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Hemoglobine E Inserto

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MINICAP HEMOGLOBIN(E)

Ref. 2207
Ref. 2227*

MINICAP FLEX-PIERCING

2018/07
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

MINICAP HEMOGLOBIN(E) EN EL MINICAP FLEX-PIERCING

UTILIZACIÓN

El kit MINICAP HEMOGLOBIN(E) permite la separación en medio alcalino (pH 9,4) de las hemoglobinas normales de la sangre humana (A, F y A2) y
la detección de las principales hemoglobinas anormales (especialmente las hemoglobinas S, C, E y D), mediante electroforesis capilar en el sistema
automático MINICAP FLEX-PIERCING, a partir de sangre total obtenida con anticoagulante que contenga EDTAK2 ó EDTAK3.
El sistema MINICAP FLEX-PIERCING permite realizar todas las etapas de la electroforesis hasta la obtención del perfil de las hemoglobinas para el
análisis cualitativo o cuantitativo. El análisis se realiza en el hemolizado de glóbulos rojos de sangre total.
Las hemoglobinas, separadas en capilares de sílice fundido, son detectadas directamente en una burbuja existente en el capilar mediante
espectrofotometría de absorbancia a 415 nm, que es la longitud de onda de absorción específica de las hemoglobinas.
Los perfiles electroforéticos son analizados visualmente para detectar las anomalías. La detección directa proporciona automáticamente una
cuantificación relativa precisa de cada fracción individual de las hemoglobinas que presenta un interés particular, como la hemoglobina A2 para el
diagnóstico de las talasemias. Además, la buena separación de las diferentes fracciones permite detectar variantes de la hemoglobina, y en particular,
diferenciar la hemoglobina S de la hemoglobina D, y la hemoglobina E de la hemoglobina C.
La cuantificación de la hemoglobina A2 también se puede realizar en presencia de hemoglobina E.

Para uso en diagnóstico In Vitro.

PRINCIPIO DEL TEST

La hemoglobina es una molécula compleja compuesta por cuatro cadenas polipeptídicas, idénticas dos a dos, estando cada cadena ligada al hemo,
que es un núcleo tetrapirrólico (porfirina) ligado a un átomo de hierro. El hemo es común a todas las hemoglobinas. La parte proteica responsable del
tipo de hemoglobina se denomina globina. Se conocen principalmente las cadenas polipeptídicas α, ß, δ y γ. En humanos podemos encontrar las
hemoglobinas normales siguientes :
• Hemoglobina A ............................................ = α 2 ß 2
• Hemoglobina A2 .......................................... = α 2 δ 2
• Hemoglobina fetal F..................................... = α 2 γ 2
La cadena α es común a estas tres hemoglobinas.

La estructura espacial de la hemoglobina (como la de todas las proteínas) depende de la naturaleza y la secuencia de los aminoácidos que forman las
cadenas. Las uniones que se forman entre los diferentes aminoácidos son responsables de la forma de la molécula, de su estabilidad y de sus
propiedades. Situadas en un campo eléctrico, las hemoglobinas se desplazan en función de su carga, del tamaño de la molécula, de la fuerza iónica,
del pH del tampón y de la naturaleza del soporte empleado. Las variantes de la hemoglobina son debidas a mutaciones de algunos aminoácidos que
implican cargas de superficie diferentes en la hemoglobina y, por consiguiente, movilidades diferentes en la electroforesis.
Las anomalías de la hemoglobina son de dos tipos :
• anomalías cualitativas o estructurales, denominadas hemoglobinopatías ;
• anomalías cuantitativas o de regulación, denominadas talasemias.

La electroforesis de las hemoglobinas de la sangre humana es un análisis muy útil en el laboratorio de análisis clínicos para investigar las anomalías
cualitativas y cuantitativas de la hemoglobina. Paralelamente a las técnicas de electroforesis en diferentes soportes, entre los que está el gel de
agarosa, se ha desarrollado la técnica de electroforesis capilar, que ofrece las ventajas de una automatización completa del análisis, separaciones
rápidas y una resolución excelente. Se define como una técnica de separación electrocinética realizada en un tubo de diámetro interno inferior a 100 µm
lleno de un tampón compuesto por electrolitos. Se considera una tecnología intermedia entre la electroforesis de zona en soporte y la cromatografía
líquida.
El sistema MINICAP FLEX-PIERCING usa el principio de la electroforesis capilar en solución libre, que representa la forma más corriente de
electroforesis capilar. Permite la separación de moléculas cargadas en función de su movilidad electroforética propia en un tampón de pH dado, y,
según el pH del electrolito, de un flujo electroendosmótico más o menos importante. El sistema MINICAP FLEX-PIERCING posee 2 capilares en
paralelo, permitiendo realizar 2 análisis simultáneos. En este sistema, la inyección en los capilares de la muestra diluida con la solución hemolizante
se realiza en el ánodo por aspiración. La separación se realiza a continuación aplicando una diferencia de potencial de varios miles de voltios en los
extremos de cada capilar. La detección directa de las hemoglobinas se efectúa a 415 nm en el lado catódico. Los capilares se lavan antes de cada
análisis con una solución de lavado, y luego con el tampón de análisis. Con el tampón de pH alcalino usado, el orden de migración de las principales
hemoglobinas normales y anormales es el siguiente, del cátodo al ánodo : δA’2 (variante de A2), C, A2/O-Arab, E, S, D, G-Filadelfia, F, A, Hope, Bart,
J, N-Baltimore y H. Hay que tener en cuenta que la anhidrasa carbónica no se detecta en el perfil electroforético de las hemoglobinas en la
electroforesis capilar, lo que permite identificar algunas variantes de la hemoglobina A2 en su zona de migración.

REACTIVOS SUMINISTRADOS EN LOS KITS MINICAP HEMOGLOBIN(E)

ATENCIÓN : Ver las fichas de datos de seguridad.

COMPONENTES REF. N° 2207 REF. N° 2227*


Tampón (listo para usar) 2 viales de 250 mL 6 viales de 250 mL
Solución hemolizante (lista para usar) 1 vial de 225 mL 3 viales de 225 mL
Solución de lavado (solución concentrada) 1 vial de 25 mL 3 viales de 25 mL
Cubetas desechables 1 bolsa de 125 3 bolsas de 125
Filtros 3 filtros 3 filtros
Cajas para cubetas usadas 4 cajas 12 cajas
Etiquetas con código de barras para la solución
5 láminas de 4 etiquetas 15 láminas de 4 etiquetas
hemolizante
* MAXI-KIT MINICAP HEMOGLOBIN(E)

- 160 - INSTRUCCIONES SEBIA - Español


MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

Durante el transporte, el kit puede permanecer a temperatura ambiente (entre 15 y 30 °C) durante 15 días sin que la calidad del test se vea afectada.
PARA UNA GESTIÓN ÓPTIMA DE LA TRAZABILIDAD : Los elementos de un mismo kit deben ser usados conjuntamente.
PARA LA OBTENCIÓN DE LOS RESULTADOS ESPERADOS : Las instrucciones suministradas deben ser respetadas.

ATENCIÓN : No use agua destilada o desionizada comercial, como por ejemplo el agua para planchar (riesgo de deterioro importante de los
capilares). Use exclusivamente agua de calidad ultra pura, como el agua para inyección.

1. TAMPÓN
Preparación
El tampón está listo para usar. Contiene : tampón pH 9,4 ± 0,5 ; componentes inocuos a las concentraciones usadas, necesarios para un
funcionamiento óptimo.
Uso
Tampón para el análisis de las hemoglobinas mediante electroforesis capilar.
Conservación, estabilidad y señales de deterioro
El tampón debe conservarse en nevera (entre 2 y 8 °C). Es estable hasta la fecha de caducidad indicada en el kit o en la etiqueta del contenedor de
tampón. No conserve el tampón a temperatura ambiente, cerca de una ventana o de una fuente de calor.
NO CONGELAR.
IMPORTANTE : Después de conservarlo en nevera y antes de usarlo, es necesario atemperar el tampón, lo que requiere unas 3 horas si el contenedor
de tampón está lleno. Si esta indicación no se respeta, el funcionamiento de la técnica puede verse afectado.
ATENCIÓN : No caliente el tampón al baño maría.
Un contenedor de tampón empezado, instalado en el MINICAP FLEX-PIERCING, es estable un máximo de 1 mes (acumulativo) a temperatura
ambiente (de 15 a 30 °C). Después de cada uso, el tampón debe conservarse obligatoriamente en nevera a 2 – 8 °C lo antes posible, siendo entonces
estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del contenedor de tampón.
IMPORTANTE : El tiempo acumulado que el tampón pase a temperatura ambiente no debe exceder de 1 mes. Esta duración de conservación de 1 mes
tiene en cuenta la duración de la atemperación del tampón.
Deseche el tampón si cambia de aspecto o aparece turbidez debido a contaminación microbiana, a un precipitado o a partículas en suspensión.

2. SOLUCIÓN HEMOLIZANTE
Preparación
La solución hemolizante está lista para usar. Contiene : tampón pH 8,7 ± 0,5 ; componentes inocuos a las concentraciones usadas, necesarios para
un funcionamiento óptimo.
Uso
Para la dilución y la hemólisis de los glóbulos rojos.
Conservación, estabilidad y señales de deterioro
La solución hemolizante debe conservarse en nevera (entre 2 y 8 °C). Es estable hasta la fecha de caducidad indicada en el kit o en la etiqueta del
contenedor de solución hemolizante. No conserve la solución hemolizante a temperatura ambiente, cerca de una ventana o de una fuente de calor. NO
CONGELAR.
Deseche la solución hemolizante si cambia de aspecto o aparece turbidez debido a contaminación microbiana, a un precipitado o a partículas en
suspensión.
IMPORTANTE : Después de cada uso, cierre herméticamente el contenedor de solución hemolizante de inmediato y consérvelo en nevera.
NOTA : La solución hemolizante puede presentar una coloración amarillenta más o menos intensa sin que su funcionamiento se vea afectado.

3. SOLUCIÓN DE LAVADO
Preparación
El vial de solución de lavado concentrada debe completarse hasta 250 mL con agua destilada o desionizada.
Después de la dilución, la solución de lavado contiene una solución alcalina pH ≈ 12.
Uso
Para lavar los capilares antes de la separación electroforética de las hemoglobinas.
IMPORTANTE : Antes de llenar el contenedor de solución de lavado, se recomienda lavar con agua destilada o desionizada en abundancia el cuello
del contenedor, el conector y el tubo para evitar la acumulación de sales.
Conservación, estabilidad y señales de deterioro
Las soluciones de lavado concentrada y diluida deben conservarse a temperatura ambiente o en nevera en contenedores cerrados para evitar la
evaporación. La solución concentrada es estable hasta la fecha de caducidad indicada en el kit o en la etiqueta del vial de solución de lavado.
La solución diluida es estable durante 3 meses.
Deseche la solución de lavado diluida si cambia de aspecto o aparece turbidez debido a contaminación microbiana.

4. CUBETAS DE REACTIVO DESECHABLES


Uso
Cubetas de un solo uso para la preparación de las muestras biológicas que se van a analizar en el instrumento. Deben colocarse en el cargador del
MINICAP FLEX-PIERCING. Una cubeta de reactivo está destinada al análisis de 2 muestras.
ATENCIÓN : Después de usarlas, manipule con precaución las cubetas de reactivo que contengan muestras biológicas. Al acabar el
análisis, las cubetas de reactivo deben ser desechadas con los residuos biológicos y NUNCA deben ser reutilizadas.
Conservación
Antes de usarlas, las cubetas de reactivo deben conservarse en su embalaje cerrado herméticamente en un lugar limpio y seco, a una temperatura
comprendida entre 2 °C y 30 °C.

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5. FILTROS
Uso
Filtros de un solo uso para el filtrado del tampón, la solución de lavado reconstituida y el agua destilada o desionizada (usada para la limpieza de los
capilares).
IMPORTANTE: Cambie sistemáticamente los filtros al empezar un nuevo kit. Use guantes limpios para la manipulación y la colocación de los filtros.
Enrosque un filtro en el extremo del tubo que cuelga del tapón de los contenedores de tampón, de solución de lavado y de agua destilada o desionizada.
Al poner los filtros, lave los conectores y los tubos con agua destilada o desionizada.
Conservación
Antes de usarlos, los filtros deben conservarse en su embalaje original cerrado herméticamente en un lugar seco a temperatura ambiente o en nevera.

6. CAJAS PARA CUBETAS USADAS


Uso
Cajas destinadas a la recuperación automática de las cubetas de reactivo usadas en el MINICAP FLEX-PIERCING. Deben colocarse en el MINICAP
FLEX-PIERCING en el emplazamiento previsto a este efecto.
ATENCIÓN : Manipule con precaución las cajas que contengan cubetas de reactivo usadas, ya que pueden contener muestras biológicas.

7. ETIQUETAS CON CÓDIGO DE BARRAS PARA LA SOLUCIÓN HEMOLIZANTE


Uso
Etiquetas destinadas a identificar el tubo de solución hemolizante (HEMOGLOBIN(E) HEMOLYSING SOLUTION).

REACTIVOS NECESARIOS NO SUMINISTRADOS

ATENCIÓN : Ver las fichas de datos de seguridad.

1. CONTROL Hb A2 NORMAL
Composición
El Control Hb A2 Normal (SEBIA, referencia n° 4778) se obtiene a partir de una mezcla de sangres humanas normales. Un procedimiento de
estabilización permite conservar el Control Hb A2 Normal en forma liofilizada.
Aplicación
El Control Hb A2 Normal está destinado, antes de iniciar una nueva serie de análisis y después del análisis de un carrusel completo, al control de
migración, así como al control de calidad del método de determinación de la hemoglobina humana A2 mediante la técnica electroforética MINICAP
HEMOGLOBIN(E) en el sistema MINICAP FLEX-PIERCING.
Reconstituya cada vial liofilizado de Control Hb A2 Normal con el volumen de agua destilada o desionizada indicado en las instrucciones del Control
Hb A2 Normal. Deje reposar 30 minutos y agite suavemente (evite la formación de espuma).
NOTA : El volumen de reconstitución debe tener una precisión del ± 1,0 %.

Control de migración :
IMPORTANTE : Para un uso óptimo del Control Hb A2 Normal en el MINICAP FLEX-PIERCING, es indispensable usar un tubo específico previsto a
este efecto y su tapón correspondiente (ver "EQUIPAMIENTO Y ACCESORIOS NECESARIOS", Tubos y tapones para Controles) e identificar ese tubo
con una etiqueta con el código de barras del Control Hb A2 Normal.

