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    Practica 3

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    Olga Ayala
    Este documento presenta las instrucciones para preparar una curva de calibración utilizando un espectrofotómetro UV-VIS para cuantificar una muestra de permanganato de potasio (KMnO4). Describe los materiales necesarios, la preparación de soluciones patrón de diferentes concentraciones, la medición de la absorbancia, el trazado de la curva de calibración, el cálculo de la ecuación de regresión lineal y la determinación de la concentración desconocida de la muestra mediante la curva.

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    Olga Ayala
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    Este documento presenta las instrucciones para preparar una curva de calibración utilizando un espectrofotómetro UV-VIS para cuantificar una muestra de permanganato de potasio (KMnO4). Describe los materiales necesarios, la preparación de soluciones patrón de diferentes concentraciones, la medición de la absorbancia, el trazado de la curva de calibración, el cálculo de la ecuación de regresión lineal y la determinación de la concentración desconocida de la muestra mediante la curva.

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    MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO

    DE QUIMCIA ANALITICA INSTRUMENTAL

    Práctica 3. Preparación de una curva de calibración

    1. Objetivo
    1.1. Que el alumno tenga la capacidad elaborar una curva de calibración y la
    cuantificación de una muestra de materia prima realizando las lecturas en un
    espectrofotómetro UV-VIS.

    2. Prelaboratorio
    2.1. ¿Qué es una curva de calibración?
    2.2. Escriba la ecuación de la recta y mencione el significado de las partes que la
    forman.
    2.3 Mencione la definición y como realizar el cálculo de: límite de detección, rango
    dinámico de la curva, sensibilidad analítica y sensibilidad de calibración.

    3. Materiales, equipos y reactivos


    3.1. Espectrofotómetro UV-VIS
    3.2. Balanza analítica
    3.3. Estándar de KMnO4 de pureza conocida
    3.4. Muestras problema de KMnO4
    3.5. Vaso de precipitados
    3.6. Matraz volumétrico
    3.7. Pipeta volumétrica
    3.8. Gotero
    3.9. Perilla

    4. Seguridad y manejo de reactivos y residuos


    4.1. Recolectar los residuos para que sean desechados de forma segura.

    5. Introducción o fundamento teórico


    La calibración se consigue al obtener la señal de respuesta absorbancia, altura del
    pico, área del pico) en función de la concentración conocida del analito. Una curva de
    calibración se prepara con una gráfica de los datos o ajustándoles una ecuación
    matemática aceptable, como la ecuación de la recta dada por la pendiente y la
    ordenada al origen que se usa en el método de los mínimos cuadrados lineales.
    El paso siguiente es la etapa de predicción en la que se obtiene la señal de respuesta
    para la muestra y se usa para predecir la concentración desconocida del analito, a
    partir de la curva de calibración o de la ecuación de mejor ajuste.
    La concentración del analito en la muestra original se calcula luego mediante la
    concentración obtenida aplicándole los factores de dilución convenientes tomados de
    los pasos que se siguieron para preparar la muestra.

    La ecuación de la recta se puede expresar matemáticamente de la siguiente manera:

    y = mx+b
    En donde y es la respuesta analítica obtenida experimentalmente, m es la pendiente
    de la recta, x es la concentración y b es la ordenada al origen.
    Para poder calcular la concentración desconocida de una muestra problema a partir
    de la ecuación de la recta de una curva de calibración se debe despejar x de la
    ecuación. Siempre y cuando la respuesta obtenida por la muestra este dentro del
    rango valido para que se pueda interpolar, ya que no es valido calcular cuando la
    respuesta analítica esta por encima o por debajo de este rango valido.

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    MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO
    DE QUIMCIA ANALITICA INSTRUMENTAL

    6. Desarrollo experimental
    6.1. Elaborar una solución madre de 5x10-2 M con el estándar de KMnO4 disuelto en
    agua destilada.
    6.2. Preparar una curva de calibración de 5 niveles a partir de la solución madre,
    teniendo una concentración máxima de 1.6x10-2 M aforando con agua destilada.
    6.3. Leer la curva de calibración y la muestra problema en el espectrofotómetro UV -
    Vis a una longitud de onda de 520 nm utilizando una celda de cuarzo/vidrio de 1 cm de
    ancho y agua destilada como blanco.
    6.4. Obtener la absorbancia de cada preparación y completar la siguiente tabla.

    Nivel Volumen de solución Volumen de Concentración


    madre mL aforo mL (M)
    1 1.0x10-3
    2 2.0x10-3
    3 4.0x10-3
    4 8.0x10-3
    5 1.6x10-2

    8. Recolección de datos experimentales


    7.1. Registrar la pureza del estándar, los pesos del estándar y la muestra
    7.1. Completar la siguiente tabla

    Nivel Absorbancia
    1
    2
    3
    4
    5
    Muestra

    8. Instrucciones de cálculos y resultados


    8.1. Realizar una grafica de absorbancia vs concentración con los datos obtenidos de
    la curva de calibración.
    8.2. Calcular la ecuación de la recta y el coeficiente de correlación (R2).
    8.3. Calcular la concentración de la muestra problema utilizando tu curva de
    calibración.

    9. Bibliografía.
    10.1. Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos (FEUM) 11ª edición.
    10.2. Análisis químico cuantitativo, Daniel C. Harris.
    10.3 Principios e análisis instrumental, Douglas A. Skoog.

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