Espectroscopía de Fluorescencia
Espectroscopía de Fluorescencia
Espectroscopía de Fluorescencia
1.1. Quimioluminiscencia:
- Definición: Según Eilhardt Weidemann en 1888, la quimioluminiscencia es la energía en forma de
luz que dejan escapar dos componentes químicos al ser mezclados y provocar una reacción. Es el
fenómeno por el que, en ciertas reacciones químicas, la energía liberada no sólo es emitida en forma de
calor o de energía química, sino también en forma de luz. Se produce cuando en una reacción química,
los electrones saltan de las capas más altas de los átomos a las más bajas. También se podría decir que
la quimioluminiscencia es la propiedad que tienen algunas sustancias químicas para emitirlos. Estas
sustancias son las que se emplean por ejemplo en los relojes que brillan en la oscuridad, y este tipo de
sustancias también se encuentran en algunos animales como en las luciérnagas.
- Fundamento de la Quimioluminiscencia: Se define como la emisión de radiación electromagnética
(normalmente en la región visible o del infrarrojo cercano) producida por una emisión química.
- Instrumentación de la Quimioluminiscencia: Se utiliza el Luminómetro.
- Aplicaciones: En las ciencias de la salud, la quimioluminiscencia se utiliza para determinar analitos
como calcio o nitrógeno, en inmunodiagnóstico y para la determinación de actividades enzimáticas, entre
otras aplicaciones. También se han descrito interesantes métodos útiles para el análisis forense.
1.1.1. Bioluminiscencia:
- Definición: Es la propiedad de ciertos organismos vivos de producir luz a partir de reacciones
enzimáticas específicas. La enzima luciferasa cataliza la oxidación de un sustrato de proteína luciferina
que emite luz. La reacción se denomina quimioluminiscencia: una reacción de emisión de luz que no
produce calor, lo que hace que sea eficiente en términos de energía.
- Aplicaciones: La Bioluminiscencia puede ser utilizada en cualquier tipo de industria de Alimentos
(Lácteos, Bebidas, Productos Cárnicos, Comidas Preparadas, etc) y específicamente para monitoreo de
higiene de superficies de contacto directo.
1.2. Fotoluminiscencia:
- Definición: La fotoluminiscencia es la propiedad que poseen determinados elementos para emitir
radiación luminosa (fotones) después de haber sido sometidos a una estimulación externa. Las sustancias
fotoluminiscentes cuando están expuestas a radiaciones ultravioletas emiten luz visible resultante de un
simple fenómeno de excitación de los átomos. Éstos, al ser excitados por la radiación ultravioleta,
almacenan la energía que, más tarde, en una situación de ausencia de luz, van liberando durante largo
tiempo mediante una luz visible, hasta que los átomos regresan a su estado inicial. La intensidad luminosa
emitida por la superficie fotoluminiscente depende de la cantidad de energía que el producto ha
conseguido almacenar.
1.2.1. Fosforescencia:
- Definición: La fosforescencia es el fenómeno en el cual ciertas sustancias tienen la propiedad de
absorber energía y almacenarla, para emitirla posteriormente en forma de luz.
Pero ¿Cuál es la diferencia entre fotoluminiscencia y fosforescencia? Pues que la fotoluminiscencia
incluye dos procesos: la fluorescencia, que es un tipo de luminiscencia donde la sustancia absorbe
radiación y la reemite prácticamente en forma instantánea; y la fosforescencia, que persiste por un
tiempo después que la molécula se expuso a la luz.
- Fundamento: Es un fenómeno similar a la fluorescencia en el cual ciertos electrones son excitados por
una fuente de radiación, pasando a un nivel energético de mayor energía y cuando son desactivados por
distintos procesos liberan parte de esa energía en forma de fotones.
- Aplicaciones: Tiene varias aplicaciones en la industria de la medicina así como en la pintura de las
manecillas de los relojes, o en determinados juguetes que se iluminan en la oscuridad.
1.2.2. Fluorescencia:
- Definición: La fluorescencia es la propiedad de algunos átomos y moléculas de absorber luz a una
longitud de onda determinada seguido por la emisión de luz de corta duración a una longitud de onda
más larga.
La fluorescencia implica una fuente de luz externa para excitar la muestra a una longitud de onda en
particular. Cuando se excita a la longitud de onda adecuada, la molécula pasa de un estado básico a
otro excitado. A medida que la molécula vuelve al estado fundamental, se libera energía en forma de
calor (pérdida de energía) y luz a una longitud de onda diferente de menor energía .
- Fundamento: Es el proceso de emisión en el cual las moléculas son excitadas por la absorción de
radiación electromagnética. Las especies excitadas se relajan al estado fundamental, liberando su exceso
de energía en forma de fotones.
- Instrumentación: Un monocromador selecciona una longitud de onda de excitación, y la fluorescencia
se examina con un segundo monocromador el cual se coloca de manera que forme un ángulo de 90º
con la luz incidente. Manteniendo fija la lex y haciendo un barrido de la radiación emitida, se obtiene un
espectro de emisión. Si la lem se mantiene constante y se hace variar la lex, se obtiene el espectro de
excitación.
La lámpara fluorescente compacta (CFL) funciona de la misma forma que cualquier tubo fluorescente
típico. Es utilizado para reemplazar lámparas incandescentes en muchas aplicaciones, pues producen
1/4 del calor por lumen emitido que los bombillos incandescentes. La fluorescencia puede ser detectada
con un mundo cromados para encontrar emisiones típicas de compuestos presentes en una
cromatografía líquida de alta eficiencia. También permite visualizar las manchas producidas por una TLC
si los compuestos o los reactivos de reveladores son fluorescentes.
- Aplicaciones: La fluorescencia ha sido empleada para el estudio de la estructura y conformación del
ADN, así mismo como de proteínas, con técnicas como la transferencia de energía de resonancia, la
cual mide distancias a nivel de angstroms.
BIBLIOGRAFÍAS:
- (N.d.). Researchgate.net. Retrieved October 20, 2022, from
https://www.researchgate.net/profile/Javier-Garcia-
Guinea/publication/284837762_TECNICAS_LUMINISCENTES/links/565960f608ae4988a7
b7f714/TECNICAS-LUMINISCENTES.pdf
- Carrera Torres, A., Cobos Fuentes, M. J., Gallardo Castillo, I., Caballero Aguilar, J., &
https://doi.org/10.4321/s0213-12852011000600004
http://www.cclabgroup.com/quimioluminiscencia-clia/
- BBC News Mundo. (2013, January 16). Bioluminiscencia: ¿por qué la naturaleza produce
luz? BBC.
https://www.bbc.com/mundo/noticias/2013/01/130116_bioluminiscencia_naturaleza_produ
ce_luz
Canarias. https://luminiscentecanarias.es/que-es-la-fotoluminiscencia/
- Espectroluminómetros - CONICET Rosario. (n.d.). Gov.ar. Retrieved October 20, 2022, from
https://www.rosario-conicet.gov.ar/equipamiento/espectroluminometros
- https://es.moleculardevices.com/technology/fluorescence#gref
- Perfil, V. T. mi. (n.d.). Fluorescencia en Nuestra Vida. Blogspot.com. Retrieved October 20,
fluorescencia.html