Actividad antibacteriana de la clorhexidina

La clorhexidina es un antiséptico desinfectante y conservador usado en medicina,

odontología y Farmacia. Es bactericida, fungicida pero no tiene actividad frente a esporas
micobacterias ni virus.

La clorhexidina es un antiséptico desinfectante y conservador usado en medicina, odontología y

Farmacia. Es bactericida, fungicida pero no tiene actividad frente a esporas, micobacterias ni
virus. Es muy importante su actividad frente a quistes de Acanthamoeba esp, parásito que
puede desarrollarse en las lentes de contacto.

Propiedades:

La clorhexidina se presenta como acetato, clorhidrato y gluconato, es estable en solución y

puede ser atuoclavada. Como agente catiónico es incompatible con agentes tensioactivos
iónicos. Su actividad antimicrobiana se reduce en presencia de agentes tensioactivos no
iónicos, también se reduce o desaparece frente a fosfolípidos y por presencia de materia
orgánica.

Cuando queremos determinar la CIM (Concentración Inhibitoria Mínima) dependerá del medio
usado generalmente es más bajo en caldo que en aguar. La reactivación por agentes
tensioactivos no iónicos como polisorbato 80(tweeen 80) y fosfolípidos, es muy importante en la
evaluación de la actividad de la clorhexidina y los compuestos de amonio cuaternario. Una
solución de fosfolipidos (asolectin,75%) en una concentración de tween 80 ha demostrado ser
muy eficaz frente a altas concentraciones de clorhexidina.

Eficacia antibacteriana

Como regla general la mayoría de las bacterias Gram positivas son inhibidas por una
concentración de I mg/I de clorhexidina y la mayoría de los gram negativos por una
concentración de 2-2,5 mg/I. En el caso de las gram negativas, por ejemplo Pseudomona
aeruginosa es resistente con una CIM de 20 a 50 mg/l, otros microorganismos requieren
mayores concentraciones.

En ausencia dE! materia orgánica a determinadas concentraciones de clorhexidina producen la

muerte de 99,99% de microorganismos (reducción de 4 logaritmos) en 10 minutos a 20°C,
Streptococcus aureus 25 mgll, Streptococcus pyogenes 50 mgll. E coli 20 mgll. P.aeruginosa 57
mgll.

W B Hugo en 1960 demostró que la clorhexidina actúa sobre la membrana citoplasmática

causando daño en su interior seguida de precipitación o coagulación de proteínas y ácidos
nucleicos. Esta acción también ocurre en la membrana externa de bacterias gram negativas y
en la pared celular de las gram positivas.

Resistencia bacteriana a la clorhexidina .

La resistencia bacteriana a antisépticos y desinfectantes puede ser intrínseca (propiedad natural

de un organismo)

La clorhexidina tiene una considerable persistencia sobre la piel (adherencia residual) lo que
hace que sea un antiséptico de elección para la limpieza de la misma. La clorhexidina tiene
además un muy bajo potencial de sensibilización por contacto y fotosensibilidad a pesar del
prolongado uso y no es absorbida por la piel intacta.

o adquirida (por incorporación de material gen ético: plásmido, transposones o por mutación).
Muchas especies bacterianas como proteus o providencia son naturalmente resistentes a la
clorhexidina.

La razón de esta elevada resistencia por parte de estos organismos se debe a la falta de
capacidad del antiséptico para alcanzar los blancos en esas células. La impermeabilidad es
cusante de la resistencia de esporas y micobacterias. Una cuestión a develar sería el
mecanismo de la resistencia a la chorhexidina de patógenos urinarios gram negativos, una de
las razones para la falta de susceptibilidad está asociada con las barreras presentes en las
capas externas de estos microorganismos claramente vinculada a la formación y presencia de
biofilms. Se ha demostrado que los biofilms de S. marcescens y S. cepacia contribuyen a una
prolongada sobrevida de los microorganismos frente a los antisépticos. Concentraciones de
clorhexidina normalmente usadas para instilaciones fracasan en la eliminación de E. coli, P.
aeruginosa, P. mirabilis K neumonia formadora de biofilms. El agente quelante EDTA
(etilendiamino tetracético) aumenta la actividad de la clorhexidina frente a patógenos urinarios,
sin embargo el efecto potencializador del EDTA es temporario.

