Lab Fisio Prac 3 Pigmentos Reporte No. 3

Universidad de San Calos de Guatemala
Facultad de Agronomía
Área de Ciencias
Subarea de ciencias biológicas
Lab. Fisiología Vegetal
Aux. Luis Sánchez
PRÁCTICA # 3
PIGMENTOS CELULARES
Angel Alberto Valle Pérez

200410740
Gua. 23 - 02 -2006
Jor. Jueves Vespertina
INTRODUCCION
La energía que posibilita la vida de la gran mayoría de los seres vivos en la tierra
procede directa o indirectamente del sol, a través del proceso fotosintético; en líneas
generales, éste consiste en la reducción del CO2 atmosférico por medio del H+ del agua
obtenido con la energía proveniente de las radiaciones electromagnéticas del sol, así la
planta almacena la energía electromagnética como energía potencial química en los
compuestos orgánicos.
Los compuestos carbonados ricos en energía obtenidos así son usados después como
fuente energética por la propia planta y por otros organismos que son incapaces de
fabricar sus propios alimentos, pero sí pueden aprovechar la materia vegetal. Los
aspectos energéticos de los alimentos adquieren especial importancia si se considera la
"vida" como una serie de transformaciones controladas, interrelacionadas y
coordinadas, cuyo cese determina la muerte.
La energía lumínica pueda ser utilizada por los sistemas vivos, primero debe ser
absorbida y quienes realizan esta función son los pigmentos fotosintéticos. Los
pigmentos son sustancias que absorben luz; algunos absorben luz de todas las longitudes
de onda y, por lo tanto, parecen negros. Otros, solamente absorben ciertas longitudes de
onda, transmitiendo o reflejando las longitudes de onda que no absorben.
La sustancia que absorbe la energía radiante que incide en la planta es la clorofila,
molécula de pigmento incluida en la unidad estructural fotosintética llamada
cuantosoma que corresponde a una parte del tilacoide. Además de las clorofilas a y b,
en el cloroplasto de plantas superiores hay otro grupo de pigmentos, los carotenoides
con las carotinas y xantofilas. En las algas, junto a la clorofila a, se encuentran otras,
como la c o la d, y pigmentos accesorios: fucoxantinas y ficoeritrinas.
La luz solar, necesaria para el proceso como fuente de energía, se compone de
longitudes de onda entre 380 nm y 760 nm, correspondientes a luz monocromática de
diferentes colores y cuya suma produce luz blanca. Sin embargo, la clorofila absorbe
sólo ciertas longitudes de onda (rojo y azul), y no las otras.
En las células de los vegetales superiores pueden encontrarse otros pigmentos
denominados antocianinos que determinan en especial el color de las flores y algunos
matices en hojas y otras estructuras, estos son solubles en agua y se encuentran disueltos
en el jugo vacuolar.
En el presente reporte de laboratorio se abarcara la descripción de la hoja y su estructura
en relación con el proceso fotosintético, así como la formación de azucares y conversión
a almidón a partir del proceso fotosintético.
OBJETIVOS
 Identificar y distinguir los pigmentos fotosintéticos que se encuentran
comúnmente en la célula vegetal.
 Separar los pigmentos fotosintéticos del cloroplasto con la técnica de
cromatografía en papel.
 Cuantificar el contenido de clorofila por medio de una técnica simple.
 Extraer e identificar a los pigmentos no fotosintéticos, situados en el vacúolo,
que coexisten con los fotosintéticos muchas veces enmascarándolos.
RESULTADOS
Separación de los pigmentos fotosintéticos y fluorescencia de la clorofila:
2 gr. Hojas de espinaca + cuarzo + CaCO3 + 7 ml acetona
Luego de ser sometida la clorofila a la cámara cromatográfica, obtuvieron los siguientes

datos: (Vistos gracias a la luz ultravioleta)
1. 2. y 4.
Posición (Arriba Rf del

Color Pigmento
hacia abajo) pigmento
12 cms Naranja Carotenos 1
4 cms Verde/blanco Clorofila A 0.33
3 cms Naranja Carotenos 0.2
2.8 cms Amarillo oscuro Xantofila 0.23
2.7 cms Verde oscuro Clorofila B 0.225
2.6 cms Naranja Carotenos 0.22
2 cms a 0 cms Verde Extracto 0.17
3. Estructuras de los pigmentos (Ver anexo 1), Pigmentos encontrados y su localización:
Las clorofilas se encuentran en los cloroplastos de cada célula.

