052
052
052
TEMA:
EVALUACIÓN NUTRICIONAL DE TEMPEH OBTENIDO POR
FERMENTACIÓN DE FRÉJOL (Phaseolus vulgaris L.) Y QUINUA
(Chenopodium quinoa) CON Rhizopus oligosporus.
AUTORES:
CATALINA FABARA M.
ANA PROAÑO G.
DIRECTOR:
Ing. CARLOS JÁCOME PILCO, Ph.D.
GUARANDA – ECUADOR
2011
INDICE DE CONTENIDOS
DENOMINACIÓN Pág.
I INTRODUCCIÓN 1
Objetivos 2
II REVISIÓN DE LITERATURA 3
3.1. MATERIALES 24
3.1.1. UBICACIÓN DEL EXPERIMENTO 24
3.1.2. LOCALIZACION DEL EXPERIMENTO 24
3.1.3. SITUACIÓN GEOGRÁFICA Y CLIMÁTICA 24
3.1.4. MATERIAL EXPERIMENTAL 25
3.1.5. MATERIAL DE CAMPO 25
3.1.6. EQUIPOS DE LABORATORIO 25
3.1.7. MATERIALES DE LABORATORIO 25
3.1.8. MATERIALES DE OFICINA 26
3.1.9. RECURSOS INSTITUCIONALES 26
3.2. MÉTODOS 27
3.2.1. FACTOR EN ESTUDIO 27
3.2.2. TRATAMIENTOS 27
3.2.3. TIPO DE DISEÑO EXPERIMENTAL 28
3.2.4. CARACTERÍSTICAS DEL EXPERIMENTO 28
3.2.5. ANÁLISIS ESTADÍSTICO Y FUNCIONAL 29
3.2.6. MÉTODOS DE EVALUACION Y DATOS A 29
EVALUARSE
3.2.6.1. MATERIA PRIMA 29
3.2.6.2. PRODUCTO FINAL 30
3.3. MANEJO DEL EXPERIMENTO 30
3.3.1. OBTENCIÓN DEL TEMPEH POR FERMENTACION 30
3.3.2. DIAGRAMA DE FLUJO 33
IV RESULTADOS EXPERIMENTALES Y 34
DISCUSIONES
V. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES 73
5.1. CONCLUSIONES 73
5.2. RECOMENDACIONES 76
6.1. RESUMEN 77
6.2. SUMMARY 78
VII BIBLIOGRAFÍA 79
ANEXOS
CAPITULO I
I. INTRODUCCIÓN
1
dieta de la población. La utilización de procesos de fermentación modifican de
una manera positiva tanto el contenido nutricional como la textura y sabor, por lo
que se utilizó como sustrato mezclas de frejol INIAP 426 y quinua INIAP
TUNKAHUAN en diferentes proporciones y como inóculo de fermentación el
hongo Rhizopus oligosporus en diferentes concentraciones, se estudió cómo se
ven mejoradas las características anteriormente descritas, evaluando
principalmente el contenido proteico y el perfil de aminoácidos, y así se obtuvo
un producto alternativo de elevada calidad nutricional.
2
II. REVISIÓN DE LITERATURA
Los principales aspectos del tempeh, son: su atractivo sabor y textura, ciertas
propiedades nutricionales y el tiempo de cocción reducido en comparación con las
materias primas utilizadas. Shurtleff y Aoyagi, (2001). Cualquier cereal, así como
residuos de los mismos, pueden utilizarse como un sustrato que proporcione
soporte para crecimiento de Rhizopus spp. En un proceso de fermentación y así
obtener un producto apto para el consumo humano. Recientemente, también se ha
producido harina de tempeh por secado y molienda del tempeh. Cuevas-
Rodríguez et al. (2004); Reyes-Moreno et al. (2004), con características
nutricionales mejoradas. Estas características de producción del tempeh han sido
ampliamente revisadas por muchos autores. Nout y Rombouts (1990);
Hachmeister y Fung (1993); Astuti et al. (2000); Nout y Kiers (2005).
3
(2001) o Douchi Li-Te et al. (2004). El Douchi está hecho de frijoles negros o
amarillos fermentados por Mucor spp., Aspergillus spp. o Rhizopus oligosporus.
Douchi (producto chino), natto (producto japonés, fréjol de soja fermentadas con
Bacillus subtilis) y tempeh (producto de Indonesia, fréjol de soja fermentadas con
R. oligosporus) podrían tener el mismo origen. Astuti et al. (2000); Li-Te et al.
(2003). En varios lugares de China las personas todavía hacen un producto como
tempeh, llamado 'Mei Dou Za', de los residuos de tofu por fermentación
espontánea durante tres días, obteniéndose un pastel con micelio blanco, similar
al okara tempeh (un residuo insoluble de la fabricación de tofu o leche de soja).
Matsuo (1990); O' Toole (1999).
2.1.2. AMINOACIDOS
4
2.1.2.1. ANIMOACIDOS ESENCIALES
2.1.2.1.1. Histidina
2.1.2.1.2. Isoleucina
2.1.2.1.3. Leucina
5
2.1.2.1.4. Lisina
2.1.2.1.5. Metionina
2.1.2.1.6. Fenilalanina
6
2.1.2.1.7. Treonina
2.1.2.1.8. Triptofano
2.1.2.1.9. Valina
2.1.2.1.10. Alanina
7
necesidades de energía, como lo que sucede con el ejercicio aeróbico, fortalece el
sistema inmunológico mediante la producción de anticuerpos. Méndez (2008).
