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Tema 1 - Bij

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Unidad de trabajo 1

LABORATORIOS DE BIOLOGÍA MOLECULAR Y CITOGENÉTICA


1. BIOLOGÍA MOLECULAR Y CITOGENÉTICA

La biología molecular es el estudio de las moléculas más importantes de los seres vivos,
como son los glúcidos, lípidos, proteínas y los ácidos nucleicos; aunque la biología
molecular hace más referencia a los ácidos nucleicos.

La citogenética es la parte de la genética que estudia la estructura, función y


comportamiento de los cromosomas en metafase (el material genético está empaquetado
en cromosomas para repartirse entre las dos células hijas).

Tanto los laboratorios de biología molecular como los de citogenética se pueden


considerar laboratorios de genética. La legislación actual no contempla ninguno de estos
laboratorios como unidades independientes, sino que ambos quedan encuadrados dentro
de la unidad de genética (Real Decreto 1277/203, de 10 de Octubre).

Bases generales sobre autorización de centros, servicios y establecimientos sanitarios.


Anexo II
Definición de centros, unidades asistenciales y establecimientos sanitarios.
Define la Unidad de genética como la unidad asistencial que, bajo la responsabilidad de un
facultativo con formación adecuada, está dedicada a la realización de pruebas genéticas y
la emisión de los dictámenes correspondientes con fines diagnósticos.

Los laboratorios de biología molecular y citogenética usan técnicas de alta complejidad


que requieren de un equipamiento especializado y costoso, que presentan un problema
común, la Contaminación. Por ello, se disponen de dos áreas de trabajo perfectamente
diferenciadas:

-áreas “sucias”: con muestras genéticas y otro tipo de materiales.


-áreas “limpias”: solo con el material de nuestra muestra.

No deben cruzarse los materiales de las áreas, sobre todo del área sucia a la limpia.

2. EL LABORATORIO DE BIOLOGÍA MOLECULAR

La técnica básica de estos laboratorios es la PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa),


que es una técnica de amplificación. Todas las estructuras y los flujos de trabajo se
organizan en torno a esta técnica. Para ello necesita un equipamiento genérico y otro
específico.
Equipamiento genérico:

-Cabina de bioseguridad
-Espectrofotómetro
-Etc.

Equipamiento específico:

- Termociclador
- Equipo de electroforesis
- Documentador de geles
- Aparatos necesarios para la realización de procesos específicos como extracción de
ácidos nucleicos y secuenciadores.

TERMOCICLADOR: en él se lleva a cabo la PCR. Es básico en cualquier laboratorio de


biología molecular. Consta de:
- un bloque incubador: un
soporte metálico con múltiples pocillos
donde se colocan los tubos de reacción
de la PCR. Es capaz de mantener las
temperaturas que se programan durante
el tiempo necesario en todo el volumen.
El rango de temperaturas normalmente
es de 4⁰C a 96⁰C. Existen diferentes
tecnologías para calentar el bloque:
1. sistema de aire caliente
y frio o resistencias eléctricas (más
antiguos).

2. materiales
semiconductores (efecto Peltier).

- tapa del bloque incubador


termoestatizado a 102-105⁰C para evitar
la evaporación y la condensación que
alterarían la reacción de la PCR.

TERMOCICLADOR A TIEMPO REAL: es un tipo especial de termociclador que incorpora un


sistema láser de detección de fluorescencia que excita y mide la fluorescencia emitida por
cada tubo de reacción individualmente y permite detectar la síntesis de los productos a
tiempo real.

EQUIPO DE ELECTROFORESIS: sirve para separar moléculas de distintos tamaños y


analizar, por ejemplo, productos de una PCR o purificar y obtener fragmentos de tamaño
concretos de ADN.

Se lleva a cabo aplicando un campo eléctrico en una disolución tampón (pH 7’5-7’8) en la
que se sumerge una matriz que contiene las muestras, cuyas moléculas migran a mayor o
menor velocidad en función de la carga que poseen (negativa a ese pH), su tamaño y su
conformación tridimensional.

El equipo de electroforesis consta de:

- soporte plástico o “cama” donde solidifica el gel.