Los carotenos que son un pigmento amarillo anaranjado, se encuentran en ciertas
células vegetales y da su color a especies como la zanahoria.
Las xantofilas, son unas sustancias cristalinas de color café oscuro, que se encuentra
juntamente con la clorofila en los cloroplastos de las plantas.
5. Estructura de la clorofila (Ver anexo 1), en que difieren las clorofilas a y b:
Ambas son los tipos de clorofila mas abundantes en las plantas, la ligera diferencia entre
ambas es su estructura, ya que la clorofila b cuenta con un oxígeno mas y dos
hidrógenos menos que la clorofila a, aparte todas las plantas verdes tienen clorofila a,
pero mucha algas y algunos otros vegetales carecen de clorofila b.
6. ¿Que factores intervienen en sus síntesis?
La temperatura, la cantidad de luz solar recibida o energía lumínica capaz de atrapar, la

concentración de CO2.
7. ¿Cuáles son los pigmentos acompañantes de la clorofila en el cloroplastidio?
Junto con las clorofilas a y b, podemos encontrar a los carotenos, las xantofilas; la
ficocianina y la ficoeritrina (en algas rojas y verdeazules).
8. ¿Se mantendrá un Rf de un compuesto si se cambian los solventes en una
cromatografía?
Si ya que el Rf va a depender de los pigmentos que contenga el compuesto, ya que en

todas las separaciones cromatográficas, la muestra se desplaza con una fase móvil, que
puede ser un gas, un líquido o un fluido supercrítico. Esta fase móvil se hace pasar a
través de una fase estacionaria con la que es inmiscible, y que se fija a una columna o a
una superficie sólida. Aunque si la muestra (mancha) no es coloreada por un método, se
requiere de métodos extras que nos permitan visualizar el (los) componente(s)
presentes. También se conoce este procedimiento como Revelado.
9. ¿Cuál es la diferencia entre Fluorescencia y Fosforescencia?
En que la fluorescencia es una propiedad que tienen ciertos cuerpos de transformar la

luz que reciben en radiaciones de mayor longitud de onda. Esta propiedad es la base del
moderno alumbrado fluorescente, mientras que la fosforescencia es la luz emitida por
substancias iluminadas con colores que no están presentes en la radiación iluminadora.
También se llama fosforescencia a la luz emitida por organismos vivientes que sin
embargo, debía llamarse bioluminiscencia. En la fosforescencia la emisión de luz
continúa aún después de extinguirse la iluminación, cosa contraria a la fluorescencia
que emite luz de colores alterados solamente durante la iluminación.
Determinación cuantitativa de las clorofilas:
nm Índice absorvencia Índice transmitancia

645 0.35 45 %
652 0.44 36 %
663 0.45 355
2. Cálculos de la cantidad de clorofila presente en el extracto:
Clorofila a = 12.7 ( ) – 2.69 ( ) * V / 1000 * pf

Clorofila b = 22.9 ( ) – 4.68 ( ) * V / 1000 * pf
Clorofila total = 20.2 ( ) + 8.02 ( ) * V / 1000 * pf
Clorofila total = * 1000/ * V / 1000 * pf
3. En las ecuaciones de cálculo propuestas, que importancia tienen los coeficientes

usados:
La importancia radica en que son los datos numéricos o coeficientes exactos para
obtener los resultados en forma precisa y exacta, propios de cada ecuación. Todos los
coeficientes fueron establecidos en base a estudios realizados en dichas ecuaciones para
el cálculo de las clorofilas.
4. Importancia de.
D = la densidad óptica del extracto

V = volumen final del extracto de clorofila
Pf = peso fresco en gramos del tejido extraído
Otros pigmentos no fotosintéticos: los antocianos
Variaciones del color de un extracto de antocianos a diferentes valores de pH:
Color pH
Tratamiento
Inicial Final Inicial Final
Extracto original Violeta Violeta 8 8
Extracto con ácido acético Violeta Fusia 8 3
Extracto con NaOH Violeta Morado 8 10
1. ¿Que condiciones o factores determinan la expresión de color de los antocianos?
La descomposición de la clorofila verde, que deja expuesto en parte la

formación de los pigmentos rojos y púrpuras de los antocianos en la savia celular; aparte
deja expuestos a las xantofilas amarillas y a los carotenos anaranjados.
2. ¿Donde se localizan los antocianos?
En el jugo celular, así como en los cromoplastos, ya que son a menudo los
determinantes de la coloración de las partes toscas de los vegetales, aunque también se
encuentran disueltos en el fluido vacuolar.
DISCUSION DE RESULTADOS
La separación de los pigmentos fotosintéticos en hojas de espinacas se realizo