2.1.2.2.1. Arginina
Este aminoácido está considerado como "El Viagra Natural" por el aumento del
flujo sanguíneo hacia el pene, retrasa el crecimiento de los tumores y el cáncer
mediante el refuerzo del sistema inmunológico, aumenta el tamaño y la actividad
de la glándula del timo, que fabrica las células T, componentes cruciales del
sistema inmunológico. La Arginina, ayuda en la desintoxicación del hígado
neutralizando el amoniaco, reduce los efectos de toxicidad crónica de alcohol, que
se utiliza en el tratamiento de la esterilidad en los hombres, ayuda en la pérdida
de peso, ayuda a la liberación de hormonas de crecimiento, que es crucial para el
"crecimiento óptimo" músculo y la reparación de tejidos, es un componente
importante del colágeno que es bueno para la artritis y trastornos del tejido
conectivo. Méndez (2008).
8
2.1.2.2.3. Cisteína
2.1.2.2.5. Glutamina
9
2.1.2.2.6. Glicina
2.1.2.2.7. Prolina
2.1.2.2.8. Serina
2.1.2.2.9. Tirosina
10
piel) y en las funciones de las glándulas suprarrenales, tiroides y la pituitaria, se
ha utilizado para ayudar a la fatiga crónica, la narcolepsia, ansiedad, depresión, el
bajo impulso sexual, alergias y dolores de cabeza. Méndez (2008).
11
Cuadro 2. Composición Química de los tempeh de Soya 100:0, Soja/Quinchoncho
y Soja/Frijol.
Tipos de Cenizas Proteinas Grasa Azúcares reductores
tempes % b.h % b.h % b.h % b.h
Soya 100:0 1,43 18,88 7,91 0,18
S/Q 90:10 1,39 17,22 6,18 0,61
S/Q 70:30 1,26 15,62 5,69 0,86
S/Q 50:50 1,03 14,47 4,56 1,21
S/F 90:10 1,32 16,62 6,93 0,39
S/F 70:30 1,18 15,66 5,56 0,48
S/F 50:50 1,07 14,02 4,41 0,91
b.h.: base humeda
Fuente: Guerra de Agreda (2000).
12
mismas. El tempeh es un alimento bajo en grasa, además de ser un alimento libre
de colesterol por ser de origen vegetal, lo mismo que el aceite utilizado durante el
proceso de freído. La humedad se incrementó durante el proceso ya que al
someter al fríjol a un remojo, este se hidrato, otro factor importante fue la
inoculación mediante la cual se adiciono cierta cantidad de agua. El contenido de
cenizas disminuyó durante la fermentación ya que el microorganismo utiliza parte
de estas en su metabolismo. Los hidratos de carbono solubles dentro de los cuales
se encuentra glucosa y sacarosa, fueron disminuidos mediante el proceso de
fermentación ya que estos azucares fueron utilizados como la principal fuente de
energía para el hongo. La acidez en el alimento es resultado de la adición y
producción de ácido láctico durante la fermentación, el cual tiene la función de
preservación en el alimento. Cabe mencionar que el valor del pH junto con el alto
contenido de humedad determina que este producto sea un alimento altamente
perecedero. Finalmente la soya fermentada (tempeh) proporciona 220.12 Kcal.
por cada 100g. Munguia et al. (2007).
13
La mejor leguminosa para elaborar este producto es la soya, pero también puede
mezclarse con otras leguminosas o granos de cereales. La técnica de la
preparación es sencilla y se basa en la fermentación sobre un sustrato sólido. La
incorporación de otras leguminosas tales como caraota (Phaseolus vulgaris),
garbanzo (Cicer arietnum), lupino (Lupino albus), haba (Vicia faba), se ha venido
haciendo para mejorar su contenido proteico. Guerra de Agreda (2000); Mugula
(1992); Shurtleff y Aoyagi (2001).
En el cuadro 5 se muestra los sustratos más utilizados para elaborar productos tipo
tempeh.
2.2. EL FRÉJOL
14
Cuadro 5. Sustratos más comúnmente utilizados para elaborar tempeh.
Materia Prima Nombre Indonesia Referencias
Soya Tempe kedele (Nout et al., 1987c; Varzakas, 1998)
(Glycine max) (kedelai)
Frejol negro (Jha y Verma, 1980)
(Phaseolus mungo)
Haba (David y Jitendra, 1981; Ashenafi &
(Vicia faba) Busse, 1991e; Shurtleff y Aoyagi, 2001)
Garbanzo (Ashenafi y Busse, 1991e; Paredes et
(Cicer arietinum) al., 1991; Reyes-Moreno et al., 2004)
Frejol común (Paredes-Lopez et al., 1990; Kalavi et
(Phaseolus vulgaris) al., 1996; Rodríguez et al., 1998)
Chicharo salvaje (Kiers et al., 2000)
(Vigna unguiculata)
Horse (wild) tamarind T. lamtoro (Ko Swan y Hesseltine, 1979)
(Leucaena ensiformis)
Frejol de chancho T. koro pedang (Shurtleff y Aoyagi, 2001)
(Canavalia ensiformis)
Frejol de Egipto, poroto (Shurtleff y Aoyagi, 2001)
(Lablab purpureus)
Judia de Lima T. koro (Ko Swan y Hesseltine, 1979)
(Phaseolus lunatus)
Frijol verde o frijol chino (Shurtleff y Aoyagi, 2001)
(Vigna radiata)
Guandul T. gude (Nout y Rombouts, 1990)
(Cajanus cajan)
Sesban bean (Nout y Rombouts, 1990)
(Sesbania grandiflora)
chocho (Chango et al., 1993; Fudiyansyah et
(Lupinus albus) al., 1995)
Frejol de terciopelo T. benguk (Ko Swan y Hesseltine, 1979)
(Mucuna pruriens)
Winged bean T. kecipir (Homma et al., 1983)
(Psophocarpus
tetragonolobus)
Alverja T. kecipir (Nout y Rombouts, 1990)
(Pisum sativum)
Frejol de arroz (Amadi et al., 1999)
(Vigna subterranea)
Frejol africano (Njoku et al., 1991)
(Sphenostylis stenocarpa Hams)
Fuente: Tesis de Doctorado Microbial dynamics during barley tempeh fermentation, Xin-Mei
Feng. (2006).
