GENETICA

BACTERIANA

Yeison Rivera
Mariana Sanchez
Juan David Tolosa
Edwin Andrés Londoño
 Estructura del genoma bacteriano
Toda la información genética esencial para la vida de la bacteria
está contenida en una única molécula de ácido
desoxirribonucleico (ADN) de doble cadena y circular, cerrado
por enlace covalente. Dicha molécula se denomina cromosoma
bacteriano. Muchas bacterias poseen además ADN extra
cromosómico, también circular y cerrado, denominado ADN
plasmodio por estar contenido en los plásmidos. Éstos, portan
información génica para muchas funciones que no son
esenciales para la célula en condiciones normales de
crecimiento.
 Los plásmidos son ADN extra-
cromosómico
Estos, son moléculas circulares de ADN de doble cadena que
constituyen una unidad de replicación independiente del
cromosoma. Por esto puede encontrarse más de una copia del
mismo plásmido dentro de la célula bacteriana. En general los
plásmidos de mayor tamaño se encuentran en una o unas pocas
copias, mientras que los más pequeños pueden estar en hasta
cien copias por célula (plásmidos multicopia).
Aunque el ADN plasmídico no porta información genética
esencial para la vida de la bacteria, sí porta genes que le
confieren nuevas propiedades fenotípicas y que en algunos casos
le son útiles para su adaptación al crecimiento en determinados
ambientes.
 Súper enrollamiento del ADN
Una molécula de ADN circular relajado puede ser “retorcida”
para formar una molécula superenrrollada negativamente. Esta
reacción es catalizada por una enzima “girasa”, mientras que la
reacción inversa lo es por una “topoisomerasa”.
 Genes "saltarines" de las bacterias

Los elementos transponibles son segmentos de ADN capaces de

moverse desde una posición a otra en el genoma. Es decir que
pueden transponerse o “saltar” desde un sitio determinado del
genoma, separándose del resto del ADN, hasta otro sitio distinto
al cual se integran. También pueden transponerse desde el
cromosoma a un plásmido o viceversa o a distintos sitios dentro
de la misma molécula de ADN. Los elementos transponibles
están ampliamente distribuidos en la naturaleza, tanto en virus,
como en células procariotas y eucariotas. Existen dos tipos de
elementos transponibles: las secuencias de inserción (elementos
IS) y los transposones (Tn).
 Replicación del ADN bacteriano

El genoma completo de una célula, sea procariota o eucariota,

debe replicarse con exactitud una vez por cada división celular.
Por lo tanto, la iniciación de la replicación compromete a la
célula a una división posterior. Si se inicia la replicación, la
división consiguiente no debe ocurrir hasta que se haya
completado la replicación y, de hecho el final de la replicación
puede disparar la división celular.
Las bacterias, a diferencia de las células eucariotas, son capaces
de replicar su ADN a lo largo de todo su ciclo celular.
Se denomina replicón a cada unidad de replicación del ADN que
contiene todos los elementos requeridos para regular este
proceso.
Colaboración de proteínas en la horquilla
de replicación
La ADN polimerasa III necesita para iniciar la síntesis un
cebador o primer que es sintetizado por una ARN polimerasa
especial. Algunas proteínas desenrollan la hélice de ADN y otras
se unen a los fragmentos de ADN unicatenario para
estabilizarlo. Como la polimerasa solo sintetiza ADN en
dirección 5’ a 3’, una de las cadenas se sintetiza en forma
discontinua, dejando una serie de fragmentos de ADN y de
huecos sin replicar. La ADN polimerasa I rellena los huecos y
una enzima ligasa sella los fragmentos entre si
 Expresión de los genes procariotas
La expresión genética de todas las células depende de los
procesos secuenciales de transcripción y traducción que, en
conjunto transfieren la información contenida en una secuencia
de nucleótidos de un gen, a una secuencia de aminoácidos de
una proteína. Esto implica que a partir de la dotación génica
portada por la célula (genotipo), se expresarán un conjunto de
características evidenciables y que constituirán el fenotipo
celular.
 Comparación entre la expresión de los
genes eucariotas y procariotas.
Los ARNm procariotas son a menudo poligénicos, es decir que
contienen información para mas de una proteína. El extremo 5’
se traduce cuando todavía se está transcribiendo el extremo 3’.
Los ARNm eucariotas son monogénicos y requieren de
modificaciones postranscripcionales antes de atravesar la
membrana nuclear y llegar al citoplasma donde son traducidos
 Regulación de la expresión génica de las
bacterias
Un importante mecanismo de regulación desarrollado por las
bacterias, se basa en la activación o desactivación de la
transcripción de un grupo de genes cuyos productos tienen
funciones relacionadas y que están organizados en una región
del genoma que permite regular su expresión. Esta forma de
organización genética se denomina operón y le permite a la
célula administrar en forma óptima sus reservas energéticas.
Un operón consiste en: un promotor, sitio blanco de la
regulación; genes adyacentes que codifican cada una de las
enzimas de una vía metabólica y una secuencia de terminación
de la transcripción. Así, todos los genes constituyentes de un
operón son transcriptos de forma coordinada como ARNm
policistrónico, es decir multigénico. Dicho ARNm es traducido
secuencialmente en proteínas por los ribosomas.
 Mecanismos de variación genotípica

