Polisacáridos

Proteínas Ac. Nucl. Lípidos

Monosacáridos
Glicerol
Aminoácidos Nucleótidos Ácidos grasos

Glucosa

Gliceraldehído
3-Fosfato

Piruvato

Acetil-CoA

CO2

NH3 ADP O2

H 2O
 PIRUVATO
DESHIDROGENASA
PDH
MECANISMO DE ACCIÓN DE LA PIRUVATO
DESHIDROGENASA (PDH)
 Hans Adolf Krebs

• Nacio en Hildesheim, Alemania. Estudió en las

universidades de Gotinga, Friburgo, Munich, Berlín
y Hamburgo.

• En 1932, en colaboración con el bioquímico Kurt

Henseleit, identificó el conjunto de reacciones
químicas conocidas posteriormente como ciclo de
Hans Krebs la urea. Se dedicó a la docencia hasta 1933, año
en el que el auge del nazismo le impulsó
abandonar Alemania e instalarse en el Reino
Unido, donde trabajó como profesor de bioquímica
en la Universidad de Sheffield.
Recibio en 1953 el Premio Nobel de Medicina. Adscrito a la Universidad
de Oxford entre los años 1954 y 1967, entre sus obras cabe destacar
Transformaciones energéticas en la materia viva (1957, en colaboración
con el bioquímico británico H. Kornberg). Fue nombrado caballero en
1958 y recibió la medalla Copley de la Royal Society en 1961.

www.biografiasyvidas.com/biografia/k/krebs.htm
Ciclo de
Krebs
 Reacciones del Ciclo de KREBS

B
c

D
E
F

H
 Regulación
del ciclo de Krebs
Reacciones Anapleroticas
 Tema:12._Producción aeróbica de ATP

✔Objetivo 11._ Analizar la morfología de la mitocondria haciendo

hincapié en las funciones en las funciones que cumplen cada
una de sus partes en el proceso de extracción de energía
Estructura y Funciones de las Mitocondrias.

Son las organelas celulares

encargados de suministrar la
mayor parte de la energía
necesaria para la actividad
celular.

Actúan por tanto, como

centrales de la célula.

Sintetizan ATP, a expensas de

los carburantes metabólicos.
 Es una bicapa lipídica, que es
permeable a iones metabolitos
y polipéptidos.
Membrana Mitocondrial Externa: Tienen como función la
elongación de los ácidos
grasos, los ácidos grasos
desnaturalizan y síntesis de
Es impermeable a la mayoría fosfolípidos
de moléculas pequeñas H+.
Las únicas que cruzan esta
membrana son las que poseen Membrana Mitocondrial Interna:
transportadores específicos.
Poseen crestas.
Se localizan los enzimas
Aloja a los componentes de la responsables de la oxidacion
cadena respiratoria. de Acidos grasos, aa, acido
pirúvico y el ciclo de Krebs.
Se encuentran dispersas en la
Matriz Mitocondrial: matrizmoleculas de ADN Y
pequeños ribosomas.
 FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

∙ La fosforilación oxidativa se refiere a la síntesis química

de ATP impulsada por el proceso exergónico de
transferencia de electrones desde el NADH al O2
∙ La fosforilación oxidativa junto con la fotofosforilación
(síntesis de ATP impulsada por luz) son los dos procesos
transductores de energía más importante en la biósfera
∙ La mayor parte del ATP sintetizado por los organismos
aeróbicos es consecuencia de la fosforilación oxidativa
y de la fotofosforilación
 Cadena de transporte

• Ocurre en la mitocondria

• La fosforilación oxidativa comienza con la entrada de e- en la cadena

respiratoria

• Los e- pasan a través de una serie de transportadores incluidos en la

membrana interna mitocondrial
Translocación de H+ asociada al flujo de electrones

Espacio intermembranas (Lado P) pH = 7.0

pH = 7.8
Matriz (Lado N)

∙ Por cada par de e- transferidos al O2, 4 H+ son bombeados por el

Complejo I, 4 H+ por el Complejo III y 2 H+ por el complejo IV; todos
ellos desde la matriz mitocondrial (Lado N), hacia el espacio
intermembranas (Lado P)