15
La fibra cruda, que se encuentra principalmente en la testa es de 3.5 a 4.7 %; los
materiales con mayor porcentaje de testa fueron los de más alto contenido de fibra
cruda (r=0.71**) siendo mayor el porcentaje que representa la testa en los
materiales de menor tamaño (r= -0.80**). Las cenizas que representan los
minerales presentes en la semilla estuvieron en concentraciones de 3.8 a 4.6 %. Se
encontró que los materiales con menor contenido de cenizas mostraron mayor
porcentaje de digestibilidad de la proteína una vez que se coció el fréjol (r = 7-
0.55*). Hernández et al. (1993).
16
Cuadro 7. Estadísticas básicas de características de calidad evaluadas en 49
genotipos de fréjol común (Phaseolus vulgaris L.) y uno de P. coccineus, variedad
Blanco Tlaxacala.
2.3. LA QUINUA
17
• La quinua no tiene colesterol
• No forma grasas en el organismo
• No engorda, es de fácil digestibilidad
• Contenido de saponina 0.08%
• Es un producto natural ecológico
18
La quinua tiene un excepcional valor nutritivo, con proteínas de alto valor
biológico y excelente balance de aminoácidos esenciales, ubicados en el
endospermo o núcleo del grano, a diferencia de otros cereales que los tienen en el
exosperma o cáscara, como el arroz o trigo. ONG (2009).
19
2.4. SISTEMA DE FERMENTACIÓN
20
requerimientos de agua son muy bajos y el producto se puede secar más para
estabilizarlo. Aunque se produce contaminación esta es propia de los laboratorios,
es limitada su extensión y fácilmente detectable. Armienta et al. (2001).
Esporas asexuales, los mohos producen gran cantidad de esporas asexuales, las
cuales son de pequeño tamaño, ligeras y resistentes a la desecación, se diseminan
fácilmente por la atmósfera para sedimentar y originar el talo de un nuevo moho
en lugares en los que encuentran condiciones favorables, en caso del Rhizopus las
esporas asexuales son las esporangiosporas, las cuales se encuentran dentro de un
esporangio, o receptáculo, situado en el extremo de una hifa fértil, el
esporangióforo. Frazier et al. (2002).
21
Esporas sexuales, los Zygomycetes forman sus zigosporas mediante la fusión de
los extremos de dos hifas, que suelen tener aspecto parecido, y que pueden
pertenecer al mismo micelio o a distintos micelios. Las zigosporas están
recubiertas por una membrana resistente, siendo esta la razón de que sean capaces
de sobrevivir por mucho tiempo. Frazier et al. (2002).
Mediante un gráfico de variación del área del grano de soya en el tiempo, fue
posible identificar una etapa estacionaria de crecimiento muy larga,
aproximadamente hasta las 40 horas de desarrollo. Por observaciones previas se
cree que en esta etapa es posible que solo exista una invasión superficial del
micelio en el grano y que cuando el micelio ya es perceptible como una masa
algodonosa, es porque el micelio ha comenzado una fase aérea. Así mismo se
observa una etapa exponencial muy corta de las 40 a las 50 horas de desarrollo
para posterior a las 50 horas, encontrar descrita una fase estacionaria en el
incremento del área, la cual suponemos se debe a que la estructura micelial se ve
limitada en el plano aéreo, debido a los materiales de soporte que posee su
estructura. Camacho et al. (2002).
22
2.6. FUNDAMENTO DE LA PROPUESTA
El presente proyecto de tesis tuvo como objetivo principal evaluar las propiedades
nutricionales de tempeh obtenido por fermentación de fréjol (Phaseolus vulgaris
L.) y quinua (Chenopodium quinoa) con Rhizopus oligosporus.
23
III. MATERIALES Y MÉTODOS
3.1. MATERIALES
Provincia: Bolívar
Cantón: Guaranda
Parroquia: Guanujo
Sector: Laguacoto II
Temperatura máxima 18 ºC
Temperatura mínima 8 ºC
Humedad 75%
24
3.1.4. MATERIAL EXPERIMENTAL
Libreta de apuntes
Cámara Fotográfica Digital
Cámara de Incubación
Autoclave
Estufa
Balanza analítica
pH metro
Molino
HPLC (Cromatografía Líquida de Alta Definición)
Determinador de Proteínas
Determinador de fibra.
