Tema 1 - Bij
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La biología molecular es el estudio de las moléculas más importantes de los seres vivos,
como son los glúcidos, lípidos, proteínas y los ácidos nucleicos; aunque la biología
molecular hace más referencia a los ácidos nucleicos.
No deben cruzarse los materiales de las áreas, sobre todo del área sucia a la limpia.
-Cabina de bioseguridad
-Espectrofotómetro
-Etc.
Equipamiento específico:
- Termociclador
- Equipo de electroforesis
- Documentador de geles
- Aparatos necesarios para la realización de procesos específicos como extracción de
ácidos nucleicos y secuenciadores.
2. materiales
semiconductores (efecto Peltier).
Se lleva a cabo aplicando un campo eléctrico en una disolución tampón (pH 7’5-7’8) en la
que se sumerge una matriz que contiene las muestras, cuyas moléculas migran a mayor o
menor velocidad en función de la carga que poseen (negativa a ese pH), su tamaño y su
conformación tridimensional.
CABINA DE BIOSEGURIDAD: se deben usar cabinas de flujo laminar vertical de clase II, que
protejan de contaminación de la muestra, a la persona manipuladora y al medio ambiente.
Su uso es importante cuando se trabaja con ARN porque las ARNasas degradan fácilmente
el ARN.
SISTEMA DE PURIFICACIÓN DE AGUA: suministro estable de agua purificada tipo II y agua
ultrapura tipo I.
-preparación de reactivos
-extracción y purificación de ácidos nucleicos de una muestra biológica
-reacción de amplificación
-análisis de los productos de la reacción (electroforesis y documentación del gel)
SALA DE PCR: debe contar con los termocicladores necesarios y un espacio de trabajo para
añadir las muestras de ADN a la mezcla de reacción.
Para que los resultados de la PCR sean fiables es necesario que el flujo de trabajo sea:
Cada área de trabajo debe ser autónoma, disponiendo de su propia infraestructura básica:
cabinas, centrifugas, baños, neveras, etc.; y su propio material de trabajo.
FUENTES DE CONTAMINACIÓN:
-Contaminación cruzada:
* Ácidos nucleicos o enzimas del medio o microorganismos del ambiente.
Es el caso de los aerosoles generados durante la manipulación de las muestras,
como pipeteos, apertura de Eppendorf, centrifugación...
Hay que intentar anular o prevenir las fuentes de contaminación. Algunas de las medidas
son:
Para una gestión eficiente de los recursos en los laboratorios se implantan estándares de
calidad y se desarrollan indicadores de calidad. Lo ideal es que el laboratorio esté
acreditado para el cumplimiento de la norma de calidad ISO, pero en cualquier caso
debería contemplar como mínimo:
- Otros equipamientos
FILTROS HEPA: Son filtros de aire de alta eficiencia que retienen partículas
de tamaño superior a 0,2 μm con una eficiencia del 99,995%.
Debe estar situada en una zona tranquila. Lo ideal es que tenga un sistema
que suministre aire filtrado. Aquí se disponen las cabinas de flujo laminar,
los incubadores y el microscopio invertido.
- Sala de frío, con los congeladores y el equipo de criogenia. Esta sala debe
estar separada porque los congeladores generan turbulencias.
Entre las normas de trabajo más importantes de trabajo en la cabina de flujo laminar
podemos citar:
- Biológica o bioseguridad
- Química
La ley clasifica las actividades de utilización confinada de los GMO en cuatro tipos:
En los laboratorios de citogenética y cultivos celulares se debe aplicar, como mínimo, las
medidas de protección y contención del nivel 2, a no ser que se trabaje con organismos de
riesgo superior.
SEGURIDAD QUÍMICA: Muchos de los reactivos usados en los laboratorios de biología
molecular, citogenética y cultivos celulares se encuadran dentro de la categoría recogida
por la ley como “sustancias peligrosas”.
- Uso de EPIs
- Prohibición de pipetear con la boca
- Manipulación de productos volátiles en campanas de extracción
- Manipulación de productos inflamables alejados de fuentes de calor
- Correcto etiquetado de todos los envases (nombre del producto, fecha de
preparación, pictograma de peligro…)
- Almacenamiento en armarios adaptados a sus características
Y Deben:
4.3. DERRAMES
Se cuentan entre los accidentes más comunes y tiene cierto peligro. Su gestión implica tres
acciones que deben ejecutarse de forma inmediata:
Los derrames de productos volátiles tóxicos por inhalación recogidos con celulosa deben
ser eliminados rápidamente en envases herméticos o bien poner la celulosa en una cabina
de extracción de gases con filtro de carbón activo hasta su evaporación y posterior
tratamiento como residuo químico.
Durante la realización de todas estas actividades se debe: