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LABORATORIO N 4

DETERMINACIÒN DE LA LONGITUD DE ONDA MÀXIMA Y REAL

DEL ¨Cr¨ Y ¨Mn¨ CON ESPECTROFOTOMETRO

I.- OBJETIVOS

 Mediante la utilización del espectrofotómetro (spectronic-20) realizar la determinación

de La longitud de onda óptima de Mn y Cr.

 Determinar la absorbancia y tramitancia mediante el equipo.

 Graficar una curva representativa de absorbancia vs longitud de onda.

II.- FUNDAMENTO TEÓRICO

El espectrofotómetro es un instrumento con el que se apoya la espectrofotometría para

medir la cantidad de intensidad de luz absorbida después de pasar a través de una

solución muestra.

Mide en función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma magnitud

Fotométrica relativos a dos haces de radiaciones y la concentración o reacciones químicas

que se miden en una muestra.

Tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática a través de una muestra y

medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra.

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La calibración del espectrofotómetro es algo más compleja. En la posición cero del

aparato, el paso de luz está cerrado, por lo que la tramitancia debe ajustarse a cero.

Luego utilizando un blanco de aire, se debe ajustar la tramitancia a 100 en la posición

meter del equipo

Curva de Calibración. Uno de los métodos más utilizados para determinar la

concentración de una muestra problema, es el método de la curva de calibración. Esta

curva de calibración es una gráfica que relaciona la concentración de al menos cinco

soluciones de estándar de concentraciones conocidas, con la absorbancia de cada uno

de ellos a la longitud de onda máxima (λ Max).

Curva de Calibración Una vez obtenida la gráfica se determina la función matemática

que presenta dicha recta a través del tratamiento estadístico de regresión de los

mínimos cuadrados, la cual relaciona la absorbancia y la concentración de un analito.

La siguiente ecuación matemática corresponde a dicha función: A = m c + n (Ecuación

1A : Absorbancia. n : Intercepto de la recta m : Pendiente de la recta y que

corresponde al producto entre absorbancia de la muestra y el espesor b de la cubeta

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- Luego se mide la absorbancia de la solución problema y se interpola su valor en la

gráfica o se reemplaza en la ecuación (1), para obtener el valor de concentración del

analito. La concentración de la solución problema debe estar comprendida en el rango

de concentración que comprende la curva de calibración. Si la concentración de la

solución problema es menor que la concentración del estándar más diluido, debe

usarse el método de adición estándar, que consiste en adicionar un volumen

determinado de un estándar concentrado a la solución problema, antes de realizar la

lectura y que permite que esta lectura este dentro de las obtenidas para la curva de

calibración. En el caso contrario, si la concentración del analito es mayor que la

concentración del estándar más concentrado la solución problema deberá ser diluida.

- La ley de Lambert-Beer establece que la absorbancia está directamente relacionada

con las propiedades intrínsecas del analito, con su concentración y con la longitud de

la trayectoria del haz de radiación al atravesar la muestra. La expresión matemática de

la ley de Lambert y Beer es:

A= C * L

la ley de Beer declaró que la absorbancia es proporcional a las concentraciones de las

especies atenuantes en la muestra de material. La derivación moderna de la ley de

Beer- Lambert combina las dos leyes y correlaciona la absorbancia tanto a las

concentraciones de las especies atenuantes así como el espesor del material de

muestra.

Para cada longitud de onda de luz que pasa a través del espectrómetro, se mide la

intensidad que pasa a través de la célula de referencia, la intensidad de la luz que pasa

a través de la célula de referencia. La intensidad de la luz pasa a través de la muestra y

se mide por la longitud de ondas, dado por el símbolo I.

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III.- EQUIPO MATERIALES Y REACTIVOS

- Tubos de ensayo

- Espectrofotómetro

- Vaso de precipitado

- Vidrio reloj

- Espátula

- Pisetas

- Pipetas

- Matraz aforado

- Permanganato de potasio

- Dicromato de potasio
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IV.- DESARROLLO DE LA EXPERIENCIA

EXPERIENCIA 1

Preparar una solución de Permanganato de potasio a 1000ppm

Pesar Cr y Mn Disolver Aforar hasta 100 ml

𝒎𝒈 𝟏𝒈 𝟓𝟓𝒈𝑴𝒏
𝟏𝟎𝟎𝟎 𝑲𝑴𝒏𝑶𝟕 ∗ 𝟎. 𝟏𝒍 ∗ ∗ = 𝟎. 𝟎𝟑𝟒𝟖𝒈
𝒍 𝟏𝟎𝟎𝟎𝒎𝒈 𝟏𝟓𝟖𝒈 𝑲𝑴𝒏𝑶𝟕

𝒎𝒈 𝟏𝒈 𝟓𝟐𝒈𝑴𝒏
𝟏𝟎𝟎𝟎 𝑲𝟐 𝑪𝒓𝟐 𝑶𝟕 ∗ 𝟎. 𝟏𝒍 ∗ ∗ = 𝟎. 𝟎𝟏𝟕𝟔𝒈
𝒍 𝟏𝟎𝟎𝟎𝒎𝒈 𝟐𝟗𝟒. 𝟏𝟖𝒈 𝑲𝟐 𝑪𝒓𝟐 𝑶𝟕

Diluir a) 50ppm b) 60ppm c) 70ppm

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EXPERIENCIA 2

Medición en el espectrofotómetro

Lo que nosotros realizamos en la experiencia es hallar la longitud de onda optima o

máxima se va hallar cuando hallamos la absorbancia máxima

Recomendaciones

Debe estar en lugar estable

No se debe derramar ácidos o bases

Cubetas de plástico limpias

Antes de cualquier medición se hace un ajuste con agua destilada

Procedimiento

Llenar la cubeta hasta la línea permitida (pico del triángulo invertido)

