Jeremy Israel Palma Carbo

gmd956 (050252 -0009)

Trabajo practico de Biologa NM #7

Fases de la mitosis

Tema: Identificacin de las fases de la mitosis en clulas vistas a travs de microscopio

Objetivos

Calcular el ndice mittico de las clulas observadas de acuerdo con las muestras

obtenidas desde el pice de la raz de la cebolla (Allium Cepa).

Identificar las cuatro fases de la mitosis y el estado de interfase en las clulas

meristemtico-apicales de la cebolla.

Variables

Independiente

o Fases en que se encuentre la clula en la mitosis

Dependiente

o ndice mittico

Controlada

o Tamao de la muestra

o Los reactivos utilizados

Hiptesis

La muestra que se tom desde el pice de la raz de 0 a 0,5 cm tendr un mayor ndice

mittico de clulas en Telofase que en Profase.

La muestra que se tom desde el pice de la raz de 0 a 0,5 cm tendr un mayor ndice

mittico de clulas en Profase que en Telofase.

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Marco terico

El ciclo celular

El ciclo celular es una secuencia ordenada de eventos que conducen a la proliferacin y

divisin celular en la que una clula madre da lugar a dos clulas hijas. De la adecuada

coordinacin del ciclo celular depende el desarrollo del organismo, su crecimiento y la

renovacin de sus clulas.

El ciclo celular se divide en dos fases: interfase y fase M o mitosis. La interfase es la fase de

replicacin y preparacin para la fase M que es la fase de divisin celular que incluye la

mitosis/meiosis.

La interfase se divide en 3 fases: G1, S y G2.

En la fase G1 (Growth 1) la clula crece, aumentando su masa celular. Es la primera

fase del ciclo, sensible a seales externas que inducen o inhiben la proliferacin

celular, como hormonas, factores de crecimiento o mitgenos.

Le sigue la fase S (Synthesis), que es la fase de replicacin del ADN. As, un

organismo diploide (2n) pasa a ser tetraploide (4n).

La interfase finaliza con la fase G2, una fase de preparacin para la mitosis, donde

ocurre la reparacin del ADN.

La fase M incluye la mitosis y la citocinesis. La mitosis es el reparto del material gentico

duplicado de la clula madre entre dos clulas hijas mientras que la citocinesis es el reparto

de citoplasma entre las dos clulas hijas incluyendo el proceso de "estrangulamiento" de la

clula madre para dar dos clulas hijas.

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Al final de la mitosis, la clula entra en interfase, si esa clula ya no se va a dividir ms, entra

en lo que se denomina perodo G0, si por el contrario esa clula va a volver a dividirse entra

de nuevo en el perodo G1 previo a la sntesis del ADN, e inicindose un nuevo ciclo de

divisin celular.

La fase G0, de quiescencia permanente o temporal, en la que se detiene el ciclo celular. En

esta fase quedan detenidas aquellas clulas que no se van a volver a dividir, as como aquellas

que necesitan estmulos externos o internos especficos para entrar en divisin. En los

mamferos muchas neuronas estn permanentemente en fase G0 mientras que algunos

hepatocitos estn en fase G0 slo temporalmente.

La fase con mayor duracin es la fase G1, y la de menor, la M. (Anexo 1)

La Mitosis y sus fases

Mitosis es la divisin celular propiamente dicha, y produce dos clulas hijas genticamente

idnticas entre s. Puede ocurrir en las clulas de los individuos eucariontes tanto haploides

como diploides. La mitosis propiamente dicha est compuesta de 4 etapas o fases: Profase,

Metafase, Anafase y Telofase. (Anexo 2)

Frecuentemente se ha discutido si la Interfase est incluida en la mitosis o no, pero

tcnicamente, no es parte de la divisin celular sino del ciclo celular.

Profase: En esta primera etapa, el material cromosmico llamado cromatina se

condensa y aparece gradualmente como barras cortas y los cromosomas pueden

comenzar a observarse con el microscopio A medida que los cromosomas se hacen

ms visibles ocurren dos eventos dentro de la clula, la membrana del ncleo y una

porcin contenida en l llamada nuclolo se desintegran y aparece una nueva

estructura tridimensional denominada huso mittico

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Metafase: Es la segunda etapa de la mitosis durante la cual los pares de cromosomas

se mueven hacia el centro o ecuador de la clula. Las cromtidas se disponen en una

fila formando ngulos rectos con las fibras del huso mittico.

Anafase: Es la tercera etapa de la mitosis, el centrmero de cada par se divide y los

cromosomas separados son jalados hacia los polos o extremos del huso mittico por

las fibras del huso.

Telofase: Es la ltima etapa de la mitosis, donde se forman dos ncleos hijos y el

citoplasma tambin completa su divisin mediante un plegamiento de la membrana

que comienza desde la periferia en la parte media y progresa hacia el centro de la

clula, donde se obtienen dos clulas hijas con igual dotacin de cromosomas y

citoplasma.

Citocinesis

La citocinesis (o cito diresis), significado: divisin de la clula, es un proceso celular

paralelo a la mitosis cuya finalidad es la divisin del citoplasma de la clula madre entre las

clulas hijas. No es igual en las clulas animales y vegetales debido a las caractersticas

fisiolgicas de cada una.