NADH + 11 H+ (N) + 1/2 O2 ⎯⎯→ H2O + NAD+ + 10 H+ (P)

Vamos a estudiar una reacción en la que juntaremos dos pares Redox en un recipiente :

Aoxi + e- Ared
E0´ = + 250 mV
e
-
Boxi + e- Bred E0´ = - 415 mV

En el primer par la forma oxidada tiene mucha afinidad por los electrones. En el
segundo par la forma oxidada tiene poca afinidad por los electrones. Por lo tanto, si
juntamos ambos pares en la misma cubeta en condiciones equimoleculares, la
reacción se realizará en la dirección :

Aoxi + Bred Ared + Boxi

En que el par de menor potencial potencial Redox cede electrones al de mayor potencial
La diferencia entre el potencial Redox de ambos pares nos indica la dirección y grado
de espontaneidad de la reacción :
Par A E0´ = + 250 mV
Aoxi + Bred Ared + Boxi
Par B E0´ = - 415 mV

DE0´ = + 665 mV

Cuanto mayor ( y positiva ) sea la DE0´ mas hacia la derecha estará

desplazada esta reacción en el equilibrio.

¿ Como podemos expresar la espontaneidad de esta reacción en términos

termodinámicos ?. Esto es, en términos de Variación de Energía libre Estandar

DGº´ = - nF DEº´
Cuanto mayor y más positiva es la diferencia de potencial Redox Estandar, menor y
mas negativa es la Variación de Energía libre Estandar.
La Ecuación de Nernst nos permite calcular Potencial de Oxidación-reducción de
una reacción redox en condiciones reales conociendo las concentraciones de
oxidantes y reductores :

Aoxi + Bred Ared + Boxi

[Ared][ Boxi]
_ ____
RT __________
DE = DEº´ Ln
nF [Aoxi][ Bred]

Se pueden resumir las relaciones entre Variación de Energía libre y Potencial

redox :
DGº´ = - nF DEº´ DG = - nF DE
 Reacciones de reducción de algunas moléculas de interés
biológico
mV
NADP+ + H+ + 2 e- NADPH - 0,320
NAD+ + H+ + 2 e- NADH - 0,315 I
FMN + 2 H+ + 2 e- FMNH2 ( complejo I ) - 0,300 I
ácido lipoico + 2 H+ + 2 e- ácido dihidrolipoico - 0,290
S + 2 e- + 2 H+ SH2 - 0,230
FAD + 2 H+ + 2 e- FADH2 ( coenzima libre ) - 0,219
acetaldehido + 2 H+ + 2 e- etanol - 0,197
piruvato- + 2 H+ + 2 e- lactato- - 0,185
oxalacetato- + 2 H+ + 2 e- malato- - 0,166
(Fe-S)oxi N-2 + e- (Fe-S)red N-2 ( complejo I ) - 0,030 I
fumarato- + 2 H+ + 2 e- succinato- + 0,031 II
FAD + 2 H+ + 2 e- FADH2 ( en D-AA oxidasa ) * 0.00
ubiquinona + 2 H+ + 2 e- ubiquinol + 0,045 I,II - III
citocromo b ( Fe+++ ) + e- citocromo b ( Fe++ ) ( mitoc. ) + 0,077 III
hemo c1 ( Fe+++ ) + e- hemo c1 ( Fe++ ) ( complejo III ) + 0,220 III

citocromo c ( Fe+++ ) + e- citocromo c ( Fe++ ) + 0,254 III - IV

citocromo a ( Fe+++ ) + e- citocromo a ( Fe++ ) + 0,290 IV

O2 + 2 e- + 2 H+ H2 O2 + 0, 295

hemo a3 ( Fe+++ ) + e- hemo a3 ( Fe++ ) (complejo IV ) + 0,385 IV

NO3- + 2 e- + 2 H+ NO2- + H2 O 0,420
SO42- + 2 e- + 2 H+ SO32- + 0,480
1/2 O2 + 2 e- + 2 H+ H2 O + 0,815 IV

* El potencial Redox estandar del FAD / FADH2 cuando está unido al enzima covalentemente varía entre – 465 y +169 mV.
 Tomemos en cada Complejo de la Cadena transportadora de electrones
el donador inicial de electrones y el aceptor final de electrones :

