Informe 2

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN
MARCOS
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
EAP FARMACIA Y BIOQUÍMICA
INFORME N°2
TECNICAS DE CULTIVO
INTEGRANTES:
1. Apaza Champi, Luis
2. Mendoza Valderrama, Jhon
3. Reyes León, Ronald
4. Arias León Jorge Ian
5. Rigoberto
2020
I. INTRODUCCCION
Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros
componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los
microorganismos. La diversidad metabólica de los microorganismos es muy
amplia; por ello, la variedad de medios de cultivo es también muy grande, no
existiendo un medio de cultivo universal adecuado para todos ellos.
Los medios de cultivo pueden ser sólidos, líquidos o semisólidos. La
composición de estos medios puede ser definida (medio sintético) o no definida
(medio complejo). No todos los medios de cultivo son iguales, ni todos los
microorganismos pueden crecer en todos los medios de cultivo. Cualquier medio
de cultivo que favorece el crecimiento de un tipo o grupo de microorganismo, e
inhibe el crecimiento del resto de la flora microbiana presente en el inóculo, se
llama medio selectivo. Generalmente estos medios contienen productos
inhibidores que no afectan el crecimiento del microorganismo o grupo de
microorganismos que queremos aislar, pero sí al resto de la biota.
El aislamiento y obtención de cultivos puros posiblemente hayan sido las bases
más importantes en el desarrollo de la Microbiología. Los primeros trabajos en
Microbiología se hicieron en unas condiciones experimentales que no permitían
tener la certeza de que se hubieran obtenido cultivos puros. Un cultivo puro es
aquel que contiene una sola clase de microorganismo. En la práctica los cultivos
puros son útiles por diferentes razones: mantienen los organismos viables,
permiten hacer subcultivos para someterlos a diferentes análisis e
intercambiarlos con otros laboratorios. Para obtenerlo es necesario recurrir a las
técnicas de aislamiento.
El proceso de aislamiento consiste en disponer de la descendencia de un
individuo (célula) inmovilizada sobre la superficie de un medio sólido y separada
del resto de individuos presentes en el cultivo mixto. Esta célula, en las
condiciones de crecimiento adecuadas dará lugar a una descendencia (clon) que
resultará macroscópicamente visible y que se llama colonia.
Cada colonia contiene millones o miles de millones de células idénticas y con el
mismo origen y propiedades. Se puede demostrar que prácticamente cada
colonia procede de una sola célula o de un grupo de células del mismo tipo si el
microorganismo forma agregados. Por ello lo más correcto es hablar de
unidades formadoras de colonias (UFC) al referirnos al origen de una colonia. 1
II. OBJETIVOS
 Conocer los diferentes tipos de siembras en medio líquido, semisólido y
sólido.
 Observar y entender sobre la lectura de colonias y crecimiento microbiano
III. METODOLOGIA
Materiales
 Tubos con azúcar de la semana anterior
 Envases con gelatina de la semana anterior
 Mascarillas
IV. RESULTADOS
V. DISCUSION
VI. CONCLUSION
 Se conoció los diferentes tipos de siembra y su principal objetivo en el

cultivo de microorganismos.
 Se observó y entendió sobre el crecimiento microbiano en la formación de
colonias.
VII. ANEXOS
 CUESTIONARIO:
1. ¿Por qué es importante evitar que la aguja se introduzca bajo la
superficie del agar cuando siembra en medio inclinado o semisólido?
Medio inclinado: es importante evitar que se introduzca por debajo de la superficie:

porqué no podríamos diferenciar si la bacteria es aerobio o anaerobio facultativo,
esto dependiendo del crecimiento solo en la superficie o también por debajo de ella.
Medio semisólido: en este caso tendríamos que introducir el asa para así poder
observar si el microorganismo tiene motilidad; si se observa turbio es móvil y si se
observa solo un crecimiento alrededor de la picadura entonces es inmóvil. La
siembra de este medio también se emplea para la conservación de
microorganismos, especialmente de los anaerobios facultativos.
2.¿Sólo se puede sembrar utilizando el asa de kolle? fundamente y cite

ejemplos
Sí, el asa de kolle o asa bacteriológica es un instrumento de laboratorio tipo pinza

