1.0148 1.0292 1.0614 0.9856 1.0040 1.1002
17 Rendimiento slido (%) = (masa en gramos de coronta hidrolizada y seca/ masa en gramos de coronta cruda) x 100
18 Rendimiento lquido (%)= (volumen en mL de hidrolizado /volumen en mL inicial de cido) x 100

g/g Azcares Reductores Totales19 2.5350 2.2950 2.9280 2.5760 5.8482 5.6118 5.6661 5.7188
% p/p Azcares Reductores Totales 32 29 36 32 36 35 35 36
FERMENTACIN
% de Levadura 12 % 14 % 12 % 14 % 14 % 12 % 14 % 12 %
Masa de Levadura (g)20 0.3042 0.3213 0.3514 0.3606 0.3987 0.3134 0.7933 0.6863
Volumen de destilado (mL) 7.98 2.02 3.83 2.77 6.40 8.25 10.35 5.67
% v/v Alcohol21 17.05011 40.56842 44.67048 36.15134 43.76285 30.30662 26.85874 41.44589
Volumen experimental (mL)22 1.36 0.82 1.71 1.00 2.90 2.50 2.78 2.35
Masa de Bioetanol experimental (g)23 1.0730 0.6470 1.3492 0.7890 2.2881 1.9725 2.1934 1.8542
Masa de Bioetanol terica (g)24 1.2776 1.1567 1.4757 1.2983 2.9475 2.8283 2.8557 2.8823
Volumen de Bioetanol terico (mL)25 1.62 1.16 1.48 1.30 2.95 2.83 2.86 2.88
% Conversin en fermentacin26 42 28 46 31 39 35 39 32
% Rendimiento en fermentacin27 84 56 91 61 78 70 77 64
% Conversin general28 11 6 13 8 11 10 11 9
% Rendimiento general29 13 8 17 10 14 12 14 12
19 Base de clculo mtodo DNS en anexo 19.1

20 Masa de levadura= (12 % 0 14%) (Masa de Azcares Reductores Totales)/100
21 Resultado mediante anlisis Cromatogrfico (anexo 23.1)
22 Se calcula aplicando la ecuacin vsto= (%v/v) (vdson)/100; Donde: (%v/v)= Porcentaje de alcohol cuantificado mediante anlisis Cromatogrfico,
(vdson)=Volumen del destilado

23
Se cuantifica con la ecuacin m= () (v); Donde ()= densidad del alcohol 0.789 g/mL, (v)= Volumen experimental (mL)
24 Se calcula tomando como referencia que 100 gramos de azcares producen 50.4 gramos de alcohol, por tanto para este clculo se aplica la ecuacin masa de
Bioetanol= (masa de azcares reductores calculados experimentalmente por mtodo DNS) (50.4 gramos de Alcohol) / 100 gramos de Azcares Reductores
25 Se calcula mediante la ecuacin v= m/, donde (m)= masa de alcohol terica y ()=Densidad del alcohol 0.789 g/mL
26 % X=masa experimental de Bioetanol / masa de azcares reductores x100
27 % R= masa experimental de Bioetanol / masa terica de Bioetanol referente a los azcares reductores totales x 100
28 % X=masa experimental de Bioetanol / masa de coronta alimentada x100
29 % R= masa experimental de Bioetanol / masa terica de Bioetanol (referente al porcentaje de material hemicelulsico) x 100

