Met A Hemoglobin A
Met A Hemoglobin A
Met A Hemoglobin A
Preparado por:
P. Oliver Sáez, A. Buño Soto, A. Galán Ortega, R. Díaz García, P. Guevara Ramírez, E. Guillén Campuzano,
S. Malumbres, J.L. Marín Soria, M. Muñoz Pérez, X. Navarro Segarra, E. Oujo, N. del Río Barcenilla.
1. INTRODUCCIÓN
Una de las actividades más comunes en las unidades que atienden
pacientes críticos es la evaluación del estado de oxigenación. Durante
este proceso hay que contemplar cuatro aspectos generales relacio-
nados entre sí: captación de oxígeno a nivel pulmonar, capacidad
de transporte, liberación a los tejidos y utilización del mismo en el
metabolismo celular. Estas fases son inseparables funcionalmente (1).
La concentración de hemoglobina total (ctHb) es una medida de la
capacidad potencial total de transporte de oxígeno. Según las modifi-
caciones químicas o ambientales que se produzcan en su estructura,
se denominan los distintos derivados de la hemoglobina, siendo los
más importantes: oxihemoglobina (O2Hb), deoxihemoglobina (HHb), Figura 1. Curva de disociación de oxígeno (CDO) (3)
1
Composición de la Comisión:
A. Buño Soto (Presidente), R. Díaz García, A. Galán Ortega, P. Guevara Ramírez, E. Guillén Campuzano, S. Malumbres, J.L. Marín Soria, M. Muñoz Pérez, X. Navarro Segarra,
P. Oliver Sáez, E. Oujo, N. del Río Barcenilla.
Realizar una revisión sobre aspectos fisiopatológicos y analíticos Población ctHb (g/dL)
de la medición de hemoglobina total y sus fracciones, así como es-
tablecer recomendaciones para su estudio a través de la cooximetría. Recién nacidos 15,0-21,0
Lactantes 9,5-12,5
3. LA HEMOGLOBINA TOTAL Niños 11,0-13,5
Y SUS FRACCIONES
Mujeres 11,5-15,5
3.2. Oxihemoglobina
La fracción de oxihemoglobina (FO2Hb (%) = cO2Hb / ctHb x 100)
Fig. 2. Estructura de la O2Hb (4) hace referencia al porcentaje de hemoglobina con Fe2+ unida al
oxígeno de forma reversible con respecto a la ctHb (5). Los valores
La determinación de la ctHb se realiza principalmente para la de referencia en el adulto en sangre arterial son 94-98% (3).
detección de anemia y la evaluación de su severidad. La anemia se A menudo es erróneamente denominada “saturación de oxígeno”.
define como un descenso de la ctHb por debajo de los valores de Sin embargo, la saturación de oxígeno, sO2 (%), se relaciona con
referencia (tabla I) (4) y conlleva una reducción en la capacidad la capacidad efectiva de transporte del mismo: cO2Hb / (cO2Hb +
de transporte de oxígeno. La razón por la cual la determinación de cHHb) x 100. Como habitualmente la mayor parte de los pacientes
la ctHb es frecuentemente solicitada es porque la anemia está pre- no presentan niveles significativos de dishemoglobinas (COHb,
sente en diversas patologías, muchas relativamente frecuentes (4): MetHb, SHb), la O2Hb y la sO2 suelen ser similares, lo cual explica
hemorragias agudas y/o crónicas, deficiencias nutricionales, tumores la confusión (1, 3, 5). La relación entre la FO2Hb y la sO2 medida
sólidos malignos, enfermedades inflamatorias crónicas, infecciones es: FO2Hb = sO2 x (1- FCOHb - FMetHb). De esta forma, en caso
crónicas, enfermedades endocrinas, patologías hematológicas, de existir una dishemoglobinemia, disminuiría la FO2Hb, pero no
defectos genéticos en la estructura de la hemoglobina, defectos la sO2 (5).
