Universidad Nacional Autónoma de México: Programa de Maestría Y Doctorado en Ingeniería

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
PROGRAMA DE MAESTRÍA Y DOCTORADO

EN INGENIERÍA
FACULTAD DE INGENIERÍA
TRATAMIENTO BIOLÓGICO PARA LA REMOCIÓN

DE COMPUESTOS ORGANOCLORADOS EN LOS
EFLUENTES PROVENIENTES DE LA INDUSTRIA
PETROQUÍMICA
T E S I S
QUE PARA OPTAR POR EL GRADO DE:
MAESTRO EN INGENIERÍA
AMBIENTAL - AGUA
P R E S E N T A :
ALEJANDRO CANUL CHUIL
TUTOR:
DRA. PETIA MIJAYLOVA NACHEVA
2006
UNAM – Dirección General de Bibliotecas
Tesis Digitales
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JURADO ASIGNADO:
Presidente: Dr. González Martínez Simón
Secretario: Dr. Durán Moreno Alfonso
Vocal: Dra. Mijaylova Nacheva Petia
1er. Suplente: Dra. Fernández Villagómez Georgina
2do. Suplente: Dr. Buitrón Méndez Germán
Lugar donde se realizó la tesis:
FACULTAD DE INGENIERÍA CAMPUS MORELOS
TUTOR DE TESIS:
DRA. PETIA MIJAYLOVA NACHEVA
_________________________________
FIRMA
AGRADECIMIENTOS
Al CONACYT, por la beca otorgada para la realización de los estudios de

maestría.
A la DGEP por el apoyo económico recibido y por la participación en el XI

congreso nacional de biotecnología bioingeniería, en Mérida, Yucatán.
A la Dra. Petia, por la dirección del presente trabajo, por sus valiosas enseñanzas
y por su gran apoyo incondicional.
A la Biol. Yolanda Hornelas, por su ayuda en la realización de las pruebas de

Microscopía Electrónica.
A mi comité de evaluación: Dra Petia Mijaylova, Dr. Alfonso Durán, Dr. Simón
González, Dr. Germán Buitrón y la Dra. Georgina Fernández, por el tiempo
dedicado en las observaciones y comentarios durante la revisión del documento.
A mis amigos de generación: Octavio, Mariana y Karla, por su gran apoyo y

amistad.
A mariana y Fabi, gracias por todo.
A mis amigos y compañeros de la planta piloto del IMTA, porque cada uno de ellos
me enseño algo nuevo de la vida y por compartir grandes momentos.
A Dios.
A mis Padres.
ÍNDICE GENERAL
Página
Resumen…………………………………………………………………………….. i
Abstract………………………………………………………………………………. ii
Índice general………………………………………………………………………... iii
Índice de tablas……………………………………………………………………… v
Índice de figuras……………………………………………………………………... v
Introducción....................................................................................................... vii
Justificación....................................................................................................... viii
Objetivo............................................................................................................. ix
Capítulo I. Antecedentes................................................................................ 1
1.1 Procesos biológicos para tratamiento de aguas residuales……………...... 1
1.1.1 Clasificación de sistemas biológicos.….................................................... 1
1.1.1.1 Metabolismo aerobio.......................................................................... 3
1.1.1.2 Metabolismo anaerobio...................................................................... 4
1.1.1.2.1 Factores ambientales relacionados con la digestión anaerobia... 5
1.2 Biomasa suspendida …………………….…………………………………….. 6
1.3 Biomasa Fija ………….……………………………………………………….... 7
1.3.1 Crecimiento de biopelículas….……………………………………………. 7
1.3.2. Alimentación de biopelícula y depuración del agua residual………… 8
1.4. Procesos de biodegradación...................................................................... 8
1.4.1 Biodegradación anaerobia/aerobia….……………………………………. 10
1.4.2 Factores que afectan el proceso de biodegradación............................. 10
1.4.2.1 Efecto de la temperatura.................................................................. 11
1.4.2.2 Efecto del pH.................................................................................... 11
1.4.2.3 Requerimiento de Oxígeno............................................................... 11
1.4.2.4 Toxicidad….……………..………………………………………………. 11
1.4.3 Contaminantes orgánicos prioritarios en los procesos biológicos.….…... 11
1.4.4 Aclimatación de microorganismos..………………………………………… 12
1.4.4.1 Presencia de toxinas.…….….……….................................................. 13
1.4.4.2 Desintoxificación.….………………………………………… ………….. 14
1.4.4.3 Deshalogenación.…….…………........................................................ 14
1.4.4.4 Mecanismos de activación y deshalogenación .…............................. 15
1.4.4.5 Proceso de crecimiento...................................................................... 16
1.5 Mecanismos utilizados por los microorganismos para la degradación de
compuestos orgánicos específicos ……………………………………………….. 16
1.6 Biodegradación de compuestos orgánicos específicos............................... 17
1.7 Biodegradación de compuestos xenobióticos............................................. 18
1.7.1 Biotransformaciones de hidrocarbonos alifáticos clorados.................... 18
1.7.2 Propiedades de compuestos clorados….………………………………… 20
1.7.3 Biodegradación de compuestos clorados ……………………………….. 22
1.8 Tratamiento de agua de petroquímica……...………………………………… 24
1.8.1 Características del agua residual de la industria petroquímica y límites
permisibles en las descargas ……………………………………………... 24
Capitulo II. Metodología................................................................................. 27
2.1 Instalación experimental.………………………………………………………. 27
iii
2.2 Caracterización de empaques.………………………………………..……... 30
2.3 Composición del agua modelo………………………………………………... 30
2.4 Nutrientes necesarios para el desarrollo de los procesos 31
biológicos……………………………………………………………………………..
2.5 Operación y control del proceso ……………………………………………… 32
2.5.1 Biofiltro anaerobio….………………………………………………………. 32
2.5.1.1 Inoculación y arranque, desarrollo de la biopelícula y adaptación de
los microorganismos a los sustratos ……………………………………………… 32
2.5.1.2 Aclimatación y evaluación a mayores COV.………………………….. 32
2.5.1.2.1 Cromatografía de gases...………….…………………………….. 33
2.5.1.2.2 Microscopía electrónica de barrido…………………………….…. 33
2.5.1.3 Control de proceso en los biofiltros……………….…………………… 33
2.5.1.3.1 Demanda química de oxígeno.…………………………………….. 34
2.5.1.3.2 Conductividad eléctrica……………………………………………. 34
2.5.2.3.3 Determinación de pH……… ……………………………………….. 35
2.5.2.3.4 Alcalinidad,relación alfa y contenido de ácidos grasos volátiles 35
2.5.1.3.5 Cloruros........................................................................................ 35
2.5.1.3.6 SST y SSV…….……………………………………………………… 35
2.5.1.4 Determinación de la cantidad de la biomasa en los biofiltros…….. 36
2.5.2 Lodos activados….…………………………………………………………… 37
2.5.2.1 Control del proceso……………………………………………………… 37
Capítulo III Resultados……………………………………………………………. 38
3.1 Caracterización de los empaques..…………………………………………… 38
3.2 Comportamiento del proceso de biofiltración anaerobia…..…….…………. 39
3.2.1 Remoción de la DQO en los biofiltros anaerobios…………………….... 39
3.2.2 Análisis de la remoción de los compuestos organoclorados por
cromatografía de gases…………………………………………………………….. 42
3.2.3 Comportamiento de la conductividad……………………………………. 44
3.2.4 Análisis de cloruros………………………………………………………… 45
3.2.5 Comportamiento de pH.…………………………………………………… 46
3.2.6 Control de alcalinidad……………………………………………………… 48
3.2.7 Comportamiento de ácidos grasos volátiles (AGVs).…………………... 49
3.2.8 Relación de alcalinidades alfa……………………………………….……. 50
3.2.9 Potencial redox……………………..………………………………………. 51
3.2.10 Control de los SST y SSV en los efluentes de los biofiltros………….. 52
3.2.11 Cantidad de biomasa en los biofiltros…………………………………... 52
3.2.12 Control de temperatura………………………...………………………… 53
3.2.13 Micrografía electrónica de barrido……………………………………… 54
3.3 Resultados obtenidos en el sistema de biodegradación aerobia con
biomasa suspendida durante la etapa de tratamiento anaerobio-
aerobio……….....……………………………………………………………………. 57
Conclusiones………………………………………………………………………… 62
4. Bibliografía…................................................................................................. 64
Anexo A………………………………….............................................................. 68
Anexo B………………………………………………………………………………. 70
Anexo C………………………………………………………………………………. 73
Anexo D………………………………………………………………………………. 74
iv
ÍNDICE DE TABLAS
TABLA Página
1.1 Principales mecanismos que pueden ocurrir durante la aclimatación.…... 14
1.2 Propiedades de compuestos clorados…….…………………………………. 21
1.3 Toxicidades que presentan los compuestos a la biomasa………….……… 22
1.4 Características del agua residual de la industria Petroquímica.................. 25
1.5 Contaminantes y límites máximos permisibles............................................ 25
1.6 Contaminantes prioritarios que marca la EPA ……………………………… 26
2.1 Propiedades típicas del carbón activado granular “Clarimex”…………….. 30
2.2 Composición del agua sintética……………………………………………..… 31
2.3 Parámetros de operación……………………………………….. ……………. 32
2.4 Condiciones de operación del cromatógrafo de gases modelo CP 3800… 33
2.5 Parámetros para el control de proceso anaerobio………………………….. 34
2.6 Parámetros de control para el proceso aerobio…….……………………….. 37
3.1 Características de los materiales de soporte………………..…………….. 38
3.2 Eficiencia de remoción de 1,2-dicloroetano con CAG y tezontle………….. 42
3.3 Resultados de cromatografía de gases………………………………………. 43
3.4 Eficiencia de remoción de los compuestos clorados con CAG y tezontle
43
durante la tercera etapa……………………………………………………………..
3.5 Promedios de los SST y SSV en los efluentes de los biofiltros durante la
tercera etapa del trabajo experimental……………………..…………………….. 52
ÍNDICE DE FIGURAS
FIGURA Página
1.1 Balance de carbono en el tratamiento aerobio y anaerobio....................... 3
1.2 Cadena de transporte electrónico para la respiración anaerobia.………… 4
1.3 Representación esquemática del flujo de carbono en el proceso de
digestión anaerobia………………………………………………………..……… 5
1.4 Sistema de lodos activados …………………………………………………… 7
1.5 Ejemplos de reacciones de decloración (reductiva) que ocurren bajo
condiciones anaerobias……………………………………………………………. 19
1.6 Transformaciones de hidrocarbonos clorados………………………………. 20
1.7 Biotrasnformación del 1,2-DCA………….……………………………………. 23
2.1 Esquema de la instalación experimental.…………………………………….. 28
2.2 Fotografías del arreglo experimental…………………………………………. 29
3.1 Fotografía de los poros de granulo de CAG y tezontle……………………... 38
3.2 Comportamiento de la DQO en los biofiltros con CAG y tezontle…………. 39
3.3 Tasa de degradación de los compuestos organoclorados…...……………. 41
3.4 Comportamiento de la conductividad……………………….………………… 45
3.5 Análisis de cloruros………………………………………………………….….. 46
3.6 Comportamiento del pH………………………………………………………... 47
3.7 Comportamiento de la alcalinidad………………………………………….…. 48
3.8 Comportamiento de AGVs……….…………………………………………..... 50
3.9 Relación alfa…………………………………………………………..………… 51
3.10 Potencial óxido-reducción………………….………………………………… 52
3.11 Comportamiento de la temperatura en los biofiltro……..…………………. 53
v
3.12 Micrografía del análisis electrónico de los gránulos de CAG y tezontle… 55
3.13 Micrografía del análisis electrónico de los gránulos de CAG y tezontle
56
durante la tercera etapa……………………………………….…………………...
3.14 Concentraciones de la DQO en los efluentes de los reactores aerobios
instalados durante la tercera etapa del estudio………………………………….. 58
3.15 Eficiencia de remoción de los lodos activados...………………….……….. 58
3.16 Concentraciones de SST y SSV en los reactores aerobios…….………… 60
3.17 Conductividad de los sistemas de lodos activados………………………... 61
vi
Resumen
RESUMEN
La Industria petroquímica que produce compuestos organoclorados genera aguas
residuales que contienen hidrocarburos alifáticos clorados. Estos compuestos son tóxicos
y cancerígenos; es por ello que existe el interés de biodegradar varios de estos
compuestos tanto por microorganismos aerobios, como por anaerobios. En base a la
caracterización del efluente de una industria petroquímica en México, se han determinado
los principales compuestos clorados y sus concentraciones promedio. Para dar solución al
tratamiento del efluente, se realizó este estudio para determinar la remoción y/o
biotransformación de compuestos clorados mediante degradación anaerobia en biofiltros,
seguido por reactores con biomasa suspendida tipo lodos activados; variando el medio de
soporte, uno de ellos con tezontle y el otro con carbón activado granular.
El estudio se dividió en tres etapas. En la primera etapa se utilizó una carga
orgánica volumétrica (COV) de 0.58 kgm3⋅d-1. En la segunda etapa se incrementó a 1.22
kgm-3d-1. Finalmente, en la tercera etapa se incrementó a 1.82 kg⋅m-3⋅d-1. Durante la
tercera etapa experimental, para complementar el tratamiento se instalaron dos sistemas
de biodegradación aerobia con biomasa suspendida, tipo lodos activados, una para el
efluente de cada biofiltro anaerobio. Esto debido a que en los biofiltros anaerobios la
remoción de organoclorados y de DQO disminuyó.
Al aplicar las cargas orgánicas hasta 1.22 kg⋅m-3⋅d-1 en el biofiltro con CAG se
obtuvieron remociones de DQO de 95%, mientras que en el biofiltro con tezontle se
obtuvo un 88%. En el caso de la remoción de los compuestos clorados, éstos fueron
mayores al 99.9% en el biofiltro con CAG y mayores de 99.6% en el biofiltro con tezontle.
El biofiltro con CAG operado con cargas orgánicas hasta 1.22 kg⋅m-3⋅d-1 puede ser
utilizado como único sistema de tratamiento para remover compuestos alifáticos clorados.
Con el aumento de la carga orgánica a 1.82 kg⋅m-3⋅d-1 la remoción de DQO en los biofiltros
anaerobios disminuyó: 89% en el biofiltro con CAG y 80% en el biofiltro con tezontle 80%.
Disminuyó y la remoción de los compuestos clorados en ambos biofiltros, siendo la
remoción del 1,2-dicloroetano de sólo 54% y las remociones de 1,1,1- tricloroetano,
tricloroetileno, y tetracloruro de carbono entre 83 y 99.6%.
Finalmente, se comprobó que el sistema acoplado anaerobio-aerobio permite
lograr remociones de DQO mayores de 95% en los casos cuando los biofiltros anaerobios
se operan con la mayor carga orgánica, de 1.82 kg⋅m-3⋅d-1; mientras que los remanentes
de los compuestos organoclorados presentes en los efluentes de los biofiltros anaerobios,
se remueven por completo en los reactores aerobios.
i
Abstract
Abstract
The petrochemical industries produce chlorinated organic compounds generate
wastewaters that contain chlorinated aliphatic hydrocarbons. These compounds are toxic
and carcinogenic. The one possibility has been reported as biodegradable by
microorganisms under both aerobic and anaerobic conditions. With base in the
characterization of the effluent of a petrochemical industry in Mexico, the main chlorinated
compounds and their concentrations have been determined average. In order to give
solution to the treatment of the effluent, the goal of the present study consist to determine
the removal and/or biotransformation of chlorinated compounds was utilizing anaerobic
degradation in biofilters followed by reactors with suspended biomass type activated
sludge process. The difference between both biofilters used was the means of used
support (puzolane and activated carbon).
The study was dividing in three stages (steps). In the first, a volumetric organic loading
(VOL) of 0.58 kg⋅m-3⋅d-1 was using. In the second stage was increasing to 1.22 kg⋅m-3⋅d-1.
Finally in the third stage was increasing to 1.82 kg⋅m-3⋅d-1.During the third experimental
stage, to complement the treatment because in chlorinated organic compounds the
anaerobic biofilters the removal of and COD diminished, settled two systems of aerobic
biodegradation with suspended biomass, type activated sludge process, one for the
effluent of each biofilter anaerobic.
Applying VOL up to 1.22 kg⋅m-3⋅d-1 in biofilter with CAG removed of COD of 95% was
obtained, whereas in biofilter with puzolane 88% are obtained. The removal of chlorinated
compounds was greatening to the 99.9% in biofilter with CAG and 99.6% in biofilter with
puzolane. Biofilter with CAG operated with VOL up to 1.22 kg⋅m-3⋅d-1 can be used like only
system of treatment to remove chlorinated aliphatic hydrocarbons.
The removal of COD in the anaerobic biofilters diminishes was applying to a greater load
of 1.82 kg⋅m-3⋅d-1. Biofilter with CAG a removal of COD was 89% whereas the removal of
COD was 80% with puzolane. The remotion of chlorinated compounds in both biofilters
was also affecting, being the removal of the 1,2-dichloroethane of only 54% and the
remotion of 1,1,1- trichloroethane, trichloroethylene, and carbon tetrachloride between 83
and 99.6%.
The connected system anaerobic-aerobic allows obtained greater remotion of COD of 95%
and in this cases the anaerobic biofilters operate with the greater volumetric organic
loading, of 1.82 kg⋅m-3⋅d-1.The surpluses of present chlorinated organic compounds in the
effluents of the anaerobic biofilters was removing completely in the aerobic reactors.
ii
Introducción
Introducción
Debido al peligro que representan los diversos contaminantes xenobióticos que se
han estado disponiendo sin ningún tratamiento previo en los diferentes elementos
del medio ambiente, es muy conveniente hacer hincapié en la necesidad de llevar
a acabo el control apropiado de estos contaminantes tóxicos y difíciles de
biodegradar (Melgoza, 2002).
Los compuestos clorados son un grupo importante de contaminantes encontrados
en sedimentos, aguas residuales industriales y suelos. Muchos de estos
compuestos están presentes en la lista de U.S. EPA de contaminantes prioritarios
que indican su potencial peligro para el medio ambiente.
La remediación de cuerpos de agua y de sitios, que se encuentran contaminados
con compuestos clorados están siendo extensamente investigados, y la posibilidad
de aplicación de microorganismos para la limpieza de la contaminación bajo
condiciones aerobias y anaerobias están siendo reconocidas (Van Eeckert, 2001).
Bajo condiciones anaerobias muchos de los compuestos alifáticos clorados
(considerados como compuestos xenobióticos) son transformados por
deshalogenación a compuestos menos clorados; tales como el tricloroetileno,
dicloroetileno, etc. Así, de esta manera, los procesos de transformación anaerobia
convierten a los compuestos alifáticos clorados a especies menos cloradas que
son más fáciles de transformar posteriormente por microorganismos aerobios,
llegando incluso hasta mineralización completa del compuesto (Norris, 1994).
En el presente trabajo se enfocó la atención sobre la biodegradación de
compuestos clorados que presenta una industria petroquímica mexicana en sus
aguas residuales, tales como el 1,1,1-tricloroetano, tetracloruro de carbono,
tricloroetileno y 1,2-dicloroetano, siendo éste el compuesto que presenta una
mayor concentración.
vii
Justificación
Justificación
El 1,2-dicloroetano es un compuesto clorado que ha sido reportado como tóxico