El Control Hb A2 Normal debe ser usado de la forma siguiente :


- Dispense el Control Hb A2 Normal reconstituido en un tubo para control previsto a este efecto.
- Cierre el tubo con su tapón.
- Coloque el tubo (identificado con la etiqueta con el código de barras del Control Hb A2 Normal) en la posición 28 del carrusel del MINICAP FLEX-
PIERCING, prevista a este efecto (posición "Control" con aro de centrado).
- Dispense 5 mL de solución hemolizante MINICAP HEMOGLOBIN(E) en un tubo de hemólisis (identificado con la etiqueta con el código de barras
de la solución hemolizante) sin que se formen burbujas de aire y coloque este tubo en la posición 27 del carrusel (posición "Diluent / Solution" sin
aro de centrado) (en caso de ausencia del tubo o de la solución hemolizante aparecerá un mensaje de advertencia).
IMPORTANTE : Compruebe la ausencia de espuma en el tubo de solución hemolizante antes de colocarlo en el carrusel.
- Introduzca el carrusel en el MINICAP FLEX-PIERCING.
- Cierre las puertas del MINICAP FLEX-PIERCING, tras lo cual el análisis comenzará automáticamente.
- Seleccione en la ventana que aparecerá en pantalla el número de análisis del Control Hb A2 Normal que quiera realizar, según las indicaciones
siguientes, y valide :
- 1 análisis del Control Hb A2 Normal antes de iniciar una nueva serie de análisis,
- 2 análisis después de cada cambio del contenedor del tampón de análisis (incluso si el lote es el mismo) o de modo de trabajo, después de
un ciclo de limpieza con CAPICLEAN, después de una actualización del programa o después de una activación de los capilares,
- 3 análisis la primera vez que se use el programa de análisis "HEMOGLOBIN(E)" en el sistema automático para electroforesis MINICAP
FLEX-PIERCING o después de un paro prolongado (más de una semana).

Los resultados obtenidos son entonces tenidos en cuenta automáticamente por el programa para el análisis de los resultados.

IMPORTANTE : El pico de la hemoglobina A del Control Hb A2 Normal debe presentar una densidad óptica (DO) mínima de 0,10. Por debajo de este
valor, el centrado del perfil electroforético no puede realizarse correctamente. Durante el análisis de las muestras, la identificación de las fracciones de
la hemoglobina Hb A, Hb F, Hb A2 y Hb C, así como la determinación de la zona de migración del resto de variantes pueden ser entonces imposibles
o erróneas (ver el párrafo ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS).

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IMPORTANTE : Para un uso óptimo del Control Hb A2 Normal, es indispensable usar una etiqueta con código de barras, destinada a identificar el tubo
para control que contenga el Control Hb A2 (cierre el tubo con su tapón específico al usarlo).

NOTA : Después de instalar el instrumento automático MINICAP FLEX-PIERCING, al realizar la primera serie de análisis de sangres, aparecerá un
símbolo de alerta rojo en caso de ausencia de hemoglobina A en una de las muestras (que indica que no es posible centrar el perfil, ver el párrafo
"Análisis de los resultados").
Se aconseja entonces analizar una muestra que contenga hemoglobina A en el capilar afectado y volver a analizar la muestra sin hemoglobina A
colocándola en un capilar que ya haya detectado la presencia de hemoglobina A.

Control de calidad :
El Control Hb A2 Normal debe ser usado como una sangre humana normal. Después de la reconstitución, use directamente el Control Hb A2 Normal
como una muestra de sangre a analizar o como control de la migración (colocado en la posición 28 del carrusel, ver el párrafo anterior). Será tratado
automáticamente con la solución hemolizante.
Se recomienda incluir el Control Hb A2 Normal en cada serie de análisis. Los valores obtenidos deben estar comprendidos entre los valores específicos
de cada lote.

IMPORTANTE : Para un uso óptimo del Control Hb A2 Normal colocado en una posición cualquiera del carrusel (posiciones 1 a 26), es indispensable
usar una etiqueta con código de barras, destinada a identificar el tubo para control que contenga el Control Hb A2 (cierre el tubo con su tapón específico
al usarlo).

Conservación, estabilidad y señales de deterioro


Ver las instrucciones del Control Hb A2 Normal.

IMPORTANTE : Después de analizar el Control Hb A2 Normal en el MINICAP FLEX-PIERCING (como control de migración o como control de calidad),
debe conservarse en nevera (2 - 8 °C) ó a - 18 / - 30 °C lo antes posible, según las indicaciones de las instrucciones del Control Hb A2 Normal.

NOTA : Durante el transporte, el Control Hb A2 Normal liofilizado puede permanecer a temperatura ambiente (entre 15 y 30 °C) durante 15 días sin
que la calidad del test se vea afectada.

ATENCIÓN: Como ninguna prueba de análisis puede probar la ausencia de los virus VIH, virus de la hepatitis B, virus de la hepatitis C o de cualquier
otro agente infeccioso, el Control Hb A2 Normal debe ser manipulado con las precauciones habituales para evitar contaminarse.
Esta sangre de control, analizada usando técnicas autorizadas por una autoridad competente (FDA, ANSM…), es negativa :
- para la presencia del antígeno de superficie de la hepatitis B,
- para la presencia de anticuerpos anti-VHC,
- para la presencia de anticuerpos anti-VIH 1 y anti-VIH 2.

2. AGUA DESTILADA O DESIONIZADA


Uso
Para lavar los capilares del aparato automático para electroforesis capilar, MINICAP FLEX-PIERCING, SEBIA.
Se recomienda utilizar agua destilada o desionizada filtrada (con un filtro de porosidad ≤ 0,45 μm) con una conductividad inferior a 3 µS/cm, que
corresponde a una resistividad superior a 0,33 MΩ.cm.
Renueve el agua cada día para evitar contaminaciones microbianas.
Para un funcionamiento óptimo, se recomienda añadir CLEAN PROTECT (SEBIA, referencia n° 2059 : 1 vial de 5 mL) al agua destilada o desionizada
(ver las instrucciones del CLEAN PROTECT) o utilizar directamente la solución CAPIprotect* lista para usar (SEBIA, referencia n° 2061 :
2 contenedores de 5 L de agua destilada con CLEAN PROTECT).
IMPORTANTE: Antes de llenar el contenedor de agua, se recomienda lavarlo con agua destilada o desionizada.
* NOTA : La solución CAPIprotect también puede usarse para diluir la solución de lavado concentrada. En ese caso, la solución de lavado diluida
puede presentar una coloración amarilla transitoria más o menos pronunciada sin ningún efecto adverso en su funcionamiento.

3. CAPICLEAN MINICAP FLEX-PIERCING


Presentación
El vial de la solución enzimática concentrada CAPICLEAN (CAPICLEAN MINICAP FLEX-PIERCING, SEBIA, referencia n° 2251 : 1 vial de 25 mL)
contiene : enzimas proteolíticos, surfactantes y componentes inocuos a las concentraciones usadas, necesarios para un funcionamiento óptimo.
Uso
Para la limpieza de la cánula de muestras del aparato automático para electroforesis capilar, MINICAP FLEX-PIERCING, SEBIA, durante el ciclo de
limpieza CAPICLEAN.
IMPORTANTE : Realice un ciclo de limpieza con CAPICLEAN al menos una vez por semana y, como máximo, una vez al día, o cada 500 análisis
cuando se hayan realizado en menos de una semana.
Ver las instrucciones del CAPICLEAN MINICAP FLEX-PIERCING, SEBIA.
ATENCIÓN : No use un tubo tapado.
IMPORTANTE : Para un uso óptimo del CAPICLEAN en el MINICAP FLEX-PIERCING, es indispensable utilizar una etiqueta con código de barras,
destinada a identificar el tubo de 100 mm que contenga la solución CAPICLEAN diluida.
Conservación, estabilidad y señales de deterioro
CAPICLEAN debe conservarse en nevera (entre 2 y 8 °C). Es estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del vial. NO CONGELAR.
Pueden observarse un precipitado o partículas agregadas en suspensión (flóculos) en el vial del CAPICLEAN sin que su funcionamiento se vea
afectado.
No resuspenda el precipitado o las partículas. Se recomienda pipetear sólo el sobrenadante.
Para un uso diferido, coloque el tubo que contenga la solución diluida en nevera. Debe usarse durante el día.

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4. SOLUCIÓN DE HIPOCLORITO DE SODIO (para la limpieza de la cánula de muestras)


Preparación
Prepare una solución de hipoclorito de sodio (lejía) con 2 - 3 % de cloro a partir de una dosis concentrada de 250 mL con 9,6 % de cloro diluida hasta
1 litro (volumen final) con agua destilada o desionizada fría.
Uso
Para la limpieza de la cánula de muestras del aparato automático para electroforesis capilar, MINICAP FLEX-PIERCING, SEBIA (mantenimiento
semanal para eliminar cualquier proteína que se haya adsorbido a la cánula).
Ver el manual de instrucciones del MINICAP FLEX-PIERCING, SEBIA.
ATENCIÓN : No use un tubo tapado.
• Dispense 2 mL de solución de hipoclorito de sodio, preparada anteriormente, en un tubo de 100 mm.
• Ponga el tubo de 100 mm (identificado con una etiqueta con el código de barras específico de la solución de hipoclorito de sodio), en la primera
posición disponible del carrusel del MINICAP FLEX-PIERCING.
• Ponga una cubeta de reactivo nueva en el cargador del MINICAP FLEX-PIERCING previsto a tal efecto (en caso de ausencia de cubetas de reactivo
aparecerá un mensaje de advertencia).
• Introduzca el carrusel en el MINICAP FLEX-PIERCING.
• Cierre las puertas del MINICAP FLEX-PIERCING y el ciclo de limpieza comenzará automáticamente.
IMPORTANTE : Para un uso óptimo de la solución de hipoclorito de sodio en el MINICAP FLEX-PIERCING, es indispensable utilizar una etiqueta con
código de barras, destinada a identificar el tubo de 100 mm que contenga la solución.
Conservación, estabilidad y señales de deterioro
La solución de hipoclorito de sodio diluida puede conservarse 3 meses a temperatura ambiente en un recipiente de plástico cerrado herméticamente,
protegido de la luz solar y de cualquier fuente de calor o ignición, y alejado de ácidos y de amoniaco.

5. SOLUCIÓN DE LAVADO CAPILLARYS / MINICAP


Preparación
Cada vial de solución de lavado concentrada CAPILLARYS / MINICAP (SEBIA, referencia n° 2052 : 2 viales de 75 mL) debe completarse hasta 750 mL
con agua destilada o desionizada.
Después de la dilución, la solución de lavado contiene una solución alcalina pH ≈ 12.
Para el MINICAP FLEX-PIERCING, se recomienda diluir sólo 25 mL de la solución concentrada hasta 250 mL con agua destilada o desionizada.
Uso
Para lavar los capilares del MINICAP FLEX-PIERCING.
IMPORTANTE : Antes de llenar el contenedor de solución de lavado, se recomienda lavar con agua destilada o desionizada en abundancia el cuello
del contenedor, el conector y el tubo para evitar la acumulación de sales.
Conservación, estabilidad y señales de deterioro
Las soluciones de lavado concentrada y diluida deben conservarse a temperatura ambiente o en nevera en contenedores cerrados para evitar la
evaporación. La solución concentrada es estable hasta la fecha de caducidad indicada en el kit o en la etiqueta del vial.
La solución diluida es estable durante 3 meses.
Deseche la solución de lavado diluida si cambia de aspecto o aparece turbidez debido a contaminación microbiana.

6. SALINA
Preparación
Solución de NaCl 0,15 M (9 g/L) en agua destilada o desionizada.
Uso
Para lavar los glóbulos rojos antes de conservarlos a - 70 / - 80 °C, si es necesario.
Conservación, estabilidad y señales de deterioro
La solución salina puede conservarse a temperatura ambiente o en nevera.
Deseche la solución después de 3 meses o si cambia de aspecto o aparece turbidez debido a contaminación microbiana. Para una conservación
prolongada, añada 1 g/L de azida sódica.

NOTA :
Las pruebas realizadas durante la validación de los reactivos muestran que, para las diferentes soluciones y usando material adaptado al volumen a
reconstituir, una variación del volumen final de un ± 5 % no tiene ningún efecto adverso en el análisis.
El agua destilada o desionizada, utilizada para la reconstitución de las soluciones, debe estar exenta de colonias bacterianas y mohos (use un filtro
de porosidad ≤ 0,45 μm) y tener una conductividad inferior a 3 µS/cm, que corresponde a una resistividad superior a 0,33 MΩ.cm.

EQUIPAMIENTO Y ACCESORIOS NECESARIOS

1. Sistema de electroforesis capilar MINICAP FLEX-PIERCING SEBIA, referencia n° 1232.


2. Carrusel suministrado con el sistema MINICAP FLEX-PIERCING, equipado con aros de centrado MINICAP FLEX-PIERCING (específicos para la
técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E)) para tubos con un diámetro de 13 mm.
3. Aros de centrado MINICAP FLEX-PIERCING para tubos con un diámetro de 11 mm (por 27), SEBIA, referencia n° 1612.
4. Contenedores de plástico suministrados con el sistema MINICAP FLEX-PIERCING : contenedor para la limpieza de los capilares (debe llenarse
con agua destilada o desionizada) y contenedor de desechos.

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5. Tubos de extracción de 13 mm de diámetro con los tapones correspondientes (altura máxima del tubo tapado : 100 mm, diámetro máximo del
tapón : 17 mm) : por ejemplo, tubos de 13 x 75 mm, BD Vacutainer, Terumo Venosafe 5 mL, Greiner Bio-one Vacuette 1, 2, 3 ó 4 mL ó Sarstedt
S-Monovette 4 mL,
ó
tubos de extracción de 11 mm de diámetro con los tapones correspondientes (altura máxima del tubo tapado : 100 mm, diámetro máximo del tapón :
17 mm) : por ejemplo, tubos de 11 x 66 mm, Sarstedt S-Monovette 2,7 mL ó Kabe Labortechnik Primavette S 2,6 mL,
o cualquier tubo de extracción de dimensiones equivalentes homologado para realizar análisis clínicos.
6. Tubos y tapones para Controles, SEBIA, referencia n° 9205 : 500 tubos cónicos y tapones para el uso de sangres control y de sangres particulares
en el sistema MINICAP FLEX-PIERCING.
7. Tubos de hemólisis (diámetro de 8 a 16 mm y altura de 50 a 100 mm).
8. Etiquetas con el código de barras "LOW VOLUME" SEBIA (por 20), referencia n° 9204, destinadas a identificar las muestras de volumen inferior a
1 mL.
9. Etiquetas de códigos de barras "LOW VOLUME AUTOMÁTICO" SEBIA (20 unidades), referencia n° 9208, destinadas a identificar las muestras de
volumen inferior a 1 mL para un análisis con "dilución automática" (VS ≥ 8.61).
10. Etiquetas de códigos de barras "LOW VOLUME MANUAL" SEBIA (20 unidades), referencia n° 9209, destinadas a identificar las muestras de
volumen inferior a 1 mL para un análisis con "dilución manual" (VS ≥ 8.61).
11. Cubetas de reactivo desechables MINICAP / 125 (3), SEBIA, referencia n° 2281.
12. Tapas para las cajas de cubetas de reactivo MINICAP usadas (por 12), SEBIA, referencia n° 2286 : tapas destinadas a cerrar las cajas para cubetas
usadas.
13. Filtro de la bomba MINICAP FLEX-PIERCING (por 2), SEBIA, referencia n° 1620.

MUESTRAS PARA EL ANÁLISIS

Extracción y conservación de las muestras


El análisis se realiza con muestras frescas de sangre total recogidas con anticoagulante que contenga EDTAK2 ó EDTAK3. No use anticoagulantes que
contengan yodoacetato. Las sangres deben ser obtenidas según los métodos establecidos de uso en el laboratorio clínico.
Las sangres pueden conservarse un máximo de siete días en nevera (entre 2 y 8 °C).
NOTA : No conserve las sangres a temperatura ambiente.

Las hemoglobinas (Hb) de las muestras conservadas en nevera se degradan progresivamente.


