INFORME 8: DROGAS CON HETERÓSIDOS FLAVONOIDES Farmacognosia

Drogas con heterósidos flavonoides

López A, Loayza L., Cervantes R., Zarate A., Caso J.
(Mesa 5- Grupo jueves) LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA Y MEDICINA TRADICIONAL, FACULTAD DE
FARMACIA Y BIOQUÍMICA, UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS.

RESUMEN
El presente estudio tuvo como objetivo la determinación de los glicósidos flavonoides en distintas
especies vegetales, tales como: naranja, ruda y maíz morado. Material y métodos: Se trabajó con
muestras de las drogas de las especies vegetales mencionadas, otorgadas por la cátedra de
farmacognosia de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional Mayor de San
marcos (UNMSM); se realizó el análisis cualitativo, primero utilizando el método de maceración para la
extracción de los metabolitos, para continuar con las reacciones especificas de identificación: para el
reconocimiento de la hesperidina en la naranja se hizo la reacción con H2SO4cc, HClcc, HNO3 Y NaOH
30%; para el reconocimiento de la rutina, en la ruda, se hizo reaccionar con los reactivos de Wilson,
Shinoda y FeCl3; para el reconocimiento de la quercetina, en la cebolla, se utilizo los reactivos
Pb(CH3COO)2 FeCl3 y por último para el reconocimiento de antocianina en el maíz morado se utilizó los
reactivos H2SO4cc y NaOH 30%. Se utilizó la cromatografía en capa fina (TLC) para comparar las
relaciones de flujo de la muestra problema y de los estándares de hesperidina y rutina. Resultados:
Los resultados del análisis cualitativo fueron todos positivos y las relaciones de flujo de la muestra
problema y los estándares, calculadas en la cromatoplaca, fueron muy próximas. Conclusiones: Las
diferentes especies vegetales estudiadas, en especial las drogas de estas, como: las hojas de ruda, el
albedo de la naranja, los bulbos de la cebolla y la coronta del maíz morado; presentan diferentes tipos
de flavonoides, utilizados hoy en las industrias con fines terapéuticos, alimentarios, etc.

Palabras clave: Glicósidos, flavonoides, maceración, hesperidina, rutina, quercetina, antocianina,

cromatografía capa fina.

Drugs with heteroside flavonoids

SUMMARY
The present study aimed at determining the flavonoid glycosides in different plant species, such as
orange and purple maize rough. Material and methods: The study of samples of drugs of plant species
mentioned, granted by the department of Pharmacognosy, Faculty of Pharmacy and Biochemistry at the
Universidad Nacional Mayor de San Marcos (San Marcos University), qualitative analysis was
performed, first using maceration method for the extraction of the metabolites, for further
identification specific reactions: for the recognition of hesperidin in the reaction became orange with
H2SO4cc, HClcc, HNO3 and 30% NaOH, for the recognition of the routine , the crude was reacted with
reagents Wilson, Shinoda and FeCl3; for recognition of quercetin, in the onion, was used reagents
Pb(CH3COO)2, FeCl3 and finally for the recognition of the maize anthocyanin purple H2SO4cc reagents
used and NaOH 30%. We used thin layer chromatography (TLC) to compare the relationships of flow of
sample and standards of hesperidin and rutin. Results: The results of qualitative analysis were positive,
and the relations of flow of sample and standards, calculated in chromatoplate were very close.
Conclusions: The study different plant species, especially drugs such as: the leaves of rue, the albedo of
orange, onion bulbs and purple corn cob, which present different types of flavonoids, used today in the
industries for therapeutic purposes, food, etc.