También es posible calcular la saturación de oxígeno (sO2 estimada celular a través del sistema NADH-citocromo reductasa (1, 2).
o calculada), en la cual no es necesario determinar las diferentes Este proceso mantiene los niveles de MetHb en valores bajos. De
fracciones de la hemoglobina ya que se deduce a partir de la presión hecho, los niveles normales de MetHb a menudo se encuentran por
parcial de oxígeno medida y una ecuación basada en la curva CDO debajo del límite de detección de los oxímetros (<1,5%) (1). Sin
(5). Estos cálculos tienen en cuenta una concentración normal de embargo, la deficiencia genética de la reductasa y/o la exposición
ctHb, ausencia de dishemoglobinas y HbF, e incluyen una correc- a agentes oxidantes puede elevar los niveles de MetHb y por tanto
ción por la temperatura, pH y pCO2. Tampoco tienen en cuenta la contribuir significativamente a una hipoxia tisular. La presencia
concentración intraeritrocitaria de difosfoglicerato, que se puede ver de MetHb desplaza la curva CDO a la izquierda, comprometiendo
afectada por transfusiones de sangre y diversos factores químicos, la liberación de oxígeno a los tejidos (1). El paciente puede estar
alterando el equilibrio entre hemoglobina y oxígeno. Por ello, es asintomático con valores inferiores al 15%. Por encima del 60% se
importante recordar que es recomendable informar la sO2 medida, puede producir confusión, convulsiones y muerte (6).
esto es, a través del análisis de la ctHb y sus fracciones (1, 3, 5). La metahemoglobinemia hereditaria se presenta con poca fre-
cuencia en población de raza caucásica. Es una enfermedad genética
3.3. Deoxihemoglobina con transmisión autosómica recesiva y está relacionada con una
deficiencia en el enzima NADH-citocromo b5 reductasa. Algunas
La fracción de deoxihemoglobina (FHHb (%) = cHHb / ctHb x 100)
variantes de la hemoglobina que estabilizan la forma férrica del
relaciona la concentración de la hemoglobina no unida a oxígeno
hierro están asociadas a la metahemoglobinemia familiar autosómica
con respecto a la ctHb. Los valores de referencia en el adulto en
dominante. Como tratamiento, se emplea la administración de ácido
sangre arterial son inferiores al 5%. Es uno de los derivados de
ascórbico o azul de metileno (2, 6).
hemoglobina capaz de transportar de forma efectiva el oxígeno.
Cada vez está más asentado el hecho de que siempre que el
Situaciones que conlleven una baja captación pulmonar de oxígeno
monóxido de carbono esté implicado, se recomienda determinar
pueden elevar sus niveles.
tanto COHb como MetHb. En muchas circunstancias en las que la
COHb está elevada, también encontramos niveles de MetHb au-
3.4. Carboxihemoglobina mentados, especialmente cuando existe un antecedente de pérdida
La carboxihemoglobina (COHb (%) = cCOHb / ctHb x 100) de conciencia (1).
se forma por la unión del monóxido de carbono a la hemoglobina,
cuya afinidad por la misma es 240 veces mayor que la que presenta 3.6. Sulfohemoglobina
el oxígeno (6). Además de desplazar al oxígeno, el monóxido de
La sulfohemoglobina (SHb (%) = cSHb / ctHb x 100) se forma
carbono entra en las células e inhibe las rutas metabólicas oxidativas.
a través de la reacción de compuestos de sulfuro con el grupo hemo
Estos efectos conducen a una hipoxia tisular, acidosis y depresión
de la hemoglobina, produciendo una alteración química irreversible
del sistema nervioso central (1).
y oxidación de la misma por la introducción de sulfuro en uno o
En condiciones normales, esta fracción suele encontrarse en
más de los anillos de porfirina. La causa más común de sulfohemo-
valores <1%, pudiendo aumentar en fumadores a 6-8% (1). Se
globinemia es la exposición a fármacos (fenacetina, sulfonamidas,
considera que, para poder realizar trabajos manuales pesados o ta-
etc). La SHb no puede transportar oxígeno, produciendo cianosis
reas complejas, es necesario que esta concentración esté por debajo
incluso a bajas concentraciones (2).
del 10%. Los niveles entre 15 y 25% se asocian a fatiga, cefalea y
náuseas, pudiéndose producir convulsiones, coma y muerte cuando
alcanzan valores cercanos al 50% (2, 6). El tratamiento recomendado
es la terapia con oxígeno, siendo posible requerirlo a alta presión 4. DETERMINACIÓN DE LA HEMOGLOBI-
en cámaras hiperbáricas en casos graves para intentar conseguir NA TOTAL Y SUS DERIVADOS
su unión a la hemoglobina, desplazando al monóxido de carbono,
el cual en estas condiciones es eliminado de forma efectiva (1). La primera metodología para la determinación de la hemoglobina
se remonta a hace más de un siglo. En ella se transformaba la hemog-
3.5. Metahemoglobina lobina en COHb, que era más estable. A partir de 1950, se desarrolló
la espectrofotometría y el método de la ciano-MetHb. Poco a poco,
El átomo de hierro presente en el grupo hemo de la hemoglobina
los analizadores de hematología fueron incorporando éste y otros
normalmente se encuentra en su estado reducido (Fe2+). En medio
métodos. En las dos últimas décadas, los avances se han centrado
alcalino, el hierro se oxida (Fe3+) por la acción de componentes
en el desarrollo de métodos que permitieran una determinación de
nitrogenados de la dieta (más frecuente en pediatría) o agentes
hemoglobina a la cabecera del paciente (POCT) (4). A continuación
tóxicos como fármacos (quinolonas, fenacetina, sulfonamidas,
se comentan algunas características de las diferentes metodologías.