- cubeta de electroforesis
-soporte central para la “cama” con el gel
- dos zonas de depósito de tampón de electroforesis en cada uno de los
extremos
- fuente de alimentación: para suministrar corriente eléctrica continua a la cubeta.
- matriz de electroforesis: dependiendo del tamaño de las moléculas que
deseemos separar:
- gel de agarosa (entre el 0’5% y 2%) para separar fragmentos de mayor
tamaño, permitiendo electroforesis más rápidas pero con limitada
resolución.
- gel de poliacrilamida: para separar moléculas de menor tamaño con
mayor poder de resolución.

- agente intercalante: la localización final de ácido nucleico en el gel se realiza con


un agente intercalante fluorescente como el bromuro de etidio.

DOCUMENTADOR DE GELES: sirve para visualizar los resultados de la electroforesis,


permitiendo ver las bandas de ácidos nucleicos en el gel después de la electroforesis y
tomar una fotografía. Consta básicamente de:

-Transiluminador: una fuente de luz UV (245-365 nm de λ) situada bajo una superficie


transparente al UV donde se coloca el gel. Cuando la luz UV ilumina el gel, el agente
intercalante emite fluorescencia, visualizándose las bandas correspondientes.

-Cámara fotográfica o sistema de captación de imágenes. Suele estar en la parte superior


de la cámara oscura.

CABINA DE BIOSEGURIDAD: se deben usar cabinas de flujo laminar vertical de clase II, que
protejan de contaminación de la muestra, a la persona manipuladora y al medio ambiente.
Su uso es importante cuando se trabaja con ARN porque las ARNasas degradan fácilmente
el ARN.
SISTEMA DE PURIFICACIÓN DE AGUA: suministro estable de agua purificada tipo II y agua
ultrapura tipo I.

ESPECTROFOTÓMETRO: se realiza por absorbancia en un rango de 230 y 320 nm de λ. Si la


cantidad de muestra es muy pequeña hay espectrofotómetros específicos.

MICROSCOPIO DE LUZ TRANSMITIDA Y FLUORESCENCIA: se usa para interpretar in situ las


técnicas de hibridación de fluorescencia (FISH). Deben tener filtros de fluorescencia
adecuado para los fluorocromos usados.

AUTOCLAVE: imprescindible para el trabajo con microorganismos y puede disminuir los


costes de materiales.
INCUBADOR O ESTUFA: si se trabaja con bacterias se necesitan estufas de cultivo de
microbiología. Si se trabaja con cultivos celulares se necesitan incubadoras de CO 2 y
humedad controlada.

BAÑO TERMOSTÁTICO, TERMOBLOQUE O PLACA CALEFACTORA: se usan para


incubaciones, digestiones y tratamientos enzimáticos. La placa calefactora debe alcanzar
de forma homogénea y estable temperaturas de 95-100⁰C para desnaturalizar el ADN de
células y tejidos.

CENTRÍFUGA Y MICROCENTRÍFUGA: con rotores que permitan centrifugar desde tubos de


50 mL a Eppendorf de 0’2 mL. Lo ideal es que también sean refrigeradas.

NEVERAS Y CONGELADORES DE -20⁰C Y -80⁰C: para conservar reactivos y muestras


(reactivos y enzimas a -20⁰C; y las muestras de ARN y almacenamiento a largo plazo de
ADN a -80⁰C).
OTROS EQUIPAMIENTOS:

-balanzas para pesar reactivos


-agitadores magnéticos
-vortéx
-pHmetros

2.1. LA ESTRUCUTRA DEL LABORATORIO

La estructura del laboratorio de biología molecular está condicionada por la principal


técnica que se realiza, la PCR. Las diferentes actividades que se realizan son:

-preparación de reactivos
-extracción y purificación de ácidos nucleicos de una muestra biológica
-reacción de amplificación
-análisis de los productos de la reacción (electroforesis y documentación del gel)

Cada actividad debe realizarse en un área independiente, físicamente separadas en


distintas salas y, cada una, con un equipamiento y material de trabajo propio para que no
haya intercambio entre ellos.

Un laboratorio de biología molecular debe constar, como mínimo, de cuatro salas:

-sala de preparación de reactivos (sala “limpia”)


-cuarto oscuro (transiluminador)
-sala de electroforesis
-sala de PCR
-sala de preparación de muestras y extracción de ácidos nucleicos (sala “sucia”)

SALA DE PREPARACIÓN DE REACTIVOS: se considera que esta es el área “limpia” del


laboratorio (sin ADN). En ella se preparan todos los reactivos, incluyendo la mezcla de
reacción de la PCR. Es fundamental que los reactivos no se contaminen con ADN. En esta
sala se debe tener una cabina se bioseguridad.