.Clorhexidina como desinfectante de manos

Experimentando con una cepa de K. aerogenes resistente con una solución de 0,5% de
clorhexidina 'en isopropanol se logró una desinfección tan eficaz como con gluconato de
corhexidina al 4%.Ayliffe y colaboradores recomendaban usar al S. aureus como
microorganismo referente para verificar la higiene de las manos apuntando a que las
formulaciones alcoholicas destruyen los microorganismos presentes en la piel. El E. falecium
vancomicina resistente puede sobrevirir sobre las manos contaminadas siendo rápidamente
removido por la clorhexidina.

Las formulaciones con clorhexidina son también empleadas para la desinfección quirúrgica de
manos de varias preparaciones andsépticas probadas, la solución de clorhexidina 4% en
detergente catiónico produjo muy buenos resultados.

La clorhexidina tiene una considerable persistencia sobre la piel (adherencia residual) lo que
hace que sea un antiséptico de elección para la limpieza de la misma.Tiene además un muy
bajo potencial de sensibilización por contacto, no produce fotosensibilidad ni es absorbida por la
piel intacta. a pesar del uso prolongado.

Okano en 1989 describe 6 pacientes que desarrollaron anafilaxis por exposición a la

clorhexidina pero el análisis de los mismos ha mostrado que dicha manifestación se produjo por
aplicación sobre membranas mucosas. Bajas concentraciones de clorhexidina son ampliamente
usdadas en las formulaciones para desinfección de lentes de contacto, la exposición accidental
a concentraciones prolongadas de clorhexidina gluconato al 4% durante 5 a 10 minutos
producen severas queratitis.

Bibliografía

 Antibacterial activity of chorhexidina A D Rousell

 And M J Doy Journal of Hospitallnfection, (1993) 25,229 238

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Es el Biofilm evitable o inevitable en el ámbito hospitalario?

Farm. Horacio Aranda.

Cabe la posibilidad de que muchos de nosotros no tengamos presente o no hayamos entrenado

nuestra vista para reconocer la presencia de un biofilm.

Sería útil que antes, durante o después de la lectura de esta reseña nos concentremos y
observemos en los dispositivos médicos de uso frecuente (tubuladuras, circuitos respiratorios) la
presencia o ausencia de dicho film. En la mayoría de las instituciones se lo observa en los
elementos utilizados cotidianamente, a pesar de ser de nuestra responsabilidad prevenir su
formación y evitar así un perjuicio para el paciente.

¿QUE ES UN BIOFILM?

En la literatura encontramos distintas definiciones de biofilm. Para Mc. Peters está constituido
por microorganismos y sustancia extracelular asociados a un sustrato lo tiene.

Charaklis sostiene que es un conjunto de células inmovilizadas sobre un sustrato y

generalmente incluidos en una matriz de polimeros orgánicos de origen microbiano.

Otra definición lo entiende como una comunidad de microorganismos incluidos en una matriz
orgánica polimérica adherida a una superficie. La matriz polimérica es conocida como EPS
(extra cellular polymeric substances ) y está constituida por polisacáridos y glucoproteinas. Para
que se organice el biofilm el medio debe ser pobre en sustancias nutritivas.

Marshall observó que una solución de glucosa con una concentración mayor a 7g/l inhibía
irreversiblemente la adhesión de Pseudomona Sp.

Se consideran ejemplos de biofilm la pelicula que recubre una piedra en el lecho de un río, la
placa dental, el sarro de una cañería, el recubrimiento de una prótesis o un catéter y el
revestimiento interior de una tubuladura y circuito respirador.

¿POR QUE SE FORMA?

Se forma porque los diferentes elementos constituyentes se encuentran juntos en un mismo

lugar, lo cual permite su proliferación, además de la presencia de una superficie que favorece su
adhesión. La bacteria obtiene numerosas ventajas viviendo en el biofilm, quedando protegida de
ataques del medio ambiente. Por ejemplo, la piedra que se encuentra en el río con su biofilm
protege a los microorganismos de la luz ultravioleta.

Los microorganismos localizados en catéteres y prótesis no son afectados por anticuerpos, ni

por la actividad fagocitica de los glóbulos blancos, ni por los antibióticos.

¿COMO SE FORMAN?

Existen propiedades inherentes a la superficie y al microorganismo.

a) Propiedades inherentes a la superficie:

1. Carga de la superficie: balance entre cargas negativas y positivas expuestas en la superficie.

2. Energía libre de la superficie: dada por la presencia de actividad hidrofílica o hidrofóbica en la

misma.