etc.), anestésicos locales (procaína, benzocaína, lidocaína, etc.),
exposición a agentes industriales, cianoderivados, óxido nitroso
empleado en el tratamiento de hipertensión pulmonar, nitratos y 4.1. Método de la ciano-metahemoglobina
nitritos empleados en agricultura y en la industria de explosivos, Fue adoptado como método de referencia por el Comité Interna-
antorchas de acetileno empleadas en empresas de fabricación y cional de Estandarización de Hematología (ICSH) (4) y el Clinical
reparación, producción de ensilaje en granjas, etc. and Laboratory Standards Institute (CLSI) (5). Está basado en
Esta oxidación convierte al grupo hemo en hematina y a la la transformación de hemoglobina a ciano-MetHb tras sucesivas
hemoglobina en metahemoglobina (MetHb (%) = cMetHb / ctHb reacciones. La ciano-MetHb es un compuesto estable que presenta
x 100), produciendo cianosis en el individuo ya que es incapaz un pico máximo de absorbancia a 540 nm y obedece a la ley de
de unir de forma reversible el oxígeno (2). En individuos sanos, Lambert-Beer. La absorbancia de la muestra se compara con una
el Fe3+ de la MetHb es reducido de forma natural en el interior solución de ciano-MetHb estandarizada de absorbancia y con-
que son necesarias por ejemplo en recién nacidos prematuros con el estudio de gases y equilibrio ácido base (9). Existen aspectos
COHb endógena generada por una anemia hemolítica. Asimismo, acerca del contenedor de la muestra, el tipo y proporción de anti-
podría no ser de utilidad para determinar incrementos moderados coagulante, el tipo de muestra, las formas de obtención de la misma
en zonas industriales. Para determinaciones más precisas de COHb y su posterior manejo y conservación.
en el rango normal (FCOHb<0,05%), el método de elección sería En el estudio de cooximetría son especialmente relevantes las
la cromatografía de gases (5). En relación a la Hb F, su espectro de siguientes consideraciones (5,9):
absorbancia difiere ligeramente de la Hb A y por ello sus errores
no siempre se tienen en cuenta. El error más común es la falsa ele- • Utilizar un contenedor de muestra con una proporción adecuada
vación de FCOHb y/o MetHb (7). Otras hemoglobinas diferentes de anticoagulante para evitar un posible efecto dilucional o, por el
a la Hb A (hemoglobina Kansas, hemoglobina Yakima, etc...) con contrario, la coagulación de la muestra.
distinto espectro de absorbancia, también pueden llevar a error en • Emplear sangre arterial o sangre capilar “arterializada”, por ser
el estudio de cooximetría convencional (5). A su vez hay estudios los tipos de muestras útiles para evaluar el estado de oxigenación
que avalan que, cuando se administra hidroxicobalamina o azul de del paciente. La sangre venosa puede emplearse para determinar
metileno como medida terapéutica en presencia de MetHb elevada, dishemoglobinas COHb y MetHb.
se produce una interferencia en la determinación de los derivados • Procesar la muestra lo antes posible tras su extracción para evitar
de hemoglobina. Algunos analizadores son capaces de detectar y la alteración de la misma. El tiempo máximo de conservación a tem-
corregir estas interferencias. La turbidez elevada de la muestra pro- peratura ambiente recomendado es de 30 minutos tras la extracción.
ducida por hiperlipemia parece que también tiene una repercusión • Realizar una correcta homogeneización y purgado de la muestra
significativa en el estudio de la cooximetría (5). antes de su procesamiento para que no se produzca sedimentación
A partir de la medición de la ctHb se obtienen otras magnitudes celular, apareciendo una fase rica en células y otra rica en plasma.