En una muestra conservada más de 7 días en nevera :
• como consecuencia de la degradación de la muestra, aparece una fracción débil, correspondiente a la metahemoglobina, en la zona de migración
de la Hb S,
• en presencia de Hb C, aparece una fracción correspondiente a la Hb C degradada en posición anódica respecto a la Hb A2, pero sin ninguna
interferencia con ésta (zona Z(E), ver la tabla del párrafo "Interpretación"),
• en presencia de Hb O-Arab, aparece una fracción correspondiente a la Hb O-Arab degradada en la zona de migración de la Hb S (zona Z(S), ver la
tabla del párrafo "Interpretación"),
• en presencia de Hb E, aparece una fracción correspondiente a la Hb E degradada en la zona Z(D) (ver la tabla del párrafo "Interpretación"),
• en presencia de Hb S, aparece una fracción correspondiente a la Hb S degradada en la zona de migración de la Hb F (zona Z(F), ver la tabla del
párrafo "Interpretación"),
• en presencia de Hb A, aparece una fracción correspondiente a la Hb A degradada en posición anódica respecto a la Hb A (zona Z11, ver la tabla del
párrafo "Interpretación").
• en presencia de Hb F (en el caso de sangres de recién nacidos), aparece una fracción en la zona de migración de la Hb A (zona Z(A), ver la tabla
del párrafo "Interpretación") como consecuencia de la degradación de la muestra.
Si la muestra se ha conservado más de 10 días en nevera, se observa la presencia de aglomerados viscosos en los glóbulos rojos : es indispensable
eliminarlos antes de realizar el análisis.

Para conservaciones prolongadas, congele rápidamente a - 70 / - 80 °C (como máximo durante las 8 horas siguientes a su obtención) las muestras de
sangre total sin preparación previa o los glóbulos rojos lavados.
Las sangres y los glóbulos rojos congelados a - 70 / - 80 °C son estables un máximo de 3 meses.
IMPORTANTE : Para una conservación óptima de las muestras, no las conserve a - 20 °C sino a - 80 °C (ver BIBLIOGRAFÍA : J Bardakdjian-Michau
et al, 2003).

Preparación de los glóbulos rojos para su conservación a - 70 / - 80 °C :


Lave los glóbulos rojos según el procedimiento siguiente : Centrifugue la sangre total para obtener un coágulo de glóbulos rojos; deseche el plasma ;
lave 2 veces los glóbulos rojos con 10 volúmenes de salina (centrifugue después de cada lavado) y elimine el exceso de salina de la superficie del
coágulo globular lavado; agite en el vortex antes de congelarlo.

Preparación de las muestras


• Use directamente las muestras de sangre total.
• Compruebe que todos los tubos contengan al menos 1 mL de sangre y que estén bien tapados.
• Agite en el vórtex durante 5 segundos las sangres que hayan sido conservadas en nevera (2 - 8 °C) durante 1 semana o conservadas a
- 70 / - 80 °C.
ATENCIÓN : Los tubos deben estar tapados con sus tapones correspondientes adaptados a la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E) en el
MINICAP FLEX-PIERCING (ver EQUIPAMIENTO Y ACCESORIOS NECESARIOS).

Casos especiales (VS < 8.61) :


IMPORTANTE : Las muestras cuya preparación es descrita a continuación deben estar identificadas con una etiqueta con el código de barras "LOW
VOLUME" ; esta etiqueta provoca la aparición de un mensaje en la pantalla que permite al usuario seleccionar el modo de dilución manual o automático,
según el caso, durante una cuenta atrás de 30 segundos. Estas muestras deben colocarse en el carrusel al principio de la serie de análisis ; no serán
analizadas si su modo de dilución no es seleccionado.

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MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

Análisis de muestras sin Hb A ó Hb A2 (estas muestras pueden ser cuantificadas pero no caracterizadas mediante las zonas de identificación) :
Para identificar las fracciones de la hemoglobina presentes en una muestra sin hemoglobina A o hemoglobina A2, se recomienda preparar la muestra
según el método siguiente :
- Agite en el vortex el tubo de sangre total durante 5 segundos.
- En un tubo cónico para control (identificado con una etiqueta con el código de barras "LOW VOLUME"), mezcle un volumen (100 µL) de la sangre
total a analizar y un volumen (100 µL) del Control Hb A2 Normal y tape el tubo.
- Agite en el vortex durante 5 segundos.
- Coloque el tubo en el carrusel del MINICAP FLEX-PIERCING al principio de una serie de análisis e introduzca el carrusel en el aparato para realizar
el análisis lo antes posible.
- Cierre las puertas del MINICAP FLEX-PIERCING.
- Seleccione en la ventana que aparecerá en pantalla "LOW VOLUME" con "dilución automática" y valide.
Los resultados obtenidos son entonces tenidos en cuenta automáticamente por el programa para el análisis de los resultados.

IMPORTANTE : En una muestra sin Hb A ó Hb A2 preparada según este método, la cuantificación de las fracciones indicada en el perfil electroforético
no tiene ningún significado y los valores obtenidos no deben ser tenidos en cuenta ; este procedimiento sólo permite la identificación de la o las
variantes de la hemoglobina presentes en la muestra mediante las zonas de identificación, gracias a que migrarán en la zona correcta.
La cuantificación de las fracciones se obtiene en este caso analizando la muestra inicial no mezclada (antes de diluirla con la sangre control).

Análisis de las muestras conservadas a - 70 / - 80 °C :


Sangre total :
Agite en el vórtex durante 5 segundos el tubo de sangre total descongelado y realice el análisis siguiendo el procedimiento habitual.

Glóbulos rojos :
Para analizar una muestra de glóbulos rojos que hayan sido conservados a - 70 / - 80 °C, prepárela según el procedimiento siguiente :
- Agite en el vortex el tubo de glóbulos rojos descongelados durante 5 segundos.
- En un tubo cónico para control (identificado con una etiqueta con el código de barras "LOW VOLUME"), mezcle un volumen (50 µL) de glóbulos rojos
y 8 volúmenes (400 µL) de solución hemolizante MINICAP HEMOGLOBIN(E) y tape el tubo.
- Agite en el vortex durante 5 segundos.
- Ponga el tubo en un carrusel del MINICAP FLEX-PIERCING al principio de una serie de análisis e introduzca el carrusel en el aparato para realizar
el análisis lo antes posible.
- Cierre las puertas del MINICAP FLEX-PIERCING.
- Seleccione en la ventana que aparecerá en pantalla "LOW VOLUME" con "dilución manual" y valide.
Los resultados obtenidos son entonces tenidos en cuenta automáticamente por el programa para el análisis de los resultados.

Análisis de muestras cuyo volumen es inferior a 1 mL :


- Agite en el vortex el tubo de sangre total durante 5 segundos y prepare la muestra, en función de su volumen, según uno de los protocolos
siguientes :

1. Volumen de muestra comprendido entre 200 µL y 1 mL :


- Dispense un mínimo de 200 µL de sangre total a analizar en un tubo cónico para control (identificado con una etiqueta con el código de barras
"LOW VOLUME") y tape el tubo.
- Ponga el tubo en un carrusel del MINICAP FLEX-PIERCING al principio de una serie de análisis e introduzca el carrusel en el aparato para realizar
el análisis lo antes posible.
- Cierre las puertas del MINICAP FLEX-PIERCING.
- Seleccione en la ventana que aparecerá en pantalla "LOW VOLUME" con "dilución automática" y valide.

2. Volumen de muestra inferior a 200 µL :


- Dispense 50 µL de sangre total a analizar en un tubo cónico para control (identificado con una etiqueta con el código de barras "LOW VOLUME")
y 250 µL de solución hemolizante MINICAP HEMOGLOBIN(E) y tape el tubo.
- Agite en el vortex durante 5 segundos.
- Ponga el tubo en un carrusel del MINICAP FLEX-PIERCING al principio de una serie de análisis e introduzca el carrusel en el aparato para realizar
el análisis lo antes posible.
- Cierre las puertas del MINICAP FLEX-PIERCING.
- Seleccione en la ventana que aparecerá en pantalla "LOW VOLUME" con "dilución manual " y valide.

Los resultados obtenidos son entonces tenidos en cuenta automáticamente por el programa para el análisis de los resultados.

NOTAS : El volumen mínimo de muestra a analizar en un tubo cónico es de 200 µL. En ausencia de código de barras en el tubo cónico, la muestra no
es identificada y el tipo de dilución (automática o manual) no puede ser seleccionado.

Casos especiales (VS ≥ 8.61) :


IMPORTANTE : Las muestras cuya preparación es descrita a continuación deben ser identificadas con una etiqueta con el código de barras "LOW
VOLUME AUTO" ó "LOW VOLUME MANUAL" ; estas etiquetas permiten al instrumento aplicar respectivamente el modo de dilución automático o
manual, según el método de preparación de la muestra. Estas muestras deben colocarse en el carrusel al principio de la serie de análisis con el código
de barras de cada tubo orientado hacia la ventana de lectura. En ausencia del código de barras el análisis puede verse afectado.

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MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

Análisis de muestras sin Hb A ó Hb A2 (estas muestras pueden ser cuantificadas pero no caracterizadas mediante las zonas de identificación) :
Para identificar las fracciones de la hemoglobina presentes en una muestra sin hemoglobina A ó hemoglobina A2, se recomienda preparar la muestra
según el método siguiente :
- Agite en el vórtex el tubo de sangre total durante 5 segundos.
- En un tubo cónico para control (identificado con una etiqueta con el código de barras "LOW VOLUME AUTO"), mezcle un volumen (100 µL) de sangre
total a analizar y un volumen (100 µL) de Control Hb A2 Normal y tape el tubo.
- Agite en el vórtex durante 5 segundos.
- Coloque el tubo en el carrusel del MINICAP FLEX-PIERCING al principio de una serie de análisis e introduzca el carrusel en el aparato para realizar
el análisis lo antes posible.
- Cierre las puertas del MINICAP FLEX-PIERCING, el análisis comenzará automáticamente.
Los resultados obtenidos son entonces tenidos en cuenta automáticamente por el programa para el análisis de los datos.

IMPORTANTE : En una muestra sin Hb A ó Hb A2 preparada según este método, la cuantificación de las fracciones indicada en el perfil electroforético
no tiene ningún significado y los valores obtenidos no deben ser tenidos en cuenta ; este procedimiento sólo permite la identificación de la o las
variantes de la hemoglobina presentes en la muestra mediante las zonas de identificación, gracias a que migrarán en la zona correcta.
La cuantificación de las fracciones se obtiene en este caso en el análisis de la muestra nativa (antes de diluirla con la sangre control).

Análisis de muestras conservadas a - 70 / - 80 °C :


Sangre total :
Agite en el vórtex el tubo de sangre total descongelada durante 5 segundos y realice el análisis según el procedimiento habitual.

Glóbulos rojos :
Para analizar una muestra de glóbulos rojos conservados a - 70 / - 80 °C, prepárela según el método siguiente :
- Agite en el vórtex el tubo de glóbulos rojos descongelados durante 5 segundos.
- En un tubo cónico para control (identificado con una etiqueta con el código de barras "LOW VOLUME MANUAL"), mezcle un volumen (50 µL) de
glóbulos rojos y 8 volúmenes (400 µL) de solución hemolizante MINICAP HEMOGLOBIN(E) y tape el tubo.
- Agite en el vórtex durante 5 segundos.
- Ponga el tubo en un carrusel del MINICAP FLEX-PIERCING al principio de una serie de análisis e introduzca el carrusel en el aparato para realizar
el análisis lo antes posible.
- Cierre las puertas del MINICAP FLEX-PIERCING, el análisis comenzará automáticamente.
Los resultados obtenidos son entonces tenidos en cuenta automáticamente por el programa para el análisis de los datos.

Análisis de muestras cuyo volumen es inferior a 1 mL :


Agite en el vórtex el tubo de sangre total durante 5 segundos y prepare la muestra, en función de su volumen, según uno de los protocolos siguientes :

1. Volumen de muestra comprendido entre 200 µL y 1 mL :


- Dispense un mínimo de 200 µL de sangre total a analizar en un tubo cónico para control (identificado con una etiqueta con el código de barras
"LOW VOLUME AUTO") y tape el tubo.
- Ponga el tubo en un carrusel del MINICAP FLEX-PIERCING al principio de una serie de análisis e introduzca el carrusel en el aparato para
realizar el análisis lo antes posible.
- Cierre las puertas del MINICAP FLEX-PIERCING, el análisis comenzará automáticamente.

2. Volumen de muestra inferior a 200 µL :


- Dispense 50 µL de sangre total a analizar en un tubo cónico para control (identificado con una etiqueta con el código de barras "LOW VOLUME
MANUAL") y 250 µL de solución hemolizante MINICAP HEMOGLOBIN(E) y tape el tubo.
- Agite en el vórtex durante 5 segundos.
- Ponga el tubo en un carrusel del MINICAP FLEX-PIERCING al principio de una serie de análisis e introduzca el carrusel en el aparato para
realizar el análisis lo antes posible.
- Cierre las puertas del MINICAP FLEX-PIERCING, el análisis comenzará automáticamente.

Los resultados obtenidos son entonces tenidos en cuenta automáticamente por el programa para el análisis de los datos.

NOTAS : El volumen mínimo de muestra a analizar en un tubo cónico es de 200 µL. En ausencia de código de barras en el tubo cónico, la muestra no
es identificada y el tipo de dilución (automática o manual según el método de preparación de la muestra) no puede ser aplicado.

Muestras a descartar
• No use muestras en las que haya comenzado la coagulación.
• No use muestras de sangre antiguas o mal conservadas, ya que la hemólisis automática de las muestras puede ser perturbada por la presencia de
aglomerados viscosos entre los glóbulos rojos ; el perfil electroforético también puede ser afectado por los productos de degradación de las
hemoglobinas (o por artefactos).
En estos 2 casos, la presencia de aglomerados de glóbulos rojos puede impedir la toma de la muestra.
• No use directamente un tubo que contenga menos de 1 mL de muestra de sangre a analizar, ya que el análisis puede verse afectado (ver casos
especiales).

NOTA : Los tubos de extracción y los parámetros de centrifugación de muestras biológicas están descritos en la documentación disponible sobre la
fase preanalítica de los análisis clínicos (datos suministrados por los fabricantes de tubos, guías y recomendaciones sobre la obtención de muestras
biológicas…). En ausencia de indicaciones en las instrucciones sobre el tipo de tubo a usar o sobre la centrifugación, consulte esta documentación,
y para las dimensiones del tubo a utilizar, consulte el documento de SEBIA "Características de los tubos a usar según el instrumento". La fase
preanalítica debe realizarse con la tecnología más avanzada y siguiendo las diferentes recomendaciones, incluyendo las suministradas por los
fabricantes de tubos, cumpliendo la reglamentación aplicable.

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MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

PROCEDIMIENTO

El MINICAP FLEX-PIERCING es un instrumento multiparamétrico automático que permite realizar el análisis de las hemoglobinas en 2 capilares en
paralelo según las etapas siguientes :
• lectura de los códigos de barras del carrusel y de los tubos primarios (hasta 26) ;
• agitación de las muestras antes del análisis ;
• hemólisis y dilución de las muestras en las cubetas de reactivo a partir de los tubos primarios ;
• lavado de los capilares ;
• inyección de las muestras hemolizadas ;
• separación y detección directa de las hemoglobinas en los capilares.

Las etapas manuales son las siguientes :


• colocación de los tubos primarios (tapados) en el carrusel, en las posiciones 1 a 26 ;
• colocación del tubo de solución hemolizante destapado en la posición 27 del carrusel ;
• colocación del Control Hb A2 Normal en la posición 28 del carrusel ;
• introducción del carrusel cargado en el MINICAP FLEX-PIERCING ;
• recuperación de los tubos después del análisis ;
• recuperación y cierre de las cajas para cubetas usadas.