Fundas plásticas
Vasos de precipitación
Erlenmeyers
Cajas petri
Espátulas
Recipientes plásticos
25
3.1.8. MATERIALES DE OFICINA
Calculadora
Computadora
Impresora
Papel de impresión
Libretas
Esferos
Escritorio
Sillas
26
3.2. MÉTODOS
3.2.2. TRATAMIENTOS
27
3.2.3. TIPO DE DISEÑO EXPERIMENTAL
yijk
Es el valor de la variable respuesta en la repetición k del nivel i-ésimo de A
y el nivel j-ésimo de B
µ promedio general si no se hubiese aplicado ningún tratamiento,
Bj
Es el efecto del j-ésimo nivel del factor B
AB ij
Es el efecto de la interacción del i-ésimo nivel del factor A y el j-ésimo
nivel
εijk
: es el error experimental en la repetición k del nivel i-ésimo de A y el nivel
j-ésimo de B
3.2.4. CARACTERÍSTICAS DEL EXPERIMENTO
DETALLE
Factores 2
Niveles 3x2
Repeticiones 3
Tratamientos 6
Unidades experimentales 18
Tamaño unidad experimental 200gr
28
3.2.5. ANALISIS ESTADÍSTICO Y FUNCIONAL
Error SCE
SCE ab(r -1) CME =
Experimental t(r − 1)
a) Nitrógeno proteico.
29
aplicando el método Kjeldahl.
b) Fibra.
a) Nitrógeno proteico.
b) Fibra.
c) Perfil de aminoácidos.
30
b) Limpieza de los granos, las impurezas fueron eliminadas por medio de
cernidores y zarandas manuales.
c) Análisis de la materia prima, los resultados de los análisis bromatológicos
proteína y fibra fueron determinados por el INIAP.
d) Molido, se realizó la molienda del fréjol en un molino de tipo manual
previamente esterilizado, con el fin de obtener una masa uniforme para
facilidad de fermentación.
e) Mezclado de fréjol- quinua, una vez realizada la molienda se procedió a la
mezcla de los granos con una paleta esterilizada hasta obtener una mezcla
uniforme.
f) Inoculación, una vez que se enfrío la mezcla se añadió el iniciador (harina
estabilizada) en cantidad del 1% y 3% de masa cocida.
g) Mezclado, se mezcló uniformemente con una paleta con el fin de expandir
adecuadamente el hongo.
h) Empacado, la mezcla homogénea fue colocada en fundas de polietileno
con poliéster, previamente agujerados con un peso final de 200 gr.
i) Incubación, se incubó a una temperatura de 35º C por 24 horas hasta 48
horas como máximo de fermentación.
j) Congelación, las muestras fueron colocadas a -4 ºC con el fin de controlar
la fermentación evitando así elevar el grado de toxicidad como lo indica
Guerra de Agreda, congelar los tempes en bolsitas tipo click hasta su
consumo.
k) Almacenamiento
l) Consumo
Las temperaturas bajas se usan para retardar las reacciones químicas y la acción
de las enzimas y retrasar o inhibir el crecimiento y actividad de los
microorganismos que se encuentran en los alimentos, una temperatura
suficientemente baja inhibirá el crecimiento de todos los microorganismos.
31
La conservación que consiguen ambos procedimientos se basa en el hecho de que
las temperaturas bajas detienen, de forma más o menos acentuada, los procesos
enzimáticos la proliferación bacteriana.
32
3.3.2. DIAGRAMA DE FLUJO
RECEPCIÓN
LIMPIEZA
ANÁLISIS
MOLIDO
MEZCLADO
EMPACADO
35 ºC x 24H INCUBACION
CONGELADO
ALMACENADO
CONSUMO
33
IV RESULTADOS EXPERIMENTALES Y DISCUSIONES
34
mejores, seguido por los tratamientos que contienen un bajo porcentaje de
proteína, como se puede apreciar en el cuadro 15.
% Proteina 30
20
Series1
10
Tratamientos
INIAP (2004), señala que el fréjol (Phaseolus vulgaris L.) variedad INIAP 426
Canario posee un porcentaje de proteína de 24% y la Quinua (Chenopodium
quinoa) variedad INIAP-Tunkahuan contiene un porcentaje de proteína de 16%,
condición que guarda relación con los resultados obtenidos donde a medida que se
disminuye el porcentaje de fréjol en la mezcla se reduce el porcentaje de proteína,
además cabe mencionar que el porcentaje de proteína del producto es mayor que
el porcentaje de proteína en el grano de fréjol.
35
4.2. DETERMINACION DE FIBRA
36
Como podemos observar en el cuadro 17 los mayores porcentajes de fibra se
encuentra en los tratamientos a0b1 con 6,85% y a0b0 con 6,35% que corresponde
al mejor, seguido por los tratamientos que contienen un bajo porcentaje de fibra
como se puede apreciar en el cuadro 17.
La fibra controla el peso, puesto que no tiene calorías y hace que uno se sienta
satisfecho, el consumo adecuado de fibra ayuda a evitar padecimientos como la
diabetes, la obesidad, la diverticulosis, la constipación e incluso el cáncer de
colon. Ayala et al. (1998).
6
% Fibra
4 Series1
2
Tratamientos
INIAP (2004), Manifiesta que el fréjol (Phaseolus vulgaris L.) variedad INIAP
426 Canario posee un porcentaje de fibra 6,15% y la Quinua (Chenopodium
quinoa) variedad INIAP-Tunkahuan contiene un porcentaje de fibra 4,10%,
reporte que corresponde a la mezcla final donde a medida que se aumenta la
cantidad de frejol se incrementa el porcentaje de fibra.