pero biodegradable por ciertos microorganismos bajo condiciones anaerobias y
aerobias. También ha sido reportado que algunos productos intermediarios del
1,2-dicloroetano son tóxicos y mutagénicos, especialmente los aldehídos
halogenados (Garzón-Zuñiga et al., 2004).
En México existe una industria petroquímica que produce etilenos y compuestos
clorados orgánicos (especialmente cloruro de vinilo). Uno de los problemas que
presenta esta industria es que tiene una concentración alta de 1,2-dicloroetano en
sus aguas residuales. Para la solución de este problema se pueden recurrir a
métodos que involucran microorganismos debido a que son eficientes y más
económicos que otras tecnologías fisico-químicas (Yerushalmi, 2003).
Así, de esta manera, la biotecnología ha demostrado que la biodegradación de
compuestos orgánicos específicos es una buena alternativa para el control de la
contaminación, ya que el uso de una biomasa adaptada a los compuestos
orgánicos recalcitrantes y tóxicos, permite su degradación o biotransformación
(Altamirano, 1997).
Por lo anterior, el empleo de microorganismos es una herramienta satisfactoria
para tratar las aguas residuales de los complejos petroquímicos del país, que
contienen compuestos tales como el 1-1 Dicloroetano, 1-2 Dicloroetano,
Tricloroetileno, Benceno, Tetracloruro de Carbono, Percloroetileno, Tricloroetileno,
etc.
viii
Objetivo
Objetivo
Determinar la remoción y/o la biotransformación de compuestos organoclorados

mediante un tratamiento biológico anaerobio en biofiltros o anaerobio-aerobio,
usando como segunda etapa un sistema de biomasa suspendida.
Objetivos particulares
• Aplicar tres diferentes cargas orgánicas volumétricas (COV) para la

remoción y/o transformación de los compuestos clorados.
• Comparar los dos sistemas de tratamiento biológicos anaerobios o sistema
anaerobio-aerobio.
ix
Capítulo I. Antecedentes
CAPÍTULO I.
ANTECEDENTES
1.1 Procesos biológicos para tratamiento de aguas residuales
El tratamiento biológico consiste en reducir el contenido en materia orgánica de

las aguas residuales, reducir su contenido en nutrientes y eliminar los patógenos
y parásitos (Cheremisinoff, 1994).
Una ventaja en el uso de estos tratamientos es que los costos pueden ser
menores que otras tecnologías, como es la incineración. Una desventaja es la
duración del tiempo de proceso implicado en el tratamiento biológico
(Cheremisinoff, 1994).
La biorremediación es una de las nuevas tecnologías prometedoras para
eliminación de contaminantes, debido a que destruye completamente a los
contaminantes en bajo costo. Existen muchos reportes acerca del uso de la
degradación por bacterias aerobias en la biorremediación. Estas bacterias
incluyen, la bacteria metano-oxidativas, bacterias propano-oxidativas y bacterias
degradantes de tolueno y fenol (Fair, 1993, Cheremisinoff, 1994 y Brungard,
2003).
Por lo que existen diferentes mecanismos que pueden ser utilizados para la
degradación de compuestos. La selección está basada en el tipo de contaminante,
el tipo de degradación (aerobia o anaerobia) (Cheremisinoff, 1994).
De esta manera, los procesos biológicos aerobios o anaerobios convierten
parcialmente la materia orgánica biodegradable en sólidos (biomasa) usando
reactores o sistemas de tratamiento a base de biomasa fija o biomasa suspendida.
En un reactor biológico pueden llevarse a cabo procesos que remuevan
contaminantes específicos o que remuevan en forma significativa la carga
contaminante (Cheremisinoff, 1994).
1.1.1 Clasificación de los sistemas biológicos
1
Los objetivos del tratamiento biológico del agua residual son la coagulación y
eliminación de los sólidos coloidales no sedimentables y la estabilización de la
materia orgánica. En el caso del agua residual doméstica, el principal objetivo es
la reducción de la materia orgánica presente y, en muchos casos, la eliminación
de nutrientes (como el nitrógeno y el fósforo). A menudo, la eliminación de
compuestos a nivel traza que puedan resultar tóxicos, también constituyen un
objetivo de importancia en el tratamiento. En el caso de aguas residuales
industriales, el principal objetivo es la reducción de la concentración de
compuestos tanto orgánicos como inorgánicos. A menudo, puede ser necesario
llevar a cabo un pretratamiento previo, debido a la potencial toxicidad de estos
compuestos para los microorganismos (Ramírez-Camperos et al, 2003).
En los procesos biológicos, la materia orgánica contaminante es utilizada como

alimento por los microorganismos presentes en los tanques o reactores. De esta
forma pueden obtener la energía necesaria para reproducirse y llevar a cabo sus
funciones vitales y la materia orgánica es transformada en nuevas células y otros
productos que pueden ser más fácilmente separados del agua (Ramírez-
Camperos et al, 2003).
La principal división entre los procesos biológicos para el tratamiento de las aguas
residuales, se hace con base en la forma en que los microorganismos utilizan el
oxígeno. Así se tienen los procesos aerobios (los requieren oxígeno) y los
anaerobios (los requieren ausencia total de oxígeno). Esto se traduce en sistemas
muy diferentes entre sí, tanto en su microbiología, como en sus aplicaciones, su
ingeniería y su control (Ramírez-Camperos et al, 2003).
Dado que los microorganismos son los responsables de llevar a cabo el proceso
biológico, sus características metabólicas determinarán el tipo de aplicación, así
como sus ventajas y desventajas. Las principales características de los procesos
aerobios y anaerobios desde el punto de vista energético se esquematizan en la
figura 1.1. En ésta se observa que la energía contenida en la materia orgánica
contaminante, utilizada por los microorganismos como demanda química de
oxígeno (DQO) o como demanda bioquímica de oxígeno (DBO), es transformada
2
en diversos productos dependiendo del metabolismo aerobio o anaerobio de la

célula. En general, las bacterias anaerobias utilizarán el 10% de la energía
contenida en su alimento o sustrato para funciones de reproducción, lo que da
origen a nuevas células y el 90% restante lo dirigirá a la producción de metano y
bióxido de carbono. Por su parte, las bacterias aerobias emplearán en presencia
del oxígeno, de un 60 a 65% de la energía del sustrato en la síntesis de nuevas
células, mientras que la fracción restante es disipada en forma de calor (Ramírez-
Camperos et al, 2003).
Carbono en lodos
(49%)
Carbono orgánico en el Tratamiento aerobio

influente (100%)
CHCN + O2 C5H7O2N + CO2 + H2O

Materia orgánica Biomasa
(100%) (49%) Carbono en el efluente tratado (2%)
Biogás Carbono en biogás (92%)

(49%) CO2 + CH4
Carbono en biomasa (4%)

Tratamiento anaerobio Carbono orgánico
en el influente (100%)
Carbono en el efluente tratado (4%)
(CHON)5 + O2 R CH3COOH CO2 + CH4 C5CH4N biomasa (4%)
Biogás
Figura 1.1 Balance de carbono en el tratamiento aerobio y anaerobio. Fuente:

Ramírez-Camperos et al, 2003.
1.1.1.1 Metabolismo aerobio
La descomposición de la materia orgánica por vía aerobia se divide en tres fases

principales: la hidrólisis de las moléculas orgánicas complejas en sus respectivos
monómeros, la descomposición de estos monómeros en intermediarios comunes y
la final en la que se realiza el ciclo de Krebs y la cadena respiratoria, en donde el
3
aceptor final de electrones es el oxígeno molecular, para formar agua como

producto final, junto con el bióxido de carbono y el amoníaco (Ramírez-Camperos
et al, 2003).
La tecnología del tratamiento de aguas residuales por vía aerobia está bien
desarrollada y es sin duda la más comúnmente aplicada. La experiencia
acumulada y las altas eficiencias en la remoción de materia orgánica son algunas
de las razones de su aceptación (Ramírez-Camperos et al, 2003).
1.1.1.2 Metabolismo anaerobio

En el metabolismo anaerobio los compuestos orgánicos generados internamente
por descomposición de la materia orgánica, el bióxido de carbono, los nitritos y
nitratos o los sulfatos se usan como aceptores finales de electrones en una serie
de reacciones complejas en serie (Ramírez-Camperos et al, 2003).
La figura 1.2 presenta la cadena de transporte electrónico para la respiración

anaerobia con los diferentes aceptores de electrones y productos finales
formados.
DH2 CO2 SO4= NO3-

Cadena de transporte
electrónico
ADP + Pi
D CH4 H2S N2, NH3, N2O
Figura 1.2 Cadena de transporte electrónico para la respiración anaerobia. Fuente:

Ramírez-Camperos et al, 2003.
La conversión biológica de la materia orgánica por vía anaerobia se produce en

tres etapas (Figura 1.3). El primer paso del proceso es la transformación por vía
enzimática (hidrólisis) de los compuestos de alto peso molecular en compuestos
que puedan servir como fuentes de energía y de carbono celular. El segundo paso
(acidogénesis), implica la conversión bacteriana de los compuestos producidos en
la primera etapa en compuestos intermedios identificables de menor peso
4
molecular. El tercer paso (metanogénesis), supone la conversión bacteriana de los

compuestos intermedios en productos finales más simples, principalmente metano
y dióxido de carbono (Metcalf, 1996).
Figura 1.3 Representación esquemática del flujo de carbono en el proceso de

digestión anaerobia. Fuente: Metcalf, 1996.
1.1.1.2.1 Factores ambientales relacionados con la digestión anaerobia
a) Temperatura
La temperatura a la que opera un reactor influye de manera importante en la
actividad de la biomasa, dado que las reacciones bioquímicas son directamente
afectadas por este parámetro (Melgoza, 2002).
Los microorganismos anaerobios se dividen, de acuerdo con su temperatura, en
tres categorías: psicrófilos (inferior a 20°C), mesófilos (20 a 40°C) y termófilos (45
a 65°C) (Melgoza, 2002).
No es aconsejable incrementar la temperatura de reactores mesófilos por encima
de 40°C, ya que a temperaturas más altas ocurre un rápido deterioro de las
bacterias. Los procesos anaerobios generalmente, se operan en el intervalo
mesófilo de 25 a 40°C (Melgoza, 2002).
b) pH y alcalinidad
El pH óptimo para la actividad de los diferentes grupos involucrados en la
digestión anaerobia, depende al grupo al que pertenecen; sin embargo, se sabe
5
que el intervalo en el que todas las bacterias pueden interactuar es alrededor de la

neutralidad (6.2-7.8) con presencia entre 7.0 y 7.2 (Melgoza, 2002).
Si el proceso de digestión anaerobia no se controla, la producción biológica de los
AGVs y del CO2 tiende a incrementar la acidez en el reactor con la consecuente
reducción del pH (Melgoza, 2002).
c) Nutrientes
La digestión anaerobia por ser un proceso biológico requiere además de la fuente
de carbono, nutrientes inorgánicos esenciales para el desarrollo de las bacterias y
la síntesis de nueva biomasa, así como para incrementar la actividad específica de
utilización del sustrato. Los nutrientes esenciales son el nitrógeno y el fósforo.
Además de estos nutrientes, se han identificado otros elementos necesarios para
la actividad de las bacterias metanógenas denominados micronutrientes tales
como Ca, K, Mg, Fe, Ni, Co, Mo, Zn, Mn y Cu. (Melgoza, 2002 y Cheremisinoff,
1994).
1.2 Biomasa suspendida

Sistema de lodos activados
El sistema de tratamiento biológico con biomasa en estado suspendido, llamado
“lodos activados” utiliza una gran variedad de microorganismos capaces de
remover materia orgánica presente en el agua, esto se ve favorecido por el uso de
reactores que proveen de las condiciones necesarias para la biodegradación
(Ramírez-Camperos et al, 2003).
El proceso involucra la generación de una masa suspendida de bacterias en un
reactor.
La parte fundamental del sistema de lodos activados es el reactor. Su diseño y
operación está en función de la carga orgánica, temperatura, presencia de
sustancias inhibitorias entre otras (Ramírez-Camperos et al, 2003 y Eckenfelder,
2000).
Descripción del proceso. El agua residual entra al reactor en el que se encuentra
un cultivo de microorganismo constituido principalmente por bacterias en
6
suspensión, las cuales en su conjunto se les conoce como licor mezclado (López,
2004).
Las condiciones aerobias y la materia en suspensión se mantienen por el
suministro de aire, por medio de sistemas de difusión o de aeración mecánica.
Después de un determinado tiempo de retención, el licor mezclado pasa a un
tanque de sedimentación secundaria, donde se realiza la separación del agua
tratada. Ésta sale por la parte superior del tanque y los microorganismos y otros
productos de la degradación se separan en forma de flóculos (Eckenfelder, 2000
y López, 2004).
Una parte de la biomasa sedimentada se retorna al tanque de aireación o reactor
para mantener una concentración deseada de sólidos suspendidos volátiles
(microorganismos) en el licor mezclado, y la otra parte se retira del sistema como
desecho, denominado lodo residual (figura 1.4) (Ramírez-Camperos et al, 2003 y
López, 2004).
Tratamiento secundario
Lodos activados
Aire
Figura 1.4 Sistema de lodos activados
1.3 Biomasa Fija

Son sistemas en los cuales los microorganismos crecen sobre la superficie del
algún material y crean una película biológica. En los sistemas con biomasa fija o
adherida, los microorganismos son retenidos dentro del reactor a diferencia de los
sistemas con biomasa suspendida en los cuales los sólidos suspendidos volátiles
(SSV) salen con el efluente (Alexander, 1994 y Ramírez-Camperos et al, 2003)
1.3.1 Crecimiento de biopelículas
7
El material de soporte para los microorganismos debe poseer ciertas

características de retención de humedad y de adsorción para que inicialmente
ciertos nutrimientos orgánicos y sales sean absorbidos por el material de soporte
antes que los microorganismos puedan colonizar la superficie de éste.
Posteriormente dichos microorganismos son también absorbidos (por fuerzas
electrostáticas entre el material de soporte y los microorganismos). Estos primeros
organismos excretan una serie de polímeros que les sirven para adherirse de
forma más sólida al material de soporte y a la vez forman una capa gelatinosa en
la cual pueden quedar atrapados otros nutrimentos de mayor tamaño y más
microorganismos (Ramírez-Camperos et al,2003).
1.3.2 Alimentación de biopelícula y depuración del agua residual

