Ejercicios Adicionales TP 4 2019

TP 4: BIOENERGÉTICA Y CINÉTICA ENZIMÁTICA - EJERCITACIÓN ADICIONAL
1. a) Realice los gráficos correspondientes a nivel energético vs coordenada de

reacción para las reacciones:
i: L→M ii: Y→Z,
Para la confección de los mismos, tenga en cuenta que:
GºL = 4.8 Kcal/mol, GºM=2.1 Kcal/mol, GºY= 5.6 Kcal/mol, GºZ= 4.4 Kcal/mol
y que el estado activado para que se produzcan ambas reacciones se alcanza a una
energía de 7,0 Kcal/mol.
b) Calcule el ∆Gº y la Ea para ambas reacciones e indique ambos parámetros en el
gráfico.
c) ¿Que puede decir respcto a la espontaneidad de las reacciones en condiciones
estándar?
d) ¿Cuál de las reacciones ocurrirá a mayor velocidad?
e) Si se agrega un catalizador enzimático específico tanto para la reacción i como para
la ii, ¿Qué ocurrirá con el ∆Gº y con la Ea de cada reacción? Indíquelo en el gráfico.
f) Si se desea acoplar la reacción A→B cuyo ∆Gº= 2 Kcal/mol ¿cuál de las dos
reacciones anteriores sería la indicada para que tal reacción ocurra? Justifique.
2. La sacarosa puede ser clivada por dos mecanismos diferentes:
I. Sacarosa + H2O → glucosa + fructosa G ’ = - 7 kcal/mol

II. Sacarosa + Pi → glucosa -1-fosfato + fructosa
a) Estime el G’ de la reacción ii sabiendo que la reacción
glucosa -1-P + H2O → glucosa + Pi tiene un G’ = –5 Kcal/mol
b) Si el objetivo del clivaje fuera obtener fructosa, ¿Cuál de los dos procesos (i-
hidrólisis o ii-fosforólisis) es más ventajoso desde el punto de vista del ahorro
energético?
c) ¿Cuál de las dos reacciones cree Ud. que será más beneficiosa si fuera acoplada
a un proceso endergónico? ¿Necesita información adicional para tener el 100% de
certeza en su respuesta?
3. La Hidroxiacil-CoA deshidrogenasa es una enzima involucrada en uno de los

pasos de la β-oxidación, la oxidación del 3-hidroxiacil-coA a 3-cetoacil-coA.
Represente en forma general un gráfico de velocidad de reacción vs concentración

de L-3-Hidroxiacil-CoA, indicando Km y Vmáx:
¿Cómo se modificarán los parámetros mencionados anteriormente si
a) se aumenta la concentración de enzima?
b) si se agrega un inhibidor competitivo?
1
c) si se agrega un inhibidor no competitivo específico de la enzima? Justifique y
represéntelo gráficamente
4. La proteína “E” es una enzima obtenida de lisosomas de riñón de mono. La misma

está constituida por una cadena polipeptídica de 120 aminoácidos a la cual se
encuentra unido un decasacárido lineal constituido por restos alternantes de D-.
glucosa y D- galactosa unidos entre sí a través de un enlace O-glicosídico (1→4).
a) i- Clasifique a la proteína E según:
- forma: ……………………………. - composición: ……………….…………….……
ii- Esquematice la unión de D-glucosa y D-galactosa tal como se encuentran en el
oligosacárido.
iii- Respecto a su estructura secundaria indique: principal interacción que la estabiliza
y grupos entre los que se establece dicha interacción.
iv- Al desnaturalizar completamente la proteína E la misma pierde la/s estructura/s
(PRIMARIA / SECUNDARIA / TERCIARIA / CUATERNARIA). (Tache lo que no
corresponda).
b) En los lisosomas, esta enzima (E) cataliza la reacción A+ → B siendo su pH y T
óptimos igual a 5 y 37°C, respectivamente. La concentración de E en los lisosomas es
4 mM y, en las condiciones óptimas, los parámetros cinéticos que la caracterizan en
estas organelas son: Km = 0,1 µM y Vmáx = 200 mM/min.
Partiendo de una solución 2 mM de la proteína E, procede a realizar distintos
experimentos:
i- Toma alícuotas de 1 ml, las coloca en cuatro tubos (P, X, Y y Z) y ajusta la
temperatura y el pH de cada uno de ellos a los valores indicados en la tabla. Luego
adiciona la cantidad necesaria de sustrato A+ para alcanzar en cada tubo la
concentración referida en la tabla. Finalmente registra la velocidad inicial de
producción de B (Vo).
En la última fila, señale los valores de Vo que espera encontrar en las distintas
condiciones (enciérrelos con un círculo).
Tubo P X Y Z
T °C 37°C 5°C 37°C 97°C
pH 5 5 7 7
[A+] 0,1µM SATURANTE SATURANTE SATURANTE
Vo
(mM B/min) 50 / 100 / 200 30 / 100 / 200 40 / 100 / 200 20 / 40 / 100
- +
ii- Incuba en presencia de (X / Y / Z), un inhibidor competitivo de E1, observando que
el Km de esta enzima será (MAYOR / IGUAL / MENOR) a 0,1 M y su Vmáx será
(IGUAL/ MENOR/ MAYOR) a 100 mM/min. (Tache lo que no corresponda)
5. En el citosol de la mayoría de las células de rata, Z- es sintetizado a partir de V+ a

