Curihuaman LEG-Felix MD-SD

FACULTAD DE INGENIERÍA Y ARQUITECTURA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL
Bioestimulación asistida por biocarbón (Estiércol de Gallina)

para remediar suelos contaminados por hidrocarburos
totales de petróleo Jicamarca-Lima 2022
TESIS PARA OBTENER EL TÍTULO PROFESIONAL DE:

Ingeniero Ambiental
AUTORES:
Curihuaman Luis, Eduard Gabriel (orcid.org/0000-0002-6556-2130)
Felix Modesto, Delsa (orcid.org/0000-0001-5227-3201)
ASESORA:
Mg. Cabello Torres Rita Jaqueline (orcid.org/0000-0002-9965-9678)
LÍNEA DE INVESTIGACIÓN
Calidad y Gestión de los Recursos Naturales
LÍNEA DE RESPONSABILIDAD SOCIAL UNIVERSITARIA:
Desarrollo sostenible y adaptación al cambio climático
LIMA – PERÚ
2022
Dedicatoria
A mi mama y a mi hermano quienes me apoyan

día a día, aconsejan para seguir adelante y no
dejarme rendir por los obstáculos que se me
puede presentar en el transcurso de mi
preparación profesional.
Félix Modesto, Delsa
Le dedico el resultado de este trabajo a

toda mi familia. Principalmente, a mis
padres que me apoyaron y contuvieron
los momentos malos y en los menos
malos. Gracias por enseñarme a
afrontar las dificultades sin perder nunca
la cabeza ni caer en el intento.
Curihuaman Luis, Eduard Gabriel
i
Agradecimiento
A Dios por la vida, la salud y su infinito amor.

A mi familia por su apoyo incondicional.
A la ingeniera Rita Cabello Torres por su apoyo
y su paciencia por apoyarnos durante todo el
proceso de la investigación.
Félix Modesto, Delsa
Agradezco a los ingenieros que nos

apoyaron a lo largo de esta etapa, ya que
gracias a sus correcciones llegamos hasta
estas instancias.
Curihuaman Luis, Eduard Gabriel
ii
Índice de contenido
Carátula ........................................................................................................... i
Dedicatoria ....................................................................................................... i
Agradecimiento ................................................................................................ ii
Índice de tablas ............................................................................................... iv
RESUMEN .................................................................................................... viii
ABSTRACT .......................................................................................................
ix
I. INTRODUCCIÓN ......................................................................................... 1
II. MARCO TEÓRICO ...................................................................................... 7
III. METODOLOGÍA ..................................................................................... 22
3.1. Tipo, diseño y nivel de investigación ...................................................... 23
3.1.1. Tipo de investigación .................................................................... 23
3.1.2. Diseño de investigación ................................................................ 23
3.2. Variables y operacionalización ............................................................ 24
3.3. Población, muestra y muestreo ........................................................... 24
3.4. Técnicas e instrumentos de recolección de datos ............................... 26
3.5. Procedimientos.................................................................................... 27
3.6. Método de análisis de datos ................................................................ 49
3.7. Aspectos éticos ................................................................................... 49
IV. RESULTADOS ....................................................................................... 50
V. DISCUSIÓN ............................................................................................... 86
VI. CONCLUSIONES ................................................................................... 92
VII. RECOMENDACIONES .......................................................................... 95
REFERENCIAS ................................................................................................ 97
ANEXO ........................................................................................................... 104
iii
ÍNDICE DE TABLAS
tabla 1. Parámetros de operación y distribución de productos de diferentes
procesos termoquímicos de biomasa
tabla 2. Fracciones principales del hidrocarburo
tabla 3. Georreferenciación de la zona de estudio
tabla 4. pruebas bioquímicas de identificación de bacterias
tabla 5. dosis de biocarbon
tabla 6. Concentración de Hidrocarburo del petróleo (método Soxhlet)
tabla 7. Concentración de Hidrocarburo total inicial (ECAS – 5000 mgHTP/kgps)
tabla 8. Concentración de Hidrocarburo total inicial (ECAS – 5000 mgHTP/kgps)
tabla 9. HTP mg/kg ps
tabla 10. Parámetros físico químicos del estiércol de gallina (Potenciometría)
tabla 11. Humedad del estiércol de gallina (Método: ASTM D2216)
tabla 12. Materia volátil del estiércol de gallina (MV) (método: ASTM D3175)
tabla 13. ceniza del estiércol de gallina (método: ASTM D5142)
tabla 14. Carbono fijo del estiércol de gallina (método: ASTM D3172)
tabla 15. Concentración inicial del hidrocarburo de Petróleo
tabla 16. Condiciones para realizar una prueba de cinética de Adsorción
tabla 17. Cinética de adsorción
tabla 18. Determinación de la Isoterma de Langmuir
tabla 19. Análisis microbiológico inicial
tabla 20. diluciones en tubos múltiples con siembra en placas Petri
tabla 21. Unidades formadoras de colonias/ml (UFC/ml)
tabla 22. Microbiología de suelo contaminado con hidrocarburo de petróleo
iv
tabla 44. Agar simmons
tabla 45. Agar manitol salt base
tabla 46. Agar cetramide base
tabla 48. Parámetros físico químico del suelo inicial con HTP de petróleo
(Método potenciométrico)
tabla 49. Determinación de la humedad (método: ASTM D 2215)
tabla 50. Capacidad de intercambio catiónico (método del acetato de amonio pH7 – 1N)
tabla 51. Carbono Orgánico (CO) (Método Walkley – Black)
tabla 52. Densidad aparente del suelo contaminado (método cilindro biselado)
tabla 53. materia Orgánica, nitrógeno total, nitratos
tabla 54. Textura del suelo (método Bouyoucos)
tabla 55. Parámetros físicos químicos (método potenciométrico)
tabla 56. Humedad del suelo (método: Norma ASTM D2216)
tabla 57. Capacidad de Intercambio Catiónico (método acetato de amonio pH7 – 1N)
tabla 58. Carbono Orgánico Total (método de Wackley – Black)
tabla 59. Materia orgánica, nitrógeno, relación carbono/ nitrógeno
tabla 60. Parámetros físico químico
tabla 61. Humedad del suelo contaminado con hidrocarburo de Petróleo
tabla 62. Capacidad de Intercambio catiónico (CIC)
tabla 63. Carbono Orgánico (CO)
tabla 64. Materia orgánica, Nitrógeno, relación C/N
tabla 65. Parámetros físicos y químicos
tabla 66. Humedad del suelo con HTP de Petróleo
tabla 67. Capacidad de intercambio catiónico
v
tabla 70. Potencial de hidrogeno (Acido/base)
tabla 71. Conductividad eléctrica (mS/cm)
tabla 72. Potencial redox (mV)
tabla 73. Humedad %
tabla 74. CIC (mq/100g)
tabla 75. Carbono orgánico total
tabla 76. Materia orgánica %
tabla 77. nitrógeno %
tabla 78. relación C/N
tabla 80. Pruebas de normalidad en 10,20 y 30 días
tabla 81. Análisis de varianza (ANOVA)
tabla 82. Tabla: El pH_123
tabla 83. potencial redoxEh_123
tabla 84. estadístico Tukey para CE_123
tabla 85. Pruebas de normalidad
tabla 86. Prueba de homogeneidad de varianzas
tabla 88. CIC_123
tabla 89. CO_123
tabla 90. MO_123
tabla 91. N_123
tabla 92. Correlaciones
tabla 96. RHTP_1234
vi
ÍNDICE DE FIGURAS
Figura1. Adsorción de biocarbon
Figura2. Área de estudio
Figura3. procedimiento
Figura4. cuarto de la muestra
Figura5. Colecta de suelo contaminado con hidrocarburo
Figura6. Potencial de hidrógeno (pH), Potencial redox (mV) (Método
potenciométrico)
Figura7. flujograma de pirolisis de estiércol de gallina
Figura8. Preparación del biocarbon
Figura9. determinación de la humedad del estiércol de gallina
Figura10. flujograma de identificación de bacterias G+ y G .
Figura11. Prueba de tinción gram (+) (-)
Figura12. flujograma del análisis microbiológica del suelo
Figura13. Análisis microbiologico
Figura14. flujograma de siembra en placas Petri
Figura15. Siembra en placas Petri ZHAO
Figura16. preparación de las pilas con el suelo contaminado
Figura17. comportamiento cinético de adsorción
Figura18. capacidad de adsorción vs concentración de equilibrio (isoterma de adsorción)
Figura19. Langmuir
Figura20. Freundlich
Figura21. textura del suelo
Figura22. Potencial de hidrogeno (Acido/base)
Figura23. Conductividad eléctrica (mS/cm)
Figura24. potencial redox (mV)
Figura25. Humedad %
Figura26. CIC (mq/100g)
Figura27. carbono orgánico total
Figura28. Materia orgánica %
Figura29. Nitrógeno %
Figura30. Relación C/N
Figura31. HTP mg/kg ps
vii
Figura32. Agar simmons
Figura33. Agar mannitol salt base
Figura34. Agar cetramide base
viii
RESUMEN
La contaminación del suelo por hidrocarburos total de petróleo se ha vuelto una
problemática mundial debido a los grandes impactos ambientales que se
vienen ocasionados por esta sustancia, consecuencia a ello la presente
investigación realizó bioestimulacion asistida por el biocarbon de estiércol de
gallina para la biodegradación del suelo contaminado con hidrocarburo total de
petróleo, para ello se utilizó el biocarbon como enmienda, el cual fue preparó a
una temperatura de 350°C por un tiempo de 5 horas, para luego ser triturado
hasta obtener una partícula de 1mm el cual fue combinado con el suelo
contaminado con TPH ya que el biocarbon fue el adsorbente y el estimulante
para la plurificacion de las bacterias nativas del suelo que actuaron como
degradares del hidrocarburo total de petróleo. El experimento tuvo un tiempo de
duración de 30 días en el cual inicialmente se tuvo una concentración de 142462
mg/Kg de hidrocarburos total en el suelo, de los cuales durante el tratamiento se
logró degradar en un 46% de hidrocarburos total de petróleo, esto quiere decir
que el biocarbon aparte de ser económico y que se puede realizar a base de
diferentes tipos de materia prima vegetal es un buen material para la
biorremediación del suelo contaminado.
Palabras claves: biorremediación, suelo contaminado, hidrocarburos,

biocarbon y bacterias.
ix
ABSTRACT
The contamination of the soil by total oil hydrocarbons has become a global
problem due to the great environmental impacts caused by this substance, as a
consequence of this the present investigation carried out biostimulation assisted
by the biocarbon of chicken manure for the bioremediation of soil contaminated
with hydrocarbons total oil, for this biocarbon was used as an amendment, which
was prepared at a temperature of 350 ° C for a period of 5 hours, to then be
crushed until obtaining a 0.01mg particle which was combined with the
contaminated soil with TPH since the biocarbon will be the adsorbent and the
stimulant for the plurification of the native soil bacteria who acted as degraders
of the total petroleum hydrocarbon. The experiment had a duration of 30 days in
which initially there was a concentration of 142462 mg/kg total hydrocarbons
present in the soil, of which during the treatment it was possible to degrade 46%
of total petroleum hydrocarbons, this This means that biocarbon, apart from being
cheap and that it can be made from different types of vegetable raw material, is
a good material for the bioremediation of contaminated soil.
Key words: bioremediation, contaminated soil, hydrocarbons, biochar and
x
I. INTRODUCCIÓN
La contaminación del suelo por hidrocarburos totales es un tema muy

preocupante debido a la alta toxicidad que presenta este compuesto y el daño que
genera al medio ambiente por el impacto negativo que ocasiona. (Rosell- Melé, et
al.2018) menciona, la contaminación por hidrocarburos totales hoy en día se ha
vuelto una problemática mundial debido al incremento de la contaminación por
hidrocarburos totales, ya que este acto se viene dando de diferentes formas como
son el derrame de petróleo y el mal manejo de dicho compuesto en las diferentes
industrias. (Dike, et al., 2022) describe, la contaminación por hidrocarburos totales
se inicia desde la extracción del crudo, durante el transporte y el almacenamiento del
petróleo, durante estas actividades la contaminación surge debido a pequeñas
filtraciones accidentales del compuesto, el cual genera grandes impactos
ambientales como la degradación del suelo, la contaminación del agua y la
contaminación de la atmosfera. (Bujahico, et al., 2020) menciona, la contaminación
por el hidrocarburo y sus derivados en el Perú en los últimos años se ha vuelto muy
recurrente mayormente en la amazonia peruana, debido a los grandes derrames del
crudo de petróleo ocasionados en esa zona, ya que desde el año 2000 hasta el
2019 se tuvieron 474 vertimientos ocurridos en la amazonia de los cuales el 65%
fue debido a la corrosión y la mala infraestructura del oleoducto Norperuano si bien
se sabe esta obra es una de los más largos oleoductos para el transporte del
petróleo . Según, (Bravo, 2019) indica, en los últimos años la empresa que más
contamina la amazonia peruano hasta hoy en día aparte del oleoducto Norperuano
es la empresa transnacional Pluspetrol norte S.A, el cual viene ocasiono grandes
impactos ambientales en Loreto y que hasta hoy en día no hace nada por remediar
las zonas que contamino. Según (Velásquez, et al., 2022) la contaminación del
suelos por hidrocarburos totales en el Perú cada vez viene siendo aún más notorio,
ya que la contaminación no solo es a causa de un derrame de petróleo, sino que
también al pasar los años el aumento de los de las industrias como los centros
mecánicos está ocasionando grandes impactos ambientales, ya que en estos
centros mecánicos se vienen realizando el uso de los insumos derivados del
hidrocarburo para el mantenimiento de los vehículos y otras actividades más que se
realizan en estos talleres mecánicos. Según (Adeniyi, et al., 2022) los talleres
mecánicos en el Perú de cada 10 talleres 8 no tienen conocimiento del daño que
ocasiona el hidrocarburo total de petróleo, ya
11
que estos en su gran mayoría son informales y no tienen licencia por el cual no
cuenta con un plan de manejo de los residuos, es decir que no tienen
conocimiento sobre la cultura ambiental, consecuente a ello estos lugares
realizan el uso de todos los compuestos tóxicos sin una fiscalización
correspondiente, y solo el 2% de todos los talleres mecánicos que son formales
cuentan con los requisitos para las buenas prácticas ambientales. (Singh, et al.,
2022) menciona, la contaminación del suelo por hidrocarburos totales en los
talleres mecánicos, en los últimos años está ocasionando grandes impactos
ambientales que alteración la estructura del suelo y hace pierda su fertilidad para
un cultivo, la contaminación por hidrocarburos en los talleres mecánicos aparte
de contaminar el suelo está afectando a la salud pública aledañas a la zona
debido a la toxicidad que tiene el hidrocarburo, pero en su mayoría las personas
que sufren más de alguna enfermedad crónica son las personas que laboran en
el taller mecánica, ya que estas personas día a día están en contacto con estas
sustancias. (Márquez‐Romance, et al., 2022) menciona, debido a los grandes
impactos ambientales ocasionados por el hidrocarburo en los últimos años se
vienen realizando biorremediación de suelos usando diferentes métodos de
biorremediación, como por ejemplo mediante el método de lavado de suelos, el
uso de bacterias biodegradables, así como también el uso del biocarbon a base
de diferentes tipos de residuos. Según (Singh, et al., 2022) indica, la
biorremediación de suelo contaminado por hidrocarburos totales mediante el uso
del biocarbon en los últimos años se vuelto un método muy accesible para la
recuperación del suelo contaminado debido a su bajo costo, ya que el biocarbon
se puede realizar a base de diferentes tipos de materia prima como es estiércol
de gallina, residuos domésticos, residuos vegetales y entre otros, este método
se ha vuelto muy beneficioso debido a que el biocarbon funciona como
adsorbente del hidrocarburos u otro tipo de metales químicos que contamina el
suelo, ya que este es un material muy poroso el cual hace que los contaminantes
se adhieran al poro del biocarbon y pierdan su estructura. Rodríguez-Uribe, et
al. (2021) menciona, el método que en los últimos años se viene realizando en
gran extensión es la bioestimulación asistida por el biocarbon, ya que este
método aparte de ser una buena vía de biorremediación para un suelo
contaminado es muy rentable debido al bajo costo, la bioestimulacion asistida
por el biocarbon funciona juntamente con las bacterias oriundos del suelo, es
12
decir con la incorporación del biocarbon se busca plurificar las bacterias nativas
los cuales funcionaran como los degradadores del contaminante no obstante
esto si se busca tener buenos resultados se puede incorporar algunos
fertilizantes que ayuden en la plurificacion de la bacteria nativa. Rivas, et al.,
(2014) menciona, para una buena bioestimulacion en la biodegradación de un
suelo contaminado con TPH, lo recomendable es añadir un fertilizante que ayude
en la recuperación de las colonias microorganismos del suelo, ya que si se tiene
más bacterias nativas la degradación del contaminante será aún más rápida y
en gran cantidad. Consecuente a ello en esta investigación biorremedio suelo
de un taller mecánica contaminados por todos los derivados del TPH, mediante
el método de bioestimulacion asistida por el biocarbon de estiércol de gallina el
cual funciono como enmienda y estimulante de las bacterias nativas, ya que el
degradador del hidrocarburo total fue las bacterias nativas presentes en el suelo
contaminado para el cual se buscó la purificación de las bacterias con la
incorporación de la solución A y la solución B que son ricos en nitrógeno, zinc,
fosforo y potasio los que son buenos nutrientes para la bioestimulacion de las
bacterias nativas.
Justificación: el presente desarrollo de investigación, propone la