LEA DETENIDAMENTE EL MANUAL DE INSTRUCCIONES DEL MINICAP FLEX-PIERCING.

I. PREPARACIÓN DEL ANÁLISIS ELECTROFORÉTICO


1. Encienda el MINICAP FLEX-PIERCING y el ordenador de control.
2. Para la inicialización del aparato, coloque al menos una cubeta de reactivo nueva en el cargador del MINICAP FLEX-PIERCING previsto a tal
efecto (en caso de ausencia de cubetas de reactivo aparecerá un mensaje de advertencia).
3. Abra el programa de gestión PHORESIS y valide el nivel de los reactivos y desechos, tras lo cual el aparato se iniciará automáticamente.
4. Use el kit MINICAP HEMOGLOBIN(E) con el programa de análisis "HEMOGLOBIN(E)". Para seleccionar el programa de análisis
"HEMOGLOBIN(E)" y conectar el contenedor de tampón MINICAP HEMOGLOBIN(E) en la posición "B2" del aparato, lea detenidamente el
manual de instrucciones del MINICAP FLEX-PIERCING y siga las instrucciones que aparecerán en pantalla.
5. Ponga cubetas de reactivo nuevas en el cargador del MINICAP FLEX-PIERCING correspondiente (en caso de ausencia de cubetas de reactivo
aparecerá un mensaje de advertencia).
6. Ponga una caja para cubetas usadas en el MINICAP FLEX-PIERCING en el lugar previsto a este efecto.
7. Compruebe el nivel de llenado de los diferentes contenedores de reactivo, complete los volúmenes si es necesario, y vacíe el contenedor de
desechos. En la ventana "Verificar el nivel de los contenedores", actualice los niveles de los reactivos mediante los cursores. Cambie, si es
necesario, el filtro situado en la salida del bloque de lavado.
8. El carrusel tiene 28 posiciones para tubos :
• Ponga hasta 26 tubos primarios de sangre total tapados en el carrusel, que debe estar equipado con los aros de centrado específicos
(posiciones 1 a 26), de forma que el código de barras de cada tubo quede orientado hacia la ventana de lectura.
• Dispense la solución hemolizante MINICAP HEMOGLOBIN(E) en un tubo de hemólisis destapado, identificado con la etiqueta con el código
de barras de la solución hemolizante, sin que se formen burbujas de aire, a razón de 2 mL para el análisis de 1 ó 2 muestras, ó de 5 mL para
el análisis de 12 muestras. Ponga ese tubo en la posición 27, sin aro de centrado, del carrusel del aparato automático (posición "Diluent /
Solution").
NOTA : 5 mL de solución hemolizante dispensados en un tubo de 13 x 75 mm permiten realizar 12 análisis ; 10 mL de solución hemolizante
en un tubo de 16 x 100 mm permiten realizar 24 análisis.
IMPORTANTE : Compruebe que no haya espuma en el tubo de solución hemolizante antes de colocarlo en el carrusel.
• Ponga el Control Hb A2 Normal en la posición 28 del carrusel (posición "Control") y seleccione el número de análisis a realizar según las
indicaciones del párrafo anterior "Control Hb A2 Normal", sección "Control de migración".
IMPORTANTE : En caso de ausencia de tubos en las posiciones n° 1 (muestra), 27 (solución hemolizante) y 28 (sangre control), el análisis no
puede comenzar y aparece un mensaje de advertencia.
NOTA : Al usar una sangre control, es indispensable usar la etiqueta con el código de barras específico prevista a este efecto.
9. Introduzca el carrusel en el MINICAP FLEX-PIERCING.
10. Cierre las puertas del MINICAP FLEX-PIERCING, tras lo cual el análisis comenzará automáticamente.
11. Después del análisis, saque el carrusel para extraer los tubos ya analizados.
12. Si es necesario, quite con precaución la caja que contiene las cubetas de reactivo usadas, ciérrela herméticamente usando una de las tapas
suministradas y deséchela.
ATENCIÓN : Manipule con precaución las cajas que contengan las cubetas de reactivo usadas, ya que pueden contener muestras
biológicas.

DILUCIÓN - MIGRACIÓN - DESCRIPCIÓN DE LAS ETAPAS AUTOMÁTICAS


1. Lectura de los códigos de barras del carrusel y de los tubos primarios de muestra.
2. Agitación de los tubos.
3. Dilución de las sangres con la solución hemolizante, con limpieza de la cánula de muestras entre cada dilución.
4. Lavado de los capilares.
5. Inyección de las muestras diluidas en los capilares.
6. Migración a voltaje constante con temperatura regulada por efecto Peltier, durante unos 8 minutos.
7. Lectura a 415 nm y aparición simultánea del perfil de las hemoglobinas en la pantalla del ordenador.

NOTA : Estas etapas se realizan consecutivamente para los 2 primeros tubos analizados : los perfiles correspondientes a los tubos analizados se
obtienen al cabo de unos 20 minutos. Para los tubos siguientes, las fases 1, 2 y 3 (lectura de los códigos de barras, agitación y hemólisis de las sangres)
se realizan durante el análisis (migración) de los 2 tubos anteriores.

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MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

II. ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS


Al final del análisis, se realiza automáticamente la cuantificación relativa de las fracciones y los perfiles pueden ser interpretados. Los picos de
hemoglobina A (Hb A), F (Hb F), A2 (Hb A2) y C (Hb C) son identificados de forma automática y el pico de Hb A es situado en el centro de la ventana
de edición de las curvas. Los perfiles electroforéticos son analizados visualmente para detectar las anomalías.
Los perfiles electroforéticos son de color :
- Cian cuando el número de fracciones / picos es el configurado por defecto para la técnica (2 fracciones en la técnica HEMOGLOBIN(E), por ejemplo),
- Magenta cuando el número de fracciones / picos no es el configurado por defecto para la técnica.
En la técnica HEMOGLOBIN(E), el pico de Hb F es naranja (identificado como «HbF o variante») cuando la edad del paciente es desconocida, y azul
(identificado como «HbF») cuando la edad del paciente es conocida y la fracción / pico es inferior al 2 %.
Las posiciones potenciales de las diferentes variantes de la hemoglobina (identificadas por las zonas Z1 a Z15) se muestran en la ventana de edición
y aparecen en el informe de resultados. La tabla del párrafo "Interpretación" presenta las variantes conocidas que pueden estar presentes en cada
zona.
Cuando el programa detecta una fracción de la hemoglobina en una zona dada, el título de esa zona es enmarcado.

Los perfiles son centrados automáticamente respecto al pico de Hb A para facilitar su interpretación :
- en caso de ausencia de detección de los picos de Hb A y / o Hb A2 en un perfil, aparece un símbolo amarillo de alerta, y el centrado del perfil se
realiza entonces respecto a la posición del pico de Hb A de los dos últimos perfiles obtenidos anteriormente en el mismo capilar, y ningún pico es
identificado (excepto en caso de detección de Hb C, en el que los picos de Hb A2 y de Hb C son identificados) ;
- en caso de presencia de Hb F en un perfil, sin detección de Hb A, el símbolo amarillo de alerta no aparece, y el centrado del perfil se realiza entonces
respecto a la posición del pico de Hb F y los picos de Hb F y / o Hb A y / o Hb A2 son identificados ;
- en caso de imposibilidad de centrado del perfil, aparece un símbolo rojo de alerta y los picos de Hb F y Hb A2 no son identificados (en este caso,
contacte con el Servicio de Asistencia Técnica de SEBIA) ;
- en caso de densidad óptica insuficiente en un perfil electroforético del control de migración (obtenido con el Control Hb A2 Normal identificado con
su etiqueta con código de barras y analizado en la posición 28 del carrusel), aparece un mensaje de advertencia que permite usar o descartar este
análisis para la determinación de la posición del pico de Hb A. Después aparece un símbolo violeta de alerta en la ventana de edición y los picos de
Hb A y Hb A2 no son identificados.
En todos estos casos, las diferentes zonas de migración (Z1 a Z15) no aparecen ni en la ventana de edición ni en el informe de resultados.
En el perfil electroforético, las curvas de las fracciones de las hemoglobinas A2 y C son calculadas y redibujadas (o ajustadas) y se superponen a la
curva nativa. Esta representación permite cuantificar la fracción Hb A2 en presencia de Hb C.
ATENCIÓN : En algunos casos de hemoglobina C (homocigoto) o debido a un problema técnico, las fracciones Hb A2 y Hb C no son
ajustadas, lo que implica una infravaloración de estas fracciones. En este caso, se recomienda cuantificar la fracción Hb A2 con otra técnica.

LEA DETENIDAMENTE EL MANUAL DE INSTRUCCIONES DEL MINICAP FLEX-PIERCING.

III. FIN DE LA SECUENCIA DE ANÁLISIS


El usuario debe realizar el procedimiento de extinción al final de la sesión de trabajo para conservar los capilares en condiciones óptimas.
IMPORTANTE : Ponga una cubeta de reactivo nueva en el cargador del MINICAP FLEX-PIERCING correspondiente (en caso de ausencia de cubeta
aparecerá un mensaje de advertencia).

IV. LLENADO DE LOS CONTENEDORES DE REACTIVO


El sistema automático MINICAP FLEX-PIERCING permite una gestión automática de los reactivos.
IMPORTANTE :
- Es necesario seguir el procedimiento previsto para el cambio de los contenedores y respetar el código de colores contenedor – conector en cada
cambio de reactivos.
- Cambie el filtro situado en la salida de la estación de lavado cada 500 análisis usando un filtro de bomba MINICAP FLEX-PIERCING (ver el párrafo
"EQUIPAMIENTO Y ACCESORIOS NECESARIOS").

La aparición de la ventana de gestión de los reactivos indica que es necesario cambiar uno o varios reactivos :
• colocar un nuevo contenedor de tampón de análisis y / o,
• llenar el contenedor de lavado con la solución de lavado reconstituida y / o,
• llenar el contenedor de limpieza con agua destilada o desionizada filtrada y / o,
• vaciar el contenedor de desechos y / o,
• cambiar el filtro situado en la salida de la estación de lavado.

ATENCIÓN : No use agua destilada comercial, como por ejemplo el agua para planchar (riesgo de deterioro importante de los capilares). Use
exclusivamente agua de calidad ultra pura, como el agua para inyección.

IMPORTANTE : Se recomienda lavar con agua destilada o desionizada en abundancia el contenedor de limpieza antes de llenarlo.

LEA DETENIDAMENTE EL MANUAL DE INSTRUCCIONES DEL MINICAP FLEX-PIERCING.

CONTROL DE CALIDAD
Después de cada cambio de lote del tampón de análisis o de modo de trabajo, o después de un ciclo de limpieza de los capilares con CAPICLEAN, y
antes de iniciar una nueva serie de análisis, es necesario realizar al menos una serie de análisis con el Control Hb A2 Normal, SEBIA, referencia
n° 4778 (ver el capítulo REACTIVOS NECESARIOS NO SUMINISTRADOS).
También se recomienda incluir una sangre control en cada serie de análisis (por ejemplo, una muestra de control que contenga las hemoglobinas A, F,
S y C, como el Control Hb AFSC, SEBIA, referencia n° 4792, o una sangre normal, el Control Hb A2 Normal, SEBIA, referencia n° 4778, o el Control
Hb A2 Patológico, SEBIA, referencia n° 4779).

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MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

RESULTADOS

Valores
La detección directa en el capilar a 415 nm permite definir las concentraciones relativas (porcentajes) de cada fracción.
Los valores normales de cada fracción de hemoglobina en el sistema MINICAP FLEX-PIERCING han sido establecidos a partir de una población de
113 adultos (hombres y mujeres) en buen estado de salud, cuyos valores de hemoglobina (medidos por HPLC) son normales :

Hemoglobina A : comprendida entre 96,8 y 97,8 %


Hemoglobina F : < 0,5 % (*)
Hemoglobina A2 : comprendida entre 2,2 y 3,2 %

(*) Ver Interferencias y limitaciones

Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios valores normales.

NOTA : Los valores normales han sido obtenidos con los parámetros de integración por defecto del programa PHORESIS (alisado 0 e integración
automática de las fracciones de la hemoglobina con la técnica HEMOGLOBIN(E)).

ATENCIÓN : Los valores normales (valores de referencia) sólo deben ser tenidos en cuenta en ausencia de variantes de la hemoglobina.

Interpretación
Ver PERFILES ELECTROFORFÉTICOS, figuras 1 – 15.

Las diferentes zonas de migración de las variantes (identificadas como Z1 a Z15) aparecen en la ventana de edición de las curvas y en el informe de
resultados. Al pasar el cursor del ratón sobre el nombre de una zona aparece una burbuja informativa que indica las variantes posibles de la
hemoglobina que migran en esa zona.
Para cada fracción, la posición del máximo (la parte superior del pico) define la zona de migración.
Ver la tabla que muestra las variantes potenciales presentes en cada zona.

1. Anomalías cualitativas : Hemoglobinopatías


La mayoría son anomalías estructurales, debidas a una sustitución por mutación de un aminoácido por otro en una de las cadenas. Las consecuencias
de la mutación varían en función de la posición del aminoácido mutado y del que le remplaza, siendo particularmente necesaria la integridad de algunas
partes de la molécula para que sea viable y funcione correctamente.
Se han definido y descrito más de 1400 variantes de la hemoglobina adulta. Las primeras hemoglobinas anormales estudiadas, y las más numerosas,
son debidas a una modificación de la carga eléctrica global de la molécula, lo que permite detectarlas claramente por electroforesis.
Cinco hemoglobinas anormales principales presentan un interés particular desde un punto de vista antropológico y médico : S, C, E, O-Arab y D.
El kit MINICAP HEMOGLOBIN(E) está destinado a la detección de las hemoglobinopatías y las talasemias.

Hemoglobina S
Es la anomalía más frecuente, y es debida a una sustitución por mutación de un ácido glutámico de la cadena ß (aminoácido ácido n° 6) por una valina
(aminoácido neutro) : presenta pues un punto isoeléctrico aumentado respecto a la hemoglobina A. Su carga negativa global está por tanto disminuida
en el pH de análisis : esta hemoglobina migra en posición catódica respecto a la hemoglobina A. En la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E), en tampón
alcalino, la hemoglobina S migra entre las fracciones A y A2, aproximadamente a 1/3 de la distancia A - A2, desde la A2.

Hemoglobina C
La mutación es debida a la sustitución de un ácido glutámico de la cadena ß por una lisina (aminoácido alcalino n° 6) : presenta pues un punto
isoeléctrico aumentado respecto a la hemoglobina A. Su carga negativa global está por tanto disminuida en el pH de análisis : esta hemoglobina migra
más rápidamente que las hemoglobinas A y A2, de la que está parcialmente separada, lo que mejora netamente el diagnóstico médico.
Además, las hemoglobinas C, E y O-Arab no se superponen en el perfil electroforético y pueden por tanto ser distinguidas fácilmente.

Hemoglobina E
Un ácido glutámico de la cadena ß (n° 26) está sustituido por una lisina En la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E), la hemoglobina E migra justo
después de la hemoglobina A2, de la que está totalmente separada. En presencia de hemoglobina E, la fracción A2 puede por tanto ser cuantificada
para detectar una ß talasemia.