través de una vía metabólica constituida por 4 reacciones secuenciales. Los valores
correspondientes a Ea y G° de las reacciones no catalizadas se indican en la tabla:
V+ W X Y Z-
Ea (kJ/mol) 3 2 1 10
a)G° que la reacción-15
(kJ/mol)
Sabiendo un G° = 45+0,01
Z- → V+ tiene---------- kJ/mol ¿Cuál -30
es el G°W → X?
b) ¿Qué puede decir respecto a la espontaneidad de la reacción W → X?
c) ¿Cuál de las reacciones condiciona la velocidad de producción de Z - en la vía sin
catalizar?
d) ¿Cuáles de estas reacciones son reversibles en condiciones celulares?
2
e) ¿Cuál es el valor de Ea de la reacción Z- →Y?
f) Si la vía metabólica tiene lugar en condiciones estándar ¿qué sucederá con el
desorden del universo?
g) EH es la enzima que cataliza la primera reacción de esta vía (V + → W) en células
de hígado y los parámetros cinéticos que la caracterizan son: Km = 0,4 mM y Vmáx =
300 mM/min. En las siguientes afirmaciones, tache lo que no corresponda:
i- La reacción V+ → W catalizada por EH posee un G° de (-17 / -13 / -15 / 15) kJ/mol
y una Ea de (1 / 3 / 5) kJ/mol.
ii- (Asp / His / Val / Ser / Cys / Lys / Glu) son dos aminoácidos que esperaría encontrar
en la región del sitio activo de EH.
iii- La isoenzima renal (ER), que es menos efectiva que EH en la catálisis tanto a bajas
como a altas [V+], posee un Km (MAYOR / IGUAL / MENOR) y una Vmáx (MAYOR /
IGUAL / MENOR) que EH.
iv- EH es una proteína (GLOBULAR/ FIBROSA) donde encontramos (UN ÚNICO
TIPO / DIVERSOS TIPOS) de estructura secundaria que puede estar estabilizada por
(ENLACES PEPTÍDICOS / FUERZAS DE VAN DER WAALS / PUENTES DE
HIDRÓGENO / PUENTES DISULFURO / INTERACCIONES HIDROFÓBICAS).
h) El producto final de la vía (Z-) puede unirse a EH en un sitio distinto del sitio activo
disminuyendo la afinidad de esta enzima por su sustrato sin inactivarla. Indique:
- Nombre específico de la regulación ejercida por Z-: ………………………………
- ¿Qué valores de Km y Vmáx sería posible encontrar para EH en condiciones en las
cuales se acumula Z-? Rta: Km = (0,6 / 0,4 / 0,2) mM y Vmáx (250 / 300 / 350) mM/min.
(Tache lo que no corresponda).
6. La enzima E es una proteína plasmática constituida por una cadena polipeptídica