Los microorganismos toman de la fase líquida las sustancias contaminantes que
les sirven de nutrimentos C, N, P, así como el oxígeno disuelto para degradar la
materia orgánica y también los elementos traza que necesitan. Estas sustancias
reaccionan en la superficie de la biopelícula y luego viajan hacia el interior de la
misma por difusión donde son finalmente digeridas y metabolizadas, creándose
así un gradiente de concentración que permite una difusión continua. Los
productos finales del metabolismo de los microorganismos (por ejemplo CO2 y
H2O) son expulsados a la capa de agua en contacto con la biopelícula. Las
sustancias orgánicas de gran tamaño como materia coloidal o en suspensión son
atrapadas por las sustancias gelatinosas de la biopelícula y luego los
microorganismos excretan enzimas para hidrolizar estos compuestos a moléculas
más pequeñas que luego siguen un curso similar al de las moléculas de bajo peso
molecular (Ramírez-Camperos et al, 2003).
1.4 Procesos de biodegradación

La biodegradación ocurre porque los microorganismos son capaces de
metabolizar la materia orgánica a través de sistemas enzimáticos para producir
dióxido de carbono, agua y energía. La energía es utilizada para la síntesis, la
movilidad y respiración (Cheremisinoff, 1994).
8
La estabilización de la materia orgánica presente en un agua residual se logra

biológicamente utilizando una variedad de microorganismos, principalmente
bacterias. En esta forma la biodegradación es el método más económico para la
remoción orgánica del agua residual (Cheremisinoff, 1994).
Los microorganismos generalmente utilizan diferentes sustancias químicas
sintéticas para su crecimiento. Ellos utilizan estas moléculas como fuente de
energía, C, N, P, S y otros elementos necesarios para las células. Mucha de la
atención ha sido enfocada en la adquisición de fuentes de carbono y energía como
sustancia de crecimiento para hongos y bacterias. Para los sustratos sintéticos
que son degradadas, la molécula es otro sustrato orgánico, del cual la población
puede obtener los elementos necesarios o energía requerida para sus reacciones
biosintéticas (Alexander, 1994 y Melgoza, 1998).
La mineralización de compuestos orgánicos es característica del aumento en la
biodegradación, en el cual los organismos convierten el sustrato hasta CO2,
componentes celulares, y productos típicos catabólicos. Sin embargo la
mineralización ocasionalmente en la naturaleza no puede incitar el crecimiento de
las cepas, pero pueden servir para control de la población de las mismas.
Inversamente, algunas especies que crecen a expensas de compuestos de
carbono pueden no mineralizar y producir compuestos de CO2 a partir del sustrato,
sin embargo, si el O2 está presente, los productos orgánicos excretados por estas
especies probablemente puedan ser convertidos a CO2 por otras especies. Así, de
esta manera, si la población inicial no produce CO2, la segunda especie lo hará. El
efecto neto resulta ser una mineralización (Alexander, 1994 y Melgoza, 1998).
Un compuesto en particular como muchos otros contaminantes ambientales,
puede presentarse como una nueva fuente de carbono y de energía para una
población específica, transformando por la vía metabólica las cuales son
características de los microorganismos heterotróficos (Alexander, 1994).
Varios estudios han demostrado que el número de células microbianas o la
biomasa de especies actúan sobre el compuesto químico de interés,
incrementando el proceso de degradación. Durante un crecimiento típico por
mineralización debido a las bacterias, las células utilizan algunas veces la energía
9
y el carbono del sustrato orgánico para realizar la formación de nuevas células, y

esto por lo tanto, incrementa la población debido a una rápida mineralización
(Alexander, 1994).
1.4.1 Biodegradación anaerobia/aerobia

Muchos compuestos xenobióticos que son refractarios bajo condiciones aerobias,
pueden ser transformados anaerobiamente. Los productos transformados y/o
parcialmente degradados pueden ser completamente mineralizados por
microorganismos aerobios. Estos hechos sugieren que los tratamientos
anaerobios y aerobios son complementarios y que la mineralización total de
compuestos xenobióticos puede realizarse a través de una serie de etapas
reductivas y oxidativas por procesos secuénciales anaerobios/aerobios, en los que
la digestión anaerobia es un tratamiento primario para suministrar parcial o
completamente compuestos destoxificados para el pulimento aerobio (Melgoza,
2002).
1.4.2 Factores que afectan el proceso de biodegradación

El ambiente físico en donde se desarrollan los microorganismos influye de manera
determinante en su proceso de crecimiento. Así, para asegurar una eficiencia
óptima en el tratamiento del agua residual, se debe proporcionar un ambiente
apropiado en los procesos de tratamiento biológicos. Así de esta forma, el
nitrógeno y fósforo en la biomasa, son importantes nutrientes para realizar la
síntesis, metabolismo, y remoción de materia orgánica en el proceso de
tratamiento. Además de estos macronutrientes se requieren de otros nutrientes en
pequeñas cantidades llamados micronutrientes como Mn, Cu, Fe, Mg, Mo, Se, Co,
y Ca (Zurita, 1997).
Para algunos efluentes es necesario agregar nitrógeno y fósforo. Se recomienda
para garantizar los nutrientes necesarios una relación de DBO5: N:P de 100:5:1
(Zurita, 1997y Fair, 1993).
10
1.4.2.1 Efecto de la temperatura

Los cambios en la temperatura afecta a todos los procesos biológicos. No sólo
influye en las actividades metabólicas de los microorganismos, sino también tiene
un efecto sobre la velocidad de transferencia de gases y las características de
sedimentación de los sólidos biológicos (Alexander, 1994 y Zurita, 1997).
1.4.2.2 Efecto del pH

El pH es un factor clave en el crecimiento de la población microbiana. La mayoría
de las bacterias no pueden tolerar niveles de pH por arriba de 9.5 o por debajo de
4.0. Generalmente el pH óptimo para el crecimiento bacteriano varía entre 6.5 y
7.5; y así para la mayoría de los tratamientos biológicos aerobios, en los que las
bacterias son la población predominante (Zurita, 1997).
1.4.2.3 Requerimiento de Oxígeno

El oxígeno libre disuelto es el reactivo esencial para los procesos aerobios, y
cuando los microorganismos aerobios utilizan los nutrientes orgánicos, consumen
al mismo tiempo el oxígeno disuelto. Si no se repone el oxígeno disuelto, el
crecimiento aerobio se detiene cuando se agota el oxígeno, produciendo como
consecuencia procesos anaerobios, lentos y malolientes (Zurita, 1997).
1.4.2.4 Toxicidad
La toxicidad en los sistemas de oxidación biológica pueden deberse a una de las
siguientes causas (Zurita, 1997):
• una sustancia orgánica, como fenol, que es tóxica en altas concentraciones,
pero biodegradable en bajas concentraciones.
• Sustancias, como metales pesados.
• Sales inorgánicas y amoniaco que producen cierta inhibición a altas
concentraciones.
1.4.3 Contaminantes orgánicos prioritarios en los procesos biológicos
11
Cuando los compuestos orgánicos prioritarios entran a un sistema de tratamiento

biológico aerobio o anaerobio, pueden suceder los siguientes fenómenos (Zurita,
1997):
a) Inhibición: el compuesto orgánico interfiere con los procesos biológicos,
resultando en una biodegradación pobre. El hexaclorobenceno muestra
este comportamiento.
b) No biodegradados: la molécula orgánica es esencialmente resistente a la
degradación y pasa por el proceso sin cambio alguno. Por ejemplo los
organoclorados.
c) Conversión química: el contaminante orgánico es parcialmente degradado a
moléculas químicas menos complejas.
d) Biodegradación: el compuesto orgánico es biodegradado a productos
finales como agua y CO2. El fenol, naftaleno, tolueno y hexacloroetano son
fácilmente degradados con una rápida adaptación de la población
microbiana.
e) Aclimatación/degradación: inicialmente existe degradación mínima o nula
del contaminante orgánico, pero después de la aclimatación existe
remoción eficiente y rápida. Algunos ejemplos son el pentaclorofenol,
diclorobenceno y antraceno.
f) Sorción: el compuesto orgánico es adsorbido en las partículas pero sin que
ocurra biodegradación.
1.4.4 Aclimatación de los microorganismos

Cuando se tratan de aguas residuales industriales, particularmente para la
remoción de compuestos orgánicos específicos, es necesario aclimatar la biomasa
al agua residual (Zurita, 1997).
El período de aclimatación se define como la duración de tiempo entre la adición
de un compuesto en un ambiente y una evidencia de su pérdida detectable (Zurita,
1997).
La aclimatación de los microorganismos a los compuestos orgánicos es una fase
importante en el proceso de biodegradación, especialmente para los compuestos
12
difíciles de biodegradar. Su duración cuando los cultivos mixtos son expuestos a

compuestos químicos nuevos o inusuales, varía desde unas pocas horas hasta
varias semanas o meses. La duración depende del tipo de compuesto y un
número de condiciones ambientales. Cuando están implicadas las enzimas
inducibles, la inducción ocurre en períodos relativamente cortos (de minutos a
días), mientras que los cambios más fundamentales, tales como la modificación de
la estructura enzimática o la aparición de mutantes generalmente necesita
períodos mucho más largos (semanas o años) (Alexander, 1994).
La fase de aclimatación se considera que termina con el inicio del período de la
biodegradación (Zurita, 1997).
En la tabla 1.1 Se presentan los diferentes fenómenos que pueden participar en
esta fase (Buitrón y Capdeville, 1995).
La duración de la aclimatación es afectada severamente por factores ambientales
(Alexander, 1994).
La temperatura tiene un mayor impacto sobre el tiempo de duración del periodo
antes de la fase activa. El pH y el estado de aireación del ambiente también
afectan los periodos de aclimatación en algunos compuestos. La concentración de
N, P o ambos puede ser importante en algunos medios, como en algunas aguas
naturales en donde una concentración baja de estos elementos, limita el
crecimiento microbiano (Alexander, 1994).
La concentración de los compuestos que son metabolizados, afecta grandemente
los tiempos antes de detectar una declinación de la concentración de éstos. La
duración de los periodos de aclimatización no es fijo a una concentración fija, ya
que varía según el sitio, debido que algunas comunidades microbianas se
aclimatan a un compuesto particular, mientras que otras no (Alexander, 1994).
1.4.4.1 Presencia de toxinas

Dos circunstancias son comunes en los cuales la presencia de inhibidores podría
afectar la longitud de los periodos anteriores al inicio de la biodegradación rápida.
Primero, el compuesto químico de interés puede presentar altos niveles que con
algunos microorganismos biodegradantes son capaces de crecer o metabolizar, y
13
la biodegradación puede no ser detectable en algunas especies raras, es capaz de

multiplicarse hasta alcanzar la biomasa suficiente para causar una pérdida
química apreciable. Altas concentraciones se encuentran en las descargas de
residuos de manufactura de químicos o en derrames accidentales. Segundo,
muchos sitios contienen mezclas de compuestos químicos tóxicos y uno o más de
los compuestos presentes en esta mezcla puede inhibir el desarrollo de los
microorganismos, destruyendo la sustancia de prueba (Alexander, 1994).
Tabla 1.1 Principales mecanismos que pueden ocurrir durante la aclimatación.

Mecanismo Descripción
Enzimático El organismo no posee la enzima inductiva a menos que el
componente esté presente en el medio. Se produce un metabolismo
fortuito cuando una enzima existente llega a tener una actividad
catalítica adecuada hacia el sustrato nuevo.
Multiplicación de La aclimatación es el período necesario para la multiplicación de una
microorganismos población pequeña inicialmente de microorganismos activos. De toda
especializados la gama de bacterias con distintas funciones alguna es apropiada para
adaptarse a un medio ambiente determinado y sobrevive. Las otras,
morirán. En esta fase hay una selección de degradadores
Cambios Las mutaciones o cambios genéticos se han asociado a ciertos casos

genéticos de aclimatación. La aclimatación puede ser fenotipo o genotipo. En el
proceso fenotipo la información genética permanece sin cambio, sólo
se modifica el grado de expresión en los genes. En el proceso
genotipo se produce modificación genética y los genes modificados
son transmitidos a las células hijas.
Limitación de La ausencia de CO2 en el medio de cultivo puede ser responsable de
nutrientes la aclimatación debido a que éste es usado por las células en la
inorgánicos. biosíntesis de moléculas complejas (purinas, aminoácidos, etc.). Otros
nutrientes necesarios son el nitrógeno y las sales de fosfato.
Toxicidad Durante la aclimatación los degradadores se acostumbran a las
toxinas o inhibidores en su ambiente.
Fuente: Buitron y Capdeville, 1995.
1.4.4.2 Desintoxicación
El más importante papel de los microorganismos en la transformación de
contaminantes es que tienen la capacidad de inducir la desintoxicación. La
desintoxicación se refiere a los cambios en la molécula que disminuye el daño a
una o más especies susceptibles. Las especies susceptibles pueden ser humanos,
animales, plantas u otros microorganismos (Alexander, 1994).
14
Varios procesos pueden resultar en la destoxicación como: hidrólisis, hidroxilación,

deshalogenación, desmetilación u otros como desalquilación, metilación,
nitrorreducción, desaminación, conjugación, y conversión de nitritos en aminas
(Alexander, 1994).
1.4.4.3 Deshalogenación
Muchos plaguicidas y residuos peligrosos industriales, contienen cloruros u otros
halógenos, y remover a los halógenos, frecuentemente convierte a los tóxicos en
productos inocuos. Las enzimas son denominadas deshalogenasas. Esta
deshalogenación implica el reemplazo de los halógenos por H (deshalogenación
reductiva) (Alexander, 1994).
RCl → RH
o por OH (deshalogenación hidrolítica)
RCl → ROH
o por la remoción del halógeno y un H adyacente (deshidrohalogenación).
RCH 2 CHClR' → RC = CHR'
El halógeno es liberado en estas reacciones como cloruro inorgánico, fluoruro,
bromuro y yoduro.
1.4.4.4 Mecanismos de activación y deshalogenación

Una mayor activación ocurre durante el metabolismo microbiano del tricloroetileno
(TCE). Debido a que el TCE es metabolizado por muchas bacterias esta
eliminación por biorremediación está siendo una alternativa muy alentadora,
desafortunadamente frecuentemente se encuentra un producto potencialmente
cancerígeno, el cloruro de vinilo:
Cl2C = CHCl → ClHC = CH2
Este carcinógeno puede ser formado durante el metabolismo aerobio del 1,1 y
trans 1,2-dicloro etileno (Alexander, 1994).
El conocimiento de la cinética de la biodegradación es esencial para la evaluación
de la persistencia del contaminante orgánico y la determinación de la exposición
en humanos, animales y plantas. Una vez que la degradación del compuesto
15
químico comienza, disminuye la cantidad a través del tiempo y la forma de la curva

de desaparición puede ser una función del compuesto en cuestión, de la
concentración, el organismo responsable y una variedad de factores ambientales
(L
Li, 2002 y Weaver et al., 1996).
1.4.4.5 Proceso de crecimiento

La biodegradación de un sustrato particular orgánico, puede llevarse a cabo por
microorganismos que presenten: a) un crecimiento que esté a expensas del
sustrato utilizándolo como fuente de energía, C, o posiblemente otro nutriente que
necesita para su proliferación, b) crecimiento a expensas de otro nutriente
orgánico que es utilizado como fuente de carbono, energía o ambas para
metabolizar el sustrato de interés; o c) o disminución del compuesto químico
metabolizado a través del crecimiento de los microorganismos (Alexander, 1994).
1.5 Mecanismos utilizados por los microorganismos para la

degradación de compuestos orgánicos específicos
Los microorganismos tienen una extraordinaria versatilidad catabólica y capacidad
de aclimatación. Los siguientes medios son una forma en que los
microorganismos degradan los compuestos orgánicos específicos, y en general,
xenobióticos (Zurita, 1997).
a) Uso de enzimas constitutivas. En todos los microorganismos, un número
mínimo de enzimas es necesario para el mantenimiento y crecimiento. Estas
enzimas que siempre están presentes son constitutivas, es decir, se forman
independientemente de las condiciones del medio. Si un compuesto sintético es
suficientemente similar en estructura a un producto natural, entonces existe la
probabilidad de que las enzimas puedan atacar los enlaces químicos comunes.
b) Inducción de enzimas. Los compuestos xenobióticos pueden ser capaces de
inducir los procesos enzimáticos necesarios. Estos grupos inducibles de enzimas
son sintetizados solamente en respuesta a la presencia de sustratos específicos
conocidos como inductores. El inductor es el sustrato cuya presencia provoca la
aparición de una enzima capaz de actuar sobre él. Los mecanismos para la
16
inducción de la síntesis enzimática involucran a genes reguladores en el DNA del

cromosoma.
c) Co-metabolismo. Se refiere a la capacidad de los microorganismos a
metabolizar un compuesto que no puede utilizarse como fuente independiente de
energía o crecimiento. El co-metabolismo es un proceso en el cual los
microorganismos mientras crecen a expensas de un sustrato también tienen la
capacidad de transformar otro compuesto sin obtener algún beneficio de su
metabolismo. Una proporción importante de la actividad biodegradativa de los
compuestos xenobióticos puede involucrar el co-metabolismo.
d) Mejoría en la biodisponibilidad del contaminante. Con frecuencia, la
insolubilidad de algunos contaminantes pueden ser el paso limitante para su
biodegradación. Algunos microorganismos han desarrollado la capacidad de
producir surfactantes que pueden emulsificar el contaminante y mejorar su
biodisponibilidad, tal es el caso de la Pseudomona cepacia.
1.6 Biodegradación de compuestos orgánicos específicos

