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Informe 4

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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MANABÍ

INFORME DE PRÁCTICA
1. INFORMACIÒN GENERAL:

FACULTAD: Facultad de Ciencias de la Salud


CARRERA: Escuela de Laboratorio Clínico
ASIGNATURA: Biología Celular Nº PRÁCTICA: 4

GRUPO DE TRABAJO: Grupo: #3


NOMINA DE ESTUDIANTES:
Delgado López Bryan

Pinargote Macías Carmen

Santana Valle Celyn

Torres Pico Carlos

DOCENTE: Marisel De Lucca Osorio, PhD.


FECHA DE LA PRÁCTICA: 21/08/2020
SEMESTRE/PARALELO: Primer Semestre Paralelo “B”

2. TEMA: Microscopía.

3. OBJETIVO: Analizar las propiedades, funcionamiento y usos de los diferentes


tipos de microscopio, su utilidad en la clínica y la investigación biomédica.

Objetivos específicos:
a) Identificar las partes del microscopio compuesto de campo claro
b) Explicar los principios de la microscopia de luz.
c) Conocer los diferentes tipos de microscopios. Identificar las partes y principios de
su funcionamiento y utilización. Análisis comparativo de los tipos de microscopia.

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4. INTRODUCCIÓN

El uso del microscopio es un instrumento de precisión que permite al estudiante


identificar y describir a través de uso de las partes que componen el sistema mecánico,
óptico y de iluminación observar y describir diferentes características morfológicas de
las células y tejidos. En el Laboratorio Clínico, Biomédico y Diagnóstico Clínico, su
uso sigue siendo muy esencial en las áreas como hematología, bioquímica y
microbiología. Dentro de las variaciones de microscopios existe el óptico que permite
la visibilidad aumentada de las muestras con la facilidad de manipular sus partes para
aumentar la distancia o calidad imagen. En esta sección será un análisis comparativo de
los videos educativos sobre los tipos de microscopia, además identificar mediante
imágenes a que pertenece cada uno de ellos.

5. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA:

Tarea 1: Se visualizarán una serie de videos educativos sobre los tipos de microscopias,
lo fundamentos de las técnicas y los equipos, y los alumnos deberán contestar el
siguiente cuestionario:

1. Cuál es el principio de rige la microscopia de luz.


Su principio es que la luz pasa a través de la célula y se puede distinguir sus partes
depende de la absorción de la luz visible por los componentes celulares. Este
microscopio permite observar objetos transparentes en láminas finas además es una
práctica estándar para analizar las muestras de tejidos en los laboratorios histológicos.

2. Defina poder de resolución.


Llamamos poder de resolución a la capacidad de un sistema óptico para diferenciar
entre dos puntos o líneas muy próximos entre sí.

3. ¿Cuál es la diferencia entre el aumento y poder de resolución?


La diferencia es que el aumento de un instrumento óptico permite conocer hasta
cuantas veces más grande se puede observar un objeto dado, mientras que el poder de
resolución hace referencia a la capacidad del instrumento óptico para diferenciar dos
puntos entre sí.

4. ¿Qué significa el término 10x 40x y 100x?


Significa el aumento de un microscopio, es una de sus características esenciales que
define su calidad y el tipo de muestras que se podrán observar. El aumento total de un
microscopio indica en qué medida este puede aumentar la imagen de la muestra
observada y se calcula multiplicando el aumento del objetivo por el aumento del ocular.
Por ejemplo, si usamos objetivo 10x y ocular 10x, el resultado final será 100x y si
usamos un objetivo 100x y ocular 10 el resultado será 1000x.

6. Describa las diferencias entre la microscopia de campo claro, de contraste de


fases y de campo oscuro.
La microscopia de campo claro es la forma más simple de microscopía donde la luz
pasa a través de o reflejada del espécimen mientras la microscopia de contraste de fase
se basa en la conversión de pequeñas diferencias del índice de refracción, que presenta
el objeto que se observa, en diferencias de brillo. Por último, la microscopia de campo
oscuro produce el contraste por la observación de los especímenes sobre un fondo
oscuro. Los objetos se iluminan por medio de rayos de luz oblicuos que no atraviesan el
objetivo.

7. Explicar el principio del funcionamiento de la microscopia electrónica.


Su principio de funcionamiento se basa en utilizar electrones en lugar de luz para
obtener una imagen de la muestra. La longitud de onda con la que se mueve un
electrón es inversamente proporcional a su velocidad. Esto significa que si los
electrones son acelerados a altas velocidades pueden obtenerse longitudes de onda
muy cortas.

7. En qué consiste la microscopia confocal.


Consiste en permitir observaciones a una mayor resolución, contraste y nitidez que
la que se puede lograr con la microscopía óptica convencional. El principio se basa en
que un láser de una determinada longitud de onda aplicado en la muestra hace que
moléculas excitadas emitan fluorescencia a una longitud de onda superior a la aplicada.