Complejo Donador E0´ Aceptor E0´ DE0´ DG0´

I NADH - 0,315 Ubiquinol + 0,045 + 0,360

II Succinato + 0,031 Ubiquinol + 0,045 + 0,014

III Ubiquinol + 0,045 Citocromo c + 0,254 + 0,209

IV Citocromo c + 0,254 ½ O2 + 0,815 + 0,561

Total I - IV NADH - 0,315 ½ O2 + 0,815 + 1,130

Total II - IV Succinato + 0,031 ½ O2 + 0,815 + 0,784

 Tomemos en cada Complejo de la Cadena transportadora de electrones
el donador inicial de electrones y el aceptor final de electrones :

Complejo Donador E0´ Aceptor E0´ DE0´ DG0´

I NADH - 0,315 Ubiquinol + 0,045 + 0,360 - 16.57 Kcal mol-1

II Succinato + 0,031 Ubiquinol + 0,045 + 0,014 - 0.65 Kcal mol-1

III Ubiquinol + 0,045 2 Citocromo c + 0,254 + 0,209 - 9.64 Kcal mol-1

2 Citocromo
IV + 0,254 ½ O2 + 0,815 + 0,561 - 25.87 Kcal mol-1
c

Total I - IV NADH - 0,315 ½ O2 + 0,815 + 1,130 - 52.12 Kcal mol-1

Total II - IV Succinato + 0,031 ½ O2 + 0,815 + 0,784 - 36.16 Kcal mol-1

Solo realizamos el cálculo cuando el número de electrones de los pares donador y

aceptor es el mismo para el valor del potencial redox estandar dado en la tabla.
Realizado por Dr. A. Martínez-Conde & Dra P. Mayor Dep. Bioquímica y Biología Molecular Fac. Medicina Universidad Complutense de
 Potenciales de reducción estándar de los
transportadores de la cadena respiratoria mitocondrial
E’o (mV)

NADH - 320
FMNH - 290
Fe-S (Complejo I) - 270
FADH - 10
Fe-S (Complejo II) 20
Ubiquinol (UQH2) 50
Citocromo bk 77
Citocromo bT 190
Citocromo c (+c1) 230
Citocromo a+a3 380
Oxigeno 816

Los e- fluyen espontáneamente desde los transportadores de E’o más

bajo hacia los transportadores con E’o más elevado.
En la tabla, los de más arriba reducen a los de mas abajo
 La transferencia de electrones es un
proceso exergónico
∙ En la cadena de transporte de e-, pasan 2 e- desde el NADH al O2
NADH + H+ + 1/2 O2 ⎯⎯→ H2O + NAD+
∙ La reacción neta es altamente exergónica
Teniendo en cuenta NAD+/NADH E’o = - 0.320 V
O2/H2O E’o = + 0.816 V
Δ E’o = 1.14 V
ΔE = E,o aceptor de e- – E,o dador de e-
● ΔE = 0.816 V – (- 0.320 V)
ΔE = 1,14 V
El cambio de energía libre:
ΔG’o = - n F ΔE
ΔG’o = - 2 x 96500 x 1.14 V = - 220 kJ/mol NADH (c/2e-)

En mitocondrias respirando activamente, la relación NADH/NAD es mayor

que 1, y el ΔG’o es mucho mayor (más negativo) que -220 kJ/mol
 Energía necesaria para la síntesis de ATP?

