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    Laboratorio ADN

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    El documento describe dos procedimientos para extraer ADN: uno de una banana y otro de saliva humana. Ambos procedimientos involucran licuar o mezclar la muestra con una solución detergente de NaCl y shampoo/detergente, filtrar la mezcla, y agregarla a alcohol frío para que el ADN precipite y pueda ser observado al microscopio.

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    El documento describe dos procedimientos para extraer ADN: uno de una banana y otro de saliva humana. Ambos procedimientos involucran licuar o mezclar la muestra con una solución detergente de NaCl y shampoo/detergente, filtrar la mezcla, y agregarla a alcohol frío para que el ADN precipite y pueda ser observado al microscopio.

    Descripción original:

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    El documento describe dos procedimientos para extraer ADN: uno de una banana y otro de saliva humana. Ambos procedimientos involucran licuar o mezclar la muestra con una solución detergente de NaCl y shampoo/detergente, filtrar la mezcla, y agregarla a alcohol frío para que el ADN precipite y pueda ser observado al microscopio.

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    El documento describe dos procedimientos para extraer ADN: uno de una banana y otro de saliva humana. Ambos procedimientos involucran licuar o mezclar la muestra con una solución detergente de NaCl y shampoo/detergente, filtrar la mezcla, y agregarla a alcohol frío para que el ADN precipite y pueda ser observado al microscopio.

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    Procedimiento para la extracción del ADN de frutas

    1. En una licuadora, licuar una banana por 15-20 segundos, hasta que la solución se mezcle.
    2. En un vaso de precipitados, preparar una solución detergente de la siguiente manera: una
    cucharadita de té de shampoo y dos pizcas de NaCl, más 20 ml de agua destilada.
    Disolver la sal y el shampoo revolviendo lentamente evitando formar espuma.
    3. A la solución detergente, agregar tres cucharaditas de té de la mezcla de banana del paso
    1.
    4. Mezclar la solución por 5-10 minutos.
    5. Mientras uno de los miembros del grupo mezcla la solución de banana, otro miembro del
    grupo pondrá el filtro Nº 2 de café dentro de otro vaso de precipitados. Doblar el borde del
    filtro alrededor del vaso para que el filtro no toque el fondo.
    6. Filtrar la mezcla vertiéndola dentro del filtro y dejar que la solución drene por algunos
    minutos hasta obtener aproximadamente 5 ml de filtrado para testear.
    7. Tomar un tubo de ensayo con alcohol frío. Para mejores resultados el alcohol debe estar tan
    frío como sea posible.
    8. Llenar la pipeta plástica con la solución de banana y agregarla al alcohol. El ADN no es
    soluble en alcohol. Cuando el alcohol se agrega a la mezcla, los componentes, excepto el
    ADN, permanecen en la solución mientras el ADN precipita en la capa de alcohol ya que el
    NaCl agregado neutraliza las cargas del grupo fosfato.
    9. Dejar la solución reposar por 2 a 3 minutos sin mover. Es importante no batir el tubo de
    ensayo. Se puede observar el ADN blanco el cual precipita en la capa de alcohol.
    10. Colocar con cuidado la varilla de vidrio dentro del tubo de ensayos para retirar una
    pequeña cantidad de fibras de ADN, esparciéndolas sobre un portaobjetos. Colorear el
    preparado con azul de metileno durante 1 minuto y observar el preparado al microscopio óptico
    entre porta y cubre.

    Procedimiento para la extracción del ADN de saliva

    1. Preparar un tubo de ensayo con alcohol etílico

    2. Poner un poco de agua en un vaso y enjuagarse la boca enérgicamente durante


    al menos medio minuto para arrastrar el mayor número posible de células de
    descamación de la mucosa bucal (antes de hacerlo conviene haber tragado
    saliva para eliminar la acción de las enzimas contenidas en ella)

    3. En el mismo vaso, añadir 20 ml de agua y 1 gramo de NaCl junto a un par de


    gotas de detergente removiendo suavemente sin que se forme espuma.

    4. Expulsar el agua de enjuague en el vaso de precipitados sobre la solución


    anterior y remover con la varilla de vidrio suavemente durante varios minutos
    sin que se forme espuma.

    5. Añadir la solución suavemente del tubo de ensayo que contiene el alcohol


    dejándola resbalar por la pared del tubo inclinado. Dejar reposar durante 2 o 3
    minutos sin moverlo en absoluto.

    6. Esperar unos minutos mientras el ADN precipita en la interfase.

    Actividades

    Preguntas para el análisis de la experiencia


    1)Esquematizar las experiencias llevadas a cabo:
    2)Dibujar y rotular las observaciones al microscopio óptico (no olvidar indicar el aumento
    utilizado)
    3) ¿Cuál es la función del alcohol en las experiencias?¿Cuál es la función del detergente en
    las experiencias?

    4)Por qué se utiliza un colorante básico para teñir el ADN?

    . 5) ¿Qué ocurre con el material genético que se consume?

    6)A modo de integración de conceptos, describir y modelizar (dibujar) las estructuras y


    propiedades del ADN y cómo se vinculan las mismas con lo trabajado en esta práctica.

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