Un número importante de compuestos orgánicos (xenobióticos) presentes en las
aguas residuales industriales, se biodegradarán si los microorganismos adquieren
las enzimas necesarias. Esto depende de dos factores (Zurita, 1997):
La estructura de los compuestos y la habilidad de las enzimas microbianas
para aceptar estos como sustrato.
De los compuestos para inducir o inhibir las enzimas catabólicas necesarias
en los microorganismos.
Un gran porcentaje de estos compuestos es extraño a los microorganismos
activos; debido a ello, los microorganismos deben ser adaptados a ellos para
degradarlos exitosamente a intermedios no tóxicos o mineralizarlos (Zurita, 1997).
Por lo general, muchos de los compuestos xenobióticos se diseñan para soportar
ciertas reacciones biológicas, físicas y químicas para maximizar su efectividad.
Por esta razón su biodegradación es con frecuencia difícil. Sin embargo, se puede
maximizar la velocidad de biodegradación del contaminante favoreciendo el
17
proceso mediante el control de las condiciones ambientales y aplicando los

esquemas de tratamiento adecuados (Zurita, 1997).
1.7 Biodegradación de compuestos xenobióticos

No todos los compuestos son biodegradables. Los compuestos xenobióticos son
compuestos químicos sintetizados por el hombre que tienen estructuras
moleculares y enlaces químicos secuenciales que no están reconocidos por las
enzimas degradativas existentes. Debido a esto algunos compuestos xenobióticos
están siendo acumulados en el medio ambiente (Alexander, 1994).
Ejemplos de estos compuestos son plaguicidas (DDT) y plásticos, que con
frecuencia persisten en el medio ambiente (Alexander, 1994).
Los compuestos xenobióticos pueden ser recalcitrantes (totalmente resistentes) a
la biodegradación tales como el DDT. Son recalcitrantes por muchas razones:
sustituciones inusuales (moléculas con cloro y otros halogenados), enlaces
inusuales (como átomos de carbono terciarios y cuaternarios), y tamaños
moleculares excesivos (como el polietileno y otros plásticos) (Alexander, 1994).
Investigaciones actuales demuestran que el DDT no es recalcitrante en el sentido
absoluto. El hongo Phanaerochaete chysospoum, es capaz de atacar al DDT y
que una especie de Antrobacter puede llegar a mineralizarlo (Alexander, 1994).
La degradación de los BPCs es llevada a cabo por hongos Phanerochaete,
aeróbicamente por Acinetobacter y Alcaligenes y anaeróbicamente por
deshalohegación reductiva (Alexander, 1994).
En muchos casos una porción de una molécula es susceptible a la degradación,
mientras que la otra es recalcitrante (Alexander, 1994).
1.7.1 Biotransformaciones de hidrocarburos alifáticos clorados

Los mecanismos de degradación microbiológica de compuestos dependen de la
naturaleza de las condiciones redox, pero también de la presencia y actividad de
las (co)enzimas requeridas para la transformación. La degradación de compuestos
clorados ha sido observado bajo diferentes condiciones redox, siendo más
susceptibles la descloración reductiva para los compuestos más clorados.
18
Consecuentemente, los compuestos altamente clorados son más fáciles de

declorar bajo condiciones anaerobias que bajo condiciones aerobias (Van Eeckert
y Shraa, 2001).
Los mecanismos de descloración más comúnmente observados bajo condiciones
anaerobias son la reducción, dehidrocloración y sustitución. Las reacciones de
reducción requieren de la introducción de electrones y principalmente ocurre vía
reacciones mediadas biológicamente. Se distinguen cuatro tipos de reacciones de
reducción: hidrogenólisis reductiva, dicloroeliminación, reducción hidrolítica y
copulación. La hidrogenólisis reductiva requiere de la introducción de dos
electrones, y un átomo de hidrógeno reemplaza a un átomo de cloro (Figura 1.5).
En la reacción de dicloroeliminación, dos átomos de cloro pueden ser removidos
de dos átomos de carbono adyacente con la formación subsecuente de un doble
enlace entre los átomos de carbono. La reducción hidrolítica y de copulación son
procesos observados durante la decloración de clorometanos y cloroetanos (Van
Eeckert y Shraa, 2001).
Hidrogenólisis reductiva Dicloroeliminación Dehidrocloración

RXn + 2H+ + 2e- → RHXn-1 + HX RXn + 2H+ + 2e- → RX n-2 + RXn + RXn-1 + HX
2HX
Figura 1.5 Ejemplos de reacciones de decloración (reductiva) que ocurren bajo

condiciones anaerobias. Fuente: Van Eeckert y Schraa, 2001.
19
Las transformaciones biológicas aeróbias generalmente son oxidaciones y están

clasificadas como hidroxilación, o sustitución de grupos hidroxilos en la molécula,
o epoxidación, en caso de hidrocarburos clorados alifáticos (Norris et al., 1994)
(Figura 1.6).
Reacciones Ejemplos
I. Sustitución
a. Solvólisis, hidrólisis
RX + H2O → ROH + HX CH3CH2CH2Br + H2O → CH3CH2CH2OH + HBr
b. Reacciones nucleofílicas
RX + N- → RN + X- CH3CH2Br + HS- →CH3CH2SH + Br-
II. Oxidación
a. α-hidroxilación
CH3CHCl2 + H2O → CH3CCl2OH +2H+ +2e-

b. Epoxidación
CHClCCl2 + H2O →CHClOCCl2 + 2H+ + 2e-
Figura 1.6 Transformaciones de hidrocarburos clorados. Fuente: Norris et

al.1994.
1.7.2 Propiedades de compuestos clorados

En la tabla 1.2 se muestran las propiedades de los compuestos clorados que se
encuentran en el agua residual en la industria petroquímica (down.com y
toxnet.nlm.nih.gov, dirección en internet). En la tabla 1.3 se encuentra el listado
sobre las toxicidades que presentan estos compuestos a la biomasa.
20
Tabla 1.2 Propiedades de compuestos clorados.

Propiedades 1,2-Dicloroetano 1,1,1- Tricloroetileno Tetracloruro
Tricloroetano de Carbono
Sinónimos cloruro de etileno o cloroetano, tricloruro de benzinoform,
dicloruro de etileno. metil acetileno, carbona,
triclorometano algylen, y fasciolin,
benzinol, entre perclorometano,
otros. entre otros.
Peso 98.96 133.4 131.39 153.8
molecular
(g/mol)
Estado físico Es un líquido Es un líquido es un líquido es un líquido
aceitoso, incoloro, incoloro. incoloro, incoloro
transparente, de olor estable,
a cloroformo sabor relativamente
dulce. volátil, no
inflamable a
temperatura
ordinaria
Punto de 83.5 °C 74°C 87.2 °C 76.8 ºC
ebullición
Temperatura -35.4 °C -30.4 °C -84.7 °C -23°C
de fusión
Gravedad 1.24 1.34 1.47 1.594
específica
Calor 1.288 a 20°C 0.259 0.226
especifico (25º
C cal/gºC)
Índice de 1.444 1.434 1.478 1.4607
refracción
Solubilidad Ligeramente soluble Soluble en Soluble en miscible con
en agua, miscible en acetona, etanol, dietil alcohol,
solventes comunes benceno, eter, cetona, y benceno,
y en otros solventes metanol y cloroformo, cloroformo y
clorados y en CCl4, soluble miscible en éter
general en otros en todos los aceite.
solventes orgánicos. solventes
orgánicos
Densidad de 3.42 4.6 4.53 5.32
vapor
Toxicidad Es tóxico por En caso de En contacto Altamente
ingestión, inhalación ingestión puede irritar o tóxico, puede
y absorción en la produce quemar la piel ser fatal si es
piel. Muy irritante a náuseas y y ojos. Produce inhalado, es
los ojos y a la piel, diarrea con o mareos y absorbido a
cancerígeno. sin síntomas sofocación. través de la
Tolerancia: 50 ppm. de piel, evite el
intoxicación. contacto con la
piel.
Fuente: Toxnet.nlm.nih.gov y dow.com.
21
Tabla 1.3 Toxicidades que presentan los compuestos a la biomasa.

Compuestos EC50, mg/L EC50, mg/L
(heterótrofos) (Nitrosomonas)
1,2-Dicloroetano 470 29
Tricloroetileno 130 0.81
1,1,1-Tricloroetano 450 8.5
Tetracloruro de 130 51
carbono
1,1-Dicloroetano 620 0.91
Fuente:Eckenfelder, W. 2000. Pág. 285
1.7.3 Biodegradación de compuestos clorados

El 1,2-dicloroetano (1,2-DCA), conocido también como dicloruro de etileno (DCE)
es usado como intermediario químico para la producción de cloruro de vinilo (CV)
y otros químicos clorados utilizados como fumigantes o como solventes para
productos farmacéuticos. El 1,2-DCA es soluble en agua y se infiltra rápidamente
en el suelo. La transformación de 1,2-DCA ocurre bajo condiciones aerobias y
anaerobias (Long et al., 1993, Zhang et al., 1997 y Andrea, 1999,). El 1,2-DCA es
usado como sustrato de crecimiento para las bacterias aerobias como por ejemplo
las cepas de Xanthobacter, Ancylobacter y Pseudomonas, las cuales oxidan
completamente el 1,2-DCA a CO2, H2O y Cloruro (Andrea, 1999 y Van Der, 1994).
Alternamente, la bacteria metanotrófica puede co-metabolizar el 1,2-DCA
(Wijngaard et al., 1992). La mineralización aerobia del 1,2-DCA se aplica en varios
sistemas de biorreactores para tratamiento de aguas residuales y aguas
subterráneas (Stucki y Thue, 1995). Bajo condiciones acetogénicas,
metanogénicas o sulfatorreductoras, el 1,2-DCA es deshalogenado
reductivamente hasta etano (Egli, 1987). Esta deshalogenación se cree que es
debido a la transformación co-metabólica por las bacterias metanogénicas. El CV,
cloroetano y etano pueden ser subproductos formados. Aunque la degradación
microbiana oxidativa con nitrato, óxido de manganeso o hierro han sido
demostrados para los mono y dicloroalifáticos, la información acerca de la
transformación del 1,2-DCA aún se desconoce. La transformación abiótica del 1,2-
DCA incluyendo hidrólisis alcalina a CV y sustitución hidrolítica produciendo etilen
glicol, también ocurre bajo condiciones anaerobias, pero comparado con la
22
transformación microbiana del 1,2-DCA estos procesos son relativamente lentos

con períodos de realización de 10 a 70 años (Andrea L, 1999).
El 1,2-DCA puede ser transformado por diferentes vías dependiendo de las
condiciones redox propuestas como se muestra en la figura 1.7 (Li, 2002).
Figura 1.7 Biotransformación del 1,2-DCA. Fuente: Li, 2002.
Diferentes estudios indican la biodegradación del cloruro de vinilo y el cis-1,2-

dicloroetileno (Cis-1,2-DCE) bajo condiciones aerobias en presencia de una fuente
de energía primaria como metano, propano, amonio o tolueno (Davis, 1990). La
biodegradación del CV puede ocurrir también sin la presencia de substratos
primarios. Sin embargo sólo algunos estudios han demostrado la biodegradación
del CV y el Cis-1,2-DCE (Nielsen, 1995 y Bradley, 2002).
El co-metabolismo aerobio es un método potencial para la remediación de
acuíferos contaminados con hidrocarburos clorados alifáticos (CAHs). Los
microorganismos crecen sobre una variedad de sustratos por medio de las
enzimas oxigenasas que son capaces de transformar los CAHs. El intervalo de los
CAHs que pueden ser transformados por el crecimiento de organismos sobre
diferentes sustratos resultan ser interesantes en estudio de la biorremediación. Se
23
han realizado estudios con Methylosinums trichosporium O3B, nitrosomonas

europaea, Xantobacter, y mezcla de cultivos metanotróficos. (Norris, 1994).
El cloroformo (CF), 1,1,1,-tricloroetano (1,1,1,-TCA), y 1,1,-dicloroetileno (1,1-
DCE), han demostrado que tiene un potencial limitado para el cometabolismo
aerobio por el sistema conocido a través del tiempo. Esta identificación del sistema
co-metabólico hace a estos compuestos interesantes (Kastner, 2000).
En estudios microcósmicos a largo plazo en acuíferos el butano se ha presentado
como un sustrato efectivo para el co-metabolismo aerobio del CF y el 1,1,1-TCA
(Norris, 1994).
1.8 Tratamiento de agua de petroquímica

La industria petroquímica normalmente se encuentra en zonas tropicales, donde
una gran cantidad de aguas residuales son liberadas en cuerpos de agua y suelos.
Aunque estas aguas residuales son tratadas para reducir la carga orgánica
contaminante, las descargas todavía contienen altas concentraciones del
contaminante (García-Rojas et al., 2003).
En México existe una industria petroquímica que produce etileno y compuestos
clorados orgánicos (especialmente cloruro de vinilo), el cual solamente tiene un
sistema de tratamiento primario para la descarga de sus aguas residuales. El
efluente de esta industria tiene una alta concentración de 1,2-dicloroetano mayor
que la concentración máxima permisible por la legislación del país (NOM-052-
SEMARNAT-1993) (Garzón-Zuñiga et al., 2004).
1.8.1 Características del agua residual de la industria petroquímica y límites

permisibles en las descargas
En la tabla 1.4 se presentan las características de las aguas residuales de la
petroquímica que produce etileno y compuestos clorados orgánicos. Se observa
que los compuestos clorados que se presentan en mayor concentración son: 1,2-
Dicloroetano, 1,1,1-Tricloroetano y Tricloroetileno (Instituto Mexicano de
Tecnología del Agua, 2004)
24
Tabla 1.4 Características del agua residual de la industria petroquímica.

Parámetro Máximo Mínimo Promedio
Temperatura °C 28.5
Grasas y Aceites (mg/L) 6.6
Sólidos sedimentables (mL/L) 1.1
Sólidos suspendidos totales (mg/L) 51.3
DBO (mg/L) 48.21
Coliformes (NMP/100 mL) 14
Cadmio total (mg/L) <0.040
Cobre total (mg/L) 0.225
Cromo total (mg/L) <1.100
Níquel total (mg/L) <0.200
Plomo total (mg/L) <0.100
Zinc total (mg/L) 0.737
pH 9.5
1,1-dicloroetano (mg/L) 0.176 0.001 0.032
1,2-dicloroetano (mg/L) 169 0.296 11
1,1,1-tricloroetano (mg/L) 0.274 0.001 0.11
Tricloroetileno (mg/L) 0.931 0.001 0.1
Percloroetileno (mg/L) 0.379 0.001 0.028
Tetracloruro de carbono (mg/L) 0.352 0.001 0.075
Benceno (mg/L) 0.135 0 0.021
DQO (mg/L) 5620 38 250
Fuente: Instituto Mexicano de Tecnología del Agua, 2004.
En la tabla 1.5 se muestra el listado y las características de lixiviados que hacen

peligroso a un residuo por su toxicidad al ambiente, de acuerdo a la legislación
aplicable en México (NOM-052-SEMARNAT-1993, anexo 5).
Tabla 1.5 Contaminantes y límites máximos permisibles

Parámetro Límite máximo permisible (mg/L)
Cadmio total 1.0
Cromo total 0.5
Niquel total 5.0
Plomo total 5.0
1,2 dicloroetano 0.5
1,1,1 tricloroetano 30
Tricloroetileno 0.5
Tetracloruro de carbono 0.5
Benceno 0.5
De acuerdo a la tabla 1.5 uno de los principales parámetros que deben ser
controlados en la descarga es el compuesto orgánico 1,2-dicloroetano ya que
25
tiene una importante presencia y concentración en la descarga (Instituto Mexicano

de Tecnología del Agua, 2004).
En la tabla 1.6 se encuentra el listado de los contaminantes prioritarios que marca
la U.S. EPA y sus límites máximos permisibles (Raymond, 1994).
Tabla 1.6 Contaminantes prioritarios que marca la U.S. EPA

Contaminante Máximo para un día Máximo para promedio de un mes
(µg/L) (µg/L)
1,2-dicloroetano 574 180
1,1-dicloroetano 59 22
1,1,1- tricloroetano 59 22
Tetracloruro de carbono 380 142
Tricloroetileno 69 26
26
Capítulo II. Metodología
CAPÍTULO II
METODOLOGÍA
2.1 Instalación experimental
En la Figura 2.1 se presenta el esquema de la instalación experimental utilizada
para la realización del estudio.
Ambos trenes de tratamiento consideran biodegradación en dos etapas,
anaerobia-aerobia, realizada en reactores o biofiltros anaerobios seguidos por
reactores con biomasa suspendida tipo lodos activados. La diferencia entre los
dos biofiltros se encuentra en el tipo de empaque a utilizar (tezontle y carbón
activado mineral).
El influente (Qi) que contiene el agua de estudio (mezcla de organoclorados) se
introduce a ambos biofiltros anaerobios por la parte inferior de forma continua y
ascendente. Los biofiltros son cilíndricos, están hechos de acrílico y tienen una
capacidad de 4.7 litros, con una altura de 60 cm y un diámetro de 10 cm. La altura
efectiva es de 40 cm y el volumen efectivo de 3.14 litros. Una porción del efluente
del biofiltro que sale de su parte superior se recircula (50%) y la otra parte se
dirige al sistema de lodos activados.
La operación del reactor de lodos activados, así como la de los biofiltros se lleva a
cabo en un régimen continuo. El reactor de lodos activados está conformado por
un compartimiento de aireación y otro de sedimentación. La entrada de agua al
compartimiento de aireación está controlada por una válvula de control de flujo.
También está conectada al reactor una entrada de aire ubicada en el fondo. La
dispersión del aire se realiza a través de un difusor de piedra porosa.
El objetivo de la combinación de estos sistemas de tratamiento es que mediante el
sistema anaerobio se logre la remoción o la biotransformación de los
organoclorados, evitando su volatilización, y por otra parte el sistema aerobio se
utilizará para la biodegradación de los subproductos formados en los biofiltros
anaerobios proporcionando así un pulimento y una mejor eficiencia del
tratamiento.
27
Figura 2.1 Esquema de la instalación experimental
En la figura 2.2 se muestran las fotografías del arreglo experimental.
28
Biofiltros Lodos activados
CAG Tezontle Efl. CAG Efl. Tezontle
CAG
Tezontle
Figura 2.2. Fotografías del arreglo experimental
29
2.2 Caracterización de los empaques

Uno de los materiales que se utiliza como empaque fue tezontle rojo (obtenido de
la mina Tetilla, en Morelos; que fue previamente triturado). El otro material que se
utilizó fue carbón activado granular mineral (CAGR 8 x30) fabricado por
CLARIMEX. En la Tabla 2.1 se muestran las propiedades del carbón activado
granular “CLARIMEX”.
Tabla 2.1 Propiedades típicas del carbón activado granular “CLARIMEX”.