SALA DE PREPARACIÓN DE MUESTRAS Y EXTRACCION DE ADN: se considera una sala


“sucia”, con ADN. Debe contar con una cabina de bioseguridad y un espectrofotómetro.

SALA DE PCR: debe contar con los termocicladores necesarios y un espacio de trabajo para
añadir las muestras de ADN a la mezcla de reacción.

SALA DE POST-PCR: con los equipos de electroforesis y de documentación de geles. Es una


sala “sucia”, por la contaminación de productos amplificados. En condiciones ideales, la
documentación de geles puede situarse en una sala oscura junto con el microscopio de
fluorescencia.

2.2. FLUJO DE TRABAJO

Para que los resultados de la PCR sean fiables es necesario que el flujo de trabajo sea:

Cada área de trabajo debe ser autónoma, disponiendo de su propia infraestructura básica:
cabinas, centrifugas, baños, neveras, etc.; y su propio material de trabajo.

NO debe haber intercambio entre las diferentes áreas.

2.3. CONDICIONES DE TRABAJO

En los laboratorios de biología molecular se aplican normas y restricciones de buenas


prácticas para cualquier laboratorio: no comer, no beber, no fumar…

También se establecen unas condiciones de trabajo específicas para minimizar la


contaminación de las muestras.

La contaminación es la introducción accidental de material exógeno en la muestra que


altera su pureza. Esta contaminación causa resultados erróneos o no interpretables. Los
dos tipos de contaminantes más peligrosos son: los ácidos nucleicos y las enzimas.

FUENTES DE CONTAMINACIÓN:

-Contaminación cruzada:
* Ácidos nucleicos o enzimas del medio o microorganismos del ambiente.
Es el caso de los aerosoles generados durante la manipulación de las muestras,
como pipeteos, apertura de Eppendorf, centrifugación...

* Contaminantes procedentes del personal como células de descamación


de la piel, guantes contaminados.

* Contaminantes de las superficies de trabajo.

-Contaminación por productos amplificados: generadas por la PCR (carryover)

-Contaminación de los reactivos comerciales y del material fungible. La garantía del


fabricante no es sinónimo de ausencia de ADN o nucleasas. Estéril significa ausencia de
microorganismos viables, pero no la ausencia de ADN ni la inactivación de las enzimas,
sobre todo las ARNasas.

2.4. NORMAS PARA LA MANIPULACIÓN DE MATERIALES Y REACTIVOS

Hay que intentar anular o prevenir las fuentes de contaminación. Algunas de las medidas
son:

-Separación física de las áreas de trabajo


-Flujo unidireccional entre ellas
-Utilizar solo reactivos y materiales fungibles certificados como libres de nucleasas
-Controlar los reactivos (lotes, fechas de apertura, fecha de caducidad)
-Buenos hábitos de trabajo => TÉCNICAS ASÉPTICAS

TÉCNICAS ASÉPTICAS: se trata de un conjunto de actividades encaminadas a prevenir la


contaminación por microorganismos, ácidos nucleicos y nucleasas.

Muchas de estas actividades cumplen un doble sentido:

-prevenir la contaminación de la muestra


-evitar la contaminación del trabajador por productos biológicos y químicos peligrosos

La técnica debe estar adaptada al laboratorio de biología molecular:

-Lavado de manos: el lavado frecuente es la norma básica de higiene cuando se manipulan


muestras biológicas y reactivos químicos.
-EPI: los principales equipos son los guantes y la bata.
-Descontaminación de superficies: se pueden realizar con métodos físicos como la luz UV,
o por métodos químicos como el lavado con soluciones de hipoclorito sódico al 10% o
descontaminantes comerciales (DNA Zap, DNA Remover, DNA Away).
-Prevención de contaminación cruzada ambiental:

*cabinas de bioseguridad clase II


*puntas de micropipetas especiales que evitan la contaminación de las pipetas
automáticas por aerosoles producidos al aspirar los fluidos

*prevención de carryover: la contaminación por productos amplificados es un gran


problema, puesto que la contaminación con pequeñas cantidades de estos
productos es suficiente para producir falsos positivos. La norma principal para
evitarlo es no revertir nunca el flujo de trabajo.