que consta de una base que puede estar hecha de platino, acero, aluminio, y un
filamento que puede ser de nicromo, tungsteno, o platino que termina o en un arito
de 5mm o en punta. Se emplea para transportar o arrastrar inóculos (pequeño
volumen que contiene microorganismos en suspensión) desde la sustitución,
solución de trabajo también llamada “solución madre” al medio de cultivo (solido o
liquido) o de un medio a otro (resiembra). También sirve para la realización de frotis.
a) Asa en argolla o anillos, no calibrada. Generalmente son de alambre de nichrome. Sirve para la
siembra por estrías e inoculaciones en general.
b) Asa recta o en hilo. Sirve para trasladar una sola colonia a medios de identificación, o sub-cultivo.
c) Asa de platino en anillo. Calibrada para tomar 0.001 ml, para uro-cultivo
d) Asa espatulada. Para manipular colonias duras y tomar muestras.
e) Asa de alambre grueso en “L”. Para purificar colonias de hongos y procedimientos especiales.
f) Aguja de disección con punta aguda. Para purificar colonias pequeñas y distribuir las preparaciones
de hongos en fresco.
3. Investigue y complete el cuadro
Medio de cultivo Bacteria Descripción de la colonia
Agar Baird Parker Staphylacoccus Colonias de forma esférica, de
aureus color negro en un medio de color
verde tenue.
Agar Mc Coney Escherichia coli Colonias presentadas como
franjas punteadas de color
rosado tenue en un medio rosado
Agar EMB Escherichia coli Colonias presentadas como
trazos punteados de color
amarillo verdoso en un medio
rojo pardo
Agar Manitol sal Staphylacoccus Colonias presentadas como
aureus franjas amarillas en un medio
amarillo.
Agar Endo Klebsiella pneumoniae Colonias presentadas como
líneas punteadas de color rojo
intenso en un medio rojo
4. Señale 2 bacterias que presenten pigmento en un medio de cultivo general

Bacillus spp y Proteus mirabilis.
5. ¿Como se puede conservar una cepa por tiempo prolongado? ¿Qué

consideraciones hay que tener?
Para una conservación por congelación se congelan las células en suspensión en
un líquido con un agente crioprotector y se guardan a temperaturas inferiores a cero
grados centígrados, con lo que el agua se congela. De esta forma, al no disponer
las células de agua en forma líquida, no hay crecimiento. Este es el mejor método
de conservación desde todos los puntos de vista, pero tiene el inconveniente de
requerir aparatos especiales, y además existe el peligro de que algún fallo del
sistema produzca una subida no deseada de la temperatura durante el
almacenamiento. También resulta ser el método más molesto para realizar el envío
de las cepas. Los cuatro factores que influyen en la viabilidad y estabilidad de las
células conservadas por este método son los siguientes:
 Edad de las células

 Velocidad en la congelación y descongelación.
 Temperatura de almacenamiento
 Empleo de agentes crioprotectores
Para una conservación por liofilización Tampoco se da crecimiento en las células

conservadas por este método, puesto que se les ha quitado el agua mediante la
liofilización, que es un proceso suave. Con ello la estabilidad genética es alta, pero a
veces no tanto como en la congelación, porque la liofilización se consigue por
sublimación del hielo de las células. Por lo tanto, primero tenemos que congelar el
agua libre de las células y después eliminarla mediante el vacío, sin que haya
necesidad de subir la temperatura, lo que acabaría afectando a la viabilidad del
microorganismo. Los factores que influyen en la eficacia del proceso son:
 Tipo de microorganismo
 Concentración celular
 Temperatura durante la sublimación
 Grado de deshidratación alcanzado
 Atmosfera del oxígeno en el tubo
 Condiciones de almacenamiento
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. García E. PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA.[Internet]; 2009-2010.[Revisado 2 de julio deDisponible
en https://www.uib.cat/depart/dba/microbiologia/micro2/practicas.pdf
2.

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 Se conoció los diferentes tipos de siembra y su principal objetivo en el

Medio inclinado: es importante evitar que se introduzca por debajo de la superficie:

2.¿Sólo se puede sembrar utilizando el asa de kolle? fundamente y cite

Sí, el asa de kolle o asa bacteriológica es un instrumento de laboratorio tipo pinza

d) Asa espatulada. Para manipular colonias duras y tomar muestras.

4. Señale 2 bacterias que presenten pigmento en un medio de cultivo general

5. ¿Como se puede conservar una cepa por tiempo prolongado? ¿Qué

 Edad de las células

Para una conservación por liofilización Tampoco se da crecimiento en las células

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

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