alfa de 120 aminoácidos y otra beta de 130 aminoácidos a la cual se encuentra unido
un oligosacárido ramificado constituido por 5 restos de D-glucosa unidas entre sí a
través de enlaces O-glicosídicos (1→2) presentando en las ramificaciones el mismo
tipo de enlace encontrado en las ramificaciones del glucógeno.
a) i- Clasifique a la proteína E según su forma y composición.
ii- Esquematice la/s unión/es encontrada/s en el oligosacárido.
b) En el torrente sanguíneo E cataliza la reacción A →B cuyos valores de G y de
estado activado para la transformación sin catalizar son: G A →B = -3 Kcal/mol;
Estado activado (A#)= 9 Kcal/mol.
Sabiendo que GB = 1 Kcal/mol y que el estado activado del complejo Enzima-Sustrato
(ER#) es de 5 Kcal/mol. Construya el gráfico de G versus coordenada de reacción y
señale en el mismo GA y Ea A →B e indique con línea de puntos cómo se modificará el
gráfico por la presencia de la enzima E.
c) En el plasma humano la [E] = 1mM y, cuando las condiciones son óptimas (pH: 7 y
37°C), los parámetros cinéticos que caracterizan a esta enzima son: Km = 5 µM y
Vmáx = 200 mM/min.
i- En las condiciones óptimas ¿Cuál será la velocidad de producción de B cuando: [A]
sea de 5 µM y la [E] sea 3mM?
ii- A 5°C, la Vmáx será (MENOR / IGUAL) que 200 mM/min porque al disminuir la
temperatura (LA ENZIMA SE DESNATURALIZA / NO SE DESNATURALIZA /
DISMINUYE LA ENERGÍA CINÉTICA DE LOS REACTIVOS / LA ENERGÍA DE
ACTIVACIÓN NO CAMBIA). (Tache lo que no corresponda).
iii- ¿Cuál de los siguientes valores corresponde al valor del Km de esta enzima en
presencia de un inhibidor competitivo? Rta: (0,1 µM / 5 µM / 0,1 mM) (Tache lo que no
corresponda).
3
7. En la figura de la derecha, hemos esquematizado una vía -
metabólica ramificada presente en citosol de hepatocitos de rata. A A
E1
través de esta vía, se generan dos productos finales diferentes: C y
D. Las enzimas E1, E2 y E3 son las encargadas de catalizar las B
E2 E3
reacciones de esta ruta como muestra el esquema.
C D
a) Sabiendo que:
- En condiciones basales E1 posee un Km = 0,01mM y una Vmáx =
200 mM/min
- La energía de activación (Ea) correspondiente a la reacción A -→B no catalizada es
3 Kcal/mol.
- E2 tiene mayor afinidad por B que E3 y la Vmáx de E3 es el doble de la alcanzada
con E2
- G°A-= 5 Kcal/mol; G°B = 6 Kcal/mol; G°C = 1 Kcal/mol; G°D = 2 Kcal/mol
- GA-= 7Kcal/mol; GB= 5Kcal/mol; GC= 2Kcal/mol; GD= 4Kcal/mol
i- Cuando se duplique la concentración de E1 en respuesta a estímulos externos los
valores de sus parámetros cinéticos serán: Km = (0,005 / 0,01 / 0,02) mM y Vmáx =
(100 / 200 / 400) mM/min. (Tache lo que no corresponda)
ii- En presencia de (X- / Y+ / Z), un inhibidor competitivo de E1, el Km de esta enzima
será (MAYOR / IGUAL / MENOR) a 0,01 mM y su Vmáx será (MAYOR / IGUAL /
MENOR) a 200 mM/min. (Tache lo que no corresponda)
iii- A bajas concentraciones de B, el producto final que se generará a mayor velocidad
será (C / D) y cuando las concentraciones de B sean altas será (C / D). (Tache lo que
no corresponda)
iv- La Keq para la reacción B → D es (MAYOR / IGUAL / MENOR) a 1. (Tache lo que
no corresponda)
v- En los hepatocitos de rata: la reacción A- → B es (ESPONTÁNEA / NO
ESPONTÁNEA) y la energía de activación de la reacción catalizada es (MAYOR /
IGUAL / MENOR) a 3 Kcal/mol (Tache lo que no corresponda)
vi En los hepatocitos de rata, la velocidad de la reacción B→A- será es (MAYOR /
IGUAL / MENOR) que la de A- → B dado que la Ea de B→A- será (MAYOR / IGUAL /
MENOR) a la Ea de A- → B. (Tache lo que no corresponda)
vii- Para la reacción global A-→C el ΔGA-→C es igual a ( -4 / -5 / +4 / +5 ) Kcal/mol.
(Tache lo que no corresponda)
b) La enzima E1 es una proteína (GLOBULAR / FIBROSA) que posee una única
cadena polipeptídica. Su estructura primaria se halla estabilizada por (ENLACES
PEPTÍDICOS / FUERZAS DE VAN DER WAALS / PUENTES DE HIDRÓGENO /
PUENTES DISULFURO / INTERACCIONES HIDROFÓBICAS), las 2 principales
fuerzas que estabilizan a su estructura secundaria son (ENLACES PEPTÍDICOS /
FUERZAS DE VAN DER WAALS / PUENTES DE HIDRÓGENO / PUENTES
DISULFURO / INTERACCIONES HIDROFÓBICAS) mientras que la estructura
terciaria puede estar estabilizada por (ENLACES PEPTÍDICOS / FUERZAS DE VAN
DER WAALS / PUENTES DE HIDRÓGENO / PUENTES DISULFURO /
INTERACCIONES HIDROFÓBICAS). (Tache lo que no corresponda)

Ejercicios Adicionales TP 4 2019

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Ejercicios Adicionales TP 4 2019

Cargado por

Información del documento

Descripción original:

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Ejercicios Adicionales TP 4 2019

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

TP 4: BIOENERGÉTICA Y CINÉTICA ENZIMÁTICA - EJERCITACIÓN ADICIONAL

1. a) Realice los gráficos correspondientes a nivel energético vs coordenada de

2. La sacarosa puede ser clivada por dos mecanismos diferentes:

I. Sacarosa + H2O → glucosa + fructosa G ’ = - 7 kcal/mol

a) Estime el G’ de la reacción ii sabiendo que la reacción

glucosa -1-P + H2O → glucosa + Pi tiene un G’ = –5 Kcal/mol

3. La Hidroxiacil-CoA deshidrogenasa es una enzima involucrada en uno de los

Represente en forma general un gráfico de velocidad de reacción vs concentración

4. La proteína “E” es una enzima obtenida de lisosomas de riñón de mono. La misma

5. En el citosol de la mayoría de las células de rata, Z- es sintetizado a partir de V+ a

6. La enzima E es una proteína plasmática constituida por una cadena polipeptídica

También podría gustarte