Propiedad CAGR 8 x 30
pH 5-7
Humedad al envasar, % Max 10
Actividad relativa de melazas, % min 97
Número de Yodo, mg I2 / g 600
Actividad azul de metileno, g/100 g 25
Soluble en agua, % Max 2.0
Densidad aparente g/cm3 0.37-0.40
Área superficial, m2/g 650
Diámetro de poro, Å 56
Fuente: Catalogo CLARIMEX
Para tener una distribución homogénea, tanto el tezontle como el carbón activado
fueron tamizados. El tamaño de partícula seleccionado fue de 1.52-1.73 mm. Este
proceso se llevó a cabo en una máquina vibradora.
Posteriormente el material de relleno se caracterizó determinando también su
densidad real, densidad aparente y porosidad (Arboleda, 1981). Ver anexo B.
2.3 Composición del agua modelo

Para la realización del estudio se utilizó un agua sintética, la cual se preparó
disolviendo cuatro compuestos clorados (1,2-dicloroetano, 1,1,1-tricloroetano,
tricloroetileno y tetracloruro de carbono) en agua cruda. Tanto la concentración de
la mezcla, como la composición y las proporciones entre los cuatro compuestos
permanecieron constantes durante la experimentación. Los compuestos (con
pureza del 100%) fueron mezclados en 20 litros hasta disolución completa y las
cantidades se encuentran en la tabla 2.2.
30
Tabla 2.2 Composición del agua sintética

Compuesto Concentración (mg/L) Volumen
1,2-Dicloroetano (de Mallinckrodt) 400 6.4 mL
Tricloroetileno (de Baker) 20 0.27 mL
1,1,1-Tricloroetano (de Baker) 20 0.3 mL
Tetracloruro de carbono (de Productos
20 0.25 mL
Analíticos Reasol)
La concentración de los compuestos en el agua de estudio fue de un valor típico

encontrado en las aguas residuales de la industria petroquímica siendo la de
mayor concentración el 1,2-dicloroetano (Tabla 2.2). La concentración de la DQO
teórica calculada fue de 416 mg/L. La concentración de la DQO del agua sintética
fue de 456±27 mg/L.
2.4 Nutrientes necesarios para el desarrollo de los procesos biológicos

Con el fin de que los microorganismos continúen con sus funciones vitales
adecuadamente, se les proporcionó macronutrientes, tales como el nitrógeno y el
fósforo en forma de sales (NH4Cl y K2HPO4).
Generalmente la razón C:N es frecuentemente utilizada para describir estos
requerimientos de nutrientes. En ocasiones, esta razón es afectada por un
sustrato específico y puede ser estimado como la razón DQO:N y varía de 400:7 a
1000:7 para una carga de sustrato mayor y menor respectivamente. Similarmente
ha sido reportada que es requerida una razón de N:P de 7:1 (Malina and Pohland,
1992).
Además de estos elementos, se les adicionó micronutrientes en forma de sales:
FeCl3, NiCl2⋅6H2O, CoCl2⋅6H2O, (NH4)6Mo7⋅4H2O, Fe2(SO4)3, Na2SO4, CaCl2,
MgSO4⋅7H2O, ZnSO4⋅7H2O, MnSO4⋅H20 y CuSO4⋅5H2O (todos distribuidos por J,T.
Baker). Estos nutrientes se mezclaban a los 20 litros de agua que contenía la
solución de compuestos organoclorados. En el anexo A se encuentra la
preparación de las soluciones de nutrientes.
La cantidad de nitrógeno y fósforo necesario para el crecimiento anaerobio, se
estimó por medio de la formula empírica de las bacterias, C5H7NO2, donde los
constituyentes nitrogenados representan el 18% de la masa celular en peso seco.
31
Si se asume que el 10% de la DQO biodegradable es convertida a nueva células

(con un rendimiento celular de 0.1 kgSSV/kgDQOremovida), se pueden entonces
calcular los requerimientos de nitrógeno y fósforo (Moreno et al. 2002).
2.5 Operación y control del proceso

2.5.1 Biofiltro anaerobio
2.5.1.1 Inoculación y arranque, desarrollo de la biopelícula y
adaptación de los microorganismos a los sustratos
Se utilizó un inóculo de un reactor anaerobio de flujo ascendente (UASB)
proveniente de una industria papelera (Unipak) en Morelos. Se mezcló con los dos
materiales durante dos semanas y posteriormente se empacaron los dos biofiltros
alimentándolos con el agua modelo y los nutrientes necesarios.
La concentración de la mezcla, su composición y la proporción de los distintos
componentes se mantuvieron constantes durante todo el estudio. El régimen de
alimentación fue continuo. Los parámetros de operación se presentan en la tabla
2.3.
Tabla 2.3 Parámetros de operación
Q DQO V COV TRH
(L/d) real, (L) (kg⋅m-3⋅d-1) (h)
(mg/L)
I etapa 4 456.15 3 0.58 18.6
II etapa 8 456.15 3 1.22 9.3
III etapa 12 456.15 3 1.82 6.2
2.5.1.2 Aclimatación y evaluación a mayores cargas orgánicas

La variable fue la carga orgánica volumétrica (COV). La primera COV se mantuvo
durante un periodo de 3 meses para la adaptación y desarrollo de la biomasa.
Posteriormente, la COV se incrementó mediante la disminución del tiempo de
retención hidráulico en el sistema y se mantuvo aproximadamente durante 3
meses. Finalmente se hizo una nueva variación por otros tres meses más.
Después de la estabilización del proceso con una carga orgánica, en el final de
cada etapa experimental anaerobia, se determinaban: la concentración de cada
uno de los compuestos clorados (Cromatografía de Gases) y la composición y la
estructura de la biopelícula en ambos reactores (Microscopía Electrónica).
32
2.5.1.2.1 Análisis por cromatografía de gases

Se utilizó un cromatógrafo de gases modelo Varian Saturn CP 3800, con detector
de masas y con una columna capilar factor 4. El gas acarreador fue Helio. Las
condiciones de operación se describen en la tabla 2.4.
Tabla 2.4 Condiciones de operación del cromatógrafo de gases modelo CP 3800

Parámetro Condición
Tempera del inyector 150 °C
Flujo de gas acarreador 1 mL/min
Presión 7.2 Psi
Flujo total 22 mL/min
Velocidad lineal 37 cm/s
Volumen de muestra 5 mL
Inicio a 35 °C, después de 3 minutos incrementos de 5°C/min
Gradiente de temperatura hasta 100 °C, posteriormente incrementos de 40 °C/min hasta
220 °C y en esta temperatura 6 minutos.
2.5.1.2.2 Observaciones en microscopio electrónico de barrido

Se utilizó un microscopio electrónico de barrido JSM-6400 Noran para observar la
superficie de los gránulos de CAG y Tezontle y ver las características de la
biopelícula durante el experimento.
Las muestras fueron preparadas fijando a los microorganismos en una mezcla de
fosfato de sodio monobásico y fosfato de sodio dibásico y con una solución de
glutaraldehído al 5%. Posteriormente se realizó la deshidratación aplicando
incremento graduales de una solución de agua desionizada/etanol en
concentraciones de 50, 60, 70, 80 y 100 % (v/v). Después las muestras se secaron
y una vez secas las muestras se revistieron electrónicamente con oro (finner coat
oin spuntter JFC 1100).
2.5.1.3 Control de proceso en los biofiltros

En la Tabla 2.5 se presentan los parámetros utilizados para el control de proceso.
Los puntos considerados para el muestreo fueron del influente a los biofiltros y de
los efluentes de los reactores anaerobios.
33
Tabla 2.5 Parámetros para el control del proceso anaerobio

Parámetros Análisis
pH Diario
Temperatura Diario
DQO Tres veces por semana
SST y SSV Una vez por semana
AGV Dos veces por semana
Alcalinidad Dos veces por semana
conductividad Diario
Cloruros Dos veces por semana
Medición de biogás Esporádicamente
Todos los análisis físico-químicos fueron realizados de acuerdo al Standard

Methods for Examination of Water and Wastewater, 1998.
Así mismo se midió el potencial de oxido-reducción (POR) mediante el equipo
Orion QuikchekTM modelo 108.
A continuación se describen las características de los equipos utilizados y los
métodos para la determinación de algunos parámetros.
2.5.1.3.1 Demanda química de oxígeno

La DQO se determinó utilizando un reactor de DQO marca HACH, modelo 45600-
00 y un espectrofotómetro marca HACH modelo DR/2400. Se utilizó una cantidad
de 2.5 mL de muestra y fue digerirla a 150°C durante dos horas, en una solución
que contenía dicromato de potasio, ácido sulfúrico, sulfato de mercurio y sulfato de
plata. Después de la digestión se determinó la concentración en el
espectrofotómetro, previamente añadida al espectrofotómetro una curva de
calibración para obtener los valores de DQO en mg/L.
2.5.1.3.2 Conductividad eléctrica

La conductividad se determinó mediante un conductímetro marca Hach modelo
44600-00 con un intervalo de medición para la conductividad de 0.0 a 19.99
mS/cm. La conductividad se determinó tanto en el influente como el efluente de
los biofiltros utilizando una muestra 20 mL. Así mismo se determinó la
temperatura mediante este equipo.
34
2.5.1.3.3 Determinación de pH
El pH se monitoreó utilizando un potenciómetro Hach 43800-00, empleando un
electrodo modelo Hach 44200-21. El potenciómetro se calibraba antes de cada
medición.
2.5.1.3.4 Alcalinidad, relación alfa y contenido de ácidos grasos

volátiles
La alcalinidad fue determinada mediante titulación potenciométrica. La alcalinidad
se determinó a pH de 5.75 y 4.3. La alcalinidad a pH 5.75 representa la capacidad
buffer del sistema debida a los bicarbonatos y a pH de 4.3 se determina la
alcalinidad total. El volumen de la muestra fue de 100 mL, utilizando como titulante
H2SO4 0.02 N. La relación [α=(Alc. 4.3 - Alc. 5.75)/ Alc. 4.3] representa la fracción
de la alcalinidad total que es utilizada para neutralizar los AGV y que no debe ser
mayor de 0.4 para un reactor estable (Rojas, 1988 y Jenkins et al., 1992).
La determinación de AGV´s se realizó indirectamente, con base en las
Alcalinidades medidas a pH de 4.3 y de 5.75, calculando los AGV de acuerdo con
la formula sugerida en Jenkins et al., (1991):
AGV teórico = (Alc 4.3 – 1.25 Alc 5.75)/0.85/0.83.
Donde: Alc 4.4 es la Alcalinidad a un pH de 4.3;
Alc 5.75 es la Alcalinidad a un pH de 5.75.
2.5.1.3.5 Cloruros
Los cloruros fueron determinados mediante el método de tiocianato mercúrico y
utilizando el espectrofotómetro marca HACH modelo DR/2400 con un rango de
0.1-25 mg Cl-/L. Se tomaron muestras de 10 y 5 mL para el efluente con CAG y
tezontle respectivamente y se diluyeron en 25 mL.
2.5.1.3.6 SST y SSV

El método consiste en la filtración de las muestras a través de un papel filtro de
fibra de vidrio de 1.6 µm en crisoles Gooch, secado a 103°C y calcinado a 550°C.
35
2.5.1.4 Determinación de la cantidad de la biomasa en los biofiltros

La determinación de la biomasa en los biofiltros se realizó mediante la técnica
gravimétrica de determinación de masa seca como sólidos volátiles; se
determinaban también los sólidos totales. Para esto se tomaron muestras del
lecho (alrededor de 30 mL), se le quitó el exceso de agua y se le colocaron en
cápsulas de porcelana. Las muestras fueron secadas a 103 °C y calcinadas a 550
°C. Los cálculos se realizaron de la siguiente manera:
g de biomasa + g de carbón (ó g de tezontle)= G2 - G1
g de biomasa = G2 - G3
g de carbón (ó g de tezontle)= G3 – G1
g de biomasa
Cantidad específica de biomasa =
g de carbón
Donde: G1 = Peso de cápsula
G2 = Peso de cápsula + muestra seca a 103 °C
G3 = Peso de cápsula + muestra después de calcinación
La cantidad de biomasa en el reactor se calculó de la siguiente forma:

Cantidad de biomasa en el reactor = kg de soporte x cantidad específica de biomasa
La concentración de biomasa en el reactor se calculó de la siguiente manera:

Cantidad de biomasa en el biofiltro
Concentración de biomasa =
Vbiofiltro
En base a estos resultados se determinó el tiempo de retención celular mediante
la formula:
V (L) • X (g/L)
TRC =
Q (L/d) • SSV( g/L)
Donde: V = Volumen del reactor
X = Concentración de biomasa en el reactor
Q = Flujo de alimentación
SSV = Sólidos suspendidos volátiles.
36
2.5.2 Lodos activados

Este sistema se implementó en la tercera etapa del experimento cuando los
biofiltros ya no removían por completo los compuestos orgánicos. El inóculo se
tomó de la planta de tratamiento del IMTA del sistema de lodos activados. La
concentración de los SSVLM se ajustó para mantener la F/M en un intervalo de
0.2-0.5 mg DQO/(mg SSV⋅d).
2.5.2.1 Control del proceso

El sistema de lodos activados se operó durante 64 días. Los parámetros que se
determinaban se encuentran en la tabla 2.6. Las muestras se tomaban de los
efluentes de los reactores. El OD se determinaba en el reactor, ajustando la
aeración para que OD sea mayor de 2 mg/L. El pH y la Temperatura se median en
el reactor. Las muestras para los SST y SSV del licor mezclado, así como para la
respiración, se tomaban directamente del reactor.
Tabla 2.6 Parámetros de control para el proceso aerobio

Parámetros Análisis
pH Diario
Temperatura Diario
OD Diario
DQO Tres veces por semana
Conductividad Diario
Respirometría Tres veces por semana
SST y SSV Dos veces por semana
37
Capítulo III. Resultados
CAPÍTULO III
RESULTADOS
3.1 Caracterización de los empaques

En la tabla 3.1 se presentan las densidades de los materiales de soporte (CAG y
tezontle) y el porcentaje de vacíos en los lechos de los biofiltros. Las densidades
fueron calculadas de acuerdo a Arboleda (1981) y el procedimiento se encuentra
en el Anexo B.
Tabla 3.1 Características de los materiales de soporte

ρ real, ρ aparente, Porosidad del
Material de soporte
t/m3 t/m3 lecho, %
CAG 1.480 0.56 61.61
Tezontle 2.089 0.89 57.25
Como ya se mencionó en la metodología, el tamaño seleccionado de los gránulos

fue de 1.52-1.73 mm, para ambos materiales. En las fotografías del tezontle y
CAG tomadas con el microscopio electrónico (Figura 3.1) se puede observar que
el tamaño de los poros del tezontle es entre 1 y 350 µm, mientras que los poros de
CAG son de un tamaño mucho menor (0.01-50 µm).
A) B)
Figura 3.1 Fotografía de los poros de granulo de A) CAG y B) tezontle.
38
3.2 Comportamiento del proceso de biofiltración anaerobia