Hemoglobina O-Arab
Un ácido glutámico de la cadena ß (n° 121) está sustituido por una lisina. En la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E), la hemoglobina O-Arab migra con
la fracción A2. En este caso, la cuantificación de la hemoglobina A2 es imposible. Cuando esta fracción es superior al 9 %, puede sospecharse la
presencia de la hemoglobina O-Arab. Esta última no puede ser confundida con las hemoglobinas C y E, ya que éstas están separadas de la fracción A2.

Hemoglobina D (-Los Angeles)


Un ácido glutámico de la cadena ß (n° 121) está sustituido por una glutamina. En la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E), la hemoglobina D
(denominada D-Punjab, D-Los Angeles, D-Chicago ó D-Portugal) migra en posición anódica respecto a la hemoglobina S, lo que permite distinguirla
de ésta.

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MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

2. Anomalías cuantitativas : Talasemias


Constituyen un grupo bastante heterogéneo de afecciones genéticas caracterizadas por la reducción de la tasa de síntesis de una o varias cadenas
de la hemoglobina. El mecanismo de esta reducción a escala molecular todavía no es bien conocido.
Existen diferentes síndromes talasémicos :

Alfa talasemias
Se caracterizan por la disminución de la síntesis de las cadenas α, afectando por consiguiente la síntesis de las 3 hemoglobinas fisiológicas. El exceso
de síntesis de las cadenas ß y γ respecto a las cadenas α provoca la formación de tetrámeros sin cadena α :
• Hemoglobina Bart = γ 4,
• Hemoglobina H = ß 4.
La hemoglobina H posee un punto isoeléctrico relativamente bajo. En la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E), migra en una posición mucho más
anódica que la hemoglobina A (y puede estar presente en forma de una o varias fracciones).

Beta talasemias
Se caracterizan por la disminución de la síntesis de las cadenas ß. Sólo se ve afectada la síntesis de la hemoglobina A.
Los porcentajes de las hemoglobinas F y A2 están por tanto aumentados respecto a la hemoglobina A. En la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E), los
valores de las diferentes hemoglobinas normales obtenidos permiten detectar los casos de beta-talasemias.

3. Notas
• En caso de ausencia de la hemoglobina A, se puede observar una fracción débil en la zona de migración de esta última. Se trata de una hemoglobina
F acetilada que representa de un 15 a un 25 % de la hemoglobina F. El sistema MINICAP FLEX-PIERCING está programado para evitar confundir
esta fracción acetilada con la hemoglobina A.
• Puede sospecharse la presencia de una variante de la hemoglobina A2 si se observa una fracción que presenta un porcentaje bajo (de 0,5 a 3 %)
en una zona de migración comprendida entre la hemoglobina F y la hemoglobina δA’2 (variante de la A2), incluso dentro de las zonas habituales de
migración de las hemoglobinas. Los porcentajes de la hemoglobina A2 normal y de la variante son casi idénticos en caso de un paciente heterocigoto.
• En caso de presencia de una variante de la hemoglobina A2 (δA’2 o cualquier otra variante de la A2), se recomienda sumar el porcentaje de esta
variante al de la hemoglobina A2 para un mejor diagnóstico de las beta-talasemias.
• Algunas variantes de la hemoglobina (Hb Camperdown y Hb Okayama, por ejemplo) migran muy cerca de la Hb A y pueden ser confundidas con
esta última.
• Algunas variantes de la hemoglobina (Hb Porto-Alegre y Hb S degradada) migran muy cerca de la Hb F y pueden ser confundidas con esta última.
• Las fracciones débiles que migran en la zona Z12 son a veces mal integradas (Hb Bart demasiado asimétricas, por ejemplo). Es necesario entonces
suprimir la integración automática e integrarlas manualmente.
• En la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E), en los pacientes diabéticos con HbA1c elevada (superior al 10 %), puede observarse una fracción débil
y eventualmente identificada en la posición Z10.
• Al analizar sangres de recién nacidos, las muestras que contengan Hb F en concentración elevada pueden presentar una fracción Hb A alterada,
especialmente a causa de la migración de Hb F degradada en esa zona. El porcentaje de Hb A indicado por el programa puede estar entonces
sobreestimado. Además, en caso de presencia de variantes de la hemoglobina (> 4 % ; S, C, E ó D-Punjab por ejemplo) en una sangre que contenga
una concentración elevada de Hb F (> 60 %), es necesario realizar análisis complementarios para confirmar la presencia de Hb A.
• En los recién nacidos hasta la edad de 6 - 9 meses, se recomienda analizar varias muestras (por ejemplo, obtenidas mensualmente) para controlar
la concentración de Hb F. Esto permitirá comprobar la disminución de Hb F y la eventual presencia de una variante. En caso de duda, se aconseja
confirmar el resultado con una técnica complementaria y realizar un análisis a los padres.
• Al analizar sangres de pacientes con drepanocitosis (anemia falciforme) antes de una transfusión, puede observarse una variación del porcentaje de
la fracción Hb S en los análisis de un mismo paciente debido a la falta de homogeneidad de este tipo de muestra. Se recomienda homogenizar bien
este tipo de muestra de sangre antes de analizarla.
• En caso de una sangre con un porcentaje bajo de Hb A (< 10 %) y elevado de Hb S (por ejemplo, sangre de un paciente con drepanocitosis que ha
recibido una transfusión, o de un paciente S beta-talasémico), la fracción Hb S puede aparecer desplazada de la zona Z(S) hacia la zona Z(D). En
este caso, mezcle la muestra con el Control Hb A2 Normal según el procedimiento indicado en el párrafo "MUESTRAS PARA EL ANÁLISIS", en la
parte "Casos especiales", para comprobar si la variante se posiciona en la zona de migración Z(S). Es indispensable confrontar este resultado con
el análisis hematológico y realizar análisis complementarios para confirmar la presencia de Hb S.

• Casos en los que la hemoglobina F (Hb F) puede estar aumentada (excepto en los recién nacidos) :
- en caso de embarazo ;
- pacientes con drepanocitosis con más de 2 años de edad, tratados con Hydrea® (hidroxicarbamida) y / o transfusionados y / o que presenten
naturalmente una cantidad incrementada de Hb F debido a un fenómeno de compensación ;
- pacientes con más de 2 años de edad con el desorden PHHF (persistencia hereditaria de Hb F : hay entre un 20 y un 40 % de Hb F en los
heterocigotos) ;
- pacientes con más de 2 años de edad que presenten leucemia (de cualquier tipo), anemia hemolítica hereditaria, diabetes, enfermedad tiroidea,
hiperactividad de la médula ósea, mieloma múltiple, o un cáncer en fase de metástasis.
Si desea obtener más información, visite la página web: http://www.answers.com/topic/fetal-hemoglobin-test

Interferencias y limitaciones
• Ver MUESTRAS PARA EL ANÁLISIS.
• Analice únicamente muestras contenidas en los tubos de extracción recomendados en el párrafo "EQUIPAMIENTO Y ACCESORIOS NECESARIOS"
o en cualquier tubo de dimensiones equivalentes homologado para realizar análisis clínicos. Contacte con el Servicio de Asistencia Técnica de SEBIA
para obtener información relativa a estos dispositivos.
• No use directamente muestras cuyo volumen sea inferior a 1 mL.
• No use muestras de sangre antiguas o mal conservadas, ya que la presencia de hemoglobinas degradadas puede observarse en el perfil
electroforético en forma de artefactos más o menos numerosos después de 7 días de conservación.
• Si las muestras se han conservado más de 10 días, se observa la presencia de aglomerados viscosos en los glóbulos rojos : es indispensable
eliminarlos antes de realizar el análisis.

- 171 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

• Cuando se detecte la presencia de una hemoglobina anormal, se recomienda usar otras técnicas de identificación (por ejemplo, electroforesis de las
cadenas de globina) o consultar a un laboratorio especializado para un tipado preciso de la variante.
IMPORTANTE : Es indispensable realizar el análisis hematológico como resultado complementario.
• La migración de una variante de la hemoglobina con una movilidad muy cercana a la fracción Hb A implica una subestimación de la fracción Hb A y
de la variante, por lo que se produce una sobrestimación de la fracción Hb A2. Para obtener una cuantificación correcta de la fracción Hb A2, es
necesario eliminar la integración de los picos de la variante y de la Hb A, para integrar conjuntamente esos 2 picos a continuación.
• Las muestras de algunos pacientes con una hemoglobina S homocigota y tratados con Hydrea® (hidroxicarbamida) pueden presentar una
hemoglobina F cuya síntesis ha sido inducida por el tratamiento. En la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E), no se han observado diferencias netas
de movilidad entre esta hemoglobina F inducida y la hemoglobina F nativa.
• Teniendo en cuenta los principios analíticos de las técnicas actuales (principios de la electroforesis de zona, resolución), no hay garantías en cuanto
a la detección total de todas las variantes de la hemoglobina.
• En el caso de pacientes que presenten una hiperleucocitosis, la velocidad de migración de las muestras puede estar acelerada, causando un
desplazamiento de los perfiles que puede provocar una ausencia de reconocimiento de las zonas.

Caso de variantes de la hemoglobina observadas en las técnicas Hb A1c y / o HEMOGLOBIN(E) :


Debido a la diferente composición de los tampones Hb A1c y HEMOGLOBIN(E), la movilidad electroforética de algunas variantes de la hemoglobina
puede ser diferente.

El estudio de los interferentes comúnmente encontrados en el análisis de las fracciones de la hemoglobina (triglicéridos y bilirrubina) con la técnica
MINICAP HEMOGLOBIN(E) realizada en el MINICAP FLEX-PIERCING ha sido realizado usando las recomendaciones EP7-A2 "Interference Testing
in Clinical Chemistry" del Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI - USA).
Los resultados se presentan a continuación :
- La presencia en la muestra de sangre de concentraciones elevadas de triglicéridos (hasta 15,57 g/L) no interfiere en el análisis de las hemoglobinas
en la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E) realizada en el MINICAP FLEX-PIERCING.
- La presencia en la muestra de sangre de concentraciones elevadas de bilirrubina (hasta 277 mg/L, es decir 473 µM) no interfiere en el análisis de
las hemoglobinas en la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E) realizada en el MINICAP FLEX-PIERCING.

Asistencia técnica
Contacte con el Servicio de Asistencia Técnica de SEBIA en caso de que el análisis sea defectuoso.
Las fichas de datos de seguridad de los diferentes reactivos del kit, así como la información relativa a la limpieza y eliminación de los desechos, a las
reglas de etiquetado y seguridad aplicadas por SEBIA, al embalaje para el transporte de muestras biológicas y a la descontaminación de los
instrumentos están disponibles en el espacio Clientes de la página web de SEBIA : www.sebia.com.

CARACTERÍSTICAS TÉCNICAS

Reproducibilidad
El estudio de la reproducibilidad de la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E) en el sistema MINICAP FLEX-PIERCING ha sido realizado siguiendo las
recomendaciones EP5-A2 "Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurements Methods" del Clinical Laboratory Standards Institute
(CLSI - USA).
Las medias, desviaciones típicas (SD) y coeficientes de variación (CV %) (n = 80) de los porcentajes de las fracciones de la hemoglobina de cada
muestra han sido calculados usando las herramientas estadísticas recomendadas por el CLSI.
Los resultados siguientes indican una muy buena reproducibilidad de la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E) realizada en el sistema MINICAP
FLEX-PIERCING para el análisis cuantitativo de las fracciones de la hemoglobina. Además, los perfiles electroforéticos han sido interpretados
cualitativamente a simple vista.
Los porcentajes de las diferentes fracciones han sido obtenidos con los parámetros de integración por defecto del programa PHORESIS (alisado 0 e
integración automática de las fracciones de la hemoglobina con la técnica HEMOGLOBIN(E)).

Reproducibilidad inter-capilares en el mismo aparato


Se han analizado siete (7) muestras de sangre diferentes con la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E) en los 2 capilares de un mismo MINICAP
FLEX-PIERCING, con el mismo lote del kit MINICAP HEMOGLOBIN(E) (sangres n° 1 y 5 normales, sangre nº 2 con Hb A2 disminuida, sangres n° 3
y 6 con Hb A2 aumentada, sangre patológica n° 4 con Hb F y S y sangre patológica n° 7 con Hb A, A2, F, S y C). En este estudio, cada sangre ha sido
analizada en los 2 capilares del mismo aparato, a razón de 40 secuencias de análisis durante 20 días (en 2 momentos diferentes del día). En cada
secuencia, el análisis de las muestras se ha hecho por duplicado.
Los resultados obtenidos para los porcentajes de las fracciones Hb A, Hb A2, Hb F, Hb S y Hb C se presentan en las tablas siguientes.

Sangre Sangre Sangre Sangre Sangre Sangre Sangre


No. 1 No. 2 No. 3 No. 4 No. 5 No. 6 No. 7
Media Hb A % 97,6 98,3 95,4 46,5 97,2 93,3 45,7
Reproducibilidad intra-secuencia (CV %) 0,0 0,1 0,1 0,2 0,0 0,1 0,5
Reproducibilidad inter-secuencias (CV %) 0,0 0,0 0,0 0,1 0,0 0,0 0,1
Reproducibilidad inter-días (CV %) 0,0 0,0 0,0 0,1 0,0 0,0 0,1
Total (CV %) 0,0 0,1 0,1 0,3 0,1 0,1 0,5

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MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

Sangre Sangre Sangre Sangre Sangre Sangre Sangre


No. 1 No. 2 No. 3 No. 4 No. 5 No. 6 No. 7
Media Hb A2 % 2,4 1,8 4,6 2,8 2,8 6,7 2,8
Reproducibilidad intra-secuencia (CV %) 1,8 3,1 1,1 1,8 1,7 1,0 4,0
Reproducibilidad inter-secuencias (CV %) 0,0 0,0 0,0 0,0 0,7 0,2 0,0
Reproducibilidad inter-días (CV %) 0,0 0,7 0,5 0,3 0,0 0,0 1,6
Total (CV %) 1,8 3,1 1,2 1,8 1,8 1,1 4,3

Sangre Sangre Sangre Sangre Sangre Sangre Sangre


No. 1 No. 2 No. 3 No. 4 No. 5 No. 6 No. 7
Media Hb F % / / / 13,0 / / 25,6
Reproducibilidad intra-secuencia (CV %) / / / 0,8 / / 0,4
Reproducibilidad inter-secuencias (CV %) / / / 0,0 / / 0,0
Reproducibilidad inter-días (CV %) / / / 0,3 / / 0,1
Total (CV %) / / / 0,9 / / 0,4

Sangre Sangre Sangre Sangre Sangre Sangre Sangre


No. 1 No. 2 No. 3 No. 4 No. 5 No. 6 No. 7
Media Hb S % / / / 37,7 / / 18,9
Reproducibilidad intra-secuencia (CV %) / / / 0,4 / / 0,7
Reproducibilidad inter-secuencias (CV %) / / / 0,0 / / 0,0
Reproducibilidad inter-días (CV %) / / / 0,2 / / 0,2
Total (CV %) / / / 0,5 / / 0,8

Sangre Sangre Sangre Sangre Sangre Sangre Sangre


No. 1 No. 2 No. 3 No. 4 No. 5 No. 6 No. 7
Media Hb C % / / / / / / 7,1
Reproducibilidad intra-secuencia (CV %) / / / / / / 1,5
Reproducibilidad inter-secuencias (CV %) / / / / / / 0,0
Reproducibilidad inter-días (CV %) / / / / / / 0,5
Total (CV %) / / / / / / 1,6

NOTA : No se ha detectado ninguna discordancia en ninguna de las muestras :


- Muestras con valor normal de Hb A2 : todos los valores son normales ;
- Muestra con valor bajo de Hb A2 : todos los valores son bajos ;
- Muestras con valores altos de Hb A2 : todos los valores son altos ;
- Muestras con hemoglobinas anormales : se han detectado todas las hemoglobinas anormales.

