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Agar CLED

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Agar CLED

Fundamento

Es un medio deficiente en electrolitos. En el medio de cultivo, la peptona, el extracto


de carne y la tripteína aportan los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo
bacteriano. La lactosa es el hidrato de carbono fermentable, la L- cistina es el agente
reductor, el azul de bromotimol es el indicador de pH y el agar es el agente
solidificante. La diferenciación de los microorganismos se basa en la utilización que
éstos puedan hacer de la lactosa; las cepas que la fermentan, acidifican el medio que
vira del verde al amarillo, mientras que los que no lo hacen, dan colonias incoloras que
viran el medio al color azul. La restricción de electrolitos en el medio impide el
desarrollo invasor de especies de Proteus, por tal motivo, es un medio ideal para el
recuento de colonias.

Formula en gramos por litro


Hidrolizado pancreático de caseína 4,0 g
Hidrolizado pancreático de gelatina 4.0 g
Extracto de carne 3.0 g
Lactosa 10.0 g
L-Cistina 0.13 g
Azul de Bromotimol 0.02 g
Indicador Andrade (Fucsina ácida) 0.1 g
Agar 15.0 g

pH : 7,5+/- 0,2
Preparación
suspender 36,2 g del polvo en 1 litro de agua purificada. dejar reposar 5 minutos
y calentar suavemente agitando por rotación. Hervir 1 o 2 minutos hasta su
disolución total. distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 118.-
121°C durante 15 minutos.
Siembra
Sembrar por estría en la superficie del medio. Recoger con un asa calibrada (0,01 o 0,001 ml)
una muestra de orina no diluida, adecuadamente mezclada. Confirmar la obtención de
una cantidad de muestra adecuada en el asa. Inocular la muestra en el centro de la placa
en una única siembra a partir de la cual se efectúa la dispersión del inoculo.

Incubación
Incubar las placas en aire ambiente a una temperatura de 35 ± 2 °C, durante un
período de 24 a 48 h.

Resultados
Microorganismos Desarrollo Color del
medio
Enterobacter satisfactorio Amarillo
aerogenes
Escherichia coli Satisfactorio Amarillo
Proteus vulgaris Satisfactorio Azul-azul
verdoso
Staphylococcus Satisfactorio Amarillo
aureus claro o
sin
cambio
Enterococcus Satisfactorio Amarillo
faecalis claro o
sin
cambio

Interpretación de los resultados

Microorganismos fermentadores de lactosa: colonias amarillas. microorganismos


no fermentadores de lactosa: colonias del color del medio, azuladas.

Características del medio

Medio de cultivo deshidratado: color beige verdoso, homogéneo, libre


deslizamiento.
Medio de cultivo preparado: color verde.
Almacenamiento

Medio de cultivo deshidratado: a 10-35 ºC.


Medio de cultivo preparado: a 2-8. ºC.

Agar sin
inoculación

Agar con
inoculación

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