37
MUNGUIA et al. (2007), enuncia que el fréjol de soya posee 5% de fibra y el
tempeh preparado de soya 7,7%, situación que se relaciona con los resultados
alcanzados donde el tempeh de fréjol- quinua presenta 6,85% un porcentaje mayor
de fibra al de la materia prima.
SHURTLEFF et al. (2000), muestra que el tempeh de soya fresco tiene 1,4% de
fibra, el tempeh de soya seco 3,1% y el producto obtenido en esta investigación
reporta un promedio de 6,00% fibra exponiendo así que el tempeh logrado de la
fermentación de fréjol y quinua tiene gran valor nutricional
4.3.1. TRIPTÓFANO
Cuadro 18. Análisis de Varianza del Triptófano en el Tempeh.
FV SC Gl. CM F cal F T 0.05 F T 0.01
Total 1,56345 17
Tratamiento 1,55945 5 0,3119 2,31 NS 3,11 5,06
Factor A 1,55843 2 0,77922 2337,65** 3,89 6,93
Factor B 0,00014 1 0,00014 0,42 NS 4,75 9,33
Interacción A x B 0,00088 2 0,00044 1,30 NS 3,89 6,93
Error Experimental 0,00400 12 0,00033
̅X 1,20
CV 1,53
38
Cuadro 19. Pruebas de Rangos de Tukey de Triptófano en el Tempeh.
TRIPTÓFANO MEDIA % RANGO
a0b1 1,61 A
a0b0 1,60 A
a1b1 1,04 B
a1b0 1,02 B
a2b0 0,95 C
a2b1 0,94 C
ELABORADO: FABARA, C.; PROAÑO, A.
2
% Triptofano
1,5
0,5
0
a0b0 a0b1 a1b0 a1b1 a2b0 a2b1
Tratamientos
39
En el gráfico 3, se reporta el porcentaje de Triptófano en el tempeh versus
tratamientos, en donde se advierte que conforme se incrementa los niveles de
quinua en la mezcla, se experimenta mayores porcentajes de Triptófano.
40
Cuadro 21. Pruebas de Rangos de Tukey para Ácido Aspártico en el
Tempeh.
5
% Acido Aspártico
0
a0b0 a0b1 a1b0 a1b1 a2b0 a2b1
Tratamientos
41
En el gráfico 4, se reporta el porcentaje de ácido aspártico en el tempeh versus
tratamientos, en donde se advierte que conforme se incrementa los niveles de
quinua en la mezcla se experimenta mayores porcentajes de ácido aspártico.
4.3.3. TREONINA
42
Cuadro 23. Rangos de Tukey para Treonina en el Tempeh.
TREONINA MEDIA % RANGO
a2b0 1,15 A
a2b1 1,14 A
a1b1 1,05 B
a0b1 1,04 B
a0b0 1,03 C
a1b0 1,03 C
ELABORADO: FABARA, C.; PROAÑO, A.
1,15
1,1
% Treonina
1,05
0,95
a0b0 a0b1 a1b0 a1b1 a2b0 a2b1
Tratamientos
43
En el gráfico 5, se reporta el porcentaje de treonina en el tempeh versus
tratamientos, en donde se advierte que conforme se incrementa los niveles de
quinua en la mezcla se experimenta mayores porcentajes de treonina
4.3.4. SERINA
̅X 1,35
CV 1,37
44
Cuadro 25. Pruebas de Rangos de Tukey para Serina en el Tempeh.
SERINA MEDIA % RANGO
a2b0 1,42 A
a2b1 1,40 A
a1b1 1,35 B
a0b1 1,32 B
a1b0 1,32 C
a0b0 1,31 C
ELABORADO: FABARA, C.; PROAÑO, A.
1,45
1,4
% Serina
1,35
1,3
1,25
a0b0 a0b1 a1b0 a1b1 a2b0 a2b1
Tratamientos
45
En el gráfico 6, se reporta el porcentaje de serina en el tempeh versus
tratamientos, en donde se advierte que conforme se incrementa los niveles de
quinua en la mezcla se experimenta mayores porcentajes de serina.
46
Cuadro 27. Pruebas de Rangos de Tukey para Acido Glutámico en el
Tempeh.
a2b0 4,48 A
a2b1 4,41 A
a1b1 3,99 B
a1b0 3,91 B
a0b1 3,90 C
a0b0 3,87 C
ELABORADO: FABARA, C.; PROAÑO, A.
47
En el gráfico 7, se reporta el porcentaje de ácido glutámico en el tempeh versus
tratamientos, en donde se advierte que conforme se incrementa los niveles de
quinua en la mezcla se experimenta mayores porcentajes de ácido glutámico.
De acuerdo con BLANCO DE ARAYA (2009), el porcentaje de Acido Glutámico
en la carne de vacuno es de 3,02%, al comparar los resultados obtenidos con datos
bibliográficos se establece que nuestro producto contiene mayor cantidad de este
aminoácido ya que los mejores tratamientos son a2b0 con 4,48% y a2b1 con 4,41%
de ácido glutámico en el tempeh.
4.3.6. PROLINA
48
Cuadro 29. Pruebas de Rangos de Tukey para Prolina en el Tempeh.
PROLINA MEDIA % RANGO
a2b0 1,12 A
a2b1 1,11 A
a1b1 0,92 B
a0b1 0,89 B
a0b0 0,88 C
a1b0 0,77 C
ELABORADO: FABARA, C.; PROAÑO, A.