Como vimos, las bacterias tienen mecanismos que les

permiten cambiar su expresión génica favoreciendo la
síntesis de los productos de ciertos genes y
reprimiendo la de otros. Estos mecanismos pueden
llamarse de variación fenotípica, ya que implican una
serie de cambios en el fenotipo celular o de la
población bacteriana. También existen mecanismos
de variación genotípica, que serán igualmente
traducidos en cambios fenotípicos, pero que se
basarán en una modificación de la información
genética contenida en la célula.
 Mutaciones
Una mutación es un cambio heredable en la secuencia de bases
de los ácidos nucleicos que constituyen el genoma de un
organismo; ésta se produce en condiciones naturales con baja
frecuencia y se deben fundamentalmente a errores en los
procesos de replicación del ADN.
Además de las mutaciones espontáneas, pueden ocurrir
mutaciones inducidas, provocadas por agentes mutagénicos
(químicos, físicos o biológicos) que proporcionan una
herramienta para introducir cambios en el genoma bacteriano en
el laboratorio. Las mutaciones en las bacterias, frecuentemente
afectan propiedades fácilmente reconocibles como
requerimientos nutricionales, morfología o resistencia
antibiótica
• MUTACIONES SELECTIVAS
• MUTACIONES NO SELECTIVAS
• MUTACIONES PUNTUALES
• MUTACIONES SIN SENTIDO
• MUTACIONES POR CAMBIO DE SENTIDO
• MUTACIONES SILENCIOSA
• MUTACIONES SUPRESORAS
 TRANSFERENCIA DE GENES ENTRE
BACTERIAS
La recombinación genética es el proceso mediante el cual los elementos
genéticos contenidos en el genoma de diferentes individuos se combina.
Esto permite que el individuo origine alguna nueva función que pueda
dar como resultado una adaptación a los cambios en el medio ambiente.
Este es un evento evolutivo importante y las células tienen mecanismos
específicos que aseguran que dicha recombinación se efectúe
 Aportes de la biología molecular y la
genética bacteriana a la
medicina
Una de las contribuciones más importantes de la ingeniería
genética de bacterias, es su uso para desarrollar vectores o
vehículos que permitan el clonado de cualquier secuencia de
ADN.
Los vectores más usados con este fin son los plásmidos
bacterianos. Otra importante aplicación de la biología molecular
a la medicina, es la producción de vacunas recombinantes. Este
procedimiento se basa en la expresión en bacterias de genes
propios de patógenos contra los que se desea vacunar, por
ejemplo virus, parásitos u otras bacterias. Estos métodos pueden
usarse también para la producción de vacunas vivas, es decir
vacunas que son administradas con virus o bacterias vivas que
han sido manipuladas genéticamente para perder su virulencia,
pero que mantienen intactas sus propiedades inmunogénicas.
 Biotecnología aplicada al diagnóstico clínico

