Autorreparación de Fisuras en Concreto
Autorreparación de Fisuras en Concreto
Autorreparación de Fisuras en Concreto
Directora:
Dra. Gloria Inés Beltrán Calvo
Profesora asociada a la Universidad Nacional de Colombia
Codirector:
Dr. Juan Manuel Lizarazo Marriaga
Profesor asociado a la Universidad Nacional de Colombia
Línea de Investigación:
Relaciones constitutivas de suelos, rocas y materiales afines
A la Dra. Gloria Inés Beltrán Calvo y al Dr. Juan Manuel Lizarazo, por su asesoría
en la elaboración del presente trabajo de investigación.
iii
SIGLAS
iv
UFC/mL: Unidades formadoras de colonias por mililitro.
µL: Microlitro
UNAL: Universidad Nacional de Colombia
USDA: United States Department of Agriculture (Departamento de Agricultura de
los Estados Unidos)
USP: United States Pharmacopeia (Farmacopea de los Estados Unidos)
v
RESUMEN
Para ello, inicialmente se realizó una revisión teórica y conceptual sobre los
principales aspectos que intervienen en el proceso de autorreparación de fisuras
en concreto mediante la adición de bacterias bioprecipitadoras de carbonato de
calcio (CaCO3). Igualmente, se realizó una recopilación bibliográfica sobre
diferentes artículos científicos que evalúan la efectividad de diferentes bacterias
bioprecipitadoras de carbonato de calcio (CaCO3) en la autorreparación de
fisuras, mediante pruebas de resistencia a la compresión, flexión y tracción,
permeabilidad y absorción de agua.
vi
ABSTRACT
Over the last few decades, the Colombian government, through the ministry of
transport et al, (2006), IDU (2011) e INVIAS (2013), have developed and
implemented specific techniques and methodologies used for the repairing and
upgrading of paved roads, both on national and district roads. It is noted that these
measures have not been enough to counteract the problems associated with rigid
pavements, including concrete cracking.
To mitigate this type of problem, the study of different self-healing methods has
been promoted internationally through the addition of bacterial strains, favoring the
precipitation of calcium carbonate crystals (CaCO3) as a possible alternative for
the filling and sealing cracks in concrete.
For this, initially a theoretical and conceptual review was carried out on the
principals aspects involved in the process of self-healing of cracks in concrete
through the addition of bioprecipitating calcium carbonate (CaCO3) bacteria. Also,
a bibliographical compilation was carried out on different scientific articles that
evaluate the effectiveness of different bioprecipitating calcium carbonate (CaCO 3)
bacteria, in the self - healing of cracks, through tests of strength compression,
flexure and traction, permeability and water absorption.
vii
TABLA DE CONTENIDO
p.
INTRODUCCIÓN 1
1. MARCO TEÓRICO 8
1.1. MECANISMOS DE FISURACIÓN EN PAVIMENTOS RÍGIDOS 8
1.2 CONCRETOS AUTORREPARABLES 10
1.2.1 Autorreparación autógena 11
1.2.2 Autorreparación autónoma 12
1.3 BACTERIAS PRECIPITADORAS DE CARBONATO DE CALCIO 14
(CaCO3)
1.3.3 Bacterias ureolíticas 14
1.3.3.1 Aspectos generales 14
1.3.3.2 Fases del crecimiento bacteriano 16
1.3.4 Factores que intervienen en la actividad de la enzima ureasa y su 17
influencia en la precipitación de carbonato de calcio (CaCO3)
1.4 PRECIPITACIÓN DE CARBONATO DE CALCIO (CaCO3) 19
1.4.1 Mecanismos en los procesos de la precipitación del carbonato de 21
calcio (CaCO3)
1.4.2 Precipitación de carbonato de calcio (CaCO3) inducida 23
microbiológicamente (MICP)
1.5 ASPECTOS GENERALES QUE CARACTERIZAN LA CEPA 27
BACTERIANA Sporosarcina pasteurii
1.5.1 Factores que intervienen en los procesos de hidrólisis de urea 27
(kurea), saturación de calcita (ks) y precipitación de carbonato de calcio
(CaCO3)
1.5.1.1 Influencia de las concentraciones bacterianas 27
1.5.1.2 Influencia de las concentraciones bacterianas, de urea y de iones 29
de Ca2+
1.5.1.3 Influencia de la Temperatura 30
1.5.1.4 Influencia del pH 31
1.5.2 Diferentes denominaciones de la cepa bacteriana de tipo 32
Sporosarcina pasteurii
1.5.3 Medios de cultivo de Sporosarcina pasteurii 33
viii
p.
1.5.4 Fuentes alternativas de nutrientes para el crecimiento y 37
supervivencia de la cepa bacteriana Sporosarcina pasteurii
1.5.4.1 Estudio realizado por Achal et al. (2008) 39
1.5.4.2 Estudio realizado por Achal et al. (2010) 41
1.5.4.3 Estudio realizado por Yoosathaporn et al (2016) 43
1.5.4.4 Estudio realizado por Williams et al (2016) 46
1.5.4.5 Conclusiones generales 55
1.6 MATERIAS PRIMAS DE CONCRETO 56
1.6.1 Cemento Portland 56
1.6.1.1 Clasificación 57
1.6.1.2 Composición química 58
1.6.1.3 Características físicas y mecánicas 58
1.6.2 Agregados 59
1.6.2.1 Agregado fino 60
1.6.2.2 Agregado grueso 61
1.6.3 Agua de mezcla 63
1.7 DISEÑO DE MEZCLA 65
1.7.1 Selección del asentamiento (slump) 65
1.7.2 Selección del tamaño máximo nominal (TMN) del agregado 66
1.7.3 Estimación del contenido de aire de la mezcla 66
1.7.4 Estimación del contenido de agua (A) de la mezcla 67
1.7.5 Determinación de la resistencia de diseño 68
1.7.6 Estimación de la relación agua/cemento (a/c) 71
1.7.6.1 Cálculo del contenido de cemento 72
1.7.7 Estimación de las especificaciones granulométricas de los agregados 72
1.7.8 Estimación de las proporciones de los agregados 72
1.7.8.1 Estimación de las proporciones de los agregados gruesos 72
1.7.8.2 Estimación de las proporciones de los agregados finos 74
1.7.9 Ajuste por humedad de los agregados 75
1.7.10 Ajustes por mezclas de prueba 77
1.8 SÍNTESIS DEL MARCO TEÓRICO 79
ix
p.
2. METODOLOGÍA Y ACTIVIDADES DESARROLLADAS 80
2.1 TIPO DE ESTUDIO 80
2.2 INSTRUMENTOS PARA LA RECOLECCIÓN DE LA INFORMACIÓN 80
2.3 PROCEDIMIENTO PARA LA RECOLECCIÓN DE LA INFORMACIÓN 80
2.3.1 Búsqueda y selección de documentos 80
2.3.2 Palabras claves 81
2.3.3 Selección de documentos 81
2.3.4 Análisis de documentos 84
x
p.
3.1.3.5 Discusión y análisis de resultados 106
3.1.4 Estudios realizados por XU, Jing et. al (2015) 106
3.1.4.1 Selección de bacterias 107
3.1.4.2 Medios de cultivo 107
3.1.4.3 Técnicas de cultivo 108
3.1.4.4 Selección de nutrientes 108
3.1.4.5 Procesos para determinar la precipitación de carbonato de calcio 109
(CaCO3)
3.1.4.6 Discusión y análisis de resultados 111
3.1.5 Estudios realizados por Lakshmi et. al (2016) 114
3.1.5.1 Selección de bacterias 114
3.1.5.2 Diseño de mezcla 115
3.1.5.3 Propiedades físico-mecánicas 116
3.1.5.4 Discusión y análisis de resultados 117
3.1.6 Estudios realizados por Chahal et. al (2011) 120
3.1.6.1 Selección de bacterias 121
3.1.6.2 Medio de cultivo 121
3.1.6.3 Propiedades físico-químicas de los agregados y aditivos 121
3.1.6.4 Diseño de mezcla 123
3.1.6.5 Propiedades físico-mecánicas 123
3.1.6.6 Técnicas para identificar los procesos de precipitación de cristales 126
de carbonato de calcio (CaCO3)
3.1.6.7 Discusión y análisis de resultados 126
3.1.7 Estudios realizados por Bang et. al (2001) 131
3.1.7.1 Selección de bacterias 131
3.1.7.2 Medio de cultivo 131
3.1.7.3 Inmovilización de las células bacterianas en espuma de 132
poliuretano (PU)
3.1.7.4 Técnicas para identificar los procesos de precipitación de cristales 133
de carbonato de calcio (CaCO3)
3.1.7.5 Propiedades físico-mecánicas 133
3.1.7.6 Discusión y análisis de resultados 134
xi
p.
3.1.8 Estudios realizados por Achal et. al (2013) 139
3.1.8.1 Selección de bacterias 139
3.1.8.2 Medio de Cultivo 140
3.1.8.3 Diseño de mezcla 140
3.1.8.4 Propiedades físico-mecánicas 140
3.1.8.5 Técnicas para identificar los procesos de precipitación de cristales 143
de carbonato de calcio (CaCO3)
3.1.8.6 Discusión y análisis de resultados 143
3.1.9 Estudios realizados por El-Enein et. al (2013) 148
3.1.9.1 Selección de bacterias 148
3.1.9.2 Medios de cultivo 148
3.1.9.3 Diseño de mezcla 149
3.1.9.4 Propiedades físico-mecánicas 149
3.1.9.5 Técnicas para identificar los procesos de precipitación de cristales 150
de carbonato de calcio (CaCO3)
3.1.9.6 Discusión y análisis de resultados 150
3.1.10 Estudios realizados por Chahal et. al (2012) 154
3.1.10.1 Selección de bacterias 154
3.1.10.2 Medio de cultivo 154
3.1.10.3 Actividad de la ureasa 155
3.1.10.4 Propiedades físico-químicas de los agregados y aditivos 156
3.1.10.5 Diseño de mezcla 159
3.1.10.6 Propiedades físico-mecánicas 159
3.1.10.7 Técnicas para identificar los procesos de precipitación de 162
cristales de carbonato de calcio (CaCO3)
3.1.10.8 Discusión y análisis de resultados 163
3.2 DISCUSIÓN Y ANÁLISIS DE RESULTADOS 168
3.2.1 Cepas bacterianas 168
3.2.2 Medios de cultivo 169
3.2.3 Concentraciones bacterianas 172
3.2.4 Diseño de mezcla 174
3.2.5 Conclusiones generales 176
xii
p.
4. PROPUESTA DE DISEÑO EXPERIMENTAL SOBRE MÉTODOS 179
BIOLÓGICOS DE AUTORREPARACIÓN DEL CONCRETO
4.1 SELECCIÓN DE MATERIALES 179
4.1.1 Tipo de cepa bacteriana 179
4.1.1.1 Medios de cultivo 181
4.1.1.2 Concentración bacteriana 183
4.1.1.3 Directrices para la preparación de la suspensión inicial y de 184
diluciones decimales para el recuento de colonias
4.1.2 Cemento Portland 189
4.1.3 Selección de los agregados 189
4.1.3.1 Agregados finos 189
4.1.3.2 Agregados gruesos 190
4.1.4 Agua de mezcla 190
4.2 DISEÑO DE MEZCLA 190
4.2.1 Selección de datos 190
4.2.2 Selección del asentamiento (slump) 191
4.2.3 Selección del tamaño máximo nominal (TMN) del agregado 192
4.2.4 Estimación del contenido de aire de la mezcla 192
4.2.5 Estimación del contenido de agua (A) de mezcla 192
4.2.6 Determinación de la resistencia de diseño 192
4.2.7 Estimación de la relación agua/cemento (a/c) 193
4.2.7.1 Cálculo del contenido de cemento 194
4.2.8 Estimación de las especificaciones granulométricas de los 194
agregados
4.2.9 Estimación de las proporciones de los agregados 194
4.2.9.1 Estimación de las proporciones de los agregados gruesos 195
4.2.9.2 Estimación de las proporciones de los agregados finos 196
4.2.10 Ajuste por humedad de los agregados 196
4.2.11 Proporción de mezcla 198
4.3 ELABORACIÓN DE MUESTRAS DE CONCRETO 199
4.3.1 Número de pruebas 199
4.3.2 Dimensiones de los especímenes de ensayo 200
xiii
p.
4.3.3 Preparación de la mezcla de concreto 201
4.3.4 Curado de los especímenes 204
4.4 FISURACIÓN DE MUESTRAS DE CONCRETO CON Y SIN 204
CONCENTRACIONES BACTERIANAS
4.4.1. Microscopia de barrido electrónico (SEM) 207
4.5 PRUEBAS DE RESISTENCIA A LA COMPRESIÓN Y FLEXIÓN, 208
PERMEABILIDAD Y ABSORCIÓN DE AGUA
4.5.1 Resistencia a la compresión 209
4.5.1.1 Objeto, importancia y uso 209
4.5.1.2 Equipo utilizado 210
4.5.1.3 Especificaciones de los especímenes de concreto 210
4.5.1.4 Metodología de ensayo 211
4.5.2 Resistencia a la flexión 212
4.5.2.1 Objeto, importancia y uso 212
4.5.2.2 Equipo utilizado 212
4.5.2.3 Especificaciones de los especímenes de concreto 213
4.5.2.4 Metodología de ensayo 214
4.5.3 Permeabilidad 215
4.5.3.1 Objeto, importancia y uso 216
4.5.3.2 Equipo utilizado 216
4.5.3.3 Especificaciones de los especímenes de concreto 216
4.5.3.4 Metodología de ensayo 217
4.5.4 Absorción del agua 219
4.5.4.1 Objeto, importancia y uso 219
4.5.4.2 Equipo utilizado. 219
4.5.4.3 Especificaciones de los especímenes de concreto 220
4.5.4.4 Metodología de ensayo 221
4.6 PRUEBAS DE MICROSCOPIA 223
4.7 APROXIMACIÓN DE LOS COSTOS PARA EL DESARROLLO DEL 224
DISEÑO EXPERIMENTAL PROPUESTO
4.7.1 Costos de la materia prima para la elaboración de los especímenes 227
de concreto
xiv
p.
4.7.1.1 Costos de materiales para la mezcla de concreto 227
4.7.1.2 Costo de la cepa bacteriana Sporosarcina pasteurii ATCC ® 227
700386™
4.7.1.3 Costo de los compuestos para los medios de cultivo 227
4.7.2 Costos de las pruebas de laboratorio 228
4.7.3 Cálculo del volumen requerido para los especímenes de concreto 230
4.7.4 Costos de las muestras de concreto con y sin concentraciones 232
bacterianas
4.7.5 Costo para 1m3 de concreto con y sin concentraciones bacterianas 233
4.7.6 Costo total para el desarrollo del diseño experimental propuesto con 234
y sin pruebas de laboratorio
4.8 SÍNTESIS DEL PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL PROPUESTO 234
BIBLIOGRAFÍA 248
ANEXOS 267
xv
LISTA DE TABLAS
p.
Tabla 1. Posibles causas y tipos de fisuras en pavimentos rígidos 9
Tabla 2. Aislamiento de bacterias ureolíticas que favorecen la actividad de 19
ureasa e inducen la precipitación de calcita
Tabla 3. Influencia de las concentraciones bacterianas de la cepa 28
Sporosarcina pasteurii en los procesos de hidrólisis de urea (kurea) y
precipitación de carbonato de calcio (CaCO 3)
Tabla 4. Influencia de las concentraciones bacterianas de la cepa 29
Sporosarcina pasteurii, de urea y de iones de Ca2+, en los procesos de
hidrólisis de urea (kurea) y precipitación de calcita (kp)
Tabla 5. Influencia de la temperatura de la Sporosarcina pasteurii en los 30
procesos de hidrólisis de urea (kurea), saturación de calcita (ks) y
precipitación de calcita (kp)
Tabla 6. Denominaciones de la cepa bacteriana de tipo Sporosarcina 32
pasteurii
Tabla 7. Organizaciones certificadas para el cultivo y comercialización de las 33
cepas bacterianas de tipo Sporosarcina pasteurii
Tabla 8. Medios de cultivo de cepas bacterianas de tipo Sporosarcina 34
pasteurii de colecciones bacteriológicas (ATCC, NCIB, NCTC, NRS, DSM)
Tabla 9. Medios de cultivo de cepas bacterianas de tipo Sporosarcina 35
pasteurii de Atlas (2010)
Tabla 10: Medios de cultivo de la cepa bacteriana Sporosarcina pasteurii 38
mediante fuentes alternativas de nutrientes
Tabla 11: Características físico-químicas del licor madre de lactosa (LML) 40
Tabla 12: Características físico-químicas del licor de maíz (CSL) 42
Tabla 13: Características físico-químicas del efluente de estiércol de pollo 44
(CME)
Tabla 14: Movilidad electroforética y potencial zeta de la bacteria 51
Sporosarcina pasteurii (ATCC 6453) cultivada en medio UYE, UME y UME-
SA
Tabla 15. Clasificación del cemento portland 57
Tabla 16. Composición química del cemento portland 58
Tabla 17. Características físicas y mecánicas del cemento portland 59
xvi
p.
Tabla 18. Requerimientos granulométricos para el agregado fino para 60
pavimentos de concreto hidráulico
Tabla 19. Requisitos del agregado fino para pavimentos de concreto 61
hidráulico
Tabla 20. Requerimientos granulométricos para el agregado grueso para 62
pavimentos de concreto hidráulico
Tabla 21. Requisitos del agregado grueso para pavimentos de concreto 62
hidráulico
Tabla 22. Requisitos para el agua de mezcla para concreto 64
Tabla 23. Límites químicos opcionales para el agua de mezclado 64
Tabla 24. Valores de asentamiento recomendados para diferentes 65
estructuras
Tabla 25. Estimación del contenido de aire de la mezcla 67
Tabla 26. Requerimientos aproximados de agua de mezclado y contenido 67
de aire para diferentes asentamientos y TMN del agregado
Tabla 27. Valores de t 69
Tabla 28. Coeficiente de modificación para la desviación estándar cuando 70
hay menos de 30 pruebas disponibles
Tabla 29. Resistencia requerida de diseño cuando no hay datos que 70
permitan determinar la desviación estándar
Tabla 30. Correspondencia entre la resistencia a la compresión a los 28 días 71
de edad y la relación a/c para los concretos con y sin inclusión de aire
Tabla 31. Volumen de agregado grueso, seco y compactado con varilla, por 73
volumen de concreto para diferentes módulos de finura de la arena
Tabla 32. Proporciones de los materiales de la mezcla en peso y en 74
volumen para 1 m3 de concreto
Tabla 33. Estados de humedad de los agregados 75
Tabla 34. Características de los estudios seleccionados 82
Tabla 35. Ficha bibliográfica 84
Tabla 36. Muestras de cepas bacterianas utilizadas para comprobar la 88
capacidad de formación de biopelículas, prueba de ureasa y bioprecipitación
de cristales de carbonato de calcio (CaCO3) provenientes de los puntos I, II y
III
xvii
p.
Tabla 37. Características bioquímicas y de formación de cristales de las 12 94
cepas mejores formadoras de biopelículas a las 24 y 48 horas en
microplacas
Tabla 38. Composición de especímenes de concreto 103
Tabla 39. Composición de los medios líquidos para cada grupo 108
Tabla 40. Constantes de precipitación de carbonato de CaCO 3 y producción 109
de amonio (NH4+) en los nutrientes minerales (nitrato de calcio y lactato de
calcio)
Tabla 41. Características de la bacteria Bacillus subtilis JC3 114
Tabla 42. Materiales de la mezcla de concreto 115
Tabla 43. Prueba de durabilidad con cloruro de sodio (NaCl) con y sin 118
concentraciones bacterianas
Tabla 44. Prueba de durabilidad con ácido sulfúrico (H2SO4) con y sin 118
concentraciones bacterianas
Tabla 45. Prueba de absorción de agua con y sin concentraciones 119
bacterianas
Tabla 46. Propiedades físicas del agregado fino y grueso 121
Tabla 47. Propiedades físicas de las cenizas volantes 122
Tabla 48. Propiedades químicas de las cenizas volantes 122
Tabla 49. Proporciones de mezcla de concreto con y sin ceniza volante 123
Tabla 50. Calificaciones de permeabilidad del cloruro 125
Tabla 51. Efecto de las bacterias Sporoscarcina pasteurii en la resistencia a 127
la compresión del concreto mediante la adición de cenizas volantes a los 28
días
Tabla 52. Efecto de las bacterias Sporoscarcina pasteurii en la prueba de 128
absorción de agua mediante la adición de cenizas volantes a los 7 días
Tabla 53. Efecto de bacterias Sporoscarcina pasteurii en la prueba de 129
permeabilidad de cloruro mediante la adición de cenizas volantes a los 28
días
Tabla 54. Valores de resistencia a la compresión en la autorreparación de 138
fisuras mediante la inmovilización de bacterias Sporoscarcina pasteurii en
espuma de poliuretano(PU)
xviii
p.
Tabla 55. Comparación de la permeabilidad en las muestras con y sin cepas 144
bacterianas de tipo Sporoscarcina pasteurii CT-5
Tabla 56. Propiedades físicas del cemento portland convencional 156
Tabla 57. Propiedades químicas del cemento portland convencional y el 157
humo de sílice
Tabla 58. Propiedades físicas del humo de sílice 157
Tabla 59. Propiedades físicas del agregado fino y grueso 158
Tabla 60. Análisis granulométrico de agregados gruesos 158
Tabla 61. Proporciones de mezcla de concreto con y sin humo de sílice 159
Tabla 62. Calificaciones de permeabilidad del cloruro 162
Tabla 63. Medios de cultivo para el estudio de la Sporosarcina pasteurii 170
Tabla 64. Mezcla de concreto utilizada por Jonkers, H., (2011) y Mors, R. y 174
Jonkers, H., (2012)
Tabla 65. Proporciones de mezcla de concreto con y sin ceniza volante 175
Tabla 66. Proporciones de mezcla de concreto con y sin humo de sílice 175
Tabla 67. Ficha técnica Sporosarcina pasteurii (ATCC ® 700386™) 180
Tabla 68. Medio de cultivo sugerido para la nutrición y conservación de la 181
Sporosarcina pasteurii ATCC ® 700386™
Tabla 69. Normas técnicas nacionales e internacionales para la preparación 182
y producción de medios de cultivo
Tabla 70. Reglas generales y directrices para la preparación de la 185
suspensión inicial y de diluciones decimales para análisis microbiológicos
Tabla 71. Selección de datos 191
Tabla 72. Valores de asentamiento recomendados para diferentes 191
estructuras
Tabla 73. Estimación del contenido de aire de la mezcla 192
Tabla 74. Requerimientos aproximados de agua de mezclado y contenido 192
de aire para diferentes asentamientos y TMN del agregado
Tabla 75. Coeficiente de modificación para la desviación estándar cuando 193
hay menos de 30 pruebas disponibles
Tabla 76. Correspondencia entre la resistencia a la compresión a los 28 días 193
de edad y la relación a/c para los concretos con y sin inclusión de aire
xix
p.
Tabla 77. Volumen de agregado grueso, seco y compactado con varilla, por 195
volumen de concreto para diferentes módulos de finura de la arena
Tabla 78. Proporción de mezcla de concreto 198
Tabla 79. Proporción de mezcla de concreto con y sin concentraciones 198
bacterianas
Tabla 80. Calculo del número de ensayos 199
Tabla 81. Dimensiones de las muestras de concreto para cada una de las 200
pruebas
Tabla 82. Especificaciones técnicas de los equipos necesarios para la 202
elaboración de especímenes de concreto
Tabla 83. Comparación de costos de los medios de cultivo (por litro) para el 225
crecimiento y nutrición de la cepa bacteriana Sporosarcina pasteurii
Tabla 84. Empresas colombianas distribuidoras de productos de laboratorio 226
de la compañía Sigma Aldrich
Tabla 85. Costos de materiales para la mezcla de concreto 227
Tabla 86. Costo (por litro) de los compuestos para los medios de cultivo de 228
la Sporosarcina pasteurii ATCC ® 700386™
Tabla 87. Lista de precios de las pruebas de laboratorio 229
Tabla 88. Costo de las pruebas de laboratorio 230
Tabla 89. Cálculo del volumen de concreto 231
Tabla 90. Volumen de concreto para las muestras con y sin concentraciones 231
bacterianas
Tabla 91. Costos de las muestras de concreto con concentraciones 232
bacterianas
Tabla 92. Costos de las muestras de concreto sin concentraciones 232
bacterianas
Tabla 93. Costo de 1m3 de concreto con concentraciones bacterianas 233
Tabla 94. Costo de 1m3 de concreto sin concentraciones bacterianas 233
Tabla 95. Costo total del diseño experimental propuesto con pruebas de 234
laboratorio
Tabla 96. Costo total del diseño experimental propuesto sin pruebas de 234
laboratorio
xx
p.
Tabla 97. Agregados livianos 287
Tabla 98. Clasificación de los minerales de arcilla según el tipo de 290
empaquetamiento
Tabla 99. Valores de resistencia a la compresión de AET 293
xxi
LISTA DE FIGURAS
p.
Figura 1. Estructuras polimorfas del Carbonato de Calcio (CaCO3) 20
Figura 2. Precipitación del carbonato de calcio (CaCO3) biológicamente 22
inducida y biológicamente controlada
Figura 3. Precipitación de calcita inducida microbiológicamente en las 24
bacterias ureolíticas
Figura 4. Crecimiento de Sporosarcina pasteurii (ATCC 6453) con los 48
diferentes medios de cultivo
Figura 5. Calorimetría isotérmica Crecimiento de Sporosarcina pasteurii 49
(ATCC 6453) con los diferentes medios de cultivo
Figura 6. Producción de amoniaco y porcentaje de urea consumida por 50
la cepa bacteriana Sporosarcina pasteurii (ATCC 6453)
Figura 7. Porcentajes en masa para las mezclas bacterianas con y sin 53
nutrientes
Figura 8. Resultado de la prueba de ureasa a los 8 días de incubación 91
Figura 9. Proceso de obtención de cristales de calcita 92
Figura 10. Imágenes microscópicas de cristales de carbonato de calcio 93
provenientes de las cepas bacterianas mejores formadoras de
biopelículas a los 15 y 22 días
Figura 11. Cristales de CaCO3 retenidos en filtros millipore y observados 97
mediante lupa binocular
Figura 12. Imágenes microscópicas de cristales de carbonato de calcio 98
CaCO3 precipitados por B. subtilis
Figura 13. Imágenes de ESEM/SE que muestra diversas formas de 98
cristales de carbonato de calcio (CaCO3)
Figura 14. Fotomicrografía en microscopio ESEM con aumento de 5000x 100
de bacterias formadoras de esporas resistentes a los álcalis (Cepa
Bacillus B2-E2-1)
Figura 15. Encapsulación en partículas de arcilla expandida porosa 102
Figura 16. Pre-fisuramiento de la muestra de concreto y posterior prueba 104
de permeabilidad
xxii
p.
Figura 17. Imágenes microscópicas de luz (aumento de 40 veces) antes 105
(izquierda) y después (derecha) de la cicatrización de las seis muestras
de (A) control pre-agrietado (B) bacteriana
Figura 18. Precipitación de carbonato de calcio (CaCO3) 109
Figura 19. Imágenes de microscopía electrónica de barrido (SEM) de 112
cristales obtenidos a partir los diferentes tipos de calcio: (a, c, e) nitrato
de calcio; (b, d y f) lactato de calcio
Figura 20. Autorreparación después de 100 días de inmersión en agua 120
Figura 21. Medición de la resistividad de la permeabilidad de cloruro 125
Figura 22. Efecto de las bacterias Sporoscarcina pasteurii en la 127
resistencia a la compresión del concreto mediante la adición de cenizas
volantes a los 28 días
Figura 23. Imagen de microscopía electrónica de barrido (SEM) de 130
concreto de control
Figura 24. Imagen de microscopía electrónica de barrido (SEM) de 130
cenizas volantes
Figura 25. Imágenes de microscopía electrónica de barrido (SEM) de las 135
muestras de células bacterianas inmovilizadas en espuma de poliuretano
(PU)
Figura 26. Formación de cristales de calcita mediante inmovilización de 136
las células bacterianas en poliuretano (PU)
Figura 27. Prueba de resistencia a la tracción y módulo de elasticidad 137
Figura 28. Medición de la porosidad en las muestras con y sin bacterias 144
Figura 29. Resistencia a la compresión de los cubos de mortero en: (a) 7 145
días y (b) 28 días con diferentes concentraciones de Bacillus
Sporoscarcina pasteurii CT - 5.
Figura 30. Imágenes de microscopía electrónica de barrido (SEM) que 146
evidencian el potencial de biocementación en muestras con
concentraciones bacterianas de Sporoscarcina pasteurii CT – 5
Figura 31. Imágenes de microscopía electrónica de barrido (SEM) que 147
compara las muestras de control con las muestras con concentraciones
bacterianas de Sporoscarcina pasteurii CT – 5
Figura 32. Prueba de absorción de agua a intervalos de 3, 7, 14 y 28 días 151
con y sin adición de bacterias
xxiii
p.
Figura 33. Prueba de resistencia a la compresión a intervalos de 3, 7, 14 152
y 28 días con y sin adición de bacterias
Figura 34. Imágenes de microscopía electrónica de barrido (SEM) que 153
muestra la precipitación de calcita después de 28 días con y sin adición
de bacterias
Figura 35. Imágenes de SEM y difracción de rayos X para la producción 155
de carbonato de calcio por bacterias Sporosarcina pasteurii
Figura 36. Actividad de la ureasa producida por la bacteria Sporosarcina 156
pasteurii
Figura 37. Resistencia a la compresión con y sin humo de sílice a los 28 163
(a) y 91 (b) días
Figura 38. Absorción de agua con y sin humo de sílice a los 28 (a) y 91 164
(b) días
Figura 39. Permeabilidad de cloruro con y sin humo de sílice a los 28 (a) 165
y 91 (b) días
Figura 40. Imagen de microscopía electrónica de barrido (SEM) de 166
muestra de control (a) y precipitación de calcita con concentración de
105 células/ml de bacterias y 10% de humo de sílice (b)
Figura 41. Difracción de rayos X de las muestras con concentración de 167
105 células/ml que contienen 5% de humo de sílice (a) y 10% de humo de
sílice (b)
Figura 42. Molde rectangular para la elaboración de especímenes de 205
concreto con y sin concentraciones bacterianas
Figura 43. Túnel de viento o cámara de condiciones ambientales 206
Figura 44. Estructura cristalina tetraédrica y octaédrica de las arcillas 289
Figura 45. Estructura del grano de arcilla expandida térmicamente (AET) 292
xxiv
LISTA DE ANEXOS
p.