En la tabla 23.2 se muestra el diseo experimental construido mediante la

metodologa Taguchi, esto implica que se ajustan 8 condiciones experimentales, por
otra parte se dispone de 8 columnas, a cada una se le asign un factor. Si en particular,
se asignan los factores en orden a las 6 columnas, dejando libre las dos ltimas, el
arreglo queda.
Tabla 23.2 Diseo de experimento Taguchi
N MC CA T0 tH ML tF % AR
Ex30 MC CA T0 tH ML tF e1 e2 (g) (%) (0C) (h) (%) (das)
1 1 1 1 1 1 1 1 1 10 4 90 1.5 12 6 32
2 1 1 1 2 2 2 2 2 10 4 90 2 14 8 29
3 1 2 2 1 1 2 2 2 10 7 100 1.5 12 8 36
4 1 2 2 2 2 1 1 1 10 7 100 2 14 6 32
5 2 1 2 1 2 1 1 2 20 4 100 1.5 14 6 36
6 2 1 2 2 1 2 2 1 20 4 100 2 12 8 35
7 2 2 1 1 2 2 2 1 20 7 90 1.5 14 8 35
8 2 2 1 2 1 1 1 2 20 7 90 2 12 6 36
Total = 271
Se observa que en las columnas 7 y 8, se ha escrito la letra e 1 y e2

respectivamente, para indicar que en ellas se evaluar el error aleatorio.
23.1.1 Anlisis de Varianza (ANOVA) para el proceso de hidrlisis
1. Como primer paso, se obtienen los totales de la variable respuesta (azcares

reductores totales), para cada uno de los niveles de los factores. Para calcular los
totales en cada nivel del factor masa de coronta, se observa que las primeras cuatro
pruebas del arreglo se efectuaron con el factor a su nivel 1 (10 g) y las siguientes
cuatro a su nivel 2 (20 g).
30(N0 Ex)= Nmero de experimento, (MC) =Masa de coronta, (CA)= Concentracin de cido Sulfrico,
(T0)= Temperatura de hidrlisis, (tH)= Tiempo de Hidrlisis, (ML)= masa de levadura, (tF)= tiempo de
fermentacin, (e1)= error aleatorio 1, (e2)= error aleatorio 2, (%AR)=Porcentaje de Azcares
Reductores Totales.
Los totales para el factor masa de coronta (MC) se calculan de la siguiente

manera: MC1= total del porcentaje de azcares reductores que se tomaron con el
factor MC a su nivel 1.
MC1 = 23+26+36+32=129
MC2= total del porcentaje de azcares reductores que se tomaron con el factor MC a
su nivel 2.
MC2 =36+35+35+36= 142
El procedimiento que se sigue para calcular los totales de los otros factores
(CA, T0, tH, ML, tF, e1, e2), es el mismo que se aplic para MC, teniendo como
resultado los totales que se muestran en la tabla 23.3.
Tabla 23.3 Totales de los factores y sus niveles
Factores MC CA T0 tH ML tF e1 e2
N1 129.00000 132.00000 132.00000 139.00000 139.00000 136 136.00000 134.00000
N2 142.00000 139.00000 139.00000 132.00000 132.00000 135 135.00000 137.00000
N1,N2 271.00000 271.00000 271.00000 271.00000 271.00000 271.00000 271.00000 271.00000
Diferencia 13.00000 7.00000 7.00000 -7.00000 -7.00000 -1.00000 -1.00000 3.00000
Se observa en la tabla 23.3 que la suma de los dos niveles debe dar siempre el
total de las ocho lecturas 271 que se denot en la tabla 23.2.
2. Se procede a calcular la suma de cuadrados para cada factor mediante la

siguiente ecuacin
Ecuacin 23.1 Suma de Cuadrados
SSX (Total nivel 2 - Total nivel 1)2 /n
Donde n representa el nmero total de experimentos

As por ejemplo, para el factor MC, la sumatoria de cuadrados se calcula sustituyendo

valores en la ecuacin 23.1, donde n representa los 8 experimentos.
SSMC= (MC2 MC1) 2/ 8

SSMC= (142.00000-129.00000) 2/ 8= 21.12500 con 1 G.L
Para el clculo de la sumatoria de cuadrados de los dems factores se sigue la
misma metodologa, excepto para los errores, donde se toma la diferencia entre el
nivel 1 y 2 se eleva al cuadrado y se divide entre el nmero de experimentos,
expresndolos de la siguiente manera:
SSe1= (Diferencia e1) 2/ 8