Linealidad
El estudio de la linealidad de la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E) realizada en el MINICAP FLEX-PIERCING ha sido realizado siguiendo las
recomendaciones EP6-A "Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A statistical Approach" del Clinical Laboratory Standards
Institute (CLSI - USA).
Los porcentajes (%) de las diferentes fracciones de la hemoglobina han sido analizados usando las herramientas estadísticas recomendadas por el
CLSI.

Linealidad de la Hb A2
El análisis de una mezcla en proporciones variables de dos muestras de sangre diferentes (una sangre enriquecida en Hb A2 con 13,4 g/dL de
hemoglobina total con un 12,2 % de Hb A2, y una sangre en la que se ha extraído la Hb A2 con 12,8 g/dL de hemoglobina total y un 0,0 % de Hb A2),
ha mostrado que el porcentaje de cada fracción de la hemoglobina estudiada (Hb A y Hb A2) está perfectamente correlacionado con la proporción de
cada una de las fracciones en la mezcla, y que toda variación es detectada de forma lineal con la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E).
La técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E) realizada en el sistema MINICAP FLEX-PIERCING es perfectamente lineal en la gama de concentraciones de
la Hb A2 estudiadas hasta un máximo del orden de 1,6 g/dL (entre 0,0 y 12,2 % de Hb A2).
Además, el análisis de una muestra de sangre con 17,9 g/dL de hemoglobina total con un 97,6 % de Hb A y un 2,4 % de Hb A2, concentrada y diluida
serialmente con la solución hemolizante MINICAP HEMOGLOBIN(E), ha mostrado que la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E) es perfectamente lineal
en la gama de concentraciones estudiadas, entre 1,79 y 45,90 g/dL de hemoglobina total, y que los porcentajes de las fracciones de la hemoglobina
Hb A y Hb A2 son independientes de la concentración de hemoglobina total de la muestra.

Linealidad de la Hb F
El análisis de una mezcla en proporciones variables de dos muestras de sangre diferentes (una sangre de cordón umbilical con 15,8 g/dL de
hemoglobina total y un 82,2 % de Hb F, y una sangre normal con 11,6 g/dL de hemoglobina total y 0,0 % de Hb F) ha mostrado que el porcentaje de
cada fracción de la hemoglobina estudiada (Hb A y Hb F) está perfectamente correlacionado con la proporción de cada una de las fracciones en la
mezcla, y que toda variación es detectada de forma lineal con la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E).

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MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

La técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E) realizada en el sistema MINICAP FLEX-PIERCING es perfectamente lineal en la gama de concentraciones de
la Hb F estudiadas hasta un máximo del orden de 13,0 g/dL (entre 0,0 y 82,2 % de Hb F).
Además, el análisis de una muestra de sangre de cordón umbilical con 17,9 g/dL de hemoglobina total y 14,7 % de Hb A y 85,3 % de Hb F, concentrada
y diluida serialmente con la solución hemolizante MINICAP HEMOGLOBIN(E), ha mostrado que la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E) es
perfectamente lineal en la gama de concentraciones estudiadas, entre 1,79 y 28,87 g/dL de hemoglobina total, y que los porcentajes de las fracciones
de la hemoglobina Hb A y Hb F son independientes de la concentración de hemoglobina total de la muestra.

Linealidad de la Hb S
El análisis de una mezcla en proporciones variables de dos muestras de sangre diferentes (una sangre patológica con 9,1 g/dL de hemoglobina total
y 86,2 % de Hb S y 0,0 % de Hb A, y una sangre normal con 13,5 g/dL de hemoglobina total, 0,0 % de Hb S y 97,4 % de Hb A) ha mostrado que el
porcentaje de cada fracción de la hemoglobina estudiada (Hb A y Hb S) está perfectamente correlacionado con la proporción de cada una de las
fracciones en la mezcla, y que toda variación es detectada de forma lineal con la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E).
La técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E) realizada en el sistema MINICAP FLEX-PIERCING es perfectamente lineal en la gama de concentraciones de
Hb S estudiadas hasta un máximo del orden de 7,8 g/dL (entre 0,0 y 86,2 % de Hb S), y en el caso de la Hb A es lineal hasta un máximo del orden de
13,1 g/dL (entre 0,0 y 97,4 % de Hb A).
Además, el análisis de una muestra de sangre patológica con 9,2 g/dL de hemoglobina total y un 79,1 % de Hb S, concentrada y diluida serialmente
con la solución hemolizante MINICAP HEMOGLOBIN(E), ha mostrado que la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E) es perfectamente lineal en la gama
de concentraciones estudiadas entre 0,92 y 31,72 g/dL de hemoglobina total, y que los porcentajes de la fracción Hb S son independientes de la
concentración de hemoglobina total de la muestra.

Exactitud – Validación interna


El estudio de correlación interno de la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E) en el sistema MINICAP FLEX-PIERCING ha sido realizado siguiendo las
recomendaciones EP09-A2 "Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline – Second Edition (Interim Revision)"
del Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI - USA).
Los porcentajes (%) de las diferentes fracciones de la hemoglobina han sido analizados usando las herramientas estadísticas recomendadas por el
CLSI.

NOTA : Las muestras de sangre usadas en el estudio de correlación interno presentado a continuación han sido suministradas por 17 laboratorios
situados en Francia, USA y Asia.
Todas las muestras han sido analizadas en paralelo con las 2 técnicas de análisis y siguiendo las mismas recomendaciones.

Ciento dieciséis (116) muestras de sangre, entre las que hay 54 muestras patológicas que presentan diferentes variantes de la hemoglobina, como las
hemoglobinas S, C, D y E, han sido analizadas en paralelo con la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E) en el sistema MINICAP FLEX-PIERCING y con
una técnica comercial de análisis de la hemoglobina mediante electroforesis capilar.
La correlación entre estas dos técnicas respecto al porcentaje de las fracciones Hb A, Hb A2, Hb F, Hb S, Hb C y Hb E ha sido determinada usando
herramientas estadísticas : media y coeficiente de regresión lineal. Los parámetros de correlación de Hb A, Hb A2, Hb F, Hb S, Hb C y Hb E entre estas
2 técnicas de análisis (y = técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E) en el MINICAP FLEX-PIERCING) se muestran en la tabla siguiente :

Límites de los valores de %


Número de Coeficiente de Punto
Fracción Hb Pendiente MINICAP HEMOGLOBIN(E) en el
muestras correlación de corte en y
MINICAP FLEX-PIERCING
Hb A 110 1,000 1,175 0,990 12,1 – 98,6
Hb A2 115 0,997 - 0,030 0,980 0,2 – 6,6
Hb F 43 1,000 - 0,013 1,000 0,3 – 80,0
Hb S 27 1,000 - 0,486 0,996 7,8 – 90,8
Hb C 6 1,000 - 0,204 0,979 6,9 – 36,6
Hb E 6 0,991 - 0,408 0,981 21,7 – 25,7

Los resultados obtenidos han mostrado una correlación perfecta entre las dos técnicas de análisis con, para la cuantificación de la hemoglobina A2 de
las muestras que no presentan variantes de la hemoglobina, una sensibilidad del 100,0 % y una especificidad del 92,5 % respecto a la técnica de
referencia, calculadas según el método recomendado (Wendling, 1986).
Además, los resultados han mostrado una correlación perfecta entre las 2 técnicas de análisis con, para la detección de hemoglobinas anormales, una
sensibilidad del 100,0 % y una especificidad del 100,0 % respecto a la técnica de referencia, calculadas según el método recomendado (Wendling,
1986). En efecto, todas las hemoglobinas anormales (S, C, D, E y otras variantes), así como los valores anormales de hemoglobinas normales, han
sido detectadas con la técnica MINICAP HEMOGLOBIN(E) realizada en el MINICAP FLEX-PIERCING coincidiendo con la técnica comparada de
electroforesis capilar. No se ha detectado ninguna discordancia entre las técnicas sea cual sea la muestra, como la presencia de falsos positivos
(detección de una Hb anormal inexistente o de una Hb con valor normal detectada con un valor anormal).

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MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

BIBLIOGRAPHIE / BIBLIOGRAPHY

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3, 116 - 122.

- 746 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

TABLEAU / TABLE

VARIANTS POTENTIELS PRÉSENTS DANS CHAQUE ZONE - POTENTIAL VARIANTS LOCATED IN EACH ZONE

Zone Hémoglobines / Hemoglobins (Hb)

Hb Santa Ana (pic mineur), Hb Mizuho (pic mineur), Hb delta A'2, Hb S-Oman, Hb T-Cambodia, Hb Poissy (pic mineur), variant de
Hb A2 "Savaria", variant de Hb A2 "Chad", variant de Hb A2 "Arya", variant de Hb A2 "Hasharon", variant de Hb A2 "Fort de France",
variant de Hb A2 "Ottawa", variant de Hb A2 "Shimonoseki", variant de Hb A2 "Russ" (alpha 1), variant de Hb A2 "Matsue-Oki", variant
de Hb A2 "Reims", variant de Hb A2 "Mizushi", variant de Hb A2 "Stanleyville-II", variant de Hb A2 "O-Indonesia", variant de Hb A2
"San Antonio", variant de Hb A2 "G-Audhali", variant de Hb A2 "Handsworth", variant de Hb A2 "G-Philadelphia", variant de Hb A2
"Memphis", variant de Hb A2 "Q-Iran", variant de Hb A2 "G-Waimanalo", variant de Hb A2 "Russ" (alpha 2), variant de Hb A2 "Ube-4",
variant de Hb A2 "Q-India", variant de Hb A2 "Watts", variant de Hb A2 "Spanish Town", variant de Hb A2 "Montgomery", variant de
Hb A2 "G-Norfolk" (alpha 1), variant de Hb A2 "Inkster", variant de Hb A2 "G-Pest", variant de Hb A2 "Winnipeg", variant de Hb A2
"Queens", variant de Hb A2 "Etobicoke", variant de Hb A2 "Chapel Hill", variant de Hb A2 "Park Ridge", variant de Hb A2 "Q-Thailand",
variant de Hb A2 "Delfzicht"
Z1
Hb Santa Ana (minor peak), Hb Mizuho (minor peak), Hb delta A'2, Hb S-Oman, Hb T-Cambodia, Hb Poissy (minor peak), "Savaria"
Hb A2 variant, "Chad" Hb A2 variant, "Arya" Hb A2 variant, "Hasharon" Hb A2 variant, "Fort de France" Hb A2 variant, "Ottawa" Hb A2
variant, "Shimonoseki" Hb A2 variant, "Russ" Hb A2 variant (alpha 1), "Matsue-Oki" Hb A2 variant, "Reims" Hb A2 variant, "Mizushi" Hb
A2 variant, "Stanleyville-II" Hb A2 variant, "O-Indonesia" Hb A2 variant, "San Antonio" Hb A2 variant, "G-Audhali" Hb A2 variant,
"Handsworth" Hb A2 variant, "G-Philadelphia" Hb A2 variant, "Memphis" Hb A2 variant, "Q-Iran" Hb A2 variant, "G-Waimanalo" Hb A2
variant, "Russ" Hb A2 variant (alpha 2), "Ube-4" Hb A2 variant, "Q-India" Hb A2 variant, "Watts" Hb A2 variant, "Spanish Town" Hb A2
variant, "Montgomery" Hb A2 variant, "G-Norfolk" Hb A2 variant (alpha 1), "Inkster" Hb A2 variant, "G-Pest" Hb A2 variant, "Winnipeg"
Hb A2 variant, "Queens" Hb A2 variant, "Etobicoke" Hb A2 variant, "Chapel Hill" Hb A2 variant, "Park Ridge" Hb A2 variant,
"Q-Thailand" Hb A2 variant, "Delfzicht" Hb A2 variant

Hb C-Ziguinchor, Hb F-Hull, Hb F-Texas-I, Hb Constant Spring, Hb C, Hb C-Harlem (C-Georgetown), variant de Hb A2 "Les Lilas",
variant de Hb A2 "Boumerdes", variant de Hb A2 "Dunn", variant de Hb A2 "Bassett", variant de Hb A2 "Tarrant", variant de Hb A2
"Sassari", variant de Hb A2 "St. Luke's", variant de Hb A2 "Verdun", variant de Hb A2 "Manitoba-I", variant de Hb A2 "Setif", variant de
Hb A2 "Sunshine Seth", variant de Hb A2 "Titusville", variant de Hb A2 "Swan River", variant de Hb A2 "Manitoba-II", variant de Hb A2
Z(C) "Val de Marne"

Hb C-Ziguinchor, Hb F-Hull, Hb F-Texas-I, Hb Constant Spring, Hb C, Hb C-Harlem (C-Georgetown), "Les Lilas" Hb A2 variant,
"Boumerdes" Hb A2 variant, "Dunn" Hb A2 variant, "Bassett" Hb A2 variant, "Tarrant" Hb A2 variant, "Sassari" Hb A2 variant, "St.
Luke's" Hb A2 variant, "Verdun" Hb A2 variant, "Manitoba-I" Hb A2 variant, "Setif" Hb A2 variant, "Sunshine Seth" Hb A2 variant,
"Titusville" Hb A2 variant, "Swan River" Hb A2 variant, "Manitoba-II" Hb A2 variant, "Val de Marne" Hb A2 variant