ANEXO 1. ESTADO DE LA RED VIAL CRITERIO TÉCNICO SEGUNDO 267
SEMESTRE 2016
ANEXO 2. MATRIZ DE DIAGNÓSTICO-MANTENIMIENTO 268
ANEXO 3: FICHAS BIBLIOGRÁFICAS 270
ANEXO 4: AGREGADOS LIVIANOS – ARCILLA EXPANDIDA 286
TÉRMICAMENTE (AET)
A.4.1 AGREGADOS LIVIANOS 286
A.4.2 ARCILLA EXPANDIDA TERMICAMENTE (AET) 287
A.4.2.1 Definiciones generales 287
A.4.2.2 Mineralogía de las arcillas 288
A.4.2.3 Propiedades de la producción 291
A.4.2.4 Propiedades físico-químicas 291
xxv
INTRODUCCIÓN
Según el informe del INVIAS titulado “Resumen del estado de la red vial con
criterio técnico” donde se da a conocer la situación del estado de la red vial
pavimentada en el territorio nacional durante el primer semestre de 2016; se
advierte que de los 6.327,93 km, aproximadamente el 56.8% se encuentra en
buenas condiciones, mientras que el restante 43,2% se encuentra en regulares
(28,27%), malas (14,46%) y muy malas condiciones (0,47%).1 (Ver Anexo 1)
1
INVIAS. Estado de la red vial mediante criterio técnico primer semestre de 2016. 2016. En [línea]
2016. [Citado 2016-11-05]. Disponible en:
http://www.invias.gov.co/index.php/red-vial-nacional/2-uncategorised/57-estado-de-la-red-vial
2
MINISTERIO DE TRANSPORTE, PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA. Manual para el
mantenimiento de la red vial secundaria (pavimentada y en afirmado). (S/F). 106 p. En [línea]
2016. [Citado 2016-10-05]. Disponible en: Disponible en:
https://dirinfra.mintransporte.gov.co/pvr2/images/stories/documentos/pavimentos1.pdf
3
MINISTERIO DE TRANSPORTE, INSTITUTO NACIONAL DE VÍAS. Estudio e Investigación del
estado actual de las obras de la red nacional de carreteras. Convenio Interadministrativo 0587- 03.
Manual de Inspección visual para pavimentos rígidos. Vol. 1. 2006. 65 p. En [línea] 2016. [Citado
2016-10-05]. Disponible en:
http://www.academia.edu/9119887/ESTUDIO_E_INVESTIGACI%C3%93N_DEL_ESTADO_ACTU
AL_DE_LAS_OBRAS_DE_LA_RED_NACIONAL_DE_CARRETERAS_MANUAL_PARA_LA_INSP
ECCI%C3%93N_VISUAL_DE_PAVIMENTOS_R%C3%8DGIDOS
1
ambientales, mala calidad de las mezclas de concreto, fallas en los procesos
industriales de su fabricación, procesos constructivos y cargas soportadas que
provocan el deterioro de los materiales; entre otros aspectos que dan lugar a la
aparición de grietas y fisuras tanto a nivel de su estructura como en la superficie.
(Ver Tabla 1)
4
IDU. Especificaciones técnicas generales de materiales y construcción para proyectos de
infraestructura vial y de espacio público en Bogotá. 2011. En [línea] 2016. [Citado 2016-10-18].
Disponible en: https://www.idu.gov.co/web/geodata/esp-tecnicas/esp-tecnicas-2011
5
INVIAS. Especificaciones generales de construcción de carreteras y normas de ensayo para
materiales de carreteras. 2013. En [línea] 2016. [Citado 2016-10-25]. Disponible en:
http://www.invias.gov.co/index.php/documentos-tecnicos-izq/139-documento-tecnicos/1988-
especificaciones-generales-de-construccion-de-carreteras-y-normas-de-ensayo-para-materiales-
de-carreteras
2
autorreparación a través de la adición de microorganismos y compuestos viables,
económicos y amigables con el medio ambiente, como una posible alternativa que
pueda permitir la ―Autorreparación de fisuras en concreto rígido para pavimentos
mediante la adición de bacterias bioprecipitadoras de carbonato de calcio”.
Realizar una revisión teórica y conceptual sobre los principales aspectos que
intervienen en el proceso de autorreparación de fisuras en concreto mediante la
adición de bacterias bioprecipitadoras de carbonato de calcio (CaCO3).
Realizar una recopilación bibliográfica sobre los diferentes métodos que
pueden permitir la autorreparación de fisuras en concreto mediante la adición
de bacterias bioprecipitadoras de carbonato de calcio (CaCO3).
Identificar las propiedades físico-mecánicas factibles de mejorarse mediante los
métodos estudiados.
Plantear una metodología experimental que permita iniciar investigaciones en
nuestro medio sobre métodos biológicos de autorreparación del concreto.
3
En reciprocidad con los objetivos propuestos, a continuación se esbozan algunas
de las razones que sugieren la justificación del presente trabajo.
4
En virtud de los objetivos propuestos, el presente trabajo se desarrolla a través de
los siguientes capítulos:
5
Biotecnología, que permitieron argumentar los diferentes temas tratados en la
presente investigación.
6
calcio (CaCO3) como las propiedades físico-mecánicas de las muestras objeto de
ensayo; como marco de referencia para realizar una aproximación de los costos
para un eventual desarrollo de la propuesta ―Diseño experimental sobre métodos
biológicos de autorreparación del concreto‖.
7
1. MARCO TEÓRICO
8
Tabla 1. Posibles causas y tipos de fisuras en pavimentos rígidos.
CAUSAS NIVEL DE SEVERIDAD EVOLUCIÓN
PROBABLE
Fisuración por retracción o Tipo malla: Fisuras limitadas sólo a la superficie del pavimento.
Frecuentemente, las grietas de mayores dimensiones se orientan en sentido longitudinal y
se encuentran interconectadas por grietas más finas distribuidas en forma aleatoria
• Curado inapropiado del concreto. Se evalúa teniendo en cuenta la
• Exceso de amasado superficial presencia de descascaramientos en los
y/o adición de agua durante el bordes de las fisuras, los niveles de
alisado de la superficie. severidad definidos, son:
• Malla de refuerzo muy cerca a la La evolución más
superficie. • Baja: Fisuramiento bien definido pero probable de las
• Acción del clima o de productos sin descascaramiento. fisuras por
químicos. • Media: Fisuramiento con retracción, es el
• Segregación del concreto descascaramiento que afecta menos descascaramiento.
hidráulico debida al exceso de del 10% de la superficie deteriorada.
vibrado durante la compactación. • Alta: Fisuramiento con
• Adición de agua durante el descascaramiento que afecta al 10% o
alisado de la superficie. más de la superficie deteriorada.
Fisuras ligeras de aparición temprana: Fisuras delgadas, que afectan únicamente la superficie
de la losa, de longitud de 0.2 m a 1 m., la mayoría de las veces adquieren tendencia a ser
paralelas entre sí y eventualmente con 45° de orientación con respecto al eje de la vía.
Las fisuras ligeras de aparición La severidad de las fisuras ligeras
temprana aparecen en la de aparición temprana se evalúa
superficie del concreto teniendo en cuenta la presencia de
La evolución más
generalmente por contracción descascaramientos en los bordes de las
probable de las
plástica del concreto, que aparece fisuras, los niveles de severidad se
fisuras de
antes del fraguado final, por definen así:
aparición
secado prematuro. • Baja: Sin descascaramiento.
temprana es el
• Media: Descascaramiento menor al
descascaramiento.
10% de la losa.
• Alta: Descascaramiento mayor al 10%
de la losa.
Fisuración por durabilidad: Corresponde a una serie de grietas finas muy cercanas entre sí, que
aparecen cerca de las juntas longitudinales, transversales y cerca de los bordes libres de las
losas. Estas grietas suelen curvarse en la intersección de las juntas longitudinales y
transversales, presentan una coloración oscura.
• Ambientes alcalinos. Los niveles de severidad para la
• Reactividad álcali-sílice cuando fisuración por durabilidad, se definen en
los agregados son expuestos a forma cualitativa con base en la
cambios de temperatura. separación y abertura de la fisura y en
• Humedecimiento excesivo en la aparición de trozos de concreto de la
el borde del pavimento sumado a superficie, los niveles de severidad se
.
exceso de cargas. definen así:
Descascaramiento
• Baja: Grietas muy cercanas sin trozos
de la superficie de
sueltos o faltantes.
las losas de
• Media: Grietas bien definidas, con
concreto.
algunos trozos pequeños sueltos o
desplazados.
• Alta: Patrón de la falla bien
desarrollado, con una cantidad
significativa de trozos sueltos o
faltantes.
Fuente: Elaboración propia tomando como parámetro los lineamientos del ―Manual de
Inspección visual para pavimentos rígidos‖. Ministerio de Transporte et al., (2006).
9
Con base en los lineamientos del Manual de Inspección visual para pavimentos
rígidos del Ministerio de Transporte et al. (2006)6, en la Tabla 1 se presenta una
descripción de los diferentes tipos de fisuras, causas, nivel de severidad y
evolución probable que puede presentar un pavimento rígido; resaltando que los
niveles de severidad se determinan dependiendo de la gravedad del daño y
grado de deterioro de cada caso en particular.
6
MINISTERIO DE TRANSPORTE et al. (2006). Op. Cit. 65p.
7
ÚBEDA BERNABÉ, Cristina. Estudio comparativo de hormigones autosellantes. Tesis de
maestría. Universidad Politécnica de Madrid. 2014. p6. Disponible en:
http://oa.upm.es/32197/1/Tesis_master_Cristina_Ubeda_Bernabe.pdf
10
según Rubio (2016)8, este tipo de concretos posee mecanismos para cerrar
microfisuras sin ninguna intervención debido a los componentes de su matriz.
8
RUBIO GARDE, Laura. Caracterización de la recuperación de las propiedades mecánicas en
hormigones autosanables. Aplicación práctica en una nave industrial en Benifaió, Valencia.
Trabajo final de grado. Universidad Politécnica de Valencia. Valencia, 2016. p.6
https://riunet.upv.es/bitstream/handle/10251/69817/01_Memoria.pdf?sequence=1
9
H. MIHASHI Y T. NISHIWAKI. ―Development of Engineered Self-Healing and Self-Repairing
Concrete‖. Journal of Advanced Concrete Technology. Materials, Structures and Environment.,
vol. 10, pp. 170-184, 2012. En: RUBIO GARDE, Laura. Caracterización de la recuperación de las
propiedades mecánicas en hormigones autosanables. p.8
10
DE ROOIJ, Mario; VAN TITTELBOOM, Kim; DE BELIE, Nele; SCHLANGEN, Erik. Self-Healing
Phenomena in Cement-Based Materials. State-of-the-Art Report of RILEM Technical Committee
221-SHC: Self-Healing Phenomena in Cement-Based Materials. Volumen Nº 11. 2013. En: RUBIO
GARDE, Laura. Caracterización de la recuperación de las propiedades mecánicas en hormigones
autosanables. p.9
11
ÚBEDA. (2014). Op. Cit. p. 6
12
DE ROOIJ, M. et. al. (2013). Op. Cit. p. 9
11
De acuerdo con la definición preliminar, se advierte que la mayoría de los tipos
tradicionales de concreto contienen partículas de cemento no hidratadas
incorporadas en la matriz consideradas como depósitos de agente curativo,
debido a que al someterse a hidratación después de la penetración del agua en
las fisuras produce un sellado parcial o incluso completo de las fisuras‖;13
resaltando que este tipo de autorreparación corresponde a los procesos naturales
propios del concreto sin el uso de ningún tipo de aditivo.
13
RUBIO (2016). Op. Cit. p. 9
14
JONKERS, H. M. Bacteria-based self-healing concrete. Delft University of Technology, Faculty of
Civil Engineering and Geosciences, Department of Materials and Environment .Heron Journal. Vol.
Nº 56, 2011, p.1. En [línea] 2016. [Citado 2016-11-23]. Disponible en: http://heronjournal.nl/56-
12/1.pdf
12
los que se resaltan (De Muynck, W. et al. 2010)15, (Jonkers, H., 2011)16 y (Mors,
R. y Jonkers, H., 2012).17 Durante este proceso, el mecanismo de cicatrización
bacteriana obedece a las propiedades químicas, físicas y mecánicas presentes en
la matriz del concreto, donde el dióxido de carbono penetra en la fisura y
reacciona con la hidratación del hidróxido de calcio, provocando la precipitación
de carbonato de calcio (CaCO3) y/o cristales de calcita, que permiten el relleno y
sellado de la fisura.
15
DE MUYNCK, Willem; DE BELIE, Nele; VERSTRAETE, Willy. Microbial carbonate precipitation
in construction materials. Ecological Engineering Vol. Nº 36, 2010. p. 2. En [línea] 2016. [Citado
2016-11-22]. Disponible en:
http://www.xoch.info/uploads/7/7/9/2/7792995/microbial_carbonate_precipitation_review.pdf
16
JONKERS, H. M. (2011). Op. Cit., p. 12.
17
MORS, Renée M.; JONKERS, Henk M. Bacteria-based self-healing concrete – an introduction.
Universidad Tecnológica de Delft, Facultad de Ingeniería Civil y Geociencias. V International PhD
Student Workshop on Durability of Reinforced Concrete. Amsterdam, The Netherlands, 2012, 8 p.
En [línea] 2016. [Citado 2016-09-25]. Disponible en:
http://repository.tudelft.nl/islandora/object/uuid:e8436dfd-3eb8-4105-a11b-
a9cd0158e9f2/datastream/OBJ/download
18
Ibíd., p. 1
13
1.3 BACTERIAS PRECIPITADORAS DE CARBONATO DE CALCIO (CaCO3)
19
SIDDIQUE, Rafat; CHAHAL, Navneet. Effect of ureolytic bacteria on concrete properties. Punjab,
India. Department of Biotechnology and Environmental Sciences, Thapar University. Elsevier, Vol.
25. 2011, p.3. En [línea] 2017. [Citado 2017-08-26]. Disponible en:
https://www.researchgate.net/publication/241102896_Effect_of_ureolytic_bacteria_on_concrete_pr
operties
20
Ibíd., p. 3
14
separación entre núcleo y citoplasma y por tanto, su material genético no se
encuentra dentro de una membrana nuclear. 21
Morfología: Las bacterias presentan diferentes tamaños que pueden oscilar entre
0,5 y 5.0 μm de longitud y una amplia gama de formas, entre las que se
encuentran las esféricas llamadas cocos; en forma de bastón alargado
denominadas bacilos; en forma de bastón curvado llamadas espirilla o
espiroquetas y en forma de coma identificadas como vibrio, entre otras.23 Esta
amplia variedad de formas se determina por la pared celular bacteriana, a través
de la cual adquieren la capacidad para obtener nutrientes, adherirse a las
superficies y desplazarse a través de líquidos, entre otros procesos
indispensables para su supervivencia.
21
Ibíd., p. 2
22
Ibíd., p. 2
23
Ibíd., p. 2
24
Ibíd., p. 2
15
En el laboratorio, las bacterias se reproducen utilizando medios de cultivos sólidos
y líquidos. Para los medios de cultivo sólidos se emplean placas de agar para
aislar cultivos de una cepa bacteriana; mientras que para los medios de cultivo
líquidos generalmente se emplea agua destilada y diferentes tipos de nutrientes
para favorecer el crecimiento bacteriano en diferentes concentraciones de
células. A pesar de sus propiedades particulares, los dos medios de cultivo
requieren de sustancias nutritivas, una condición de pH adecuada, condiciones
asépticas y condiciones medioambientales propicias para garantizar el desarrollo,
crecimiento y supervivencia de los microorganismos.25
27
ANBU, Periasamy; KANG, Chang-Ho; SHIN, Yu-Jin & So, Jae-Seong. Formations of calcium
carbonate minerals by bacteria and its multiple applications. Springer Plus. Republic of Korea.
Vol. 5. Article 250, 2016. p.7. En [línea] 2016. [Citado 2016-10-22]. Disponible en:
https://springerplus.springeropen.com/articles/10.1186/s40064-016-1869-2
28
Ibíd., p. 7
29
Ibíd., p. 7
17
Concentración bacteriana. Las altas concentraciones de células bacterianas (de
106 a 108 células) aumentan la concentración de ureasa, proporcionan los sitios
de nucleación y crean un ambiente alcalino para propiciar la precipitación de
carbonato de calcio (CaCO3). Por lo tanto, la hidrólisis de urea tiene una relación
directa con las concentraciones de células bacterianas 30
30
Ibíd., p. 8
31
Ibíd., p. 8
32
Ibíd., p. 8
33
Ibíd., p. 9
34
Ibíd., p. 9
35
Ibíd., p. 9
18
muestran la capacidad de algunas bacterias en la actividad de ureasa para
inducir la precipitación de cristales de carbonato de calcio (CaCO3). (Ver Tabla
2)
40
Ibíd., p. 2
21
autores como ―Precipitación de carbonato de calcio inducida microbiológicamente
(MICP)‖. (Ver Figura 2) 41
43
Ibíd., p. 2
44
ANBU et. al (2016). Op. Cit. p.2.
45
Ibíd., p. 2
46
Ibíd., p. 2
23
iones de calcio, 2) la concentración del carbono inorgánico disuelto, 3) el pH, y 4)
la disponibilidad de sitios de nucleación para la formación de cristales de
carbonato de calcio. Los tres primeros parámetros influyen en la concentración de
iones de carbonato (CO3²¯) (estado de saturación), mientras que la disponibilidad
de sitios de nucleación es muy importante para la formación de carbonato de
calcio (CaCO3).47 En la Figura 3 se representan los eventos que se producen
durante la precipitación de calcita inducida microbiológicamente en las bacterias
ureolíticas.
Como se observa en la Figura 3, los iones de calcio son atraídos por los iones de
carga negativa en las paredes celulares de las bacterias. Una vez se suministra la
urea en el microentorno bacteriano, se liberan el carbono inorgánico disuelto
(DIC) y amonio (AMM) (a). La presencia de iones de calcio favorece una
sobresaturación y por lo tanto, la precipitación de carbonato de calcio (CaCO3) en
la pared celular bacteriana (b). Posteriormente la célula bacteriana se encapsula
limitando la transferencia de nutrientes, conduciendo a la muerte celular (c). En la
imagen (d) se observan las huellas de las células bacterianas implicadas en la
47
DE MUYNCK, W. et al. (2010). Op. Cit., p.2
24
precipitación de carbonato de calcio (CaCO3).48 En correspondencia con lo
anterior, De Muynck et al. (2010) explica la precipitación de calcita inducida
microbiológicamente en las bacterias ureolíticas de la siguiente manera.49
48
DE MUYNCK, W. et al. (2010). Op. Cit., p.9
49
Ibíd., p. 7-8
25
de la hidrólisis de la urea y los iones de calcio (Ca2+) derivados de una fuente de
calcio:
CO3²¯ + Ca2+ ↔ CaCO3
26
1.5 ASPECTOS GENERALES QUE CARACTERIZAN LA CEPA BACTERIANA
Sporosarcina pasteurii
50
ANBU et. al (2016). Op. Cit. p.2.
51
WONG, Leong Sing. Microbial cementation of ureolytic bacteria from the genus Bacillus: a
review of the bacterial application on cement-based materials for cleaner production. Selangor,
Malaysia. Journal of Cleaner Production. Elsevier Vol. 93, 2015. p.4. En [línea] 2016. [Citado 2016-
11-23]. Disponible en:
http://www.sciencedirect.com.ezproxy.unal.edu.co/science/article/pii/S0959652615000232
52
Ibíd., p. 3 - 4
53
Ibíd., p. 3
27
de hidrólisis de urea (kurea) y precipitación de carbonato de calcio (CaCO 3) (Ver
Tabla 3)
28
Estos resultados evidencian que la tasa de hidrólisis de urea tiene una relación
directa con las concentraciones de células bacterianas. Durante este proceso, las
altas concentraciones bacterianas aumentan la concentración de la enzima
ureasa, aceleran la conversión de urea a NH4+ y CO32-, proporcionan los sitios de
nucleación y crean un ambiente alcalino que induce la precipitación de carbonato
de calcio (CaCO3).
54
Ibíd., p. 4
29
Además de lo anterior, comprobaron que utilizando la misma concentración de
células bacterianas (7,2×105 células/ml) y de urea (250 mM) y aumentando la
concentración de Ca2+ (50 a 200 mM) a una temperatura de 20°C; la tasa de
hidrólisis de urea (kurea) y de saturación de calcita (ks) disminuyó, mientras que la
precipitación de calcita (kp) aumentó; concluyéndose que la concentración de Ca2+
es proporcional con la precipitación de carbonato de calcio (CaCO3).
55
Ibíd., p. 4
30
1.5.1.4 Influencia del pH. Los estudios realizados por Okwadha y Li (2010),
Tobler et al., (2011), Ferris et al. (2003) y Mitchell y Ferris (2005) citados por
Wong, L. (2015),56 evidenciaron que al mezclar la bacteria Sporosarcina pasteurii
con agua subterránea artificial, el pH de los medios de crecimiento se incrementó
de 6,5 a 9 aproximadamente, indicando que la tasa de hidrólisis de urea se
produjo en un medio de crecimiento óptimo de las bacterias, propiciando la
precipitación de carbonato de calcio (CaCO3).
Los estudios realizados por Okwadha y Li (2010), Tobler et al., (2011), Ferris et al.
(2003) y Mitchell y Ferris (2005) citados por Wong, L. (2015)57 concluyeron que la
tasa de hidrólisis de urea (kurea), saturación de calcita (ks) y precipitación de
carbonato de calcio (CaCO 3), dependen directamente de los factores ambientales
que involucran: el tipo de bacteria, concentración bacteriana, concentración de
urea y de calcio, temperatura y pH, respectivamente.
Una vez examinados los factores que intervienen en los procesos de hidrólisis de
urea (kurea), saturación de calcita (ks) y precipitación de carbonato de calcio
(CaCO3) utilizando la cepa bacteriana de tipo Sporosarcina pasteurii; a
continuación se examinan las diferentes denominaciones y medios de cultivo de
la cepa objeto de estudio, provenientes de colecciones bacteriológicas (ATCC,
NCIB, NCTC, NRS, DSM), como también otras fuentes alternativas de nutrientes
para el crecimiento y supervivencia de las células bacterianas; como marco de
referencia para futuras investigaciones relacionadas con el tema objeto de
investigación.
56
Ibíd., p. 3 - 4
57
Ibíd., p. 5
31
DSMZ-Deutsche Sammlung von Mikroorfanismen und Zellkulturen GmbH (DSM) y
la National Collection of Type Cultures (NCTC); avaladas por la normatividad
internacional para la implementación de estándares de calidad orientados al
cultivo, crecimiento, propagación, conservación, aplicación y su posterior
comercialización para fines científicos.
58
ISO: International Standard Organization (Organización Internacional para la Normalización)
59
ANSI: American National Standards Institute (Instituto Nacional Estadounidense de acreditación
de Estándares)
60
ANAB: ANSI-ASQ National Accreditation Board (Junta Nacional de acreditación de la ANSI-
ASQ)
61
FDA: Food and Drug Administration (Agencia de Alimentos y Medicamentos)
62
USDA: United States Department of Agriculture (Departamento de Agricultura de los Estados
Unidos)
63
AOAC: The association of analytical communities (Asociación de comunidades analíticas,
encargada de la validación de métodos y la garantía de calidad de laboratorio
64
USP: United States Pharmacopeia (Farmacopea de los Estados Unidos)
65
EP: European Pharmacopoeia (Farmacopea Europea)
66
OMS: Organización Mundial de la Salud
32
académicos, gubernamentales, biotecnológicos, farmacéuticos, agrícolas e
industriales, entre otros.
33
referencias provenientes de las organizaciones ATCC, NCIB, NCTC y NRS
comparten el mismo medio de cultivo, mientras que para las cepas bacterianas
ATCC 700386 y DSM 33 se utilizan otro tipo de nutrientes.
34
En concordancia con lo anterior, el estudio realizado por Atlas (2010)67
denominado ―Manual de Medios Microbiológicos, Cuarta Edición‖, realiza una
recopilación significativa de diferentes medios de cultivo para la bacteria
Sporosarcina pasteurii provenientes tanto de las organizaciones certificadas
citadas en la Tabla 7 como de diferentes investigaciones científicas de orden
internacional. La importancia de este compendio radica en la inclusión de
procedimientos a seguir para su preparación, constituyéndolo en un referente
importante para aplicaciones microbiológicas en diferentes campos.68 (Ver Tabla
9)
67
ATLAS, Ronald M. Handbook of microbiological media. Taylor & Francis Group. Washington,
D.C. Cuarta Edición. 2010. 2043p. En [línea] 2017. [Citado 2017-03-01]. Disponible en:
https://faculty.psau.edu.sa/filedownload/doc-4-pdf-c0f48c8ab1b8e41d825d24714e851659-
original.pdf
68
Ibíd., p.182.
35
Medio de cultivo - (Composición por litro) Preparación
Preparación del medio:
Bacillus pasteurii - Medio
Añadir los componentes al agua destilada
Urea ........................................... 20,0 g
/ desionizada y llevar el volumen a 1,0 l.
Agar............................................. 15,0 g
Mezclar bien.
Peptona.......................................... 5,0g
Calentar suavemente y llevar a ebullición.
NaCl............................................... 5,0g
Distribuir en tubos o frascos.
Extracto de levadura...................... 2,0g
Llevar a autoclave durante 15 minutos a
Extracto de carne…………............ 1,0 g
15 psi de presión a 121°C.
pH 7,4 +/- 0,2 a 25ºC Verter en placas de Petri estériles o dejar
en tubos.
Preparación del medio:
Se añade cada componente a un matraz
separado y se lleva el volumen de cada
Bacillus pasteurii NH4 YE Medio
uno a 333,0 ml con tampón Tris 0,13 mM,
(Medio de extracto de levadura de amonio)
pH 9,0.
Extracto de levadura................... 20,0 g
Llevar a autoclave los ingredientes por
Agar............................................. 20,0 g
separado durante 15 minutos a 15 psi de
(NH4)2SO4 .................................. 10,0 g
presión a 121°C.
No se produce crecimiento si los
pH 9,0 +/- 0,2 a 25ºC
componentes se esterilizan juntos. Enfriar
a 50°-55°C y combinar asépticamente las
soluciones.
Verter en placas de Petri estériles.
Bacillus pasteurii Agar Esporulación Preparación del medio:
Urea............................................ 20,0 g Añadir los componentes al agua destilada
Agar............................................ 15,0 g / desionizada y llevar el volumen a 1,0 l.
Peptona.......................................... 5,0g Calentar suavemente y llevar a ebullición.
Extracto de carne........................... 3,0g Ajuste el pH a 7,0. Autoclave durante 15
MnSO4 • H2O ........................... 10,0 mg minutos a 15 psi de presión a 121°C.
Verter en placas de Petri estériles o
pH 7,0 +/- 0,2 a 25ºC distribuir en tubos estériles.
Fuente: Atlas (2010). p.182
Como puede observarse, los medios de cultivo seleccionados por Atlas (2010),
además de recopilar los nutrientes recomendados por las colecciones
bacteriológicas para el crecimiento y nutrición de las cepas bacterianas, describe
36
de manera sencilla los procedimientos a seguir para su preparación, con una
mínima cantidad de sustancias orgánicas y un alto nivel nutricional.
37
Tabla 10. Medios de cultivo de la cepa bacteriana Sporosarcina pasteurii
mediante fuentes alternativas de nutrientes
AUTOR TÍTULO MEDIO DE CULTIVO
(COMPOSICIÓN POR LITRO)
Achal, v.; Lactose Mother Medio LML-urea (10% LML, 5 g de NaCl, 2%
Mukherjee, Liquor as an de urea y 25 mM CaCl2)
A.; Basu, Alternative Nutrient Medio NB-urea [8 g de caldo nutriente
P.C. (2008) Source for Microbial (Himedia, Mumbai, India), 5 g de NaCl, 2%
Concrete Production de urea y 25 mM CaCl2] y
by Sporosarcina Medio YE-urea [1 g de extracto de levadura
pasteurii. (Himedia, Mumbai, India), 5 g de NaCl, 2%
de urea y CaCl 25 mM2].
Achal, v.; Biocalcification by Medio CSL-urea que contenía (1,5% CSL,
Mukherjee, Sporosarcina 5g de NaCl, 2% de urea y 25 mM CaCl 2)
A.; Reddy, pasteurii using corn Medio NB-urea que contenía (8 g de caldo
M. (2010) steep liquor as nutriente, 5g de NaCl, 2% de urea y 25 mM
nutrient source. CaCl2)
Medio YE-urea que contenía (1 g de
extracto de levadura, 5g de NaCl, 2% de
urea y 25 mM de CaCl2).
Yoosathapor A cost effective Medio CME-urea que contenía (25% (v/v) de
n, s; cultivation medium efluente de estiércol de pollo, 20 g de urea y
Tiangburana for biocalcification of 25 mM CaCl2)
tham, P; Bacillus pasteurii Medio TSB-urea que contenía (30 g caldo de
Bovonsomb KCTC 3558 and its soja tríptico, 20 g de urea y 25 mM CaCl2)
ut, S; effect on cement Medio NB-urea que contenía (3 g de extracto
Chaipanich, cubes properties. de carne, 5 g de peptona, 20 g de urea y
A; Pathom- 25 mM CaCl2)
Aree, W. Medio modificado de producción que
(2016) contenía (0,5 g extracto de levadura, 2,6 g
de (NH4)2SO4, 1 g de MgSO4·7H2O, 0,032 g
de NiSO4·7H2O, 2,4 g de KH2PO4, 5,6 g de
K2HPO4, 20 g de urea y 25 mM CaCl2).
Williams, Optimization of Medio U-ME que contenía [(20 g/L de
Sarah l.; growth medium for extracto de carne (ME), 10 g/L de urea, y
Kirisits, Sporosarcina 15,75 g/L de Tris base (pH 9)].