3.2.1 Remoción de la DQO en los biofiltros anaerobios
Después de realizar la inoculación y del empaque de los biofiltros, empezó su
operación con una carga orgánica volumétrica (COV) de 0.58 kg⋅m-3⋅d-1, con un
tiempo de residencia hidráulica (TRH) de18 h y un flujo de recirculación del 50%.
Estas condiciones se conservaron hasta el final de la primera fase experimental.
La remoción de la DQO obtenida durante todo el período experimental se presenta
en la Figura 3.2. Durante los primeros 30 días se observó formación de biopelícula
sobre los granos del tezontle y del CAG, así como una ligera desintegración de los
gránulos del lodo anaerobio utilizado como inóculo. La concentración de la DQO
del agua sintética fue determinada de 456±27 mg/L, mientras que la teórica,
basada en las concentraciones de los compuestos que integraban la mezcla, fue
calculada de 416 mg/L. La diferencia se puede atribuir a los micronutrientes
adicionados a la solución influente a los biofiltros. Como se puede observar en la
Figura 3.2, desde el principio hubo una remoción de DQO, la cual paulatinamente
aumentaba, junto con el desarrollo de la biopelícula. La remoción de DQO fue
significativamente mayor en el biofiltro con CAG.
400 100
90
80
Remoción de DQO (%)
300
70
DQO ( mg/L)
60
200 50
40
30
100
20
10
0 0
0 50 100 150 200 250 300 350 400 450
Primera etapa Segunda etapa Tercera etapa
Efl. CAG Efl Tezontle CAG Tezontle
Figura 3.2 Comportamiento de la DQO en los biofiltros con CAG y tezontle
39
En el transcurso del tiempo durante la primera etapa, las remociones de DQO

aumentaron, alcanzando un 80% de remoción el día 50 desde el arranque en el
biofiltro con CAG y el día 70 desde el arranque en el biofiltro con tezontle. En el
efluente del biofiltro empacado con CAG se obtuvieron concentraciones de DQO
de hasta 16 mg/L, mientras que en el biofiltro empacado con tezontle se
obtuvieron concentraciones de DQO más altas, de hasta 58 mg/L.
El biofiltro con CAG alcanzó una remoción de 96.5% en el día 74. El promedio de
la remoción de DQO en el biofiltro con CAG durante la primera etapa fue de 95%.
El biofiltro empacado con tezontle alcanzó hasta un 87.7% en el día 76 y el
promedio de la remoción en esta etapa fue de 85%.
Durante la segunda etapa del estudio se aplicó una COV de 1.22 kg⋅m-3⋅d-1 y un
tiempo de residencia hidráulica de 9 horas. La DQO del efluente con CAG tuvo un
promedio de 37.09±13.47 mg/L, mientras que el efluente del biofiltro con tezontle
fue de 48.12±15.89. Con respecto a la remoción se observó que el biofiltro
empacado con CAG presenta un promedio de 94%, obteniendo una mayor
remoción el día 189 (96.67%), mientras que con el biofiltro empacado con tezontle
tuvo un promedio de 88%, obteniendo una mayor remoción el día 182 (95.26%).
Comparando las remociones de esta etapa con la primera se observa que en ésta
se obtienen mejores resultados, lo cual se explica con la mayor cantidad de
biomasa desarrollada y acumulada en los biofiltros.
Durante la tercera fase de la experimentación se aplicó una COV de
1.82 kg⋅m-3⋅d-1 con un tiempo de residencia hidráulica de 6 horas. En esta fase se
obtuvieron promedios de DQO de 74.01±16.35 mg/L y de 77.96±16.61 mg/L para
el efluente del biofiltro con CAG y tezontle respectivamente.
Con respecto a la remoción en esta etapa el biofiltro con CAG se logró una
remoción de DQO promedio de 89%, mientras que el biofiltro con tezontle tuvo un
promedio de 80%. Se observa que en esta etapa se obtuvieron remociones
inferiores comparadas con las etapas anteriores. A pesar de esto, la DQO en los
efluentes no rebasó 105 mg/L. Debido a que durante la tercera etapa del estudio,
los valores de DQO fueron mayores, se justificó la implementación de una
40
segunda fase de tratamiento mediante un sistema de biodegradación aerobia con

biomasa suspendida.
En la figura 3.3 se muestra la tasa de degradación de los compuestos orgánicos
durante las tres etapas experimentales y las remociones promedio obtenidas en
cada etapa. Se observa que las tasas de degradación aumentan con el aumento
de la carga orgánica y que el segundo aumento de la carga provoca un menor
incremento de la tasa de degradación. Durante la primera etapa se obtuvo una
tasa de remoción de DQO promedio de 0.493 kg⋅m-3⋅d-1 en el biofiltro con tezontle
y de 0.55 kg⋅m-3⋅d-1 en el biofiltro con CAG, que corresponde a remociones
promedio de 85 y 95% respectivamente. En la segunda etapa las tasas fueron de
1.15 kg⋅m-3⋅d-1 en el biofiltro con CAG y de 1.07 kg⋅m-3⋅d-1 en el biofiltro con
tezontle, con remociones promedio de 94% y de 88% respectivamente. Durante la
tercera etapa las tasas promedio fueron de 1.62 kg⋅m-3⋅d-1 en el biofiltro con CAG y
de 1.46 kg⋅m-3⋅d-1 en el biofiltro con tezontle, obteniéndose remociones promedio
de 89 y 80% respectivamente.
1.8 100
1.6 95
Tasa de degradación
1.4 90
1.2 85
(kg/(m 3.d))
80
1
75
0.8
70
0.6 65
0.4 60
0.2 55
0 50
0 0.5 1 1.5 2
COV
CAG Tezontle RCAG Rtezontle
Figura 3.3 Tasa de degradación de los compuestos organoclorados
Durante las primeras dos etapas se formaban cantidades de biogás muy

pequeñas por lo que se dificultó su medición precisa. Se puede estimar una
producción de 0.3-1.5 L/d. Durante la tercera etapa se observó que el biofiltro con
41
tezontle fue el que presentó una mayor formación de biogás comparado con la del
biofiltro con CAG, siendo las cantidades diarias en ambos biofiltros entre 1.1 y 1.7
L/d.
3.2.2 Análisis de la remoción de los compuestos organoclorados por

cromatografía de gases
El análisis cromatográfico de los efluentes de los biofiltros al final de la primera
etapa demostró que el 1,2-dicloroetano está presente en el efluente del biofiltro
con tezontle en una concentración de 5.70 mg/L, mientras que en el efluente del
biofiltro con CAG quedó menos de 0.05 mg/L, por debajo del LMP (0.50 mg/L). Los
demás compuestos estuvieron ausentes pero se encontró la presencia de
cloroetenos en los efluentes, esto puede ser debido a la biotransformación que
sufren los compuestos. En la tabla 3.2 se presentan las remociones del 1,2-
dicloroetano para los biofiltros con CAG y tezontle. En ella se observa que en el
biofiltro con CAG se obtiene una remoción de 1,2-dicloroetano mayor al 99.9%,
mientras que en el biofiltro con tezontle se remueve un 0.4% menos que en el
biofiltro con CAG.
Tabla 3.2 Eficiencia de remoción de 1,2-dicloroetano con CAG y tezontle

Biofiltros con: % de remoción
CAG 99.98
Tezontle 99.58
Los análisis cromatográficos al final de la segunda etapa indicaron que ninguno de

los compuestos clorados del agua sintética estaban presentes en los efluentes. Se
observó presencia de cloroetenos solamente en el efluente del biofiltro con
tezontle, mientras que en el efluente del biofiltro con CAG no se detectó presencia
de ningún compuesto clorado. Lo anterior indica que los compuestos fueron
exitosamente biotransformados y biodegradados por los microorganismos y que
uno de los subproductos que se generan durante la biodegradación son los
cloroetenos.
42
Los análisis cromatográficos de la tercera etapa indicaron presencia de los

compuestos clorados en los dos efluentes, encontrándose el 1,2-dicloroetano en
mayor concentración (Tabla 3.3). Los demás compuestos clorados se encuentran
en concentraciones menores de 3.4 mg/L, pero solamente la concentración del
tetracloruro de carbono está por debajo del límite máximo permisible para
descargas a cuerpos receptores según la U.S. EPA (0.38 mg/L). Las
concentraciones del 1,2-dicloroetano y del tetracloruro de carbono determinadas
en los efluentes de los dos biofiltros fueron similares, sin embargo, las
concentraciones del 1,1,1 tricloroetano y del tricloroetileno fueron 19-23 veces
mayores en el efluente del biofiltro con tezontle.
Tabla 3.3 Resultados de cromatografía de gases

1,2- 1,1,1,- tetracloruro de
tricloroetileno
Biofiltros dicloroetano tricloroetano carbono
(mg/L)
(mg/L) (mg/L) (mg/L)
Con CAG 184.74 0.086 0.182 <0.10
Con Tezontle 183.09 1.96 3.39 <0.10
En la tabla 3.4 se presentan las eficiencias de remoción de los compuestos

clorados obtenidas en ambos biofiltros.
Tabla 3.4 Eficiencia de remoción (R) de los compuestos clorados con CAG y
tezontle durante la tercera etapa
R de 1,2- R de 1,1,1,- R de R de
Biofiltros dicloroetano tricloroetano tricloroetileno tetracloruro de
(%) (%) (%) carbono (%)
Con CAG 53.84 99.57 99.09 99.50
Con Tezontle 54.23 95.8 83.05 99.50
43
De acuerdo a la tabla 3.4, la remoción del 1,2-dicloroetano durante la tercera

etapa es baja, alrededor de 54% en ambos biofiltros, mientras que los demás
compuestos presentes se remueven por encima del 83%. La remoción de 1,1,1-
tricloroetano y de tricloroetileno es mayor en el biofiltro con CAG, mientras que las
remociones de 1,2-dicloroetano y de tetracloruro de carbono son iguales en ambos
biofiltros. Estos resultados confirman la necesidad de otro tratamiento adicional a
la biofiltración anaerobia cuando a los biofiltros anaerobios se aplican cargas
orgánicas de 1.82 kg⋅m-3⋅d-1.
3.2.3 Comportamiento de la conductividad

La variación de la conductividad durante todo el período experimental se ilustra en
la figura 3.4. Durante la primera etapa la conductividad eléctrica en los efluentes
de ambos biofiltros aumentó a medida que la de remoción, medida con base en
DQO, iba aumentando. Esto se puede explicar principalmente con la liberación de
cloruros en el proceso de biotransformación y biodegradación de los compuestos
orgánicos clorados. Inicialmente las conductividades en los dos efluentes fueron
similares. Después del día 90 desde el arranque, en el efluente del tezontle se
observó un aumento de la conductividad a 0.5 mS/cm, mientras que en el del
biofiltro con CAG el valor de la conductividad permaneció alrededor de 0.4 mS/cm.
Esta variación se debió a una disminución del pH en el influente provocada por
una adición incontrolada de micronutrientes al agua sintética, la cual no afectó el
proceso pero sí influenció los valores de la conductividad, sobre todo en el biofiltro
con tezontle. En el transcurso de la experimentación la diferencia en las
conductividades de los dos efluentes disminuyó, pero una diferencia de 0.01-0.05
mS/cm se conservó hasta el final del estudio.
Durante la primera etapa la conductividad del efluente del biofiltro con CAG tuvo
un promedio de 0.39±0.04 mS/cm, mientras que el biofiltro con tezontle tuvo un
promedio de 0.42±0.05 mS/cm. La conductividad del agua sintética fue en
promedio de 0.29±0.07. La diferencia en las conductividades del influente y de los
efluentes se atribuye básicamente a los cloruros liberados en el proceso de
biodegradación.
44
La conductividad eléctrica promedio durante la segunda etapa fue de 0.35±0.03

mS/cm y de 0.42±0.05 mS/cm para el biofiltro con CAG y el biofiltro con tezontle
respectivamente. La conductividad del agua sintética fue de 0.21±0.02. La
diferencia en las conductividades de los dos efluentes se puede atribuir a la mayor
cantidad de cloruros presentes en el efluente del biofiltro con tezontle ya que los
valores del pH fueron similares.
A partir del día 335, debido a cambios en algunos de los reactivos químicos,
utilizados para proveer los micronutrientes, se registró un incrementó en la
conductividad eléctrica del agua sintética, lo cual se reflejó también en los
efluentes de los biofiltros con CAG y tezontle registrando valores de hasta 0.57 y
0.6 mS/cm respectivamente. Debido a esto, la conductividad promedio durante la
tercera etapa fue mayor que durante la anterior, de 0.38 ± 0.06 mS/cm en el
efluente del biofiltro empacado con CAG y de 0.43 ± 0.07 mS/cm en el biofiltro
empacado con tezontle. El influente (agua sintética) presentó una conductividad
promedio de 0.24 ±0.05 mS/cm.
Conductividad (m s/cm )
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1 Primera etapa Segunda etapa Tercera etapa
0
0 50 100 150 200 250 300 350 400
Tiempo de operación (días)
Agua sintética Efl. CAG Efl. Tezontle
Figura 3.4 Comportamiento de la conductividad
3.2.4 Análisis de cloruros

En la figura 3.5 se presenta la gráfica de la concentración de cloruros,
determinados mediante el método de tiocianato mercúrico (ver anexo C). La
45
determinación directa de los cloruros confirmó que existe liberación de estos iones
en los efluentes de los reactores. Durante la segunda y tercera etapa del
experimento el agua sintética tuvo una concentración de cloruros de 14.47±2.65
mg/L., mientras que el efluente del biofiltro con CAG contenía 32.99±9.59 y el del
biofiltro con tezontle contenía 44.63±7.79 mg/L. Hasta el día 230 desde el
arranque la concentración de los cloruros en el biofiltro con tezontle se mantenía
mayor que la concentración en el biofiltro con CAG, casi en un 20 mg/L. Después
la diferencia disminuyó a un 5 mg/L. Las concentraciones de cloruros
determinados en los efluentes son menores (menos del 90%) que los calculados
teóricamente con base en un balance de masa. Esto puede ser debido a que parte
de los cloruros sean absorbidos por los microorganismos que abandonan el
sistema con los efluentes, ya que los cloruros se determinaban en muestras
filtradas de los efluentes. Otras razones pueden ser la bioacumulación de cloruros
en los microorganismos que se acumulan en el sistema o la precipitación de
cloruros inorgánicos que quedan en el lecho adsorbidos en la superficie de los
soportes. En algunas de las micrografías de los gránulos de soporte de la biomasa
se observaron precipitados minerales sobre la superficie en ambos casos, tezontle
y CAG.
Cloruros (mg/L)
80
60
40
20
Segunda etapa Tercera etapa
0
100 150 200 250 300 350 400
Tiempo de operación (Días)
Efl. CAG Efl. Tezontle
Figura 3.5 Concentración de los cloruros en los efluentes de los biofiltros
3.2.5 Comportamiento del pH

Los resultados del control de pH durante el experimento se muestran en la figura
3.6. El pH del efluente del biofiltro con CAG durante la primera etapa tuvo un
46
promedio de 7.45±0.36 y el del biofiltro con tezontle un promedio de 7.58±0.40. El

pH promedio del agua sintética fue de 7.67±0.43. Se observa que en el proceso de
biodegradación se obtiene una ligera disminución del pH original, en un 0.1-0.2
unidades de pH, permaneciendo alcalinos los pH de los efluentes. En los días 85-
102 el agua sintética presentó valores de pH en el intervalo de 6.5-6.63, pero los
biofiltros fueron capaces de amortiguarlo, debido a la alcalinidad que estos tenían
y a la recirculación del efluente.
Durante la segunda etapa los valores de pH en los dos biofiltros fueron muy
similares, el pH promedio de los biofiltros con tezontle y CAG fue de 7.38±0.26 y
de 7.31±0.22 respectivamente. El pH promedio del agua sintética fue de
7.58±0.29. Otra vez se observa una pequeña disminución del pH en el proceso de
biodegradación, en un 0.2 unidades de pH.
Durante la tercera etapa el pH promedio fue de 7.34 ±0.34 en el biofiltro con
tezontle y de 7.29±0.3 en el con CAG. El pH promedio del agua sintética fue de
7.37±0.29. La disminución del pH debida a la biodegradación fue en menor
proporción, en un 0.03-0.08 unidades.
9.2
8.8
8.4
8
pH
7.6
7.2
6.8
6.4
6
0 50 100 150 200 250 300 350 400
Figura 3.6 Comportamiento del pH
En cuanto al comportamiento del pH en general, se observa que durante todo el

experimento los efluentes de los biofiltros se mantuvieron ligeramente alcalinos.
Se sabe que el intervalo para el mejor funcionamiento de las bacterias es
47
alrededor de la neutralidad (6.2-7.8) y que el pH de un reactor debe mantenerse

en un intervalo de 6.5 a 7.5 (Moreno et al, 2002). Es decir, a pesar de que el
proceso de biodegradación provocaba una ligera disminución en los valores del
pH, durante todo el estudio se trabajó dentro del intervalo óptimo para este
parámetro. Los valores de pH en ambos efluentes fueron muy similares, siendo
ligeramente mayores (en 0.05-0.1 unidades de pH) en el biofiltro con tezontle.
3.2.6 Control de alcalinidad