SSe1= (-1.00000) 2/ 8 = 0.12500
SSe2= (Diferencia e2) 2/ 8
SSe1= (3.00000) 2/ 8= 1.12500
SSe= SSe1 + SSe2
SSe= 0.125000 + 1.12500 = 1.25000 con 2 G.L
3. Construccin de la tabla de ANOVA
Tabla 23.4 Anlisis de Varianza (ANOVA)
Efecto SS G.L V Fexp

21.12500 21.12500 33.80000
MC 1
6.12500 6.12500 9.80000
CA 1
6.12500 6.12500 9.80000
T0 1
6.12500 6.12500 9.80000
tH 1
6.12500 6.12500 9.80000
ML 1
0.12500 0.12500 0.20000
tF 1
1.25000 0.62500
Error 2
47.00000
Total 7

Bajo la columna SS se tienen las sumas de cuadrados, as mismo bajo la columna

G.L. (grados de libertad), se muestra el nmero de columnas que se usaron para
evaluar el factor, en este caso, slo puede ser de uno para cada factor y ms de uno
nicamente para el caso del error. La columna V, se obtiene dividiendo el nmero bajo
la columna SS, entre el nmero de la columna G.L.
As por ejemplo, para el factor MC se tiene
V= SSMC/G.L
V= 21.12500/1= 21.12500
Por ltimo, el valor de Fexp, se obtiene de dividir el valor de V de cada factor, entre
el valor de V para la estimacin del error.
Fexp de X= V(X) / V (error)
Fexp de MC= 21.12500/ 0.62500= 33.80000
4. Conclusiones
Los factores que tienen Fexp mayor que 2: Masa de coronta, concentracin de
cido, temperatura y tiempo de hidrlisis, se consideran que afectan la variable
repuesta % de Azcares Reductores Totales, estos son llamados factores
significantes, mientras que los que no resultaron significantes: masa de levadura y
tiempo de fermentacin se consideran como error aleatorio, a fin de obtener una mejor
estimacin (con mayor nmero de grados de libertad). Cabe mencionar que los
factores masa de levadura y tiempo de fermentacin no resultan significantes en esta
etapa del proceso, porque son variables manipulables del proceso fermentativo.
Por lo tanto para mejor estimacin de SSe se considera la sumatoria de

cuadrados de masa de levadura (SSML) y tiempo de fermentacin (SStF).

SSe= SSML + SStF + SSe
SSe= 6.12500 + 0.12500 + 1.25000= 7.50000
Con 1+1+2= 4 grados de libertad y (Ve)= (SSe) /4= 7.50000 /4= 1.87500
En la tabla 23.5 del anlisis de varianza solo se indican los factores que afectan
la variable repuesta (% de azcares reductores totales).
Tabla 23.5 Anlisis de varianza para los factores significantes en la variable respuesta
Efecto SS G.L V Fexp

21.12500 21.12500
MC 1 6.20
6.12500
CA 1 6.12500 1.80
6.12500
T0 1 6.12500 1.80
6.12500
tH 1 6.12500 1.80
13.62500
Error 4 3.40623
53.1250
Total 7
Ahora queda decir a que nivel habr de fijar cada factor significante y qu se
puede esperar. Para tomar esta decisin, se obtienen los promedios de las lecturas
que se tomaron a cada nivel para cada uno de los factores significantes.
Los promedios del porcentaje de azcares reductores para cada nivel, se obtienen
dividiendo cada uno de los totales entre 4, (cada total es la suma de cuatro
experimentos).
MC MC1 / 4
1
MC 129.00000/ 4 32.25000
1
MC MC2 / 4
2
MC 142.00000/ 4 35.50000
2

El resto de los promedios se muestran en la tabla 23.6
Tabla 23.6 Promedio del nivel 1 y 2 en cada factor
Factor Nivel 1 Nivel 2
MC 32.25000 35.5000
CA 33.00000 34.75000
T0 33.00000 34.75000
tH 34.75000 33.00000
ML 34.75000 33.00000
tF 33.75000 67.75000
El promedio general de la respuesta es:

% AR= (32+ 29 + 36 + 32 + 36 + 35 + 35 + 36)/8
%AR= 271/8
%AR= 34.00000
Los factores masa de coronta, concentracin de cido sulfrico, temperatura y

tiempo de hidrlisis que afectan el porcentaje de azcares reductores en el proceso
hidroltico, debern fijarse al nivel que aumente el porcentaje de la variable repuesta,
esto es al nivel que se obtenga el promedio mayor, para lo cual MC 2, CA2, T02 y tH1,
20 gramos de masa de coronta, concentracin de cido 7 %, 100 0C de temperatura y
1.5 h de hidrlisis.

Cul ser el nivel esperado de % de Azcares Reductores Totales bajo

los nuevos porcentajes propuestos en el estimado?
Para contestar esta interrogante, en cada efecto significante se calcula una resta
que se denomina el efecto de cada factor respecto al promedio general.
EF= (promedio bajo la condicin propuesta del factor promedio general)

EFMC= 35.5000- 34.0000
EFMC= 1.50000
Siguiendo la misma metodologa del efecto en el factor masa de coronta, se
calculan los factores temperatura y tiempo de hidrlisis, los resultados se muestran en
la tabla 23.7
Tabla 23.7 Efecto de cada factor significante
Factor Efecto
EFMC 1.50000
EFCA 0.75000
EFT0 0.75000
EFtH 0.75000
% AR est
Finalmente, el resultado esperado bajo las condiciones MC2, T02 y tH1, denotado
como % de Azcares reductores Totales estimado, se calcul sumando al promedio
general % AR y todos los efectos de los factores significantes, por lo tanto teniendo
mayor porcentaje de azcares reductores totales se espera que incremente el
rendimiento de bioetanol.
% AR est = % AR + EFMC + EFCA + EFT0 + EFtH

% AR est = 34.00000+ 1.50000 +0.75000 + 0.75000 +0.75000
% AR est = 37.75 38

23.1.2 Anlisis de varianza (ANOVA) para la fermentacin y proceso general
El procedimiento para el clculo de los porcentajes de conversin y rendimiento

en la etapa de fermentacin y proceso general, es el mismo que se emple en el
anlisis de varianza para azcares reductores totales, los resultados se presentan en
la tabla 23.8.
Tabla 23.8 Variables respuestas con su valor promedio estimado
Variable Respuesta Valor estimado

Porcentaje de conversin en fermentacin 39
Porcentaje de rendimiento en fermentacin 79
Porcentaje de conversin proceso general 24
Porcentaje de rendimiento proceso general 30

Anexo: 23.1
23.1.1 Resultados del anlisis del porcentaje de alcohol mediante anlisis
Cromatogrfico
Calibracin del equipo y especificaciones para la cuantificacin del porcentaje de

Alcohol etlico

Curva de Calibracin

Especificaciones para el anlisis del experimento 1

Cromatograma experimento 1

Curva de calibrado para el experimento 1






















Anexo: 24
24.1 Glosario
Acidez: Es la cualidad de un cido. Pueden presentar caractersticas tales como sabor

agrio, liberacin de hidrgeno, o pH menor que 7 (a 25C). La escala ms comn para
cuantificar la acidez o la basicidad es el pH, que solo es aplicable para disolucin
acuosa. Sin embargo, fuera de disoluciones acuosas tambin es posible determinar y
cuantificar la acidez de diferentes sustancias.
pice: m. Extremo superior o punta de una cosa.
Biosntesis: s. f. Proceso celular mediante el cual los organismos vivos elaboran

sustancias qumicas complejas a partir de otras ms sencillas, con el consecuente
gasto de energa metablica.
Biodegradable: Es el producto o sustancia que puede descomponerse en los