3. Rugosidad: aunque la superficie aparentemente esté pulida habrá ondulaciones del orden del
micrón, que son suficientes para proteger una bacteria en un flujo turbulento.

b) Propiedades inherentes a los microorganismos:

E. En relación con el microorganismo, el mismo es atraído hacia la superficie por fuerzas de

Van der Waals. Estas fuerzas producen una atracción instantánea hacia la interfase y el
microorganismo se adherirá en forma reversible o irreversible.

La adhesión se considera reversible cuando es originada por la unión entre la bacteria y la

superficie caracterizada por la existencia de movimiento browniano, lo que condiciona la
facilidad de la remoción de los microorganismos con la aplicación de una fuerza moderada
(chorro de agua).

La adhesión se torna irreversible cuando tiene lugar una firme unión entre la célula y el sustrato
dependiendo del tiempo de contacto y la forma en que el mismo se produce. (Ver cuadro 1)

FACTORES QUE INTERVIENEN EN LA ADHESION

Además de los factores propios de la superficie y del microorganismo hay otros factores que
participan:

Temperatura: por ejemplo la Yersinia enterocolitica se adhiere al acero inoxidable a 21 grados

C con más firmeza que a 35 ó a l0 grados C.

Desecación: favorece la adhesión actuando la matriz como un reservorio de agua protegiendo a las células de su carencia.

Las células en el biofilm se encuentran en un estado llamado STARVATION SURVIVAL (Estado de inanición).

El biofilm es susceptible de desprenderse parcialmente, liberando microorganismos al medio con una gran resistencia a antibióticos y desinfectantes.

¿COMO ELIMINAR EL BIOFILM?

Hay dos métodos para lograrlo: limpieza y desinfección.

Es de vital importancia suprimir la mayor cantidad de microorganismos antes de realizar la desinfección. Los microorganismos son más sensibles a los desinfectantes
una vez que fueron desprendidos de la superficie a la cual estaban adheridos.AI respecto se ha observado la imposibilidad de actuar sobre el biofilm a través de
algunos desinfectantes, tales como el formol , el glutaraldehido y las sales mercuriales.

La acción mecánica como un enérgico cepillado o el agua a presión elevada son métodos adecuados para su eliminación.

Czechowski sugiere el uso de detergentes alcalinos dorados y posterior tratamiento con detergentes alcalinos para desprender el biofilm.

Otros autores sugieren el uso de quelantes para eliminar el calcio del medio al ser su presencia necesaria para la formación de la matriz.También proponen el uso de
enzimas glucolíticas y proteoliticas pero su eficiencia depende de cada colonia en particular.

Por otro lado,Wiatr estudió 40 enzimas distintas considerando que la mezcla de alfa amilasa, beta glucanasa y proteasa era la más efectiva.

Se ha sugerido el uso del ultrasonido para su eliminación, pero esto solo es efectivo para objetos de tamaño reducido.

Otro método ideado para suprimir el biofilm y destruir los microorganismos consiste en exponer el mismo a un campo eléctrico.

En cuanto a la desinfección hemos manifestado que estos microorganismos son más resistentes que aquelíos que se encuentran en suspensión. Con siete
desinfectantes distintos fue necesario aumentar de lO a lOO veces la concentración para lograr el mismo resultado.

De acuerdo a todos los autores la presencia de la matriz es suficiente para explicar la resistencia observada.

En general se recomienda el uso de ácido peracético o hipoclorito alcalino como desinfectantes adecuados.

Como conclusión debemos recordar que lo más conveniente es evitar la formación de biofilm en base a la práctica de una limpieza correcta cada vez que
corresponda y un control posterior para aceptar o rechazar la esterilización del dispositivo médico correspondiente.

Porcentaje de población

TEST TIEMPO LIBRES U.DEBIL U.FIRME

ORGINAL 2 27 57 15

2 HS. SOBRENADANTE 2 26 58 15

2 HS LAVADO 2 12 12 76

ORIGINAL 4 16 43 40

Cuadro 1. Efecto observado al exponer una suspensión de Pseudamona EK 20 a una superfide de poliestireno y su capacidad de adhesión.
BIBLIOGRAFíA CONSULTADA

Marshall K.C. y B. LBIainey. Role of bacterial adhesion in biofilm formation and biocorrosion. School of Microbiology. University of New South Wales.
Australia.

Carpentier; B.y O. Cerf Bio films and their canse quences, with particular refrrence to hyigiene in the foad industry. Revista Jaurnal of Applied
Bacteriolagy. 1993 pag. 499-511. Francia.

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