TIPOS DE PCR

dNTPs Cebadores Cofactores ADN polimerasas Agua T° T° Anillamiento T° Número de ciclos Detección Aplicación
Desnaturalización / hibridación Elongación
2 (forward – reverse) • Electroforesis • Arqueología
PCR • Concentración Oligonucleótidos cortos Mg++ 0.5 - 2.5 mM Taq polimerasa obtenida Agua ultrapura 94°C por 1 54° C por 45 72°C por 2 30 -40 ciclos en gel agarosa • Medicina forense
convencional inicial en (varían entre 18 y 30 a partir de Thermus calidad tipo I. minuto segundos minutos bajo un buffer o • Medicina clínica
solución stock nucleótidos) aquaticus (mQ) Libre de tampón TAE o • Diagnóstico de enfermedades infecciosas
(2,5 mM) Forward Y Reverse: DNAsas, TBE. • Demostración de genes indicadores de
• Concentración RNAsas, patología
final en la • Concentración Proteasas • Oncogenes
reacción (0,25 inicial en solución Máxima pureza: • Genes supresores de tumor
mM) stock (10 uM (10 Estéril para
• Estudio y pronóstico de tumores.
• Volumen para pmol/uL) PCR (A0103)
20 uL (2) • Concentración
final en la
reacción (10 uM (
10 pmol / uL)
• Volumen para 20
uL (0,2)

• 100 µl de • Sonda • Cuantificación de la expresión genética

qPCR o PCR en mezcla de 2 (forward – reverse) Mg++ 0.5 y 2.5 Taq polimerasa Agua ultrapura 95 ° C por 5 50 °C – 60 °C 72° C por 30 Puede variar de fluorogenica: • Verificación de microarrays
tiempo real dNTP, 10 mM 0,375 uL. mM obtenida a partir de calidad tipo I. minutos por segundos 40, 35 y 30 ciclos. TaqMan • Control de calidad y validación de
de cada uno de Los cebadores deben Thermus aquaticus (mQ) Libre de 45 segundos • Colorante de ensayos
dATP, dCTP, tener nucleótidos de DNAsas, unión al ADN de • Detección de patógenos
dGTP y dTTP longitud entre (18 -24) RNAsas, doble hebra • Genotipada de SNP
Proteasas especifico: • Variación del número de copias
Máxima pureza: SYBR Green • Análisis de microARN
Estéril para
• Cuantificación viral.
PCR (A0103)

• 100 µl de • Primer oligo(dT) • La transcriptasa 90 °C – 94 °C por 50° C – 60 °C 72 °C por 7 30 – 40 ciclos • Sondas • Diagnóstico de tumores
mezcla de (12 -18 • MgCl2 (1,5 inversa del virus 2 minutos por 15 minutos minutos. fluorescentes. • Respuesta a medicamentos en cuanto a
dNTP, 10 mM deoxitimidinas) mM) de la Agua de grado • Electroforesis cáncer humano
de cada uno de • Primers • Mg ++ 0.5 - mieloblastosis RT-PCR, no en gel de • Genotipado de muestras a partir de la
dATP,, dCTP, específicos (SSPs, 2.5 mM aviar (AMV), tratada con agarosa o cuantificación y diferenciación de alelos
RTPCR o dGTP y dTTP Sample Specific posee actividad DEPC. El agua poliacrilamida. • Detección de polimorfismos llegando
retrotrancriptasa Primers) (RT - ARNasa H de calidad RT- incluso a detectar polimorfismos
inversa PCR PCR de un solo PCR está nucleotídicos (SNP)
paso ) • Transcriptasa certificada
• Random primers inversa originada como carente
(aproximadamente del virus de de
6 nucleotidos) leucemia murina endonucleasas
Moloney (M- y de
MLV)que carece contaminación
sustancialmente con ácidos
de actividad de nucleicos que
ARNasa H puede causar
falsas señales
• Transcriptasa positivas en la
inversa, RT-PCR
retrotranscriptasa
rTth ADN
polimerasa de
Thermus
thermophilu

• Visual • Detección rápida de ARN de coronavirus

Amplificación dNTPs de 10 mM en 4 – 6 cebadores La enzima utiliza • Bst polimerasa Agua ultrapura no son necesarios • Flujo lateral (COVID-19)
isotérmica un volumen de 3.5 uL • Externos F3 (2 el cofactor Mg+2 obtenida Bacillus calidad tipo I. ciclos de cambio • Gel • Detección directa de ARN de SARS-CoV-
Mediada por (1.4 mM final) µM) y B3 (2 µM) que a su vez stearothermophil (mQ) Libre de de temperatura • Turbidez 2 del medio de transporte universal
bucle (LAMP) • Internos FIP (16 puede ser us (66 °C) DNAsas, • Utiliza temperatura constante de 60 – 65 °C para la separación • Fluorescencia • Filariasis en humanos e insectos
µM) y BIP (16 µM) utilizado como RNAsas, de las hebras
• Aplicaciones de campo de calidad de
• Bucle LF (4 µM) ayuda para la • Bsm polimerasa Proteasas como sucede en la
reacción de obtenida de Máxima pureza: PCR agua y alimentos
(hacia adelante) y
LB (4 µM) (hacia detección Bacillus smithii Estéril para • Detección del virus Zika en muestras
atrás) (63 °C) PCR (A0103) humanas.

