ESPECTROFOTOMETRÍA ULTRAVIOLETA Y PH DE MUESTRA DE VAINILLINA

1
Eduardo Rodríguez: 20152150024, 2Sandra Milena Hurtado Bocarejo 20152150031,
3
Yuly Andrea Pirazan 4Jonnathan Valbuena Diaz 20161150016
3
Giovanna Granados.
Universidad Distrital Francisco José de Caldas
1,2
Estudiante Análisis Químico Instrumental, 3Profesora

RESUMEN: Se realizó el siguiente informe con el objetivo de cuantificar una muestra de

vainillina por medio de espectrofotometría UV y analizar el efecto del pH por medio del
espectro de absorción de una muestra de vainillina. En el cual se logró identificar que
PALABRAS CLAVES: pH, Absorción, Espectrofotometría UV.

ABSTRACT: He was the next report in order to quantify a sample of vanillin by UV

spectrophotometry and analyze the effect of pH by means of the absorption spectrum of a
sample of vanillin. This became a calibration curve of the vanillin allowing reflect their
maximum points that would help perform various analyses. You were identified during that
practice from the facts that were taken regarding found maximum where is a curve of
ringbom which tells us the lesser photoelectric error range. Finally identifies the change in
pH can cause different effects on the curves.

KEYWORDS: pH, Absorption, UV Spectrophotometry.

INTRODUCCIÓN: Instrumentación utilizada en la
1.1ESPECTROMETRÍA ULTRAVIOLETA espectrofotometría ultravioleta y visible

La espectroscopía UV-Vis está basada en el Los instrumentos utilizados en la

proceso de absorción de la radiación espectrofotometría uv – visible son los
ultravioleta-visible (radiación con longitud de fotómetros y espectrofotómetros, los cuales
onda comprendida entre los 160 y 780 nm) por están formados por distintos componentes a
una molécula. La absorción de esta radiación saber: Una fuente de radiación (fuente
causa la promoción de un electrón a un estado fotónica), un sistema óptico de lentes y
excitado. Los electrones que se excitan al espejos para la colimación y dirección del haz
absorber radiación de esta frecuencia son los luminoso, un dispositivo seleccionador de la
electrones de enlace de las moléculas, por lo longitud de la onda (monocromador), un porta
que los picos de absorción se pueden muestra (celda), el detector de la radiación
correlacionar con los distintos tipos de enlace (detector fotónico) y procesador de la señal.
presentes en el compuesto. Debido a ello, la Finalmente, la señal procesada se puede
espectroscopía UV-Vis se utiliza para la presentar de manera digital en una pantalla o
identificación de los grupos funcionales display (Rubinson, y Rubinson, 2000). En la
presentes en una molécula. Las bandas que siguiente figura se muestra un esquema
aparecen en un espectro UV-Vis son anchas general de un sistema espectrofotométrico
debido a la superposición de transiciones
vibracionales y electrónicas.
Figura #1: Esquema general de un sistema
espectrofotométrico.

Imagen 2. Espectrofotómetro Shimadzu UV 1800

1.1.1 Ley de Beer-Lambert

En las tomas de absorción de las muestras que
se analizan hay una gran cantidad de factores
Dependiendo del tipo de enlace que
que originan variaciones en los valores de
consideremos como cromóforo la excitación
λmax y εM, entre los que se incluye el pH, la
electrónica que puede observarse es:
polaridad del solvente o moléculas vecinas y
Absorbancia = ε·l·c
la orientación de los cromóforos vecinos; y
cada uno afecta de forma particular. Por
Dónde: ε = Coeficiente de extinción molar, es
ejemplo, variaciones originadas por cambios
una constante relacionada con el área de
de pH son debidas al efecto de éste sobre la
incidencia del cromóforo y la probabilidad de
ionización del compuesto.
que produzca la absorción.
l = recorrido en cm de la radiación a través de
la muestra METODOLOGIA:
c = concentración de la muestra en moles/litro
Consideraremos que cuando ε es inferior a A partir de una solución stock de vainillina se
10000 esa absorción se debe a una transición prepararon las siguientes diluciones:
electrónica prohibida por las reglas de
selección.

Cuando la radiación incide sobre una sustancia

no toda ella se ve afectada por la misma; al
átomo o conjunto de átomos que absorben
radiación se le denominaba cromóforo. En las
moléculas existen también átomos o grupos de
átomos que no absorben radiación, pero hacen
que se modifique alguna de las características
de la absorción del cromóforo, se
denominaban a tales grupos auxocromos.

En este caso es utilizado el espectrómetro

Shimadzu UV 1800
LONGITUD DE ONDA: 190 nm-1100 nm
ABSORBANCIA: -4.0- 4.0
SISTEMA ÓPTICO: Doble haz con ancho
de banda de 1 nm.
Tabla #1: Diluciones de la vainilla stock en diferentes medios,
blancos (muestras que no tengan analito).

Gráfico 1: Barrido espectral de la vainilla.

Posteriormente se procedió a tomar el espectro
UV mediante el equipo Shimadzu UV 1800,
para poder registrar los datos y determinar las
longitudes de onda máximas para cada
espectro.

RESULTADOS Y ANALISIS DE
RESULTADOS

Máximo de Longitud
Medio
absorbancia de onda
Metanol 3.3203 2.23
Blanco 0.7949
Metanol/NaO
3.5731 2.15
H
Blanco/NaOH 2.0675
Metanol/HCl 3.3787 2.21
Blanco/HCl 0.29493
Tabla #2: Máximos de absorbancia.