La citocinesis puede ser afectada por la cariocinesis (divisin nuclear), que es previa la

divisin del citoplasma. Por ejemplo, en casos en que se somete a una clula a cafena no se

produce citocinesis, lo que hace que la clula experimente cariocinesis y que el resultado sea

una clula poli nucleada. Por curiosidad tambin puede haber citocinesis sin cariocinesis, al

someterse la clula a bromuro de etilo, o citocinesis en clulas anucleadas.

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ndice Mittico

El ndice mittico es el coeficiente entre el nmero de clulas en proceso de mitosis en un

tejido y el nmero total de clulas observadas, el ndice describe el estado de proliferacin de

una poblacin, en otras palabras, la proporcin de unidades celulares en divisin. El ndice

puede presentar un valor elevado cuando se estn llevando a cabo procesos que promueven la

divisin celular tales como el crecimiento normal o la reparacin celular, adems de servir

como indicador en clulas cancerosas. Se puede calcular utilizando esta ecuacin:

ndice mittico = X 100%

Materiales de laboratorio
Reactivos

1 microscopio compuesto
Orcena actica
1 porta y cubre objetos
cido Clorhdrico (HCl) al 10%
1 bistur
Muestras
1 caja Petri plsticas o de vidrio/
1 cebolla (Allium Cepa)
o algn recipiente plano

Guantes

Preparacin de la muestra

De una a dos semanas antes de hacer la prctica se pone un bulbo de cebolla en un vaso de

precipitados lleno de agua, de tal manera que la parte inferior del mismo est en contacto con

el agua. No permita que la cebolla caiga dentro del recipiente, sino que quede suspendida

sobre el agua (si es necesario, inserte unos palillos de dientes en los lados de la cebolla para

que la sostengan).

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Al cabo de los esos das se habrn formado numerosas raicillas, cuyos pices se utilizarn en

esta prctica. Se debe cambiar el agua del frasco por agua limpia, al menos dos veces, a los 3

y 4 das. La raz de la cebolla debe de estar sumergida en agua hasta el momento de realizar

la prctica. (Fig. 1)

(Fig. 1)

Procedimiento

Nota: La muestra extrada fue de 0 a 0,5 cm desde el pice de la raz.

1. Con un bistur se corta el extremo de varias raicillas, procurando que su longitud sea

de unos 2 a 3 mm. ya que es en esta zona de la raz donde se encuentran las clulas en

divisin. (Fig. 2)

2. Enjuague los pices de cebolla (fijados) en agua destilada por 30 segundos.

3. Coloque las races en un plato Petri/recipiente plano que contenga unos 3ml. de HCl

1% por 7-8 min. (esto se hace para romper la pared celular). (Fig. 3)

Nota: Se recomienda el uso de guantes en este paso ya que el manejo de cido

clorhdrico debe usarse con suma precaucin.

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4. Mientras transcurre el tiempo anterior, corte y conserve la porcin del pice de raz

que posea un tejido blanquecino (casi 2-3 mm del extremo de la raz) y deseche el

resto.

5. Transferir los pices a agua destilada y dejarlos all 30 segundos (enjuague).

6. Coloque el tejido sobre un portaobjetos e inmediatamente agregue dos gotas de

Orcena actica sobre ste durante 5min aprox. Este reactivo se lo utiliza para poder

visualizar mejor las fases que se encuentran en la muestra. (Fig. 4)

7. Coloque un trozo de papel toalla sobre el cubreobjetos; presione fuerte y

cuidadosamente por medio de un borrador de lpiz (esta tcnica se llama "extendido

por aplastamiento" o "squash). Recuerde que mientras est ms aplastado, las clulas

se separarn ms unas de las otras y se encontrarn en el mismo plano,

distinguindose mejor las distintas etapas de mitosis. (Fig. 5)

8. Despus del aplastamiento, si es necesario, levante el cubreobjetos con la ayuda de

una aguja de diseccin y agregue una gota adicional de Orcena actica; coloque

nuevamente el cubreobjetos sobre la muestra. (Fig. 6)

9. Observe al microscopio (primero con el objetivo 10x localice el rea adecuada, luego

pase a 40x para observar con detalles). (Fig. 7) (Anexo 3)

(Fig. 2) (Fig. 3) (Fig. 4)

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(Fig. 5) (Fig. 6) (Fig. 7)

Tabulacin de datos obtenidos

Tabla con el nmero de clulas que se observaron en el ciclo celular (Interfase, Mitosis)

y en la divisin celular (Profase, Metafase, Anafase, Telofase).

MITOSIS
Variable Interfase
Profase Metafase Anafase Telofase

No. de clulas 87 52 5 4 6

Total 87 67 154

Metodologa para el clculo del ndice mittico

1. Contar el nmero de clulas que se observa en el campo visual en 40x y calcular su

tamao real.
2. Separar el nmero de clulas por cada etapa de la mitosis (profase, metafase, anafase
y telofase) e interfase.
3. Calcular el ndice mittico, en la interfase y en la mitosis (profsico, metafsico,
anafsico, telofsico).