2.5. USO EFICIENTE DE LOS RECURSOS

Para una gestión eficiente de los recursos en los laboratorios se implantan estándares de
calidad y se desarrollan indicadores de calidad. Lo ideal es que el laboratorio esté
acreditado para el cumplimiento de la norma de calidad ISO, pero en cualquier caso
debería contemplar como mínimo:

- Plan de mantenimiento de equipamiento e infraestructura y revisiones


técnicas periódicas, así como calibraciones y limpieza de equipos.
- Asegurar la trazabilidad de los reactivos, desde que se reciben hasta su
consumo o eliminación por caducidad.
- Todo el personal nuevo debe recibir adiestramiento adecuado, también en
materia de seguridad y gestión de residuos. También debe existir un plan
de formación continuada.
- Los procedimientos técnicos deben estandarizarse mediante
procedimientos normalizados de trabajo.
- Debería haber un código de buenas prácticas medioambientales.

3. LABORATORIO DE CITOGENÉTICA Y CULTIVOS CELULARES

Laboratorio de cultivos celulares: su objetivo es la propagación o crecimiento de células


eucariotas de organismos pluricelulares en medios de cultivo artificiales en condiciones
controladas.
Laboratorio de citogenética: su objetivo es el estudio de los cromosomas de especies
eucariotas. El laboratorio de citogenética humana se dedica al estudio de los cromosomas
humanos, tanto desde una perspectiva morfológica (cariotipo), como molecular
(citogenética molecular).

3.1. EQUIPAMINETO DEL LABORATORIO DE CITOGENÉTICA

Los laboratorios de citogenética requieren:

- Equipamiento específico para realizar cultivos celulares

- Cabina de flujo laminar


- Incubador de CO2
- Microscopio invertido
- Equipo de criogenia

- Equipamiento específico para técnicas de citogenética

- Equipo de análisis de imagen


- Microscopio óptico convencional y de fluorescencia

- Equipamiento común a otros laboratorios

- Equipo de esterilización (autoclaves)


- Sistema de purificación de agua
- Nevera y congeladores de -20ºC y -80ºC

- Otros equipamientos

Cabina de flujo laminar: En ella se realizan todos los procesos y manipulación de


los cultivos celulares: preparación de medios, siembra de los cultivos, cambios
de medio…

La cabina adecuada es la cabina de seguridad biológica de clase II. Consta de:

- Panel frontal transparente, que mantiene la estabilidad del flujo interior.


- Rejilla frontal, que genera una corriente entrante de aire.
- Sistema mecánico que impulsa el aire entrante hacia la parte superior.
- Filtro HEPA (High Efficiency Particle Arrestance) de gran superficie, en el
techo. Parte del aire impulsado por el sistema mecánico se fuerza a pasar
por el filtro, generando un flujo laminar estable.
- Segundo filtro HEPA, más pequeño que el primero, por el que se elimina al
exterior el resto del aire impulsado por el sistema mecánico.

FILTROS HEPA: Son filtros de aire de alta eficiencia que retienen partículas
de tamaño superior a 0,2 μm con una eficiencia del 99,995%.

Colocados en las cabinas de flujo laminar, retienen bacterias, hongos,


esporas y levaduras, evitando la contaminación de los cultivos por estos
microorganismos.

Incubador de CO2: Proporciona las condiciones ambientales óptimas para el


crecimiento de las células en el medio de cultivo.
Consta de:

- Control de temperatura, para mantener estable este parámetro


- Recirculación del aire interior, para homogeneizar la temperatura
- Control de CO2. El CO2 puro se suministra comprimido en botellas
presurizadas y este dispositivo lo mezcla con aire en la proporción
adecuada (4-7%) y lo inyecta en el interior del incubador.
- Control de humedad, para evitar la evaporación del medio de cultivo. Se
puede conseguir simplemente colocando una bandeja de agua en el suelo
del incubador, aunque esto puede favorecer la contaminación.

Microscopio invertido: El control del crecimiento de un cultivo se realiza por


observación microscópica directa, pero el tamaño de los frascos de cultivo impide
el uso del microscopio óptico convencional y se recurre al invertido que tiene
invertida la posición de la fuente de luz y el revólver de objetivos, con respecto a
un microscopio convencional.

Equipo de criogenia: Permite conservar a largo plazo y en forma viable muestras de


células y cultivos celulares.