Barrido espectral de la vainilla en diferentes

Como bien puede observarse en el gráfico, en
solventes
el compendio de los 300-350nm de longitud
de onda, se pueden ver de manera ampliada
los picos de absorbancia de la vainillina.

Comparación y análisis con los espectros

teóricos y experimentales

VAINILLINA (4-HYDROXY-3-
METHOXYBENZALDEHYDE)
Molecular Formula: C8H8O3
Molecular Weight: 152.149 g/mol

Gráfico 2. Espectro de vainillina en metanol según teoría

Gráfico 3. Espectro de solución patrón.

Según la literatura se presenta una absorbancia

Debido al ruido que se presenta en esta señal
máxima a 345 nm cuando la vainillina se
se procede a realizar un suavizado de datos, el
encuentra en un solvente como el metanol.
cual se puede describir como un conjunto de
Esto se da, debido a que a concentraciones
técnicas aplicadas al procesamiento de
bajas la concentración no se puede diferenciar
señales, utilizado para eliminar el ruido de una
de otra más baja, y en concentraciones altas, el
señal contaminada, esto contribuye a revelar
soluto deja de ser soluto para ser solvente es
características y debido a que este puede
decir, el método no permite una transmitancia
ocultar características importantes como picos
efectiva.
o anchura de los picos, además este puede
hacer que sea difícil calcular las características
Espectro de la solución patrón (monitor)
de la señal, como laderas, área y anchuras de
los picos.
Este suavizado del espectro se realiza en un
rango de longitud de onda de 220-257nm.
 Gráfico 6. Barrido espectral de la muestra de NaOH

Gráfico 4. Barrido espectral de metanol

Para la muestra de metanol anteriormente

mostrada se realiza el suavizado y se obtiene
que como se puede observar, sin la presencia
de ruido, el espectro tiene el pico más alto
para la muestra de metanol en 222nm y con un
valor de absorbancia de 3.3203

Gráfico 7. Espectro teórico de Vainillina en metanol reportado

Con respecto a la gráfica de la Vainillina en

Metanol que es el espectro teórico, se logró
observar un desplazamiento hipercrómico ya
que el valor de la “A” aumenta hasta 3,5 y un
desplazamiento batocrómico ya que se
evidencia un aumento en la longitud de onda
Gráfico 5. Barrido espectral de metanol suavizado.
que se va desplazando hacia el color rojo.

Espectro de vainilla con HCl

Espectro de vainillina con NaOH

Para el espectro que se tomó en este caso

como solvente al NaOH, se realizó una
comparación de este resultado, respecto a la
espectro teórico de la vainilla en metanol,
gráficamente se pudo observar que:
  De la práctica se puede concluir que
para los blancos, específicamente de
fosfatos (de la solución buffer) la
interferencia es menor, y son las sales
que menos absorben en 220-280nm.
 Para la muestra de metanol no se
describe ningún cambio ya que el pH
de la solución patrón no es alterado en
gran medida ya que el solvente es el
mismo metanol que mantiene el pH de
Gráfico 8. Espectro experimental de HCl la solución.
 Mediante la adición del metanol y el
HCl, se observa que al disminuir el
pH de la vainillina, hay un
desplazamiento hipercrómico en el
espectro de absorción. Varios
investigadores han interpretado estas
variaciones como resultado como
resultado de cambios en la relación
ion-molécula
Gráfico 9. Espectro teórico

BIBLIOGRAFÍA
Para realizar este análisis se tuvieron en
cuenta parámetros como poder comparar en
● Universidad de Alicante.
los rangos de lambda (λ) que efecto puede
Espectroscopia ultravioleta visible.
existir en estos puntos, lo cual dio como
https://sstti.ua.es/es/instrumentacion-
resultado que: se ve un desplazamiento
cientifica/unidad-de-rayos-x-de-
hipsocrómico ya que disminuye la absorbancia
monocristal-y-espectroscopias-
máxima con respecto a la gráfica teórica de la
vibracional-y-optica/espectroscopia-
Vainillina en metanol, pero se logra evidenciar
ultravioleta-visible.html (accessed
un ligero desplazamiento batocrómico.
May 2018).
● Millán, F. Libro de espectroscopia
Sabemos que la relación de equilibrio entre las
UV-visible. Instituto Universitario
formas protonada y no protonada de una Politécnico Santiago Mariño (2007).
molécula se define como una función del pH.
Dado que las absorciones de diferentes ● Cornard, J. P., & Merlin, J. C. (2005).
especies en solución son aditivas, podemos Molecular structure and spectroscopic
combinar todas estas ecuaciones para darnos properties of 4-nitrocatechol at
una expresión de la absorción total de una different pH: UV–visible, Raman,
especie ionizante en función del pH, pKa y los DFT and TD-DFT calculations.
coeficientes de extinción de las formas Chemical physics, 309(2-3), 239-24
protonadas y no protonada ● CARNERO, C., HERNANDEZ, M.,
& MARQUEZ, J.
CONCLUSIONES: DETERMINACIÓN CONJUNTA DE
VAINILLINA Y
SIRINGALDEHIDO EN RON
MEDIANTE EL MODELO
GRAFICO. V jornadas universitarias
de viticultura y enología en jerez, 239.