∙ La síntesis de ATP, a partir de ADP y Pi, es un proceso endergónico:

ADP + Pi ⎯⎯→ ATP + H2O ΔG’o = 30.5 kJ/mol

• En condiciones fisiológicas, en eritrocitos [ATP] = 2.25 mM

[ADP] = 0.25 mM y [Pi] = 1.65 mM
A 25 oC, pH = 7.0 ΔG’ = 51.8 kJ/mol

La cadena de transporte de e- libera energía más que

suficiente para sintetizar ATP
 Cadena respiratoria mitocondrial ó
cadena de transporte de electrones

∙ Transportadores universales de electrones -

Nucleótidos de piridina (NAD+ y NADP+) -
Nucleótidos de flavina (FMN y FAD+)
 Los electrones son canalizados hacia
aceptores universales de electrones

∙ La mayor parte de los e- que entran en la cadena respiratoria

proviene de la acción de deshidrogenasas que capturan e-
provenientes de reacciones catabólicas, canalizándolos en forma
de pares de e- hacia aceptores universales

∙ Las deshidrogenasas ligadas a nucleótidos de piridina, catalizan:

Sustrato reducido + NAD+ ⇔ Sustrato oxidado + NADH + H+

Sustrato reducido + NADP+ ⇔ Sustrato oxidado + NADPH + H+

∙ Las deshidrogenasas ligadas al NAD eliminan dos átomos de

hidrógeno de sus sustratos (:H- y H+)
 Los electrones son canalizados hacia
aceptores universales de electrones

∙ El NAD+ puede colectar equivalentes de reducción a partir del NADPH.

Esta reacción es catalizada por las enzimas transhidrogenasas:

NADPH + NAD+ NADP+ + NADH

∙ El NADH y el NADPH son transportadores electrónicos

hidrosolubles, asociados reversiblemente con deshidrogenasas

∙ El NADH actúa como transportador de difusión, llevando e- que

provienen de reacciones catabólicas a su punto de entrada en la
cadena respiratoria, el complejo NADH deshidrogenasa (Complejo I)

∙ La flavoproteínas contienen nucleótidos de flavina (FAD o FMN)

fuertemente unido, a veces covalentemente. El nucleótido oxidado
puede aceptar un e- (dando la forma semiquinona) o dos e- dando
FADH2 o FMNH2
 Cadena respiratoria mitocondrial ó
cadena de transporte de electrones

∙ Otros grupos transportadores de electrones

- Ubiquinona ó Coenzima Q (benzoquinona) -
Citocromos - Proteínas
ferro-sulfuradas
 Cadena respiratoria mitocondrial ó
cadena de transporte de electrones

∙ La cadena respiratoria consta de una serie de transportadores

electrónicos, la mayoría proteínas integrales de membrana, con
grupos prostéticos capaces de aceptar y donar 1 ó 2 e-

∙ Cada componente de la cadena acepta e- del transportador

precedente y se los transfiere al siguiente en una secuencia
específica

∙ Tipos de transferencia de e- (equivalentes de reducción) en la

cadena respiratoria: (1) transferencia
directa de e- (Fe3+/Fe2+) (2)
transferencia de un H+ (1 e-)
(3) transferencia de un hidruro (:H-) portador de 2 e-
Otros grupos transportadores de electrones
Ubiquinona o Coenzima Q

∙ La reducción completa (UQH2)

requiere 2 e- y 2 H+ y se produce
en 2 pasos sucesivos

∙ La UQ puede aceptar 1 e-
formándose radical semiquinona
(UQH∙)

∙ Debido a que es pequeña e

hidrofóbica difunde a través de la
membrana interna, actuando de
lanzadera de equivalentes de
reducción entre otros
transportadores electrónicos de la
membrana, menos móviles
 Otros grupos transportadores de electrones
Citocromos

b a

∙ Son proteínas que contienen el grupo

prostético hemo: 4 anillos penta-atómicos
nitrogenados en una estructura cíclica llamada
porfirina. Los 4 N están coordinados con un
Fe2+ (cit reducido) o Fe3+ (cit oxidado)
∙ Hemo de cit c está unido covalentemente a su
proteína, a diferencia de hemos de cit a y b
∙ El cit c mitocondrial es una proteína soluble
(excepción), asociada a MI por interacciones
c electrostáticas
 Otros grupos transportadores de electrones
Proteínas ferro-sulfuradas