Otro uso de la producción de antígenos a escala industrial en

bacterias, es para realizar pruebas diagnósticas que detecten
anticuerpos específicos contra antígenos microbianos en el suero
de pacientes. En estos casos, interesa clonar en una bacteria de
rápido crecimiento como E. coli, el gen que codifica para un
antígeno determinado del microorganismo contra el cual se
desea detectar la respuesta inmune desarrollada por el paciente.
De esta manera, se producirá el antígeno proteico en cantidad
suficiente como para “capturar” los anticuerpos en la técnica
elegida para la prueba diagnóstica, ya sea por encimo inmune
ensayo (ELISA), inmunofluorescencia, aglutinación de
partículas de látex u otras.
 Reacción en cadena de la polimerasa
(PCR)
El ADN molde se desnaturaliza (aprox. 94 °) y los primers se unen en
sus secuencias complementarias en los extremos de la región a
amplificar ( aprox. 55°, según la secuencia de los primers). Luego la
polimerasa sintetiza una nueva hebra de ADN a partir de cada primer
copiando la cadena molde ( a 72°). Así se completa un ciclo,
repitiéndose el proceso unas 35 veces, amplificando la secuencia de
interés en forma exponencial.
 Bibliografías
• Schaechter M, Medoff G, Eisenstein BI, Guerra H.
Microbiología. Mecanismos de las enfermedades
infecciosas. Ed Panamericana. 2ª ed. Buenos Aires 1993
• Joklik WK, Willett HP, Amos DB, Wilgert CM. editores,
Zinsser Microbiología. 20ª ed. BsAs. Panamericana; 1994.
• Lewin B. Genes VII. Ed. Reverté, 7 ed. 2000.
• Murray PR. Baron EJ. Jorgensen JH. Pfaller MA. Yolken RH
Editors. Manual of Clinical Microbiology. 8th. ed.
Washington, D.C. ASM Press. 2003.
• Watson JD, Tooze J, Kurtz DT. ADN recombinante.
Introducción a la ingeniería genética. Ed. Labor. 1988.
• http://130.206.160.21/rid=1NQMWD86S-1N93KN5-
R6/GeneticaBacteriana.pdf
Transferencia
Genética
 Transferencia Genética

*Unidireccional: de una dadora a una receptora

*Exogenote: la porción de genoma de la célula dadora que se
transfiere
*Endogenote: el genoma de la célula receptora
*Parcial: es decir que sólo pasan algunos genes, no puede pasar
el cromosoma completo, aunque hay algunos casos que si
sucede transferencia completa, por ej el caso de los
endosimbiontes, es decir una célula receptora que ha
incorporado una célula completa, por ej la teoría de la
endosimbiosis del origen de las mitocondrias y cloroplastos.
*Destino del material: recombinación, destrucción, pérdida
Mecanismos de
transformación
 Transformación

La transformación genética de bacterias es un procedimiento de

laboratorio por el cual se introduce material genético a una
bacteria. Existen otros procesos de inserción del material
genético, que dependiendo del organismo receptor y el
mecanismo, algunos reciben nombres como transfección o
transducción.
 Conversión

Los virus que infectan a las bacterias se llaman bacteriófagos.

Los bacteriófagos, como los demás virus, son los piratas del
mundo biológico, toman el control de los recursos de la célula y
los usan para fabricar más bacteriófagos.
 Conjugación

En la conjugación, el ADN se transfiere de una bacteria a otra.

Después de que la célula donante se une a la receptora mediante
una estructura llamada pilus, se transfiere el ADN entre las
células. En la mayoría de los casos, este ADN está en forma de
plásmido.
Agentes físicos
y químicos
 Agentes físicos

• Radiación UV: Es el mutágeno físico más empleado en el

laboratorio para obtener mutaciones en las bacterias. Como ya
estudiamos en su momento, su efecto principal es originar dímeros
de pirimidina intracatenarios (con creación de una anillo
ciclobutano entre dos Py consecutivas). Las proporciones de
lesiones son las siguientes:

Las mutaciones aparecen principalmente como consecuencia del

mecanismo posreplicativo de reparación propenso a error (o sea, el
sistema SOS). Con menor frecuencia la luz UV ocasiona hidratación de
la C, lo que da origen a transiciones.
• Rayos x y radiaciones ionizantes: Tienen mayor
poder de penetración que los rayos UV, pero son de difícil
manejo, por lo que se emplean poco en bacterias. Los rayos
X ocasionan daños reparables por el sistema SOS.