• N/A (WGA) • Investigación forense

• PEP - PCR • Phi29 ADN Agua ultrapura • Enfermedades Genéticas
Amplificación dNTPs de 10 mM en (cebadores Mg++ polimerasa (25 - calidad tipo I. • Nuevas tecnologías como secuenciación
del genoma un volumen de 3.5 uL aleatorios) (100 mM) 40 °C) (mQ) Libre de • Utiliza temperatura constante de 30 °C no son necesarios de próxima generación y la matriz CGH
completo (1.4 mM final) • DOP – PCR • Bst ADN DNAsas, ciclos de cambio ( hibridación genómica comparativa)
(WGA) y (cebadores polimerasa (66 RNAsas, de temperatura • Secuenciación de sanger
Amplificación semidegenerados) °C) Proteasas para la separación • Genotipado con microarrays
de (10 – 5 uM) Máxima pureza: de las hebras • Genotipado de polimorfismo de
desplazamient Nota: el genoma se Estéril para como sucede en la nucleótido único
o múltiple amplifica durante la PCR (A0103) PCR
(MDA) reacción de
 amplificación por
desplazamiento múltiple
(MDA)

• 2 cebadores • MgCl2 ADN polimerasa Agua ultrapura no son necesarios • Fluorescencia. • Diagnostico de carga viral
dNTPs de 10 mM en externos de (100mM) desplazamiento de calidad tipo I. ciclos de cambio (en tiempo real • Análisis serológicos
un volumen de 3.5 uL protuberancia cadena generalmente (mQ) Libre de • Utiliza temperatura constante de 60 °C de temperatura usando tintas o • Detección de variables genéticas de virus
(1.4 mM final) • 2 cebadores Concentración DNAsas, para la separación sondas con alta tasa de mutación
Amplificación de internos con final recomendada • Bst ADN RNAsas, de las hebras intercalantes)
desplazamiento regiones de cola de 3 – 3,5 mM polimerasa Proteasas como sucede en la
de hebra (SDA) 5´ que contienen Máxima pureza: PCR
sitio de • Fragmento Estéril para
reconocimiento de grande o PCR (A0103)
la enzima fragmento klenow
melladora (3’ – 5´exo)

Mg++ • ADN polimerasa l no son necesarios • Flujo lateral • Detección de marcadores de seguimiento
Amplificación Como la PCR solo (100 mM) E. coli UvrD Agua ultrapura ciclos de cambio • Fluorescencia en fuentes microbiana.
dependiente de dNTPs de 10 mM en requiere 2 cebadores. • ADN polimerasa calidad tipo I. • Utiliza una temperatura constante de 65 °C de temperatura (sondas marcadas • Detección rápida de patógenos
helicasa (HDA) un volumen de 3.5 uL • Biotinilados Concentración ll E. coli UvrD (mQ) Libre de para la separación con un extintor y un • Empleada en varios dispositivos de
(1.4 mM final) • Específcos final recomendada DNAsas, de las hebras
(75 – 100 nM) de 1,5 – 3,0 mM • Helicasa RNAsas, como sucede en la
fluorocromo) diagnóstico y pruebas aprobadas por la
FDA.
termoestable Tte Proteasas PCR
– UvrD de Máxima pureza:
Estéril para
Thermoanaerobacter
PCR (A0103)
tengcongenesis

• RPA utiliza 2 • Bsu ADN Agua ultrapura no son necesarios • Fluorescencia • Detección de patógenos en humanos y
Amplificación oligonucleótidos • Mg polimerasa calidad tipo I. ciclos de cambio • Flujo lateral animales y recientemente para
de la dNTPs de 10 mM en como cebadores (CH3COO) obtenida a partir (mQ) Libre de • Utiliza una temperatura constante de 37 °C de temperatura enfermedades en plantas y la detección
recombinasa un volumen de 3.5 uL inversos • Mg++ (100 de Bacillus DNAsas, para la separación de begomovirus
polimerasa (1.4 mM final) • SIBA incluye un mM) subtilis RNAsas, de las hebras • Aplicación de amplificación de
(RPA) y la oligo de invasión Concentración Proteasas como sucede en la recombinasa polimerasa con flujo lateral
amplificación mas largo final recomendada Máxima pureza: PCR para una detección a simple vista de
basada en la de 1,5 – 3,0 mM Estéril para Lysteria monocytogenes en superficies
amplificación PCR (A0103) de procesamientos de alimentos.
de cadena • Amplificación de recombinasa polimerasa
(SIBA) (RPA) combinada con inmunoensayo de
flujo lateral para la detección rápida de v
Salmonella en alimentos.
•

Amplificación • Uno de los • Mg++ (100 • RNasas H de E. Agua ultrapura no son necesarios • Fluorescencia • Evaluación de la seguridad
basada en dNTPs de 10 mM en cebadores debe mM) coli calidad tipo I. • Utiliza una temperatura constante de 40° C ciclos de cambio (Molecular microbiológica y la autenticidad de
secuencia de un volumen de 3.5 uL incluir una Concentración • Transcriptasa (mQ) Libre de – 55 °C de temperatura Beacon o sonda productos cárnicos
ácidos (1.4 mM final) secuencia final recomendada inversa del virus DNAsas, para la separación de hibridación) • Usadas en variedad de diagnósticos
nucleicos promotora de la de 1,5 – 3,0 mM de la RNAsas, de las hebras clínicos
(NASBA) y ARN polimerasa mieloblastosis Proteasas como sucede en la
amplificación de T7 en el aviar (AMV) Máxima pureza: PCR
mediada por extremo 5´ • ARN polimerasa Estéril para
transcripción • Cebador a+: del fago de T7 PCR (A0103)
(TMA) presenta una
secuencia
complementaria al
extremo 5´ de la
molécula de ARN
• Cebador b-: este
cebador es
complementario al
extremos 3´ del
ARN y además
presenta una
secuencia
promotora de t7
en 5´,

INTEGRANTES.

• Adriana Lucia Bautista

• Lorena Pamplona
• Martha Liliana Bonilla
• María Gabriela Castillo
• Liseth Hernández Caballero
• David Murcia Gómez
Referencias
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