Mary Jo; pasteurii in Medio U-CSL que contenía [(20 g/L de licor
Ferron, bio‑based cement de maíz (CSL), 10 g/L de urea, y 15,75 g/L
Raissa pastes to mitigate de Tris base (pH 9)].
38
AUTOR TÍTULO MEDIO DE CULTIVO
(COMPOSICIÓN POR LITRO)
Douglas. delay in hydration Medio U-LML que contenía [(20 g/L de licor
(2016) kinetics. madre de lactosa (LML), 10 g/L de urea, y
15,75 g/L de Tris base (pH 9)].
Medio U-SA que contenía [(20 g/L de acetato
de sodio (SA), 10 g/L de urea, y 15,75 g/L de
Tris base (pH 9)].
Medio U-Glu que contenía [(20 g/L de
glucosa (Glu), 10 g/L de urea, y 15,75 g/L de
Tris base (pH 9)].
Medio U-YE que contenía [(20 g/L de
extracto de levadura (YE), 10 g/L de urea, y
15,75 g/L de Tris base (pH 9)].
Fuente: Elaboración propia a partir de los estudios realizados por Achal et al.
(2008), Achal et al. (2010), Yoosathaporn et al (2016) y Williams et al (2016)
1.5.4.1 Estudio realizado por Achal et al. (2008). El estudio realizado por Achal
et al. (2008)69 se planteó como objetivo evaluar la efectividad de la cepa
bacteriana Sporosarcina pasteurii (NCIM 2477) en la prueba de ureasa,
precipitación de calcita y resistencia a la compresión, utilizando tres medios de
cultivo: NB-urea, YE-urea y LML-urea, resaltando que se éste último se evaluó
como fuente alternativa de nutriente.
69
ACHAL, V.; MUKHERJEE, A.; BASU, P. C. Lactose Mother Liquor as an Alternative Nutrient
Source for Microbial Concrete Production by Sporosarcina pasteurii. J Ind Microbiol Biotechnol.
Springer, Vol. 36, 2008. p.1. En [línea] 2017. [Citado 2017-08-31]. Disponible en:
https://www.researchgate.net/publication/23689203_Lactose_mother_liquor_as_an_alternative_nut
rient_source_for_microbial_concrete_production_by_Sporosarcina_pasteurii
70
Ibíd., p.1
39
Tabla 11: Características físico-químicas del licor madre de lactosa (LML).
Componente Cantidad
pH 6,20
Sólido (%) 5,50
Lactosa (%) 15,40
Proteínas (%) 8,00
Grasas (%) 2,00
Ceniza (%) 0,53
Calcio (mg/l) 353,00
Fósforo (mg/l) 35,00
Potasio (mg/l) 186,00
Sodio (mg/l) 44,00
Cloruro (mg/l) 90,00
Azufre (mg/l) 15,00
Fuente: Achal et al. (2008). p.2
1.5.4.2 Estudio realizado por Achal et al. (2010). El estudio realizado por Achal
et al. (2010)75 se planteó como objetivo evaluar la efectividad de la cepa
bacteriana Sporosarcina pasteurii (NCIM 2477) en la prueba de ureasa,
precipitación de calcita y resistencia a la compresión, utilizando tres medios de
cultivo: NB-urea, YE-urea y CSL-urea, resaltando que se éste último se evaluó
como fuente alternativa de nutriente.
73
Ibíd., p.4
74
Ibíd., p.5
75
ACHAL, V.; MUKHERJEE, A.; REDDY, S. Biocalcification by Sporosarcina pasteurii using corn
steep liquor as nutrient source. Industrial Biotechnology. Mary Ann Liebert, INC., Vol. 6, 2010. p.1.
En [línea] 2017. [Citado 2017-08-31]. Disponible en:
https://www.researchgate.net/publication/238322041_ORIGINAL_RESEARCH_Biocalcification_by
_Sporosarcina_pasteurii_using_corn_steep_liquor_as_the_nutrient_source
41
Yamunanagar, Haryana, India, respectivamente.76 El licor de maíz (CSL) se
analizó por sus propiedades físico-químicas enunciadas en la Tabla 12
76
Ibíd., p.1
77
Ibíd., p.1
42
Actividad de la ureasa: La cepa bacteriana Sporosarcina pasteurii mostró la
máxima producción de ureasa tanto en el medio CSL-urea (412 U/ml), como en
los medios NB-urea (412 U/ml) y YE-urea (412 U/ml), respectivamente.78
81
YOOSATHAPORN, S; TIANGBURANATHAM, P; BOVONSOMBUT, S; CHAIPANICH, A;
PATHOM-AREE, W. A cost effective cultivation medium for biocalcification of Bacillus pasteurii
KCTC 3558 and its effect on cement cubes properties. Microbiological Research, Elsevier, Vol.
186-187, 2016. p.1. En [línea] 2017. [Citado 2017-08-31]. Disponible en:
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0944501316300532?via%3Dihub#bbib0065
82
Ibíd., p.2
83
Ibíd., p.2
44
Medio TSB-urea que contenía (30 g caldo de soja tríptico, 20 g de urea y
25 mM CaCl2)
Medio NB-urea que contenía (3 g de extracto de carne, 5 g de peptona, 20 g de
urea y 25 mM CaCl2)
Medio modificado de producción que contenía (0,5 g extracto de levadura,
2,6 g de (NH4)2SO4, 1 g de MgSO4·7H2O, 0,032 g de NiSO4·7H2O, 2,4 g de
KH2PO4, 5,6 g de K2HPO4, 20 g de urea y 25 mM CaCl2).
Medio CME-urea que contenía (25% (v/v) de efluente de estiércol de pollo,
20 g de urea y 25 mM CaCl2)
Absorción de agua: Para esta prueba se fundieron cubos de concreto con y sin
concentraciones bacterianas de la cepa Bacillus pasteurii (KCTC3558) cultivadas
en medio CME-urea. Los resultados evidenciaron que la absorción de agua en
cubos de concreto preparados con el medio CME-urea (22,52) fue 6,03% mayor
que en la muestra de control (21,34).85
84
Ibíd., p.3
85
Ibíd., p.4
86
Ibíd., p.4
45
Conclusiones: Los resultados del estudio concluyeron que utilizando el medio
CME-urea se obtuvieron resultados superiores respecto a las muestras de
control, en las pruebas de ureasa, absorción de agua y resistencia a la
compresión. En correspondencia con lo anterior, se advierte que el medio CME-
urea puede servir como una fuente alternativa de nutrientes para el crecimiento
y actividad de la ureasa de la cepa bacteriana Bacillus pasteurii (KCTC3558)
87
WILLIAMS, Sarah L.; KIRISITS, Mary Jo; FERRON, Raissa Douglas. Optimization of growth
medium for Sporosarcina pasteurii in bio‑based cement pastes to mitigate delay in hydration
kinetics. J Ind Microbiol Biotechnol, Springer, Vol. 43, 2016. p.3. En [línea] 2017. [Citado 2017-08-
31]. Disponible en: http://link.springer.com.ezproxy.unal.edu.co/article/10.1007/s10295-015-
1726-2
88
Ibíd., p.3
46
Medios de cultivo para los ensayos de crecimiento. La ATCC recomienda el
siguiente medio de crecimiento líquido estándar para la cepa bacteriana
Sporosarcina pasteurii (ATCC 6453): 20 g/L de extracto de levadura, 10 g/L de
sulfato de amonio y 15,75 g/L de Tris base (pH 9,0). En el marco de estos
lineamientos, para efectos de este trabajo el extracto de levadura (YE) se
reemplazó por cada una de las fuentes alternativas de carbono utilizando los
siguientes medios de cultivo (por litro):89
Medio U-YE que contenía [(20 g/L de extracto de levadura (YE), 10 g/L de
urea, y 15,75 g/L de tris base (pH 9)].
Medio U-ME que contenía [(20 g/L de extracto de carne (ME), 10 g/L de urea,
y 15,75 g/L de tris base (pH 9)].
Medio U-CSL que contenía [(20 g/L de licor de maíz (CSL), 10 g/L de urea, y
15,75 g/L de tris base (pH 9)].
Medio U-LML que contenía [(20 g/L de licor madre de lactosa (LML), 10 g/L de
urea, y 15,75 g/L de tris base (pH 9)].
Medio U-SA que contenía [(20 g/L de acetato de sodio (SA), 10 g/L de urea, y
15,75 g/L de tris base (pH 9)].
Medio U-Glu que contenía [(20 g/L de glucosa (Glu), 10 g/L de urea, y 15,75
g/L de tris base (pH 9)].
89
Ibíd., p.3
90
Ibíd., p.3
47
Figura 4. Crecimiento de Sporosarcina pasteurii (ATCC 6453) con los diferentes
medios de cultivo
91
Ibíd., p.3
48
dispusieron 20 g de cada una de las mezclas en un Calorímetro Térmico durante
45 horas a una temperatura de 23°C, a fin de observar la velocidad de calor
durante el tiempo de duración de la prueba.92
92
Ibíd., p.3
93
Ibíd., p.3
49
mezcla (Pura). No obstante, las muestras de ME seguidas de las muestras de
CSL, YE y LML, respectivamente, mostraron un retraso en el calor de hidratación
de cemento. En similar sentido, se evidenció que la adición de Glu ocasionó un
retraso importante debido posiblemente a que el azúcar puede ser un retardante
del fraguado del cemento.
94
Ibíd., p.3
50
De acuerdo con la Figura 6(a), la cepa bacteriana Sporosarcina pasteurii (ATCC
6453) evidenció la máxima producción de amoniaco (NH3) en el medio UME-SA,
seguidos de los medios UYE y UME. Por su parte, en la Figura 6(b), se observa
que el mayor porcentaje de urea consumida se presentó en el medio UME-SA,
seguido por el UYE y UME, respectivamente.
95
Ibíd., p.7
51
en relación con las características y propiedades de las partículas de cemento;
deduciéndose que las células bacterianas pueden actuar como sitios para la
nucleación heterogénea de carbonato de calcio (CaCO 3).
96
Ibíd., p.5-6
52
Figura 7. Porcentajes en masa para las mezclas bacterianas con y sin nutrientes
53
Los resultados de la prueba de calorimetría isotérmica demostraron que SA no
mostró un retraso significativo en comparación con la pasta de cemento de la
mezcla (Pura). Si bien, las muestras de ME seguidas de las muestras de CSL, YE
y LML respectivamente, mostraron un retraso en el calor de hidratación de
cemento; se observó que la Glu presentó un retraso importante, debido
posiblemente a que el azúcar puede ser un retardante del fraguado del cemento.
Los resultados del estudio permiten concluir que los medios de cultivo: extracto
de carne (U-ME), extracto de levadura (U-YE) y acetato de sodio (U-SA)
favorecen la nutrición y crecimiento de la cepa bacteriana Sporosarcina pasteurii
(ATCC 6453) y en consecuencia, propician los procesos precipitación de
carbonato de calcio (CaCO3).
54
1.5.4.5 Conclusiones generales. Los estudios realizados por Achal et al. (2008)
y Achal et al. (2010) que utilizaron como fuentes alternativas de nutrientes: el licor
madre de lactosa (LML) y licor de maíz (CSL) respectivamente, a fin de
comparar su efectividad con: el caldo de nutriente (NB) y el extracto de levadura
(YE); concluyeron que en las pruebas de ureasa, precipitación de calcita y
resistencia a la compresión; el medio de cultivo que incluyó el CSL obtuvo
resultados superiores, mientras que el LML obtuvo resultados inferiores, con
respecto a los medios que incluyeron el NB y el YE.
Finalmente, el estudio realizado por Williams et al (2016) que utilizó como fuentes
alternativas de carbono: el extracto de carne (ME), licor de maíz (CSL), licor
madre de lactosa (LML), acetato de sodio (SA) y glucosa (Glu) en reemplazo del
extracto de levadura (YE); concluyó que en las pruebas de crecimiento
bacteriano, calorimetría isotérmica, hidrólisis de urea, movilidad electroforética y
potencial zeta y prueba de difracción de rayos x; los medios de cultivo que
incluyeron el extracto de carne (U-ME), extracto de levadura (U-YE) y acetato de
sodio (U-SA) obtuvieron resultados superiores comparados con los medios de
cultivo que incluyeron licor de maíz (CSL), licor madre de lactosa (LML) y
glucosa (Glu).
En términos generales, los estudios realizados por Achal et al. (2008), Achal et al.
(2010), Yoosathaporn et al (2016) y Williams et al (2016) que utilizaron como
fuente alternativa de nutrientes: el licor madre de lactosa (LML), el licor de maíz
(CSL) y el efluente de estiércol de pollo (CME), a fin de comparar su efectividad
55
con: el caldo de nutriente (NB), el extracto de levadura (YE), el caldo de soja
tríptico (TSB), el extracto de carne (NB), el acetato de sodio (SA) y la glucosa
(Glu), concluyeron que los medios de cultivo que incluyeron el CLS y el CME
obtuvieron resultados superiores respecto a las muestras de control, en las
pruebas objeto de investigación.
97
MOLINA ESCOBAR, Kenneth Alejandro. Evaluación de morteros para albañilería y
revestimientos elaborados a base de cementos mezclados con escorias de horno. Universidad de
San Carlos de Guatemala. Facultad de Ingeniería Civil. Guatemala. 2006, p.12. En [línea] 2017.
[Citado 2017-03-22]. Disponible en: http://biblioteca.usac.edu.gt/tesis/08/08_2608_C.pdf
98
RIVERA LÓPEZ, Gerardo Antonio. Concreto simple. Ingeniería y construcción. Facultad de
Ingeniería Civil. Universidad del Cauca. Concreto Simple. Popayán 3ª edición. 2006, 256p. En
[línea] 2017. [Citado 2017-02-18]. Disponible en:
http://www.mediafire.com/download/9ivt2x9ad6jax6f/Tecnologia-Concreto-y-Mortero-Rivera.pdf
99
MONTOYA TOBÓN, Laura María. Evaluación del desempeño del cemento portland tipo III
adicionado con sílice de diferentes tamaños de partícula. Tesis de pregrado. Universidad Nacional
de Colombia. Facultad de minas. Medellín. 2009, p.9. En [línea] 2017. [Citado 2017-03-22].
Disponible en: http://www.bdigital.unal.edu.co/876/1/43271665_2009.pdf.
56
Dentro de estos lineamientos, se deduce que el cemento portland se obtiene de la
pulverización del Clinker con la adición de una o más formas de sulfato de calcio u
otros compuestos que no afectan las propiedades del cemento resultante.100 En
relación con lo anterior, la clasificación, composición química y características
físico mecánicas del cemento portland se definen a través de las normas NTC 30,
NTC 321 y NTC 121; respectivamente, tal como se describe a continuación.
1.6.1.1 Clasificación. Según la norma técnica colombiana NTC 30, los cementos
portland se clasifican de la siguiente manera: 101
Como se observa en las Tabla 15 y 16, los diversos tipos de cemento están
conformados por compuestos químicos en diferentes proporciones que le
confieren propiedades especiales, tales como: mayor resistencia, bajo calor de
hidratación, resistencia a la acción de los sulfatos, estabilidad química; entre otras
características requeridas para cada una de sus aplicaciones.
100
ICONTEC. NTC 321. Ingeniería civil y arquitectura. Cemento portland. Especificaciones
químicas. Segunda actualización. Bogotá, 1982. 6p. En [línea] 2017. [Citado 2017-03-21].
Disponible en:
http://zonanet.zonafrancabogota.com/www/resources/NTC%20321%20de%201982.pdf
101
ICONTEC. NTC 30. Cemento Portland. Clasificación y nomenclatura. Bogotá, 1966. 4p. En
[línea] 2017. [Citado 2017-03-21]. Disponible en:
https://www.academia.edu/9500250/NTC-30-Cemento-Portland-Clasificacion-y-Nomenclatura
57
1.6.1.2 Composición química. Según la norma técnica colombiana NTC 321, el
cemento portland está conformado por los siguientes compuestos químicos:102
102
ICONTEC. NTC 321 (1982). Op. Cit. p.2.
103
ICONTEC. NTC 121. Ingeniería civil y arquitectura. Cemento portland. Especificaciones físicas
y mecánicas. Segunda actualización. Bogotá, 1982. 7p. En [línea] 2017. [Citado 2017-03-21].
Disponible en:
http://zonanet.zonafrancabogota.com/www/resources/NTC%20121%20de%201982.pdf
58
Tabla 17. Características físicas y mecánicas del cemento portland
Características Tipo 1 Tipo 1 M Tipo 2 Tipo 3 Tipo 4 Tipo 5
Finura de Blaine, m2/Kg, min 280 280 280 - 280 280
Expansión autoclave, % máx. 0,8 0,8 0,8 0,8 0,8 0,8
Tiempo de fraguado en minutos (método de Vicat)
Fraguado inicial, en minutos 45 45 45 45 45 45
Fraguado final, en horas 8 8 8 8 8 8
Resistencia mínima, MPa
1 día 10,0
3 días 8,0 12,5 10,5 21,0 - 8,5
7 días 15,0 19,5 17,5 - 7,0 15,5
28 días 24,0 - - - 17,5 21,0
Fuente: NTC 121 (1982). p.2
1.6.2 Agregados. Los agregados para concretos pueden definirse como aquellos
materiales inertes, de forma granular, naturales o artificiales, que mezclados con
el cemento Portland y el agua forman una masa compacta conocida con el
nombre de mortero o concreto. Además de lo anterior, las partículas de los
agregados poseen una resistencia propia que no afecta las propiedades de la
mezcla y garantizan una adherencia con la pasta endurecida del cemento
Portland.104 Según su tamaño pueden clasificarse en agregados finos y gruesos.
104
Rivera (2006). Op. Cit. p. 37
59
Para los procesos de construcción del pavimento de concreto hidráulico, las
especificaciones técnicas del INVIAS (2013); establecen tanto los requisitos
granulométricos como los parámetros de calidad, para los agregados finos y
gruesos de la siguiente manera. 105
1.6.2.1 Agregado fino. El agregado fino se define como la fracción que pasa el
tamiz de 4.75 mm (No. 4) proveniente de arenas naturales o de la trituración de
rocas, gravas y escorias siderúrgicas.106 Además de lo anterior, estos materiales
deben cumplir con los requerimientos tanto de granulometría como de calidad
establecidos en las Tablas 18 y 19.
105
INVIAS. Especificaciones generales de construcción de carreteras. Capítulo 5. Pavimentos de
concreto. Artículo 500. Bogotá, 2013. 74p. En [línea] 2017. [Citado 2017-03-22]. Disponible en:
https://www.invias.gov.co/index.php/documentos-tecnicos1/139-documento-tecnicos/1988-
especificaciones-generales-de-construccion-de-carreteras-y-normas-de-ensayo-para-materiales-
de-carreteras
106
Ibíd., p. 2
107
Ibíd., p.2
60
Tabla 19. Requisitos del agregado fino para pavimentos de concreto hidráulico
Norma de
Característica Requisito
ensayo INV
Durabilidad
Pérdidas en ensayo de solidez en sulfatos, máximo (%) E - 220 10 -15
‐ Sulfato de sodio
‐ Sulfato de magnesio
Limpieza
Índice de plasticidad (%) E‐125 y E‐126 NP
Equivalente de arena, mínimo (%) E‐133 60
Terrones de arcilla y partículas deleznables, máximo (%) E‐211 3
Partículas livianas, máximo (%) E‐221 0,5
Material que pasa el tamiz de 75 μm (No. 200), máximo E‐214 3
(%).
Contenido de materia orgánica
Color más oscuro permisible E-212 Igual a
muestra
patrón
Características químicas
Contenido de sulfatos, expresado como SO4 =, máximo (%) E-233 1,2
Absorción
Absorción de agua, máximo (%) E‐222 4
Fuente: INVÍAS (2013). Capítulo 5. Pavimentos de concreto. Art. 500. p.3.
108
Ibíd., p.3
61
De acuerdo con lo anterior, los agregados gruesos deben cumplir con los
requerimientos tanto de granulometría como de calidad establecidos en las Tablas
20 y 21.
% PASA
Fracción 1: 2 1/'' a
100 90-100 35-70 0-15 - 0-5 - - -
1 ''
AG 1
Fracción 2: 1 1/2''
- - 100 95-100 - 25-60 - 0-10 0-5
a No.4
Fracción 1: 2'' a
- 100 90-100 20-55 0-15 - 0-5 - -
3/4''
AG 2
Fracción 2: 1'' a
- - - 100 90-100 - 20-5 0-10 0-5
No.4
AG 3 1 1/2'' a No.4 - - 100 95-100 - 25-60 - 0-10 0-5
Fuente: INVÍAS (2013). Capítulo 5. Pavimentos de concreto. Art. 500. p.4.
Tabla 21. Requisitos del agregado grueso para pavimentos de concreto hidráulico
Característica Norma Requisito
Ensayo
INV
Dureza
Desgaste en la máquina de los Ángeles (Gradación A), E‐218 40 a 8
máximo (%) ‐ 500 revoluciones ‐ 100 revoluciones
Degradación por abrasión en el equipo Micro‐Deval, E‐238 30
máximo (%)
Resistencia mecánica por el método del 10 % de finos E‐224 90 a 75
‐ Valor en seco, mínimo (kN)
‐ Relación húmedo/seco, mínimo (%)
109
Ibíd., p.4
62
Característica Norma Requisito
Ensayo
INV
Durabilidad
Pérdidas en el ensayo de solidez en sulfatos, máximo % E-220 10-15
‐ Sulfato de sodio
‐ Sulfato de magnesio
Limpieza
Terrones de arcilla y partículas deleznables, máximo (%) E‐211 3
Partículas livianas, máximo (%) E‐221 0,5
Geometría de las partículas
Partículas fracturadas mecánicamente (una cara), E‐227 60
mínimo (%)
Partículas planas y alargadas (relación 5:1), máximo (%) E‐240 10
Características químicas
Proporción de sulfatos del material combinado, E‐233 1
expresado como SO4 =, máximo (%)
Reactividad álcali ‐ agregado grueso y fino: E‐234 SiO2 < R cuando
Concentración SiO2 y reducción de alcalinidad R R > 70
SiO2 < 35 + 0,5R
cuando R < 70
Fuente: INVÍAS (2013). Capítulo 5. Pavimentos de concreto. Art. 500. p.5.
1.6.3 Agua de mezcla. Acorde con las normas de ensayo establecidas por el
INVIAS (2013),110 para la elaboración de la mezcla de concreto hidráulico debe
utilizarse agua proveniente de acueductos o plantas de tratamiento confiables,
libre de ácidos, sulfatos, azucares, aceites y demás sustancias que puedan
perjudicar las propiedades del concreto. El agua proveniente de fuentes no
certificadas por las entidades responsables, deberá someterse a las normas de
ensayo establecidas en la Tabla 22.
110
INVIAS. Especificaciones generales de construcción de carreteras y normas de ensayo para
materiales de carreteras. Capítulo 6 – Estructuras y drenajes. Artículo 630. Bogotá, 2013. p.8. En
[línea] 2017. [Citado 2017-03-22]. Disponible en: https://www.invias.gov.co/index.php/documentos-
tecnicos1/139-documento-tecnicos/1988-especificaciones-generales-de-construccion-de-
carreteras-y-normas-de-ensayo-para-materiales-de-carreteras
63
Tabla 22. Requisitos para el agua de mezcla para concreto
Propiedad Norma de ensayo Límites
pH ASTM D 1293 5,5 – 8,5
Resistencia a compresión, % mínimo en control INV E‐410 90
a 28 días
Tiempo de fraguado, desviación respecto del ASTM C 403 de 1:00 inicial
tiempo de control (horas:minutos) a 1:30 final
Fuente: INVÍAS (2013). Capítulo 6 – estructuras y drenajes. Art. 630. p.8.
111
ACI. Standard Practice for Selecting Proportions for Normal, Heavyweight, and Mass Concrete
(ACI 211.1-91). Reported by ACI Committee 211. Michigan. EE.UU., 1991. 38p. En [línea] 2017.
[Citado 2017-08-05]. Disponible en: https://es.scribd.com/document/258681950/ACI-211
65
En la Tabla 24, se presentan diferentes asentamientos para determinadas
estructuras, resaltando que los valores pueden variar entre 2,5 y 10 cm
dependiendo de la consistencia del concreto y grado de trabajabilidad de la
muestra. En caso de que el valor del asentamiento no se encuentre dentro de los
parámetros de la Tabla, puede estimarse un valor adecuado para cada tipo de
obra, teniendo en cuenta la consistencia apropiada que garantice la eficiencia en
la colocación del concreto.
112
Ibíd., p.7
113
INVÍAS (2013). Capítulo 5. Pavimentos de concreto. Art. 500. Op. Cit. p.4
114
ACI 211.1 (1991). Op. Cit. p.22
66
Tabla 25. Estimación del contenido de aire de la mezcla
Porcentaje Porcentaje promedio total de aire
Agregado
promedio recomendado para los siguientes
Grueso
aproximado de aire grados de exposición
Pulgadas mm atrapado Suave Mediano Severo
3/8 9,5 3,0% 4,5 6,0 7,5
½ 12,5 2,5% 4,0 5,5 7,0
¾ 19 2,0% 3,5 5,0 6,0
1 25 1,5% 3,0 4,5 6,0
1½ 37,5 1,0% 2,5 4,5 5,5
2 50 0,5% 2,0 4,0 5,0
3 75 0,3% 1,5 3,5 4,5
6 150 0,2% 1,0 3,0 4,0
Fuente: ACI 211.1 (1991). Adaptación de la Tabla A1.5.3.3. p.22
67
Agua en kg/m3 de concreto para los TMN del agregado
Asentamiento cm indicados (mm)
9,5 12,5 19 25 38 50 70 150
Concreto con aire incluido
2,5 a 5,0 181 175 168 160 150 142 122 107
7,5 a 10 202 193 184 175 165 155 133 119
15 a 17,5 216 205 197 174 174 166 154 -
Fuente: ACI 211.1 (1991). Tabla A1.5.3.3. p.22
Dónde:
f'cr = Resistencia promedio requerido en obra (kg/cm2)
f’c = Resistencia especificada (kg/cm2)
115
ACI. Evaluation of Strength Test Results of Concrete (ACI 214R-02). Reported by ACI
Committee 214. Michigan. EE.UU., 2002. p. 9-10. En [línea] 2017. [Citado 2017-08-05]. Disponible
en: http://www.aice.cl/es/archivos/wp-aice-old/uploads/2012/01/214r_02.pdf
68
t = Factor que depende de la proporción del porcentaje de resultados menores del
valor de f’c que se admitan o de la probabilidad de ocurrencia.
Para ello se recomienda usar un mínimo de 30 muestras. (Ver Tabla 27)
σ = Valor preestimado de la desviación estándar (kg/cm2)
De acuerdo con los lineamientos de la norma ACI 318S (2008), para que el nivel
de resistencia de determinadas muestras de concreto se considere satisfactorio,
se deben cumplir los siguientes requisitos:116
Que ningún ensayo de resistencia debe ser menor que f´c en más de 35
kg/cm² y su probabilidad de ocurrencia no debe exceder de 1 en 100.
116
ACI. Requisitos de reglamento para concreto estructural (ACI 318S-08). Producido por el
Comité ACI 318. Michigan. EE.UU., 2008. p. 71-72. En [línea] 2017. [Citado 2017-08-05].
Disponible en: https://es.scribd.com/document/338684573/ACI-318S-08-pdf
69
Que el promedio de tres pruebas consecutivas de resistencia a la compresión
sea inferior de f´c y su probabilidad de ocurrencia no debe exceder de 1 en
100.
√
Tabla 29. Resistencia requerida de diseño cuando no hay datos que permitan
determinar la desviación estándar.
Resistencia especificada f’c (kg/cm2) Resistencia de diseño de la mezcla
f’cr (kg/cm2)
Menos de 210 kg/cm2 f’c + 70 kg/cm2
2 2
De 210 kg/cm a 350 kg/cm f’c + 83 kg/cm2
Más de 350 kg/cm2 1,10 f’c + 50 kg/cm2
Fuente: ACI 318S (2008). Tabla 5.3.2.2. Capítulo 5. p.72
70
1.7.6 Estimación de la relación agua/cemento (a/c). De conformidad con la
norma ACI 211.1 (1991), debido a que la resistencia a la compresión obedece a la
relación e interacción entre los agregados y demás constituyentes de la mezcla
del concreto, es probable que los diferentes grupos de materiales presenten
resistencias variables con la misma relación agua/cemento.
117
ACI 211.1 (1991). Op. Cit. p.9
71
1.7.6.1 Cálculo del contenido de cemento. Una vez obtenido el valor del
contenido de agua (Ver Tabla 26) y la relación a/c se procede a calcular el
contenido de cemento (C) por metro cúbico mediante la siguiente expresión:118
Dónde:
118
Ibíd., p. 12
72
Tabla 31. Volumen de agregado grueso, seco y compactado con varilla, por
volumen de concreto para diferentes módulos de finura de la arena
Volumen de agregado grueso secado en el horno por
Tamaño nominal
unidad de volumen de concreto para diferentes módulos
del agregado
de finura de agregado fino (b/bo)
Pulgadas mm 2,40 2,60 2,80 3,00
3/8 9,5 0,50 0,48 0,46 0,44
½ 12,5 0,59 0,57 0,55 0,53
¾ 19 0,66 0,67 0,62 0,60
1 25 0,71 0,69 0,67 0,65
1½ 37,5 0,75 0,73 0,71 0,69
2 50 0,78 0,76 0,74 0,72
3 75 0,82 0,80 0,78 0,76
6 150 0,87 0,85 0,83 0,81
Fuente: ACI 211.1 (1991). Tabla 6.3.6. p.12
Entonces:
( )
119
Ibíd., p.12
73
cálculo hasta en un 10%, teniendo en cuenta que la relación a/c, asentamiento y
resistencia del concreto, deben cumplir con los requerimientos establecidas en las
especificaciones técnicas enunciadas anteriormente.120
Vi = Pi/Gi
Dónde:
Vi = Volumen absoluto del material en l/m3
Pi = Peso seco del material en kg/m3
Gi = Peso específico del material (para los agregados debe usarse el peso
específico aparente seco) en g/cm3
Acorde con lo anterior, el peso seco del agregado fino se puede obtener al
multiplicar su volumen absoluto por su respectivo peso específico aparente, tal
como se indica en la Tabla 32.