por medio de una cámara cromatográfica, la cual sirve para separar los pigmentos, por
medio de densidades, por la solubilidad del medio en que se encuentre y por la
capilaridad existente.
Al observar el papel cromatográfico Whatmann No.1, donde se realizo la
cromatografía, se observaron cinco bandas o zonas de color, que corresponden a los
distintos pigmentos fotosintéticos presentes en las hojas de espinaca. Según su grado de
solubilidad con el etanol se reconocen a los siguientes pigmentos en orden ascendente:
· Carotenos
· Clorofila B
· Xantofila
· Clorofila A
El pigmento que mas subió desde el borde del papel, fueron los carotenos que llegaron a
una distancia de 12 centímetros hacia arriba, aunque también fueron encontrados a
distancias de 3 y 2.6 centímetros, dando como resultado de Rf, 1, 0.25 y 0.22. La
clorofila A fue el segundo pigmento mas alto, con 4 centímetros, dando un color verde
claro y un Rf de 0.33; continuo a la clorofila a, encontramos a la Xantofila a una
distancia de 2.8 cms y con un Rf de 0.23. Y hasta el inicio del papel encontramos a la
clorofila b, a una distancia de 2.7 cms y con un Rf de 0.225.
Los antocianos son los responsables de dar color el color violeta a las flores de
bougambillia, las cuales dieron un pH casi neutro de 8 luego de ser sometidas al calor.
Un tubo de ensayo nos sirvió de testigo, con el pH de 8 y un color violeta; un segundo
tubo de ensayo con las mismas características del testigo, cambio su pH a 3, al
agregarle una gota de ácido acético, convirtiéndose así en una sustancia más ácida,
variando también su color a fusia, ya que se torno un poco menos intenso. El tercer
tubo de ensayo, también con las características del testigo, cambio su pH a 10, al
agregarle una gota de NaOH, convirtiéndose así en una sustancia más alcalina o básica,
variando también su color a morada, ya que se torno un poco mas intenso.
CONCLUSIONES
 La fotosíntesis es el proceso que permite a los vegetales obtener la materia y la

energía que necesitan desarrollar sus funciones vitales, se lleva a cabo gracias a
la presencia en las hojas y en los tallos jóvenes, de pigmentos, capaces de captar
la energía química.
 Entre los pigmentos mas comunes que podemos encontrar en los vegetales
podemos encontrar a: (todos con su posible coloración ante una cámara
cromatográfica)
PIGMENTO COLOR
Clorofila A Verde azulado
Clorofila B Verde amarillento
Carotenos Naranja
Xantofilas Amarillo
 Entre los distintos métodos que existen para separar y obtener los pigmentos de
la clorofila se encuentra el de la cromatografía, que es una técnica que permite la
separación de las sustancias de una mezcla y que tiene una afinidad diferente por
el disolvente en que se encuentran. De tal manera que al introducir una tira de
papel en esa mezcla el disolvente arrastra con distinta velocidad a los pigmentos
según la solubilidad que tengan y los separa, permitiendo identificarlos
perfectamente según sea su color.
BIBLIOGRAFIA
 NASON, Alvin. Biología. Editorial Limusa. Décima reimpresión, Trad. Por
Juan Luis Cifuentes y Guadalupe Nava de Cifuentes. México D.F. 1975. 726
p.p.
 VILLE, Claude A. Biología. Editorial Interamericana. Séptima edición, Trad.

Por Dr. Roberto Zarza. México D.F. 1978. 803 p.p.
 KIMBAL, John W. Biología. Fondo Educativo Interamericano S.A., Cuarta
edición, Trad. Por Luis Eduardo Mora. México D.F. 1982. 883 p.p.
 www.monografias-cpm
 www.botanica.cnba.uba.ar/Trabprac/Tp6/Pigmentos.htm
 http://www.whfreeman.com/life/update/.

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Angel Alberto Valle Pérez

Separación de los pigmentos fotosintéticos y fluorescencia de la clorofila:

2 gr. Hojas de espinaca + cuarzo + CaCO3 + 7 ml acetona

Luego de ser sometida la clorofila a la cámara cromatográfica, obtuvieron los siguientes

Posición (Arriba Rf del

3. Estructuras de los pigmentos (Ver anexo 1), Pigmentos encontrados y su localización:

Las clorofilas se encuentran en los cloroplastos de cada célula.

5. Estructura de la clorofila (Ver anexo 1), en que difieren las clorofilas a y b:

6. ¿Que factores intervienen en sus síntesis?

La temperatura, la cantidad de luz solar recibida o energía lumínica capaz de atrapar, la

Si ya que el Rf va a depender de los pigmentos que contenga el compuesto, ya que en

9. ¿Cuál es la diferencia entre Fluorescencia y Fosforescencia?

En que la fluorescencia es una propiedad que tienen ciertos cuerpos de transformar la

Determinación cuantitativa de las clorofilas:

nm Índice absorvencia Índice transmitancia

2. Cálculos de la cantidad de clorofila presente en el extracto:

Clorofila a = 12.7 ( ) – 2.69 ( ) * V / 1000 * pf

3. En las ecuaciones de cálculo propuestas, que importancia tienen los coeficientes

D = la densidad óptica del extracto

Otros pigmentos no fotosintéticos: los antocianos

Variaciones del color de un extracto de antocianos a diferentes valores de pH:

1. ¿Que condiciones o factores determinan la expresión de color de los antocianos?

La descomposición de la clorofila verde, que deja expuesto en parte la

2. ¿Donde se localizan los antocianos?

La separación de los pigmentos fotosintéticos en hojas de espinacas se realizo

 La fotosíntesis es el proceso que permite a los vegetales obtener la materia y la

Clorofila A Verde azulado

Clorofila B Verde amarillento

 VILLE, Claude A. Biología. Editorial Interamericana. Séptima edición, Trad.

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