elementos qumicos que lo conforman, debido a la accin de agentes biolgicos, como
plantas, animales, microorganismos y hongos, bajo condiciones ambientales
naturales.
Calor latente: Cantidad de calor que es absorbida o liberada por una sustancia al
cambiar su estado sin sufrir un cambio de temperatura.
Ciperceas: f. pl. bot. Familia de monocotiledneas, herbceas, con rizoma, tallos

gralte. Triangulares y sin nudos, hojas envainadoras, flores unisexuales y fruto
monospermo. Los gneros ms importantes son Cyperus y Carex.
Ciclo Otto: Es el ciclo termodinmico que se aplica en los motores de combustin

interna de encendido provocado (motores de gasolina). Inventado por Nicolaus Otto
en 1872. Se caracteriza porque en una primera aproximacin terica, todo el calor se
aporta a volumen constante.

Coronta: Sinnimos: marlo, olote (Mxico), zuro, tusa (Colombia). Mazorca del maz
despus de desgranada.
Clorosis: f. Bot. Amarilleo de las partes verdes de una planta debido a la falta de
actividad de sus cloroplastos.
Dentado, -da: adj. Que tiene dientes, o puntas parecidas a dientes.
Detoxificacin: Liberacin de toxinas de un sustrato. La exposicin de vegetales y

suelos a txicos qumicos es una fuente gradual de aumento de la toxicidad en el
organismo animal en general y del ser humano en particular. Las toxinas orgnicas en
general y los productos qumicos inorgnicos, entre otros, se depositan en los diversos
rganos y tejidos, afectando su funcionamiento, lo que determina finalmente
disfunciones o alteraciones del funcionamiento orgnico, generando graves trastornos
orgnicos y enfermedades de tipo degenerativo.
Electrodilisis: quim. Procedimiento de separacin de los iones de una disolucin en

presencia de un campo magntico empleando para ello unas membranas que tienen
la propiedad de permitir el paso de los iones de un signo y no los de signo contrario.
Espeque: Una barra o palanca, generalmente de madera, utilizado en un molinete o

cabrestante, para el ancla agitado, y, en formas modificadas, para diversos fines.
El cogollero del maz: (Spodoptera frugiperda) es una especie de lepidptero

ditrisio de la familia Noctuidae muy conocida en el mbito agrcola por ser una plaga
bastante importante atacando distintos cultivos.
Fermentacin: bioqum. Proceso de transformacin de un sustrato orgnico

producido por enzimas de bacterias, levaduras u hongos en el cual se pueden liberar
gases o no. La transformacin se realiza mediante reacciones de oxidacin-reduccin
catalizadas por enzimas a travs de las cuales muchos microorganismos pueden
obtener energa, como productos residuales, alcoholes y cidos orgnicos.

Fosfofructoquinasa: bioqum. Cualquiera de un grupo de enzimas quinasas que

convertir fosfatos de fructosa a bifosfatos.
Fosfolpido: s. m. Lpido complejo que forma parte de la membrana celular.
Fngico, ca: adj. Perteneciente o relativo a los hongos.
Gluclisis: f. bioqum. Proceso bioqumico de degradacin de los glcidos.
Hexosa: f. bioqum. Azcar de seis tomos de carbono.
Hidrlisis: f. qum. Descomposicin de compuestos qumicos por accin del agua.
Lanceolado: adj. Se aplica a la hoja de una planta que tiene forma de punta de lanza.
Lmite Inferior de Explosividad (LIE): Es la concentracin mnima de gas en el aire

por debajo de la cual una explosin no es posible.
Lmite Superior de Explosividad (LSE): Es la mxima concentracin de gas en el

aire por encima de la cual una explosin no es posible.
Mollicutes o Tenericutes: Es un grupo inusual de bacterias que se distinguen por

carecer de pared celular y comnmente son llamados micoplasmas. Son parsitos
primarios de varios animales y plantas viviendo dentro de las clulas husped.
Monoico, -ca: adj. Se aplica a la planta espermatfita con flores de ambos sexos en
un mismo pie.
Morfologa: f. biol. Estudio de la forma externa y la estructura de los rganos u

organismos.