utilización del biochar del estiércol de gallinas, para biorremediar suelos
contaminados por hidrocarburos donde utilizamos fertilizantes siendo la solución
A y la solución B que permitió observar cómo esta se recuperaba en todo su
proceso del tratamiento. Se debe considerar las siguientes justificaciones:
justificación Social, los suelos contaminados con hidrocarburos son altamente
tóxicos, por lo que perjudican a la salud de las personas, ocasionándoles
diversas enfermedades, como dificultad en la respiración, males estomacales, lo
que se soluciona utilizando este método de biorremediación donde el biochar no
genera olores ni descomposición alguna tampoco genera gases que atente
contra el ambiente, obteniéndose una calidad de vida, justificación económica,
la biorremediación mediante el aprovechamiento del biocarbon aparte de ser un
buen biorremediador es muy económico ya que este material se puede realizar
a base de diferentes materiales primas es decir de cualquier tipo de residuos,
justificación ambiental, El biochar en el suelo contaminado va a funcionar como
un sumidero de carbono, no permitiendo la generación del dióxido de carbono
13
gas de efecto invernadero, se recupera nutrientes y macronutrientes, mejorando
el suelo, y podamos tener un suelo sostenible, (Zhao, et al. 2016).
problema general:
PG: ¿Cómo la bioestimulación asistida por biocarbon de estiércol de

gallinas degrada la contaminación de hidrocarburos totales de petróleo en el
suelo?
problemas específicos:
PE1: ¿Cuáles serán las propiedades físicas del biocarbon del estiércol
de gallina para reducir el hidrocarburo de petróleo en el suelo contaminado?
PE2: ¿Cuáles son las presuntas bacterias presentes en el suelo

contaminado por hidrocarburos totales antes y durante el proceso?
PE3: ¿Cuáles serán las características físicas y químicas del suelo

contaminado con hidrocarburo antes y después del tratamiento con el biocarbon
del estiércol de gallina?
PE4: ¿Cuál será las dosis óptimas del biocarbon del estiércol de gallina
para disminuir la concentración del hidrocarburo total en las pilas de suelo
contaminado?
objetivo general:
OG: Evaluar la bioestimulación asistida por biocarbon de estiércol de
gallinas en la degradación de la contaminación de hidrocarburos totales de
petróleo en el suelo Lima- Jicamarca 2022
objetivos específicos:
OE1: Analizar las propiedades físicas del biocarbon del estiércol de gallina para
reducir los hidrocarburos totales de petróleo en el suelo contaminado.
OE2: Analizar las presuntas bacterias presentes en el suelo contaminado de

hidrocarburos totales antes y durante el proceso
14
OE3: Analizar las características físicas y químicas del suelo contaminado con
hidrocarburo antes y después del tratamiento con el biocarbon de estiércol de
gallina
OE4: Analizar la dosis óptima del biocarbon de estiércol de gallina en la
reducción de la concentración del hidrocarburo total en las pilas de suelo
contaminado
Hipótesis General:
HG: La bioestimulación asistida por biocarbon de estiércol de gallinas
influirá en la degradación de los hidrocarburos totales de petróleo en el suelo
Jicamarca-Lima 2022.
Hipótesis específicas:
H1: Las propiedades físicas del biocarbon del estiércol de gallina mejora
los parámetros del suelo contaminado con hidrocarburos.
H2: La determinación de las presuntas bacterias presentes en el suelo
contaminado con hidrocarburos totales de petróleo resulta significativa durante
el proceso.
H3: Las características físicas y químicas del suelo contaminado mejoran
un 54% después del tratamiento con el estiércol de gallina
H4: La dosis del estiércol de gallina disminuye la concentración del
hidrocarburo total en las pilas de suelo contaminado.
15
16
II. MARCO TEÓRICO
Liu, et al., (2019) realizo tres tipos de biocarbon, siendo la primera materia prima
el estiércol de pollo, la segunda la paja de trigo y como tercero aserrín de madera,
los cuales fueron pirolizados a una temperatura de 600°C, estos materiales fueron
utilizados para la remediación del suelos contaminados con TPH, la biodegracion
del suelo contaminado con TPH duro 223 días, teniendo como resultado final, en la
mayor degradación de hidrocarburos total de petróleo presentes en el suelo se
produjo con el biocarbon del estiércol de pollo, y el que tuvo menor eficiencia en la
degradación de los hidrocarburos fue el biocarbon abases del aserrín de madera.
Barati, et al., (2017) realizo la comparación de dos enmiendas siendo del

estiércol fresco de gallinas y el biocarbon a base de la misma materia prima, para el
cual utilizo como indicador a la ceba, este tratamiento fue realizando durante cinco
meses todo este tratamientos fueron realizado bajo un invernadero, finalmente
teniendo como resultado los suelos con plantas de ceba tuvieron mayor grado de
eficiencia en la degradación del hidrocarburo y en la respiración de comunidad
microbiana, mientras que el suelo sin un cultivo no tuvo buenos resultados,
concluyendo en la degradación del hidrocarburo total el suelo con tratamiento de
estiércol fresco junto con la comunidad microbiana degradaron en un 15,64 y un
12,74% y el tratamiento con el biocarbon a base de estiércol de gallina y las
bacterias nativas degradaron en un 28,07 y un 26,86%, algo que el suelo sin ningún
tipo de tratamiento solo tuvo un 4% de degradación de hidrocarburos totales.
Aziz, et al., (2020) para su trabajo de investigación realizo biocarbon a partir de

los residuos de frutas, verduras y lodos de depuradora para el cual utilizo un
enfoque térmico, siendo su aplicación para la biodegradación de suelos
contaminados por hidrocarburos totales mediante los métodos de bioaumentacion y
bioestimulacion, para el cual la caracterización del biocarbon se realizó mediante la
espectroscopia infrarroja transformada de Fourier, donde se realizaron los análisis
de área superficial y el análisis de poros, en la investigación se pudo ver la eficiencia
del biocarbon en la recuperación de suelos contaminados, teniendo como resultado
de la investigación el 82% de degradación del contaminante fue realizado mediante
la bioaumentacion con el estiércol de vaca siendo así que donde ubo mayor
degradación de hidrocarburos.
17
se tuvo mayor presencia de bacterias nativas que ayudaron en la degradación del
hidrocarburo total, esta investigación concluyo destacando que la enmiendas
mediante el biocarbon tiene un alto grado en degradación del hidrocarburo total
presentes en el suelo.
Deebika, et al., (2021) investigo la degradación de los hidrocarburos totales en

el suelo mediante la aplicación del biocarbon a base de estiércol de gallina y el
compost de vegetales y la presencia de las bacterias nativas del suelo, para el cual
el experimento tuvo como indicador a la planta de la marihuana quienes fueron
sembradas en macetas de plásticos y para retener la filtración del agua de riego de
cada maseta se utilizó el biocarbon ya que este material es un compuesto muy
poroso y ayuda en la retención del agua y en la degradación del hidrocarburo total, el
experimento tuvo un tiempo de tres meses de tratamiento en él se llegó a observar
que el biocarbon junto al compost realizaron la degradación del hidrocarburo en
62,2% y 77.1%, concluyendo que el biocarbon es un material prima muy beneficioso
y accesible en la descontaminación de suelos contaminados por hidrocarburos
totales.
Saeed, et al. (2021) en su trabajo de investigación realizo bioestimulacion

asistida por el biocarbon para la biorremediación del suelo contaminado por
hidrocarburos total de petróleo, donde identifico bacterias nativas con diferentes
tipos de agares, en el cual inicialmente carecía de bacterias, pero todo fue
cambiando según el tiempo de tratamiento ya que las bacterias aumento en 10 y 8
veces más el cual iso que el hidrocarburo se degrade en un 41% de la
concentración, todo esta degradación fue realizada en tiempo de 40 días,
concluyendo que el biocarbon es un gran adsorbente y un buen estimulante para el
crecimiento de las colonias bacterianas del suelo.
Hussain, et al., (2022) realizo la biorremediación del suelo contaminado por

hidrocarburo mediante el biocarbon de residuos vegetales, el compost del mismo
material y las bacterias nativas, donde se obtuvieron resultados muy satisfactorios
pero con porcentajes de degradación distintos para cada tratamiento, él tuvo una
duración de 3 meses, donde se tuvo mayor degradación del 40% en la combinación
de los tres insumos que fueron biocarbon de residuos vegetales, compost de residuos
y la presencia de las bacterias nativas en el suelo y la segunda muestra que tuvo
una degradación notable fue la muestra
18
que contenía el biocarbon el cual tuvo una degradación de 36%, en esta
investigación se pudo destacar que el biocarbon junto a otras enmiendas ayudo
mucho en la degradación de hidrocarburo, así como también cabe mencionar que el
biocarbon es un material muy recomendable para biorremediación de suelos
contaminados por hidrocarburos totales.
Zhang, et al., (2019) realizo biorremediación de suelos contaminado por

hidrocarburo total utilizando como enmienda al biocarbon de hongo seco y
incorporación de las bacterias presentes en suelo, los cuales fueron aisladas y
cultivadas para luego volverlos al suelo junto al biocarbon, si bien se sabe el
biocarbon es un gran adsorbente de un contaminante presentes en el suelo, en
este trabajo se estudió a las bacterias degradadoras de hidrocarburos, las cuales
fueron involucrados en el biocarbon para luego tratar al suelo contaminado, este
estudio fue realizado por un tiempo de 60 días donde se tuvo un resultado
favorable, el suelo tratado con estos compuestos realizaron una degradación de
hidrocarburo total y el n-alcanos presentes en C12-18, este estudio demostró que
el biocarbon junto a las bacterias inmovilizadas realizaron una buena
biorremediación del suelo haciendo que este suelo recupere su fertilidad para el
cultivo.
Mierzwa-Hersztek, et al., (2018) realizo biocarbon con la cama de las aves, los
que fueron usados en la biorremediación de suelos contaminados por hidrocarburos
totales, para el cual la identificación de los hidrocarburos presentes en el suelo
realizo mediante el método de gravimetría el cual permio ver el nivel de
contaminación tenía el suelo que remedio, para el cual utilizo biocarbon del
estiércol de las aves como fuente estimulante para la reproducción de las bacterias
presentes en el suelo ya que las bacterias y el biocarbon fueron los que tuvieron
gran eficiencia en la degradación del hidrocarburo total, para el cual aplicaron 2,5kg
de biocarbon en sus muestras de tratamiento, donde finalmente en tiempo de 3
meses lograron degradar el hidrocarburo en un 34%, esto quiere decir que el
biocarbon de la cama de las aves que funciono como enmiendo degradaron y un
gran adsorbente de hidrocarburo presente en el suelo.
19
Abangadura, et al., (2022) investigo cómo influye la aplicación de biocarbon de
estiércol de aves de campo y estiércol de aves de campo en la biorremediación de
suelos contaminados por hidrocarburos, ya que el biocarbon fue aplicada como
enmienda para la mejora del suelo en el contenido de carbono orgánico del suelo y la
productividad de las plantas para el cual el experimento se realizó con cultivos de
plantas donde se buscaba ver la producción de las plantas en el suelo contaminado
y suelo con tratamiento, este tratamiento tuvo una duración de 12 meses donde se
vieron que la muestras con tratamiento es decir el suelo con el biocarbon tuvo una
degradación del hidrocarburo en un 26% y el suelo con estiércol de campo en un
24% y suelo sin tratamiento 0%, concluyendo que el mayor degradante del
hidrocarburo fue el biocarbon de estiércol de aves y también vieron que en la
muestra ubo más reproducción del cultivo es decir del indicador.
Ji, et al., (2022) nos indica la manera de preparar el biocarbon a base de estiércol
de pollo, para el cual la primera etapa fue realizar el secado a temperatura
ambiente para luego ser pasado por una estufa de 60°C por 12h, seguidamente se
realizó la pirolizacion donde se probaron varias temperaturas para su pirolización
llegando a las temperaturas de 400°C, 500°C, 600°C, 700°C y 800°C donde se
tuvieron resultados muy distintos, pero donde se llegó obtener el biocarbon de dicha
materia prima fue en los 400°C por un tiempo de 3 horas, los cuales fueron triturados
y tamizados para ser aplicados en la biorremediación deun suelo contaminado.
Guo, et al., (2022) la pirólisis del biocarbon se puede realizar en diferentes

tiempos y temperaturas, estas se pueden realizar en una pirolisis lenta, pirólisis
rápida, pirólisis intermedia y pirólisis flash, por el cual esta investigación procedió
realizar la pirólisis intermedia, el Biocarbon se realizó a partir de una muestra seca
la que se depositó en el reactor anaerobio, sin presencia de oxígeno, en las primeras
2 horas se alcanzó a la temperatura de 100°C, posteriormente entre la tercera y
cuarta hora se llega a la temperatura de 200°C y finalmente en la quinta hora se llegó
a una temperatura de 300°C, donde se obtuvo el biocarbon de estiércol de gallina,
siendo luego lavados y secados en estufa a 100 °C por 1 hora, para luego ser
demolidos hasta la malla -90mm ya que mientras las partículas de biocarbon sean
más pequeñas tendrán mayor adsorción.
20
Quang, et al., (2022) menciona, para la producción del biocarbon del estiércol de
pollo recogido de una granja se secó a temperatura ambiente por un tiempo de 15
días, los cuales pasaron a secar a una estufa a 100°C durante una hora para luego
ser pirolizado en reactor aeróbico a una temperatura de 500°C por un tiempo de 4
horas en los que se obtuvo el biocarbon, consecuentemente se realizó la trituración
del biocarbon a un tamaño de 2mm, para luego ser aplicados para la biorremediación
del suelo contaminado por hidrocarburos de petróleo, donde finalmente se tuvo una
degradación del hidrocarburo en 52% esto quiere decir que el tamaño y el método de
pirolisis del biocarbon tuvo buenos resultadosen la degradación del contaminante.
Teorías relacionadas al tema. El Biocarbón; según, (Lataf, et al., 2022) el

biocarbon es un material poroso y adsorbente para cualquier tipo de contaminante
que puede estar presente en el suelo, este material se pirolizado a altos grados de
temperatura y con oxigeno moderado para evitar la incineración completa ya que la
presencia del oxígeno puede ocasionar que el biocarbon se convierta en ceniza.
Por otro lado, (Zhang, et al., (2022) menciona, que el biocarbon es un buen
adsorbente para cualquier tipo de metal pesado presentes en el suelo en específico
para los hidrocarburos totales ya que el biocarbon funciona como un sumidero e
bioestimulante para las bacterias presentes que degradan el hidrocarburo. Según,
(Jingqin, et al., 2022) el biocarbon es producto del proceso de pirolisis, se caracteriza
por capturar carbono del suelo, asimismo adsorbe contaminantes metálicos.
Controla la movilidad y disminuye la toxicidad del contaminante, esto está
demostrado por distintos estudios lo efectivo que resulta el biochar para remover
metales pesados, por ello su aplicación contribuye a la problemática de la
Contaminación por metales pesados.
21
Figura1. Adsorción de biocarbon
Fuente: Sol, et al., (2022).
Respecto a la producción del biocarbon (carbón vegetal). La pirolisis del
biocarbon es el proceso termoquímico empleado para la transformación de la
biomasa de cualquier tipo de materia prima, esta materia prima será quemado en
un reactor con poca presencia del oxígeno, por el cual se le conoce como secuestro
del oxígeno (Abangadura, et al., 2022).
(Guo, et at., 2022) el biocarbon o carbón vegetal se produce a partir de
diferentes tipos de materia prima es por ende que su costo es demasiado bajo, la
producción del pirolisis según los estudios realizado se puede realizar en diferentes
tiempos y temperaturas ya que para la producción del biocarbon se tiene la pirolisis
rápido, pirolisis intermedio y al pirolisis flash ya que en estos métodos se puede
obtener biocarbon, pero para esto depende mucho la textura de la materia prima
que se va pirolizar y según el material se puede aplicar los métodos mencionados.
Tipos de pirolisis. La producción del biocarbon tiene diferentes métodos de
pirolización siendo las diferencias en la temperatura y en el tiempo, la producción del
biocarbon se puede realizar a base de muchos materiales, por lo tanto, su costo es
muy rentable (Guo, et at., 2022).
22
tabla 1. Parámetros de operación y distribución de productos de
diferentes procesos termoquímicos de biomasa.
velocidad tamaño de rendimien

tipos de temperatura de tiempo alimentaci to de
procesos de reacción calentamie de ón biocarbon
termoquímico °C nto residen (mm) (%)
s C/min) cia
pirólisis lento 400 - 500 5a7 >1h 5 a 50 25 a 35
pirólisis rápido 850 - 1250 6000- >2s <1 10 a 25
pirólisis 400-650 60 - 600 10 - 30s 1a5 25 a 40
intermedio
pirólisis flash >1000 >60,000 >1s <0.5 10 a 25
gasificación >500 1 a 50 10 - 20s 0.2 - 10 5 a 10
Fuente: (Guo, et at., 2022).
La pirolisis lenta se realiza con temperaturas bajas que alcanza de 5 a 7°C/min
como un tiempo de resistencia de 1 hora y más llegando a la temperatura de
calentamiento de 300 – 800°C aproximado, en el proceso de la pirolisis el vapor
permanece en el reactor y la fase gaseosa permanece por mucho tiempo, el cual
hace que la producción de la pirolisis sea favorable (Liu etal., 2015).
La pirolisis rápida es el procedimiento donde se realiza la pirolisis a base de

diferentes materias primas, la pirolisis se puede realizar al aire libre es decir con la
presencia del oxígeno, la pirolisis rápida tiene un calentamiento elevado que
sobrepasa los 100°C /min, ya que este tipo de pirolisis se puede realizar un tiempo
corto por su elevada temperatura hace que la biomasa se incinere más rápido ya
que la temperatura suele ser de los 400°C – 600°C en un corto tiempo (Guo, et at.,
2022).
La pirolisis intermedia es la combinación de la pirolisis lenta y la pirolisis rápida,

donde se utilizan generalmente las temperaturas de 300°C – 600°C para producción
del biocarbon, para el cual se cuenta con un tiempo de 2 – 4s de resistencia de
vapor, la pirolisis intermedia es el proceso más recomendable en la producción de
un biocarbon ya que en este procedimiento se puede tener un biocarbon más
poroso (Guo, et at., 2022).
La pirolisis flash es similar a la pirolisis rápida con diferencia de temperatura y

tiempo, así como el mismo nombre lo dice este de pirolisis se puede realizar en un
menor tiempo con altos grados de temperatura el cual es mayor de 100°C/s con una
temperatura de 900°C – 1300°C para el cual las partículas de la materia prima son
23
más pequeñas con un aproximado de 105 – 250um (Guo, et at., 2022).
Considerando las propiedades fisicoquímicas del biocarbon, las características

fisicoquímicas del biocarbon también depende del método de pirolisis, ya que si se
realiza a temperaturas altas aumenta la microporosidad del biocarbon, así como
también depende mucho del tipo de materia que se realiza es decir la estructura de
la materia prima influye mucho en el tipo de textura del biocarbon (Bao, et al.,
2020).
El pH del biocarbon: El pH del biocarbon varía dependiendo de la temperatura

en que realizo, así como también influye mucho en el pH el tipo de material que se
utilizó en la producción del biocarbon si el biochar se produce a altas
temperaturas y con materia vegetal el pH será elevado (Bian, et al., 2019).
La capacidad de intercambio catiónico: La CIC tiene una capacidad muy

variable y va de unas cuentas unidades hasta 40 cm kg-1 producto de la química
superficial. Esta puede resultar baja cuando se utiliza en la pirolisis temperaturas
bajas, pero se incrementa cuando se trabaja a temperaturas más altas (Guo, et al.,
2022)
La conductividad eléctrica o solidos totales disueltos (ms/cm): Es la media

del contenido de las sales disueltas presentes en el biochar, es decir si el biocarbon
tiene ceniza en gran cantidad tendrá la probabilidad de alzar los SDT puesto que las
sales presentes en el biocarbon se miden como ceniza (Liu et al.,2015).
El tamaño de partícula: Este depende mucho de tipo de material que se utiliza

en la producción del biocarbon, ya que si se realiza la pirolisis de un material con
partículas de buen tamaño se tendrá que realizar la trituración en más pequeñas ya
que este fue procesado a grandes temperaturas y menor tiempo el cual hace que el
biocarbon será aún más porosa (Liu, et al., 2015).
El área de superficie: Se llama área de superficie a la unidad de masa, el cual

constituye a la suma del área de superficie para formar un gramo de material, el área
de superficie y la porosidad influyen mucho en la capacidad de adsorción que el
biocarbon ante un contamínate (Lataf, et al., 2022).
La Bioestimulación, es la bioaumentacion de las bacterias presentes en el

suelo mediante la aplicación de un nutriente que ayude en la plurificacion de las
24
dichas bacterias, el nutriente que se le añade al suelo contaminado tienen que ser
ricos en nitrógeno, fosforo, carbono y potación ya que estos nutrientes serán los
bioestimulantes en la regeneración de las bacterias es decir la parte microbiana del
suelo con la incorporación del nutriente se multiplicara en gran cantidad y estas
actuaron con los degradadores del contaminante y lo convertirá en un producto
menos toxico (Xiong, et al., 2017).
Dinámica de microorganismos en procesos de bioestimulación. Los

microorganismos del suelo en la bioestimulacion para la remediación de un suelo
contaminado, tomaran el control en la degradación del contaminante, ya que son
estimulados mediante dos o más compuesto que hacen que se plurifiquen en gran
cantidad y realizan la degradación del contaminante del suelo, ya las bacterias
degradan a la sustancia toxica hasta convertirlo en un producto inocuos o también
llamado compuesto menos toxico para el suelo (Wei, et al., 2020).
Tipo de microorganismos. Según Bao, et al., (2020) los microorganismos vivos
del suelo tienen diversa formas y tamaños, como los lombrices, insectos y
pequeñas bacterias que ayudan al desarrollo de las plantas y a la descomposición
de algún animal en descomposición en suelo, en el cual las bacterias ayudan en la
descomposición liberando nutrientes para el suelo, el cual hace que una planta se
desarrolló.
Identificación de microorganismo. La identificación de las bacterias se realiza
mediante el aislamiento con la finalidad de obtener las cepas de bacterias puras, y los
medios apropiados para la aislación de estas principalmente usando las sales
minerales modificado (vandera & koukkou, 2017). Todo este procedimiento se realiza
en laboratorio especializado, donde se hace las transferencias de las bacterias de
su ambiente a otro espacio que tenga todo lo necesario para el desarrollo de la
bacteria, para su posterior identificación, donde se podrían encontrar a las
siguientes bacterias.
25
Figura2. Bacterias presentes en el suelo con TPH
Características de microorganismos. Macroscópica. Este procedimiento es

útil para la poder ver la presencia de las bacterias de gram negativo y gram
positivo los cuales se distinguirán por el color, el tamaño, forma, etc. diana, et
al., (2020).
Microscópica, como Tinción gram. Es el procedimiento más importante para

la identificación de las bacterias ya que este procedimiento permite saber la
presencia de las bacterias de gram negativo o gram positivo, ya que mediante
este procedimiento se puede verificar la presencia de estas dos bacterias
presentes en una membrana (Hidalgo et al., 2020).
Una vez realizada la tinción de gram se observará en un microscopio con

los diferentes lentes (10X,40X y 100X), para el cual se le añadirá aceite de
inversión quien facilitará la verificación de las bacterias de gram (-) y (+) diana,
et al., (2020).
Figura3. Identificación de las bacterias de gram (-) y (+)

Fuente: diana, et al., (2020)
Metabolismo de degradación del hidrocarburo presente en el suelo
Para realizar la degradación del hidrocarburo mediante la estimulación se
necesita trabajar con las bacterias aeróbicas presentes en el suelo, para ello es
necesario la presencia del oxígeno molecular, que este facilite la oxidación del
hidrocarburo, ya que como resultado se tendrá un bi-producto enzimático
multicomponente conocido como cis-dihidrioles, finalmente son divididos por la
oxigenasas en los anillos intradiol o extradiol, para luego juntarse por una via de
orto-escisión o meta-escisión, que correlaciona para la formación de los
26
productos intermedios centrales ( protocatecuato y catecoles) conocido como los
precursores del ciclo del ácido tricarboxilico (Vandera, E., & Koukkou, A. I. 2017).
Figura4. Ruta de degradación del hidrocarburo por

bacterias
Fuente: Vandera, E., & Koukkou, A. I. (2017)
Hidrocarburos totales de petróleo en el suelo. Todos los derivados del

hidrocarburo usados por la humanidad en las diferentes industrias en los últimos
años vienen afectando notoriamente a la estructura del suelo, consecuencia a
ello los cultivos no pueden desarrollarse ya que ellos adsorben el hidrocarburo
del suelo, y esto afecta a los cultivos por su alta toxicidad el cual hace que el
suelo pierda los nutrientes como el potasio, sodio, sulfato y el nitrato,
consecuente a ello el suelo se expone a la lixiviación y a la degradación,
consecuencia a ello el suelo pierde su fertilidad para un cultivo (Barati, et al.,
2017). La presencia del hidrocarburo en el suelo hace que se pierda la
permeabilidad, la compactación debido al exceso de aceite en el suelo.
Metodología para determinar El TPH presente en el Suelo. Para determinar

el nivel de concentración del hidrocarburo se puede realizar mediante muestras
húmedas pero lo más apropiado seria sacarlos y homogenizarse en su totalidad
(Patel et al., 2020).
27
Extracción del hidrocarburo. Los métodos más usados para la extracción del
hidrocarburo.
• Extracción por soxhlet o reflujo. Es la técnica que más se utiliza para

la extracción del hidrocarburo ya sea volátiles o semivolatiles. (Valencia,
et al ., 2011) indica, este método permite tener los resultados en óptimos
de la muestra del solvente de extracción , pero sin embargo para el
solvente de los compuestos orgánicos es necesario contar con una
muestra con partículas de menor tamaño. (Almonte, et al., 2019) indica,
para el método de extracción de soxhlet es necesario tener el solvente
apropiado y que tenga una afinidad en la muestra y baja afinidad por la
muestra , este debe tener un alto grado de volatilidad para poder ser
removidos con facilidad finalmente, ya que método por extracción de
soxhlet tiene la eficiencia en la extracción en 80% pero con una limitación
por la cantidad de muestra y el tiempo.
Figura5. Extracción por soxhlet o reflujo

Fuente:
https://www.dequimica.info/extraccion-
solido-liquido/
28
Extracción por agitación – centrifugado. Este método es lo más económico
debido a se puede analizar mayor cantidad de muestras al mismo tiempo, debido
a que lo realiza en menor tiempo, con varias muestras y por la cantidad de
solventes que se utiliza, es decir se puede tener los resultados en menor tiempo
(Almonte, et al., 2019).
Fraccionamiento del hidrocarburo. El fraccionamiento del hidrocarburo es

muy necesario ya que permite verificar el tipo de hidrocarburos que se tiene en
la muestra que se está analizando. Además, este método realiza la identificación
de los hidrocarburos por fraccionamiento en una columna empacada con materia
altamente porosos y granular teniendo al pH neutro, separando las fracciones de
los compuestos alifatos es decir se puede analizar por cada fracción teniendo a
la F1, aromáticos F2 y nitrogenados f3 de petróleo (Anticona, et al., 2021).
tabla 2. Fracciones principales del hidrocarburo
FRACCIONES PRINCIPALES DE UN CRUDO TIPICO

RANGO DE
FRACCIONES COMPOSICION EBULLICION (°) USOS
Gas C1-C4 O-30 Combustible gaseoso
Compuestos volátiles C5-C6 30-60 Solvente
Gasolina C6-C9 70-150 Combustible para motores
Combustible para reactores,
Querosene C10-C12 160-240
petróleo combustible
combustible diésel, reserva
ACPM (gas-oíl) C13-C16 250-300
para cracking
Aceite lubricante, aceite
lubricantes (aceites de C16-C20 300-450
mineral, reserva para
cera)
cracking
Fuel-oíl (pesado) C20-C30 450-600 Aceite para carreteras,
asfalto
papel encerado, velas, alquitrán
Residuo Mayor de C30 Mas de 600
para techos, asfaltos,
impermeabilizantes
Fuente: https://www.emaze.com/@AOOITQTIL
Cuantificación de los hidrocarburos. El método de gravimetría es lo más

recomendado para muestras que contengan aceites y grasos como es el TPH
ya sea en una muestra de suelo o en una muestra de agua (Anticona, et al.,
2021).
Métodos analíticos. Espectroscopia de infrarrojo (IR): En este método se

puede tener los resultados en poco tiempo y con un bajo costo, pero hay una
29
cierta ocasión se presentan ciertas limitaciones en cuanto a la precisión de los
resultados, estas limitaciones mayormente se tiene las muestras que no está
bien homogenizadas. Cromatografía de gases (CG): Este método clasifica los
compuestos que tiene la materia orgánica o los compuestos generados en el
tratamiento, por el cual el hidrocarburo es extraído por los solventes y
decantados mediante el método de cromatografía de gases, donde se podrá
verificar el tipo de hidrocarburos que se tiene presente en la muestra (Almonte,
et al., 2019).
Isotermas de adsorción Isotermas de adsorción de Freunchlich. El modelo

de freunchlich es lo más recomendable para la superficie heterogéneas ya que
preside un aumento en la parte iónicas adsorbidas de la superficie del solido esto
ocurre debido al aumento en las concentraciones de las especies que se
encuentran en la etapa liquida, este método hace que la energía de adsorción
disminuya en la parte final de los centros de adsorción (Rivas, et al., 2022).
Isotermas de adsorción de Langmuir. El método de Langmuir tiene la

metodología de que todos los sitios de adsorción son iguales de activos, si bien
se sabe la superficie es energéticamente homogénea donde se forma coberturas
de superficies monocapa sin ninguna interacción entre moléculas adsorbidas, ya
que también hay cambio de energías libres en todos los sitios de adsorción
donde no interacción de adsorbente- adsorbato (De Los Santos, et al., 2019).
30
III. METODOLOGÍA
3.1. Tipo, diseño y nivel de investigación

3.1.1. Tipo de Investigación
La investigación propone un estudio de tipo aplicado con un enfoque

cuantitativo según, (Fuentes, et al., 2020) se manipula una variable
independiente esperando un efecto en la variable dependiente, para el cual se
realiza tratamientos antes, durante y después del experimento, donde se emplea
ciertas teorías para convertirlos en conocimientos prácticos que resuelvan los
problemas.
La investigación es de tipo aplicada, ya que se realizará bioestimulacion a

un suelo contaminado por hidrocarburos totales de petróleo, para lo que se usó
como enmienda al biocarbon de estiércol de gallina el cual hace que las bacterias
nativas se desarrollen con más facilidad y degraden el hidrocarburo total de
petróleo, en cuanto al enfoque de la investigación es de tipo cuantitativa, por lo
que se obtuvo resultados a través de los tratamientos que se realizaron en cada
una de sus etapas.
3.1.2. Diseño de investigación
La investigación tuvo un diseño experimental, según (Hernández, et al.,

2019) hacen referencia a un estudio donde se manipulan las Variables
Independientes para poder realizar el análisis de los resultados.
La investigación es experimental, debido a que se realizó un estudio a los

suelos contaminados con hidrocarburo mediante la aplicación del biocarbon de
estiércol de gallina (BEG) el cual funciono como enmienda, en ese sentido, se
31
utilizaron distintas informaciones y conocimientos sobre el BEG y las bacterias
nativas del suelo, para el cual se realizó pruebas antes, durante y después del
experimento, las muestras se seleccionaron al azar para ser analizados en una
preprueba y posprueba.
3.2. Variables y Operacionalización

Variables: Son todos los cambios que se originan cuando estas llegan a
interactuar con la finalidad de conseguir objetivos positivos.
3.2.1. Variable Independiente:
• Bioestimulación asistida por biocarbon
3.2.2. Variable Dependiente:
• remediación de suelos contaminados por hidrocarburos totales de

petróleo.
3.3. Población, muestra y muestreo

3.3.1.- Población
Se dice población inferencia, a un grupo de unidades de estudio

conformados por sujetos u objetos los que tienen un característica observable o
reacción que pueda expresarse en un estudio de interés (Fuentes, et al., (2020).
La población de la investigación está conformada por los 100m 2 de suelo

contaminado con hidrocarburo total de petróleo dentro del taller mecánico, de
Jicamarca, y está ubicado en el distrito de Huarochirí del departamento de Lima,
de donde se extrajo la muestra.
Criterio de inclusión: suelos contaminados por hidrocarburos
Criterio de exclusión: partículas y residuos sólidos presentes en el suelo

contaminado
3.3.2.- Muestra
32
Esta es un grupo de poblaciones, en el que se realizara investigación para
el cual se tiene para conseguir la cantidad de un componente para la muestra,
que consiste un conjunto de reglas para la selección de la muestra, la muestra
es la parte más significativa de una población, (Hernández, et al., 2019).
La presente investigación realizó la recolección de la muestra de acuerdo a la

guía de muestreo de suelos, del decreto supremo 011 – 2017 MINAM, la
recolección de la muestra se realizó en el taller mecánica ubicada en la localidad
de Jicamarca del distrito de Huarochirí, en una área de 100m 2, en los que se
realizaron 50 hoyos de 10 cm de profundidad con diámetro 15 cm según la guía
de muestreo de suelos, de los cuales se tomaron 4 kg de muestra por cada hoyo
obteniendo 200 kg de muestra y posteriormente fue homogenizada y cuarteada
para así obtener la muestra representativo y ser conducidos al laboratorio donde
se realizará la medición de los parámetros físico químicos del suelo.
fuente: google maps

https://www.google.com/maps/place/San+Antonio+de+C
Figura6. Área de estudio
3.3.3.- Muestreo
En cuanto al muestreo es probabilístico, el método que se emplea para la

clasificación de la muestra general de la población se rige bajo ciertos conjuntos
de reglas, procedimientos y criterios los que permiten la selección del conjunto
de la población el cual representara lo que sucede en toda la población
(Hernández, et al., 2019).
33
El muestreo de la investigación es de tipo probabilístico, debido a que las
unidades tienen las probabilidades para la selección y recolección de las
muestras representativas, la cual se desarrollaron utilizando el método de
homogenización y cuarteo, consecuente a ello la presente investigación realizo
el muestreo de acuerdo a la guía de muestreo de suelos, del decreto supremo
011 – 2017 MINAN, la que fue homogenizada y cuarteada para así obtener la
muestra representativo que fueron distribuidas en 4 pilas.
3.4. Técnicas e instrumentos de recolección de datos

3.4.1. Técnica de la Investigación
La técnica observación se refiere a toda investigación ligada a verificar todos
los cambios que ocurre durante el transcurso de un trabajo, con el fin de probar
la hipótesis planteada (Kazdin, et al.,2001).
La técnica que se empleó para el desarrollo de la investigación fue la

observacional, debido a que se analizó todos los cambios que ocurrió durante la
biorremediación del suelo contaminado con TPH, por el cual estas muestras
fueron analizados desde la toma de muestra hasta los tiempos del tratamiento
para obtener respuestas fiables a los objetivos planteados
3.4.2. Instrumentos de recolección de datos
Los instrumentos que se utilizarán para la recolección de los datos serán

clasificados por registros en este caso se tendrá cinco registros.
Registro 1: Recolección de la muestra
Registro 2: Características físicas y químicas del suelo contaminado con

hidrocarburo antes y después del tratamiento
Registro 3: bacterias presentes en el suelo contaminado de hidrocarburos

totales antes y durante el proceso.
Registro 4: Las propiedades físicas del biocarbon del estiércol de gallina
Registro 5: Dosis del biocarbon de estiércol de gallina en la reducción de la

concentración del hidrocarburo total en las pilas de suelo contaminado.
34
3.5. Procedimientos
35
36
Figura7. procedimiento
3.5.1. RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA
• Ubicación de la zona de estudio
El suelo contaminado con hidrocarburos fue tomado del taller mecánica el

chino ubicado en de Jicamarca, del distrito de San Antonio, provincia de
Huarochirí del departamento de Lima.
tabla 3. Georreferenciación de la zona de estudio
Muestra Coordenadas UTM – WG84
GAT-JHL X: 285840 y: 8680405
Muestra Coordenadas geográficas en grados
GAT-JHL Longitud: 84° 17´54.43630¨
Latitud: 78°2´41.09051¨
GAT-JHL: Georreferenciación del área de toma de muestra – Jicamarca,

Huarochirí, Lima.
• Equipos y materiales para la toma de muestra
Equipos
01 balanza de 5 kilogramos
01 GPS
01 multiparámetro de campo
01 cinta métrica de 50 metros
01 equipo de protección personal
Materiales
01 lampa
01 barreta
100 bolsas de polietileno de media densidad
01 indeleble, sticker, pabilo.
05 sacos de 50 kilogramos.
37
• Muestreo de detalle toma de muestra de suelo con
hidrocarburo
La recolección de la muestra se realizó bajo la guía del D.S.
011 – 2017 MINAN, mediante el método sistemático de rejillas simples, bajo este
decreto supremo se realizaron hoyos de 10 cm de profundidad por 15 cm de
diámetro, para suelo industrial como son los talleres de mecánica, la recolección
de muestras se realizó en un área de 100m 2 , donde se realizaron 50 hoyos en
todo lo el perímetro del área, de los cuales se sacaron 4kg de muestra por cada
hoyo , logrando un peso de 200 kilogramos de muestra general los que fueron,
los que fueron conducidos al lugar donde se realizó el experimento, las muestras
fueron secados a temperatura ambiente para luego ser pasados por un tamiz de
0,2mm, obteniendo la muestra a tratar de 160kg los que fueron cuarteadas en
cuatro pilas para su tratamiento.
Figura8. cuarto de la muestra

Fuente: decreto supremo 011-2017 MINAM
Figura9. Colecta de suelo contaminado con hidrocarburo

Fuente: Elaboración propia
38
• Muestreo de Identificación
El muestreo de identificación fue tomado para poder tomar la decisión del
estudio, ya que este análisis nos permitió conocer que tanto estaba el
contaminante por encima de los valores de los estándares de calidad de suelo
(ECA de Suelo), con respecto al Decreto Supremo 017-2017 MINAN.
• Plan de descontaminación del suelo
Se conoce que los hidrocarburos en el suelo de los talleres de mecánica
son un riesgo para la salud de las personas como también para el ambiente, ya
que su exceso en suelo puede llegar a ocasionar alergias, como heridas
cancerígenas, además si estas se encuentran con suelos arenosos su infiltración
pudiera llegar a niveles freáticos contaminando el agua del sub suelo (Barati, et
al., 2017). por tal razón es importante realizar un sistema de gestión ambiental
para poder prevenir los impactos ambientales para lo cual se tomaron datos de
la guía de evaluación de riesgo a la salud y medio ambiente (ERSA).
3.5.2. Características fiscas y químicas del suelo contaminado con
hidrocarburo antes y después del tratamiento
• Temperatura (°C), Potencial de Hidrogeno (acido/base),

Conductividad eléctrica (mS/cm), Potencial redox (mV)
(Método Potenciométrico)
La evaluación se realizó obteniendo un extracto de suelo, en una relación de 1:2
para ponerlo en agitación rotacional a 30 rpm por 45” para luego dejarlo reposar
por 24h y realizar las mediciones.
• Humedad gravimétrica del suelo (HG%) (Norma ASTM D2216)
Nos proporciona cual es la cantidad de agua que retiene cuando el suelo se
encuentra contaminado con hidrocarburo y conocer como lo afecta.
Formula:
39
• Concentración de Hidrocarburo total (Método cromatografía
de gases)
El método de cromatografía de gases, es el método que determina los

compuestos volátiles de un suelo contaminado u otro tipo de muestra, esta
técnica utiliza la como fase un gas inerte el que arrastra los diferentes
componentes de la muestra atravez de una columna cromatográfica (Jareño-
Esteban, et al., 2013).
La presente investigación analizo la concentración del hidrocarburo volátil
de la muestra por el método de cromatografía de gases, donde se analizaron las
fracciones F1, F2 y F3 del hidrocarburo y la cantidad de cada carbono, ya que
estos análisis nos permitieron conocer que tanto estaba contaminante el suelo y
si sobrepasaba los valores de los estándares de calidad de suelo (ECA de
Suelo), con respecto al Decreto Supremo 017-2017 MINAM.
• Concentración de Hidrocarburo total (Método gravimétrico -
Extracción Soxhlet)
La concentración del hidrocarburo total, será extraído con hexano, por reflujo por
4 horas, para luego destilar la muestra y separar el hidrocarburo del solvente, y
luego colocarlo en la estufa y secar por 4 horas, enfriar y pesar el método será
físico.
Formula:
40
• Carbono Orgánico Total y materia Orgánica (%CO) (Método
Walkley – Black)
Se realizo para conocer como el hidrocarburo en un suelo contaminado
es influenciado en el equilibrio de carbono porque la cadena de hidrocarburo
tiene carbono, donde también hace cambios en la materia orgánica, su método
utiliza al dicromato de potasio 0.25 normal y terminando en una titulación de
volumetría con el indicador ferroina y la sal de Mohr como titulante.
• Capacidad de intercambio catiónico (CIC meq/100g) (método

del acetato de amonio – 1N pH7)
Se acondiciona la muestra a secar con temperatura ambiente por 24
horas, la que será analizo agregando al acetato de amonio en 25 ml, para
colocarlo en agitador magnético por 30 minutos, y así generar el extracto
necesario para evaluar el CIC, teniendo en cuenta que el método termina con
una titulación volumétrica con hidróxido de sodio y con un indicador la
fenolftaleína.
41
• Nitrógeno Total (N%) (Método Kjeldahl)
La determinación del nitrógeno total se realizó en dos etapas la primera

mediante la digestión y la segunda por destilación, para terminar en una titulación
volumétrica.
Formula
• Relación C/N (Adimensional)

En la relación se observa cuanto aumenta o disminuye el nitrógeno o
como es el comportamiento del carbono en el suelo contaminado por
hidrocarburos.
3.5.3. PARÁMETROS DEL ESTIÉRCOL DE GALLINA ANTES DEL

BIOCARBON
● Potencial de hidrógeno (pH), Potencial redox (mV) (Método

potenciométrico)
Se tomó un peso de 15 g de estiércol de gallina seco al ambiente y se añadió
50 ml de agua destilada, seguidamente se agito en un equipo rotacional de 30
rpm por un tiempo de 45”, retirarlo y ponerlo a decantar por 24 horas, para luego
tomar la solución decantada y realizar las mediciones potenciométricas con un
equipo multiparámetro Gondo ezodo, con certificado de calibración por empresa
acreditada al Inacal.
Figura10. Potencial de hidrógeno (pH), Potencial

redox (mV) (Método potenciométrico).
fuente: elaboración propia
3.5.4. PIRÓLISIS DE LA MATERIA PRIMA (MÉTODO ANAERÓBICO)
42
• Pirolisis de estiércol de gallina (metodología: Guo, et al., 2022)
A B
Figura11. Flujograma de pirolisis de estiércol de gallina

• Descripción
Para realizar la pirolisis del estiercol de gallina se utilize la medologia de
(Dike, et al., 2022) pero con ciertos cambios.
Es el método de obtener Biocarbon a partir de una muestra seca de
estiércol de gallina se tuvo que hacerlo secar al ambiente hasta una humedad
del 4% para poder realizar la pirolisis, en el reactor anaerobio, donde no existía
presencia de oxígeno, por un tiempo de 4 horas en tres tiempos que fueron el
bajo medio y alto a temperatura de 100 °C, se tuvo por 1 hora con la finalidad
de sacar todo el agua residual de la muestra, luego llegamos a 150 grados
centígrados para que se inicie el secado final por 1 hora, seguidamente siguió la
temperatura de 280°C a 300°C para iniciar la formación del biocarbon por un
tiempo de 1 hora la hora final se cierran las válvulas y se deja hasta la
temperatura de 300°C y luego se deja enfriar sin destapar el reactor hasta que
tenga una temperatura ambiente y poder retirar el producto de la pirolisis, para
luego ser demolidos hasta la malla -90mm ya que mientras las partículas de
biocarbon sean más pequeñas tendrán mayor adsorción.
43
BIOCARBON DE ESTIÉRCOL DE GALLINA
100°C/ 2h 200°C/ 2h 300°C/1h
Figura12. Preparación del hidrocarburo

Fuente: elaboración propia
3.5.4.1. Propiedades físicas del biocarbon del estiércol de gallina
• Humedad (%) (método: Norma ASTM D 2216)
Parámetro físico que fue determinado para conocer la humedad de la

materia prima que se realizó biocarbon, este se realizó en un crisol de porcelana
secado a 105 °C por 60 minutos, enfriado en desecador hasta temperatura
ambiente para luego pesarlo en balanza analítica de cuatro dígitos, verter la
muestra y colocarlo en una estufa a 105 °C por 90 minutos, enfriar y pesarlo y
así poder obtener el resulta mediante la siguiente ecuación:
Ecuación:
44
Figura13. Determinación de la humedad del estiércol de
gallina
• Materia Volátil (%) (método: Norma ASTM D – 3175)

La materia volátil de la materia prima se tomó a partir de la muestra seca
en una cápsula de porcelana con tapa ya que este proceso es anaeróbico, sin
presencia de oxígeno, llevado a 900 °C por un tiempo de 7 minutos, para luego
enfriar la capsula y pesarlo en una balanza analítica y tener sus resultados
utilizando la ecuación.
Ecuación:
45
• Ceniza (%) (método: Norma ASTM D – 5142 – 2015)
La ceniza fue evaluada a partir de la muestra de materia volátil,
colocándolo en la mufla a 900 °C por 2 horas u observar que la muestra tomo un
color blanquecino, para enfriarlo en el desecador hasta temperatura ambiente y
pesarlo en una balanza analítica.
Ecuación:
Carbono Fijo (%) (Método: Norma ASTM D – 3172)

Para calcular el carbono fijo se tiene que tener como datos fundamentales
la materia volátil y la ceniza y así poder determinar su resultado que nos sirve
para evaluar la superficie de adsorción de los contaminantes y también como
retenedor del agua para la planta indicadora.
Ecuación:
% CF = 100 – (% Ceniza + % MV)
• Capacidad de adsorción (método de isoterma de Langmuir y

Freundlich)
Para la prueba de adsorción Langmuir nos guiamos de la metodología de

(Hodelin-Barrera, et al., 2022) pero con ciertos cambios.
Para la prueba de adsorción de Langmuir lo primero que se realizo fue
pesar los vasos que se usaron, para el cual los vasos fueron lavados para luego
ser secados en una estufa a una temperatura de 105°C por un tiempo de 1h, una
46
vez secadas se deja enfriar para luego ser pesados, una vez pesados se
procedió a realizar el experimento para el cual se tomó 100ml de agua destilada
para cada vaso precipitado, donde se le añade 1ml de hidrocarburo para ser
homogenizados por 10 minutos a 300 rpm, seguidamente se añadió el
biocarbon en diferentes dosis siendo 0.1g, 0.3g, 0.5g, 0.8g, 1.0g, 1.3g, 1.5g,
1.8g, 2.0g y 2.3g de igual manera esto fue homogenizado por 10 minutos a 300
rpm, luego se dejó reposar un tiempo de 50 minutos, para luego pesar los filtros
pero para que eso suceda todas las muestras fueron colocadas en una estufa a
una temperatura de 100°c por un tiempo de 2h y media donde se evaporo todo
el agua presente en cada muestra para luego nuevamente ser colocados a la
estufa a una temperatura de 100°C por un tiempo de 3h para luego ser pesados.
Formula:
Pi – Pf = Vm x 10 -6
Donde:
Pi: peso inicial
Pf: peso final
Vm: volumen de la muestra
3.5.4. BACTERIAS PRESENTES EN EL SUELO CONTAMINADO DE
HIDROCARBUROS TOTALES DURANTE EL PROCESO
• Identificación y aislación de las bacterias del suelo
Para el aislamiento de las bacterias del suelo se aplicó la metodología
planteada por (Rodríguez-Uribe. al.et. 2021). Es la prueba cuantitativa que se
realizó para determinar las bacterias gram (+) y gram (-), se utilizó el cristal
violeta, un mordiente complejo yodo Lugol, otro para decolorar el alcohol de 96%
y finalmente la safranina todos tuvieron una fijación de un minuto, controlado con
un cronometro.
Seguidamente fueron evaluados en un microscopio electrónico con su lente de
100x utilizando aceite de inmersión.
• Prueba de tinción gran (+) (-)
47
Figura14. Flujograma de identificación de bacteria de Gram
(-) y gram (+)
Prueba de tinción gram
Figura15. Prueba de tinción del gram (-) (+)

• Análisis microbiológico
Para el análisis microbiológico de las bacterias nativas nos guiamos de la

metodología planteado por (Rodríguez-Uribe. al.et. 2021) pero con algunos
cambios.
Para iniciar el análisis se esterilizaron todos los materiales a utilizar, en una

autoclave a una temperatura de 121 °C por 20 minutos.
Seguidamente se tomó una muestra de las 4 pilas, completando un peso de
100g, se le agregó 200 ml de agua peptonada relación (1:2), bacteriológica para
obtener una solución con las bacterias de identificación inicial sin ningún tipo de
agregado, colocándolo en un equipo de agitación de rotación a una velocidad de
30 rpm por 40 minutos, cumplido el tiempo se dejó decantar 2 horas y se tomó
48
la muestra enrasando una fiola de 100ml de donde se tomaron las diluciones de
los tubos múltiples, 10-1, 10-2, y 10-3
Figura16. Flujograma del análisis microbiológica del suelo

Análisis microbiológico
Figura17. Analis microbioogico

Fuente: elaboracion propia
• Siembra en placas Petri ZHAO, (método planteado por (Baowei et
al.2022)).
Se realizo la siembra con el asa de siembra esterilizando en el mechero bunsen,

y realizando una siembra en zig, zag, también hubo tres blancos, de cada Agar
diferencial, uno estafilococo, rhodococcus, con el manitol, cetramide agar
49
diferencial de la familia pseudomona sp., el citrato Simmons, agar para presencia
de pseudomonas y estafilococos.
Estas placas Petri ya sembradas fueron colocados en la incubadora a una
temperatura de 36 °C por 24 horas.
Después de las 24 horas se procedió al recuento de colonias en el contador de
colonias.
Formula:
Numero de colonias = (alto + medio + bajo/3) * 65
Numero de colonias * factor de dilución
UFC/g =
Volumen de muestra
Figura18. Flujograma de siembra en placas Petri

Siembra en placas Petri ZHAO
50
3.5.5. PRUEBAS BIOQUÍMICAS DE IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS
tabla 4. pruebas bioquímicas de identificación de bacterias
Pilas Descripción Imagen laboratorio
Pila Suelo con HTP con humedecimiento de agua por 30
1 días fuente: elaboración
Bacterias obtenidas por frotis en microscopio con lente propia
100X
Presencia de cocos y leucocitos todos Gram negativos
(Laboratorio)
Fuente:
https://www.google.com/search?q=e
scherichia+coli+microscopio&tbm=is
Pila Suelo con HTP, se rego con nutrientes A+B por 30 días fuente: elaboración
propia
2 Bacterias obtenidas por frotis en microscopio con lente
100 presencia de Diplococos todos Gram negativos
(Laboratorio)
Fuente:
https://www.google.com/search?q=escher
Pila Suelo con HTP, y Biocarbon de estiércol de gallinaza fuente: elaboración

propia
3 Bacterias obtenidas por frotis en microscopio con lente
100X presencia de E. coli, cocos, y pseudomonas, todos
Gram negativos (Laboratorio).
Fuente:
51
Pila suelo con HTP, con Biocarbon de estiércol de fuente: elaboración
propia
4 gallinaza + solución A+B Bacterias obtenidas por frotis
en microscopio con lente 100X presencia de E. coli,
cocos, y pseudomonas, todos Gram negativos
(Laboratorio)
Fuente:

• Prueba bioquímica de la catalasa
PILAS TIPO DE Presuntas bacterias DESCRIPCION IMAGEN PRUEBA DESCRPCION IMAGEN
AGAR BIOQUIMICA
PILA1 Agar Triple - Escherichia coli determina las grandes La prueba Bacterias que para su (+)
- PILA Sugar Iron - Klebsiella/Enterobacte negativas porque este bioquímica nos dio vida necesitan
2 r en un agar diferencial, positivo, peptone, lactosa,
- Proteus donde se observaron reconociendo a las dextrosa, sacarosa,
- Salmonella (cepas con en la prueba de frotis bacterias ya sodio y sulfato de
resultado positivo a cocos, estafilococos y mencionadas. fierro.
(+) H2S) debido al color
- Shigella y Salmonella amarillento en el agar
con resultado negativo triple sugar iron se
a H2S puede percibir que hay
- Enterococcus presencia de
enteroccus, eschirichia
coli y klebsiella/entero
bacterias
52
PILA Agar - Salmonella Enteritidis Ammoniun phophe, La prueba Presencia de (+)
2- Simmons - Klebsiella pneumoniae indicador que cambia bioquímica fue enterobacterias,
PILA4 Citrate - Proteus vulgaris al color por el cambio positiva porque porque en las 24 horas
- Escherichia coli de pH, Bromo tymol efervece en ambas de incubación cambio
blue donde finalmente pilas corroborando de color
se puede deducir que el cambio de color
(+) tiene presencia de las del indicador.
bacterias
mencionadas.
PILA Pruebas - Escherichia coli método de siembra en Prueba resulto presencia de (+)
3- de - Klebsiella, placas y colocados en positivo porque al Enterobacterias, y
PILA4 catalasa Enterobacter incubadora por 24 utilizar el reactivo presencia de e. coli
en las dos - Proteus horas teniendo como bioquímico esta
pilas - Pseudomonas resultado, una efervece de manera
aeruginosa supuesta presencia de inmediata. (método
Mac - Enterococos las bacterias del porta objeto)
Conkey - Staphylococcus Enterococos,
Agar aureus Staphylococcus
aureus y Escherichia
(+) coli
PILAS El ultimo resultado por tubos Pruebas realizadas en (+)

1,2,3 Y hace referencia a la presencia las pilas 1,2,3,4 Se observa cómo
4 de bacterias nativas en el suelo haciéndose un barrido es que son
en método de tubos positivos dando
inclinados por respuesta a lo antes
inoculación de evaluado incluso
profundidad. mostramos un
compasito que
(+) efervece siendo la
prueba positiva.
Figura20. Pruebas bioquímicas de la catalasa

53
3.5.6. PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS DE CADA PILA
Se tamizo la muestra con malla N° 10 (10mm) de acuerdo a la
metodología planteado por Xinxin Liu (2019). Se realizo la homogenización de la
muestra en un equipo mezclador, con la finalidad que las pilas sean
representativas, y así se procedió a realizar la mezcla del biocarbon + suelo
contaminado, suelo contaminado + el fertilizante (solución A y Solución B), suelo
contaminado + biocarbon de estiércol de gallina más el fertilizante (solución A y
solución B), para la bioestimulacion.
SUELO CONTAMINADO POR HTP
Figura21. Preparación de las pilas con el suelo

contaminado
• Peso de la muestra
Los pesos que se utilizaron fueron:

Muestra Peso de suelo Peso de Volumen de
biocarbon fertilizante
(kg)
(g) (ml) A+B
Pila 1 40
Pila 2 40 2.4
Pila 3 40 2.4 3000ml
Pila 4 40 4000ml
54
3.6. Método de análisis de datos
El método de análisis de dato es el desarrollo y análisis de datos, ya sea

de nivel descriptivo o inferencial. La información obtenida será analizada
utilizando métodos estadísticos, elaboración de gráficos y cuadros en
Microsoft Excel, ubicación del área de estudio Google earth, transcripción de
información en el cuaderno de campo sobre el proceso de estudio del trabajo
de investigación.
3.7. Aspectos éticos
El desarrollo de la investigación fue por decisión propia y se respetará los

derechos de autor con las citas bibliográficas, por el cual toda información
redactada es verídica, toda información plasmada es confiable, asi como lo pide
la universidad y el consejo de la universidad N° 0262-2020/UCV que fue
promulgado el 28 de agosto del 2020, además se respeta cada autor de los
artículos y toda fuente utilizada para la investigación.
55
IV: RESULTADOS
OG: Evaluar la bioestimulación asistida por biocarbon de estiércol de gallinas en la

degradación de la contaminación de hidrocarburos totales de petróleo en el suelo Lima-
Jicamarca 2022
tabla 6. Concentración de Hidrocarburo del petróleo (método
Soxhlet)
Pilas - Primer Peso de Peso de balón Peso de HTP

tratamiento Balón (g) + HTP muestra seca mg/kgps
P1-(10 DIAS) 202.4730 202.5572 5.0238 14.2462
P2 - (10 DIAS) 142.4058 142.4846 5.0234 13.3336
P3 - (10 DIAS) 162.3445 162.4103 5.0023 11.1809
P4 - (10 DIAS) 181.2559 181.3212 5.0004 11.1001
tabla 7. Concentración de Hidrocarburo total inicial (ECAS – 5000
mgHTP/kgps)
Peso de HTP
Pilas - Segundo Peso de Peso de
muestra
tratamiento Balón (g) balón + HTP mg/kgps
seca
P1-(20 DIAS) 202.4741 202.5372 5.0124 10.700
P2 - (20 DIAS) 142.4154 142.4728 5.0125 9.734
P3 - (20 DIAS) 162.2343 162.2879 5.0211 9.074
P4 - (20 DIAS) 181.2255 181.2732 5.0078 8.096
tabla 8. Concentración de Hidrocarburo total inicial (ECAS – 5000
mgHTP/kgps)
Pilas - Tercer Peso de Peso de balón Peso de HTP

tratamiento Balón (g) + HTP muestra seca mg/kgps
P1-(30 DIAS) 202.4642 202.5262 5.0012 10.537
P2 - (30 DIAS) 142.5154 142.5678 5.0045 8.900
P3 - (30 DIAS) 162.3343 162.3789 5.0058 7.573
P4 - (30 DIAS) 181.4255 181.4642 5.0041 6.574
tabla 9. HTP mg/kg ps

HTP mg/kg ps
pila 1 pila 2 pila 3 pila 4
10 días 14.2462 13.3336 11.1809 11.1001
20 días 10.700 9.734 9.074 8.096
30 días 10.537 8.900 7.573 6.574
56
HTP mg/kg ps
16 14.2462
14 13.3336
12 10.7 10.537 11.1809 11.1001

9.734
10 8.9 9.074
8.096
7.573
8 6.574
6
4
2
0
Figura22. HTP mg/kg ps

Interpretación:
En el grafico N 9 se puede observar la concentración del hidrocarburo total de
petróleo los cuales fueron analizados en diferentes periodos de 10 días, 20 y 30
días, de los cuales en el periodo uno (10 días) se tuvo una concentración de
14.2462 de TPH y según el tratamiento que se le realizo finalmente se tuvo una
concentración de 6.574 de hidrocarburo total de petróleo, esto resultado se
obtuvo de la pila 4 que contenía el biocarbon de estiércol de gallina y la solución
A y la solución B donde se degrado el hidrocarburo total en un aproximado de
46%.
OE1: determinar las propiedades físicas del biocarbon del estiércol de gallina
para reducir los hidrocarburos totales de petróleo en el suelo contaminado.
tabla 10. Parámetros físico químicos del estiércol de gallina
(Potenciometría)
Muestra Temperatura Potencial de Conductividad Potencial
°C hidrogeno eléctrica redox
(acido/base) (mS/cm) (mV)
PFQ-EG 18.5 6.27 7.98 245.5
Las tablas N° 10, son los parámetros físicos que se realizaron en el biocarbón
del estiércol de gallina, fue importante porque con ellos deberíamos obtener
resultados del carbono fijo que es un indicador fundamental para demostrar su
buena capacidad de adsorción cuando es menor del 50%
57
tabla 11. Humedad del estiércol de gallina (Método: ASTM D2216)
Peso del Peso del crisol + Peso del Peso del Humedad
Muestra
crisol (g) EH(g) estiércol(g) crisol + ES %
48.2953 53.0972 4.8019 50.3601 57.00
HEG-I
tabla 12. Materia volátil del estiércol de gallina (MV) (método: ASTM
D3175)
Peso de Peso crisol + CC Peso de crisol+CC a MV
Muestra
crisol (g) (g) 900°C – 7minutos (g) %
MV-EG 22.8991 23.2074 22.9801 73.73
tabla 13. ceniza del estiércol de gallina (método: ASTM D5142)

Peso del Peso del crisol Peso del crisol +CC a Ceniza
Muestra
crisol (g) +CC (g) 900 - 1H (g) %
CEG 22.8991 23.2074 22.9300 10.02
tabla 14. Carbono fijo del estiércol de gallina (método: ASTM D3172)
muestra Ceniza % Materia volátil % Carbono fijo

CF-EG 10.02 73.73 16.25
58
PRUEBA DE ADSORCIÓN DEL BIOCARBON DE ESTIÉRCOL DE GALLINA
Determinación de las isotermas de Langmuir
tabla 15. Concentración inicial del hidrocarburo de Petróleo.
Peso del Peso del vaso Volumen de C
Muestra muestra (ml)
vaso (g) + HTP (g) (mg HTP/Kg)
1 101.0130 102.0130 101 9900.99
2 101.2041 102.2041 101 9900.99
3 104.0479 105.0479 101 9900.99
4 107.7272 108.7272 101 9900.99
5 107.3513 108.3513 101 9900.99
6 99.6000 100.6000 101 9900.99
7 96.3301 97.3301 101 9900.99
8 99.6077 100.6077 101 9900.99
9 107.1593 108.1593 101 9900.99
10 102.7474 103.7474 101 9900.99
Promedio = 9900.99
tabla 16. Condiciones para realizar una prueba de cinética de

Adsorción
Malla Potencial de Temperatura Peso del Concentración Tiempos Agitación

Muestra (mm) Hidrogeno °C biocarbon del adsorbato (minutos) (rpm)
(acido/base) (g) (mg/kg)
1 N°18 (1) 7 20 0.1032 9900.99 5 300
2 N°18 (1) 7 20 0.3030 9900.99 10 300
3 N°18 (1) 7 20 0.5024 9900.99 15 300
4 N°18 (1) 7 20 0.8000 9900.99 20 300
5 N°18 (1) 7 20 1.0041 9900.99 25 300
6 N°18 (1) 7 20 1.3039 9900.99 30 300
7 N°18 (1) 7 20 1.5023 9900.99 35 300
8 N°18 (1) 7 20 1.8039 9900.99 40 300
9 N°18 (1) 7 20 2.0035 9900.99 45 300
10 N°18 (1) 7 20 2.3010 9900.99 50 300
En lo que se pudo observar a través de la adsorción es que cuando la
granulometría es pequeña la superficie tiene una mayor capacidad de adsorción,
de acuerdo a los antecedentes que se evaluaron (Landeta Tapia, et al. 2020).
59
tabla 17. Cinética de adsorción
Tiempos concentración Concentración Adsorbente
Muestra (minutos) de adsorbato Ce Inicial Biocarbon
(mg/kg) (mg/kg) (mg/kg)
1 t0 9900.99 9900.99
2 t1 7096.1 9900.99 2804.89
3 t2 6059.4 9900.99 3841.59
4 t3 5156.2 9900.99 4744.79
5 t4 4103.1 9900.99 5797.89
6 t5 3159.3 9900.99 6741.69
7 t6 2672.1 9900.99 7228.89
8 t7 2568.5 9900.99 7332.49
9 t8 2548.4 9900.99 7352.59
10 t9 2525.2 9900.99 7375.79
Figura23. comportamiento cinético de adsorción
Comportamiento cinetico de adsorcion

12000
Concentracion HTP (mg/kg)
10000 7096.1 2672.1

9900.99 2525.2
8000 4103.1
3159.3 2568.5
2525.1
2548.4
6000
4000 6059.4
5156.2
2000
0
0 2 4 6 8 10 12
Tiempo (minutos)

En la prueba cinética de la adsorción del adsorbente se ve claramente como es
extraído el contaminante del adsorbato, lo que mediante las fuerzas de van der
Wall se realiza la adsorción de muy aceptable capacidad debido a su área de
superficie como se pudo observar en la tabla N°17.
60
Figura24. capacidad de adsorción vs concentración de
equilibrio (isoterma de adsorción)
Capacidad de adsorcion vs concentracion de

equilibrio (Isoterma de adsorcion)
12000
9900.99
Concentracion de adsorcion del
7228.89 7332.49 7352.59

10000 6059.4 7375.79
8000 7096.1 5797.89
adsorbente
6000 4103.1 6741.69

4744.79 2525.2
3159.3 2568.5
4000
3841.59
2000 5156.2 2672.1
2804.89 2548.4
0
0 2 4 6 8 10 12
Concentracion de equilibrio en un tiempo (t)
Series1 Series2

Tabla 18: El Excel nos grafica como se llega a la concentración de equilibrio,
con relación a la capacidad de adsorción del adsorbente (biocarbon)
tabla 18. Determinación de la Isoterma de Langmuir

Peso del Concentración X= Ci - Ce q= X/m Eje X (C) Eje y (C/q)
biocarbon de equilibrio
(g) en adsorbato
(mg/kg)
0 9900.99 0 9900.99 0
0.1032 7096.1 2804.89 27.179 7096.1 2.5
0.3030 6059.4 1036.7 3.421 6059.4 5.8
0.5024 5156.2 903.2 1.798 5156.2 5.7
0.8000 4103.1 1053.1 1.316 4103.1 3.9
1.0041 3159.3 943.8 0.940 3159.3 3.3
1.3039 2672.1 487.2 0.374 2672.1 5.5
1.5023 2568.5 103.6 0.069 2568.5 24.8
1.8039 2548.4 20.1 0.011 2548.4 126.8
2.0035 2525.2 23.2 0.012 2525.2 108.8
2.3010 2525.1 0.1 0.000 2525.1 25251.0
61
Figura25. Langmuir
Langmuir
140.0
120.0 y = -0. 015x + 91.746
R² = 0.2768
100.0
80.0
60.0
40.0
20.0
0.0
0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000
-20.0
-40.0

figura N° 24: Isoterma de Langmuir se calcula la capacidad de adsorción del
biocarbon mediante la ecuación de la recta, teniendo una muy aceptable
respuesta cuando el R2 no se encuentra formando una recta, si sucedía así su
adsorción del adsorbente no sería tan representativo en la prueba.
Datos de la formula lineal:

b= -66.7
K= - 0.727
Capacidad de adsorción en el equilibrio = 0.012 mg/g
Capacidad de adsorción en tiempo (t) = 307.9 mg/g
Figura26. Freundlich
Freundich 1/n= 7.3636

2.00 n= 0.1358
y = 7.3636x - 26.898
R² = 0.60 29
Log kd = -26.898
1.00
Kd= 1.265*10-27
0.00 Log q = 1/n logC + Log
3.3000 3.4 000 3.5000 3.6000 3.7000 3.8000 3.9000 Kd
-1.00
-2.00 Log q: 1.48 = 30.2

mg/kg
-3.00
-4.00
-5.00
62
OE2: Identificar las presuntas bacterias presentes en el suelo contaminado de
TIEMPO INICIAL
tabla 19. Análisis microbiológico inicial
Agares diferenciales utilizados Descripción (Presunción)
Agar Simmons Citrate Enterobacter, Salmonella
Agar base Mannitol Salt Staphylococcus, Rodococcus
Agar base Cetramide Pseudomonas p.
tabla 20. diluciones en tubos múltiples con siembra en placas Petri

Siembra placa 10-1 10- 10- 10-4 10-5 10-6
2 3
Petri
Simmons Citrate - - - - - -
Mannitol Salt 195 colonias - - - - -
Cetramide - - - - - -
Nota: De las 195 colonias obtuvimos UFC/g =1950
En una pila de 40 kg hubo: 780000 UFC/kg (Rhodococcus)
PRIMER PERIODO
Primer Tratamiento Colonias Factor Volumen de UFC/ml
Pila 1 muestra(ml)
Agar Simmons 130.0 10 1 1300
Agar Mannitol Salt base 151.7 10 1 1511
Agar Cetramide base 0 10 1 0
tabla 22. Microbiología de suelo contaminado con hidrocarburo de
petróleo
Primer Tratamiento Alto Medio Bajo N°
Pila 2 Colonias
Agar Simmons 3 2 2 151.7
Agar Mannitol Salt base 4 2 2 173.3
Primer Tratamiento Colonias Factor Volumen UFC/ml
Pila 2 de
muestra(ml)
Agar Simmons 151.7 10 1 1517
63
petróleo
Pila 3 Colonias
Agar Cetramide base 1 0 0 21.7
Primer Tratamiento Colonias Factor Volumen UFC/ml
Pila 3 de
muestra(ml)
Agar Simmons 281.6 100 1 28160
Agar Cetramide base 21.7 100 1 2170
petróleo
Pila 4 Colonias
Primer Tratamiento Colonias Factor Volumen de UFC/ml
Pila 4 muestra(ml)
Agar Simmons 195.0 100 1 19500
SEGUNDO PERIODO
petróleo
Segundo Tratamiento Alto Medio Bajo N°
Pila 1 Colonias
Agar Mannitol salt base 3 2 2 151.7
64
segundo Tratamiento Colonias Factor Volumen de UFC/ml
Pila 1 muestra(ml)
Agar Simmons 130.0 10 1 1300
Agar Mannitol salt base 151.7 10 1 1511
petróleo
segundo Tratamiento Alto Medio Bajo N°
Pila 2 Colonias
Agar Simmons 4 3 2 195
segundo Tratamiento Colonias Factor Volumen UFC/ml
Pila 2 de
muestra(ml)
Agar Mannitol Salt base 173.3 10 1 1733.3
petróleo
Pila 3 Colonias
Segundo Tratamiento Colonias Factor Volumen UFC/ml
Pila 3 de
muestra(ml)
Agar Simmons 216.7 100 1 21670
65
petróleo
Pila 4 Colonias

Segundo Tratamiento Colonias Factor Volumen de UFC/ml
Pila 4 muestra(ml)
Agar Simmons 260 100 1 26000
TERCER PERIODO

petróleo
Tercer Tratamiento Alto Medio Bajo N°
Pila 1 Colonias
Agar Mannitol Salt base 5 3 1 195

Tercer Tratamiento Colonias Factor Volumen de UFC/ml
Pila 1 muestra(ml)
Agar Simmons 238.3 100 1 23830
petróleo
Pila 2 Colonias
66
Tercer Tratamiento Colonias Factor Volumen UFC/ml
Pila 2 de
muestra(ml)
Agar Simmons 281.7 1000 1 281666.7

petróleo
Pila 3 Colonias

Tercer Tratamiento Colonias Factor Volumen UFC/ml
Pila 3 de
muestra(ml)
Agar Simmons 281.6 1000 1 281600

petróleo
Pila 4 Colonias

Tercer Tratamiento Colonias Factor Volumen de UFC/ml
Pila 4 muestra(ml)
Agar Simmons 281.7 1000 1 281700
67
tabla 44. Agar simmons
Agar Simmons
10 días 20 días 30 días
pila 1 1300 1300 23830
pila 2 1517 1950 281666.7
pila 3 28160 21670 281600
pila 4 19500 26000 281700
Agar Simmons
300000
200000
100000
0
10 dias 20 dias 30 dias
Figura27. Agar simmons

Interpretación:
Según la tabla N 44 se puede observar que la presencia de las bacterias

en la primera etapa no se tenía mucha presencia de bacterias, los cuales fueron
cambiando durante el tiempo de tratamiento como se puede observar en el
segundo periodo ya se contaba con una cierta cantidad de bacterias en el agar
Simmons es decir se cuenta con la presencia de las bacterias del gran negativo
en gran cantidad.
tabla 45. Agar manitol salt base

Agar Mannitol salt base
pila 1 1511 1511 19500
pila 2 1733 1733.3 26000
pila 3 23840 19500 260000
pila 4 21670 23830 238400
68
Agar Mannitol salt base
300000 260000
238400
250000
200000
150000
100000
50000 19500 26000
0
Figura28. Agar mannitol salt base

Interpretación:
En la tabla N°45, se observa cómo va aumentando las bacterias según el

tratamiento que se le brinda al suelo ya que como se ve en la tabla en la primera
etapa se carece de bacterias algo que cambia notoriamente en el tercer periodo
para la pila 3 y la pila 4 que contenían biocarbon, ya que según los resultados se
puede decir que el biocarbon ayudo a que las bacterias del gram negativo se
plurifiquen en gran cantidad.

Agar Cetramide base
pila 1 0 0 0
pila 2 0 0 6500
pila 3 2170 4330 238300
pila 4 6500 6500 216700
69
Agar Cetramide base
300000
238300
250000 216700
200000
150000
100000
50000
0 6500
0

Interpretación:
En la tabla N°46, se observa como las bacterias de gram positiva va en
aumento en los diferentes periodos, donde una vez más se ve que las pila 3 y la
pila 4 tienen más aumento de estas bacterias, una vez más se demuestra que la
presencia del biocarbon hace que las bacterias nativas aumenten en gran
cantidad.
OE3: determinar las características físicas y químicas del suelo

contaminado con hidrocarburo antes y después del tratamiento con el
biocarbon de estiércol de gallina
En la tabla N° 48, se observa una comparación del suelo de Jicamarca con
un suelo agrícola con la finalidad de ver los impactos que ocasiona el
hidrocarburo de petróleo, con respecto al pH vemos que el suelo contaminado
se vuelve ligeramente alcalino, y la conductividad eléctrica aumenta, lo que
significa que el suelo ha perdido su formación inicial.
tabla 48. Parámetros físico químico del suelo inicial con HTP de
petróleo (Método potenciométrico)
Potencial de Conductividad Potencial
Muestra °C hidrogeno eléctrica redox
(acido/base) mS/cm mV
STM-HTP 18.7 7.45 0.794 215.23
SA - Bco. 18.7 6.59 0.285 122.80
STM-HTP: Suelo de taller mecánico – hidrocarburo de petróleo
SA - Bco.: Suelo agrícola blanco
70
En la tabla 48: Para la humedad podemos observar que la capacidad de
infiltración es menor en el suelo contaminado ya que los hidrocarburos no
permiten la absorción de agua a diferencia del suelo agrícola
tabla 49. Determinación de la humedad (método: ASTM D 2215)

Peso del crisol Peso crisol + Peso del crisol Humedad
Muestra (g) muestra húmeda (g) +muestra seca (g) %
STM-HTP 44.5597 54.8001 54.3747 4.15
SA - Bco. 45.3310 50.0035 49.5324 10.08
SA - Bco.: Suelo agrícola blanco
En la tabla N° 49, la capacidad de intercambio catiónico es menor debido a que

las sales del suelo no se solubilizan tanto de manera normal de ahí sus valores
diferentes.
tabla 50. Capacidad de intercambio catiónico (método del acetato de
amonio pH7 – 1N)
Peso de Volumen Volumen Normalidad CIC
muestra gastado en gastado en
Muestra (g) Blanco (ml) muestra (ml) NaOH meq/100g
STM-HTP 5.0072 0.3 1.4 0.5 11.34
SA - Bco 5.0045 0.3 2.1 0.5 18.56
SA - Bco.: Suelo agricola blanco
En la tabla N° 50, el carbono en un suelo contaminado por hidrocarburo es

mayor a la del suelo que estamos comparando lo que significa que un
desequilibrio origina impactos ambientales.
tabla 51. Carbono Orgánico (CO) (Método Walkley – Black)

Peso de Volumen Volumen Normalidad CO
muestra gastado en gastado en Sulfato
Muestra (g) Blanco (ml) muestra (ml) meq/100g
ferroso
STM-HTP 0.5031 10.2 7.4 1 4.46
SA - Bco 0.5002 10.2 9.8 1 2.56
SA - Bco.: Suelo Agrícola - blanco
71
tabla 52. Densidad aparente del suelo contaminado (método cilindro
biselado)
Peso de Peso de tara Peso de tara Volumen del Densidad

Muestra
tara (g) + SH (g) + SS (g) cilindro (cm3) aparente (g/cm3)
STM-HTP 271 600 592 212 1.51
SA - Bco 459 779 765 212 1.44
STM-HTP: Suelo de taller mecánico – hidrocarburo total de petróleo
SA - Bco.: Suelo agrícola - blanco
tabla 53. materia Orgánica, nitrógeno total, nitratos

Materia orgánica Nitrógeno total Nitratos Relación
Muestra (%) (%) mg/l C/N
STM-HTP 7.70 0.36 185 12.40
SA - Bco 4.41 0.23 85 11.13
(método Walkley – Black), (método Kjeldahl), (método espectrofotometría
UV/V)
STM-HTP: suelo de taller mecánica – hidrocarburo total de petróleo
SA - Bco.: Suelo Agrícola – blanco
tabla 54. Textura del suelo (método Bouyoucos)

Arena Limo Arcilla Textura del
Muestra (%) % % suelo
Arcilla -
STM-HTP 15 45 40
Limoso
SA - Bco. 12 25 63 arcilla
STM-HTP: Suelo de taller mecánico – hidrocarburo total de petróleo
SA - Bco.: Suelo Agrícola – blanco
Figura29. textura del suelo
72
PRIMER TRATAMIENTO
tabla 55. Parámetros físicos químicos (método potenciométrico)
Pilas - Primer Temperatura
tratamiento °C Potencial de Conductividad Potencial
hidrogeno eléctrica Redox
(Acido/base) (mS/cm) (mV)
P1-(10 DIAS) 19.6 6.92 2.69 109.32
P2-(10 DIAS) 19.6 7.15 2.47 125.12
P3-(10 DIAS) 19.6 7.24 3.87 128.42
P4-(10 DIAS) 19.6 7.19 4.92 120.51
tabla 56. Humedad del suelo (método: Norma ASTM D2216)
Peso del
Peso del Peso del crisol + Peso de la
Pilas - Primer crisol + Humedad
crisol seco muestra muestra
tratamiento muestra %
a 105°C (g) Húmeda(g) (g)
seca(g)
P1-(10 DIAS) 50.4797 70.4354 19.9557 67.1232 16.60
P2 - (10 DIAS) 48.4282 79.8652 31.437 74.9629 15.59
P3 - (10 DIAS) 48.3656 80.9598 32.5942 75.8321 15.73
P4 - (10 DIAS) 47.0472 80.5135 33.4663 74.9791 16.54
tabla 57. Capacidad de Intercambio Catiónico (método acetato de
amonio pH7 – 1N)
Peso de la Normalidad CIC
Pilas - Primer muestra Volumen Volumen del NaOH (mq/100g)
tratamiento (g) gastado en gastado en
blanco(ml) muestra(ml)
P1-(10 DIAS) 5.0031 0.3 2.36 0.5 21.25
P2 - (10 DIAS) 5.0004 0.3 2.55 0.5 23.22
P3 - (10 DIAS) 5.006 0.3 2.91 0.5 26.91
P4 - (10 DIAS) 5.064 0.3 2.95 0.5 27.00
tabla 58. Carbono Orgánico Total (método de Wackley – Black)
Volumen Normalidad Volumen Carbono
Pilas - Primer
Peso de la gastado en de Sulfato gastado en Orgánico
tratamiento
muestra blanco ferroso muestra Total
P1-(10 DIAS) 0.566 10 1 7.2 1.93
P2 - (10
DIAS) 0.5011 10 1 7.6 1.87
P3 - (10
DIAS) 0.5029 10 1 6.5 2.71
P4 - (10
DIAS) 0.5137 10 1 6.8 2.43
tabla 59. Materia orgánica, nitrógeno, relación carbono/ nitrógeno
73
Materia Organica Nitrógeno Relación C/N
Pilas - Primer
% %
tratamiento
P1-(10 DIAS) 3.33 0.21 9.19
P2 - (10 DIAS) 3.22 0.18 10.38
P3 - (10 DIAS) 4.68 0.25 10.86
P4 - (10 DIAS) 4.19 0.24 10.12
SEGUNDO TRATAMIENTO
tabla 60. Parámetros físico químico
Temperatura Potencial de Conductividad Potencial
Pilas - segundo °C hidrogeno eléctrica Redox
tratamiento (Acido/base) (mS/cm) mV
P1-(20 DIAS) 20.15 6.98 2.15 125.14
P2 - (20 DIAS) 20.15 7.11 2.12 141.23
P3 - (20 DIAS) 20.15 7.18 2.49 132.11
P4 - (20 DIAS) 20.15 7.12 2.56 131.12
tabla 61. Humedad del suelo contaminado con hidrocarburo de
Petróleo
Peso del Peso de Peso del
Peso del
Pilas - Segundo crisol + la crisol + Humedad
crisol seco a
tratamiento muestra muestra muestra %
105°C (g) Húmeda(g) (g) seca (g)
P1-(20 DIAS) 50.4557 70.2364 19.7807 67.0242 16.24
P2 - (20 DIAS) 48.4864 72.5612 24.0748 68.7544 15.81
P3 - (20 DIAS) 48.5157 72.7988 24.2831 68.9281 15.94
P4 - (20 DIAS) 47.1132 73.1145 26.0013 68.9211 16.13
tabla 62. Capacidad de Intercambio catiónico (CIC)
Peso de la Volumen Volumen Normalidad CIC
Pilas - Segundo
muestra gastado en gastado en del NaOH (mq/100g)
tratamiento
(g) blanco (ml) muestra (ml)
P1-(20 DIAS) 5.0211 0.3 2.25 0.5 20.04
P2 - (20 DIAS) 5.0034 0.3 2.35 0.5 21.14
P3 - (20 DIAS) 5.0045 0.3 2.61 0.5 23.82
P4 - (20 DIAS) 5.0124 0.3 2.65 0.5 24.19
Peso de la Volumen Normalidad Volumen Carbono
Pilas - Segundo
muestra gastado en de Sulfato gastado en Orgánico
tratamiento
(g) blanco (ml) ferroso muestra (ml) Total (%)
P1-(20 DIAS) 0.5261 10 1 7.1 2.15
P2 - (20 DIAS) 0.5121 10 1 7.1 2.21
P3 - (20 DIAS) 0.5012 10 1 7.2 2.18
74
P4 - (20 DIAS) 0.5031 10 1 7.3 2.09
Pilas - Segundo Materia Nitrógeno Relación
tratamiento Organica (%) (%) C/N
P1-(20 DIAS) 3.71 0.20 10.75
P2 - (20 DIAS) 3.81 0.15 14.72
P3 - (20 DIAS) 3.76 0.21 10.38
P4 - (20 DIAS) 3.61 0.20 10.47
TERCER TRATAMIENTO
tabla 65. Parámetros físicos y químicos

Pilas - Tercer Temperatura Potencial de Conductividad Potencial
tratamiento °C hidrogeno eléctrica Redox
(acido/base) (mS/cm) (mV)
P1-(30 DIAS) 20.0 6.99 2.02 131.45
P2 - (30 DIAS) 20.0 7.09 2.01 143.21
P3 - (30 DIAS) 20.0 7.10 2.24 145.51
P4 - (30 DIAS) 20.0 7.08 2.29 145.12
tabla 66. Humedad del suelo con HTP de Petróleo
Pilas - Tercer Peso del Peso del crisol + Peso de Peso del Humedad
tratamiento crisol seco muestra Húmeda la crisol + %
a 105°C (g) muestra muestra seca
(g) (g) (g)
P1-(30 DIAS) 50.4087 70.2861 19.8774 68.0242 11.38
P2 - (30 DIAS) 48.4924 70.5842 22.0918 68.1544 11.00
P3 - (30 DIAS) 48.6037 70.4798 21.8761 68.0221 11.23
P4 - (30 DIAS) 47.5212 70.9995 23.4783 68.3811 11.15
tabla 67. Capacidad de intercambio catiónico
Pilas - Tercer Peso de Volumen Volumen Normalidad CIC
tratamiento la muestra gastado en gastado en del NaOH (mq/100g)
(g) blanco (ml) muestra (ml)
P1-(30 DIAS) 5.0001 0.3 2.21 0.5 19.71
P2 - (30 DIAS) 5.0003 0.3 2.25 0.5 20.12
P3 - (30 DIAS) 5.0005 0.3 2.21 0.5 19.71
P4 - (30 DIAS) 5.0004 0.3 2.25 0.5 20.12
75
Pilas - Tercer Peso de la Volumen Normalidad Volumen Carbono
tratamiento muestra (g) gastado en de Sulfato gastado en Orgánico
blanco (ml) ferroso muestra (ml) Total
P1-(30 DIAS) 0.5001 10 1 7.42 2.01
P2 - (30 DIAS) 0.5002 10 1 7.39 2.03
P3 - (30 DIAS) 0.5000 10 1 7.28 2.12
P4 - (30 DIAS) 0.50014 10 1 7.26 2.14
Pilas - Tercer Materia orgánica Nitrógeno Relación
tratamiento (%) (%) C/N
P1-(30 DIAS) 3.47 0.22 9.25
P2 - (30 DIAS) 3.51 0.21 10.10
P3 - (30 DIAS) 3.66 0.2 10.68
P4 - (30 DIAS) 3.68 0.20 10.68
tabla 70. Potencial de hidrogeno (Acido/base)

Potencial de hidrogeno (Acido/base)
10 días 6.92 7.15 7.24 7.19
20 días 6.98 7.11 7.18 7.12
30 días 6.99 7.09 7.1 7.08
Potencial de hidrogeno (Acido/base)

7.3 7.24
7.18 7.19
7.2 7.15
7.11 7.09 7.1 7.12
7.08
7.1
6.98 6.99
7 6.92
6.9
6.8
6.7
Figura30. Potencial de hidrogeno (Acido/base)

76
Interpretación:
En la tabla N°70 se puede observar el pH del suelo contaminado por
hidrocarburo, donde se observa que en los primeros tratamientos el suelo se
encontraba demasiado acido ya que se encontraba por debajo de lo establecido,
así como también se puede observar en la tabla como el pH va mejorando según
el tratamiento como se puede observar en el tercer periodo (30) el pH se
encuentra casi neutro.
tabla 71. Conductividad eléctrica (mS/cm)

Conductividad eléctrica (mS/cm)
10 días 2.69 2.47 3.87 4.92
20 días 2.15 2.12 2.49 2.56
30 días 2.02 2.01 2.24 2.29
conductividad electrica (mS/cm)

6
4.92
5
3.87
4
2.69 2.49 2.24 2.56 2.29
3 2.15 2.02 2.47
2.12 2.01
2
1
0
Figura31. Conductividad eléctrica (mS/cm)

Interpretación:
En la tabla N° 71, se puede observar la conductividad eléctrica del suelo
contaminado por hidrocarburo y los cambios que ocurrió durante el tratamiento,
como se puede observar en la tabla y en el grafico en el primer periodo se tuvo
una conductividad eléctrica alta es decir tenía alta salinidad, los cuales en los
fueron disminuyendo según el tiempo de tratamiento.
77
tabla 72. Potencial redox (mV)
Potencial redox (mV)
DIAS pila 1 pila 2 pila 3 pila 4
10 días 109.32 125.12 128.42 120.51
20 días 125.14 141.23 132.11 131.12
30 días 131.45 143.21 145.51 145.12
Potencial redox (mV)

200
141.23143.21 145.51 145.12
150 125.14131.45 125.12 128.42132.11 120.51131.12
109.32
100
50
0
Figura32. potencial redox (mV)

Interpretación:
El comportamiento del potencial redox (mV) en la pila 1,2,3 y pila 4 en los
periodos de 10, 20 y 30 días se observa en la tabla 68, que a los 30 días el
potencial redox (mV) en la pila 3 y la pila 4 mejoro en un buen porcentaje esto
quiere decir que el tratamiento mediante la incorporación del biocarbon al suelo
contaminado está dando buenos resultados.
tabla 73. Humedad %

Humedad %
10 días 16.6 15.59 15.73 16.54
20 días 16.24 15.81 15.94 16.13
30 días 11.38 11 11.23 11.15
78
Humedad %
20 16.6 16.24 15.73 15.94 16.54 16.13
15.59 15.81
15 11.38 11 11.23 11.15
10
5
0
Figura33. Humedad %
Interpretación:
La humedad del suelo contaminado por hidrocarburos total de petróleo en la pila
1, 2, 3 y la pila 4 en los diferentes periodos de 10 días, 20, y 30 días se puede
observar en la tabla N 69 que varía mucho en especial en la pila 3 y la pila 4
debido a la incorporación del biocarbon del estiércol de gallina y a las Solución
A y solución B.
tabla 74. CIC (mq/100g)

CIC (mq/100g)
10 días 21.25 23.22 26.91 27
20 días 20.04 21.14 23.82 24.19
30 días 19.71 20.12 19.71 20.12
CIC (mq/100g)
30 26.91 27
23.22 23.82 24.19
25 21.25 20.04 21.14 20.12
19.71 19.71 20.12
20
15
10
5
0
Figura34. CIC(q/100g)
79
Interpretación:
El CIC del suelo contaminado por hidrocarburos totales de petróleo en las pilas
1,2,3 y 4 varían mucho, los cuales fueron determinado en los diferentes periodos
de 10 días, 20 y 30 días el cual se puede observar en la tabla N70, la variación
de la humedad se dio específicamente en la pila 3 en el que fue incorporado el
biocarbon de estiércol de gallina.
tabla 75. Carbono orgánico total

Carbono orgánico total
10 días 1.93 1.87 2.71 2.43
20 días 2.15 2.21 2.18 2.09
30 días 2.03 2.03 2.12 2.14
Carbono organico total

3 2.71
2.43
2.5 2.21 2.18 2.12
2.15 2.09 2.14
1.93 2.03 2.03
2 1.87
1.5
0.5
0
Figura35. carbono orgánico total

Interpretación:
El carbono orgánico tiene una cierta variación en las cuatro pilas con tratamiento
de suelo, los cuales se puede observar en la tabla N 75, siendo la más destacada
la pila 3 y la pila 4 esto quiere decir que el tratamiento con la incorporación del
biocarbon y la solución A y la solución B ayudaron mucho en el carbono orgánico.
80
tabla 76. Materia orgánica %
Materia orgánica %
10 días 3.33 3.22 4.68 4.19
20 días 3.71 3.81 3.76 3.61
30 días 3.47 3.51 3.66 3.68
materia organica %
5 4.68
4.5 4.19
4 3.71 3.81 3.76 3.66
3.47 3.51 3.61 3.68
3.5 3.33 3.22
3
2.5
2
1.5
1
0.5
0
Figura36. Materia orgánica %

Interpretación:
En la tabla N° 76 se observa los cambios que ocurrió en el suelo contaminado
por hidrocarburos total de petróleo, es decir con la incorporación del biocarbon
ayudo a que la parte microbiana se recupere es decir las bacterias se
multipliquen ya que estas bacterias realizan la degradación del contaminante y
finalmente hacen que la materia orgánica del suelo se recupere haciendo que
este tome su estructura natural se vuelva fértil para el cultivo
81
tabla 77. nitrógeno %
Nitrógeno %
10 días 0.21 0.18 0.25 0.24
20 días 0.2 0.15 0.21 0.2
30 días 0.22 0.21 0.2 0.2
nitrogeno %
0.3
0.25
0.24
0.25
0.22
0.21 0.21 0.21
0.2 0.2 0.2 0.2
0.2 0.18
0.15
0.15
0.1
0.05
0
Figura37. Nitrógeno %
Interpretación:
En la tabla N° 77 se puede observar el cómo fue tomando su estructura el
nitrógeno ya que esto fue alterado por la presencia del hidrocarburo total del
petróleo, si bien se sabe el nitrógeno es la parte fundamental para la producción
de las plantas que se puede cultivar en un suelo ya que el nitrógeno es el
nutriente más principal del suelo por el cual en la tabla se ve como fue
recuperándose durante los tres periodos.
82
tabla 78. relación C/N
relación C/N
10 días 9.19 10.38 10.86 10.12
20 días 10.75 14.72 10.38 10.47
30 días 9.25 10.1 10.68 10.68
Relacion C/N
16 14.72
14
12 10.75 10.86 10.38 10.68
10.38 10.1 10.12 10.47 10.68
10 9.19 9.25
8
6
4
2
0
Figura38. Relación C/N

Interpretación:
En la tabla N 78 se puede observar la relación carbono nitrógeno de los cuales
en la pila 2 en el segundo periodo de 20 días se puede observar que el nivel de
C/N se muestra en un nivel muy alto debido a la incorporación de la solución A y
la solución B, esto quiere decir que las soluciones son grandes influyentes en la
relación de C/N.
83
OE4: evaluar la dosis óptima del biocarbon de estiércol de gallina en la
reducción de la concentración del hidrocarburo total en las pilas de suelo
contaminado
Muestra Peso de suelo Peso de Volumen de
biocarbon fertilizante
(kg)
(g) (ml) A+B
Pila 1 40
Pila 2 40 2.4
Pila 3 40 2.4 3000ml
Pila 4 40 4000ml
4.3. Estadística
tabla 80. Pruebas de normalidad en 10,20 y 30 días
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Estadístico gl Sig. Estadístico gl Sig.
pH_123 ,183 12 ,200* ,958 12 ,760
CE_123 ,316 12 ,002 ,711 12 ,001
Eh_123 ,146 12 ,200* ,938 12 ,468
En la tabla N°°80, de normalidad se pudo observar que en los tres tratamientos

combinados del suelo contaminado con HTP, el pH tiene un p>0.05, los que nos
indica que tiene tuna distribución normal, en cambio la conductividad eléctrica su
p<0.05 siendo esta no paramétrica, y el potencial redox es su p>0.05 también
teniendo una distribución normal en los treinta días.
84
Suma de Media
cuadrados gl cuadrática F Sig.
pH_123 Entre grupos ,075 3 ,025 9,678 ,005
Dentro de grupos ,021 8 ,003
Total ,096 11
Eh_123 Entre grupos 394,136 3 131,379 1,138 ,390
Dentro de grupos 923,331 8 115,416
Total 1317,468 11
CE_123 Entre grupos 2,248 3 ,749 ,984 ,448
Dentro de grupos 6,096 8 ,762
Total 8,344 11
En los parámetros físicos y químicos del suelo contaminado con HTP, en 10, 20,
y 30 días, en lo que respecta al comportamiento del pH tiene un F grande y una
significancia con un p<0.05 entonces rechaza la hipótesis nula y acepta la
hipótesis alterna, donde las medias son diferentes para el caso de la
conductividad eléctrica y potencial redox su Fes pequeño y su p>0.05 acepta la
hipótesis nula y rechaza la hipótesis alterna teniendo medias iguales.
tabla 83. potencial

tabla 82. Tabla: El pH_123 redoxEh_123
HSD Tukeya HSD Tukeya
Subconjunto para alfa = 0.05
Subconjunto
SC_HTP N 1 2
para alfa = 0.05
1 3 6,9633 SC_HTP N 1
2 3 7,1167 1 3 121,9700
4 3 7,1300 4 3 132,2500
3 3 7,1733 3 3 135,3467
Sig. 1,000 ,554 2 3 136,5200
Sig. ,402
85
tabla 84. estadístico Tukey
para CE_123 En las tablas de pH, CE, Y Eh la significancia
HSD Tukeya tiene un valor p>0.05indicando Tukey que el