MÉNDEZ, (2008), menciona que las funciones de este aminoácido son mejorar la
textura de la piel, ayudando a la producción de colágeno y reducir la pérdida de
colágeno a través del proceso de envejecimiento.
49
De acuerdo con BLANCO DE ARAYA (2009), el porcentaje de prolina en la
carne de vacuno es de 0,89%, al comparar los resultados obtenidos con datos
bibliográficos se establece que nuestro producto contiene mayor cantidad de este
aminoácido ya que los mejores tratamientos son a2b0 con un valor de 1.12% y
a2b1 con un valor de 1,11% de prolina en el tempeh.
4.3.7. GLICINA
50
Cuadro 31. Pruebas de Rangos de Tukey para Glicina en el Tempeh.
GLICINA MEDIA % RANGO
a2b0 1,55 A
a2b1 1,53 A
a1b1 1,33 B
a1b0 1,30 B
a0b1 1,18 C
a0b0 1,17 C
ELABORADO: FABARA, C.; PROAÑO, A.
51
De acuerdo con BLANCO DE ARAYA (2009), el porcentaje de Glicina en la
carne de vacuno es de 1,14%, al comparar los resultados obtenidos con datos
bibliográficos se establece que nuestro producto contiene mayor cantidad de este
aminoácido ya que los mejores tratamientos son a2b0 con un valor de 1,55% y
a2b1 con un valor de 1,53% de glicina en el tempeh.
4.3.8. ALANINA
52
Cuadro 33. Pruebas de Rangos de Tukey para Alanina en el Tempeh.
a2b0 1,94 A
a2b1 1,92 A
a0b1 1,80 B
a0b0 1,78 B
a1b1 1,63 C
a1b0 1,60 C
ELABORADO: FABARA, C.; PROAÑO, A.
53
De acuerdo con BLANCO DE ARAYA (2009), el porcentaje de Alanina en la
carne de vacuno es de 1,22%, al comparar los resultados obtenidos con datos
bibliográficos se establece que nuestro producto contiene mayor cantidad de este
aminoácido ya que los mejores tratamientos son a2b0 con un valor de 1,94% y
a2b1 con un valor de 1,92% de alanina en el tempeh.
4.3.9. VALINA
54
Cuadro 35. Pruebas de Rangos de Tukey para Valina en el Tempeh.
VALINA MEDIA % RANGO
a2b0 1,68 A
a2b1 1,66 A
a0b1 1,58 B
a0b0 1,56 B
a1b1 1,54 C
a1b0 1,51 C
ELABORADO: FABARA, C.; PROAÑO, A.
55
De acuerdo con BLANCO DE ARAYA (2009), el porcentaje de Valina en la
carne de vacuno es de 1,01%, al comparar los resultados obtenidos con datos
bibliográficos se establece que nuestro producto contiene mayor cantidad de este
aminoácido ya que los mejores tratamientos son a2b0 con un valor de 1,68% y
a2b1 con un valor de 1,66% de valina en el tempeh.
4.3.10. METIONINA
56
Cuadro 37. Pruebas de Rangos de Tukey para Metionina en el Tempeh.
METIONINA MEDIA % RANGO
a2b0 0,37 A
a2b1 0,37 A
a1b1 0,32 B
a1b0 0,31 B
a0b0 0,25 C
a0b1 0,25 C
ELABORADO: FABARA, C.; PROAÑO, A.
57
De acuerdo con BLANCO DE ARAYA (2009), el porcentaje de Metionina en la
carne de vacuno es de 0,46%, al comparar los resultados obtenidos con datos
bibliográficos se establece que nuestro producto contiene bajo porcentaje de este
aminoácido ya que los mejores tratamientos son a2b0 y a2b1 con un valor de
0,37% en el tempeh.
4.3.11. ISOLEUCINA
58
Cuadro 39. Pruebas de Rangos de Tukey para Isoleucina en el Tempeh.
a2b0 1,39 A
a2b1 1,37 A
a1b1 1,31 B
a0b1 1,30 B
a0b0 1,29 C
a1b0 1,28 C
ELABORADO: FABARA, C.; PROAÑO, A.
59
tempeh a partir de estas materias primas eleva su porcentaje, al presentar como
mejores tratamientos a2b0 con un valor de 1,39% y a2b1 con un valor de 1,37% de
isoleucina.
4.3.12. LEUCINA
60
Como podemos observar el mayor porcentaje de, Leucina se encuentra en los
tratamientos a2b0 con un valor de 2,37% y a2b1 con un valor de 2,33% que
corresponde al mejor, seguido por los tratamientos que contienen un bajo
porcentaje de Leucina, como se puede apreciar en el cuadro 41.
MÉNDEZ, (2008), indica que este aminoácido reduce los niveles de azúcar en la
sangre y ayuda a aumentar la producción de la hormona del crecimiento
61
4.3.13. TIROSINA
62
corresponden a los mejores, seguido por los tratamientos que contienen un bajo
porcentaje de Tirosina, como se puede apreciar en el cuadro 43.
63
4.3.14. FENILALANINA
a2b0 1,91 A
a2b1 1,89 A
a0b1 1,75 B
a1b1 1,75 B
a0b0 1,73 C
a1b0 1,71 C
ELABORADO: FABARA, C.; PROAÑO, A.
64
Como podemos observar el mayor porcentaje de Fenilalanina, se encuentra en el
tratamiento a2b0 con un valor de 1,91% y a2b1 con un valor de 1,89% que
corresponden a los mejores, seguido por los tratamientos que contienen un bajo
porcentaje de Fenilalanina, como se puede apreciar en el cuadro 45.