En la figura 3.7 se presentan los resultados de la alcalinidad total determinada en
los biofiltros durante todo el período experimental..
La alcalinidad (capacidad amortiguadora o buffer) durante la primera etapa del
efluente del biofiltro con CAG tuvo un promedio de 132.20±12.88 mg CaCO3/L,
mientras que el biofiltro con tezontle fue de 136.30±14.11 mg CaCO3/L.
Durante la segunda etapa la alcalinidad en el biofiltro con CAG tuvo un promedio
de 116.91±8.98 mg CaCO3/L mientras que la alcalinidad del biofiltro con tezontle
fue de 141.27±14.99 mg CaCO3/L.
Las alcalinidades durante la tercera etapa fueron de 109.17±10.29 y de
127.41±6.04 mg CaCO3/L en los biofiltros con CAG y tezontle respectivamente.
200.00
Alcalinidad (mg
CaCO 3/L)
150.00
100.00
50.00
0 50 100 150 200 250 300 350 400
Figura 3.7 Comportamiento de la alcalinidad
48
En general las alcalinidades en ambos biofiltros fueron similares, ligeramente

mayor (en unos 20 mg/L) fueron las alcalinidades en el biofiltro con tezontle.
3.2.7 Comportamiento de ácidos grasos volátiles (AGVs)

El contenido de los AGV’s determinados en los dos biofiltros se presentan en la
figura 3.8. Se puede observar que en general los valores fueron bajos, variando
entre 5 y 80 mg/L y que los AGV en los dos biofiltros fueron similares. Durante la
primera etapa, los AGV’s en el biofiltro con CAG fueron de 43.05±10.66 mg/L y en
el biofiltro con tezontle de 45.14±13.32 mg/L. Se sabe que una alta producción de
AGV puede abatir la capacidad amortiguadora de un reactor anaerobio y provocar
acidificación en el proceso. En este caso, sin embargo, la cantidad de AGV’s fue
relativamente baja y había suficiente alcalinidad en los reactores, lo cual indica un
funcionamiento estable de los dos biofiltros.
Durante la segunda etapa, los AGV’s en el biofiltro con CAG fueron de 37.29±6.66
mg/L, mientras que en el biofiltro con tezontle fueron de 43.14±7.70 mg/L. De igual
manera que durante la primera etapa, los valores de AGV eran bajos y muy
similares en los dos reactores. El promedio de AGV durante la tercera etapa fue
de 35.78±5.23 en el biofiltro con CAG y de 40.24±7.33 mg/L en el biofiltro con
tezontle. De esta manera, al tener valores bajos de AGV y alcalinidad
amortiguadora, ambos reactores presentaron un buen funcionamiento durante
todo el período del experimento. Con respecto a la tendencia en la variación de los
AGV en el transcurso del tiempo, se observa que hubo estabilidad y que la
dispersión de los valores fue menor durante la tercera etapa (± 0.04). (Figura 3.8).
49
80.00
AGV (mg/L)
60.00
40.00
20.00
0.00
0 50 100 150 200 250 300 350 400
Figura 3.8 Comportamiento de AGV’s
3.2.8 Relación de alcalinidades alfa

En cuanto a la relación de alcalinidades alfa, calculada a partir de los resultados
de las alcalinidades a diferentes pH (alfa = [alc 4.3- alc 5.75]/alc 4.3), se observó
que durante la primera etapa el biofiltro con CAG tuvo un promedio de
0.314±0.065, mientras que el biofiltro con tezontle fue de 0.311±0.065, lo cual nos
indica que los reactores anaerobios presentan una buena una capacidad buffer,
ya que es sabido que una correcta operación de sistemas anaerobios se logra con
valores de alfa de 0.4 como máximo, que representa un 60 % en capacidad buffer
(Moreno et al., 2002).
Con respecto a la relación de alcalinidades alfa se observó que durante la
segunda etapa el biofiltro con CAG tuvo un promedio de 0.313±0.059 mientras que
el biofiltro con tezontle fue de 0.305±0.055, indicando de nuevo que existe una
buena capacidad buffer en los biofiltros anaerobios.
Con respecto a la relación alfa en la tercera etapa se observó que se mantuvo en
el intervalo de 0.28-039 con un promedio de 0.32±0.04 en el biofiltro con CAG,
mientras que el biofiltro con tezontle presentó un intervalo de 0.17-0.41 con un
promedio de 0.31±0.06. Así de esta manera se puede observar que los biofiltros
se mantuvieron estables durante toda la fase experimental (ver figura 3.9).
50
0.500
0.400
Relación alfa
0.300
0.200
0.100
0.000
0 50 100 150 200 250 300 350 400
Figura 3.9 Relación alfa
3.2.9 Potencial redox

El potencial óxido-reducción (POR) se comenzó a medir durante la segunda etapa,
los resultados se muestran en la figura 3.10. En esta gráfica se observa que el
biofiltro con tezontle alcanzó valores más negativos que el biofiltro con CAG. Sin
embargo, en ambos casos prevalecieron las condiciones reductoras de
anaerobiosis. El potencial óxido-reducción promedio del biofiltro con CAG fue de
-188.686 ± 41.06 mV mientras que para el reactor empacado con tezontle fue de
-268.4 ± 42.07 mV. Hubo una tendencia de disminución de potencial durante la
segunda etapa, sin embargo los valores se estabilizaron durante la tercera etapa.
Durante esta última el potencial óxido-reducción promedio del biofiltro con CAG
fue de -175.15±36.57, mientras que la del biofiltro con tezontle tuvo un promedio
de -229.51±37.18, lo cual confirma que igualmente que en la etapa anterior,
prevalecieron las condiciones reductoras de anaerobiosis.
51
-400
-350
Potencial (mV)
-300
-250
-200
-150
Segunda etapa Tercera etapa
-100
200 250 300 350 400
Figura 3.10 Potencial óxido-reducción
3.2.10 Control de los SST y SSV en los efluentes de los biofiltros

Durante la primera etapa del experimento las concentraciones de los SSV en los
efluentes de los biofiltros con CAG y con tezontle fueron muy bajas, con un
promedio de 28.5 mg/L. Esto es debido a que en este periodo la cantidad de
biomasa dentro de los reactores fue relativamente pequeña. Durante la segunda
etapa la concentración de SSV aumentó y la concentración promedio fue de 56.96
mg/L, en ambos biofiltros. En la tercera etapa se observó un incremento mayor en
la biomasa de ambos biofiltros, relacionado con lo cual aumentaron las
concentraciones de los sólidos en los efluentes. En la tabla 3.5 se presentan los
promedios de los SST y SSV determinados en los efluentes de los biofiltros con
CAG y con tezontle durante esta etapa experimental.
Tabla 3.5 Promedios de los SST y SSV en los efluente de los biofiltros durante la
tercera etapa del trabajo experimental
Biofiltros SST(mg/L) SSV (mg/L)
Con CAG 135.55 113.89
Con Tezontle 144.44 127.22
3.2.11 Cantidad de la biomasa en los biofiltros

Durante todo el período experimental no se realizaron procedimientos especiales
de extracción de biomasa de los reactores, por lo cual ésta crecía y se acumulaba
52
en los lechos. La única salida de microorganismos de los biofiltros era con los
efluentes y se controlaba mediante la determinación de los SSV en ambos
efluentes. La cuantificación de la biomasa se realizó dos veces durante la tercera
etapa experimental de acuerdo al procedimiento descrito en el apartado 2.5.1.4.
Los promedios de las dos determinaciones fueron de 23.3 g/L para el biofiltro con
CAG y de 17.1 g/L para el biofiltro con tezontle.
Los tiempos de retención celular calculados a partir de estos valores resultan ser
de 51.1 días para el biofiltro con CAG y de 33.7 días para el con tezontle.
3.2.12 Control de temperatura

En la figura 3.11 se muestran los resultados de la temperatura de los biofiltros
durante toda la fase experimental. En ella se observa que la temperatura se
incrementó durante los días calurosos del año, correspondiente a finales de marzo
(día 222) y comenzó a disminuir a principios de junio. Los promedios de
temperatura en el biofiltro con CAG y tezontle fue de 26.01±2.52 y de 26.07±2.52
°C respectivamente. De acuerdo a estos resultados se puede decir que los
microorganismos anaerobios que se encuentran en los biofiltros son del tipo
mesófilo (20-40 °C) (Moreno et al., 2002).
35
33
Temperatura (°C)
31
29
27
25
23
21
19
0 50 100 150 200 250 300 350 400

Figura 3.11 Comportamiento de la temperatura en los biofiltros
53
3.2.13 Micrografía electrónica de barrido

En la figura 3.12 se muestran las micrografías de los gránulos de CAG y tezontle.
En las figuras 3.12 A y B se muestra la micrografía del granulo de CAG antes del
experimento, mientras en las 3.12 C y D se muestra la superficie de los gránulos
de tezontle. Se observa que los gránulos se encuentran libres de microorganismos
incluyendo dentro de los poros como en el caso de la Figura 3.12 B. Así mismo se
observa que la morfología de ambos gránulos resultan ser diferentes, en el caso
del granulo de tezontle se observa que presenta aspectos irregulares en forma de
hojuelas.
En el final de la primera etapa experimental se tomaron micrografías a los
gránulos de cada biofiltro. En la figura 3.12 E y 3.12 F se muestran las
micrografías de los gránulos de CAG al final de la primera etapa y en ellas se
observa ya la presencia de una capa de biomasa adherida y materia orgánica que
puede ser sustancias poliméricas extracelulares, incluso se encuentran también
dentro de los poros. En esta biomasa los microorganismos que se observan
resultan ser cocos, bacilos y hongos principalmente. Microorganismos similares se
observaron en las micrografías de los gránulos de tezontle (Figura 3.12 G y 3.12
H).
54
A) B)
C) D)
E) F)
G) H)
Figura 3.12 Micrografía del análisis electrónico de los gránulos de CAG y tezontle
A y B gránulo de CAG, C y D gránulo de tezontle antes del experimento.
E y F gránulo de CAG al final de la primera etapa, G H gránulo de tezontle al final de la primera
etapa.
55
En la figura 3.13 se muestran las micrografías de los gránulos de CAG y tezontle

durante la tercera etapa experimental. En la figura 3.13 A y 3.13 B se muestran las
micrografías de los gránulos de CAG y en ella se observa la presencia de cocos
bacilos y hongos, así como de materia orgánica adsorbida a la superficie. En esta
etapa se puede observar que existe una mayor presencia de microorganismos
comparados con las micrografías de la primera etapa, la biopelícula es más densa
y mayor cantidad de la superficie de los granos está recubierta por la biopelícula.
En las figura 3.13 C y 3.13 D se muestran las micrografías de los gránulos de
tezontle, en ellas se observan las presencia también de una mayor comunidad de
microorganismos, principalmente hongos, bacilos y cocos.
A) B)
C) D)
Figura 3.13 Micrografía de los gránulos de CAG y tezontle durante la tercera etapa
A y B gránulo de CAG
C y D gránulo de tezontle
56
3.3 Resultados obtenidos en el sistema de biodegradación

aerobia con biomasa suspendida durante la etapa de tratamiento
anaerobio-aerobio
Durante la tercera etapa experimental, cuando en los biofiltros anaerobios se
aplicó la mayor carga orgánica de 1.82 kg.m-3.d-1, la remoción de organoclorados y
de DQO disminuyó. Para complementar el tratamiento, se instalaron dos sistemas
de biodegradación aerobia con biomasa suspendida, tipo lodos activados, una
para el efluente de cada biofiltro anaerobio. Los sistemas se acoplaron de acuerdo
al tren de tratamiento presentado en la metodología del estudio (Figura 2.2) y se
operaron de acuerdo a lo establecido en el apartado 2.5.2 a partir del día 312
desde el arranque de los biofiltros anaerobios.
En la figura 3.14 se muestran las concentraciones de la DQO obtenidas en el
efluente del reactor aerobio acoplado con el biofiltro anaerobio con CAG (L.A. del
efl. con CAG) y del reactor aerobio acoplado con el biofiltro anaerobio con tezontle
(L.A. del efl. con tezontle). Las concentraciones de DQO en el efluente
paulatinamente bajaron durante los primeros 24 días, estabilizándose después.
Con una variación relativamente pequeña. Esto se atribuye a la aclimatación de la
biomasa utilizada para inocular los reactores aerobios al nuevo sustrato. El
efluente del sistema de lodos activados que trataba el efluente del biofiltro con
CAG tuvo un promedio de DQO de 20.66±7.15 mg/L, mientras que el sistema de
lodos activados que trataba el efluente del biofiltro con tezontle tuvo un promedio
de 22.41±6.80 mg/L. Ambos promedios se obtuvieron con base en los resultados
obtenidos después de la aclimatación (desde el día 24 hasta el final del
experimento).
Con base en los resultados se calcularon los porcentajes de remoción de los
sistemas acoplados anaerobio-aerobio (% de remoción total en base al influente y
con biofiltro con CAG, % de remoción total en base al influente y con biofiltro con
tezontle), así como las remociones obtenidas en los reactores aerobios solamente
(%de remoción en base al efluente del biofiltro empacado con CAG y %de
remoción en base al efluente del biofiltro empacado con tezontle). Las remociones
se presentan en la Figura 3.15. Se puede observar que en el arranque, las
57
remociones de DQO en los reactores aerobios fueron bajas (43-45%), pero

después aumentaron, alcanzando remociones de 77-80% después de 24 días de
operación. Esto es debido a la aclimatación de los microorganismos, para la cual
se necesitó un período de tres semanas. Los promedios de las remociones
determinadas con base en los resultados del período después de la aclimatación
de la biomasa en los reactores de lodos activados fueron de 75.54% para el
reactor de lodos activados que trató el efluente del biofiltro con CAG y de 74.25%
para el reactor de lodos activados que trataba el efluente del biofiltro con tezontle.
35
DQO (mg/L)
30
25
20
15
10
0 10 20 30 40 50 60
Días de operación
L.A. del efl. con CAG L.A. del efl. con Tezontle
Figura 3.14 Concentraciones de la DQO en los efluentes de los reactores aerobios

instalados durante la tercera etapa del estudio
100
90
% de remoción
80
70
60
50
40
0 10 20 30 40 50 60
% de remo ció n to tal en base al influente y co n bio filtro co n CA G
% de remo ció n to tal en base al influente y co n bio filtro co n Tezo ntle
% de remo ció n en base al efluente co n bio filtro empacado co n CA G
% de remo ció n en base al efluente co n bio filtro empacado co n Tezo ntle
Figura 3.15 Eficiencia de remoción de los activados
58
La remoción total de DQO en los sistemas anaerobio-aerobio fue alta (figura 3.15).
Porcentajes de remoción mayores de 95% se obtuvieron tanto en el sistema
biofiltro con CAG-LA, como en el sistema biofiltro con tezontle-LA. Los promedios
de las remociones determinadas con base en los resultados del período después
de la aclimatación de la biomasa en los reactores de lodos activados fueron de
95.62% para el sistema biofiltro con CAG-LA y de 95.25% para el sistema de
biofiltro con tezontle-LA. No se encontraron compuestos organoclorados en los
efluentes de los reactores aerobios.
Comparando estos resultados con los obtenidos con los biofiltros durante las dos
primeras fases experimentales, se observa que las remociones de DQO en el
biofiltro con CAG operado con cargas de 0.58 y 1.22 kg.m-3.d-1 eran de 95% y de
94% respectivamente, mientras que el sistema con biofiltro con CAG operado con
una carga de 1.82 kg.m-3.d-1 y acoplado con el sistema aerobio permitió alcanzar
una remoción de 96%. En todos los casos no había organoclorados en los
efluentes. En este caso la mejora de la efectividad del tratamiento realizando el
acoplamiento anaerobio-aerobio se podría justificar solamente para aguas
residuales que además de los compuestos clorados, contienen otros compuestos
orgánicos en altas concentraciones.
En el biofiltro con tezontle, las remociones de DQO fueron menores, de 85% y de
88 % para las cargas de 0.58 y de 1.22 kg.m-3.d-1 respectivamente. También se
determinaron pequeñas concentraciones de 1,2-dicloroetano (5.70 mg/L) en el
efluente y se detectaron cloroetenos como productos intermedios. El sistema
acoplado, biofiltro con tezontle (operado con una carga orgánica de1.82 kg.m-3.d-1)
y lodos activados, permitió mejorar sustancialmente la efectividad del proceso
alcanzándose 95% de remoción de DQO y obteniéndose un efluente libre de
compuestos clorados.
En la figura 3.16 se muestra la gráfica de las concentraciones de SST y SSV en el
licor mezclado de los reactores aerobios. En ella se observa que existe un
crecimiento gradual de la biomasa (SSV). El sistema de lodos activados que
trataba el efluente del biofiltro con CAG alcanzó valores de biomasa de hasta 925
mg/L, con un promedio de 699.45±155.94 mg/L; mientras que el sistema que
59
trataba el efluente del biofiltro con tezontle alcanzó valores de SSV de hasta 858
mg/L teniendo un promedio de 558.36±145.86. La relación F/M de los sistemas fue
de 0.39±0.11 y de 0.50±0.14 kg DQO/(kgSSV.d).
SST y SSV (mg/L) 2500