Hb A2, Hb Chad (E-Keelung), Hb Hong Kong (cas anti-Lepore), Hb O-Tibesti, Hb O-Arab, Hb E-Saskatoon, variant de Hb A2
"Charolles", variant de Hb A2 "Roubaix", variant de Hb A2 "Dallas" *, variant de Hb A2 "Aztec" *, variant de Hb A2 "Boghé" *, variant
de Hb A2 "Bonn" *, variant de Hb A2 "Brugg" *, variant de Hb A2 "Buffalo" *, variant de Hb A2 "Chicago" *, variant de Hb A2 "Columbia
Missouri" *, variant de Hb A2 "Conakry" *, variant de Hb A2 "Fontainebleau" *, variant de Hb A2 "Frankfurt" *, variant de Hb A2
"Godavari" *, variant de Hb A2 "Gouda" *, variant de Hb A2 "Groene Hart" *, variant de Hb A2 "Hekinan" *, variant de Hb A2 "Kosovo"*,
variant de Hb A2 "Le Lamentin" *, variant de Hb A2 "Le Lamentin 2" *, variant de Hb A2 "Lisbon" *, variant de Hb A2 "Lyon-Bron" *,
variant de Hb A2 "M-Boston" *, variant de Hb A2 "Milledgeville" *, variant de Hb A2 "Mosella" *, variant de Hb A2 "Noko" *, variant de
Hb A2 "Owari" *, variant de Hb A2 "Ozieri" *, variant de Hb A2 "Riccarton" *, variant de Hb A2 "Rouen" *, variant de Hb A2 "Saclay" *,
variant de Hb A2 "Taybe" *, variant de Hb A2 "Toulon" *, variant de Hb A2 "Twin Peaks" *, variant de Hb A2 "Verona" *, variant de
Hb A2 "Westmead" *, variant de Hb A2 "Zoetermeer" *, variant de Hb A2 "Melusine" *, variant de Hb A2 "Jura", variant de Hb A2
"Nouakchott"
Z(A2)
Hb A2, Hb Chad (E-Keelung), Hb Hong Kong (anti-Lepore case), Hb O-Tibesti, Hb O-Arab, Hb E-Saskatoon, "Charolles" Hb A2
variant, "Roubaix" Hb A2 variant, "Dallas" Hb A2 variant *, "Aztec" Hb A2 variant *, "Boghé" Hb A2 variant *, "Bonn" Hb A2 variant *,
"Brugg" Hb A2 variant *, "Buffalo" Hb A2 variant *, "Chicago" Hb A2 variant *, "Columbia Missouri" Hb A2 variant *, "Conakry" Hb A2
variant *, "Fontainebleau" Hb A2 variant *, "Frankfurt" Hb A2 variant *, "Godavari" Hb A2 variant *, "Gouda" Hb A2 variant *, "Groene
Hart" Hb A2 variant *, "Hekinan" Hb A2 variant *, "Kosovo" Hb A2 variant *, "Le Lamentin" Hb A2 variant *, "Le Lamentin 2" Hb A2
variant *, "Lisbon" Hb A2 variant *, "Lyon-Bron" Hb A2 variant *, "M-Boston" Hb A2 variant *, "Milledgeville" Hb A2 variant *, "Mosella"
Hb A2 variant *, "Noko" Hb A2 variant *, "Owari" Hb A2 variant *, "Ozieri" Hb A2 variant *, "Riccarton" Hb A2 variant *, "Rouen" Hb A2
variant *, "Saclay" Hb A2 variant *, "Taybe" Hb A2 variant *, "Toulon" Hb A2 variant *, "Twin Peaks" Hb A2 variant *, "Verona" Hb A2
variant *, "Westmead" Hb A2 variant *, "Zoetermeer" Hb A2 variant *, "Melusine" Hb A2 variant *, "Jura" Hb A2 variant, "Nouakchott"
Hb A2 variant

Hb Seal Rock, Hb Köln (Ube-1), Hb Buenos Aires (pic mineur), Hb E, Hb M-Saskatoon (pic mineur), Hb G-Siriraj, Hb A2-Babinga,
Hb F-Moyen Orient, Hb Agenogi, Hb Sabine, Hb Santa Ana, Hb Savaria, Hb Djelfa (pic 3), variant de Hb A2 "M-Iwate", variant de
Hb A2 "Saint Claude", variant de Hb A2 "Jackson" (alpha 2), variant de Hb A2 "Wayne" (pic 1), Hb C dégradée
Z(E)
Hb Seal Rock, Hb Köln (Ube-1), Hb Buenos Aires (minor peak), Hb E, Hb M-Saskatoon (minor peak), Hb G-Siriraj, Hb A2-Babinga,
Hb F-Moyen Orient, Hb Agenogi, Hb Sabine, Hb Santa Ana, Hb Savaria, Hb Djelfa (peak 3), "M-Iwate" Hb A2 variant, "Saint Claude"
Hb A2 variant, "Jackson" Hb A2 variant (alpha 2), "Wayne" Hb A2 variant (peak 1), denatured Hb C

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MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

TABLEAU / TABLE

VARIANTS POTENTIELS PRÉSENTS DANS CHAQUE ZONE - POTENTIAL VARIANTS LOCATED IN EACH ZONE

Zone Hémoglobines / Hemoglobins (Hb)

Hb Arya, Hb Kenya (HPFH-7), Hb Hasharon (Sinai), Hb Dhofar (Yukuhashi), Hb Shimonoseki (Hikoshima), Hb O-Indonesia
(Buginese-X), Hb Machida, Hb Vexin, Hb Corbeil, Hb Ottawa (Siam), Hb Fort de France, Hb S, Hb Montgomery, Hb G-Copenhagen,
Hb S-Antilles, Hb Handsworth, Hb Poissy, Hb Hamadan, Hb Belfast, Hb Russ (alpha 1), Hb Russ (alpha 2), Hb Evanston, Hb
Stanleyville-II, Hb Cocody, Hb Reims, variant de Hb A2 "Tokoname", variant de Hb A2 "Pisa", variant de Hb A2 "Lombard", variant de
Hb A2 "Tatras", variant de Hb A2 "J-Cape Town" (alpha 2), variant de Hb A2 "Thionville", variant de Hb A2 "Cemenelum", variant de
Hb A2 "J-Cape Town" (alpha 1), variant de Hb A2 "Nikaia", variant de Hb A2 "Hopkins-II" (alpha 1), variant de Hb A2 "Jackson"
(alpha 1), variant de Hb A2 "Hopkins-II" (alpha 2), variant de Hb A2 "Singapore", Hb O-Arab dégradée
Z(S)
Hb Arya, Hb Kenya (HPFH-7), Hb Hasharon (Sinai), Hb Dhofar (Yukuhashi), Hb Shimonoseki (Hikoshima), Hb O-Indonesia
(Buginese-X), Hb Machida, Hb Vexin, Hb Corbeil, Hb Ottawa (Siam), Hb Fort de France, Hb S, Hb Montgomery, Hb G-Copenhagen,
Hb S-Antilles, Hb Handsworth, Hb Poissy, Hb Hamadan, Hb Belfast, Hb Russ (alpha 1), Hb Russ (alpha 2), Hb Evanston, Hb
Stanleyville-II, Hb Cocody, Hb Reims, "Tokoname" Hb A2 variant, "Pisa" Hb A2 variant, "Lombard" Hb A2 variant, "Tatras" Hb A2
variant, "J-Cape Town" Hb A2 variant (alpha 2), "Thionville" Hb A2 variant, "Cemenelum" Hb A2 variant, "J-Cape Town" Hb A2 variant
(alpha 1), "Nikaia" Hb A2 variant, "Hopkins-II" Hb A2 variant (alpha 1), "Jackson" Hb A2 variant (alpha 1), "Hopkins-II" Hb A2 variant
(alpha 2), "Singapore" Hb A2 variant, denatured Hb O-Arab

Hb Memphis, Hb G-Audhali, Hb G-Szuhu (Gifu), Hb Leiden, Hb Beograd (D-Camperdown), Hb Muravera, Hb D-Bushman, Hb Matsue-
Oki, Hb D-Punjab (D-Los Angeles), Hb Osu Christiansborg, Hb Watts, Hb A2-Coburg, Hb G-Waimanalo (Aida), Hb Muskegon,
Hb D-Ibadan, Hb Buenos Aires (pic mineur), Hb Q-India, Hb Lepore-BW, Hb Q-Iran, Hb Summer Hill, Hb G-Philadelphia, Hb D-Ouled
Rabah, Hb Yaizu, Hb Kenitra, Hb San Antonio, Hb Ferrara, Hb Lepore-Hollandia, Hb Quin-Hai, Hb Fort Worth, Hb Mizushi, Hb Lepore-
Baltimore, Hb Djelfa (pic 2), Hb Spanish Town, Hb Korle-Bu (G-Accra), Hb Köln (Ube-1), Hb G-Norfolk (alpha 1), Hb Maputo,
Hb Etobicoke, Hb D-Iran, Hb G-Taipei, Hb Caribbean, Hb Ube-4, Hb St. Luke's, Hb G-Coushatta (G-Saskatoon), Hb Winnipeg,
Hb Inkster, Hb Zürich, Hb G-Pest, Hb P-Galveston, Hb Queens (Ogi), Hb Aubenas, Hb Setif, Hb P-Nilotic, Hb Sunshine Seth,
Hb Titusville, variant de Hb A2 "J-Sardegna", variant de Hb A2 "Suresnes", variant de Hb A2 "J-Meerut" (alpha 2), variant de Hb A2
"J-Broussais" (alpha 2), variant de Hb A2 "J-Rajappen", variant de Hb A2 "J-Anatolia", variant de Hb A2 "J-Oxford", variant de Hb A2
"J-Meerut" (alpha 1), variant de Hb A2 "Ube-2", variant de Hb A2 "J-Broussais" (alpha 1), variant de Hb A2 "J-Abidjan", variant de
Hb A2 "J-Toronto", variant de Hb A2 "Mexico" (alpha 1), variant de Hb A2 "Mexico" (alpha 2), variant de Hb A2 "Thailand", variant de
Hb A2 "J-Tongariki", variant de Hb A2 "Neuilly-sur-Marne", variant de Hb A2 "J-Wenchang-Wuming", variant de Hb A2 "J-Paris-I"
(alpha 2), variant de Hb A2 "J-Habana", variant de Hb A2 "J-Paris-I" (alpha 1), variant de Hb A2 "Wayne" (pic 2), Hb E dégradée
Z(D)
Hb Memphis, Hb G-Audhali, Hb G-Szuhu (Gifu), Hb Leiden, Hb Beograd (D-Camperdown), Hb Muravera, Hb D-Bushman, Hb Matsue-
Oki, Hb D-Punjab (D-Los Angeles), Hb Osu Christiansborg, Hb Watts, Hb A2-Coburg, Hb G-Waimanalo (Aida), Hb Muskegon,
Hb D-Ibadan, Hb Buenos Aires (minor peak), Hb Q-India, Hb Lepore-BW, Hb Q-Iran, Hb Summer Hill, Hb G-Philadelphia, Hb D-Ouled
Rabah, Hb Yaizu, Hb Kenitra, Hb San Antonio, Hb Ferrara, Hb Lepore-Hollandia, Hb Quin-Hai, Hb Fort Worth, Hb Mizushi, Hb Lepore-
Baltimore, Hb Djelfa (peak 2), Hb Spanish Town, Hb Korle-Bu (G-Accra), Hb Köln (Ube-1), Hb G-Norfolk (alpha 1), Hb Maputo,
Hb Etobicoke, Hb D-Iran, Hb G-Taipei, Hb Caribbean, Hb Ube-4, Hb St. Luke's, Hb G-Coushatta (G-Saskatoon), Hb Winnipeg,
Hb Inkster, Hb Zürich, Hb G-Pest, Hb P-Galveston, Hb Queens (Ogi), Hb Aubenas, Hb Setif, Hb P-Nilotic, Hb Sunshine Seth,
Hb Titusville, "J-Sardegna" Hb A2 variant, "Suresnes" Hb A2 variant, "J-Meerut" Hb A2 variant (alpha 2), "J-Broussais" Hb A2 variant
(alpha 2), "J-Rajappen" Hb A2 variant, "J-Anatolia" Hb A2 variant, "J-Oxford" Hb A2 variant, "J-Meerut" Hb A2 variant (alpha 1),
"Ube-2" Hb A2 variant, "J-Broussais" Hb A2 variant (alpha 1), "J-Abidjan" Hb A2 variant, "J-Toronto" Hb A2 variant, "Mexico" Hb A2
variant (alpha 1), "Mexico" Hb A2 variant (alpha 2), "Thailand" Hb A2 variant, "J-Tongariki" Hb A2 variant, "Neuilly-sur-Marne" Hb A2
variant, "J-Wenchang-Wuming" Hb A2 variant, "J-Paris-I" Hb A2 variant (alpha 2), "J-Habana" Hb A2 variant, "J-Paris-I" Hb A2 variant
(alpha 1), "Wayne" Hb A2 variant (peak 2), denatured Hb E

Hb F, Hb Willamette, Hb Hoshida, Hb Languidic, Hb Sunnybrook, Hb Park Ridge, Hb Delfzicht, Hb Alabama, Hb Chapel Hill,
Hb Bunbury, Hb Tak, Hb Q-Thailand (G-Taichung), Hb Sabine, Hb Bassett, Hb Les Lilas, Hb Rampa, Hb G-Georgia, Hb Barcelona,
Hb G-San José, Hb Denmark Hill, Hb Pôrto Alegre, Hb Geldrop Santa Anna, Hb Ta-Li, Hb Richmond, Hb Abruzzo, Hb Verdun,
Hb Boumerdes, Hb Swan River, Hb Burke, Hb Tarrant, Hb Dunn, Hb Manitoba-I, Hb Manitoba-II, Hb Sassari, Hb Hazebrouck, Hb Port
Phillip, variant de Hb A2 "J-Rovigo", Hb S dégradée, Hb D-Punjab dégradée
Z(F)
Hb F, Hb Willamette, Hb Hoshida, Hb Languidic, Hb Sunnybrook, Hb Park Ridge, Hb Delfzicht, Hb Alabama, Hb Chapel Hill,
Hb Bunbury, Hb Tak, Hb Q-Thailand (G-Taichung), Hb Sabine, Hb Bassett, Hb Les Lilas, Hb Rampa, Hb G-Georgia, Hb Barcelona,
Hb G-San José, Hb Denmark Hill, Hb Pôrto Alegre, Hb Geldrop Santa Anna, Hb Ta-Li, Hb Richmond, Hb Abruzzo, Hb Verdun,
Hb Boumerdes, Hb Swan River, Hb Burke, Hb Tarrant, Hb Dunn, Hb Manitoba-I, Hb Manitoba-II, Hb Sassari, Hb Hazebrouck, Hb Port
Phillip, "J-Rovigo" Hb A2 variant, denatured Hb S, denatured Hb D-Punjab
Hb F acétylée, Hb Lansing, Hb Hinsdale, Hb Roanne, Hb Yakima, Hb Ypsilanti (Ypsi - pic 1), Hb Saint Mandé, Hb Alberta,
Hb Bruxelles, Hb Val de Marne (Footscray), Hb Kempsey, Hb Shelby (Leslie), Hb Atlanta, Hb Chemilly, Hb S-Clichy, Hb Sarrebourg,
Hb Charolles, Hb Ypsilanti (Ypsi - pic 2), Hb Rainier, Hb Athens-GA (Waco), Hb Debrousse, Hb Köln (Ube-1), Hb Aubagne
Z8
Acetylated Hb F, Hb Lansing, Hb Hinsdale, Hb Roanne, Hb Yakima, Hb Ypsilanti (Ypsi - peak 1), Hb Saint Mandé, Hb Alberta,
Hb Bruxelles, Hb Val de Marne (Footscray), Hb Kempsey, Hb Shelby (Leslie), Hb Atlanta, Hb Chemilly, Hb S-Clichy, Hb Sarrebourg,
Hb Charolles, Hb Ypsilanti (Ypsi - peak 2), Hb Rainier, Hb Athens-GA (Waco), Hb Debrousse, Hb Köln (Ube-1), Hb Aubagne

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MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

TABLEAU / TABLE

VARIANTS POTENTIELS PRÉSENTS DANS CHAQUE ZONE - POTENTIAL VARIANTS LOCATED IN EACH ZONE

Zone Hémoglobines / Hemoglobins (Hb)