120
Ibíd., p.12
74
1.7.9 Ajuste por humedad de los agregados. La porosidad que presentan los
agregados en la superficie puede provocar la absorción del agua de mezcla,
generando un contenido de humedad variable que dificulta una adecuada
dosificación por peso seco. Para minimizar estos limitantes, el contenido de agua
debe ajustarse a la mezcla dependiendo del grado de humedad de los agregados,
a fin de no alterar la relación a/c, ni perjudicar la trabajabilidad de la mezcla y la
resistencia del concreto.
[ ]
Dónde:
H = Humedad del agregado
Pa = Peso de una muestra de agregado con humedad natural
Ps = Peso de una muestra de agregado en estado S
122
ICONTEC. NTC 1776. Ingeniería civil y arquitectura. Método de ensayo para determinar por
Secado el contenido total de humedad de los agregados. Bogotá, 1994. p.4. En [línea] 2017.
[Citado 2017-08-10]. Disponible en: https://es.scribd.com/document/340673704/Norma-Tecnica-
Colombiana-1776
123
ASTM C70-13. Método de ensayo. Determinación de la humedad superficial en el agregado
fino. Traducción de la Comisión Guatemalteca de Normas. Ministerio de Economía. Guatemala.
2014. p.7. En [línea] 2017. [Citado 2017-08-11]. Disponible en:
http://www.iccg.org.gt/index.php/component/phocadownload/category/8-
agregados?download=95:astm-c70
76
Dónde:
Ph= Peso húmedo del agregado
Ps= Peso del agregado en estado S
H= Porcentaje de humedad del agregado
Con el fin de realizar las correcciones por humedad y absorción de los agregados,
se determina el agua en exceso o defecto respecto a la condición SSS (A a) de la
siguiente manera: 124
1.7.10 Ajustes por mezclas de prueba. Una vez calculadas las proporciones de
los materiales utilizados para la mezcla del concreto, se debe preparar una
mezcla de prueba a fin de realizar los ajustes pertinentes. Para ello, según las
124
ASTM C 127 (2001). Op. Cit. p. 3
125
Ibíd., p.3
77
recomendaciones de la ACI 211.1 (1991), se sugiere tener en cuenta las normas
ASTM que rigen el control de calidad de la mezcla de concreto. 126
126
ACI 211.1 (1991). Op. Cit. p.13
127
Ibíd., p.13
78
La dosificación del peso estimado por metro cúbico de concreto, se obtiene
aumentando o disminuyendo el porcentaje del contenido de aire de la mezcla,
respecto a la primera mezcla de prueba.
Finalmente, se calculan las nuevas proporciones de materiales de la mezcla,
modificando el volumen de agregado grueso en caso de que sea necesario, a
fin de obtener una trabajabilidad acorde con los requerimientos técnicos del
proyecto.
79
2. METODOLOGÍA Y ACTIVIDADES DESARROLLADAS
128
DÁVILA NEWMAN, Gladys. El razonamiento inductivo y deductivo dentro del proceso
investigativo en ciencias experimentales y sociales. Universidad Pedagógica Experimental
Libertador. Caracas, Venezuela. Revista de Educación Laurus, Vol. 12, 2006. p. 199. En [línea]
2016. [Citado 2016-03-03]. Disponible en: http://www.redalyc.org/pdf/761/76109911.pdf
80
entre los que se destacan: encapsulación bacteriana, incorporación de bacterias
inactivas en el interior de la mezcla de concreto, métodos para las pruebas de
precipitación de cristales de carbonato de calcio (CaCO3), entre otras técnicas
que contribuyen a la resistencia y durabilidad del concreto.
81
Tabla 34. Características de los estudios seleccionados
Nº Título Original Autores, año, país, Publicación
idioma
1 Estudio comparativo ÚBEDA BERNABÉ, Universidad Politécnica de
de hormigones Cristina. 2014. Madrid. Disponible en:
autosellantes España, Español. http://oa.upm.es/32197/1/Tesis_m
aster_Cristina_Ubeda_Bernabe.p
df
2 Caracterización de la RUBIO GARDE, Laura. Universidad Politécnica de
recuperación de las 2016. Valencia. Disponible en:
propiedades España, Español https://riunet.upv.es/bitstream/han
mecánicas en dle/10251/69817/01_Memoria.pdf
hormigones ?sequence=1
autosanables.
3 Hormigones auto- ALCARAZ MARÍN, Universidad Politécnica de
regenerantes: Jesús; PARRA COSTA, Cartagena. Disponible en:
Mecanismos y Carlos J. 2015. http://repositorio.upct.es/bitstream
procesos de España, Español /handle/10317/5371/hac.pdf?sequ
autosellado de ence=1
fisuras.
4 Self-Healing DE ROOIJ, Mario; VAN International union of laboratories
Phenomena in TITTELBOOM, Kim; DE and experts in construction
Cement-Based BELIE, Nele; materials, systems and structures
Materials. SCHLANGEN, Erik. (RILEM). Disponible en:
2013. http://www.rilem.org/docs/201314
Holanda, Inglés 2416_unedited-version-221-
shc.pdf
5 Application of bacteria JONKERS, Henk M.; ELSEVIER.COM. Disponible en:
as self-healing agent THIJSSEN, Arjan; https://www.researchgate.net/publ
for the development of MUYZER, Gerard; ication/222648872_Application_of
sustainable concrete. COPUROGLU, _bacteria_as_self-
Oguzhan; healing_agent_for_the_developm
SCHLANGEN, ent_of_sustainable_concrete
Erik.2008.
Holanda, Inglés
6 La bioprecipitación de PÁRAMO AGUILERA, Universidad Nacional de
carbonato de calcio Leandro; NARVÁEZ Ingeniería. Disponible en:
por la biota nativa ZAPATA, José Alberto; http://www.lamjol.info/index.php/N
como un método de ORTEGA MORALES, EXO/article/view/1779/1925
restauración Benjamín Otto.2015.
Nicaragua, Español
7 Caracterización de MONTOYA, Carolina; Revista Colombiana de
cristales de calcita MÁRQUEZ, Marco A.; Biotecnología, Vol. 7, Núm. 2.
bioprecipitada por un LÓPEZ, Jesús María; Disponible en:
aislamiento nativo de CUERVO, Claudia. http://revistas.unal.edu.co/index.p
Bacillus subtilis. 2005. hp/biotecnologia/rt/printerFriendly/
Colombia, Español 492/880
8 Bacteria-based self- MORS, Renée M.; Universidad Tecnológica de Delft,
healing concrete – an JONKERS, Henk M. Facultad de Ingeniería Civil y
introduction 2012. Holanda, Inglés Geociencias. Disponible en:
82
Nº Título Original Autores, año, país, Publicación
idioma
http://repository.tudelft.nl/islandor
a/object/uuid:e8436dfd-3eb8-
4105-a11b-
a9cd0158e9f2/datastream/OBJ/d
ownload
9 Bacteria-based self- JONKERS, Henk M. Heron Journal. Disponible en:
healing concrete 2011. http://heronjournal.nl/56-12/1.pdf
Holanda, Inglés
10 Effects of Calcium XU, Jing; DU, Yali; Frontiers in Microbiology.
Source on JIANG, Zhengwu & Disponible en:
Biochemical SHE, Anming. 2015. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/
Properties of Microbial China, Ingles articles/PMC4667088/pdf/fmicb-
CaCO3 Precipitation. 06-01366.pdf
11 Durability and Self- LAKSHMI.L,, MEERA IJIRSET Disponible en:
Healing Behaviour of .C.M, ELDHOSE, https://www.ijirset.com/upload/201
Bacterial Impregnated Cheriyan. 2016. 6/august/111_Durability.pdf
Concrete. India, Inglés
12 Influence of bacteria CHAHAL, Navneet; Elsevier Vol. 28. Disponible en:
on the compressive SIDDIQUE, Rafat; Disponible en:
strength, water RAJOR, Anita. 2011. http://www.sciencedirect.com.ezpr
absorption and rapid India, Inglés oxy.unal.edu.co/science/article/pii/
chloride permeability S0950061811003965
of fly ash concrete.
13 Calcite precipitation BANG, Sookie; Elsevier Vol. 28. Disponible en:
induced by GALINAT, Johnna; http://www.sciencedirect.com.ezpr
polyurethane- RAMAKRISHNAN, V. oxy.unal.edu.co/science/article/pii/
immobilized Bacillus 2001. S0141022900003483
pasteurii. EE.UU., Inglés
14 Biogenic treatment ACHAL, Varenyam; Elsevier Vol. 48. Disponible en:
improves the MUKERJEE, Abhijeet; http://www.sciencedirect.com.ezpr
durability and REDDY, M. Sudhakara. oxy.unal.edu.co/science/article/pii/
remediates the cracks 2013. S0950061813005795
of concrete structures India, Inglés
15 Application of EL-ENEIN, Abo; ALI, HBRC Journal, Vol. 9. Disponible
microbial AH; TALKHAN, Fatma; en:
biocementation to ABDEL-GAWWAD, HA. http://www.sciencedirect.com/scie
improve the physico- 2013. nce/article/pii/S168740481200026
mechanical properties Egipto, Inglés 0
of cement mortar.
16 Influence of bacteria CHAHAL, Navneet; Elsevier, Vol. 37. Disponible en:
on the compressive SIDDIQUE, Rafat; http://www.sciencedirect.com.ezpr
strength, water RAJOR, Anita. 2012. oxy.unal.edu.co/science/article/pii/
absorption and rapid India, Inglés S0950061812004989
chloride permeability
of concrete
incorporating silica
fume.
Fuente: Elaboración propia: Fichas descriptivas
83
De los artículos encontrados se seleccionaron los documentos que a juicio del
investigador contribuyen al desarrollo de la problemática planteada.
84
Etapa 1: Establecimiento al Estado del Arte: En esta etapa se realizó una
aproximación al estado del arte sobre los diferentes métodos que pueden permitir
la “Autorreparación de fisuras en concreto mediante la adición de bacterias
bioprecipitadoras de carbonato de calcio (CaCO3).”
85
3) Seguidamente se realiza un diseño de mezcla con las proporciones de
agregado, contenido de cemento, relación de agua/cemento y proporción de
adición de bacterias.
4) Acorde con las especificaciones técnicas de las normas ASTM C1579-06;
INV 402-13; NTC 4483 y ASTM C1585-13, se funden muestras de concreto
con y sin concentraciones bacterianas para ser utilizadas como muestras de
control.
5) Posteriormente se inducen fisuras en las muestras de concreto con y sin
concentraciones bacterianas, a fin de evaluar la precipitación de carbonato de
calcio (CaCO3).
6) Consecutivamente, se realizan pruebas de resistencia a la compresión y
flexión, permeabilidad y absorción de agua, con el fin de identificar la mejora
de las propiedades físico-mecánicas.
7) Finalmente se examinan las muestras con y sin concentraciones bacterianas
bajo el microscopio a fin de determinar la precipitación de carbonato de calcio
(CaCO3).
86
3. MÉTODOS DE AUTORREPARACIÓN DE CONCRETOS RÍGIDOS
MEDIANTE LA ADICIÓN DE BACTERIAS BIOPRECIPITADORAS DE
CARBONATO DE CALCIO
3.1.1 Estudios realizado por Páramo et. al (2015). A partir de diferentes tipos de
cepas bacterianas del Castillo Chapultepec (México), el estudio realizado por
Páramo et. al (2015)129 se planteó como objetivo, identificar los microorganismos
que presentaron los mejores resultados tanto en la formación de biopelículas,
como en la prueba de ureasa y en la producción de cristales de carbonato de
calcio (CaCO3), como una posible alternativa para la restauración de monumentos
mediante la utilización de la biota autóctona. En reciprocidad con los anteriores
lineamientos, a continuación se describen los diferentes procesos que permitieron
dar respuesta al tema objeto de estudio.
129
PÁRAMO AGUILERA, Leandro; NARVÁEZ ZAPATA, José Alberto; ORTEGA MORALES,
Benjamín Otto. La bioprecipitación de carbonato de calcio por la biota nativa como un método de
restauración. Programa de Investigación y Estudios Nacionales y Servicios Ambientales (PIENSA).
Universidad Nacional de Ingeniería (UNI). Managua, Nicaragua, 2015. p.1. En [línea] 2016. [Citado
2016-10-05]. Disponible en: http://www.lamjol.info/index.php/NEXO/article/view/1779/1925
87
3.1.1.1 Selección de bacterias. En cumplimiento con el objetivo planteado, se
seleccionaron 30 cepas bacterianas de diferentes tipos, entre las que se destacan
los microorganismo del género Bacillus. Para la recolección de las muestras se
escogieron tres puntos que cumplían con características climatológicas tales
como: la luz solar, temperatura, humedad, incidencia del aire, entre otros
aspectos que intervienen en los procesos de bioprecipitación de cristales de
carbonatos de calcio. Los puntos I y II se ubicaron en los cimientos del muro
perimetral, mientras el punto III se ubicó en el patio lateral del Castillo. 130 (Ver
Tabla 36)
130
Ibíd., p. 4
88
3.1.1.2 Medio de cultivo. Una vez escogidos los puntos I, II y III para la
recolección de muestras, las 30 cepas bacterianas se dispusieron en placa Petry
en 10 mL de medio líquido de cultivo LB (Luria Bertani, Miller) a 30ºC y con
agitación moderada de 50 rpm, a fin de observar su crecimiento a las durante las
siguientes 18 y 20 horas en condiciones ambientales de cuarto de cultivo.131
131
Ibíd., p. 5
132
Ibíd., p. 5
133
Ibíd., p. 5
134
Ibíd., p. 5
89
A las 24 horas: IS4 (Bacillus subtilis), IIIS10 (Bacillus subtilis), IS16 (Bacillus
subtilis), IIS15a (Bacillus cereus), IIIS5 (Bacillus simplex), IIIS4 (Bacillus
megaterium)
A las 48 horas: IS5 (Bacillus subtilis), IIIS9b (Bacillus subtilis), IS3 (Bacillus
subtilis), 31 (Bacillus simplex), IS6 (Pantoea agglomerans) y 21 (Pantoea
agglomerans)
135
Ibíd., p. 7
136
Ibíd., p. 7
90
observadas períodicamente, a fin de determinar su cambio de coloración, como
indicativo de la liberación de la ureasa.137 (Ver Figura 8)
137
Ibíd., p. 7
138
Ibíd., p. 11
91
(Luria Bertani, Miller), suplementadas con 0,2% de carbonato de calcio
(CaCO3).139
139
Ibíd., p. 7
140
Ibíd., p. 7
92
frasco Erlenmeyer se dejó en reposo durante un tiempo aproximado de 15
minutos, con el objetivo de inducir la precipitación de cristales de carbonato de
calcio (CaCO3) (Figura 9C). Los cristales de calcita obtenidos del proceso anterior
se sometieron a tres lavados con agua destilada y se dejaron en reposo durante
15 minutos para sedimentar los cristales de carbonato de calcio (CaCO 3) (Figura
9D). Finalmente, los cristales y el exceso de carbonato se retiraron del
Erlenmeyer y se envasaron en viales (Figura 9E), para los respectivos análisis de
microscopía.141
141
Ibíd., p. 7
142
Ibíd., p. 11
93
De acuerdo con la Figura 10, la observación microscópica permite evidenciar que
a los 15 y 22 días, las tres cepas bacterianas que presentaron mejores resultados
en la formación de biopelículas corresponden a las cepas BI y CI: Cepa IS16
(Bacillus subtilis), BII y CII: Cepa IIS15a (Bacillus cereus) y BIII y CIII: Cepa IIIS10
(Bacillus subtilis). Si bien, se observan cristales de carbonato de calcio (CaCO3)
de diferentes colores y tamaños en cada una de las muestras bacterianas, se
advierte que no se evidenciaron diferencias significativas entre los cristales
durante el tiempo de realización del ensayo.143
143
Ibíd., p. 11
94
Respecto a la prueba de capacidad para la formación de biopelículas se encontró
que las cepas bacterias que mostraron los mejores resultados a las 24 horas,
fueron: IS4 (Bacillus subtilis), IIIS10 (Bacillus subtilis), IS16 (Bacillus subtilis),
IIS15a (Bacillus cereus), IIIS5 (Bacillus simplex), IIIS4 (Bacillus megaterium) y a
las 48 horas fueron: IS5 (Bacillus subtilis), IIIS9b (Bacillus subtilis), IS3 (Bacillus
subtilis), 31 (Bacillus simplex), IS6 (Pantoea agglomerans) y 21 (Pantoea
agglomerans)
Lo anterior permite concluir que las cepas bacterianas IS16 (Bacillus subtilis),
IIS15a (Bacillus cereus) y IIIS10 (Bacillus subtilis) presentaron los mejores
resultados tanto en la formación de biopelículas como en la precipitación de
carbonato de calcio (CaCO3), resaltando además que la cepa IS16 (Bacillus
subtilis) también obtuvo resultados favorables en la prueba de ureasa.
3.1.2 Estudios realizado por Montoya et. al (2005). El estudio realizado por
Montoya et. al (2005)144 se planteó como objetivo, evaluar las características
mineralógicas de la precipitación de cristales de carbonato de calcio (CaCO3)
producidos por la cepa Bacillus subtilis extraída de una mina de oro situada en
Segovia (Antioquia).
144
MONTOYA, Carolina; MÁRQUEZ, Marco A.; LÓPEZ, Jesús María; CUERVO, Claudia.
Caracterización de cristales de calcita bioprecipitada por un aislamiento nativo de Bacillus subtilis.
Universidad Nacional de Colombia. Medellín. Revista Colombiana de Biotecnología, Vol. 7, Núm.
2, 2005, p.1. En [línea] 2016. [Citado 2016-09-25]. Disponible en:
http://revistas.unal.edu.co/index.php/biotecnologia/rt/printerFriendly/492/880
95
3.1.2.1 Selección de bacterias. En cumplimiento con el objetivo planteado, en
primera instancia se seleccionaron cepas bacterianas de tipo Bacillus subtilis de
los desechos de una mina de oro situada en Segovia (Antioquia).
145
El medio de cultivo LB (Luria Bertani, Miller) se utiliza para el cultivo de cepas recombinantes
de tipo Bacillus subtilis, toda vez que contribuye en su incubación, producción y mantenimiento
para fines industriales.
146
Ibíd., p. 2
147
VALENCIA GONZÁLEZ, Yamile, DE CARVALHO CAMAPUM, José, LARA-VALENCIA, Luis
Augusto. Influence of biomineralization on a profile of a tropical soil affected by erosive processes.
Universidad Nacional de Colombia. Medellín. DYNA, Volumen 82, Número 192, 2015, p. 223. En
[línea] 2017. [Citado 2017-08-22]. Disponible en:
http://revistas.unal.edu.co/index.php/dyna/article/view/42942/52337
96
A partir de los resultados de los cultivos líquidos y sólidos enunciados
anteriormente, a continuación de describen las características mineralógicas de la
precipitación de cristales de carbonato de calcio (CaCO3) producidos por la cepa
Bacillus subtilis.
Esta reacción que fue observada a través de lupa binocular con un aumento de
15x, permitió identificar la presencia de cristales de carbonato de calcio (CaCO3),
con un tamaño aproximado de 0,45 um, caracterizados principalmente por su
color crema y por presentar formas de cristales delgados agrupados en forma
aciculares radial.149 (Ver Figura 11).
3.1.3 Estudios realizados por (Jonkers, H., 2011) y (Mors, R. y Jonkers, H.,
2012). Los estudios realizados por (Jonkers, H., 2011) y (Mors, R. y Jonkers, H.,
2012) se plantearon como objetivo, identificar la efectividad de la bacteria de tipo
Bacillus (B2 - E2 - 1) mediante la adición de lactato de calcio en muestras de
concreto, con el fin de identificar la precipitación de carbonato de calcio (CaCO3) a
través de la prueba de permeabilidad.
152
Ibíd., p. 4
153
Universidad de Tecnología de Delft. Facultad de Ingeniería Civil y Geociencias, Departamento
de Materiales y Medio Ambiente - Microlaboratorio Delft, Países Bajos. En [línea] 2017. [Citado
2017-08-23]. Disponible en: https://www.tudelft.nl/over-tu-delft/
99
de bacterias consiste en su capacidad de formar estructuras diferenciadas de
paredes gruesas especializadas, conocidas con el nombre de esporas.
Estas esporas son células latentes pero inactivas por períodos superiores a los 50
años, siempre y cuando permanezcan en estado seco. Además de lo anterior,
pueden soportar tensiones mecánicas y químicas que se producen en las
condiciones internas del concreto; resaltando que al realizar las pruebas de
compatibilidad no mostraron influencias significativas sobre las características de
flexión y resistencia del concreto. 154 155 (Ver Figura 14)
Para solucionar las anteriores problemáticas, se demostró que cuando las cepas
bacterianas y el nutriente mineral se protegen a través de un encapsulamiento
pueden alcanzar un mayor potencial de viabilidad y actividad a largo plazo. 158
156
Ibíd., p. 4
157
JONKERS, Henk M. (2011), Op. Cit., p.4
158
MORS, R; JONKERS, H. M. (2012). Op. Cit. p.4
159
JONKERS, Henk M. (2011), Op. Cit., p.5
101
Figura 15. Encapsulación en partículas de arcilla expandida porosa.
De acuerdo con los resultados del estudio, los estudios de (Jonkers, H., 2011) y
(Mors, R. y Jonkers, H., 2012) evidenciaron que mediante la técnica de
encapsulado, la supervivencia de las esporas bacterianas incorporadas en el
concreto aumentó a 6 meses, favoreciendo la precipitación de carbonato de calcio
(CaCO3) y la capacidad para rellenar y sellar las fisuras en el concreto.160
160
Ibíd., p. 5
161
Ibíd., p. 5
162
Ibíd., p. 5
102
Tabla 38. Composición de especímenes de concreto.
Compuestos Volumen (cm3) Peso (g)
2 - 4 mm LWA * 196 167
1 - 2 mm LWA * 147 125
0,5 - 1 mm de arena 147 397
0,25 – 0,5 mm Arena 128 346
0,125 - 0,25 mm Arena 69 186
Cemento CEMI 42.5N 122 384
Agua 192 192
Total 1001 1796
Fuente: Jonkers, H. M. (2011). p.6
* LWA se refiere a los agregados ligeros; es decir a la proporción de arcilla expandida porosa.
163
Ibíd., p. 5
164
Ibíd., p. 6
103
Figura 16. Pre-fisuramiento de la muestra de concreto y posterior prueba de
permeabilidad
165
Ibíd., p. 6
166
Ibíd., p. 6
104
La comparación entre las muestras bacterianas y de control después de dos (2)
semanas de inmersión en agua, reveló una diferencia significativa en las pruebas
de permeabilidad y por lo tanto en la capacidad de relleno y sellado de
fisuras. (Ver Figura 17)
Como se observa en la Figura 17, las fisuras de las seis muestras que contenían
cepas bacterianas se sellaron completamente, evidenciando que no hubo indicios
de permeabilidad medible (percolación de 0 ml/h); mientras que de las fisuras de
las seis muestras de control, sólo dos parecían perfectamente curadas, las otras
cuatro presentaron valores de permeabilidad (percolación de agua) entre 0 y 2
ml/h, advirtiéndose que la precipitación se produjo en gran medida cerca del
borde de la fisura, dejando las principales partes de la fisura no cicatrizadas.167
167
Ibíd., p. 6
105
3.1.3.5 Discusión y análisis de resultados. El estudio realizado por (Jonkers,
H., 2011) y (Mors, R. y Jonkers, H., 2012), se concluye lo siguiente:
De conformidad con los resultados del estudio, se puede concluir que el relleno y
sellado de la fisura mediante la adición de cepas bacterianas precipitadoras de
carbonato de calcio (CaCO3) puede ser altamente beneficioso, toda vez que
puede bloquear las fisuras; reduciendo de esta manera, la permeabilidad de la
matriz y protegiendo el acero de refuerzo de agentes químicos agresivos que
aumentan la corrosión. Este tipo de curación a futuro podría aumentar la
durabilidad y la vida útil de las construcciones.
3.1.4 Estudios realizados por XU, Jing et. al., (2015). El estudio realizado por
XU, Jing et. al. (2015) se planteó como objetivo, evaluar el efecto de las cepas
bacterianas de tipo Sporosarcina pasteurii en los procesos de precipitación de
carbonato de calcio (CaCO3) mediante la adición de nitrato de calcio y lactato de
106
calcio a través de las pruebas de pH, concentración de calcio soluble (Ca 2+) y
concentración de amonio (NH4+).168
Para cumplir con el objetivo planteado, en primer lugar se seleccionaron las cepas
bacterianas y se prepararon los medios de cultivo con sus respectivos nutrientes,
a fin de identificar su efectividad en los procesos de precipitación de carbonato de
calcio (CaCO3). Seguidamente, se determinó el pH, la concentración de calcio
soluble (Ca2+) y la concentración de amonio (NH4+) en la formación de cristales de
calcita. En reciprocidad con lo anterior, a continuación se describen los diferentes
procesos para cumplir con los objetivos de la investigación.
168
XU, Jing; DU, Yali; JIANG, Zhengwu & SHE, Anming. Effects of Calcium Source on Biochemical
Properties of Microbial CaCO3 Precipitation. China. Frontiers in Microbiology, Vol. 6. Article 1366,
2015. p.4. En [línea] 2016. [Citado 2016-11-15]. Disponible en:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4667088/pdf/fmicb-06-01366.pdf
169
ATCC. American Type Culture Collection. USA. En [línea] 2017. [Citado 2017-08-23].
Disponible en: https://www.atcc.org/products/all/11859.aspx
170
Ibíd., p. 2
171
Ibíd., p. 2
107
3.1.4.3 Técnicas de cultivo. El crecimiento de las bacterias fue revisado
cuantitativamente bajo microscopio óptico, utilizando la cámara de Neubauer o
hemacitómetro para el recuento de microorganismos. Concluido el tiempo de
incubación, los cultivos bacterianos se depositaron en un tubo con agua destilada
para su lavado mediante centrifugación. La suspensión acuosa bacteriana se
analizó microscópicamente para cuantificar el número de células presentes y
posteriormente se mantuvo en medio fresco a 4ºC para su conservación
adecuada y uso posterior.172
172
Ibíd., p. 2
173
Ibíd., p. 2-3
108
fin de proveer un medio alcalino compatible con la concentración inicial de iones
de calcio.174
La Tabla anterior permite deducir que el lactato de calcio proporciona las fuentes
de calcio y de carbono indispensables para la nutrición de las bacterias,
174
Ibíd., p. 3
175
Ibíd., p. 3
176
Ibíd., p. 3
109
advirtiéndose que para efectos del presente estudio, es el nutriente mineral que
ofrece mejores resultados para la precipitación de carbonato de calcio (CaCO3).
110
22 - 26 h, se presentó un crecimiento y una densidad celular aumentado en casi
100 veces.
177
Ibíd., p. 4
178
Ibíd., p. 4
179
Ibíd., p. 4
111
En la primera etapa, el valor pH y de (Ca2+) se redujo gradualmente, mientras que
la concentración de amonio (NH4+) y densidad de las células mostraron cambios
poco significativos. La alcalinidad inicial del medio obedeció principalmente a la
descomposición de la urea durante la esterilización.
180
Ibíd., p. 4
181
Ibíd., p. 5
182
Ibíd., p. 5
112
Figura 19. Imágenes de microscopía electrónica de barrido (SEM) de cristales
obtenidos a partir los diferentes tipos de calcio: (a, c, e) nitrato de calcio; (b, d y f)
lactato de calcio
113
este respecto que el tipo de fuente de calcio, pH, temperatura, composición y
concentración de los nutrientes tiene un impacto significativo en el proceso de
precipitación de carbonato de calcio (CaCO3).
3.1.5 Estudios realizados por Lakshmi et. al (2016). El estudio realizado por
Lakshmi et. al (2016) se planteó como objetivo, evaluar la efectividad de la cepa
bacteriana de tipo B. subtilis jc3 durante el proceso de precipitación de carbonato
de calcio (CaCO3), mediante la realización de pruebas de durabilidad con
soluciones de sal y ácido sulfúrico, absorción del agua y resistencia a la
compresión.
La Bacillus subtilis JC3 es una bacteria Gram positiva en forma de bastón, que se
encuentra comúnmente en el suelo y en diferentes hábitats. Su gruesa membrana
celular le confiere la capacidad de formar endosporas protectoras que la hacen
114
resistente a ambientes hostiles con un pH alto, baja humedad y temperaturas
extremas.183
Por las anteriores características, las cepas bacterias tipo B. subtilis jc3 pueden
permanecer en estado de latencia en el interior del concreto por largos períodos
de tiempo hasta que se proporciona el ambiente adecuado para activarse. Acorde
con lo anterior, la aparición de fisuras en la estructura del concreto favorece la
entrada de agua y aire, reduciendo su pH y permitiendo la activación de las cepas
bacterianas para dar inicio al relleno y sellado de fisuras mediante los procesos de
precipitación de cristales de calcita.184
183
Ibíd., p. 3
184
Ibíd., p. 2
115
compresión de 17,48 N/mm2 y de 26,07 N/mm2, a los 7 y 28 días,
respectivamente.185
Prueba de absorción del agua: Para realizar las pruebas de absorción del agua
se fundieron 2 cubos de concreto de 100×100×100 mm. Uno (1) de ellos con la
adición de bacterias tipo B. subtilis jc3 y uno (1) sin bacterias para la muestra de
control.
185
Ibíd., p. 3
186
Ibíd., p. 3
187
Ibíd., p. 3
116
La prueba de absorción del agua se llevó a cabo a los 28 días a partir de la fecha
de inmersión. A fin de determinar el porcentaje de absorción de agua, tanto para
el concreto bacteriano como para la muestra de control, los cubos se pesaron y se
secaron al horno a una temperatura de 105ºC. Este proceso se repitió a intervalos
de 24 horas hasta lograr una diferencia poco significativa entre las medidas de las
dos masas.188
188
Ibíd., p. 3
189
Ibíd., p. 3
190
Ibíd., p. 4
117
peso tanto del concreto bacteriano como del concreto convencional, a los 14 y 28
días de inmersión en soluciones de NaCl y de H2SO4.