Las radiaciones ionizantes (p. ej., rayos g) provocan

labializaciones en el ADN, que terminan en roturas en las hebras
del ADN (por ataque al enlace fosfodiéster), que finalmente
pueden conducir a delecciones.
 Agentes Químicos

• Análogos de base: Son sustancias con una estructura en

anillo similar a las bases naturales de los ácidos nucleicos,
pero con propiedades químicas diferentes. Como ejemplos
tenemos:
Estas moléculas entran a las células y son convertidas a los
correspondientes “dNTP”, de modo que su estructura les permite
ser incorporados durante la replicación del ADN.
1) El 5-BrU es análogo de la T. Propicia transiciones T:A àG:C
debido a que experimenta frecuentes cambios tautoméricos
desde su forma ceto a su forma enol:
BUceto:AàBUenol:G
Si partimos de una pareja A=T y en la 1ª ronda de replicación la
ADN-polimerasa introducen un BUceto frente a la adenina, los
acontecimientos hasta llegar a la mutación se pueden resumir
así:
A:T à (la primera replicación incorpora
BU) àA:BUceto à(tautomerización y 2ª
replicación) à G:BUenol à (3ª replicación) à G:C
2) La 2-AP es un análogo de la A. Provoca transiciones
A:Tà C:G debido a sus frecuentes tautomerizaciones
(APamino à APimino). Veamos el proceso:
A:T à (primera replicación) à APamino:T à (tautemerización y 2ª
replicación) à APimino:C à (3ª replicación) à G:C
• Agentes desanimantes o hidroxilantes: Alteran las Pu o
las Py, de modo que:
1. Causan errores en el emparejamiento
2. Labilizan las bases, de modo que estas
espontáneamente se modifiquen químicamente con
gran frecuencia
• Ácido nitroso: provoca una desanimación oxidativa de A y
C, lo que origina transiciones.El nitroso también desamina
oxidativamente a la G, pero en este caso no hay
mutación: G à xantina, que al igual que la G, se empareja con
la C.
Hidroxilamina (NH2OH): actúa específicamente
sobre la citosina, añadiéndole un hidroxilo a su
grupo -NH2.
• Agentes alquilantes: Introducen radicales alquílicos en
una cadena (los alquilantes monofuncionales) o en las dos
cadenas (los bifuncionales) del ADN, produciendo efectos
letales y mutagénicos.

Como hemos dicho, estos agentes originan un daño

premutagénico principal consistente en alquilación del O6 de la
G. Ello provoca una gran distorsión en la doble hélice, que
posteriormente se plasma en transiciones del tipo G:C à A:T.
Sin embargo, muchas bacterias poseen un sistema específico
para reparar las lesiones de la O6-alquil-guanina, que
funciona de la siguiente manera:
1) La bacteria posee una O6-alquil-glucosilasa, que rompe el
enlace N-glucosídico entre la O6-alquil-guanina y la
desoxirribosa. Esto provoca la creación de un sitio
apuntico (sitio AP).
2) El sitio AP es reconocido por una endonucleasa
correctora (apurinasa), que rompe el enlace fosfodiéster del
lado 5' del sitio apurínico.
3) Se produce una reparación por escisión-resíntesis de un
pequeño nº de nucleótidos, pero si el daño es muy grande se
produce una situación SOS que tiende a ser reparada por
el sistema propenso a error ya estudiado, lo que provoca
introducción de errores, que conducen a transiciones y
transversiones .
• Sustancias intercalantes: Se introducen entre los pares de bases
del ADN, dando origen a pérdida o ganancia de nucleótidos (o
sea, generan mutaciones de cambio de la pauta de lectura del
mensaje genético). Estas sustancias son moléculas planares con 3 o
4 anillos conjugados, que presentan un cierto parecido con los pares
de bases del ADN, pero no se pueden incorporar covalentemente al
esqueleto de éste, sino que se intercalan entre dos pares de bases
consecutivas, con lo que provocan distorsiones de la doble hélice.
Estabilizan emparejamientos erróneos durante la replicación y la
recombinación del ADN, dando origen a desplazamientos de la pauta
de lectura.
Ejemplos:
• Agentes que bloquean totalmente el emparejamiento de
bases: Este grupo incluye potentes carcinógenos como:
Aflatoxina-B1 benzo-a-pireno

Modifican purinas, provocando grandes lesiones en el ADN, que

inducen el sistema SOS de reparación, lo que finalmente implica
reparación propensa a error. Las aflatoxinas son unas
micotoxinas (producidas por hongos, como Aspergillus)
 Bibliografías
• https://www.studocu.com/es-ar/document/universidad-nacional-de-
tucuman/microbiologia/apuntes-de-clase/genetica-bacteriana-
transferencia-genetica/1340655/view
• https://seguridadbiologica.blogspot.com/
• https://es.khanacademy.org/science/biology/bacteria-
archaea/prokaryote-structure/a/genetic-variation-in-prokaryotes
• https://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/16mutacion.htm#_Toc6
2545601