importantes. Junto con la presión parcial de oxígeno, es útil para En ese caso, en función de la fracción analizada, la ctHb estaría
determinar una magnitud relevante en la evaluación del transporte sobre o infraestimada.
de oxígeno a los tejidos, la concentración total de oxígeno (5). Por
otra parte, algunos analizadores de gases en sangre son capaces de
calcular además el hematocrito (HTO) a partir de la ctHb, o bien 6. RECOMENDACIONES
medirlo mediante conductimetría. En el primer caso, el cálculo del
hematocrito se basa en la concentración de hemoglobina corpuscular
1. Para una adecuada valoración del estado de oxigenación de
media (CHCM): CHCM = Hb (g/dL) x 100 / HTO (%). Se asume
un paciente es necesario realizar un estudio con cooximetría. Con
una CHCM normal de 34% y, por ello, valores diferentes pueden
ella se va a poder medir la concentración total de hemoglobina, las
afectar al valor informado del hematocrito (5). Además, actualmente
fracciones de hemoglobinas funcionales y las dishemoglobinas.
pueden realizarse determinaciones de bilirrubina en el cooxímetro
2. Es recomendable poder determinar además de la hemoglobina
de algunos analizadores de gases. Los resultados obtenidos por
total, las fracciones de oxihemoglobina, deoxihemoglobina, car-
espectrofotometría en general correlacionan adecuadamente con
boxihemoglobina y metahemoglobina. Otras posibles fracciones
los métodos habituales de laboratorio, aunque son necesarios más
serían la sulfohemoglobina y la hemoglobina fetal.
estudios que aseguren una adecuada precisión y exactitud, especial-
3. Se recomienda informar la saturación de oxígeno medida a
mente a niveles elevados en muestras de neonatos (8).
través de la cooximetría en detrimento de la calculada, debido a que
A diferencia de los cooxímetros, los oxímetros básicos, más
en esta última se consideran una serie de parámetros normales que
frecuentemente denominados pulsioxímetros, sólo utilizan dos
podrían no ser ciertos y podría conllevar un error en la valoración
longitudes de onda, una para la O2Hb y otra para la HHb. Pueden
del estado de oxigenación del paciente.
medirse a través de la piel, permitiendo una monitorización no
4. Es posible realizar la cooximetría tanto en los laboratorios clíni-
invasiva de la sO2. En muchos casos puede resultar útil emplear
cos como en unidades POCT, ya que en la actualidad muchos de los
un pulsioxímetro ya que permite una cómoda monitorización no
analizadores de gases llevan incorporados cooxímetros. Ello permite
cruenta, sin pérdida de sangre y con menor coste. Sin embargo, en
el estudio conjunto de gases en sangre y cooximetría, obteniendo
casos de intoxicación con monóxido de carbono u otras sustancias
resultados de forma rápida, fácil y con un escaso volumen de muestra.
que afectan a la hemoglobina, los resultados pueden llevar a error
5. Es posible monitorizar de forma no invasiva la saturación de
al no valorar la presencia de dishemoglobinas (1,3,5). Actualmente
oxígeno del paciente mediante pulsioxímetros. Los resultados ob-
existen pulsioxímetros de nueva generación que utilizan longitudes
tenidos muestran una buena correlación con los de la cooximetría,
de onda capaces de medir COHb y MetHb. Éstos presentan buena
aunque en determinadas circunstancias (presencia de dishemoglo-
correlación con los cooxímetros. En general, para obtener un valor de
binas) podrían ofrecer información incompleta de la capacidad de
sO2 real, determinar la capacidad efectiva del transporte de oxígeno
transporte de oxígeno del paciente.
o evaluar la causa de cualquier hipoxia clínica, no se recomienda
6. Desde un punto de vista preanalítico, es importante tener en
utilizar un pulsioxímetro (1,5).
cuenta las mismas consideraciones que las relacionadas con el estudio
de gases debido a que los cooxímetros suelen estar incorporados en
los analizadores de gases en sangre.
5. CONSIDERACIONES PREANALÍTICAS
DE LA COOXIMETRÍA
7. BIBLIOGRAFÍA
En general y, dado que los cooxímetros suelen estar incorporados
en los analizadores de gases en sangre, es importante tener en cuenta 1. Moran R.F. Application of hemoglobin derivatives in STAT analysis.
las mismas consideraciones preanalíticas que las relacionadas con Blood Gas News 1999. 8:4-11