∙ En las proteínas ferro-sulfuradas, el hierro está presente no en forma de hemo,

sino en asociación con átomos de azufre inorgánico o con azufre de residuos
Cys de la proteína, o con los dos simultáneamente
∙ Centros (Fe-S): estructuras sencillas a complejas
∙ Participan en reacciones de transferencia de 1 e- en la que se oxida o reduce
uno de los átomos de Fe
∙ Al menos, 8 proteínas Fe-S intervienen en la cadena e transporte de e-
∙ Potenciales de reducción: -0.65V a + 0.45 V
 Cadena respiratoria mitocondrial ó
cadena de transporte de electrones

∙ Una serie de moléculas con grupos prostéticos redox con potenciales

de reducción estándar crecientes desde el NADH (-320 mV) al
O2 (+ 816 mV)

∙ Transporte de e- mitocondrial: reacción global

NADH ⇒ Fp(FMN) ⇒ UQ ⇒ cit bKbT ⇒ cit c,c1 ⇒ cit aa3 ⇒ O2

Complejo I
Complejo II
Complejo III
Complejo IV
 Fuerza protón-motriz
Gradiente electroquímico de H+

∙ La membrana mitocondrial
interna separa 2
compartimientos de
diferente pH, generando
diferencias tanto en la
concentración de H+ (ΔpH)
como en la distribución de
cargas (Δψ).
∙ El efecto neto de esta
diferencia es la fuerza
protón-motriz
 En resumen
Fosforilación oxidativa

• Ocurre en la mitocondria
• La fosforilación oxidativa comienza con la entrada de e- en la cadena
respiratoria
• Los e- pasan a través de una serie de transportadores incluidos en la membrana
interna mitocondrial
• Los transportadores electrónicos mitocondriales funcionan dentro de complejos
proteicos ordenados en serie
• La cadena de transporte de e- es un proceso exergónico, que libera energía
suficiente para la síntesis de ATP
• Existe una translocación de H+ desde la matriz hacia el EIM
(fuerza protón-motriz)
• Síntesis de ATP por ATP sintasa
 Compuestos que inhiben la cadena respiratoria

Fosforilación Oxidativa puede ser inhibida por:

Rotenona.
Amital.
Inhibición del transporte electrónico. Antimicina
Cianuro, Azida.
Monoxido de Carbono.

Inhibición de la ATP sintetasa. Oligomicina

Desacoplamiento de la oxidación y la Fosforilación

Inhibidores de la cadena de transporte
Efecto de un inhibidor

Tiempo
RESUMEN
Los Procesos oxidativos convierten los metabolitos como glucosa o ácidos grasos en
CO2 + Energía . La Energía se almacena en forma de moléculas Reducidas como son
NADH y FADH2 , que han recibido 2 electrones durante dichos procesos oxidativos.

CO2

e e e
e - - - e
-
Acidos Grasos Glucosa -

e
-

e
-

PDH b oxidación
Glucolisis Ciclo de Krebs PODER

REDUCTOR

e
-

Realizado por Dr. A. Martínez-Conde & Dra P. Mayor Dep. Bioquímica y Biología Molecular Fac. Medicina Universidad Complutense de
 Matriz Mitocondrial

CT DUCTOR
POPODER
R

e
ER PODER

-
DE

OR
e D

DURE
- PO OR
H 2O H T
+ D UC
REDUCTOR

RE
e

e
H RE

-
+ - e
e-
-
IV II H
+
e
O2 III -

I
H
+
H H H
+ + +
H H H H H
+ +
H + +
H H H +
+ + + +
H H
Espacio Intermembrana
+ + H
+

La Cadena Transportadora de Electrones bombea protones al espacio intermembrana

desde la Matriz mitocondrial
Realizado por Dr. A. Martínez-Conde & Dra P. Mayor Dep. Bioquímica y Biología Molecular Fac. Medicina Universidad Complutense de
¿ Como se produce la transferencia de energía desde la Cadena Transportadora de
Electrones ( Complejos I, II, III y IV ) hasta el Complejo V ( F0F1 ATPasa )?.