65
4.3.15. HISTIDINA
66
corresponden a los mejores, seguido por los tratamientos que contienen un bajo
porcentaje de Histidina, como se puede apreciar en el cuadro 47.
67
4.3.16. LISINA
68
Como podemos observar el mayor porcentaje de, Lisina se encuentra en el
tratamiento a2b0 con un valor de 1,52% y a2b1 con un valor de 1,50% que
corresponden a los mejores, seguido por los tratamientos que contienen un bajo
porcentaje de Lisina, como se puede apreciar en el cuadro 49.
Según MÉNDEZ, (2008), funciones de este aminoácido son garantizar la
absorción adecuada de calcio y mantener un equilibrio adecuado de nitrógeno en
los adultos.
4.3.17. ARGININA
69
Cuadro 50. Análisis de Varianza de la Arginina en el Tempeh.
FV SC Gl. CM F cal F T 0.05 F T 0.01
Total 0,53843 17
Tratamiento 0,53582 5
0,1072 0,79 NS 3,11 5,06
Factor A 0,53451 2 0,26726 1231,03** 3,89 6,93
Factor B 0,00010 1 0,00010 0,46 NS 4,75 9,33
Interacción A x B 0,00121 2 0,00061 2,80 NS 3,89 6,93
Error Experimental 0,00261 12 0,00022
̅X 1,03
CV 1,43
a1b1 1,23 A
a1b0 1,21 A
a2b0 1,07 B
a2b1 1,06 B
a0b1 0,81 C
a0b0 0,80 C
ELABORADO: FABARA, C.; PROAÑO, A.
70
corresponden a los mejores, seguido por los tratamientos que contienen un bajo
porcentaje de Arginina, como se puede apreciar en el cuadro 51.
71
0,44%; ácido Glutámico 1,43%; prolina 0,37%; glicina 0,62%; alanina 0,56%;
valina 0,54%; metionina 0,24%; isoleucina 0,43%; leucina 0,72%; tirosina 0,34%;
fenilalanina 0,49%; lisina 0,67%; histidina 0,29%; arginina 0,84%.
Al comparar los resultados obtenidos con datos bibliográficos, se obtiene que para
el triptófano el mejor tratamiento corresponde a la mezcla 80% fréjol – 20%
quinua ya que el triptófano es predominante en el fréjol, los aminoácidos acido
aspártico y arginina presentan los valores más altos en las mezclas 60% fréjol y
40% quinua por encontrarse en porcentajes elevados tanto en el frejol como en la
quinua, los aminoácidos treonina, serina, ácido glutámico, prolina, glicina,
alanina, valina, metionina, isoleucina, leucina, tirosina, fenilalanina, histidina,
lisina se encuentran en mayor porcentaje en la mezcla 40% fréjol – 60% quinua,
ya que la quinua posee un adecuado porcentaje de los aminoácidos esenciales.
72
V. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
5.1. CONCLUSIONES
73
• En la tipificación de Treonina, se registraron diferencias altamente
significativas (p <0.01) entre las medias de los tratamientos, obteniendo
mayores porcentajes de este aminoácido en los tratamientos a2b0 y a2b1
con 1,15% y 1,14% correspondientemente.
74
los mejores resultados con 40% frejol y 60% quinua al 1% y 3% de
Rhizopus oligosporus con 0,37% para los dos tratamientos.
75
• En la identificación arginina, se determinaron diferencias altamente
significativas (p <0.01) entre las medias de los tratamientos, alcanzando los
más altos porcentajes en los tratamientos a1b1 con 1,23% y a1b0 con
1,21%.
5.2. RECOMENDACIONES.
• Investigar los productos alternativos con alto nivel proteico que se pueden
elaborar a base de tempeh.
76
VI. RESUMEN Y SUMMARY
6.1. RESUMEN
El presente trabajo de investigación procura aportar a nivel científico datos reales
de un producto de elevado valor nutricional dirigido a reemplazar el alto consumo
de carnes rojas en el Ecuador. El cual se realizó en el laboratorio de biología
molecular y biotecnología de la Facultad de Ciencias Agropecuarias, Recursos
Naturales y del Ambiente, de la Universidad Estatal de Bolívar. Ubicado en la
provincia de Bolívar, cantón: Guaranda, parroquia: Guanujo, sector: Laguacoto.
El objetivo general fue evaluar las propiedades nutricionales de Tempeh obtenido
por fermentación de fréjol (Phaseolus vulgaris l.) y quinua (Chenopodium
quinoa) con Rhizopus oligosporus. Y como objetivos específicos tenemos:
implementar el sistema de fermentación para la producción de tempeh. Estudiar el
efecto de la variación de la mezcla fréjol- quinua, con dos niveles de Rhizopus
oligosporus, en la producción de tempeh. Evaluar las propiedades nutricionales
del tempeh obtenido. Para lo cual se establecieron tres formulaciones de mezcla
de fréjol y quinua, para fermentar con dos niveles de Rhizopus oligosporus. Para
cada formulación se evaluaron los parámetros: nitrógeno proteico, fibra y perfil de
aminoácidos y se seleccionó la formulación con el nivel de hongo, que presento el
mejor valor de los parámetros evaluados. De los resultados obtenidos los mayores
porcentajes de proteína se lograron con mezclas de 80% frejol + 20% quinua al
3% y 1% de Rhizopus oligosporus con 27,41% y 27,20% respectivamente. Los
más altos porcentajes de fibra se obtuvieron en los tratamientos a0b1 y a0b0 que
corresponden a mezclas de 80% fréjol + 20% quinua al 3% y 1% de Rhizopus
oligosporus respectivamente con valores de 6,85% y 6,35%. En la identificación
de aminoácidos se alcanzaron los mejores porcentajes en los tratamientos a2b0 y
a2b1, que corresponde a una mezcla de 40% fréjol + 60% quinua al 1% y 3% de
Rhizopus oligosporus respectivamente. En el análisis de varianza se determinó
que el nivel de Rhizopus oligosporus no influye en el porcentaje de proteína y
fibra del producto ni en los porcentajes de aminoácidos.