Tabla 43. Prueba de durabilidad con cloruro de sodio (NaCl) con y sin
concentraciones bacterianas
Tipo de Peso del cubo (Kg) Aumento Aumento
concreto Peso inicial Peso día 14 Peso día 28 porcentual porcentual
en peso en peso
(día 14) (día 28)
Concreto 2,587 2,598 2,609 0,425 0,85
convencional
Concreto 2,532 2,535 2,541 0,118 0,36
bacteriano
Fuente: Lakshmi et. al (2016). p.4
Tabla 44. Prueba de durabilidad con ácido sulfúrico (H2SO4) con y sin
concentraciones bacterianas
Tipo de Peso del cubo (Kg) Pérdida Pérdida Perdida
mezcla Peso Peso Peso porcentual porcentual porcentual
inicial día 14 día 28 en peso en peso en fuerza a la
(día 14) (día 28) compresión
118
inicial; advirtiéndose que se registró una mayor pérdida de peso en el concreto
convencional.
Tal como lo indican las Tablas 43, 44 y 45, los resultados de las pruebas
experimentales de durabilidad con cloruro de sodio y ácido sulfúrico y de
absorción de agua, permiten concluir que las muestras de concreto bacteriano
obtuvieron mejores resultados de durabilidad en comparación con las muestras de
control de concreto convencional.
3.1.6 Estudios realizados por Chahal et. al (2011). El estudio realizado por
Chahal et. al (2011)192 se planteó como objetivo, determinar el efecto de la
bacteria Sporoscarcina pasteurii en las pruebas de resistencia a la compresión,
absorción de agua y permeabilidad en cloruro con y sin cenizas volantes.
191
Ibíd., p. 5
192
CHAHAL, Navneet; SIDDIQUE, Rafat; RAJOR, Anita. Influence of bacteria on the compressive
strength, water absorption and rapid chloride permeability of fly ash concrete. Punjab, India.
Department of Biotechnology and Environmental Sciences, Thapar University. Elsevier, Vol. 28.
2011, p.2. En [línea] 2016. [Citado 2016-11-23]. Disponible en:
http://www.sciencedirect.com.ezproxy.unal.edu.co/science/article/pii/S0950061811003965
120
3.1.6.1 Selección de bacterias. Para el presente estudio se seleccionaron
bacterias de tipo Sporoscarcina pasteurii. proveniente de la rizosfera de la planta
de tulsi.193
193
Ibíd., p.3
194
Ibíd., p.2
195
Ibíd., p.2
121
En la Tabla 46 se presentan las propiedades físicas del agregado fino y grueso,
determinando su gravedad específica, módulo de finura y peso unitario de la
unidad (kg/m3) para cada uno de los tipos de agregado. Para los ensayos del
presente estudio se utilizó arena natural con un tamaño máximo de 4,75 mm en
forma de agregados finos y agregados gruesos con 12,5 mm de diámetro
nominal.196
196
Ibíd., p.3
122
3.1.6.4 Diseño de mezcla. Se seleccionaron concentraciones de 103, 105, 107
células/ml de tipo Sporoscarcina pasteurii para ser añadidas directamente en el
momento de la elaboración de la mezcla de concreto, conformada por cemento,
arena natural, cenizas volantes, agregado grueso y agua.
Para los ensayos de laboratorio, el peso de cemento se reemplazó con 0%, 10%,
20% y 30% de cenizas volantes. Se utilizó una relación de agua/cemento (A/C) de
0,5 y un escurrimiento slump entre 80 y 90 (mm). La mezcla de concreto se
diseñó para obtener una resistencia a la compresión de 28 MPa a los 28 días.197
197
Ibíd., p.3
123
Por último, se fundieron los cubos de concreto de 150×150×150 mm, seguido de
su compactación mediante una máquina de vibración. Finalmente, todas las
muestras se desmoldaron después de 24 horas y se curaron en agua a
temperatura ambiente durante un período de 28 días.198
Una vez realizados los anteriores procedimientos, el 50% de las muestras se selló
con recipiente de PVC de 90 mm de diámetro. Uno de los lados del recipiente se
llenó con solución de cloruro de sodio al 3% y se conectó al terminal de cátodo de
198
Ibíd., p.3
199
Ibíd., p.3
200
Ibíd., p.3
124
la fuente de alimentación. El lado opuesto se llenó con una solución de hidróxido
de sodio con una concentración de 0,3 N y se conectó al terminal del ánodo de la
fuente de alimentación.201 (Ver Figura 21)
Para interpretar los resultados de la prueba, se indica que cuanto mayor sea el
número de Coulomb o de la carga transferida durante la prueba, mayor es la
permeabilidad de la muestra (Ver Tabla 50). En este sentido, el concreto más
permeable mostrará mayor transferencia de carga y viceversa. Es preciso
subrayar que este método ha demostrado una buena correlación con las pruebas
de cloruro.
Q =9 0 0 (I 0 +2 I 3 0 +2 I 6 0 +2 I 9 0 +2 I 1 2 0 +⋯ +2 I 3 0 0 +2 I 3 3 0 +I 3 6 0 )
201
Ibíd., p.3
202
Ibíd., p.3
203
Ibíd., p.3
125
En la Tabla 50 se muestra la calificación de permeabilidad cloruro que permite
identificar los resultados de la transferencia de carga durante la prueba.
204
Ibíd., p.3 - 4
126
de agua y permeabilidad en cloruro con y sin cenizas volantes, permite concluir lo
siguiente:
205
Ibíd., p.4
128
Los anteriores resultados sugieren que la entrada del agua al concreto favorece la
precipitación de cristales de calcita. Este proceso contribuye al taponamiento de
los poros en el interior del concreto, lo que permite disminuir la absorción de agua
y permeabilidad de las muestras. En consecuencia, se deduce que la presencia
de cristales de calcita puede mejorar la resistencia y durabilidad del concreto, sin
que se perjudique la integridad de los materiales.
Los resultados de la prueba permiten concluir que la capacidad del concreto para
resistir la penetración de iones cloruro es un parámetro crítico en la determinación
de la vida útil de las estructuras de concreto expuestas a sales de deshielo o
entornos marinos. En correspondencia con lo anterior, se evidenció que las
muestras de concreto adicionadas tanto con cenizas volantes como bacterias
Sporoscarcina pasteurii en dosis óptimas mostraron una buena resistencia a la
penetración de cloruros.
129
Técnicas para identificar los procesos de precipitación de calcita
3.1.7 Estudios realizados por Bang et. al (2001). El estudio realizado por Bang
206
et. al (2001) se planteó como objetivo, evaluar la efectividad de las células
bacterianas Sporoscarcina pasteurii ATCC 11859 inmovilizadas en espuma de
poliuretano (PU) en los procesos de precipitación de carbonato de calcio (CaCO3)
mediante las pruebas de resistencia a la tracción y el módulo de elasticidad y
resistencia a la compresión del concreto.
206
BANG, Sookie; GALINAT, Johnna; RAMAKRISHNAN, V. Calcite precipitation induced by
polyurethane-immobilized Bacillus pasteurii . EEUU. Department of Chemistry and Chemical
Engineering, South Dakota School of Mines and Technology. Elsevier, Vol. 28. 2001, p1. En [línea]
2016. [Citado 2016-11-13]. Disponible en:
http://www.sciencedirect.com.ezproxy.unal.edu.co/science/article/pii/S0141022900003483
207
ATCC. American Type Culture Collection. USA. En [línea] 2017. [Citado 2017-08-23].
Disponible en: https://www.atcc.org/products/all/11859.aspx
208
Bang et. al (2001). Op. Cit. p.1
209
Ibíd., p.2
131
3.1.7.3 Inmovilización de las células bacterianas en espuma de poliuretano
(PU). Para cumplir con los objetivos propuestos se utilizó la técnica de
Inmovilización de las células bacterianas en espuma de poliuretano (PU)
mediante los siguientes procedimientos.
212
Ibíd., p.2
213
Ibíd., p.2
214
Ibíd., p.2
133
5×106, 5×107, 5×108 células/ml, observándose la ruptura de las tiras de espuma
en poliuretano (PU) al final de la prueba.215
215
Ibíd., p.3
216
Ibíd., p.3
217
Ibíd., p.3
218
Ibíd., p.3
134
Figura 25. Imágenes de microscopía electrónica de barrido (SEM) de las muestras
de células bacterianas inmovilizadas en espuma de poliuretano (PU)
219
Ibíd., p.3
135
en espuma de poliuretano (PU) que se incubaron en urea y cloruro de calcio
(CaCl2) durante 12h.
220
Ibíd., p.5
136
Figura 27. Prueba de resistencia a la tracción y módulo de elasticidad
Como se observa en la Figura 27, los resultados del estudio evidenciaron que
inmediatamente después de la inmersión en el medio, hubo un aumento
porcentual del 42% de la resistencia a la tracción. Acorde con lo anterior, para las
muestras con bacterias fue de 21,18 psi, mientras que para las muestras sin
bacterias fue de 14,94 psi.221
221
Ibíd., p.5
222
Ibíd., p.5
137
De otra parte, se observó que los resultados de las muestras del módulo de
elasticidad son similares a los de las pruebas de resistencia a la tracción;
subrayando que después de la inmersión en el medio de cultivo en urea y cloruro
de calcio (CaCl2), el módulo de elasticidad con células bacterianas reportó un
aumento del 26% con respecto al de las muestras de control.
3.1.8 Estudios realizados por Achal et. al (2013). El estudio realizado por Achal
et. al (2013) se planteó como objetivo, identificar la capacidad de biocementación
de la cepa bacteriana de tipo Sporoscarcina pasteurii CT-5 durante el proceso de
precipitación de carbonato de calcio (CaCO3) mediante la realización de las
pruebas de biocementación y porosidad, permeabilidad en cloruro y resistencia a
la compresión.224
224
ACHAL, V.; MUKERJEE, A.; REDDY, S. Biogenic treatment improves the durability and
remediates the cracks of concrete structures. India. Department of Biotechnology, Thapar
University. Elsevier, Vol. 48. 2013, p.1. En [línea] 2016. [Citado 2016-12-27]. Disponible en:
http://www.sciencedirect.com.ezproxy.unal.edu.co/science/article/pii/S0950061813005795
225
Ibíd., p.2
139
3.1.8.2 Medio de Cultivo. La cepa bacteriana se cultivó en agar bacteriológico
que contenía: 8 g de caldo nutriente, 2% de urea y 25 mM de cloruro de calcio
(CaCl2) a un pH de 8. Posteriormente, los medios de cultivo se incubaron a una
temperatura de 37ºC en un agitador operado a 130 rpm.226
226
Ibíd., p.2
227
Ibíd., p.2
228
Ibíd., p.3
140
parámetros: 1) masa saturada y superficialmente seca, 2) masa en agua y 3)
masa seca.229
229
Ibíd., p.3
230
Ibíd., p.3
231
Ibíd., p.3
141
permite medir la profundidad de la penetración de iones de cloruro a través de un
multímetro. En consecuencia, para medir la resistividad de las muestras
cilíndricas de concreto, uno de los lados se conectó al terminal negativo (cátodo),
mientras el lado opuesto se conectó al terminal positivo (ánodo) de la fuente de
alimentación.232 Posteriormente, se realizó la medición de la resistividad a la
prueba de permeabilidad del cloruro mediante la aplicación de un voltaje de 60 V
durante intervalos de 12 a 16 horas.233
En relación con lo anterior, la carga total que pasa a través de las muestras se
expresa en términos de culombios. Por tanto, para interpretar los resultados de la
prueba, se resalta que la penetrabilidad de cloruro es directamente proporcional a
la carga que fluye a través de la muestra; es decir, que cuanto mayor sea el
número de Coulomb o de la carga transferida durante la prueba, mayor es la
permeabilidad de la muestra. (Ver Tabla 50)
Las fisuras inducidas se rellenaron con una mezcla de agua, arena y cepas
bacterianas con concentraciones de 5x106, 5x107, 5x108 células/ml, mientras que
las muestras de control se rellenaron con una mezcla de arena y agua. Tanto las
muestras bacterianas como las muestras de control se curaron en una solución
que contenía urea y cloruro de calcio (CaCl2) durante 7 y 28 días. Después de
232
Un ejemplo de este procedimiento se encuentra en la Figura 17 del presente trabajo, donde se
visualizan los equipos de laboratorio utilizados para la realización de una prueba similar.
233
Ibíd., p.3
234
Ibíd., p.3
142
estos procedimientos se realizaron las pruebas de resistencia a la compresión y
se examinaron bajo microscopía electrónica de barrido (SEM). 235
Prueba de porosidad de las muestras: Una vez realizadas las pruebas para
identificar la precipitación de cristales de carbonato de calcio (CaCO 3) y porosidad
de las muestras, se observó que las muestras que contenían células bacterianas,
propiciaron la precipitación de cristales de carbonato de calcio (CaCO 3),
favoreciendo la disminución de la permeabilidad al agua. Además de lo anterior,
en las muestras bacterianas se encontró una reducción de más del 50% de la
porosidad respecto a las muestras de control, reflejando la capacidad de
absorción de agua de las muestras.237 (Ver Figura 28).
235
Ibíd., p.3
236
Ibíd., p.3
237
Ibíd., p.3
143
Figura 28. Medición de la porosidad en las muestras con y sin bacterias
238
Ibíd., p.4
144
En reciprocidad con los anteriores resultados, se resalta que la menor
permeabilidad al cloruro presentada por las muestras bacterianas obedeció a la
precipitación de cristales de carbonato de calcio (CaCO3) provocando una mayor
densidad en la estructura del concreto. En este sentido, las pruebas de laboratorio
demostraron que la precipitación de cristales de calcita produce una capa
protectora que puede mejorar tanto la resistencia a la permeabilidad, como la
resistencia a la penetración de sustancias nocivas dentro de la matriz del material,
favoreciendo la durabilidad de las estructuras de concreto.
Figura 29. Resistencia a la compresión de los cubos de mortero en: (a) 7 días y
(b) 28 días con diferentes concentraciones de Sporoscarcina pasteurii CT - 5.
145
De otra parte, se evidenció que la precipitación de cristales de carbonato de calcio
(CaCO3) propició el relleno y sellado de fisuras y aumentó la resistencia a la
compresión de manera proporcional con la profundidad de la fisura. Para fisuras
de 13,4 mm de profundidad, se aumentó en un 40%, para las fisuras de 18,8 mm
en un 38,5% y para las fisuras de 27,2 mm en un 37%.239
239
Ibíd., p.4
146
Las imágenes de microscopía electrónica de barrido (SEM) de la Figura 30,
permiten observar a) área de la fisura biocementada, b) porción ampliada de la
fisura biocementada mediante la precipitación de calcita y c) bacteria de tipo
Sporoscarcina pasteurii CT – 5 en forma de bastón incrustado en el área de fisura
biocementada.
240
Ibíd., p.5
147
fisuras mostraron una menor concentración tanto de cristales de calcita como de
bacterias.
3.1.9 Estudios realizados por El-Enein et. al (2013). El estudio realizado por El-
Enein et. al (2013) se planteó como objetivo, identificar la efectividad de la
bacteria Sporosarcina pasteurii en los procesos de precipitación de carbonato de
calcio (CaCO3) mediante las pruebas de resistencia a la compresión y absorción
de agua.242 En cumplimiento con el objetivo propuesto, se seleccionaron las
cepas bacterianas, los medios de cultivo y la proporción de la mezcla del mortero,
tal como se describe a continuación.
241
Ibíd., p.5
242
EL-ENEIN, Abo; ALI, AH; TALKHAN, Fatma; ABDEL-GAWWAD, HA. Application of microbial
biocementation to improve the physico-mechanical properties of cement mortar. Egipto. Housing
and Building National Research Center. HBRC Journal, Vol. 9. 2013, p.1. En [línea] 2017. [Citado
2017-03-05]. Disponible en: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1687404812000260
243
Ibíd., p.2
244
Ibíd., p.2
148
3.1.9.3 Diseño de mezcla. Las cepas bacterianas de tipo Sporosarcina pasteurii
NCIMB 8841 se añadieron directamente en el momento de la preparación de la
mezcla. Para las pruebas objeto de estudio se prepararon cubos de mortero que
contenían arena y cemento portland convencional con una relación de cemento a
arena de 1:3 (en peso) y una relación de agua a cemento de 0,46.245
Posteriormente se curaron en una cámara húmeda con una humedad relativa del
aire al 100% durante 24 h. Finalmente, las muestras bacterianas fueron curadas
en una solución de 20 g/l de urea y 25 mM de CaCl2, mientras que las muestras
control fueron curadas bajo el agua del grifo a temperatura ambiente a intervalos
de 3, 7, 14 y 28 días para cada una de las pruebas.247
245
Ibíd., p.2
246
Ibíd., p.2
247
Ibíd., p.2
149
temperatura de 80ºC durante 24h y se pesaron nuevamente (W2). Este parámetro
se calculó a partir de la siguiente ecuación:248
[ ]
248
Ibíd., p.2
249
Ibíd., p.2
250
Ibíd., p.2
150
Prueba de absorción del agua: Los resultados de la prueba de absorción de
agua que utilizó cubos de mortero sin y con concentraciones bacterianas (0,5, 1 y
1,5 OD) curados con agua del grifo y medios de crecimiento a intervalos de 3, 7,
14 y 28 días, respectivamente se presentan en la Figura 32.
Como se observa en la Figura 32, la absorción de agua de las muestras con y sin
concentraciones bacterianas disminuyó proporcionalmente con el tiempo de
curado hasta transcurridos 28 días. Además de lo anterior, se observó que los
valores de absorción de agua de las muestras de control fueron más altos que los
de las muestras bacterianas; advirtiéndose que la absorción de agua disminuyó
proporcionalmente con el aumento de las concentraciones bacterianas (0,5, 1, y
1.5 DO).
151
Prueba de resistencia a la compresión: Los resultados de la prueba de
resistencia a la compresión que utilizó muestras de control y muestras con
concentraciones bacterianas (0,5, 1 y 1,5 OD) curadas con agua del grifo y
medios de crecimiento a intervalos de 3, 7, 14 y 28 días, respectivamente se
presentan en la Figura 33.
152
Técnicas para identificar los procesos de precipitación de cristales de
carbonato de calcio (CaCO3): En la Figura 34 se muestran las imágenes de
microscopía electrónica de barrido SEM de precipitación de carbonato de calcio
(CaCO3) para concentraciones bacterianas (0,5, 1 y 1,5 OD) y para la muestra de
control.
3.1.10 Estudios realizados por Chahal et. al (2012). El estudio realizado por
Chahal et. al (2012) se planteó como objetivo, determinar el efecto de la bacteria
Sporoscarcina pasteurii en las pruebas de resistencia a la compresión, absorción
de agua y permeabilidad en cloruro con y sin humo de sílice.251
251
CHAHAL, Navneet; SIDDIQUE, Rafat; RAJOR, Anita. Influence of bacteria on the compressive
strength, water absorption and rapid chloride permeability of concrete incorporating silica fume.
Punjab, India. Department of Biotechnology and Environmental Sciences, Thapar University.
Elsevier, Vol. 37. 2012, p.1. En [línea] 2017. [Citado 2017-03-08]. Disponible en:
http://www.sciencedirect.com.ezproxy.unal.edu.co/science/article/pii/S0950061812004989
252
Ibíd., p.2
253
Ibíd., p.2
254
Ibíd., p.2
154
3.1.10.3 Actividad de la ureasa. Como parte de la presente investigación, se
evaluó la efectividad de las cepas bacteriana Sporosarcina pasteurii para la
actividad de la enzima ureasa. Para ello se preparó un medio de cultivo
convencional de fenol-hipoclorito, utilizando 50 a 100 µM de cloruro de amonio.
Posteriormente, al cultivo previamente filtrado se le añadió a una mezcla de 250
µl que contenía un buffer de 1 ml a 0,1 M de fosfato de potasio (pH 8,0) y 2,5 ml
de urea a 0,1 M y se incubó a 37°C durante 5 min. Seguidamente se le adicionó 1
ml de fenol-nitroprusiato y 1 ml de hipoclorito alcalino, incubándose a 37°C
durante 25 min. La densidad óptica se midió espectrofotométricamente a 626
nm.255
157
En similar sentido, en correspondencia con la norma ASTM C1240, en la Tabla 58
se presentan las propiedades físicas del humo de sílice, de color gris claro,
determinando su gravedad específica, densidad aparente (kg/m3) y superficie
(kg/m2) con sus respectivos valores observados.
Para los ensayos del presente estudio se utilizó arena natural con un tamaño
máximo de 4,75 mm en forma de agregado fino y piedra triturada con un tamaño
máximo de 12,5 mm en forma de agregado grueso procedentes de fuentes
naturales para el concreto de Nueva Delhi (India). Conforme a la norma IS 383 de
la India, en la Tabla 59 se presentan las propiedades físicas de los agregados
finos y gruesos; determinando su densidad aparente (kg/m3), gravedad específica,
absorción de agua (%), contenido de humedad (%), material más fino que 75μ (%)
y módulo de finura, con sus respectivos valores observados.
256
Ibíd., p.3
257
Ibíd., p.3
159
Resistencia a la compresión: BPI: 516-1959
La absorción de agua y la porosidad: ASTM 642
Prueba de permeabilidad al cloruro rápida: ASTM C 1202
258
Ibíd., p.3
259
Ibíd., p.3
160
Donde A es la masa de la muestra seca del horno en aire (gr), C es la masa de la
muestra después de la inmersión y de ebullición (gr), y D es la masa aparente de
la muestra en agua después de la inmersión y de ebullición (gr). 260
Para interpretar los resultados de la prueba, es preciso resaltar que cuanto mayor
sea el número de Coulomb o de la carga transferida durante la prueba, mayor es
la permeabilidad de la muestra (Ver Tabla 62).263
260
Ibíd., p.3
261
Ibíd., p.4
262
Ibíd., p.4
263
Ibíd., p.4
161
Tabla 62. Calificaciones de permeabilidad del cloruro
Carga pasada (C) Penetrabilidad ión cloruro
> 4000 Alto
2000-4000 Moderado
1000-2000 Bajo
100-1000 Muy baja
<100 Despreciable
Fuente: Chahal et. al (2011). p.4.
264
Ibíd., p.4
265
Ibíd., p.4
162
3.1.10.8 Discusión y análisis de resultados. El estudio realizado por Chahal et.
al (2012) que se planteó como objetivo, determinar el efecto de la bacteria
Sporoscarcina pasteurii en las pruebas de resistencia a la compresión, absorción
de agua y permeabilidad en cloruro con y sin humo de sílice se permite concluir lo
siguiente:
Figura 37. Resistencia a la compresión con y sin humo de sílice a los 28 (a) y 91
(b) días
Figura 38. Absorción de agua con y sin humo de sílice a los 28 (a) y 91 (b) días
Figura 39. Permeabilidad de cloruro con y sin humo de sílice a los 28 (a) y 91 (b)
días
166
En la imagen microscópica de la muestra de control de la Figura 40(a) se
observan los poros del concreto en su interior; mientras que en la muestra de la
Figura 40(b) que contiene una concentración de 105 células/ml y 10% de humo de
sílice, se evidencia el taponamiento de los poros en el interior del concreto
provocado por la precipitación de cristales de carbonato de calcio (CaCO3).
167
3.2 DISCUSIÓN Y ANÁLISIS DE RESULTADOS
3.2.1 Cepas bacterianas. Los estudios realizados por Bang et. al (2001),
Montoya et. al (2005), Jonkers, H.,(2008), Jonkers, H.,(2011), Chahal et. al
(2011), Chahal et. al (2012), Mors, R. y Jonkers, H., (2012), Achal et. al (2013), El-
Enein et. al (2013), Páramo et. al (2015), XU, Jing et. al, (2015) y Lakshmi et. al
(2016), concluyeron que las mejores cepas bioprecipitadoras de cristales de
carbonato de calcio (CaCO3) pertenecen al género Bacillus, caracterizadas
principalmente por ser microorganismos unicelulares que resisten altas
temperaturas y baja humedad, que les permite sobrevivir en estado latente
durante largos periodos de tiempo. Estas propiedades le confieren la capacidad
de resistir entornos alcalinos similares a las condiciones internas del concreto;
haciéndola viable para ser utilizada como agente de autorreparación de fisuras en
concreto.
Dentro de estos lineamientos, los estudios realizados por Montoya et. al (2005),
Páramo et. al (2015) y Lakshmi et. al (2016) establecieron que la cepa Bacillus
subtilis obtuvo resultados favorables en la producción de ureasa, característica
que la hace importante para la formación de biopelículas y en consecuencia para
la bioprecipitación de cristales de carbonato de calcio.
De otra parte, los estudios realizados por (Jonkers, H., 2011) y (Mors, R. y
Jonkers, H., 2012) determinaron que mediante el encapsulamiento en partículas
de arcilla expandida, la bacteria de tipo Bacillus (B2 - E2 - 1) alcanzó una
168
supervivencia de seis meses, propiciando el relleno y sellado de fisuras mediante
los procesos de precipitación de carbonato de calcio (CaCO3).
Finalmente, los estudios realizados por Bang et. al (2001), Muynck et al. (2010),
Okwadha y Li, (2010), Chahal et. al (2011), Chahal et. al (2012), Achal et. al
(2013), El-Enein et. al (2013), XU, Jing et. al, (2015), Wong (2015) y Anbu et. al
(2016), concluyeron que las cepas de tipo Sporosarcina pasteurii del género
Bacillus pertenecen a uno de los grupos bacterianos con mejor capacidad para
resistir entornos alcalinos, con alto contenido de sal, elevadas temperaturas y
diferentes entornos ambientales presentes en suelos, océanos, ríos, lagos de
agua dulce y salada, los cuales no interfieren en sus actividades metabólicas
para la producción de la enzima ureasa, característica fundamental para la
formación de biopelículas y por lo tanto, para la bioprecipitación de cristales de
carbonato de calcio (CaCO3).
Las investigaciones realizadas por Bang et. al (2001), Chahal et. al (2011), Chahal
et. al (2012), Achal et. al (2013), El-Enein et. al (2013) y XU, Jing et. al. (2015),
utilizaron los medios de cultivo referenciados en la Tabla 63 para la nutrición,
crecimiento y mantenimiento de la cepa bacteriana de tipo Sporosarcina pasteurii,
caracterizada por ser una de las cepas bacterianas productoras de ureasa que ha
169
demostrado resultados favorables en los procesos de precipitación de carbonato
de Calcio (CaCO3).
170
1,6%, de urea y cloruro de calcio (CaCl2) esterilizados mediante autoclave a una
temperatura de 30°C.
Como se puede apreciar, los resultados de los estudios realizados por Bang et. al
(2001), Chahal et. al (2011), Chahal et. al (2012), Achal et. al (2013), El-Enein et.
al (2013) y XU, Jing et. al. (2015) sintetizados en la Tabla 63, permiten concluir
que la mayoría de las investigaciones objeto de investigación coincidieron en
utilizar los siguientes nutrientes para la preparación del medio de cultivo: urea,
171
bicarbonato de sodio (NaHCO3), cloruro de amonio (NH4Cl), cloruro de calcio
(CaCl2), extracto de carne, extracto de levadura, peptona, agua (H2O), y caldo
nutriente.
Por último, se resalta que las colecciones bacteriológicas (ATCC, NCIB, NCTC,
NRS y DSM) certificadas y avaladas internacionalmente, sugieren los siguientes
componentes para el crecimiento y conservación de la cepa bacteriana
Sporosarcina pasteuri: extracto de levadura, sulfato de amonio (NH4)2SO4, agar,
0,13 M de buffer, extracto de carne, peptona, peptona de caseína, peptona de
harina de soya, agua destilada. (Ver Tabla 8)
Los estudios realizados por (Jonkers, H., 2011) y (Mors, R. y Jonkers, H., 2012)
concluyeron que las cepas de tipo Bacillus (B2 - E2 - 1) en concentraciones
bacterianas de 109 células/ml, obtuvieron los mejores resultados tanto en los
procesos de precipitación de carbonato de calcio (CaCO3), como en la prueba de
permeabilidad al agua.
Los estudios realizados por Bang et. al (2001) concluyeron que las cepas
bacterianas de tipo Sporoscarcina pasteurii en concentraciones de 5×106, 5×107,
5×108 5×109 células/ml, obtuvieron los mejores resultados en los procesos de
precipitación de carbonato de calcio (CaCO3), prueba de inmovilización en
espuma de poliuretano (PU), resistencia a la tracción, cálculo del módulo de
elasticidad y resistencia a la compresión del concreto.
172
Las investigaciones realizadas por Chahal et. al (2011) y Chahal et. al (2012)
dedujeron que las cepas bacterianas de tipo Sporoscarcina pasteurii en
concentraciones de 105 células/ml, obtuvieron los mejores resultados en las
pruebas de resistencia a la compresión, absorción de agua y permeabilidad al ión
cloruro.
El estudio realizado por Achal et. al (2013) determinó que las cepas
bacterianas de tipo Sporoscarcina pasteurii CT-5 en concentraciones de 5x107
células/ml, obtuvo los mejores resultados en las pruebas de biocementación y
porosidad, permeabilidad en cloruro y resistencia a la compresión.
El estudio realizado por El-Enein et. al (2013) comprobó que las cepas
bacterianas de tipo Sporoscarcina pasteurii NCIMB 8841, en concentraciones de
1,0 DO obtuvo los mejores resultados tanto en los procesos de precipitación de
carbonato de calcio (CaCO3) como en las pruebas de resistencia a la compresión
y absorción de agua.
El estudio realizado por XU, Jing et. al, (2015) concluyó que las cepas bacterianas
de tipo Sporosarcina pasteurii en concentraciones de 2×105 células/ml y 1x108
células/ml, obtuvieron los mejores resultados tanto en los procesos de
precipitación de carbonato de calcio (CaCO3) como en las pruebas de pH,
concentración de calcio soluble (Ca2+) y concentración de amonio (NH4+).
173
impacto importante tanto en la tasa de hidrólisis de urea como en la precipitación
de carbonato de calcio (CaCO 3).
Los estudios realizados por Jonkers, H., (2011) y Mors, R. y Jonkers, H., (2012)
que emplearon las cepas bacterianas de tipo Bacillus (B2 - E2 - 1) en las pruebas
objeto de estudio, utilizaron la siguiente proporción de mezcla de concreto:
Tabla 64. Mezcla de concreto utilizada por Jonkers, H., (2011) y Mors, R. y
Jonkers, H., (2012)
Compuestos Volumen (cm3) Peso (g)
2 - 4 mm LWA * 196 167
1 - 2 mm LWA * 147 125
0.5 - 1 mm de arena 147 397
0.25 - 0.5 mm Arena 128 346
0,125 - 0,25 mm Arena 69 186
Cemento CEMI 42.5N 122 384
Agua 192 192
Total 1001 1796
Fuente: Jonkers, H. M. (2011). p.6
* LWA se refiere a los agregados ligeros; es decir a la proporción de arcilla expandida porosa.