Un equipo de criogenia mínimo consta de:


- Tanque de nitrógeno de nitrógeno).
líquido (se puede ir
rellanando el tanque o
conectarlo con un
suministro centralizado

3.2. ESTRUCTURA DEL LABORATORIO

Igual que en el laboratorio de biología molecular, la prevención de la contaminación


condiciona la estructura de los laboratorios de citogenética.

Un laboratorio de citogenética completo debe tener, como mínimo, tres salas:

- Sala de cultivos, que es la “sala limpia”, donde se realizan los


procedimientos directamente relacionados con el cultivo celular.

Debe estar situada en una zona tranquila. Lo ideal es que tenga un sistema
que suministre aire filtrado. Aquí se disponen las cabinas de flujo laminar,
los incubadores y el microscopio invertido.

- Sala de laboratorio convencional, es la “sala sucia” con el resto del


equipamiento, excepto el equipo de criogenia.

- Sala de frío, con los congeladores y el equipo de criogenia. Esta sala debe
estar separada porque los congeladores generan turbulencias.

3.3. CONDICIONES DE TRABAJO

Debe existir una estricta técnica aséptica.

Entre las normas de trabajo más importantes de trabajo en la cabina de flujo laminar
podemos citar:

- Lavado frecuente de manos


- Uso de guantes y batas desechables estériles
- Puerta de la sala siempre cerrada
- Material y reactivos estériles. Material no intercambiable con otras salas
- No usar mecheros bunsen, que alteran el flujo laminar por turbulencias
- Colocar en el interior de la cabina sólo el material que se va a usar
- No sacar material estéril de su embalaje hasta el momento de usarlo
- El material fungible se deposita en los contenedores adecuados, que se
retiran al finalizar la sesión de trabajo
- Restringir el acceso a la sala de personal ajeno al trabajo
- Limpieza de las cabinas de flujo laminar con etanol al 70%
- En cabinas con lámpara germicida UV ésta se conecta después de la
limpieza un máximo de 30 minutos
- Realizar un mantenimiento regular de la cabina (mínimo una vez al año)
4. SEGURIDAD EN EL LABORATORIO

La seguridad en los laboratorios de biología molecular, citogenética y cultivos celulares


hace referencia a la prevención de la exposición del personal a agentes nocivos y también
a impedir la liberación de éstos al exterior.

En función de la naturaleza de éstos agentes, la seguridad será:

- Biológica o bioseguridad
- Química

BIOSEGURIDAD: Cualquier muestra biológica debe ser considerada potencialmente


peligrosa y deben adoptarse medidas mínimas de prevención como el uso de EPIs.

El principal problema de bioseguridad en este tipo de laboratorios los plantea en trabajo


con microorganismos en general y con organismos genéticamente modificados (GMO) en
particular.

La ley clasifica las actividades de utilización confinada de los GMO en cuatro tipos:

- Tipo 1, sin riesgo


- Tipo 2, riesgo bajo
- Tipo 3, riesgo moderado
- Tipo 4, riesgo alto

En los laboratorios de citogenética y cultivos celulares se debe aplicar, como mínimo, las
medidas de protección y contención del nivel 2, a no ser que se trabaje con organismos de
riesgo superior.
SEGURIDAD QUÍMICA: Muchos de los reactivos usados en los laboratorios de biología
molecular, citogenética y cultivos celulares se encuadran dentro de la categoría recogida
por la ley como “sustancias peligrosas”.

Las buenas prácticas referidas a la seguridad química deben incluir:

- Prevenir la exposición del personal a estas sustancias (penetración


cutánea, inhalación, ingestión)
- Almacenamiento seguro
- Gestión eficiente de los residuos

Estas medidas se establecen en base a la ficha de datos de seguridad de cada producto


que aporta información acerca de la composición, manipulación, peligros, vías de
exposición, efectos tóxicos, primeros auxilios…

Como medidas genéricas tenemos:

- Uso de EPIs
- Prohibición de pipetear con la boca
- Manipulación de productos volátiles en campanas de extracción
- Manipulación de productos inflamables alejados de fuentes de calor
- Correcto etiquetado de todos los envases (nombre del producto, fecha de
preparación, pictograma de peligro…)
- Almacenamiento en armarios adaptados a sus características