Keywords: glycosides, flavonoids, maceration, hesperidin, rutin, quercetin, anthocyanin, thin layer
chromatography.
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I. INTRODUCCIÓN preliminar del tipo de flavonoide en un extracto

Los flavonoides pertenecen a un grupo de de planta, puede hacerse basado inicialmente
compuestos naturales arreglados bajo un en un estudio de sus propiedades de solubilidad
sistema C6-C3-C6, en el cual dos anillos y de comportamiento ante reacciones de color;
aromáticos llamados A y B están unidos por una esto, seguido por un examen cromatográfico
unidad de tres carbonos que pueden o no directamente del extracto y/o del extracto
formar un tercer anillo, que en caso de existir es hidrolizado1.
llamado anillo C. Se conoce como 10 clases de Los objetivos de este trabajo son: 1) Determinar
flavonoides los cuales pueden encontrarse la presencia de glicósidos flavónicos en
como aglicona o bajo la forma de glicósidos con diferentes especies vegetales. 2) Separar e
una o tres unidades de azúcar, generalmente en Identificar mediante reacciones específicas de
los carbonos 3 y/o 7, siendo los azucares más identificación la presencia de glicósidos
comunes la glucosa, galactosa, ramnosa, xilosa y flavónicos en diferentes especies vegetales. 3)
arabinosa. Es frecuente que diferentes azúcares Comprobar la presencia de glicósidos
se hallen unidas a una misma aglicona y en flavónicos en especies vegetales por el análisis
diferentes posiciones lo que hace mayor el cromatográfico.
número de glicósidos conocidos; es también
común, que se encuentren en mezclas como
agliconas y/o glicósidos, aun de las diferentes
II. MATERIAL Y MÉTODOS
clases siendo esto último lo más frecuente.
Se hallan presente en todas las partes de la 1. MATERIAL
planta, algunas clases se encuentran más  H2SO4 CC
ampliamente distribuidas que otras, siendo más  HCl CC
comunes las flavonas y flavonoles y más  HNO3
restringidos en su ocurrencia las isoflavonas,  NaOH 30%
las chalconas y auronas.  R. Wilson (ac. Bórico + citrato de sodio)
Aunque los flavonoides han sido empleados  Shinoda
desde mucho tiempo como colorantes de lana,  FeCl3
se les atribuye diversas propiedades en las  Pb(CH3COO)2
plantas, entre ellos podemos citar (a)  Naranja (Citrus sinensis)
protección a los vegetales contra la incidencia
 Ruda (Ruta graveolens)
de rayos ultravioleta y visible, así como
 Cebolla (Allium cepa L.)
protección contra insectos, hongos virus y
 Maíz morado (Zea mays L.)
bacterias, (b) atrayentes de animales con
finalidad de polinización, (c) antioxidantes, (d)
control de la acción de las hormonas vegetales, 2. MÉTODOS
(e) agentes alelopáticas y (f) inhibidora de las
enzimas. Por otro lado, estos compuestos 2.1 ANALISIS CUALITATIVO
poseen también importancia farmacológica,
resultado de algunas propiedades importantes 2.1.2 HESPIRIDINA: Citrus sinensis “naranja”
atribuidas a algunos representantes de las
diferentes clases, como por ejemplo,
A. Extracción2
antinflamatorio, antialérgico, antiulcerogénico,
Se pesa 20g de albedo de naranja en un frasco
antiviral, anticarcinogénico; asimismo, son
ámbar, se agrega 20mL de etanol y 2mL de
utilizados para el tratamiento de la fragilidad
NaOH y se deja reposar por 7 días.
capilar, de la diabetes, de las afecciones
Pasado el tiempo de maceración, se decanta el
cardiacas, entre otras.
líquido de maceración, se acidifica a pH5 y se
Como características generales de estos
deja reposar por 30minutos para la formación
compuestos debemos señalar su solubilidad en
de cristales. Luego se filtra, para obtener los
agua y etanol, su carácter fenólico y su intensa
cristales de hesperidina en la torta, se lleva a
absorción en la región ultravioleta y visible del
secar para la ebullición de los solventes hasta
espectro debido a la presencia de sistemas
obtener el extracto seco de hesperidina.
aromáticos conjugados. Una clasificación
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B. Reacciones especificas de identificación2 2.1.4. ANTOCIANINAS: Zea mays L. “maíz