El estudio realizado por Lakshmi et. al (2016) que empleó la cepa bacteriana de
tipo Bacillus subtilis jc3 en las pruebas objeto de estudio, utilizó una proporción de
mezcla 1:1:2 (Cemento: arena: grava) con una relación Agua/cemento de 0,44;
con una consistencia Slump de 105mm. La mezcla utilizada obtuvo una
174
resistencia a la compresión de 17,48 N/mm2 y de 26,07 N/mm2, a los 7 y 28 días,
respectivamente.
Los estudios realizados por Chahal et. al (2011) y Chahal et. al (2012) que
emplearon tanto la cepa bacteriana Sporosarcina pasteurii , como las cenizas
volantes y humo de sílice en las pruebas objeto de estudio, utilizaron las
proporciones de mezcla que se observan en las Tablas 65 y 66, respectivamente.
Para cada una de las muestras se utilizó una relación de agua/cemento (A/C) de
0,5 y un escurrimiento slump entre 80 y 90 mm. La mezcla de concreto se diseñó
para obtener una resistencia a la compresión de 28 MPa a los 28 días.
175
El estudio realizado por Achal et. al (2013) que empleó la cepa bacteriana
Sporosarcina pasteurii CT-5 en las pruebas objeto de estudio, utilizó una relación
de cemento a arena de 1:3 (en peso) y una relación de agua a cemento de 0,47.
Finalmente, el estudio realizado por El-Enein et. al (2013) que empleó la cepa
bacteriana Sporosarcina pasteurii NCIMB 8841 en las pruebas objeto de estudio,
utilizó una relación de cemento a arena de 1:3 (en peso) y una relación de agua a
cemento de 0,46.
3.2.5 Conclusiones generales. Los estudios realizados por Bang et. al (2001),
Okwadha y Li (2010), Chahal et. al (2011), Chahal et. al (2012), Achal et. al
(2013), El-Enein et. al (2013) y XU, Jing et. al. (2015), concluyeron que la cepa
bacteriana de tipo Sporoscarcina pasteurii del género Bacillus en concentraciones
que oscilan entre 0, 105, 106, 107, 108 y 109 células/ml, obtuvieron los mejores
resultados tanto en las pruebas físico-mecánicas como en los procesos de
precipitación de cristales de carbonato de calcio (CaCO3).
Con relación al diseño de mezcla, los estudios realizados por Chahal et. al (2011),
Chahal et. al (2012) Achal et. al (2013) y El-Enein et. al (2013) que utilizaron la
176
cepa bacteriana de tipo Sporoscarcina pasteurii para las pruebas objeto de
estudio, realizaron el diseño mezcla con las siguientes proporciones: relación de
cemento a arena de 1:3 (en peso), relación de agua/cemento (A/C) que osciló
entre 0,46 y 0,5 y un escurrimiento slump entre 80 y 90 mm.
Por último, los estudios realizados por Bang et. al (2001), Chahal et. al (2011),
Chahal et. al (2012), Achal et. al (2013), El-Enein et. al (2013) y XU, Jing et. al.,
(2015), que utilizaron la cepa bacteriana de tipo Sporoscarcina pasteurii para las
pruebas de autorreparación de fisuras en concreto, resistencia a la compresión,
resistencia a la tracción, cálculo del módulo de elasticidad, porosidad,
permeabilidad al ión cloruro, permeabilidad al agua, absorción de agua, pH,
concentración de calcio soluble (Ca2+) y concentración de amonio (NH4+);
obtuvieron resultados favorables curando los especímenes a los 3, 7 y 28 días.
266
BRANDÃO. Pedro Filipe; LIZARAZO MARRIAGA, Juan Manuel; MONTAÑO SALAZAR, Sandra
Milena. Aislamiento de bacterias formadoras de calcita presentes en muestras de cemento de
Colombia. Universidad Nacional de Colombia - Sede Bogotá. Trabajo de pregrado, Programa
académico: Biología. 2013. 58 p.
177
Los resultados del estudio evidenciaron que las cepas bacterianas de tipo
Rhodococcus qingshengii y Bacillus psycrodurans obtuvieron los mejores
resultados en la formación de cristales de calcita, advirtiendo la importancia de
darle continuidad a este tipo de investigaciones a nivel nacional, que contribuyan
al desarrollo y ejecución de posibles aplicaciones en la industria de la
construcción colombiana.
267
BRANDÃO. Pedro Filipe; LIZARAZO MARRIAGA, Juan Manuel; MONTAÑO SALAZAR, Sandra
Milena. Calcium carbonate induced precipitation by native bacteria with potential use in
biotechnological applications. VI International Conference on Environmental, Industrial and Applied
Microbiology – BioMicroWorld. Barcelona, España, 2015.
178
4. PROPUESTA DE DISEÑO EXPERIMENTAL SOBRE MÉTODOS
BIOLÓGICOS DE AUTORREPARACIÓN DEL CONCRETO
Teniendo en cuenta los estudios citados en las fichas bibliográficas (Ver Anexo 3),
que sirvieron como referente para argumentar tanto el marco teórico como los
diferentes métodos que pueden permitir la autorreparación de fisuras en concreto,
en el presente capítulo se plantea una metodología experimental, como punto de
apoyo para iniciar investigaciones sobre métodos biológicos de autorreparación
del concreto, en cumplimiento con el tema objeto de estudio.
Para ello en primer lugar se realiza una selección de materiales que incluyen el
tipo de bacteria, medio de cultivo, concentraciones bacterianas, agregados
(gruesos, finos) y demás materias primas a utilizar en el desarrollo del presente
diseño experimental. Consecutivamente se define tanto la proporción de la
mezcla, como los procesos para la elaboración y fisuración de muestras de
concreto con y sin concentraciones bacterianas. Posteriormente se describen los
métodos a seguir para la realización de las pruebas de autorreparación de fisuras
en concreto, resistencia a la compresión, resistencia a la flexión, permeabilidad y
absorción del agua, a fin de evaluar las propiedades físico-mecánicas de las
muestras de concreto. Finalmente se determinan las pruebas de microscopía
electrónica de barrido (SEM) para evaluar la efectividad de la bacteria
seleccionada Sporosarcina pasteurii en las pruebas objeto de estudio.
De conformidad con la Tabla 68, la importancia del medio de cultivo sugerido para
la nutrición y conservación de la Sporosarcina pasteurii ATCC ® 700386™,
radica en su facilidad para la preparación con una mínima cantidad de sustancias
orgánicas con alto nivel nutricional. En este sentido, el extracto de carne es un
componente proteico que contiene vitaminas, minerales, sales esenciales y
compuestos nitrogenados; la peptona proporciona fuentes de nitrógeno que
contribuyen al crecimiento de los microorganismos; mientras que el Cloruro de
calcio provee nutrientes esenciales de calcio que contribuyen a la precipitación de
calcita bacteriana.
269
American Type Culture Collection (ATCC). Medio de cultivo para la cepa bacteriana
Sporosarcina pasteurii ATCC ® 700386™. En [línea] 2017. [Citado 2017-09-12]. Disponible en:
https://www.atcc.org/~/media/E6FA2163B72E4DCD880719A2612F2C92.ashx
181
700386™, para efectos del presente diseño experimental se sugiere tener en
cuenta las normas nacionales e internacionales que establecen las guías
generales para la preparación y control de calidad de los medios de cultivo
producidos en el laboratorio. (Ver Tabla 69).
En la Tabla 69, se enuncian las normas colombianas GTC 171 y GTC 78 con sus
respectivas guías de preparación de cultivo, resaltándose que corresponden a la
traducción idéntica de las normas internacionales ISO/TS 11133-2 e ISO/TS
11133-1, respectivamente.
270
ICONTEC. GTC 171. Microbiología de alimentos y alimentos para animales. Guía para la
preparación y producción de medios de cultivo. Guía general para los ensayos de desempeño de
medios de Cultivo. 2008. 12p. En [línea] 2017. [Citado 2017-09-17]. Disponible en:
https://tienda.icontec.org/wp-content/uploads/pdfs/GTC171.pdf
271
ISO/TS 11133-2. Microbiology of food and animal feeding stuffs - Guidelines on preparation and
production of culture media - Part 2: Practical guidelines on performance testing of culture media.
2003. 28p. En [línea] 2017. [Citado 2017-09-17]. Disponible en:
https://es.scribd.com/document/243343221/Norma-ISO-TS-11133-2-2003-E-1-pdf
272
ICONTEC. GTC 78. Microbiología de alimentos y alimentos para animales. Guía para la
preparación y producción de medios de cultivo. Guía general para el aseguramiento de la calidad
para la preparación de los medios de cultivo en el laboratorio. 2002. 8p. En [línea] 2017. [Citado
2017-09-17]. Disponible en:
https://tienda.icontec.org/wp-content/uploads/pdfs/GTC78.pdf
273
ISO/TS 11133-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs - Guidelines on preparation and
production of culture media - Part 1: General guidelines on quality assurance for the preparation of
culture media in the laboratory. 2000. 24p. En [línea] 2017. [Citado 2017-09-17]. Disponible en:
http://files.instrument.com.cn/bbs/upfile/2008421112515.pdf
182
En virtud de lo anterior, las normas GTC e ISO establecen las especificaciones
técnicas para la preparación, producción, almacenamiento, pruebas de
rendimiento y control de calidad, aplicables a cualquier entidad comercial o no
comercial que produzca y/o distribuya medios de cultivo destinados al análisis
microbiológico de alimentos para consumo humano y animal.
183
permeabilidad y absorción de agua, como su potencial para la formación de
biopelículas en los procesos de precipitación de cristales de carbonatos de calcio
(CaCO3). En reciprocidad con los anteriores lineamientos, a continuación se
enuncian las directrices para la preparación de la suspensión inicial y de
diluciones decimales para análisis microbiológicos, como marco de referencia
para determinar los procedimientos para el recuento de colonias en placa Petri
sugerido por la American Type Culture Collection (ATCC).
274
ARNALIZ, Carmen; ISAC, Laura; LEBRATO, Julian. Determinacion de la biomasa en procesos
biológicos. I. Métodos directos e indirectos. Grupo de tratamiento de aguas residuales. Escuela
Universitaria Politecnica. Universidad de Sevilla. Tecnologia del agua. 2000. p.3. En [línea] 2017.
[Citado 2017-09-12]. Disponible en:
https://idus.us.es/xmlui/bitstream/handle/11441/34261/TA_Lebrato_2000_Determinaci%c3%b3n%
20I.pdf?sequence=1&isAllowed=y
275
Ibíd., p.3
184
Tabla 70. Reglas generales y directrices para la preparación de la suspensión
inicial y de diluciones decimales para análisis microbiológicos
NORMA PRUEBA REQUERIMIENTOS TÉCNICOS
NTC 4092276 Análisis Microbiológico. Requisitos generales y directrices
Año: 2009 para análisis microbiológicos.
ISO 7218277 Microbiology of food and General requirements and guidance
Año: 2007 animal feeding stuffs. for microbiological examinations.
NTC 4519278 Microbiología de los Método horizontal para el recuento
Año: 2009 alimentos para consumo de microorganismos. Técnica de
humano y animal. recuento de colonias a 30°C.
ISO 4833279 Microbiology of food and Microorganisms colony-count
Año: 2002 animal feeding stuffs. technique at 30 degrees C
NTC 4491-1280 Preparación de muestras Parte 1. Reglas generales para la
Año: 2005 para ensayo, suspensión preparación de la suspensión inicial
inicial y diluciones decimales y de diluciones decimales
para análisis microbiológico.
ISO 6887-1281 Preparation of test samples, Part1: General rules for the
Año: 1999 initial suspension and reparation of the initial suspension
decimal dilutions for and decimal dilutions.
microbiological examinations.
Fuente: Elaboración propia
276
ICONTEC. NTC 4092. Microbiología de alimentos y productos para alimentación animal.
Requisitos generales y directrices para Análisis microbiológicos. 2009. 85p. En [línea] 2017.
[Citado 2017-09-17]. Disponible en:
http://service.udes.edu.co/modulos/documentos/karenmartinez/50159704-NTC4092.pdf
277
ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs — General requirements and
guidance for microbiological examinations. Microbiologie des aliments — Exigences générales et
recommendations. 2007. Switzerland, 2007. 74p. En [línea] 2017. [Citado 2017-09-17]. Disponible
en:
http://service.udes.edu.co/modulos/documentos/karenmartinez/50159704-NTC4092.pdf
278
ICONTEC. NTC 4519. Microbiología de los alimentos para consumo humano y animal. Método
horizontal para el recuento de microorganismos. Técnica de recuento de colonias a 30°C.
2009.17p. En [línea] 2017. [Citado 2017-09-17]. Disponible en:
https://es.scribd.com/doc/125110969/metodo-horizontal-para-el-recuento-de-microorganismo-
tecnica-de-recuento-de-colonias-a-30%C2%BAc-NTC-4519
279
ISO 4833. Microbiology of food and animal feeding stuffs. Microorganisms colony-count
technique at 30 degrees C. 2002. 11p. En [línea] 2017. [Citado 2017-09-17]. Disponible en:
https://es.scribd.com/document/350531598/ISO-4833-Conteo-Total-Aerobios-mesofilos-pdf
280
ICONTEC. NTC 4491-1. Microbiología de alimentos y alimentos para animales. Preparación de
muestras para ensayo, suspensión inicial y diluciones decimales para análisis microbiológico.
Parte 1. Reglas generales para la preparación de la suspensión inicial y de diluciones decimales.
2005. 7p. En [línea] 2017. [Citado 2017-09-17]. Disponible en:
https://es.scribd.com/doc/215422138/NTC4491-1
281
ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs. Preparation of test samples, initial
suspension and decimal dilutions for microbiological examinations. Part1: General rules for the
reparation of the initial suspension and decimal dilutions. 1999. 10p. En [línea] 2017. [Citado
2017-09-17]. Disponible en: https://es.scribd.com/document/208399900/NC-ISO-6887-1-
Preparacion-suspenciones-y-diluciones
185
En la Tabla 70, se enuncian las normas colombianas NTC 4092, NTC 4519 y NTC
4491-1 con su respectiva metodología, resaltándose que corresponden a la
traducción idéntica de las normas internacionales ISO 7218, ISO 4833 e ISO
6887-1, respectivamente.
Donde
ΣC: Suma de colonias contadas en dos placas provenientes de dos diluciones
sucesivas, resaltando que al menos una de ellas debe contener un mínimo de 10
colonias.
V: Volumen (mL) de inóculo utilizado en cada placa.
d: Dilución correspondiente a la primera dilución seleccionada [d=1 cuando se
utiliza el producto líquido sin diluir (muestra de ensayo)].
188
El resultado calculado se aproxima a dos cifras decimales.
El resultado se expresa como un número entre 1,0 y 9,9 multiplicado por la
potencia correspondiente de 10, o como un número entero con dos cifras
decimales.
Por último, el resultado se presenta como el número N de microorganismos por
mL para productos líquidos o por gr para otros productos.
Una vez definidas las normas técnicas nacionales e internacionales tanto para la
preparación de medios de cultivo, como para el recuento de células viables en
placa Petri; a continuación se enuncian los requerimientos establecidos en las
normas NTC e INVIAS (2013) para los materiales utilizados en la elaboración de
mezclas de concreto.
189
4.1.3.2 Agregados gruesos. En las Tablas 20 y 21 se definen tanto los
requisitos granulométricos, como los parámetros de calidad en materia de
dureza, durabilidad, limpieza, geometría de las partículas y características
químicas; establecidos por las normas de ensayo del INVIAS (2013) para la
construcción de pavimentos de concreto hidráulico.
4.1.4 Agua de mezcla. De acuerdo con el INVIAS (2013) Capítulo 5. ―Art. 500 -
Pavimento de concreto hidráulico‖, numeral 500.2.1.2 ―Se considera adecuada el
agua que cumpla los requisitos establecidos en el numeral 630.2.3‖.282
282
INVÍAS (2013). Capítulo 5. Pavimentos de concreto. Art. 500. Op. Cit. p.2.
190
Tabla 71. Selección de datos
Selección de datos Valor
Agregados
Módulo de finura del agregado fino 2,60
Peso específico aparente agregado grueso 2,62
Absorción agregado grueso 1,8%
Humedad natural agregado grueso 0,8%
Peso específico aparente agregado fino 2,67
Absorción agregado fino 3,5%
Humedad natural agregado fino 0,8%
Cemento
Peso específico 3,20
Concreto
Asentamiento (slump) 55 mm
Resistencia a la compresión f’c 28 MPa
Desviación estándar del f’c en obra 0,5 MPa
Coeficiente de modificación (25 datos) 1,03
Concreto sin aire incluido
El pavimento estará sometido a condiciones ambientales normales
Fuente: Elaboración propia
191
4.2.3 Selección del tamaño máximo nominal (TMN) del agregado. El tamaño
máximo nominal (TMN) se selecciona teniendo en cuenta las especificaciones
técnicas tanto de la ACI 211.1 (1991),283 como del INVÍAS (2013),284
seleccionando un TMN igual a 25 mm.
4.2.5 Estimación del contenido de agua (A) de mezcla. Para la estimación del
contenido de agua de la mezcla de concreto, se tiene en cuenta un asentamiento
de 5 cm y un TMN de 25 mm, obteniéndose un valor de 179 kg/m3.
283
ACI 211.1 (1991). Op. Cit. p.7
284
INVÍAS (2013). Capítulo 5. Pavimentos de concreto. Art. 500. Op. Cit. p.4.
285
ACI 318S (2008). Op. Cit. p.71-72
192
√
Dónde:
f'cr = Resistencia promedio requerido en obra
f’c = Resistencia especificada
σ= Desviación estándar
No obstante, como se tienen más de 15 registros pero menos de 30, la
desviación estándar se multiplica por el coeficiente de modificación de la
siguiente Tabla:
Dónde:
C = Contendido de cemento
a = Requerimiento de agua de mezclado
a/c = Relación agua/cemento por peso
286
ACI 211.1 (1991). Op. Cit. p.12
194
4.2.9.1 Estimación de las proporciones de los agregados gruesos. Los
volúmenes de agregado grueso, seco y compactado con varilla por volumen de
concreto para un módulo de finura de la arena igual a 2,60 se calcula mediante la
siguiente Tabla:
Tabla 77. Volumen de agregado grueso, seco y compactado con varilla, por
volumen de concreto para diferentes módulos de finura de la arena
Máximo tamaño nominal Volumen de agregado grueso secado en el horno por
de agregados unidad de volumen de concreto para diferentes
módulos de finura de agregado fino (b/bo)
Módulo de finura
Pulgadas mm 2,40 2,60 2,80 3,00
1 25 0,71 0,69 0,67 0,65
Fuente: ACI 211.1 (1991). Tabla 6.3.6. p.12
Entonces:
( )
287
Ibíd., p.12
195
Por lo tanto, el peso por metro cúbico de agregado grueso se calcula de la
siguiente manera:
Sobre la base de lo antes planteado, el peso por metro cúbico de agregado fino
se calcula de la siguiente manera:
4.2.10 Ajuste por humedad de los agregados. Para calcular el ajuste por
humedad del agregado grueso se tiene en cuenta una humedad (H) igual a 0,8%
y una capacidad de absorción (CA) igual a 1,8%. Por lo anterior, se calcula el
peso húmedo del agregado grueso de la siguiente manera: 288
288
ASTM C 70 (2013). Op. Cit. p. 7
196
Posteriormente, se calcula el agua en exceso o defecto a través de la siguiente
ecuación: 289
Para calcular el ajuste por humedad del agregado fino, se tiene en cuenta una
humedad (H) igual a 0,8% y una capacidad de absorción de 3,5%. Por lo antes
planteado, se calcula el peso húmedo del agregado fino de la siguiente forma:
Cuando la capacidad de absorción (CA) es mayor que la humedad (H) para los
agregados gruesos y finos; se advierte que estos requieren de una proporción
adicional de agua para alcanzar el estado saturado y superficialmente seco.
Dentro de estos lineamientos, el agua de mezcla se calcula de la siguiente
manera:
289
ASTM C 127 (2001). Op. Cit. p. 3
197
4.2.11 Proporción de mezcla. Teniendo en cuenta los datos anteriores, en la
Tabla 78 se establecen las proporciones de los diferentes componentes de la
mezcla.
198
De acuerdo con las Tablas 78 y 79, para la realización de pruebas con y sin
concentraciones bacterianas, para 1 m3 de mezcla de concreto se calculó un
peso total de 2400,87 kg/m3, distribuido en 314,04 kg/m3 de cemento portland tipo
I; 1251,90 kg/m3 de agregado grueso; 626,72 kg/m3 de agregado fino; 0,179
m3/m3 de agua para las muestras de control y 0,090 m3/m3 para cada una de las
muestras con concentraciones bacterianas de 105, 106, 107, 108 y 109 células/ml.
290
INVIAS. Manual de normas de ensayo de materiales para carreteras. Sección 400 – Concreto
hidráulico. INV E-402. ―Elaboración y curado de especímenes de concreto en el laboratorio para
ensayos de compresión y flexión‖. Bogotá, 2013. p.6. En [línea] 2017. [Citado 2017-04-08].
Disponible en: https://www.invias.gov.co/index.php/documentos-tecnicos1/139-documento-
tecnicos/1988-especificaciones-generales-de-construccion-de-carreteras-y-normas-de-ensayo-
para-materiales-de-carreteras
199
En correspondencia con la Tabla 80, para la realización de pruebas con y sin
concentraciones bacterianas, se calcula un total de 162 pruebas, distribuidas de
la siguiente manera: 18 para los ensayos de autorreparación de fisuras en
concreto; 54 para la resistencia a la compresión; 54 para la resistencia a la
flexión; 18 para la permeabilidad y 18 para la absorción de agua.
Una vez descritas las especificaciones técnicas de los equipos necesarios para la
elaboración de especímenes de concreto, para efectos del presente diseño
experimental se proponen los siguientes procedimientos:
201
Tabla 82. Especificaciones técnicas de los equipos necesarios para la
elaboración de especímenes de concreto
EQUIPO ESPECIFICACIONES TÉCNICAS
Moldes
Cilíndricos horizontales Utilizado para especímenes de flujo plástico (creep) que
contienen medidores de deformación embebidos
axialmente.
Cilíndricos Verticales Deben tener una altura interna nominal igual al doble de su
diámetro interno nominal.
Vigas y moldes prismáticos Deben ser de forma rectangular y de las dimensiones
requeridas para producir especímenes del tamaño
deseado.
Varillas para compactación
Varilla larga De diámetro igual a 16 mm (5/8"), y aproximadamente 600
mm (24") de longitud.
Varilla corta De diámetro igual a 10 mm (3/8") y aproximadamente 300
mm (12") de longitud.
Vibradores
Vibradores internos Pueden ser de eje rígido o flexible, preferiblemente
accionados por motores eléctricos. La frecuencia de
vibración debe ser de 7000 rpm.
Vibradores externos Pueden ser de mesa o de plancha. La frecuencia de
vibración debe ser de 3600 rpm.
Otros equipos
Mazo Con cabeza de caucho o de cuero crudo y una masa de 0.6
± 0.20 kg.
Cono para medir el Debe cumplir con los requisitos indicados en la norma INV
asentamiento E–404.
Recipientes para muestreo y Deben ser de fondo plano, metálicos de alto calibre,
mezcla impermeables, de profundidad adecuada y de suficiente
capacidad para permitir una mezcla fácil de toda la bachada
con una pala.
Aparatos para medir el El aparato para medir el contenido de aire debe cumplir con
contenido de aire lo establecido en la norma INV E–406.
Balanzas Deben tener una exactitud de 0.30 % de la carga de ensayo,
en cualquier punto de su rango de uso.
Mezcladora de concreto La mezcladora debe ser accionada mecánicamente y
consistir en un tambor giratorio, una mezcladora basculante,
un recipiente giratorio o una mezcladora de paletas.
Termómetro Debe ser capaz de medir la temperatura del concreto fresco
con una exactitud de ± 0.5° C a través del rango de 0 a
50°C.
Equipo para tamizado por vía Si se requiere este tipo de tamizado, el equipo deberá
húmeda satisfacer los requisitos de la norma INV E–401.
Equipo misceláneo Tamices, palas, palustres, cucharones, reglas, guantes de
caucho, calibrador de espesores, tazones metálicos para
mezclado, etc.
Fuente: INVIAS (2013). Sección 400. INV E-402. p. 2 - 5.
202
En relación con lo anterior, para las muestras de control, el volumen del agua se
mantiene constante; mientras que para las muestras M1, M2, M3, M4 y M5 se
realiza una solución que contiene el 50% del total del contenido de agua y el
50% restante con las concentraciones bacterianas de 105, 106, 107, 108 y 109
células/ml embebidas en su medio de cultivo.
294
INVIAS (2013). Sección 400. INV E-402. Op. Cit. p. 10 - 11
295
Ibíd., p. 12
203
4.3.4 Curado de los especímenes. Después del acabado, a fin de mantener la
humedad, las muestras de concreto se deben cubrir con una platina, una lámina
de plástico o un costal de fique húmedo, evitando el contacto directo con los
especímenes.296
Teniendo en cuenta las sugerencias del numeral 4.3.1 y de la Tabla 80, para el
desarrollo de la prueba de autorreparación de fisuras, se elaboran especímenes
296
Ibíd., p. 18
297
Ibíd., p. 18
298
ASTM C511-09. Cuartos de mezclado, gabinetes húmedos, cuartos húmedos y tanques de
almacenamiento de agua usados en los ensayos de cementos hidráulicos y concretos.
Especificaciones. Traducción de la Comisión Guatemalteca de Normas. Ministerio de Economía.
Guatemala. 2013. 10p. En [línea] 2017. [Citado 2017-04-09]. Disponible en:
http://www.iccg.org.gt/index.php/component/phocadownload/category/10-
concreto?download=183:astm-c511
299
ASTM C1579-06 (2011). Op. Cit. 7p.
204
por triplicado para las muestras con concentraciones de 105, 106, 107, 108 y 109
células/ml y para las muestras de control. Conforme a lo anterior, se estima un
total de 18 especímenes de concreto con medidas de 355mm x 560mm x 100mm
con la proporción de mezcla establecida en la Tabla 79.
300
EGAS RIBADANEIRA, Diego. Microscopía electrónica: Fundamentos, teoría y aplicaciones.
Tesis de grado. Escuela politécnica nacional. Facultad de ingeniería eléctrica. Quito – Ecuador.
1998. p. 46 – 47. En [línea] 2017. [Citado 2017-04-18]. Disponible en:
http://bibdigital.epn.edu.ec/bitstream/15000/10421/3/T1421.pdf
207
rayos X utilizado para la realización de análisis de la composición y distribución
de los diferentes elementos del espécimen.
301
Ibíd., p. 55
302
INVIAS. (2013). Sección 400. INV E-402-13. Op. Cit. 20p.
208
compresión y flexión; NTC 4483303 para los ensayos de permeabilidad y ASTM
C1585-13304 para los ensayos de absorción de agua.
303
ICONTEC (1998). NTC 4483. Op. Cit. 9p.
304
ASTM C1585. (2013). Op. Cit. 15 p.
305
INVIAS. Manual de normas de ensayo de materiales para carreteras. Sección 400 – Concreto
hidráulico. INV E-410-13 ―Resistencia a la compresión de cilindros de concreto‖. Bogotá, 2013.
16p. En [línea] 2017. [Citado 2017-04-08]. Disponible en:
https://www.invias.gov.co/index.php/documentos-tecnicos1/139-documento-tecnicos/1988-
especificaciones-generales-de-construccion-de-carreteras-y-normas-de-ensayo-para-materiales-
de-carreteras
306
Ibíd., p. 1
209
edad del concreto, entre otros aspectos que intervienen en la calidad de los
especímenes de concreto.
307
Ibíd., p. 2 - 8
308
Ibíd., p. 14
309
Ibíd., p. 10
210
especímenes por triplicado para las muestras con concentraciones de 105,
106, 107, 108 y 109 células/ml y para las muestras de control.
Para calcular el área de contacto con la prensa hidráulica de cada uno de los
cilindros, se realiza un promedio de tres mediciones de diámetro a diferentes
alturas.
211
Dónde:
310
INVIAS. Manual de normas de ensayo de materiales para carreteras. Sección 400 – Concreto
hidráulico. INV E-414-13 ―Resistencia a la flexión del concreto usando una viga simplemente
apoyada y cargada en los tercios de la luz libre‖. Bogotá, 2013. 10p. En [línea] 2017. [Citado 2017-
04-08]. Disponible en: https://www.invias.gov.co/index.php/documentos-tecnicos1/139-documento-
tecnicos/1988-especificaciones-generales-de-construccion-de-carreteras-y-normas-de-ensayo-
para-materiales-de-carreteras
311
Ibíd., p. 1
312
Ibíd., p. 1 - 2
212
Máquina de ensayo: Según las especificaciones técnicas definidas en la norma,
la máquina a utilizar debe tener la capacidad de aplicar una carga a velocidad
constante y permitir la realización de verificaciones y correcciones a
determinados intervalos de tiempo.
313
ASTM C42-04. Método de ensayo. Obtención y ensayo de núcleos perforados y vigas
aserradas de concreto. Traducción de la Comisión Guatemalteca de Normas. Ministerio de
Economía. Guatemala. 2004. p. 14. En [línea] 2017. [Citado 2017-04-07]. Disponible en:
http://conred.gob.gt/site/normas/NRD3/NTG41049.pdf
213
Con base en lo anterior y teniendo en cuenta que los especímenes se
ensayarán a los a los 3, 7 y 28 días de curado, para la prueba de resistencia
a la flexión se estima un total de 54 vigas de concreto, con medidas de 150
mm × 150 mm x 530 mm (6’’ × 6’’ x 21’’).
Para ubicar los sitios de apoyo de la viga se verifica que la luz corresponda a
tres veces la altura de la viga con una tolerancia del 2%. De igual manera se
comprueba que la distancia entre extremos y apoyo sea mayor o igual a 25
mm. Asimismo, los puntos de aplicación de la carga se ubican a los tercios
medios de la luz libre de la viga.314
314
INVIAS (2013). Sección 400. INV E-414. Op. Cit. p. 3
315
Ibíd., p. 4
214
Dónde:
Dónde:
318
Ibíd., p. 1
319
Ibíd., p. 2
320
Ibíd., p. 4
321
Ibíd., p. 4
216
especímenes por triplicado para las muestras con concentraciones de 105,
106, 107, 108 y 109 células/ml y para las muestras de control.