77
6.2. SUMMARY
This research seeks to provide scientific data at the actual product of high
nutritional value aimed at replacing the high consumption of red meat in Ecuador.
Which was conducted in the laboratory of molecular biology and biotechnology
of the faculty of agricultural sciences, natural resources and environment,
Universidad Estatal Bolivar Located in the province of Bolivar, Canton:
Guaranda, parish Guanujo, sector: Laguacoto. The overall objective was to
evaluate the nutritional properties of tempeh produced by fermentation of bean
(Phaseolus vulgaris L.) and quinoa (Chenopodium quinoa) with Rhizopus
oligosporus. And specific objectives are: implement the fermentation system for
production of tempeh. To study the effect of changes in the mix beans, quinoa,
with two levels of Rhizopus oligosporus in tempeh production. Assess the
nutritional properties of tempeh obtained. Which were established for three
formulations of mixed beans and quinoa, to ferment with two levels of Rhizopus
oligosporus. For each formulation were analyzed for nitrogen protein, fiber and
amino acid profile and selected the design with the level of fungus, which gave
the highest value of the parameters. From the results obtained the highest
percentages of protein mixtures were achieved with 80% + 20% beans quinoa 3%
and 1% of Rhizopus oligosporus to 27.41% and 27.20% respectively. The highest
percentages of fiber treatments were obtained in the a0b1 and a0b0 mixtures
corresponding to 80% quinoa beans + 20% to 3% and 1% of Rhizopus
oligosporus, respectively, with values of 6.85% and 6.35%. In the identification of
amino acids reached the best percentages in the treatments and a2b0 a2b1, which
corresponds to a mixture of 40% + 60% beans quinoa 1% and 3% respectively
Rhizopus oligosporus. In the analysis of variance was determined that the level of
Rhizopus oligosporus not affect the percentage of protein and fiber of the product
or the percentage of amino acids. Of this research is recommended: taking this
product as a substitute for meat because of the data was a high-protein and
contains all the essential amino acids.
78
VII. BIBLIOGRAFÍA
ASTUTI M., MELIALA A., DALAIS F.S. Y WAHLQVIST M.L. 2000. Tempe,
a nutritious and healthy food from Indonesia. Asia Pacific Journal of
Clinical Nutrition 9: 322-325.
AYALA Guido, ORTEGA Luz & MORON Cecilio. 2008. Valor Nutritivo y Usos
De La Quinua. Publicaciones cultivos andinos FAO, Lima- Perú. Cap. 8.
79
Análisis de Imágenes del Crecimiento de R. oligosporus en un Grano de
Soya mediante Microscopia de Luz. Departamento de Graduados e
Investigación en Alimentos. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas.
Instituto Politécnico Nacional. Plan de Ayala y Carpio s/n. Col. Plutarco
Elías Calles, 11340. México, D.F.
CHANGO A., BAU H.M., VILLAUME C., MEJEAN L. Y NICOLAS J.P. 1993.
Effects of fermentation by Rhizopus oligosporus on chemical composition
of sweet white lupin, sweet yellow lupin and bitter yellow lupin. Sciences
des Aliments 13: 285-295.
80
FEHR W.R., NARVEL J.M., WELDON L.C. 2000. Analysis of soybean seed
lipoxygenases. Crop Science. 40: 838.
KIERS J.L., NOUT M.J.R., ROMBOUTS F.M., NABUURS M.J.A. Y VAN DER
MEULEN, J. 2002. Inhibition of adhesion of enterotoxigenic Escherichia
coli K88 by soya bean tempe. Letters in Applied Microbiology. 35: 311-
315.
81
LI-TE L., JIAN-HUA Z., ZAI-GUI L. Y TAT-SUMI E. 2003. The comparison of
natto, tempeh and douchi. China Condiment (In Chinese). 5: 3-7.
LI-TE L., YIN L.J. Y SAITO M. 2004. Function of traditional foods and food
culture in China. Jarq-Japan Agricultural Research Quarterly. 38: 213-220.
NJOKU H.O., OFUYA C.O. Y OGBULIE J.N. 1991. Production of tempeh from
the African yam bean (Sphenostylis stenocarpa Hams). Food
Microbiology. 8: 209-214.
82
NOUT M.J.R. Y ROMBOUTS F.M. 1990. Recent developments in tempe
research. Journal of Applied Bacteriology. 69: 609-633.
O'TOOLE D.K. 1999. Characteristics and use of okara, the soybean residue from
soy milk production--a review. Journal of Agricultural and Food
Chemistry. 47: 363-71.
83
XIN-MEI FENG. 2006. Microbial dynamics during barley tempeh fermentation.
Faculty of Natural Resources and Agricultural Sciences Department of
Microbiology Uppsala. Doctoral thesis Swedish University of Agricultural
Sciences.
84