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Procesamiento de datos

Tamao real de la muestra

Medimos el campo de visin C.V X 1000 = 40x 0,35 X 1000 = 350 u

350
=
= 20
= 17,5

17,5
= = = 0,4375
40

Clculo del ndice mittico en el ciclo celular (Interfase, Mitosis) y en la divisin celular

durante las fases de la mitosis s (profsico, metafsico, anafsico, telofsico).

Interfase y mitosis (Grafico #1)

= 100

87
= 100% = 56,49%
154

= 100%

67
= 100% = 43,50 %
154

Fases de la mitosis (Grafico #2)

= 100%

52
= 100% = 77,61 %
67

5
= 100% = 7,46 %
67

4
= 100% = 5,97 %
67

6
= 100% = 8,95 %
67

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Anlisis

Con los resultados obtenidos en la observacin de la clula del pice de la raz de la cebolla

se puedo determinar en qu fases del ciclo celular se encuentras las clulas de la muestra,

muchas de ellas casi la mayor parte, se encontraba en la interfase 87/154 en relacin con la

mitosis 67/154 y calculando el ndice mittico nos mostr en qu proporcin se encontraban

distribuidas 56,49 % y 43,50% respectivamente. Estas clulas tambin se encontraban en

algunas fases de la divisin celular como profase, metafase, anafase y telofase, entre estas la

fase que ms abundaba era la profase 52/67 (77,61%), esto se pudo haber influenciado en el

momento de tomar la muestra ya que fue extrada de 0 a 0,5 cm desde el pice de la raz, y

hay podemos ver clulas que estn iniciando la divisin celular y por ende habr ms clulas

en profase en relacin con las dems.

Conclusin

Tras las investigaciones realizadas y con la comprobacin de la prctica con datos verdicos,

se puede llegar a la conclusin que la primera hiptesis es incorrecta aceptndose la segunda,

prcticamente porque la muestra extrada desde el pice de la raz, se puede notar como las

clulas estn iniciando la divisin celular y por ende habrn ms clulas en profase en

relacin a la telofase ya que las clulas que se encuentran en esta zonas deben ser

reemplazadas constantemente porque se daan debido al crecimiento constante de la raz, en

otras palabras la clulas que se encuentran en estas zonas experimentan ms rpido el proceso

de la mitosis por lo que se observaran ms clulas nuevas que estn iniciando una nueva

divisin celular.

Por otra parte, con los datos calculados de los ndices mitticos nos mostr en qu proporcin

se encontraban distribuidas las clulas en las distintas fases, cumpliendo los objetivos de la

prctica.

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Limitaciones

Al momento de contar las clulas se pudo haber cometido un error debido al cansancio visual

y pudo haber afectado a los resultados sin embargo se intent ser lo ms exacto posible.

Anexos

(Anexo #1) El ciclo celular

(Anexo #2) Fases de la Mitosis

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(Anexo #3) Muestra utilizada del pice de la cebolla

Fuente: Fotografa tomada de la muestra del grupo 1.
Grficos

#1: Porcentaje del ndice mittico en el ciclo

celular: Interfase y Mitosis

100
ndice mittico (%)

90
80 56.49
70
60 43.5
50
40
30
20
10
0

ndice mittico (%)

Interfase 56.49
Mitosis 43.5

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#1: Porcentaje del ndice mittico en el ciclo

celular: Interfase y Mitosis

Interfase Mitosis

44%

56%

#2: Porcentaje del ndice mittico len las

fases de la Mitosis

100
90
ndice mittico (%)

80
70
60
50
40
30
20
10
0
ndice profsico
ndice metafsico
ndice anafsico
ndice telofsico
ndice profsico ndice metafsico ndice anafsico ndice telofsico
ndice mittico (%) 77.61 7.46 5.97 8.95

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#2: Porcentaje del ndice mittico len las

fases de la Mitosis
ndice profsico ndice metafsico
ndice anafsico ndice telofsico

6% 9%
7%

78%

Bibliografa
Arteaga, C. (5 de Agosto de 2015). slideshare. Obtenido de DIVISIN CELULAR: LA
MITOSIS: http://es.slideshare.net/carolinataipearteaga/practica-n12ciclo-celular-
divisin-celular-la-mitosis

Medmol. (11 de Septiembre de 2007). Medicina Molecular FIBAO. Obtenido de Ciclo

celular: http://medmol.es/glosario/55/

Oxford University Press 2015. (2015). ndice mittico. Gran Bretaa: Oxford.

Romani, J. (10 de Mayo de 2013). Biologia general. Obtenido de CITOCINESIS EN

CLULAS ANIMALES Y VEGETALES:
http://generalbiology2012.blogspot.com/2013/05/citocinesis-en-celulas-animales-
y.html

CRITERIOS DE EVALUACION
COMPROMISO PERSONAL EXPLORACION ANLISIS EVALUACION COMUNICACIN TOTAL
(2 PUNTOS) (6 PUNTOS) (6 PUNTOS) (6 PUNTOS) (4 PUNTOS) (24 PUNTOS)

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