 Reacción con H2SO4 cc. morado”
Coloque 1mg de extracto seco de hesperidina A. Reacciones especificas de identificación2
en una placa de toques, agregue gotas de H2SO4  Reacción con H2SO4 cc.
cc. Observe el cambio de coloración Coloque 0,5mL de extracto maíz morado en un
 Reacción con HCl cc. tubo de ensayo, agregue gotas de H2SO4 cc.
Coloque 1mg de extracto seco de hesperidina Observe el cambio de coloración
en una placa de toques, agregue gotas de HCl  Reacción con NaOH 30%
cc. Observe el cambio de coloración. Coloque 0,5mL de extracto maíz morado en un
 Reacción con HNO3 tubo de ensayo, agregue gotas de de NaOH 30%
Coloque 1mg de extracto seco de hesperidina cc. Observe el cambio de coloración
en una placa de toques, agregue gotas de HNO3.
Observe el cambio de coloración. 2.1 ANALISIS CROMATOGRÁFICO2
 Reacción con NaOH 30% Sistema de solventes: acetato de etilo:
Coloque 1mg de extracto seco de hesperidina metileno: agua (100:13.5: 10)
en una placa de toques, agregue gotas de NaOH Revelador: solución etanólico de cloruro
30%. Observe el cambio de coloración. férrico
Soporte: Cromatofolio de Sílica gel
2.1.2. RUTINA: Ruta graveolens “ruda” Muestra Problema: Extracto de Ruda
A. Extracción2 Estándares: Mezcla de rutina y hesperidina
Pese 1g de muestra seca y pulverizada de hojas
de ruda en un Erlenmeyer de 50mL, añade 5mL Observe las fluorescencias coloreadas a la luz
de metanol y caliente por 10 minutos a 600C. UV366nm después de aspersado y determine el
Filtre sobre un vial valor de Rf de cada componente
B. Reacciones especificas de identificación2
 Reacción de Shinoda III. RESULTADOS
Coloque 0,5mL de extracto de ruda en un tubo
de ensayo, agregue 2 a 3 virutas de Mg y
1. ANALISIS CUALITATIVO
adicione gotas de HCl cc. Observe el cambio de
coloración.
1.1. HESPERIDINA
 Reacción de Wilson o Borocítrica
Coloque 0,5mL de reactivo Wilson A u 0,5mL de
Ensayo - Observación -
reactivo Wilson B en un tubo de ensayo, Resultado
Reacción Característica
agregue 0,5mL de extracto de ruda y dejar en
oscuridad por 30 minutos. Observar coloración
amarilla en luz natural y en UV fluorescencia Coloración positivo
verde. H2SO4 cc
naranja
 Reacción con FeCl3
Coloque 0,5mL de extracto de ruda en un tubo
de ensayo, agregue gotas de FeCl3. Observe el
positivo

cambio de coloración. Precipitado

HCl cc
blanco
2.1.3. QUERCETINA: Allium cepa L. “cebolla”
A. Reacciones especificas de identificación2
 Reacción con FeCl3
Coloración
positivo

Coloque 0,5mL de extracto de cebolla en un

tubo de ensayo, agregue gotas de FeCl3. HNO3 pardo
Observe el cambio de coloración. rojiza
 Reacción con Pb(CH3COO)2
Coloque 0,5mL de extracto de cebolla en un
Coloración
positivo

tubo de ensayo, agregue gotas de Pb(CH3COO)2. NaOH

Observe el cambio de coloración. amarillo
30%
naranja
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1.2. QUERCETINA

Ensayo - Observación -
Resultado
Reacción Característica
4.2
3.9
Precipitado

positivo
Pb(CH3COO)2 color 5.8
amarillo

Coloración

positivo
FeCl3 verde en
frio A B

1.3. RUTINA IV. DISCUSIÓN

Ensayo - Observación -
Resultado Las antocianinas son más estables en un medio
Reacción Característica
ácido que en un medio neutro o alcalino. En
Coloración amarillo medio ácido a pH 1, la forma predominante es
Wilson o
Rayos UV: positivo la del ión flavilio, el cual da el color rojo, cuando
borocítrica
fluorescencia verde esta es sometida a pH básico o alcalino, el ión
flavilio es susceptible al ataque nucleofílico por
parte del agua, produciéndose la pseudobase
Shinoda Coloración rosada positivo carbinol, esto es a pH 4.5 y seguido se forma la
chalcona, las dos formas son incoloras. A un pH
7 se produce la base quinoidal, el cual da una
FeCl3 Coloración verde positivo coloración azul debido a cambios
conformacionales y a la estabilización de los
electrones de valencia del catión flavilio y
1.4. ANTOCIANINAS resonancia del anillo aromático B3. La muestra
Ensayo - Observación - problema de antocianina obtenida de la coronta
Resultado de maíz cambió a color rojo al agregar ácido
Reacción Característica
sulfúrico concentrado; luego de agregar una
base como el NaOH 30% cambió a color verde
H2SO4 cc Coloración roja positivo azulado oscuro