8. Cuál es la utilidad de la microscopia confocal en la investigación biomédica.


Es una herramienta de uso amplio en la investigación biomédica y sus diferentes
aplicaciones abarcan la posibilidad de realizar análisis desde un nivel tejido-estructural
hasta el molecular. Además, es posible obtener y analizar imágenes tanto de cultivos
celulares, como de especímenes que contengan células y moléculas autofluorescentes o
marcadas con fluoróforos.

9. Indique el nivel de resolución de la microscopia de luz, la microscopia


electrónica y la microscopia confocal.
La microscopia de luz tiene un límite máximo de resolución de 0,2 µm. En cuanto a
la microscopía electrónica tiene un límite de resolución más pequeño que 2 nm gracias
a que no usa la radiación electromagnética de la luz visible sino la alta frecuencia de un
haz de electrones que incide sobre la muestra. Por último, la microscopia confocal
envuelve escaneos seriales al espécimen para crear secciones ópticas generadas por
computadora desde 250 nm de espesor usando iluminación visible. Sin embargo, la
configuración óptica de la mayoría de los microscopios confocales disponibles
comercialmente este límite es de aproximadamente 200 nm.

10. Explique el funcionamiento de la microscopia de fuerza atómica.


Al analizar una muestra, se registra continuamente la altura sobre la superficie de
una sonda. La sonda va acoplada a un listón microscópico, muy sensible al efecto de las
fuerzas. La fuerza atómica se puede detectar cuando la punta se aproxima a la
superficie de la muestra. Se registra la pequeña flexión del listón mediante un haz láser
reflejado en su parte posterior.

Tarea 2: observe las siguientes imágenes, e indique: ¿con qué tipo de microscopia fueron
obtenidas?
Imagen A: Microscopia Óptica

Imagen B: Microscopio Confocal

Imagen C: Microscopia fluorescencia (campo amplio)

Imagen D: Microscopía Electrónica de Trasmisión

Imagen E: Microscopía Electrónica de Barrido


Imagen F: Microscopio de Contraste de Fase

Tarea 3. Identificar las partes de un microscopio óptico compuesto.

Oculares
Tubo (cabezal)

Revolver
Brazo
Objetivos

Pinzas
Platina

Tornillo
Diafragma y macrométrico
Condensador
Tornillo
Lámpara luminosa micrométrico

Perlillas coaxiales
Base
de movimiento

Fuente: https://www.caracteristicas.pro/microscopio-optico/

11. CONCLUSIONES (Describa las conclusiones acordes con los objetivos,


recuerde estas son sus conclusiones y no se suelen comparar con bibliografía).

 Se logró reconocer las partes y el funcionamiento del microscopio compuesto de


campo claro.

 Se logró realizar un análisis comparativo de los tipos de microscopia.

 Se logró entender que el microscopio es una herramienta que permite describir las
características y función de distintos organismos unicelulares y pluricelulares, es
fundamental que el estudiante identifique las partes ópticas y mecánicas, que le sirve
de conocimiento previo en las subsecuentes prácticas no solamente en la asignatura de
biología celular, sino que será para toda su profesión.

12. OBSERVACIONES (Incluya todo problema que haya tenido en el


transcurso de la práctica y sus recomendaciones).

 Es importante saber las partes del microscopio para saber manejarlo.


 Para transportar el microscopio deben utilizarse siempre las dos manos, sujetándolo
por el brazo con una mano y por el pie con la palma de la otra.
 Una vez colocado el microscopio en su sitio, no debe moverse hasta que finalice la
práctica. Cuando se vaya a cambiar de observador se debe mover él y no el
microscopio.
 Si se ensucian las lentes se limpiarán con un paño suave de algodón con alcohol éter.
13. BIBLIOGRAFÍA

Gray, P. (1964). Handbook of Basic Microtechnique. Mc Graw Hill Nook Co. New
York. 302 pp.

Cortes José A. El microscopio óptico compuesto. 2001 Última modificación: 2005.


Disponible en: http://www.joseacortes.com/practicas/microscopio.htm
Ing. Chirinos A. (S.F.). Características del microscopio óptico. Disponible en:
https://www.caracteristicas.pro/microscopio-optico/

Megías M, Molist P, Pombal MA. (2019). Atlas de histología vegetal y animal.


Técnicas histológicas. Recuperado 23 de agosto de 2020, de:
http://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/1-introduccion.php

Gerard, K. (1991). Biología Celular y Molecular. Obtenido de 2 edición McGraw Hill:


http://www.sld.cu/galerias/pdf/sitios/histologia/microscopio_de_campo_oscuro.pdf

https://www.espe-innovativa.edu.ec/cencinat/microscopia-de-fuerza-atomica/

Medic.ula.ve. 2020. Microscopía. [online] Available at:


<http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitulo6
_7.htm> [Accessed 25 August 2020].

Piliszek A, Kwon GS, Hadjantonakis AK. Ex utero culture and live imaging of mouse
embryos. Methods Mol Biol. 2011; 770: 243-257.

Selever J, Kong JQ, Arenkiel BR. A rapid approach to high-resolution fluorescence


imaging in semi-thick brain slices. J Vis Exp. 2011; 26: 53. doi: 10.3791/2807

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