Ejemplos de sustancias peligrosas en los laboratorios de biología molecular y citogenética


son:
- Inflamables: alcoholes (etanol, isopropanol, metanol…)
- Tóxicos o muy tóxicos: acrilamida, azida sódica, bromuro de etidio,
diaminobencidina (DAB), formamida, tetrametil urea…
- Carcinógenos: acrilamida, DAB, formaldehido…
- Mutágenos: acrilamida, bromuro de etidio…
- Teratógeno y/o perjudiciales para la fertilidad: acrilamida, formamida,
tetrametil urea…

4.1. EQUIPAMIENTO Y NORMAS DE SEGURIDAD

La distribución, instalaciones y equipamiento deben ser adecuados para prevenir y


minimizar los riesgos:

- Debe haber instalaciones de emergencia (duchas, lavaojos, extintores…)


- Deben estar dotados con EPIs adecuados (guantes, batas desechables,
gafas de seguridad, mascarillas, pantallas…)
- Deben tener instalaciones adecuadas para el almacenamiento de
sustancias tóxicas y peligrosas (armarios específicos)
- Deben existir contenedores adecuados para los residuos
- Debe haber kits para la recogida de derrames de productos químicos y
citotóxicos
- Deben contar con un manual de seguridad y un plan de gestión de residuos

MANUAL DE SEGURIDAD: Es un documento de obligado conocimiento para todo el


personal del laboratorio.

La información que contiene se refiere a:

- Evaluación de riesgos a cada puesto de trabajo


- Descripción y normas de uso del equipamiento de seguridad
- Hábitos de trabajo apropiados para minimizar riesgos
- Normas de almacenamiento de productos químicos
- Normas para la eliminación de desechos y gestión de residuos

Normas de actuación en caso de emergencias, accidentes biológicos y accidentes químicos

4.2. GESTIÓN DE RESIDUOS

Los laboratorios deben disponer de un plan de gestión de residuos tóxicos y peligrosos,


según su actividad.

Este plan debe incluir medidas para la recogida selectiva, la clasificación y el


almacenamiento temporal de residuos hasta su recogida por una empresa gestora.

En concreto se deben especificar medidas para gestionar:

- Residuos biosanitarios especiales, como objetos punzantes y cortantes


que han estado en contacto con productos biológicos, cultivos
microbiológicos y material contaminado con éstos, cultivos celulares,
sangre y otros fluidos biológicos…
- Residuos químicos, incluyendo envases que han contenido productos
químicos, reactivos caducados o innecesarios, EPIs contaminados, filtros de
cabinas de aspiración de gases…
- Residuos citotóxicos, incluyendo restos de productos carcinógenos,
mutágenos, teratógenos, así como los envases que los hayan contenido…
- Residuos radiactivos.

Como norma general los residuos se recogen en:

- Contenedores en el caso de residuos sólidos


- Garrafas en el caso de residuos líquidos

Y Deben:

- Estar homologados y ser específicos de cada tipo de residuo


- Ser diferenciados por código de color
- Estar perfectamente etiquetados

No se debe llenar más de 2/3 de su capacidad y deben cerrar herméticamente.

4.3. DERRAMES

Se cuentan entre los accidentes más comunes y tiene cierto peligro. Su gestión implica tres
acciones que deben ejecutarse de forma inmediata:

- Neutralización. Depende de las características del producto derramado


- Absorción. El material absorbente usado depende también del producto
derramado, algunos ejemplos son:

- Serrín para líquidos no inflamables ni tóxicos ni corrosivos


- Carbón activo para líquidos inflamables, tóxicos o
corrosivos
- Absorbentes-neutralizadores comerciales para cualquier
derrame líquido según indicaciones de la casa comercial
- Celulosa para absorber directamente derrames de
pequeñas cantidades

- Eliminación. El residuo se introduce en un envase adecuado y se elimina en


el contenedor específico

Los derrames de productos en polvo se recogen directamente evitando la formación de


aerosoles y de polvo en suspensión.

Los derrames de productos volátiles tóxicos por inhalación recogidos con celulosa deben
ser eliminados rápidamente en envases herméticos o bien poner la celulosa en una cabina
de extracción de gases con filtro de carbón activo hasta su evaporación y posterior
tratamiento como residuo químico.
Durante la realización de todas estas actividades se debe:

- Restringir el acceso al laboratorio


- Los intervinientes deben tener EPIs adecuados
- Tener especial cuidado con derrames de líquidos inflamables y volátiles

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