2000
1500
1000
500
0
16 24 30 37 39 43 46 50 52 59 64
SST de L.A. que trata efl. de biofiltro con CAG
SST de L.A. que trata efl. de biofiltro con Tezontle
SSV de L.A. que trata efl. de biofiltro con CAG
SSV de L.A. que trata efl. de biofiltro con Tezontle
Figura 3.16 Concentraciones de SST y SSV en los reactores aerobios
Con respecto al pH, el sistema de lodos activados acoplado al biofiltro con CAG
tuvo un promedio de 7.78±0.21, mientras que el sistema acoplado al biofiltro con
tezontle tuvo un promedio de 7.98±0.15, lo cual indica que ambos funcionaron
adecuadamente ya que se sabe que el intervalo óptimo para un proceso de lodos
activados es de 6.8-8.5.
En la figura 3.17 se presenta la gráfica de los valores de conductividad. Se
observa que la conductividad en los reactores aerobios aumentó, llegando a
valores de hasta 0.57 mS/cm, lo cual se puede atribuir al contenido de sales
(micronutrientes) que permanecen en los efluentes de los biofiltros anaerobios.
60
0.6
Conductividad
0.5
(mS/cm)
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 10 20 30 40 50 60 70
L.A. del biofiltro con CAG L.A. del biofiltro con tezontle
Figura 3.17 Conductividad de los sistemas de lodos activados
61
Conclusiones
Conclusiones
• El biofiltro anaerobio con CAG, así como el sistema acoplado de biofiltro
anaerobio con tezontle y reactor aerobio con biomasa suspendida, son
alternativas de tratamiento efectivas para la remoción de compuestos
alifáticos clorados en efluentes de la industria petroquímica.
• Aplicando cargas orgánicas hasta 1.22 kg⋅m-3⋅d-1 en el biofiltro con CAG se
pueden obtener remociones de DQO de 94-95%, mientras que en el biofiltro
con tezontle se obtiene 88%. La remoción de los compuestos clorados
fueron mayores al 99.9% en el biofiltro con CAG y mayores de 99.6% en el
biofiltro con tezontle. Operado con cargas orgánicas hasta 1.22 kg⋅m-3⋅d-1 el
biofiltro con CAG puede ser utilizado como único sistema de tratamiento
para remover compuestos alifáticos clorados en los intervalos de
concentración estudiados.
• La remoción de DQO en los biofiltros anaerobios disminuye aplicando una
carga mayor, de 1.82 kg⋅m-3⋅d-1. En el biofiltro con CAG se puede obtener
una remoción de DQO de 89% y en el biofiltro con tezontle una remoción de
80%. Se afecta también la remoción de los compuestos clorados en ambos
biofiltros, siendo la remoción del 1,2-dicloroetano de sólo 54% y las
remociones de 1,1,1- tricloroetano, tricloroetileno, y tetracloruro de carbono
entre 83 y 99.6%.
• El sistema acoplado anaerobio-aerobio permite lograr remociones de DQO
mayores de 95% y en los casos cuando los biofiltros anaerobios se operan
con la mayor carga orgánica, de 1.82 kg⋅m-3⋅d-1. Los remanentes de los
compuestos organoclorados presentes en los efluentes de los biofiltros
anaerobios se remueven por completo en los reactores aerobios.
• El sistema acoplado anaerobio-aerobio es indispensable cuando se utiliza
el biofiltro anaerobio con tezontle, ya que en el efluente de éste quedan
compuestos clorados en pequeñas concentraciones, inclusive cuando se
opera con cargas orgánicas bajas. El efluente del biofiltro con CAG no
requiere de un pulimento cuando se opera con cargas orgánicas hasta 1.22
kg⋅m-3⋅d-1.
62
Conclusiones
• El aumento de la conductividad en los efluentes de los biofiltros anaerobios

se atribuye básicamente al incremento de la concentración de los cloruros
en el agua debido a liberación de los iones cloro en el proceso de la
biotransformación de los compuestos clorados.
• El pH se mantuvo estable durante todo el experimento, el proceso de
biodegradación anaerobia no presentó acidificación, el potencial redox se
mantuvo en condiciones más reductoras de anaerobiosis en el biofiltro con
tezontle.
• La relación alfa que presenta los biofiltros anaerobios indica que existe una
buena capacidad buffer, ya que se encuentra en un intervalo menor a 0.4.
• El proceso de biofiltración anaerobia se desarrolló exitosamente utilizando
como inóculo lodo granulado de un reactor UASB. La transformación de la
biomasa (desintegración de los gránulos y formación de biopelícula) requirió
de 2.5 meses de operación. Las micrografías de los gránulos de los
biofiltros indicaron presencia de cocos, bacilos y hongos, que son los
encargados de biotransformar los compuestos clorados.
63
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67
Anexo A
Anexo A
Requerimiento de N y P
Ejemplo de cálculo de nutrientes:
DQO Remoción Crecimiento de la N P

DQOefl aer,
(teórica), de DQO biomasa (mg requerido requerido
mg/L
mg/L asumida, % SSV/L) (mg/L) (mg/L)
416 85 62.4 6.24 0.7488 0.106971429

416 82 74.88 7.488 0.89856 0.128365714
416 80 83.2 8.32 0.9984 0.142628571
El 12% de la masa celular seca corresponde al nitrógeno
El contenido de fósforo es aproximadamente 1/7 del nitrógeno requerido
Crecimiento de la biomasa = 0.1 x DQO removida
0.1 kg SSV/kg de remoción de DQO= se asume que el 10% de la DQO bajo las condiciones de
biodegradación es convertida en células nuevas.
Elemento Elemento Peso del g/L requerido mg/L

requerido requerido Compuesto PM (g) elemento del requerido del
(mg/L) (g/L) (g) compuesto compuesto
DQO
(teórica), N N
mg/L NH4Cl 53.45 14 NH4Cl
416 0.7488 0.0007488 0.002858811 2.858811429
P P K2HPO4 173.97 30.97 K2HPO4
0.106971429 0.000106971 0.000600898 0.60089827
Rango Fe Fe Fe FeCl3 162.15 55.8
0.416-
0.5 0.0005
.832 0.001452957 1.452956
Ni Ni NiCl2•6H2O 237.6 58.7
0.03 0.00003 0.000121431 0.121431
Co Co CoCl2•6H2O 237.8 58.9
8.4784x10-5 0.084784
68
Anexo A
Miligramos requeridos de:

Elemento requerido
Mo (NH4)6Mo7• 4H2O
0.017 0.02155
Na Na2SO4
55 340.567
Ca CaCl2
0.02496 0.0692
K K2HPO4
0.0624 0.139
Mg Mg2SO4
0.0182 0.189
Zn ZnSO4• 7H2O
0.0003744 0.001645
Mn MnSO4 H2O
0.0001248 0.000383
Cu CuSO2• 5H2O
0.0000624 0.000245
Metales requeridos para la biomasa anaerobia en función de la DQO del agua (Procesos
de trat. An., UNAM).
Elementos Concentración del metal (mg/L)

10 g DQO/L 50 g DQO/L
Fe 0.5-20 3-100
Ni 0.05-3 0.3-15
Co 0.05-2 0.3-10
Mo 0.01-0.05 0.05-0.2
Composición elemental de bacterias metanogénicas.

Elemento Concentración en mg/kg de células secas
N 65000
P 15000
S 10000
Ca 4000
K 10000
Mg 3000
Fe 1800
Ni 100
Co 75
Mo 60
Zn 60
Mn 20
69
Anexo B
Anexo B
Determinación de peso específico real
a) Secar la muestra del medio filtrante que se quiere analizar durante 24 horas
a 103 °C.
b) Pesar cuidadosamente una muestra de 150 gramos y colocarla en un vaso
de precipitado de 400 mL.
c) Añadir 100 mL de agua destilada y hervir durante 5 minutos a fin de
expulsar el aire.
d) Pesar un matraz desecado de 250 mL.
e) Enfriar y llevar la muestra a ese matraz. Completar con agua destilada
hasta la marca.
f) Pesar el agua más el matraz más la muestra de lecho filtrante. El peso
específico será igual:
g) S = Peso de la muestra (150 gramos)/ Volumen de la muestra, gramos
fuerza / ml
Usando la relación 1kg fuerza = 0.09806 N, el peso específico se
puede expresar en N/m3 o kN/m3.
El volumen de muestra es igual a:
Vm = Va- Vb
Va = Volumen de la muestra + agua = 250 mL.
Vb = Volumen de agua desplazada.
Determinación de peso específico aparente

La muestra se lava y se seca a 130ºC durante 24 horas.
Se enfría la muestra y se introduce a una probeta graduada, se agita y se deja la
muestra asentar en su forma natural. Si es necesario, se dan dos pequeños
golpes en el fondo para que el material asiente. Se mide el volumen (Vm). Se pesa
la cantidad de arena contenida en este volumen (Pm).
Peso específico aparente = Pm/Vm.
70
Anexo B
También se puede utilizar el siguiente procedimiento: pesar 100 g de la muestra y

verterlos en una probeta graduada. Sea V el volumen leído en la probeta. El peso
específico aparente será:
Peso de la muestra (100 g )

γ aparente = , gramos fuerza / ml
Volumen de la muestra
Al igual que en el caso anterior, usando la relación 1kg fuerza =

0.009806 kN, el peso específico aparente se puede expresar en N/m3
o kN/m3.
En este caso se determinará la masa volumétrica del material después de

asentarlo en la probeta.
Determinación de porosidad
La determinación de porosidad se realizó de la siguiente manera:

a) Colocar 150 gramos del medio de soporte en una probeta y llenarlo hasta la
mitad de agua. La muestra debe de haberse lavado previamente para
eliminar toda la tierra o polvo que puede contener.
b) Agitar a fin de extraer el aire.
c) Si el agua esta turbia, decantar repetidamente hasta que se clarifique.
d) Llenar el tubo completamente con agua y colocarle un tapón de goma de
modo que no quede burbujas de aire dentro.
e) Rotar el tubo rápidamente 180°.
f) Cuando el medio de soporte sedimente en el fondo del tubo, rotarlo de
nuevo rápidamente 180° y colocarlo en un soporte a fin de que permanezca
verticalmente y sin perturbaciones.
71
Anexo B
g) Marcar la probeta o tubo con un lápiz el borde superior del medio de

soporte.
h) Remover el medio de soporte y el agua de la probeta.
i) Añadir agua hasta la marca que se hizo en el tubo y medir este volumen en
un cilindro graduado.
La porosidad será igual a:

P = Volumen de vacíos/ Volumen de muestra x 100.
El volumen de vacíos puede hallarse por la diferencia entre el volumen medido en

el cilindro graduado (volumen total) menos el volumen de la muestra ( peso de la
muestra, 150 gramos dividido por su peso específico.
Se puede aplicar y el siguiente procedimiento:
Se toma un volumen de muestra (VM) y se seca durante 24 horas y se vuelve a

pesar (Ws).
a. Se determina el volumen seco de la muestra (Vs) a partir del peso seco (Ws) y
el peso específico.
Vs=Ws/γ
b.El volumen de vacíos Vv se obtiene restando el volumen medido (VM) del
volumen seco (Vs).
Vv=VM-Vs
b. El valor de la porosidad es la relación de volumen de vacíos entre el volumen
medido.
c. P=Vv/VM.
La porosidad se determina
Densidad real - Densidad aparente

Porosidad =
Densidad real
Nota: En la determinación se realizó una modificación de la técnica de Jackson.

Se usó una probeta graduada de 100 mL y una muestra del material filtrante de
alrededor de 75 g. La muestra es previamente lavada y secada.
72
Anexo C
Anexo C
Determinación de cloruros
Esta técnica se determinó a través del método de tiocianato mercúrico y utilizando

el espectrómetro marca Hach modelo DR/2400. El procedimiento se describe a
continuación:
a) Filtrar la muestra si presentan turbiedad a través de un papel filtro antes del
análisis.
b) Llenar una celda de 25 mL de muestra.
c) Llenar otra celda de 25 mL con agua desionizada (este es el blanco).
d) Pipetear 2 mL de tiocianato mercúrico a cada celda.
e) Agitar la mezcla.
f) Pipetear 1 mL de la solución ión férrico a cada celda.
g) Agitar la mezcla. Deberá aparecer una coloración naranja si hay presencia
de cloruros.
h) Esperar 2 minutos para que se realice la reacción.
i) Leer en el espectro cuando hayan pasado los dos minutos.
73
Anexo D
Anexo D
Pérdida por Desorción
Esta prueba se realizó con el fin de determinar la pérdida por desorción o
volatilización de la mezcla compuestos clorados en el agua sintética durante 24
horas, medida a través de la DQO.
En las tabla 1 y en la gráfica 1 se presenta la pérdida por desorción de los
compuestos clorados y se observa que la mayor pérdida por volatilización ocurre
principalmente después de 19 horas de alimentación y es cuando mayor es la
temperatura del ambiente, ya que resulta ser después del medio día.
Tabla 1 Pérdida por desorción
A. % de
% de desorción
Tiempo 100
sintética desorción
80
0 488.12 0.00 60
2 406.8 16.66 40
4 381.8 21.78 0 5 10 15 20 25
19 365.64 25.09 Tiem po (hrs)
21 352.9 27.70
23 257.86 47.17
Figura1 Desorción de los compuestos en 24 horas
74

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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

PROGRAMA DE MAESTRÍA Y DOCTORADO

TRATAMIENTO BIOLÓGICO PARA LA REMOCIÓN

ALEJANDRO CANUL CHUIL

El uso de imágenes, fragmentos de videos, y demás material que sea

Presidente: Dr. González Martínez Simón

Secretario: Dr. Durán Moreno Alfonso

Vocal: Dra. Mijaylova Nacheva Petia

1er. Suplente: Dra. Fernández Villagómez Georgina

2do. Suplente: Dr. Buitrón Méndez Germán

Lugar donde se realizó la tesis:

FACULTAD DE INGENIERÍA CAMPUS MORELOS

DRA. PETIA MIJAYLOVA NACHEVA

Al CONACYT, por la beca otorgada para la realización de los estudios de

A la DGEP por el apoyo económico recibido y por la participación en el XI

A la Biol. Yolanda Hornelas, por su ayuda en la realización de las pruebas de

A mis amigos de generación: Octavio, Mariana y Karla, por su gran apoyo y

A mariana y Fabi, gracias por todo.

El 1,2-dicloroetano es un compuesto clorado que ha sido reportado como tóxico

Determinar la remoción y/o la biotransformación de compuestos organoclorados

• Aplicar tres diferentes cargas orgánicas volumétricas (COV) para la

1.1 Procesos biológicos para tratamiento de aguas residuales

El tratamiento biológico consiste en reducir el contenido en materia orgánica de

1.1.1 Clasificación de los sistemas biológicos

En los procesos biológicos, la materia orgánica contaminante es utilizada como

en diversos productos dependiendo del metabolismo aerobio o anaerobio de la

Carbono orgánico en el Tratamiento aerobio

CHCN + O2 C5H7O2N + CO2 + H2O

Biogás Carbono en biogás (92%)

Carbono en biomasa (4%)

Carbono en el efluente tratado (4%)

(CHON)5 + O2 R CH3COOH CO2 + CH4 C5CH4N biomasa (4%)

Figura 1.1 Balance de carbono en el tratamiento aerobio y anaerobio. Fuente:

1.1.1.1 Metabolismo aerobio

La descomposición de la materia orgánica por vía aerobia se divide en tres fases

aceptor final de electrones es el oxígeno molecular, para formar agua como

1.1.1.2 Metabolismo anaerobio

La figura 1.2 presenta la cadena de transporte electrónico para la respiración

DH2 CO2 SO4= NO3-

Figura 1.2 Cadena de transporte electrónico para la respiración anaerobia. Fuente:

La conversión biológica de la materia orgánica por vía anaerobia se produce en

molecular. El tercer paso (metanogénesis), supone la conversión bacteriana de los

Figura 1.3 Representación esquemática del flujo de carbono en el proceso de

1.1.1.2.1 Factores ambientales relacionados con la digestión anaerobia

que el intervalo en el que todas las bacterias pueden interactuar es alrededor de la

1.2 Biomasa suspendida

Figura 1.4 Sistema de lodos activados

1.3 Biomasa Fija

1.3.1 Crecimiento de biopelículas

El material de soporte para los microorganismos debe poseer ciertas

1.3.2 Alimentación de biopelícula y depuración del agua residual

1.4 Procesos de biodegradación

La estabilización de la materia orgánica presente en un agua residual se logra

y el carbono del sustrato orgánico para realizar la formación de nuevas células, y

1.4.1 Biodegradación anaerobia/aerobia

1.4.2 Factores que afectan el proceso de biodegradación

1.4.2.1 Efecto de la temperatura

1.4.2.2 Efecto del pH

1.4.2.3 Requerimiento de Oxígeno