NaOH 30% Coloración azul positivo En el ensayo de identificación de rutina se tuvo

que preparar extracto de ruda. Para la
preparación del extracto, las hojas frescas
2. ANÁLISIS CROMATOGRÁFICO fueron estabilizadas por acción del alcohol
hirviente que solubiliza los heterósidos. Esta
Flavonoides Relación de Flujo (R.F) purificación permite eliminar la clorofila cuya
intensa coloración enmascara ciertas
Rutina (A)
0.67 reacciones de caracterización4.
Hesperidina (A)
La reacción del extracto de ruda con el reactivo
M.P. (B) 0.72 de Wilson, presentó una coloración amarilla y
cuando se llevó la muestra a la lámpara uv, se
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tornó de color verde fluorescente. La reacción VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

indica positivo cuando el flavonoide posee un
grupo carbonilo y un grupo oxhidrilo posición
5, tal es el caso de la rutina, dan complejos 1. Lock, O. Investigación Fitoquímica,
amarillos y en fluorescencia verde. Esta Método en el Estudio de Productos
coloración intensa en la lámpara UV se debe a la Naturales. Fondo Editorial PUCP. Lima.
deslocalización de los electrones presentes en 1994, pp. 114-130
los anillos (sistemas aromáticos conjugados) 3.
En el caso de la reacción de Shinoda, el extracto 2. Cátedra de farmacognosia y medicina
de ruda en contacto con ácido clorhídrico con Tradicional, guía de práctica-
virutas de magnesio metálico se genera Farmacognosia, 2012.
hidrógeno, este último reduce al flavonoide
(rutina), lo cual se reconoce por la coloración
3. Cuevas Montilla E., Antezana A. y
rosada 4. Winterhalter P., ANÁLISIS Y
En la reacción de coloración con FeCl3, la CARACTERIZACIÓN DE ANTOCIANINAS
muestra de extracto de ruda cambio a una
EN DIFERENTES VARIEDADES DE MAÍZ
coloración verde. Esto se debe a que la
naturaleza polifenólica de los flavonoides, (Zea mays) BOLIVIANO. Universidad
específicamente compuestos con orto-difenoles, Mayor San Simón Cochabamba, Sucre a
lleva a la formación de coloraciones variadas en Parque la Torre, Cochabamba, Bolivia,
presencia de FeCl3, que en este caso por 2008. pág. 83 -84
presentar rutina, produce una coloración
verde4 . 4. Kuklinski C. Farmacognosia, Estudio de
las drogas y sustancias medicamentosas
V. CONCLUSIONES de origen natural. Barcelona: Ediciones
Omega S.A; 2000. Pág. 106-108.
1. Las diferentes especies vegetales estudiadas,
en especial las drogas de estas, como: las hojas
de ruda, el albedo de la naranja, los bulbos de la
cebolla y la coronta del maíz morado; presentan
diferentes tipos de flavonoides, utilizados hoy
en las industrias con fines terapéuticos,
alimentarios, etc.

2. Mediante los métodos de extracción

(maceración) y las reacciones de identificación,
la naranja presenta el heterósido flavónico
hesperidoósido (genina: flavonona
hesperidina); la ruda presenta heterósido
flavónico rutinósido (genina: flavonol rutina);
la cebolla presenta heterósido flavónico
quercetinósido (genina: flavonol quercetina) y
el maíz morado presenta heterósido flavónico
antocianina (genina: antocianidina).

3. La muestra problema de flavonoides rutinas

(ruda), presenta una relación de flujo
aproximado, cercano a los estándares
empleados.