322
Ibíd., p. 4
323
Ibíd., p. 5
217
Dónde:
Dónde:
324
ASTM C642-13. Método de ensayo. Determinación de la densidad, la absorción de agua y los
vacíos en el concreto endurecido. Traducción de la Comisión Guatemalteca de Normas. Ministerio
de Economía. Guatemala. 2013. 10p. En [línea] 2017. [Citado 2017-04-11]. Disponible en:
http://www.iccg.org.gt/index.php/component/phocadownload/category/10-
concreto?download=126:astm-c642
325
ICONTEC (1998). NTC 4483. Op. Cit. p. 5 - 6
218
4.5.4 Absorción del agua. Para los ensayos de absorción del agua se siguen
los parámetros establecidos por la norma ASTM C1585-13,326 que describe el
objeto, importancia y uso, los requerimientos de los equipos a utilizar,
especificaciones de los especímenes de concreto y procedimientos a seguir para
el desarrollo de la prueba objeto de estudio.
326
ASTM C1585. (2013). Op. Cit. 15 p.
327
Ibíd., p. 6
328
Ibíd., p. 7
329
Ibíd., p. 7
330
Ibíd., p. 8
219
Cámara ambiental y horno desecador: Según las especificaciones técnicas
definidas en la norma, la cámara ambiental debe permitir la circulación del aire y
mantener una temperatura de 50 ± 2°C y una humedad relativa de 80 ± 3%. Por
su parte, el horno desecador debe tener la capacidad para contener los
especímenes y para mantener una temperatura de 50 ± 2°C.331
331
Ibíd., p. 8
332
Ibíd., p. 8 – 9
333
Ibíd., p. 4
220
especímenes por triplicado para las muestras con concentraciones de 105,
106, 107, 108 y 109 células/ml y para las muestras de control.
221
A continuación, se miden como mínimo cuatro diámetros de la superficie de
concreto que será expuesta al agua con una aproximación de 0,1mm.
Consecutivamente se calcula el diámetro promedio con una aproximación de
0,1mm.
222
Dónde:
I = la absorción, en mm
mi = Cambio de masa en gramos del espécimen en un tiempo t,
d = La densidad del agua en g/mm3 (0.001g/mm3)
a= área transversal del espécimen en mm2
223
electrónica de barrido (SEM) con acercamiento entre 1 y 100 micras, para las
muestras de ensayo con concentraciones bacterianas, es posible identificar:
Para ello se tuvo en cuenta tanto los materiales descritos en la (Tabla 78.
Proporción de mezcla de concreto), como el medio de cultivo sugerido por la
colección bacteriológica American Type Culture Collection para la nutrición y
conservación de la Sporosarcina pasteurii ATCC ® 700386™ (Ver Tabla 68).
224
experimental se propone la utilización de la Sporosarcina pasteurii ATCC ®
700386™, en razón a que el medio de cultivo sugerido por la ATCC para este
microorganismo, evidencia una significativa reducción de costos en comparación
con las demás cepas bacterianas provenientes de las colecciones
bacteriológicas (ATCC, NCIB, NCTC, NRS y DSM), tal como se observa en la
Tabla 83.
Tabla 83. Comparación de costos de los medios de cultivo (por litro) para el
crecimiento y nutrición de la cepa bacteriana Sporosarcina pasteurii
Compuesto Unidad Cantidad/L V/unit (Pesos) V/Total
ATCC: 11859, 6452, 6453 , NCIB: 8219, 8841, NCTC: 4822, NRS: 673, 674, 675, 929
Agar g 20 $ 2.050,65 $ 41.012,95
Extracto de levadura g 20 $ 672,41 $ 13.448,30
Cloruro de calcio (CaCl2) g 25 $ 339,37 $ 8.484,34
(NH4)2SO4 g 10 $ 318,05 $ 3.180,54
0,13 M Tris buffer (pH 9,0) L 1 $ 325.315,20 $ 325.315,20
Total $ 391.441,32
ATCC: 700386
Agar g 15 $ 2.050,65 $ 30.759,71
Peptona g 5 $ 1.228,65 $ 6.143,23
Extracto de carne g 3 $ 928,89 $ 2.786,67
Cloruro de calcio (CaCl2) g 25 $ 339,37 $ 8.484,34
Agua destilada mL 1000 $ 4,92 $ 4.920,00
Total $ 53.093,95
DSM: 33
Agar g 15 $ 2.050,65 $ 30.759,71
Peptona de caseína g 15 $ 1.150,22 $ 17.253,32
Cloruro de sodio (NaCl) g 5 $ 202,16 $ 1.010,80
Peptona de harina de soya g 5 $ 1.751,47 $ 8.757,37
Urea g 20 $ 318,05 $ 6.361,07
Cloruro de calcio (CaCl2) g 25 $ 339,37 $ 8.484,34
Agua destilada mL 1000 $ 4,92 $ 4.920,00
Total $ 77.546,62
Fuente: Elaboración propia
En correspondencia con la Tabla 83, se señala que los costos de los compuestos
sugeridos para la preparación de los medios de cultivo para el crecimiento y
nutrición de la cepa bacteriana Sporosarcina pasteurii, se obtuvieron del catálogo
225
de productos de la empresa Sigma Aldrich,334 encargada de la distribución de
reactivos, kits y demás materiales de laboratorio; advirtiéndose que el valor para
(1 litro) de medio de cultivo para la ATCC: 11859, 6452, 6453 , NCIB: 8219, 8841,
NCTC: 4822, NRS: 673, 674, 675 y 929, se calculó en $ 391.441,32; para la DSM
33 se calculó en $ 77.546,62; mientras que para la ATCC ® 700386™ se calculó
en $ 53.093,95.
334
SIGMA ALDRICH. Catálogo de productos en línea. En [línea] 2017. [Citado 2017-09-21].
Disponible en: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/AdvancedSearchPage.do
335
SIGMA ALDRICH. Distribuidores de la empresa Sigma Aldrich en Colombia. En [línea] 2017.
[Citado 2017-09-21]. Disponible en: http://www.sigmaaldrich.com/site-level/corporate/worldwide-
offices.html#colombia
226
4.7.1 Costos de la materia prima para la elaboración de los especímenes de
concreto. A continuación se realiza una aproximación de los costos de la
materia prima para la elaboración de los especímenes de concreto con y sin
concentraciones bacterianas.
4.7.1.3 Costo de los compuestos para los medios de cultivo. Los costos de
los compuestos para los medios de cultivo de la cepa bacteriana Sporosarcina
336
INVIAS. Análisis de precios unitarios de Cundinamarca 2017 - 1. Bogotá, 2017. 326p. En [línea]
2017. [Citado 2017-09-04]. Disponible en: https://www.invias.gov.co/index.php/archivo-y-
documentos/analisis-precios-unitarios/6092-apus-cundinamarca-2017-1
337
American Type Culture Collection (ATCC). Costo de la cepa bacteriana Sporosarcina pasteurii
ATCC ® 700386™. En [línea] 2017. [Citado 2017-09-19]. Disponible en:
https://www.atcc.org/en/Products/Cells_and_Microorganisms/Bacteria/Alphanumeric_Genus__Spe
cies/700386.aspx
227
pasteurii ATCC ® 700386™ se cotizaron en el catálogo de productos de la
empresa Sigma Aldrich.
Tabla 86. Costo (por litro) de los compuestos para los medios de cultivo de la
Sporosarcina pasteurii ATCC ® 700386™
Compuesto Unidad Cantidad/L V/unit (Pesos) V/Total
Agar g 15 $ 2.050,65 $ 30.759,71
Peptona g 5 $ 1.228,65 $ 6.143,23
Extracto de carne g 3 $ 928,89 $ 2.786,67
Cloruro de calcio (CaCl2) g 25 $ 339,37 $ 8.484,34
Agua destilada mL 1000 $ 4,92 $ 4.920,00
TOTAL $ 53.093,95
Fuente: Elaboración propia
De acuerdo con la Tabla 86, se advierte que el costo del medio de cultivo (por
litro) para la nutrición y conservación de la Sporosarcina pasteurii ATCC ®
700386™ se cotizó en la empresa Sigma Aldrich por un valor de $53.093,95.
338
UNAL. Resolución N° 10 de 2015. ―Por la cual se adoptan las nuevas tarifas para los ensayos,
asesorías y servicios que el Instituto de Extensión e Investigación realiza a través de las diferentes
Unidades y Laboratorios de la Facultad de Ingeniería. Bogotá. 2015. En [línea] 2017. [Citado
2017-09-19]. Disponible en: https://www.ingenieria.bogota.unal.edu.co/documentos/category/145-
plan-maestro-de-laboratorios%3Fdownload%3D680+&cd=2&hl=es&ct=clnk&gl=co
339
UNAL. Acuerdo Nº 041 de 2015. 201. Por el cual se establecen las tarifas de los servicios que
presta la Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia para el año 2015. Bogotá. 2015. En
[línea] 2017. [Citado 2017-09-19]. Disponible en:
http://www.legal.unal.edu.co/sisjurun/normas/Norma1.jsp?i=74930#4
340 UNAL. Resolución Nº 1036 de 2014. Por la cual se modifica la Resolución de Decanatura No.
432 del 24 de febrero de 2014, para incluir los valores establecidos para los diferentes servicios
del proyecto de Extensión: "Servicios de Análisis de Laboratorio del Departamento de Física
2014". Bogotá. 2014. En [línea] 2017. [Citado 2017-09-19]. Disponible en:
http://ciencias.bogota.unal.edu.co/fileadmin/content/fisica/Documentos/Resolucion_1036_modifica
cion.PDF
228
A este respecto, se resalta que en la Circular Nº 001 de 2017341, se establece que
el valor del punto para 2017 es de $24.591. Por lo tanto, en la Tabla 87 se calcula
el valor de cada una de las pruebas a partir del puntaje establecido para los
laboratorios de la UNAL.
341 UNAL. Circular Nº 001 de 2017. Por la cual se establece el valor del punto para efectos de fijar
las tarifas para el año 2017 de los diferentes servicios que presta la Universidad Nacional de
Colombia. 2017. En [línea] 2017. [Citado 2017-09-19]. Disponible en:
http://www.legal.unal.edu.co/sisjurun/normas/Norma1.jsp?i=87942
229
Tabla 88. Costo de las pruebas de laboratorio
Nº de Puntaje Puntaje
Prueba V/Unitario V/Total
pruebas Unitario total
Pruebas fisicomecánicas - Resolución N° 10 de 2015 (UNAL)
Prueba de autorreparación de
18 14,3 257,4 $ 351.651,30 $ 6.329.723,40
fisuras
Resistencia a la compresión 54 0,7 37,8 $ 17.213,70 $ 929.539,80
Resistencia a la flexión 54 2,3 124,2 $ 56.559,30 $ 3.054.202,20
Permeabilidad 18 14,3 257,4 $ 351.651,30 $ 6.329.723,40
Absorción de agua 18 4,1 73,8 $ 100.823,10 $ 1.814.815,80
SUB TOTAL $ 18.458.004,60
Pruebas microbiológicas – Acuerdo Nº 041 de 2015 (UNAL)
Cultivo microbiologico para
5 2,14 10,7 $ 52.624,74 $ 263.123,70
aerobios y anaerobios
Recuento (cuantificación de
5 1,16 5,8 $ 28.525,56 $ 142.627,80
microorganismos indicadores)
SUB TOTAL $ 405.751,50
Pruebas de microscopía - Resolución Nº 1036 de 2014 (UNAL)
Servicio de equipo SEM
5 N.A N.A $ 120.000,00 $ 600.000,00
(Valor/hora)
SUB TOTAL $ 600.000,00
TOTAL $ 19.463.756,10
Fuente: Elaboración propia
230
Tabla 89. Cálculo del volumen requerido para los especímenes de concreto
Nº de Volumen
Tipo de Diámetro Altura Ancho Largo Volumen
Prueba Especí- 3 desperdicio
espécimen (m) (m) (m) (m) (m ) 3
menes (10%)(m )
Prueba de
autorreparación de 18 Prismático - 0,1 0,355 0,56 0,358 0,394
fisuras
Resistencia
54 Cilindro 0,1 0,2 - - 0,085 0,093
Compresión
Resistencia Flexión 54 Viga - 0,15 0,15 0,53 0,644 0,708
Permeabilidad 18 Cilindro 0,1 0,1 - - 0,014 0,016
De acuerdo con la Tabla 89, una vez calculado el volumen de concreto (m 3) para
los 162 especímenes objeto de investigación, se calculó el volumen (m 3)
añadiendo el 10% de desperdicio para un total de 1,219 m 3.
A partir del volumen total requerido para los especímenes de concreto (1,219 m3),
se procede a calcular el volumen para fundir, tanto las muestras de control como
las muestras con concentraciones bacterianas de 105, 106, 107, 108 y 109
células/ml. (Ver Tabla 90)
Tabla 90. Volumen de concreto para las muestras con y sin concentraciones
bacterianas
Nº de Volumen
Tipo de muestra muestras (m3)
Muestras con concentraciones bacterianas 135 1,016
Muestras de control (sin concentraciones bacterianas) 27 0,203
TOTAL 162 1,219
Fuente: Elaboración propia.
De acuerdo con las Tablas 93 y 94, el costo para 1m3 de concreto con
concentraciones bacterianas es de $ 4.924.489,59, mientras que el costo para
1m3 de concreto sin concentraciones bacterianas es de $ 177.123,92.
233
4.7.6 Costo total para el desarrollo del diseño experimental propuesto con y
sin pruebas de laboratorio. En las Tablas 95 y 96 se presenta el costo total del
diseño experimental propuesto con y sin pruebas de laboratorio.
Tabla 95. Costo total para el desarrollo del diseño experimental propuesto con
pruebas de laboratorio
Costos totales V/Total
Muestras de concreto sin concentraciones bacterianas $ 35.973,89
Muestras de concreto con concentraciones bacterianas $ 5.000.821,75
Costo de la Sporosarcina pasteurii ATCC ® 700386™ $ 1.028.228,40
Pruebas de laboratorio $ 19.463.756,10
TOTAL $ 25.528.780,14
Fuente: Elaboración propia.
Tabla 96. Costo total para el desarrollo del diseño experimental propuesto sin
pruebas de laboratorio
Costos totales V/Total
Muestras de concreto sin concentraciones bacterianas $ 35.973,89
Muestras de concreto con concentraciones bacterianas $ 5.000.821,75
Costo de la Sporosarcina pasteurii ATCC ® 700386™ $ 1.028.228,40
TOTAL $ 6.065.024,04
Fuente: Elaboración propia.
De conformidad con las Tablas 95 y 96, el costo total para el desarrollo del diseño
experimental propuesto con y sin pruebas de laboratorio es de $25.528.780,14 y
$6.065.024,04, respectivamente.
Para ello, en primer lugar se seleccionan los materiales a utilizar en las pruebas
de laboratorio, entre los que se encuentran: la cepa bacteriana de tipo
Sporosarcina pasteurii ATCC ® 700386™, medio de cultivo sugerido por la
colección bacteriológica American Type Culture Collection (ATCC) y
concentraciones bacterianas; con base en los referentes teóricos y en los
resultados experimentales de las investigaciones objeto de estudio.
Una vez especificados los requerimientos técnicos que deben cumplir las
materias primas a utilizar y siguiendo los procedimientos sugeridos en las normas
nacionales e internacionales, tales como: INVIAS (2013), NTC 1776 (1994), ACI
211.1 (1991), ACI 214R (2002), ACI 318S (2008), ASTM C127 (2001) y ASTM
C70 (2013); se diseña la proporción de mezcla teniendo en cuenta en primer
lugar, la selección del asentamiento y del tamaño máximo nominal (TMN) del
agregado; en segundo lugar, la estimación del contenido de aire, de agua de la
mezcla, de la relación agua/cemento (a/c), de las proporciones de los agregados
y de las concentraciones bacterianas seleccionadas y en tercer lugar, se realizan
los respectivos ajustes por humedad de los agregados.
235
muestras de concreto, que comprende el número de pruebas, dimensiones de los
especímenes, preparación y el curado para cada uno de los ensayos propuestos.
Por último, se realiza una aproximación de los costos para un eventual desarrollo
de la propuesta ―Diseño experimental sobre métodos biológicos de
autorreparación del concreto‖. Una vez investigado, los costos de la materia prima
para la elaboración de los especímenes de concreto, los costos de las muestras
de concreto con y sin concentraciones bacterianas y los costos de las pruebas
de laboratorio físico mecánicas, microbiológicas y de microscopía electrónica de
barrido (SEM); se concluyó que el costo total para el desarrollo del diseño
experimental propuesto con y sin pruebas de laboratorio es de $25.528.780,14 y
$6.065.024,04, respectivamente.
236
5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
5.1 CONCLUSIONES
237
bacterias en espuma de poliuretano (PU), adición directa de bacterias en la
mezcla del concreto y encapsulación de bacterias en partículas de arcilla
expandida porosa.
De conformidad con lo anterior, los estudios realizados por Bang et. al (2001),
utilizaron la técnica de inmovilización de bacterias de tipo Sporoscarcina pasteurii
ATCC 11859 en concentraciones de 5×106, 5×107, 5×108 células/ml en espuma
de poliuretano (PU), para las pruebas de resistencia a la tracción, cálculo del
módulo de elasticidad y resistencia a la compresión del concreto.
Por su parte, los estudios realizados por Jonker, et al. (2008), Jonker, H. M.
(2011), Chahal et. al (2011), Chahal et. al (2012), Achal et. al (2013), El-Enein et.
al (2013), XU, Jing et. al, (2015), Lakshmi et. al (2016) y Anbu et. al (2016)
utilizaron la técnica de adición directa de cepas bacterianas en la mezcla del
concreto para la realización de los ensayos de autorreparación de fisuras en
concreto y de pruebas físico mecánicas.
Por último, las investigaciones realizadas por Jonker, et al. (2008), Jonker, H. M.
(2011) y Mors, R. y Jonkers, H., (2012) utilizaron la técnica de adición directa y la
encapsulación de bacterias en partículas de arcilla expandida porosa, para la
realización de pruebas de autorreparación de fisuras y de permeabilidad en
concreto.
A pesar de que los estudios realizados por Jonker, et al. (2008), Jonker, H. M.
(2011), Chahal et. al (2011), Chahal et. al (2012), Achal et. al (2013), El-Enein et.
al (2013), XU, Jing et. al, (2015), Lakshmi et. al (2016) y Anbu et. al (2016),
obtuvieron resultados favorables en los pruebas de precipitación de carbonato de
calcio (CaCO3) mediante la técnica de adición directa; los estudios realizados por
Jonker, H. M. (2011) y Mors, R. y Jonkers, H., (2012) demostraron la viabilidad de
algunas cepas bacterianas para actuar como agentes de cicatrización microbiana
durante los procesos de precipitación de cristales de calcita mediante la aplicación
238
de la técnica de encapsulación de bacterias en arcilla expandida térmicamente
(AET).
En este sentido, para la selección del tipo de bacteria, los estudios realizados por
Bang et. al (2001), Muynck et al. (2010), Okwadha y Li, (2010), Chahal et. al
(2011), Chahal et. al (2012), Achal et. al (2013), El-Enein et. al (2013), XU, Jing et.
al, (2015), Wong (2015) y Anbu et. al (2016), coincidieron en afirmar que las
mejores cepas bacterianas bioprecipitadoras de cristales de carbonato de calcio
(CaCO3) corresponden al tipo Sporosarcina pasteurii del género Bacillus,
caracterizadas principalmente por ser microorganismos unicelulares que resisten
altas temperaturas y baja humedad en entornos ambientales extremos, que les
permite sobrevivir en estado latente durante largos periodos de tiempo.
239
Con relación a la selección del medio de cultivo, se resalta que si bien, las
colecciones bacteriológicas (ATCC, NCIB, NCTC, NRS y DSM) certificadas y
avaladas internacionalmente, sugieren los siguientes componentes: extracto de
levadura, sulfato de amonio (NH4)2SO4, agar, 0,13 M de buffer, extracto de carne,
peptona, peptona de caseína, peptona de harina de soya y agua destilada, para el
crecimiento, mantenimiento y conservación de la bacteria de tipo Sporosarcina
pasteuri; los estudios realizados por Achal et al. (2008), Achal et al. (2010),
Yoosathaporn et al (2016) y Williams et al (2016) utilizaron como fuentes
alternativas de nutrientes: el licor madre de lactosa (LML), el licor de maíz (CSL)
y el efluente de estiércol de pollo (CME), a fin de comparar su efectividad con
algunos de los medios de cultivo enunciados anteriormente. (Ver numeral 1.5.4)
En correspondencia con lo anterior, los estudios realizados por Achal et al. (2008),
Achal et al. (2010) y Yoosathaporn et al (2016) concluyeron que los medios de
cultivo que incluyeron el CLS y el CME obtuvieron resultados superiores en
relación con las muestras de control en las pruebas de ureasa, crecimiento
bacteriano, absorción de agua, resistencia a la compresión, calorimetría
isotérmica, movilidad electroforética y potencial zeta, prueba de difracción de
rayos x y precipitación de carbonato de calcio (CaCO3). (Ver numeral 1.5.4.5)
Por último, los estudios realizados por Bang et. al (2001), Muynck et al. (2010),
Okwadha y Li, (2010), Chahal et. al (2011), Jonkers, H. (2011), Chahal et. al
(2012), Mors, R. y Jonkers, H. (2012), Achal et. al (2013), El-Enein et. al (2013),
XU, Jing et. al, (2015), Wong (2015) y Anbu et. al (2016), concluyeron que las
cepas bacterianas del género Bacillus en concentraciones que oscilan entre 105,
106, 107, 108 y 109 células/ml, obtuvieron los mejores resultados en las pruebas de
autorreparación de fisuras en concreto.
240
autorreparación de fisuras en concreto, resistencia a la compresión, resistencia a
la flexión, cálculo del módulo de elasticidad, porosidad, permeabilidad al ión
cloruro, permeabilidad al agua y absorción de agua.
Dentro de estos lineamientos, los estudios realizados por (Jonkers, H., 2008)
concluyeron que utilizando la técnica de adición directa, la producción de cristales
de calcita fue limitada debido al corto período de supervivencia de las esporas
bacterianas que osciló entre los 2 y 4 meses; mientras que los estudios realizados
por (Jonkers, H., 2011) y (Mors, R. y Jonkers, H., 2012) evidenciaron que
mediante la encapsulación de bacterias en partículas de arcilla expandida porosa,
las cepas bacterianas lograron sobrevivir hasta 6 meses, demostrando mejores
resultados en el relleno y sellado de fisuras, favoreciendo a su vez, la disminución
de la permeabilidad del concreto.
241
compresión, evidenciándose que entre menor sea la proporción de cenizas
volantes, mayor es la resistencia a la compresión tanto para las muestras
bacterianas como para las muestras de control.
De otra parte, los estudios realizados por Bang et. al (2001), concluyeron que
mediante la adición de cepas bacterianas de tipo Sporoscarcina pasteurii ATCC
11859 en concentraciones de 5×106, 5×107, 5×108 y 5x109 células/ml en espuma
de poliuretano (PU); las pruebas de resistencia a la tracción, módulo de
elasticidad y resistencia a la compresión, obtuvieron mejores resultados para las
muestras con células bacterianas respecto a las muestra de control. Se resalta
además que el valor más alto de resistencia a la compresión se obtuvo con
concentraciones de 5x109 células/ml, deduciéndose que la resistencia a la
compresión fue proporcional al aumento de las concentraciones bacterianas.
Asimismo, los estudios realizados por Achal et. al (2013) evidenciaron que
mediante la adición de cepas bacterianas de tipo Sporoscarcina pasteurii CT-5 en
concentraciones de 5×107 células/ml, se obtuvo una menor permeabilidad, una
mayor resistencia a la compresión y una mejor resistencia a la penetración de
iones cloruro, debido probablemente a la precipitación de cristales de carbonato
de calcio (CaCO3) que produce una capa protectora de calcita, aumentando la
durabilidad de las estructuras de concreto.
242
En similar sentido, los estudios realizados por El-Enein et. al (2013) evidenciaron
que mediante la adición de la bacteria Sporosarcina pasteurii en concentraciones
de 0,5, 1,0 y 1.5 DO; la absorción de agua disminuyó proporcionalmente con el
aumento de las concentraciones bacterianas, mientras que la resistencia a la
compresión aumentó en las muestras bacterianas respecto a las muestras de
control, subrayándose que el valor más alto se obtuvo con una concentración de
1.0 DO. Los resultados anteriores permiten concluir que la precipitación de
carbonato de calcio (CaCO3) contribuyó a cerrar los poros abiertos del mortero,
disminuyendo el grado de absorción de agua y aumentando la resistencia a la
compresión de los cubos de mortero.
Por último, los estudios realizados por Chahal et. al (2012) señalan que
adicionando a la mezcla del concreto una proporción de 10 5 células/ml de tipo
Sporoscarcina pasteurii y concentraciones de 0%, 5% y 10% de humo de sílice,
se evidenció que la resistencia a la compresión aumentó proporcionalmente con
el porcentaje de adición de humo de sílice, tanto para las muestras bacterianas
como para las muestras de control.
243
métodos biológicos de autorreparación del concreto, mediante trabajo
interdisciplinario entre las Facultades de Ciencias e Ingeniería de la Universidad
Nacional de Colombia, cuyos principales aspectos se resumen a continuación.
244
En reciprocidad con lo anterior, en primer lugar, se esbozó el diseño de la
proporción de mezcla con las proporciones de agregado, contenido de cemento,
relación de agua/cemento y adición de cepas bacterianas acorde con las
concentraciones seleccionadas y en segundo lugar, se establecieron los
lineamientos a seguir para fundir las muestras de concreto, tales como: el número
de pruebas, dimensiones de los especímenes, preparación y el curado para cada
uno de los ensayos propuestos.
Por último, se realizó una aproximación de los costos para un eventual desarrollo
de la propuesta ―Diseño experimental sobre métodos biológicos de
autorreparación del concreto‖. Una vez investigado, los costos tanto de la materia
prima, de las muestras de concreto con y sin concentraciones bacterianas; como
de las pruebas de laboratorio físico mecánicas, microbiológicas y de microscopía
electrónica de barrido (SEM); se concluyó que el costo total para el desarrollo del
diseño experimental propuesto con y sin pruebas de laboratorio es de
$25.528.780,14 y $6.065.024,04, respectivamente.
245
Si bien, las investigaciones realizadas por Bang et. al (2001), Montoya et. al
(2005), Muynck et al. (2010), Okwadha y Li, (2010), Chahal et. al (2011), Jonkers,
H. (2011), Chahal et. al (2012), Mors, R. y Jonkers, H. (2012), Achal et. al (2013),
El-Enein et. al (2013), Páramo et. al (2015) XU, Jing et. al, (2015), Wong (2015) y
Anbu et. al (2016) estudiadas a lo largo de la presente investigación, obtuvieron
resultados favorables en las pruebas de autorreparación de fisuras en concreto,
resistencia a la compresión, flexión, tracción, permeabilidad al agua y al ión
cloruro, durabilidad y absorción de agua; se advierte que a la fecha de la
realización del presente trabajo, no se encontraron estudios que realizaran
pruebas de campo en los pavimentos de concreto rígido, que permitan determinar
la viabilidad de implementar esta técnica como una posible alternativa para la
reparación, conservación, mantenimiento y aumento de la durabilidad de la
infraestructura vial.
5.2 RECOMENDACIONES
342
JONKERS, H. M. (2011). Op. Cit. 12p.
343
MORS, Renée M.; JONKERS, Henk M. (2012). Op. Cit. 12p. 8p.
246
Complementando las anteriores recomendaciones, en el ―Anexo 4: Agregados
livianos – arcilla expandida térmicamente (AET)‖, se realiza un breve esbozo tanto
de las características de los agregados livianos, como de la mineralogía y
propiedades de la arcilla expandida térmicamente (AET), como marco de
referencia para ser tenido en cuenta en nuevos estudios relacionados con el tema
objeto de investigación.
De otra parte, teniendo en cuenta que los estudios realizados por Achal et al.
(2008), Achal et al. (2010) y Yoosathaporn et al (2016) obtuvieron resultados
favorables en las pruebas objeto de investigación, utilizando los nutrientes: licor
de maíz (CSL) y efluente de estiércol de pollo (CME). (Ver numeral 1.5.4.5); para
futuras investigaciones se sugiere profundizar en el estudio de fuentes
alternativas de nutrientes, como punto de apoyo para iniciar investigaciones que
permitan evaluar su efectividad tanto en sus actividades ureolíticas, condiciones
de crecimiento, procesos de precipitación de carbonato de calcio (CaCO3), como
en los posibles beneficios económicos en relación con los nutrientes y medios de
cultivo avalados por las colecciones bacteriológicas.
247
BIBLIOGRAFÍA
248
AMERICAN TYPE CULTURE COLLECTION (ATCC). Cepa bacteriana
Sporosarcina pasteurii ATCC ® 700386™. En [línea] 2017. [Citado 2017-09-12].
Disponible en: https://www.atcc.org/Products/All/700386.aspx#documentation
ANBU, Periasamy; KANG, Chang-Ho; SHIN, Yu-Jin & So, Jae-Seong. Formations
of calcium carbonate minerals by bacteria and its multiple applications. Springer
Plus. Republic of Korea. Vol. 5. Article 250, 2016. 26 p. En [línea] 2016. [Citado
2016-10-22]. Disponible en:
https://springerplus.springeropen.com/articles/10.1186/s40064-016-1869-2
249
ATLAS, Ronald M. Handbook of microbiological media. Taylor & Francis Group.
Washington, D.C. Cuarta Edición. 2010. 2043p. En [línea] 2017. [Citado 2017-03-
01]. Disponible en: https://faculty.psau.edu.sa/filedownload/doc-4-pdf-
c0f48c8ab1b8e41d825d24714e851659-original.pdf
250
CHAHAL, Navneet; SIDDIQUE, Rafat; RAJOR, Anita. Influence of bacteria on the
compressive strength, water absorption and rapid chloride permeability of fly ash
concrete. Punjab, India. Department of Biotechnology and Environmental
Sciences, Thapar University. Elsevier, Vol. 28. 2011, 7p. En [línea] 2016. [Citado
2016-11-23]. Disponible en:
http://www.sciencedirect.com.ezproxy.unal.edu.co/science/article/pii/S0950061811
003965
251
EGAS RIBADANEIRA, Diego. Microscopía electrónica: Fundamentos, teoría y
aplicaciones. Tesis de grado. Escuela politécnica nacional. Facultad de
ingeniería eléctrica. Quito – Ecuador. 1998. 136p. En [línea] 2017. [Citado 2017-
04-18]. Disponible en:
http://bibdigital.epn.edu.ec/bitstream/15000/10421/3/T1421.pdf
INVIAS. Estado de la red vial mediante criterio técnico primer semestre de 2016.
2016. En [línea] 2016. [Citado 2016-11-05]. Disponible en:
http://www.invias.gov.co/index.php/red-vial-nacional/2-uncategorised/57-estado-
de-la-red-vial
252
JONKERS, H. M. Bacteria-based self-healing concrete. Delft University of
Technology, Faculty of Civil Engineering and Geosciences, Department of
Materials and Environment .Heron Journal. Vol. Nº 56, 2011, 12p. En [línea] 2016.
[Citado 2016-11-23]. Disponible en: http://heronjournal.nl/56-12/1.pdf
253
MARTINEZ PINEDA, Diego Roberto. Concreto liviano estructural con arcilla
expandida térmicamente extraída de canteras localizadas en el sur de la sabana
de Bogotá. Universidad Nacional de Colombia. Facultad de Ingeniería. Maestría
en Ingeniería – Estructuras. Bogotá D.C. 2010. 218 p. En [línea] 2017. [Citado
2017-01-28]. Disponible en:
http://www.bdigital.unal.edu.co/8825/1/diegorobertomartinezpineda.2010.pdf
254
MOLINA ESCOBAR, Kenneth Alejandro. Evaluación de morteros para albañilería
y revestimientos elaborados a base de cementos mezclados con escorias de
horno. Universidad de San Carlos de Guatemala. Facultad de Ingeniería Civil.
Guatemala. 2006, 92p. En [línea] 2017. [Citado 2017-03-22]. Disponible en:
http://biblioteca.usac.edu.gt/tesis/08/08_2608_C.pdf
255
PÁRAMO AGUILERA, Leandro; NARVÁEZ ZAPATA, José Alberto; ORTEGA
MORALES, Benjamín Otto. La bioprecipitación de carbonato de calcio por la biota
nativa como un método de restauración. Programa de Investigación y Estudios
Nacionales y Servicios Ambientales (PIENSA). Universidad Nacional de Ingeniería
(UNI). Managua, Nicaragua, 2015. 16p. En [línea] 2016. [Citado 2016-10-05].
Disponible en: http://www.lamjol.info/index.php/NEXO/article/view/1779/1925
256
RUBIO GARDE, Laura. Caracterización de la recuperación de las propiedades
mecánicas en hormigones autosanables. Aplicación práctica en una nave
industrial en Benifaió, Valencia. Trabajo final de grado. Universidad Politécnica de
Valencia. Valencia, 2016. 129p. En [línea] 2016. [Citado 2016-10-05]. Disponible
en:
https://riunet.upv.es/bitstream/handle/10251/69817/01_Memoria.pdf?sequence=1
257
SIGMA ALDRICH. Distribuidores de la empresa Sigma Aldrich en Colombia. En
[línea] 2017. [Citado 2017-09-21]. Disponible en:
http://www.sigmaaldrich.com/site-level/corporate/worldwide-offices.html#colombia
UNAL. Circular Nº 001 de 2017. Por la cual se establece el valor del punto para
efectos de fijar las tarifas para el año 2017 de los diferentes servicios que presta
la Universidad Nacional de Colombia. 2017. En [línea] 2017. [Citado 2017-09-19].
Disponible en: http://www.legal.unal.edu.co/sisjurun/normas/Norma1.jsp?i=87942
UNAL. Resolución N° 10 de 2015. ―Por la cual se adoptan las nuevas tarifas para
los ensayos, asesorías y servicios que el Instituto de Extensión e Investigación
realiza a través de las diferentes Unidades y Laboratorios de la Facultad de
Ingeniería. Bogotá. 2015. En [línea] 2017. [Citado 2017-09-19]. Disponible en:
https://www.ingenieria.bogota.unal.edu.co/documentos/category/145-plan-
maestro-de-laboratorios%3Fdownload%3D680+&cd=2&hl=es&ct=clnk&gl=co
UNAL. Acuerdo Nº 041 de 2015. 201. Por el cual se establecen las tarifas de los
servicios que presta la Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia para el
año 2015. Bogotá. 2015. En [línea] 2017. [Citado 2017-09-19]. Disponible en:
http://www.legal.unal.edu.co/sisjurun/normas/Norma1.jsp?i=74930#4
258
VALENCIA GONZÁLEZ, Yamile, DE CARVALHO CAMAPUM, José, LARA-
VALENCIA, Luis Augusto. Influence of biomineralization on a profile of a tropical
soil affected by erosive processes. Universidad Nacional de Colombia. Medellín.
DYNA, Volumen 82, Número 192, 2015, p. 221-229. En [línea] 2017. [Citado
2017-08-22]. Disponible en:
http://revistas.unal.edu.co/index.php/dyna/article/view/42942/52337
WILLIAMS, Sarah L.; KIRISITS, Mary Jo; FERRON, Raissa Douglas. Optimization
of growth medium for Sporosarcina pasteurii in bio‑based cement pastes to
mitigate delay in hydration kinetics. J Ind Microbiol Biotechnol, Springer, Vol. 43,
2016. 9p. En [línea] 2017. [Citado 2017-08-31]. Disponible en:
http://link.springer.com.ezproxy.unal.edu.co/article/10.1007/s10295-015-1726-2
WONG, Leong Sing. Microbial cementation of ureolytic bacteria from the genus
Bacillus: a review of the bacterial application on cement-based materials for
cleaner production. Selangor, Malaysia. Journal of Cleaner Production. Elsevier
Vol. 93, 2015. 13 p. En [línea] 2016. [Citado 2016-11-23]. Disponible en:
http://www.sciencedirect.com.ezproxy.unal.edu.co/science/article/pii/S0959652615
000232
259
XU, Jing; DU, Yali; JIANG, Zhengwu & SHE, Anming. Effects of Calcium Source
on Biochemical Properties of Microbial CaCO3 Precipitation. China. Frontiers in
Microbiology, Vol. 6. Article 1366, 2015. 7 p. En [línea] 2016. [Citado 2016-11-15].
Disponible en:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4667088/pdf/fmicb-06-01366.pdf
260
ASTM C70-13. Método de ensayo. Determinación de la humedad superficial en el
agregado fino. Traducción de la Comisión Guatemalteca de Normas. Ministerio
de Economía. Guatemala. 2014. 9p. En [línea] 2017. [Citado 2017-08-11].
Disponible en:
http://www.iccg.org.gt/index.php/component/phocadownload/category/8-
agregados?download=95:astm-c70
261
ASTM C1579-06. Standard Test Method for Evaluating Plastic Shrinkage Cracking
of Restrained Fiber Reinforced Concrete (Using a Steel Form Insert). Washington.
United States, 2006. 7p. En [línea] 2017. [Citado 2017-04-07]. Disponible en:
http://www.forta-ferro.com/protected/ASTM1579.pdf
262
ICONTEC. GTC 78. Microbiología de alimentos y alimentos para animales. Guía
para la preparación y producción de medios de cultivo. Guía general para el
aseguramiento de la calidad para la preparación de los medios de cultivo en el
laboratorio. 2002. 8p. En [línea] 2017. [Citado 2017-09-17]. Disponible en:
https://tienda.icontec.org/wp-content/uploads/pdfs/GTC78.pdf
263
ICONTEC. NTC 30. Cemento Pórtland. Clasificación y nomenclatura. Bogotá,
1966. 4p. En [línea] 2017. [Citado 2017-03-21]. Disponible en:
https://www.academia.edu/9500250/NTC-30-Cemento-Portland-Clasificacion-y-
Nomenclatura
264
INVIAS. Manual de normas de ensayo de materiales para carreteras. Sección 400
– Concreto hidráulico. INV E-410-13 ―Resistencia a la compresión de cilindros de
concreto‖. Bogotá, 2013. 16p. En [línea] 2017. [Citado 2017-04-08]. Disponible en:
https://www.invias.gov.co/index.php/documentos-tecnicos1/139-documento-
tecnicos/1988-especificaciones-generales-de-construccion-de-carreteras-y-
normas-de-ensayo-para-materiales-de-carreteras
ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs — General requirements
and guidance for microbiological examinations. Microbiologie des aliments —
Exigences générales et recommendations. 2007. Switzerland, 2007. 74p. En
[línea] 2017. [Citado 2017-09-17]. Disponible en:
http://service.udes.edu.co/modulos/documentos/karenmartinez/50159704-
NTC4092.pdf
ISO 4833. Microbiology of food and animal feeding stuffs. Microorganisms colony-
count technique at 30 degrees C. 2002. 11p. En [línea] 2017. [Citado 2017-09-17].
Disponible en: https://es.scribd.com/document/350531598/ISO-4833-Conteo-
Total-Aerobios-mesofilos-pdf
265
ISO/TS 11133-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs - Guidelines on
preparation and production of culture media - Part 1: General guidelines on quality
assurance for the preparation of culture media in the laboratory. 2000. 24p. En
[línea] 2017. [Citado 2017-09-17]. Disponible en:
http://files.instrument.com.cn/bbs/upfile/2008421112515.pdf
ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs. Preparation of test
samples, initial suspension and decimal dilutions for microbiological examinations.
Part1: General rules for the reparation of the initial suspension and decimal
dilutions. 1999. 10p. En [línea] 2017. [Citado 2017-09-17]. Disponible en:
https://es.scribd.com/document/208399900/NC-ISO-6887-1-Preparacion-
suspenciones-y-diluciones
266
ANEXOS
PAVIMENTADO (Kms)
TERRITORIAL
No. MUY BUENO BUENO REGULAR MALO MUY MALO
267
ANEXO 2. MATRIZ DE DIAGNÓSTICO-MANTENIMIENTO
Estructura Daño Descripción Reparación
Deficiencias del Se considera como deterioro del sello cualquiera Sello de juntas en pavimento rígido
sellado de los siguientes defectos: endurecimiento,
desprendimiento del sello de una o ambas
paredes, fluencia fuera de la caja, carencia total
del sello, incrustaciones de material extraño y
crecimiento de vegetación. Deterioro del sello de
las juntas que permite la incrustación de
materiales incompresibles (piedras, arenas, etc.)
y/o la infiltración de una cantidad considerable de
agua superficial.
Juntas Desintegración de las aristas de una junta, Sello de juntas en pavimento rígido.
desportilladas longitudinal o transversal o una grieta, con Parcheo en pavimento de
pérdida de trozos y que puede afectar hasta concreto hidráulico.
Pavimento unos 500 mm de longitud de la losa.
rígido
Separación de Abertura en la junta longitudinal del Sello de juntas en pavimento
la junta pavimento mayor a 13 mm. rígido
longitudinal
Desintegración Desintegración progresiva de la superficie; Reemplazo de losa
primero se pierde la textura y luego el mortero, y
queda el árido grueso expuesto.
Baches Cavidad, normalmente de forma redondeada, Parcheo en pavimento de
que se forma al desprenderse concreto concreto
hidráulico de la superficie. Su diámetro varía
entre unos 25 mm y 100 mm y la profundidad
supera a los 15 mm.
Textura inadecuada Carencia o pérdida de la textura superficial, Re texturizado de losa de
necesaria para que exista una fricción adecuada concreto
entre el pavimento y los neumáticos.
Levantamiento Levantamiento de parte de la losa, localizado a Parcheo en pavimento de
localizado ambos lados de una junta transversal o grieta. concreto
Habitualmente el concreto hidráulico afectado se
quiebra en varios trozos.
268
Estructura Daño Descripción Reparación
Parches Área superior a 0,1 m2 o losa completa que ha Parcheo en pavimento de
deteriorados sido removida y reemplazada por un material concreto hidráulico
que puede ser concreto hidráulico o mezcla
asfáltica y que se encuentra deteriorada.
Grieta de esquina Consiste en grietas o fisuras que se Sello de fisuras y grietas en
presentan en las esquinas de las losas de pavimento rígido.
concreto hidráulico (de esquina). Parcheo en pavimento de
concreto hidráulico.
Grieta longitudinal Grietas predominantemente paralelas al eje de la Sello de fisuras y grietas en pavimento
Pavimento calzada o que se extienden desde una junta rígido.
rígido transversal hasta el borde de la losa, pero la Parcheo en pavimento de concreto
intersección se produce a una distancia mucho hidráulico.
mayor que la mitad del ancho de la losa.
Grieta transversal Grietas predominantemente perpendicular al eje Sello de fisuras y grietas en pavimento
de la calzada, a lo ancho de la calzada. rígido
Fisuramiento Grietas capilares (fisuras) limitadas sólo a la Sello de fisuras y grietas en concreto
por retracción superficie del pavimento. Frecuentemente, las hidráulico.
(tipo malla) grietas de mayores dimensiones se orientan en Parcheo en pavimento de concreto.
sentido longitudinal y se encuentran
interconectadas por grietas más finas
distribuidas en forma aleatoria.
Presencia o Expulsión de agua mezclada con suelos finos, Se recomienda hacer un análisis para
emanación de a través de las juntas, grietas y borde externo determinar la causa que genera el
finos (bombeo) del pavimento, bajo el paso repetido de los ingreso de agua a la estructura y
vehículos. En algunos casos se forma un posteriormente acometer las acciones
pequeño pozo o bache en la berma, al borde pertinentes para eliminar la fuente que
del pavimento. Normalmente el material fino se genera el ingreso de la misma.
deposita alrededor de las zonas por las que fue Sello de fisuras y grietas en
expulsado. pavimento rígido y/o sello de juntas
en pavimento rígido.
Fuente: Ministerio de Transporte et al (S/F). Manual para el mantenimiento de la red vial secundaria (pavimentada y en afirmado).
p. 17-22 106 p. Disponible en: https://dirinfra.mintransporte.gov.co/pvr2/images/stories/documentos/pavimentos1.pdf
269
ANEXO 3: FICHAS BIBLIOGRÁFICAS
FICHA BIBLIOGRÁFICA Nº 1
TITULO: Estudio comparativo de hormigones autosellantes
AUTORES: ÚBEDA BERNABÉ, Cristina
AÑO: 2014 Pág. 68 p. LUGAR: Madrid (España) IDIOMA: Español
MEDIO DE PUBLICACIÓN: Universidad Politécnica de Madrid. Disponible en:
http://oa.upm.es/32197/1/Tesis_master_Cristina_Ubeda_Bernabe.pdf
TIPO DE ESTUDIO DE INVESTIGACIÓN: Tesis de maestría
Palabras Clave: Hormigones autosellantes, autosellado intrínseco, encapsulado y
vascular, Precipitación de CaCO3.
RESUMEN
En el presente estudio se elabora un estado del arte del concreto auto sellante,
tomando como parámetro los estudios realizados por Van Tittleboom y De Belie
durante los años 2009, 2010, 2011, 2012 y 2013; los cuales fueron
complementados con otras fuentes de información disponibles en las referencias
bibliográficas.
El documento en primera instancia explica los aspectos generales de los
hormigones autosellantes; seguidamente expone los diferentes métodos de
autosellado, entre los que se encuentran: 1) el Autosellado intrínseco, 2) el
Autosellado basado en encapsulados y el 3) Autosellado vascular. A continuación
expone los diferentes métodos para desencadenar el sellado, las técnicas de
encapsulación apropiadas, los requerimientos de los diferentes tipos de agentes
de sellado, como también el incremento en la durabilidad y recuperación de
propiedades mecánicas. Seguidamente presenta un estudio de caso, señalando
el tipo de bacterias encapsuladas que pueden utilizarse en la construcción, su
actividad metabólica con precipitación de CaCO3, la tecnología utilizada y los
procesos químicos del proceso de autosellado.
Finalmente se explica los beneficios del autosellado por precipitación de CaCO3
frente a otro tipo de metodologías expuestos en el estado del arte. En último lugar
señala la posible cuantificación de la eficiencia del proceso de autosellado
basado en la precipitación de CaCO3 por acción metabólica bacteriana,
sugiriendo que es preciso establecer un método estandarizado para la
cuantificación de la eficiencia del proceso de autosellado basado en la acción
metabólica bacteriana.
270
FICHA BIBLIOGRÁFICA Nº 2
271
FICHA BIBLIOGRÁFICA Nº 3
272
FICHA BIBLIOGRÁFICA Nº 4
273
FICHA BIBLIOGRÁFICA Nº 5
274
FICHA BIBLIOGRÁFICA Nº 6
275
FICHA BIBLIOGRÁFICA Nº 7
276
FICHA BIBLIOGRÁFICA Nº 8
TITULO: Bacteria-based self-healing concrete – an introduction
AUTORES: MORS, Renée M.; JONKERS, Henk M.
AÑO: 2012 Pág.8p. LUGAR: Holanda IDIOMA: Inglés
MEDIO DE PUBLICACIÓN: Universidad Tecnológica de Delft, Facultad de
Ingeniería Civil y Geociencias. Disponible en:
http://repository.tudelft.nl/islandora/object/uuid:e8436dfd-3eb8-4105-a11b-
a9cd0158e9f2/datastream/OBJ/download
TIPO DE ESTUDIO DE INVESTIGACIÓN: Revista Científica elsevier.
Palabras Clave: Concrete, Self healing, bacteria, sustainable, mineral formation
RESUMEN
En el presente estudio se planteó como objetivo identificar la efectividad de la
bacteria de tipo Bacillus (B2 - E2 - 1) en concentraciones bacterianas de 109
células/ml, mediante la adición de lactato de calcio cumpliendo la función de
nutriente mineral, con el fin de identificar la precipitación de carbonato de calcio
(CaCO3) a través de la prueba de permeabilidad.
Según los autores, a partir de la conversión metabólica de lactato de calcio se
inicia el proceso de cicatrización microbiana. Esta obedece a dos procesos, en
primera instancia cuando el dióxido de carbono (CO 2) ingresa a la fisura,
reacciona con las partículas de hidróxido de calcio presentes en la matriz de
concreto y en segunda instancia, cuando el agua penetra repetidamente en las
fisuras, se produce la expansión de partículas de cemento hidratado debido a la
conversión bacteriana del lactato de calcio, como nutriente mineral.
Los autores deducen que mediante la adición directa la producción de cristales de
calcita fue limitada, debido a que los agentes de curación añadidos a la mezcla
del concreto, obstaculizan el acceso de las bacterias al lactato de calcio;
disminuyendo a su vez el período de supervivencia de las esporas bacterianas
que osciló entre los 2 y 4 meses.
Respecto a la adición de las bacterias y el lactato de calcio por encapsulamiento
en partículas de arcilla, se observó que una vez realizados los procedimientos de
impregnado, secado, enfriado y tratamiento al vacío, los agentes de curación se
encontraron en un 6% de su proporción en peso.
De igual manera, se evidenció un aumento de la supervivencia de las esporas
bacterianas hasta de 6 meses. No obstante, a la fecha de realización de los
anteriores estudios se requirieron grandes volúmenes de agentes curativos, que
afectaron negativamente la resistencia a la tracción y compresión del concreto,
advirtiéndose a este respecto que para la aplicación práctica es preciso realizar
nuevas investigaciones que permitan optimizar el material, a fin de lograr la
viabilidad, funcionalidad, durabilidad y rentabilidad tanto de los agentes curativos,
como de los materiales de construcción.
277
FICHA BIBLIOGRÁFICA Nº 9
278
FICHA BIBLIOGRÁFICA Nº 10
279
FICHA BIBLIOGRÁFICA Nº 11
280
FICHA BIBLIOGRÁFICA Nº 12
281
FICHA BIBLIOGRÁFICA Nº 13
282
FICHA BIBLIOGRÁFICA Nº 14
TITULO: Biogenic treatment improves the durability and remediates the cracks of
concrete structures.
AUTORES: ACHAL, Varenyam; MUKERJEE, Abhijeet; REDDY, M. Sudhakara.
AÑO: 2013 Pág. 5p. LUGAR: India IDIOMA: Inglés
MEDIO DE PUBLICACIÓN: Elsevier Vol. 48. Disponible en:
http://www.sciencedirect.com.ezproxy.unal.edu.co/science/article/pii/S095006181
3005795
TIPO DE ESTUDIO DE INVESTIGACIÓN: Revista Científica
Palabras Clave: Biocement, Bacillus Sporoscarcina pasteurii ,Self-healing,
Urease, Microbially induced calcite precipitation, Porosity, Rapid chloride
penetration test
RESUMEN
El presente estudio que se planteó como objetivo, identificar la capacidad de
biocementación de la cepa bacteriana de tipo Bacillus Sporoscarcina pasteurii
CT-5 durante el proceso de precipitación de carbonato de calcio (CaCO 3),
mediante la realización de las pruebas de biocementación y porosidad,
permeabilidad en cloruro y resistencia a la compresión, se permite concluir lo
siguiente.
Los resultados de las pruebas de biocementación evidenciaron las muestras
bacterianas propiciaron la precipitación de calcita. Por su parte, las pruebas de
porosidad con bacterias demostraron una reducción de más del 50% de la
porosidad respecto a las muestras de control.
Respecto a la prueba de permeabilidad de cloruro se observó que la
permeabilidad para las muestras de control fue moderada con una transferencia
de carga promedio de 3177C, mientras que para las muestras bacterianas fue
muy baja con una transferencia de carga promedio de 975,33C. Esta reducción
obedece probablemente a la precipitación de cristales de carbonato de calcio
(CaCO3), que origina una capa protectora de calcita, aumentando la durabilidad
de las estructuras de concreto.
Los resultados de la prueba de la resistencia a la compresión concluyen que a
pesar de que en todas las muestras con bacterias registraron un aumento de este
parámetro, la mayor resistencia a la compresión se obtuvo a los 7 y 28 días con
una concentración de 5x107 células/ml. En similar sentido, se observó que la
precipitación de cristales de carbonato de calcio (CaCO3) aumenta la resistencia
a la compresión de manera proporcional con la profundidad de la fisura.
Por último, mediante la prueba de microscopía electrónica de barrido (SEM) se
observaron cristales de carbonato de calcio completamente desarrollados cerca
de la superficie de la fisura. De la misma manera, en las zonas interiores de las
fisuras se apreció una menor concentración tanto de cristales de calcita como de
bacterias. En similar sentido, se identificaron cristales de calcita con presencia
significativa de bacterias en forma de varillas.
283
FICHA BIBLIOGRÁFICA Nº 15
284
FICHA BIBLIOGRÁFICA Nº 16
285
ANEXO 4: AGREGADOS LIVIANOS – ARCILLA EXPANDIDA
TÉRMICAMENTE (AET)
344
MAMLOUK, M. S., ZANIEWSKI, J. P. (2009). Materiales para Ingeniería Civil. Segunda
Edición. Pearson Educación S.A. Madrid, España. En: RODRÍGUEZ LOAIZA, Said Steward.
Incidencia de la arcilla expandida térmicamente en los procesos de corrosión del acero de
refuerzo del concreto liviano estructural. Universidad Nacional de Colombia. Facultad de
Ingenieria. Maestría en Ingeniería – Estructuras. Bogotá D.C. 2014. p.53. En [línea] 2017. [Citado
2017-01-27]. Disponible en: http://www.bdigital.unal.edu.co/46261/1/300346.2014.pdf
345
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA NTC 4045. Ingeniería civil y arquitectura. Agregados
livianos para concreto estructural. ICONTEC. 1997-11-26. p.1
346
MARTINEZ PINEDA, Diego Roberto. Concreto liviano estructural con arcilla expandida
térmicamente extraída de canteras localizadas en el sur de la sabana de Bogotá. Universidad
Nacional de Colombia. Facultad de Ingeniería. Maestría en Ingeniería – Estructuras. Bogotá D.C.
2010. p.29-32. En [línea] 2017. [Citado 2017-01-28]. Disponible en:
http://www.bdigital.unal.edu.co/8825/1/diegorobertomartinezpineda.2010.pdf
347
SILVA CORREAL, Julian David. Propuesta metodológica para la determinación experimental
de la reacción alcali-silice en agregados de arcilla térmicamente expandida por medio de un nuevo
ensayo de electro-migración. Universidad Nacional de Colombia. Facultad de Ingenieria. Maestría
en Ingeniería – Estructuras. Bogotá D.C. 2014. p.73-77. En [línea] 2017. [Citado 2017-01-25].
Disponible en: http://www.bdigital.unal.edu.co/46263/1/300359.2014.pdf
286
recopilación de los diferentes tipos de agregados livianos, que se resumen en la
Tabla 97.
287
Echevarría (2011), define la arcilla ―como una roca sedimentaria consistente en
mezclas de distintos minerales, esencialmente silicatos hidratados de aluminio,
hierro o magnesio que, junto a diversas impurezas, se encuentran en forma de
partículas cristalinas extremadamente pequeñas y en proporciones variables‖. 348
Esta definición es complementada por Martínez (2010) quien manifiesta que ―Las
arcillas corresponden a rocas sedimentarias, en la mayor parte de los casos de
origen dendrítico, que son constituyentes esenciales de los suelos y sedimentos,
puesto que son los productos finales de la meteorización de los silicatos que
formados a mayores presiones y temperaturas.‖349
348
ECHEVARRÍA INASTRILLA, Yuri. Protección de especies de lantanidos por intercalación en
silicatos y aluminosilicatos laminares. Universidad de Chile. Programa de doctorado en Química.
Chile. 2011. p.19. En [línea] 2017. [Citado 2017-01-27]. Disponible en:
http://repositorio.uchile.cl/tesis/uchile/2011/qf-echevarria_y/pdfAmont/qf-echevarria_y.pdf
349
MARTINEZ (2010). Op. Cit. p. 35
350
MENDES DE FREITAS, José Jorge. Caracterización y estudio tecnológico de arcillas del
estado de Bahía (Brasil), para la obtención de materiales cerámicos tradicionales. Universidad de
Santiago de Compostela. España. 2009. p.9. En [línea] 2017. [Citado 2017-01-28]. Disponible en:
https://minerva.usc.es/xmlui/handle/10347/2768
351
KRSTIĆ, Vesna. Catalizadores de Rh-soportado y su aplicación en la hidrogenación de
crotonaldehído. Capítulo 1. Introducción y objetivos Universidad de Cantabria. 2005. p.8. En
[línea] 2017. [Citado 2017-01-28]. Disponible en:
http://www.tdx.cat/bitstream/handle/10803/10685/1de5.VKcap1.pdf?sequence=2
288
Figura 44. Estructura cristalina tetraédrica y octaédrica de las arcillas
Como se puede apreciar en la Figura 44, los silicatos son tetraedros compuestos
por 4 átomos de Oxigeno que rodean 1 átomo de silicio; mientras que los
filosilicatos son una subclase de silicatos octaédricos conformados por 4
hidroxilos y 2 átomos de aluminio o magnesio; advirtiéndose que estos elementos
(Si, O, Al y OH) son esenciales en su composición y estructura cristalina. Dentro
de estos lineamientos, la estructura cristalina tanto de los silicatos como de los
filosilicatos resultan de la combinación de las capas tetraédricas (T) y octaédricas
(O), mediante la cual se comparten oxígenos apicales de la capa tetraédrica con
los oxígenos libres de la octaédrica para formar las diferentes capas que
conforman los empaquetamientos de la arcilla.352
352
SILVA (2014). Op. Cit.p.78-79
289
(trilaminares); mientras que para la combinación de dos 2 tetraédricas con 2
octaédricas, se denomina como 2:2.353 (Ver Tabla 98)
353
KRSTIĆ (2005). Op. Cit.p.8
290
Es preciso resaltar que las fracciones de arcilla de empaquetamiento 1:1
generalmente se encuentran en suelos cálidos y húmedos; las de tipo 2:1 en
regiones secas y frías, mientras que las de tipo 2:2 en zonas semiáridas, cálidas
o frías, según la ubicación geográfica; deduciendo a este respecto, que el
empaquetamiento de los minerales arcillosos dependen principalmente de los
factores climáticos (temperatura, precipitación) que pueden variar dependiendo
de su tiempo de exposición.
354
RODRÍGUEZ LOAIZA, Said Steward. Incidencia de la arcilla expandida térmicamente en los
procesos de corrosión del acero de refuerzo del concreto liviano estructural. Universidad Nacional
de Colombia. Facultad de Ingenieria. Maestría en Ingeniería – Estructuras. Bogotá D.C. 2014.
p.63. En [línea] 2017. [Citado 2017-01-27]. Disponible en:
http://www.bdigital.unal.edu.co/46261/1/300346.2014.pdf
291
gases y posee baja densidad con respecto a los agregados convencionales que
puede oscilar entre 300 y 1120 kg/m3, entre otras.355 (Ver Figura 45)
355
MARTINEZ (2010). Op. Cit. p. 37
292
para la fabricación de elementos aislantes, mientras que las más altas son
empleadas para la producción de concretos livianos estructurales.356
A este respecto, Weigler y Karl (1974), citado por Martínez (2010) para gránulos
de AET comerciales presentan los siguientes valores de resistencia a la
compresión: Árido ―Leca Giesche‖: 6.5 MPa. Pizarra Expandida ―Berwilit‖: 14.5
MPa y Arcillas expandidas ―Detoon‖ y ―Liapor 8‖: 27.2 MPa.357
356
Ibíd., p. 39
357
Ibíd., p. 39
293
importante tener en cuenta la absorción del agua de las AET, debido a que influye
en la relación de agua/cemento, manejabilidad, uniformidad, resistencia y
densidad del concreto. Además de lo anterior, se recomienda que 24 horas antes
del mezclado se realice un humedecimiento previo de los agregados a emplear, a
fin de contar con un tiempo suficiente para que se realice la absorción de agua
por parte de las AET de manera eficaz y no interfiera con la proporción de agua a
utilizar durante el proceso de mezcla.358
358
Ibíd., p. 40
359
Ibíd., p. 40
360
Ibíd., p. 40
294
y conserva sus propiedades aun cuando se somete a alta resistencia producida
por el fuego.361
361
Ibíd., p. 40
362
Ibíd., p. 40
363
Ibíd., p. 40-41
295