Este documento presenta los resultados de una práctica de laboratorio sobre medios de cultivo realizada por estudiantes de bioquímica y farmacia. En la práctica, los estudiantes prepararon agar Sabouraud y realizaron el cultivo de muestras de saliva, zapatos, suero y una muestra negativa. Observando el crecimiento bacteriano y de hongos en cada placa, analizaron la presencia de microorganismos comunes y posibles contaminantes. Finalmente, concluyeron que los medios de cultivo son esenciales para
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Este documento presenta los resultados de una práctica de laboratorio sobre medios de cultivo realizada por estudiantes de bioquímica y farmacia. En la práctica, los estudiantes prepararon agar Sabouraud y realizaron el cultivo de muestras de saliva, zapatos, suero y una muestra negativa. Observando el crecimiento bacteriano y de hongos en cada placa, analizaron la presencia de microorganismos comunes y posibles contaminantes. Finalmente, concluyeron que los medios de cultivo son esenciales para
Este documento presenta los resultados de una práctica de laboratorio sobre medios de cultivo realizada por estudiantes de bioquímica y farmacia. En la práctica, los estudiantes prepararon agar Sabouraud y realizaron el cultivo de muestras de saliva, zapatos, suero y una muestra negativa. Observando el crecimiento bacteriano y de hongos en cada placa, analizaron la presencia de microorganismos comunes y posibles contaminantes. Finalmente, concluyeron que los medios de cultivo son esenciales para
Este documento presenta los resultados de una práctica de laboratorio sobre medios de cultivo realizada por estudiantes de bioquímica y farmacia. En la práctica, los estudiantes prepararon agar Sabouraud y realizaron el cultivo de muestras de saliva, zapatos, suero y una muestra negativa. Observando el crecimiento bacteriano y de hongos en cada placa, analizaron la presencia de microorganismos comunes y posibles contaminantes. Finalmente, concluyeron que los medios de cultivo son esenciales para
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UNIVERSIDAD PRIVADA FRANZ TAMAYO
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
PRACTICA 3: MEDIOS DE CULTIVO
ESTUDIANTES:
- Fabiola Norma Aquino Gutiérrez
- Adrian Bustamante Quenta - Gabriela Callisaya Salinas - Gabriela Colque Ticona - Paula Angela Diaz Valda - Brayan Leiza Galindo - Alejandro Lopez Irigoyen - Michelle Gisberth Carvajal
ASIGNATURA: Microbiología II
DOCENTE: Irenice Coronado Arrazola
FECHA: 24/03/2023
COCHABAMBA – BOLIVIA 1. INTRODUCCIÓN
Una vez que se pudo evidenciar la existencia de microorganismos a partir de la
microscopía. La microbiología plantea la necesidad de poder lograr el crecimiento “In Vitro” de las distintas formas de microorganismos bacterias, parásitos y finalmente virus. La historia de la microbiología permitió desarrollar este aspecto como un principio de observación. Entre otros, el aspecto que se solía observar con mayor frecuencia era el crecimiento de organismos en heridas, alimentos y/o superficies. En todos los casos con determinadas condiciones de temperatura, pH y principalmente de factores nutricionales. Los “medios de cultivo” como se los conoce actualmente, tienen una aplicación esencialmente en lograr el desarrollo de bacterias, para otros microorganismos como los parásitos los medios de cultivo no tienen una aplicación diagnóstica por las características propias de los parásitos, para estos el diagnóstico se basa en evidenciar la presencia del parásito en la muestra del paciente o bien mediante técnicas inmunológicas las cuales reflejan la producción de anticuerpos del huésped. En el caso de los Virus los medios de cultivo son básicamente líneas de células de crecimiento continuo o cultivos celulares. Cuando se utiliza el cultivo como un método diagnóstico suele ser el tipo de enfermedad o patología infecciosa la que define el tipo de medio de cultivo que se utilizará y si es necesario inhibir a otras bacterias acompañantes.