Necrtico: Es el material seco, negro, correoso que resulta de la destruccin de las

clulas.
Neutralizacin: qum. Reaccin qumica de un cido con una base; los productos
formados son: la sal correspondiente de estos compuestos y agua.
Nigrospora spp: Hongo ampliamente distribuido en suelos, planta en descomposicin

y semillas. Es un contaminante comn de laboratorios. Moho. Un crecimiento de
diminutos hongos que se forman sobre materia vegetal o animal, habitualmente como
una capa vellosa o peluda y asociado con la descomposicin o la humedad.
Octanaje: Es la escala que permite calificar el poder antidetonante de los carburantes,

cuando stos son comprimidos en el cilindro que forma parte de un motor. Esta escala,
tambin conocida como ndice de octano, considera una determinada combinacin de
hidrocarburos como base para poder realizar la comparacin correspondiente.
Panoja: s. f. Conjunto de espigas o racimos que nacen de un mismo tallo y que se ra

mifican a su vez en nuevos racimos: la mazorca del maz es una panoja.
Pentosa: f. bioqum. Cada uno de los azcares de cinco tomos de carbono.
Peso frmula: El peso frmula de una sustancia es la masa de los pesos atmicos de
los elementos de la frmula, tomados tantas veces como se indica en ella; es decir, el
peso frmula es la masa de la unidad frmula en uma. Los pesos frmula, al igual que
los pesos atmicos en los que se basan, son pesos relativos.
Pichia stipitis: (Aka stipitis Scheffersomyces ) es una especie de levadura, que

pertenece a la "CUG Clade" de levaduras ascomycetous. Este es un grupo de hongos
que serina sustituto de leucina cuando se encuentra el codn CUG. S. stipitis es
lejanamente relacionado con la levadura de cerveza, Saccharomyces cerevisiae y
tiene la capacidad natural ms alto conocido de cualquier levadura para fermentar

directamente xilosa, la conversin a etanol, un rasgo potencialmente valiosa

econmicamente.
Pilorriza: Extremo de la raz cuya funcin es proteger el meristemo apical del roce
contra el suelo. Se forma constantemente a partir de las clulas iniciales y se erosiona
y desgasta constantemente al penetrar por entre los grnulos del suelo.
Poder calorfico: Es la cantidad de calor que entrega un kilogramo o un metro cbico,

de combustible al oxidarse en forma metro cbico, de combustible al oxidarse en forma
completa.
Punto de ebullicin: Es la temperatura que se debe alcanzar para pasar una

sustancia del estado lquido al estado gaseoso.
Punto de inflamabilidad: Es el conjunto de condiciones de entorno en que una

sustancia combustible inflamable, est en condiciones de iniciar una combustin si se
le aplica una fuente de calor a suficiente temperatura, llegando al punto de ignicin.
Presin de vapor: Es la presin de la fase gaseosa o vapor de un slido o un lquido

sobre la fase lquida, para una temperatura determinada, en la que la fase lquida y el
vapor se encuentra en equilibrio dinmico; su valor es independiente de las cantidades
de lquido y vapor presentes mientras existan ambas.
Psicoactivo: Se considera a toda sustancia qumica de origen natural o sinttico que

al introducirse por cualquier va, ejerce un efecto directo sobre el sistema nervioso
central (SNC), ocasionando cambios especficos a sus funciones; que est compuesto
por el encfalo y la mdula espinal, de los organismos vivos. Estas sustancias son
capaces de inhibir el dolor, modificar el estado anmico o alterar las percepciones.
Raquis: bot. Nervio principal de una hoja.

Saccharomyces Cerevisiae: (Saccharo azcar, myces hongo y cerevisiae

cervecera) es un hongo unicelular, un tipo de levadura utilizado industrialmente en la
fabricacin de pan, cerveza y vino. En su ciclo de vida alternan dos formas, una
haploide y otra diploide. Ambas formas se reproducen de forma asexual por gemacin.
En condiciones muy determinadas la forma diploide es capaz de reproducirse
sexualmente.
Ssil: adj. BOT. Dc. De cualquier rgano que carece de pie o soporte.
Sustrato: m. biol. Lugar que sirve de asiento a una planta o animal fijo. bioqum.
Materia o sustancia sobre la que acta un fermento.
Taxonoma: Ciencia que trata de los principios, mtodos y fines de la clasificacin,

generalmente cientfica; se aplica, en especial, dentro de la biologa para la ordenacin
jerarquizada y sistemtica de los grupos de animales y de vegetales. "la taxonoma se
ocupa de la clasificacin de los seres vivos, encuadrndolos en categoras como
orden, familia o gnero".
Temperatura de fusin: Temperatura necesaria para la ocurrencia del cambio de

estado slido al lquido en una sustancia, cada sustancia ya sea pura o no posee un
valor de temperatura de fusin propio.

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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE NICARAGUA, MANAGUA

RECINTO UNIVERSITARIO RUBN DARO

TTULO: OBTENCIN DE BIOETANOL A PARTIR DE LA CORONTA

Bra. Kiara Yanibeth Montiel Centeno

Managua, Diciembre 2015

5. ANLISIS Y DISCUSIN DE LOS RESULTADOS 70

Anexo 1 Zonificacin ecolgica del cultivo del maz 1

Figura 2.1 Estructura de la coronta de maz 15

Figura 4.1 Morfologa de la planta de maz 5

Flujograma Preparacin de las soluciones para la curva de calibrado

Tabla 2.1 Principales pases productores de Maz a nivel mundial en el

Tabla 19.2 Longitud de onda en rango 588.0 a 413.0 nm con sus

Grfico 2.1 Desarrollo del mercado mundial de etanol 28

Diagrama 2.1 Produccin de Bioetanol a partir de biomasa 29

ACS: Grado reactivo analtico

ADP: Adenosin difosfato

AFEX: Explosin de fibra con amonaco

AGROMER: Agropecuaria Mercantel S.A. Es una empresa fundada en 2005. Joven,

ANOVA: Anlisis de varianza

ATP: Adenosin trifosfato

CA: Concentracin de cido

CO: Monxido de carbono

CO2: Dixido de carbono

DEKALB: Es un programa que proporciona al agricultor semilla de maz hbrido para

DNS: cido 3,5-dinitrosalicilico

EFMC: Efecto en masa de coronta

EFT0: Efecto en la temperatura

EFtH: Efecto en tiempo de hidrlisis

e2: Error dos

E-1: Experimento uno

E-2: Experimento dos

E-3: Experimento tres

E-4: Experimento cuatro

E-5: Experimento cinco

E-6: Experimento seis

E-7: Experimento siete

E-8: Experimento ocho

E5: Mezcla de 5 % de etanol y 95 % de gasolina

E10: Mezcla de 10 % de etanol y 90 % de gasolina

E20: Mezcla de 20 % de etanol y 80 % de gasolina

E95: Mezcla de 95 % de etanol y 5 % de gasolina

FAO: Organizacin de las Naciones Unidas para la Alimentacin y la Agricultura

G.L: Grados de libertad

H2SO4: cido sulfrico

HS-5: Hbrido del surco nmero cinco.

H2O2: Perxido de hidrgeno

HRP: Horseradish peroxidasa

INTA: Instituto Nicaragense de Tecnologa Agropecuaria

LHW: Agua lquida a alta temperatura

Lip: Lignina peroxidasa

MAGFOR: Ministerio Agropecuario y Forestal.

MC: Masa de coronta

MC1: Promedio de masa de coronta uno

MC1: Masa de coronta uno

MC2: Promedio de masa de coronta dos

MC2: masa de coronta dos

MmL: miles de millones de Litros

MnP: Manganeso peroxidasa

ML: Masa de levadura