Hb A, Hb Presbyterian, Hb Roubaix (Poland), Hb Silver Springs *, Hb El Escorial *, Hb Dallas *, Hb Olympia *, Hb Phnom Penh *,
Hb La Coruna *, Hb Uzes *, Hb Bougardirey-Mali *, Hb Saint Nazaire *, Hb Alzette *, Hb Antibes-Juan-Les-Pins *, Hb Arta (pic
majeur) *, Hb Austin *, Hb Aztec *, Hb Beirut *, Hb Bethesda *, Hb Boghé *, Hb Bonn *, Hb Brem-sur-Mer *, Hb Brest *, Hb Brigham *,
Hb Brisbane (Great Lakes) *, Hb Brugg *, Hb Buenos Aires (Bryn Mawr - pic majeur) *, Hb Buffalo (Reeuwijk) *, Hb Bushwick *,
Hb Chicago *, Hb City of Hope *, Hb Coimbra (Ingelheim) *, Hb Columbia Missouri *, Hb Conakry *, Hb Djelfa (pic 1) *,
Hb Fontainebleau *, Hb Frankfurt *, Hb Fukuoka *, Hb Godavari *, Hb Gorwihl (Hinchingbrooke) *, Hb Gouda *, Hb Grange Blanche *,
Hb Groene Hart (Bernalda) *, Hb Hamilton *, Hb Heathrow *, Hb Hekinan *, Hb Iraq-Halabja *, Hb Kosovo *, Hb La Desirade *, Hb Le
Lamentin *, Hb Le Lamentin 2 *, Hb Linköping (Meilahti) *, Hb Lisbon *, Hb Little Rock *, Hb Lulu Island *, Hb Lyon-Bron *,
Hb M-Boston (M-Osaka) *, Hb M-Saskatoon (pic majeur) *, Hb McKees Rocks *, Hb Malmö *, Hb Marseille (Long Island) *,
Hb Milledgeville *, Hb Minneapolis Laos *, Hb Mizuho *, Hb Mosella *, Hb Noko *, Hb Okayama *, Hb Owari *, Hb Ozieri *, Hb Perth
(Abraham Lincoln) *, Hb Potomac *, Hb Puttelange *, Hb Raleigh *, Hb Ravenscourt Park *, Hb Regina *, Hb Rhode Island
(Southwark) *, Hb Riccarton *, Hb Rouen (Ethiopia) *, Hb Saclay *, Hb St Joseph's *, Hb San Diego *, Hb Santa Juana (Serres) *,
Hb Savannah *, Hb Sydney *, Hb Taybe *, Hb Templeuve *, Hb Toulon *, Hb Twin Peaks *, Hb Ty Gard *, Hb Valletta *, Hb Verona *,
Hb Villejuif *, Hb Villeparisis *, Hb Volga (Drenthe) *, Hb Westmead *, Hb Wood *, Hb Yaounde (Mataro) *, Hb Zoetermeer *,
Hb M-Milwaukee-I *, Hb Melusine *, Hb Pitie-Salpetriere *, Hb Syracuse *, Hb Hounslow, Hb Fort Dodge, Hb Old Dominion (OD/BuT),
Hb Camperdown, Hb Duarte, Hb Jura (Bamako)
Z(A)
Hb A, Hb Presbyterian, Hb Roubaix (Poland), Hb Silver Springs *, Hb El Escorial *, Hb Dallas *, Hb Olympia *, Hb Phnom Penh *,
Hb La Coruna *, Hb Uzes *, Hb Bougardirey-Mali *, Hb Saint Nazaire *, Hb Alzette *, Hb Antibes-Juan-Les-Pins *, Hb Arta (main
peak) *, Hb Austin *, Hb Aztec *, Hb Beirut *, Hb Bethesda *, Hb Boghé *, Hb Bonn *, Hb Brem-sur-Mer *, Hb Brest *, Hb Brigham *,
Hb Brisbane (Great Lakes) *, Hb Brugg *, Hb Buenos Aires (Bryn Mawr, major peak) *, Hb Buffalo (Reeuwijk) *, Hb Bushwick *,
Hb Chicago *, Hb City of Hope *, Hb Coimbra (Ingelheim) *, Hb Columbia Missouri *, Hb Conakry *, Hb Djelfa (peak 1) *,
Hb Fontainebleau *, Hb Frankfurt *, Hb Fukuoka *, Hb Godavari *, Hb Gorwihl (Hinchingbrooke) *, Hb Gouda *, Hb Grange Blanche *,
Hb Groene Hart (Bernalda) *, Hb Hamilton *, Hb Heathrow *, Hb Hekinan *, Hb Iraq-Halabja *, Hb Kosovo *, Hb La Desirade *, Hb Le
Lamentin *, Hb Le Lamentin 2 *, Hb Linköping (Meilahti) *, Hb Lisbon *, Hb Little Rock *, Hb Lulu Island *, Hb Lyon-Bron *,
Hb M-Boston (M-Osaka) *, Hb M-Saskatoon (main peak) *, Hb McKees Rocks *, Hb Malmö *, Hb Marseille (Long Island) *,
Hb Milledgeville *, Hb Minneapolis Laos *, Hb Mizuho *, Hb Mosella *, Hb Noko *, Hb Okayama *, Hb Owari *, Hb Ozieri *, Hb Perth
(Abraham Lincoln) *, Hb Potomac *, Hb Puttelange *, Hb Raleigh *, Hb Ravenscourt Park *, Hb Regina *, Hb Rhode Island
(Southwark) *, Hb Riccarton *, Hb Rouen (Ethiopia) *, Hb Saclay *, Hb St Joseph's *, Hb San Diego *, Hb Santa Juana (Serres) *,
Hb Savannah *, Hb Sydney *, Hb Taybe *, Hb Templeuve *, Hb Toulon *, Hb Twin Peaks *, Hb Ty Gard *, Hb Valletta *, Hb Verona *,
Hb Villejuif *, Hb Villeparisis *, Hb Volga (Drenthe) *, Hb Westmead *, Hb Wood *, Hb Yaounde (Mataro) *, Hb Zoetermeer *,
Hb M-Milwaukee-I *, Hb Melusine *, Hb Pitie-Salpetriere *, Hb Syracuse *, Hb Hounslow, Hb Fort Dodge, Hb Old Dominion (OD/BuT),
Hb Camperdown, Hb Duarte, Hb Jura (Bamako)
Hb Créteil, Hb Nouakchott, Hb Wayne (pic 1), Hb M-Iwate (M-Kankakee), Hb Camden (Tokuchi), Hb Hope
Z10
Hb Créteil, Hb Nouakchott, Hb Wayne (peak 1), Hb M-Iwate (M-Kankakee), Hb Camden (Tokuchi), Hb Hope
Hb A dégradée, Hb Vaasa, Hb Tacoma, Hb Providence (pic X-Asn), Hb Shepherds Bush, Hb Cook, Hb Corsica, Hb Pisa,
Hb K-Woolwich, Hb Lombard, Hb J-Guantanamo, Hb Andrew Minneapolis, Hb J-Cape Town (alpha 1), Hb Kaohsiung (New York),
Hb Fannin-Lubbock I, Hb Saint Claude, Hb Thionville, Hb Jackson (alpha 2), Hb J-Cape Town (alpha 2), Hb Strasbourg, Hb Osler
(Fort Gordon), Hb Pierre-Bénite, Hb J-Auckland, Hb Nancy, Hb Himeji, Hb Singapore, Hb Jackson (alpha 1), Hb Tatras, variant de
Hb A2 "I (I-Texas)"
Z11
Denatured Hb A, Hb Vaasa, Hb Tacoma, Hb Providence (X-Asn peak), Hb Shepherds Bush, Hb Cook, Hb Corsica, Hb Pisa,
Hb K-Woolwich, Hb Lombard, Hb J-Guantanamo, Hb Andrew Minneapolis, Hb J-Cape Town (alpha 1), Hb Kaohsiung (New York),
Hb Fannin-Lubbock I, Hb Saint Claude, Hb Thionville, Hb Jackson (alpha 2), Hb J-Cape Town (alpha 2), Hb Strasbourg, Hb Osler
(Fort Gordon), Hb Pierre-Bénite, Hb J-Auckland, Hb Nancy, Hb Himeji, Hb Singapore, Hb Jackson (alpha 1), Hb Tatras, "I (I-Texas)" Hb
A2 variant
Hb Bart, Hb Nikaia, Hb Cemenelum, Hb Tokoname, Hb J-Cubujuqui, Hb Wayne (pic 2), Hb Hopkins-II (alpha 1), Hb J-Calabria (J-Bari),
Hb J-Camagüey, Hb J-Tongariki, Hb J-Meerut (J-Birmingham - alpha 1), Hb Hopkins-II (alpha 2), Hb Zaïre, Hb J-Meerut
(J-Birmingham - alpha 2), Hb Trollhättan, Hb Pyrgos (Mizunami), Hb Providence (pic X-Asp), Hb Suresnes, Hb J-Broussais (Tagawa-I -
alpha 2), Hb Grady (Dakar - alpha 2), Hb Grady (Dakar - alpha 1), Hb Hikari, Hb J-Rajappen, Hb J-Anatolia, Hb J-Broussais (Tagawa-
I - alpha 1), Hb J-Chicago, Hb J-Sardegna, Hb J-Cordoba, Hb J-Toronto, Hb J-Oxford (I-Interlaken), Hb J-Meinung (J-Bangkok),
Hb Ube-2, Hb Hofu, Hb J-Cambridge (Rambam), Hb J-Abidjan, Hb Ulm, Hb J-Iran, Hb Riyadh (Karatsu), Hb Mexico (J-Paris-II -
alpha 2), Hb Neuilly-sur-Marne, Hb Pontoise (J-Pontoise), Hb Ankara, Hb Mexico (J-Paris-II - alpha 1), Hb J-Paris-I (J-Aljezur -
alpha 1), Hb Thailand, Hb J-Habana, Hb J-Baltimore (N-New Haven), Hb J-Wenchang-Wuming, Hb J-Paris-I (J-Aljezur - alpha 2),
Hb K-Ibadan
Z12
Hb Bart, Hb Nikaia, Hb Cemenelum, Hb Tokoname, Hb J-Cubujuqui, Hb Wayne (peak 2), Hb Hopkins-II (alpha 1), Hb J-Calabria
(J-Bari), Hb J-Camagüey, Hb J-Tongariki, Hb J-Meerut (J-Birmingham - alpha 1), Hb Hopkins-II (alpha 2), Hb Zaïre, Hb J-Meerut
(J-Birmingham - alpha 2), Hb Trollhättan, Hb Pyrgos (Mizunami), Hb Providence (X-Asp peak), Hb Suresnes, Hb J-Broussais
(Tagawa-I - alpha 2), Hb Grady (Dakar - alpha 2), Hb Grady (Dakar - alpha 1), Hb Hikari, Hb J-Rajappen, Hb J-Anatolia,
Hb J-Broussais (Tagawa-I - alpha 1), Hb J-Chicago, Hb J-Sardegna, Hb J-Cordoba, Hb J-Toronto, Hb J-Oxford (I-Interlaken),
Hb J-Meinung (J-Bangkok), Hb Ube-2, Hb Hofu, Hb J-Cambridge (Rambam), Hb J-Abidjan, Hb Ulm, Hb J-Iran, Hb Riyadh (Karatsu),
Hb Mexico (J-Paris-II - alpha 2), Hb Neuilly-sur-Marne, Hb Pontoise (J-Pontoise), Hb Ankara, Hb Mexico (J-Paris-II - alpha 1),
Hb J-Paris-I (J-Aljezur - alpha 1), Hb Thailand, Hb J-Habana, Hb J-Baltimore (N-New Haven), Hb J-Wenchang-Wuming, Hb J-Paris-I
(J-Aljezur - alpha 2), Hb K-Ibadan

- 749 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

TABLEAU / TABLE

VARIANTS POTENTIELS PRÉSENTS DANS CHAQUE ZONE - POTENTIAL VARIANTS LOCATED IN EACH ZONE

Zone Hémoglobines / Hemoglobins (Hb)

Hb J-Europa, Hb N-Baltimore (Hopkins-I), Hb J-Rovigo, Hb Arta (pic mineur), Hb J-Norfolk (Kagoshima), Hb J-Kaohsiung (J-Honolulu)
Z13
Hb J-Europa, Hb N-Baltimore (Hopkins-I), Hb J-Rovigo, Hb Arta (minor peak), Hb J-Norfolk (Kagoshima), Hb J-Kaohsiung (J-Honolulu)

Hb N-Seattle
Z14
Hb N-Seattle

Hb H, Hb I-Toulouse, Hb Sudbury, Hb Kurosaki (alpha 1), Poly A (A->G); AATAAA->AATAAG of the alpha2 gene alpha-Thal-2,
Hb Kurosaki (alpha 2), Hb F-Emirates, Hb N-Timone, Hb I (I-Texas, I-Philadelphia), Hb Shaare Zedek
Z15
Hb H, Hb I-Toulouse, Hb Sudbury, Hb Kurosaki (alpha 1), Poly A (A->G); AATAAA->AATAAG of the alpha2 gene alpha-Thal-2,
Hb Kurosaki (alpha 2), Hb F-Emirates, Hb N-Timone, Hb I (I-Texas, I-Philadelphia), Hb Shaare Zedek

* Pic non visible / Hidden peak

- 750 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

SCHÉMAS / FIGURES

PROFILS ÉLECTROPHORÉTIQUES - ELECTROPHORETIC PATTERNS

Figure 1 Figure 2

Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1 Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1

Hb A Hb A

Hb A2
Hb A2

Sang normal Sang bêta-thalassémique


Normal blood sample Blood sample with beta-thalassemia

Figure 3 Figure 4

Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1 Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1

Hb C Hb A
Hb A
Hb S

Hb A2 Hb A2
Hb F

Sang avec variant Hb C Sang avec variant hétérozygote Hb S


Blood sample with Hb C variant Blood sample with Hb S heterozygote variant

- 751 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

SCHÉMAS / FIGURES

PROFILS ÉLECTROPHORÉTIQUES - ELECTROPHORETIC PATTERNS

Figure 5 Figure 6

Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1 Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1

Hb F Hb F

Hb A

Hb A

Hb A2 Hb Bart's

Sang de bébé (agé de 3 semaines) Sang de bébé avec Hb Bart's


Baby blood sample (3 weeks old) Baby blood sample with Hb Bart's

Figure 7 Figure 8

Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1 Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1

Hb A Hb A

Hb F

Hb A2 Hb H Hb A2

Sang avec Hb F (jeune enfant) Sang avec Hb H


Blood sample with Hb F (young child) Blood sample with Hb H

- 752 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

SCHÉMAS / FIGURES

PROFILS ÉLECTROPHORÉTIQUES - ELECTROPHORETIC PATTERNS

Figure 9 Figure 10

Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1 Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1

Hb D-Punjab Hb A
Hb A

Hb A2 Hb
Hb A2 delta A'2

Sang avec variant Hb D-Punjab Sang avec variant delta Hb A'2


Blood sample with Hb D-Punjab variant Blood sample with delta Hb A'2 variant

Figure 11 Figure 12

Hb E Hb C

Hb S

Hb F

Hb A2
Hb A2
Hb F

Sang avec variant homozygote Hb E et fraction Hb F élevée Sang avec variants hétérozygotes Hb S et Hb C
Blood sample with homozygote Hb E variant and elevated Hb F Blood sample with Hb S & Hb C heterozygote variants

- 753 -
MINICAP HEMOGLOBIN(E) - 2018/07

SCHÉMAS / FIGURES

PROFILS ÉLECTROPHORÉTIQUES - ELECTROPHORETIC PATTERNS

Figure 13 Figure 14

Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1

Hb S Hb A

Hb A
Hb F dégradée
Hb A2 degraded Hb A2
Hb F

Sang avec variant homozygote Hb S (et Hb F) Sang avec Hb A dégradée (Hb A3) et Hb F faible
Blood sample with Hb S homozygote variant (and Hb F) Blood sample with degraded Hb A (Hb A3) and faint Hb F

Figure 15

Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1

Hb A

Hb Lepore-BW

Hb F Hb A2

Sang avec variant Hb Lepore-BW


Bood sample with Hb Lepore-BW variant

- 754 -
Benelux SCS / Comm. V
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1800 Vilvoorde
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