2. OBJETIVOS
2.1. OBJETIVO GENERAL
● Aprender las técnicas de preparación y almacenaje de medios de
cultivo bacterianos más comunes, que se utilizan para el cultivo de los microorganismos en diferentes muestras y lograr el crecimiento y desarrollo óptimo de las bacterias
2.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
● Familiarizarse con las técnicas básicas utilizadas en el laboratorio de
microbiología, preparación de medios de cultivo y esterilización del material de laboratorio. ● Aprender las técnicas de preparación de medios de cultivo de diferentes clases y su forma de esterilización
3. MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS
MATERIALES EQUIPOS REACTIVOS
● Matraz Erlenmeyer ● Balanza analitica ● Agua Destilada
de 250ml ● Estufa ● Agar Sabouraud ● Vaso de precipitado de 250ml ● Probeta de 100ml ● Papel aluminio ● Espátula ● 4 cajas petry ● Mechero de alcohol ● Asa microbiológica ● Asa de Digralsky
4. PROCEDIMIENTO ❖ Desinfectar los mesones con hipoclorito y luego con alcohol. ❖ Dispones el material necesario. ❖ Lavar y desinfectar el material a usar. ❖ Realizar los cálculos para la preparación. ❖ Revisar específicamente del medio de cultivo (necesitamos 160 ml de agua destilada y 10.4 gr de agar Sabouraud, esto para 4 placas grandes de 40 ml cada uno). ❖ Realizar la pesada del medio de cultivo en este caso 10.4 gr de agar Sabouraud. ❖ Llevar a ebullición hasta diluir (lograr tres vapores) ❖ Esperar a que enfríe un poco (tapar la boca del matraz con papel aluminio, para que no se contamine) ❖ Encendemos las hornillas ❖ Realizar el plaqueado ❖ Esperar a que el agar se solidifique ❖ Codificar las placas con las iniciales del agar (A.S) y grupo. ❖ Procedemos a cultivar en cada placa con diferentes muestras. 5. RESULTADOS
Muestra de saliva
En el agar realizado de una muestra salival
vemos el crecimiento bacteriano de lo que se puede sospechar una proteobacteria dónde se detecta que las encías sanas predominan a crear estas bacterias. Estás proteobacterias incluyendo variedad de patógenos como ser escherichia salmonella entre otros. Con esto no decimos que el paciente pueda correr riesgos si no que esto es algo común en la boca ya que sí lleva más de 700 especies diferentes de bacterias en la boca Se sospecha el crecimiento de hongos.
Muestra de zapato
Se muestra el crecimiento de múltiples
microorganismos que formaron distintas colonias donde se muestra el desarrollo y proliferación de la bacteria. El 96% de los zapatos se encuentra en contacto directo con las bacterias o microorganismos cuya hábitat son el ambiente natural pero se detectaron entre 7 a 10 colonias Muestra de suero
Sí se encontraron bacterias y hongos de
crecimiento en el agar este puede ser por alguna contaminación del agar o descuido de los que sembraron
Muestra Negativa
Si hubo crecimiento dado caso que se crearon
colonias que se identificaran, es posible el agente extraño entrara al agar, o posiblemente este esté sucio
6. DISCUSIÓN
Discusión
Para la obtención de los cultivos se tiene primero que obtener a los microorganismos, en primera instancia se tiene que hablar de Robert Koch (padre de la bacteriología) donde explica como los microorganismos están presentes en lo cotidiano y que estos son agentes causantes de enfermedades.
La elaboración de un medio de cultivo es esencial ya que es un material nutritivo para el
crecimiento de microorganismos, la mayoría de ellos pueden crecer en cualquier tipo de cultivo, sin embargo hay otras que requieren medios especiales, en otras no crecen en ninguno de los medios existentes. Cuando se hace el cultivo en medio solido se le agrega un agente solidificante conocido como agar que es un polisacárido complejo proveniente de un alga marina utilizada anteriormente como espesante de alimentos como jaleas y helados y sirve esencialmente ya que pocos microorganismos pueden degradar el agar permaneciendo en estado sólido, en los laboratorios el agar se mantiene en baños de agua a 50°C ya que no altera a la mayor parte de las bacterias cuando son vertidas.
Así mismo una vez que el agar se solidifica puede incubarse a temperaturas que se aproxima a los 100°C antes de que se licue y sirven principalmente cuando se desea cultivar bacterias termófilas
Los medios con agar se utilizan en tubos de ensayo o en placas Petri cuando el agar se solidifica en un tubo de posición vertical se denomina profundo mientras que las de Petri se realizan en placas poco profundas con una tapa que cubre perfectamente la base para evitar la contaminación de otro microorganismo.
En lo que se elaboró en los laboratorios fue por el medio solido mediante el uso de placas Petri con el método de cultivo puro (método de siembra por estría en placa) en el cual se introduce un asa de inoculación estéril en un cultivo mixto que contenga un microorganismo y se distribuye en la superficie del medio nutritivo para su posterior crecimiento y observación de la bacteria que se aisló.
7. CONCLUSIONES
Como grupo llegamos a la conclusión de que para realizar medios de cultivos de cualquier especie micobacteriana tenemos que ser muy cuidadosos a la hora de sembrar y realizar su correspondiente agar ya que nos podemos contagiar de alguna patología que desprenden estos mismos, los medios de cultivo son esenciales para determinar el crecimiento bacteriano en los diferentes medios de cultivo ya que las bacterias se reproducen por fisión binaria (bacterias similares a la madre) o por brotación (formación de una protuberancia inicial) que se agranda y toma el tamaño de una célula y posteriormente se separa por eso es esencial en la microbiología la observación y crecimiento bacterianos para su posterior análisis en caso de enfermedades patógenas.