Limpiar huellas dactilares

La parte lisa en dirección al haz de luz

Se inserta y se cierra

Se determina la longitud de onda con las flechas se puede ver absorbancia y tramitancia

Elaborar una tabla para el Mn y Cr con sus respectivas mediciones

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Mn
50ppm 60 ppm 70 ppm
(nm) Abs. T Abs. T Abs. T
510 0,076 83,9 0,08 83,1 0,105 78,5
520 0,082 82,7 0,086 82 0,106 78,4
530 0,079 83,4 0,083 82,6 0,101 79,4
540 0,075 84,1 0,078 83,6 0,099 79,6
550 0,074 84,2 0,071 84,8 0,09 81,4

Cr
50ppm 60ppm 70ppm
(nm) Abs. T Abs. T Abs. T
340 0,001 99,6 0,01 97,7 0,025 94,5
350 0,003 99,4 0,013 97,1 0,027 93,8
360 0,006 98,5 0,016 96,4 0,031 93,2
370 0,008 98,1 0,014 96,7 0,029 93,4
380 0,006 98,6 0,01 97,7 0,016 94,1
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TABLAS DE EXCEL

Abs 50 ppm "Mn"

0.083
0.082
0.081
0.08
0.079
0.078
0.077
0.076
0.075
0.074
0.073
500 510 520 530 540 550 560
(nm)

Abs. 60 ppm "Mn"

0.1
0.09
0.08
0.07
0.06
0.05
0.04
0.03
0.02
0.01
0
500 510 520 530 540 550 560
(nm)

Abs. 70 ppm "Mn"

0.108
0.106
0.104
0.102
0.1
0.098
0.096
0.094
0.092
0.09
0.088
500 510 520 530 540 550 560
(nm)
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V.- CONCLUSIONES

 Mediante la utilización del espectrofotómetro se pudo realizar la determinación de la

longitud de onda óptima de Mn y Cr.

 Determinamos la absorbancia y tramitancia de las diferentes soluciones mediante el

equipo.

 Se logró realizar las gráficas representativas de absorbancia vs longitud de onda.

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VI.- CUESTIONARIO

1.- ¿Depende de la concentración las mediciones de absorbancia? ¿por qué?

Cuando un rayo de luz de una determinada longitud de onda de intensidad incide

perpendicularmente sobre una disolución de un compuesto químico que absorbe luz el

compuesto absorberá una parte de la radiación incidente y dejará pasar el resto

2.- ¿Cuál es el fundamento teórico en el que se basan las mediciones en el

espectrofotómetro?

Es un método científico utilizado para medir cuánta luz absorbe una sustancia química,

midiendo la intensidad de la luz cuando un haz luminoso pasa a través de la solución

muestra, basándose en la Ley de Beer-Lambert.

3.- ¿Qué es absorbancia?

Cuando un haz de luz incide sobre un cuerpo traslúcido, una parte de esta luz es absorbida

por el cuerpo, y el haz de luz restante atraviesa dicho cuerpo. A mayor cantidad de luz

absorbida, mayor será la absorbancia del cuerpo, y menor cantidad de luz será transmitida

por dicho cuerpo. Como se ve, la absorbancia y la tramitancia son dos aspectos del mismo

fenómeno.

4.- ¿Cuál es la diferencia entre la técnica colorimétrica y espectrofotométrica?

La colorimetría se fundamenta en los mismos principios que la espectrofotometría, es

decir, en el estudio del espectro electromagnético de la energía radiante absorbida,

transmitida o emitida por un objeto, pero a diferencia de la espectrofotometría, la

colorimetría se centra en las longitudes de onda de percepción del color, es decir, que

excitan a la foto receptores del ojo humano, y la cuantificación de esta percepción.

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5.- ¿Qué factores intervienen negativamente en las mediciones espectrofotométricas?

Mal manejo de los protocolos de medición

Equipo no calibrado

Debe estar en lugar estable

No se debe derramar ácidos o bases

Cubetas de medición limpias

Antes de cualquier medición se hace un ajuste con agua destilada

VII.- BIBLIOGRAFIA

https://quimica.fandom.com/wiki/

https://elespectrofotometro.com/partes/

https://es.scribd.com/doc/149737902/Instructivo-de-Operacion-Calibracion-Verificacion-

y-Ajuste-Del-Equipo-Espectrofotometro-Ultravioleta-Visible-Uv-Vis-160a