Como ya hemos señalado anteriormente, la Cadena Transportadora de Electrones se

comporta como un gran sistema de bombeo de protones, de tal forma que tres de los
cuatro complejos ( I, III y IV ) se comportan como Bombas de protones.

cit
C

Q
I III
IV
II

Realizado por Dr. A. Martínez-Conde & Dra P. Mayor Dep. Bioquímica y Biología Molecular Fac. Medicina Universidad Complutense de
Por
El cada
Cuatro de2ellos
Complejoelectrones
IV bombea
III bombeatransportados
22 protones
protones
son bombeados desde
por el el NADH
Complejo I hasta el O2, se bombean 10 H+
H
H H H +
+ + +
H H H
Lado P + H +
H H H + + H
+ +
H +
H +
+ +
H H
+ H + H H H
+ + +
H cit H +
+ +
C

Q
I III
IV
II
H H
+ + H H H H
+ + +
H H +
+ +

Lado N

Realizado por Dr. A. Martínez-Conde & Dra P. Mayor Dep. Bioquímica y Biología Molecular Fac. Medicina Universidad Complutense de
¿ Como son bombeados los otros dos protones ?

H H H
+ + + H
Lado P H +
+
H H H H CICLO Q, sitios Q0 y Qi
+ + +
+
H H
+ H + H
+ +
H
+

He H e
+ -
e +
- e
QH- QH -
Q
I + +
III
II
H H
+ + H H
+ +
H H
+
+

Lado N Realizado por Dr. A. Martínez-Conde & Dra P. Mayor Dep. Bioquímica y Biología Molecular Fac. Medicina Universidad Complutense de
Inhibidores del Transporte de electrones del Complejo I : Rotenona, Amital

H H H
+ + +
H H H
Lado P + H +
H H H + + H
+ +
H +
H +
+ +
H H
+ H + H H H
+ + +
H cit H +
+ +
C

Q
I III
IV
e
- e
II
-
H H
+ + H H e H H
+ + H H +
- e + + +
-
Lado N ROTENONA , AMITAL

Realizado por Dr. A. Martínez-Conde & Dra P. Mayor Dep. Bioquímica y Biología Molecular Fac. Medicina Universidad Complutense de
Inhibidores del Transporte de electrones del Complejo II : Carboxina

H H H
+ + +
H H H
Lado P + H +
H H H + + H
+ +
H +
H +
+ +
H H
+ H + H H H
+ + +
H cit H +
+ +
C

Q
I III
IV
e
- e
II
-
H H
+ + H H e H H
+ + H H +
- e + + +
- H
Lado N CARBOXINA H +
+

Realizado por Dr. A. Martínez-Conde & Dra P. Mayor Dep. Bioquímica y Biología Molecular Fac. Medicina Universidad Complutense de
Inhibidores del Transporte de electrones del Complejo III : Antimicina

H H H
+ + +
H H H
Lado P + H +
H H H + + H
+ +
H +
H +
+ +
H H
+ H + H H H
+ + +
H cit H +
+ +
C

Q
I III
IV
II
e
H
- e e
-
+ H - e H ANTIMICINA H
+ -
+
H H +
+ +

Lado N

Realizado por Dr. A. Martínez-Conde & Dra P. Mayor Dep. Bioquímica y Biología Molecular Fac. Medicina Universidad Complutense de
Inhibidores del Transporte de electrones del Complejo IV : CN- , azida, CO

H H H
+ + +
H H H
Lado P + H +
H H H + + H
+ +
H +
H +
+ +
H H H
+ H + H H H
+
+ + +
H cit H +
+ +
C

Q
I III
IV
II
e
- e e
H -
+ H HH - e H H
+ ++
-
+
H H +
+ +

Lado N CN- , AZIDA, CO

Realizado por Dr. A. Martínez-Conde & Dra P. Mayor Dep. Bioquímica y Biología Molecular Fac. Medicina Universidad Complutense de