Subconjunto
tratamiento tuvo una distribución normal.
para alfa = 0.05
SC_HTP N 1
2 3 2,2000
1 3 2,2867
3 3 2,8667
4 3 3,2567
Sig. ,489
CIC_123 ,231 12 ,076 ,842 12 ,029
CO_123 ,239 12 ,058 ,880 12 ,088
MO_123 ,241 12 ,052 ,879 12 ,085
N_123 ,244 12 ,047 ,927 12 ,347
El
carbono orgánico, materia Organica, y nitrógeno tienen un p>0.05 lo que estos
resultados tienen una distribución normal, a diferencia de la capacidad de
intercambio catiónico que es p<0.05 teniendo una distribución no paramétrica.
Estadístico de
Levene gl1 gl2 Sig.
CIC_123 Se basa en la media 1,497 3 8 ,288
Se basa en la mediana 1,013 3 8 ,436
Se basa en la mediana y con 1,013 3 5,193 ,458
gl ajustado
Se basa en la media 1,467 3 8 ,295
recortada
CO_123 Se basa en la media 2,231 3 8 ,162

Se basa en la mediana ,263 3 8 ,850
Se basa en la mediana y con ,263 3 3,879 ,849
gl ajustado
86
recortada
MO_123 Se basa en la media 2,230 3 8 ,162

gl ajustado
recortada
N_123 Se basa en la media ,992 3 8 ,444

gl ajustado
Se basa en la media ,927 3 8 ,471
recortada
De acuerdo a la homogeneidad de varianza con el estadístico de Levene las
significancias tienen un p>0.05, donde los grupos son iguales.
Suma de Media
CIC_123 Entre grupos 23,896 3 7,965 1,132 ,393
Total 80,185 11
CO_123 Entre grupos ,201 3 ,067 1,482 ,291
Total ,561 11
MO_123 Entre grupos ,598 3 ,199 1,475 ,293
Dentro de grupos 1,081 8 ,135
Total 1,678 11
N_123 Entre grupos ,003 3 ,001 1,687 ,246
Total ,007 11
En el estadístico inferencial del análisis de varianza los F son pequeños y su

p>0.05 entonces se puede afirmar que las medias son iguales.
87
tabla 88. CIC_123
tabla 89. CO_123
HSD Tukeya
HSD Tukeya
Subconjunto
Subconjunto
para alfa = 0.05
para alfa = 0.05
SC_HTP N 1
SC_HTP N 1
1 3 20,3600
1 3 2,0300
2 3 21,4933
2 3 2,0367
3 3 23,4800
4 3 2,2200
4 3 23,7700
3 3 2,3367
Sig. ,442
Sig. ,353
tabla 91. N_123

tabla 90. MO_123
HSD Tukeya
HSD Tukeya
Subconjunto
Subconjunto
para alfa = 0.05
para alfa = 0.05
SC_HTP N 1
SC_HTP N 1
2 3 ,1800
1 3 3,5033
1 3 ,2100
2 3 3,5133
4 3 ,2133
4 3 3,8267
3 3 ,2200
3 3 4,0333
Sig. ,240
Sig. ,354
En los 4 parámetros del suelo contaminado con HTP, tienen una significancia de
p>0.05 rechazando la hipótesis alterna.
tabla 92. Correlaciones
CIC_123 CO_123 MO_123 N_123

CIC_123 Correlación de Pearson 1 ,665* ,664* ,511
Sig. (bilateral) ,018 ,019 ,089
N 12 12 12 12
CO_123 Correlación de Pearson ,665* 1 1,000** ,555
Sig. (bilateral) ,018 ,000 ,061
N 12 12 12 12
MO_123 Correlación de Pearson ,664* 1,000** 1 ,558
Sig. (bilateral) ,019 ,000 ,059
N 12 12 12 12
N_123 Correlación de Pearson ,511 ,555 ,558 1
Sig. (bilateral) ,089 ,061 ,059
N 12 12 12 12
88
El CIC guarda correlación con la materia orgánica y carbono orgánico, y el
carbono orgánico también guarda relación junto a la materia orgánica porque
tienen un p<0.05, a diferencia del nitrógeno que tiene un p>0.05 y no guarda
correlación con los demás parámetros.
RHTP_1234 ,147 12 ,200* ,971 12 ,924
En la prueba de normalidad de las 4 pilas en 10, 20, 30, días se evaluo de

acuerdo al estadístico de Shapiro – Wilk ya que su grado de libertad es de 12
resultados, donde se observa un p>0.05, determinando una distribución normal.
Estadístico de
Levene gl1 gl2 Sig.
RHTP_1234 Se basa en la media ,183 3 8 ,905
gl ajustado
Se basa en la media ,161 3 8 ,920
recortada
El estadístico de Levene tiene un p>0.05, donde nos indica que los grupos son
homólogos.
RHTP_1234
Suma de Media
Entre grupos 18,757 3 6,252 1,349 ,326
Total 55,826 11
En el anova se observa que el f es pequeño y su p>0.05 indicando que las
medias son iguales.
89
tabla 96. RHTP_1234
De acuerdo al estadístico
HSD Tukeya
Subconjunto
inferencial de Tukey la
para alfa = 0.05 significancia es mayor a 0.05
RHTP_4P N 1
aceptando la hipótesis nula y
4 3 8,590033
rechazando la hipótesis
3 3 9,275967
2 3 10,655867 alterna
1 3 11,827733
Sig. ,323
90
IV. DISCUSIÓN
OG: Evaluar la bioestimulación asistida por biocarbon de estiércol de gallinas en
la degradación de la contaminación de hidrocarburos totales de petróleo en el
suelo Lima- Jicamarca 2022
En la presente investigación se observa la eficiencia de la bioestimulacion

asistida por el biocarbon de estiércol de gallina para la biorremediación del suelo
contaminado con hidrocarburo total de petróleo, para el cual se trabajó con las
bacterias nativas quienes fueron bioestimulados con el biocarbon de estiércol de
gallina con una dosis de 2.4g, la solucione A con 3000ml y la solución B con una
dosis de 4000ml, los cuales fueron incorporados en las diferentes pilas de suelo
contaminado los cuales fueron ordenada de la siguiente manera, pila 1 sin
hidrocarburos, pila 2 suelo más solución A y solución A, pila 3 suelo más
biocarbon de estiércol de gallina y la pila 4 suelo más biocarbon y las soluciones
A y B, de los cuales se tuvieron resultados muy distintos en el aumento de las
bacterias para los cuales se aislaron en tres diferentes agares siendo agar
Simmons, agar manitol Salt base y el agar cetramide base, donde inicialmente
en el primer agar se tuvo la presencia 130.0 de colonias de bacterias de gram-
negativo, en el segundo agar se tuvo 151.7 de colonias de gram-positivos donde
finalmente en el tercer agar no se tuvo presencia de las bacterias de gram-
negativos, algo que al final todo esto cambio debido a la presencia de las
soluciones y el biocarbon ya que finalmente se tuvo aumento de las bacterias en
las diferentes pilas, pero la pila que tuvo más resultado fue la pila 4 que contenía
el biocarbon más las dos soluciones donde se tuvo la presencia de la bacteria
281.7 de colonias en el agar Simmons (gram-negativo), 238.4 de colonias de
gram-positivo en el agar manitol Salt base y 216.7 de gram-negativos en el agar
cetramide base, donde finalmente la presencia de estas bacterias ayudó en la
degradación del hidrocarburo ya que se degrado de 14.2462 hasta 6.574 es
decir se redujo en un 46% del hidrocarburo en un tiempo de 30 días de
tratamiento.
Por otro lado, Saeed, et al. (2021) en su trabajo similar a la presente
investigación, biorremedio el suelo contaminado aplicando el biocarbon a base
de estiércol de gallinaza y un fertilizante que ayudo en la recuperación de las
colonias microbianas del suelo, con la finalidad de degradar el TPH presentes en
91
el suelo donde finalmente tuvo una degradación del 46% hidrocarburo en un
tiempo de 40 días. Por otro lado, Abangadura, et al., (2022) biorremedio el suelo
contaminado aplicando solo el biocarbon de estiércol de aves de campo, donde
tuvo una degradación de 26% de hidrocarburos, en un tiempo de 12 meses, esto
quiere decir que es necesario aplicar un fertilizante que ayude en la recuperación
de las bacterias nativas del suelo, ya que estas serán las que degradan el
hidrocarburo.
OE1: determinar las propiedades físicas del biocarbon del estiércol de gallina
para reducir los hidrocarburos totales de petróleo en el suelo contaminado.
En la presente investigación las propiedades físicas del biocarbon de

estiércol de gallina van a dependen mucho para la degradación del hidrocarburo,
por el cual el biocarbon fue realizado a base del estiércol de gallina a una
temperatura de 350°C por un tiempo de 5h,obteniéndose el biocarbon aceptable
para absorción, donde de igual manera el tamaño del biocarbon influye mucho
en la absorción del contaminante hidrocarburo siendo así el biocarbon fue
triturado hasta alcanzar una partícula de 1mm ya que mientras las partículas del
biocarbon sean aún más pequeñas mejor será la capacidad de absorción y que
finalmente esta investigación tuvo una degradación del hidrocarburo en un 46%
en 30 días.
Por otro lado, (Barati, et al., 2017) para la biorremediación de suelo
contaminado con hidrocarburos totales, aplico el biocarbon a base de estiércol
de aves que fue realizado a una temperatura de 400°C en tiempo de 4h y
triturado a un tamaño de 2mm, donde tuvo una degradación del hidrocarburo en
un 45,18% en tiempo de 3 meses. Así como (Quang, et al., 2022) biorremedio
un suelo contaminado con TPH, para el cual aplico biocarbon de estiércol de
pollo que pirolizado a una temperatura de 500°C en tiempo de 4h y triturados a
un tamaño de 0,02mm, donde finalmente degrado el 52% del hidrocarburo en
tiempo de 2 meses. Esto quiere decir que propiedades físicas del biocarbon
influyen mucho para la biorremediación de un suelo contaminado.
92
OE2: Identificar las presuntas bacterias presentes en el suelo contaminado de
En la presente investigación se realizaron diferentes tipos de análisis con
la finalidad de identificar los tipos de bacterias que tenía el suelo contaminado
con hidrocarburos, para el cual se utilizaron tres tipos de agares que fueron agar
Simmons, agar manitol Salt base y el agar cetramide base, donde en el agar
Simmons se llegó observar que si había colonias de bacterias que podrían haber
sido escherichia coli, Sphingomonas paucimobilis EPA 505, Sphingobium
yanoikuyae B1 y enterobacter aerogenes, así como también en el agar manitol
Salt base ubo muchas colonias de gram-positivos es decir que este agar hace
referencia a las bacterias cocos y el agar cetramide base hace referencia a las
bacterias pseudomonas aeruginosa u escherichia coli ya que en el agar ubo una
gran cantidad de colonias que podían haber sido dichas bacterias, la presencia
de estas bacterias mayormente fueron en el periodo 2 y en el periodo 3 de la
investigación ya que en el tiempo cero no se tuvo mucha presencia de dichas
colonias de las bacterias.
Ccolque, et al. (2017) en su trabajo de investigación realizo la aislación e
identificación de las bacterias nativas de un suelo contaminado donde uso los
agares Simmons, agar manitol Salt base y el agar cetramide base, donde tiene
las bacterias mencionadas y hace referencia a las posibles bacterias de gram-
negativos y gram-positivos. así como (zhao et al., 2017) indica el grado de
descontaminación de hidrocarburos que tuvo en tiempo de 3 mese el cual en
rango de 65%, para el cual trabajo con las presuntas bacterias nativas del suelo,
que podrían haber sido los Sphingomonas paucimobilis EPA 505, Sphingobium
yanoikuyae B1 que son los que mayormente se encuentran en un suelo
contaminado.
OE3: determinar las características físicas y químicas del suelo contaminado

con hidrocarburo antes y después del tratamiento con el biocarbon de estiércol
de gallina
Para la presente investigación las características físicas y químicas del
suelo contaminado con hidrocarburos total de petróleo, inicialmente se buscó ver
el nivel de concentración de hidrocarburo que tenía el suelo, por el cual la
determinación del hidrocarburo fue realizado por el método gravimétrico por
93
extracción de soxhlet, donde inicialmente se tuvo una concentración de 14.2462
el cual sobrepasa los niveles establecidos por el ECA, de igual manera todos los
parámetros del suelo se encontraban fuera de lo establecido, donde se tenía,
7.45 de potencial de hidrogeno, 0.794 de conductividad eléctrica, 215.23 de
potencial redox, 4.15 humedad, 11.34 de CIC, 4.46 de carbono orgánico, 1.51
de densidad aparente, 7.70 de materia orgánica, 0.36 de nitrógeno total, 185 de
nitratos 12.40 de relación C/N y finalmente se tuvo una textura arcilla-limoso,
como se puede ver en los parámetros físicos y químicos del suelo inicialmente
se encuentra muy alterado debido a la presencia del hidrocarburo lo cual fue
cambiando con el tratamiento sé que le dio es decir con la incorporación de
biocarbon y las soluciones A y B, donde finalmente en la pila sin tratamiento se
tuvo 6.92 de potencial de hidrogeno, 2.69 de conductividad eléctrica, 109.32 de
potencial redox, 16.60 humedad, 21.25 de CIC, 1.93 de carbono orgánico, 1.51
de densidad aparente, 3.33 de materia orgánica, 0.21 de nitrógeno total, 185 de
nitratos 9.19 de relación C/N y 10.537 de TPH en la primera pila que no tiene
ningún tipo de tratamiento se puede ver claramente como estos aún se
encuentran alterados ya que no hay presencia de ningún tipo sustancia que
ayude en la degradación del hidrocarburo algo que cambia notoriamente en la
pila 4 que contiene biocarbon y las soluciones A y B, donde se tiene 7.08 de
potencial de hidrogeno, 2.29 de conductividad eléctrica, 145, 12 de potencial
redox, 11.15 humedad, 20.12 de CIC, 2.14 de carbono orgánico, 3.68 de materia
orgánica, 0.20 de nitrógeno total, 9.25 de relación C/N y 6.574 de TPH, se ve la
gran diferencia que se tiene la pila 1 y la pila 4 con tratamiento, según los
resultados obtenidos quiere decir que el biocarbon y los dos soluciones isieron
que la parte microbiana del suelo se fortalezcan y por ende con la degradación
del hidrocarburo que isieron bajaron la alcalinidad del suelo haciendo que los
parámetros del suelo se neutralicen.
Del mismo modo, Barati, et al., (2017) para la biorremediación del el suelo
contaminado analizo el suelo mediante el método de gravimetría por extracción
donde inicialmente tuvo una concentración muy elevada, de igual manera los
parámetros del suelo se encontraban completamente alterados debido a la
presencia del hidrocarburo, donde inicialmente tuvo 6.09 de pH, 2.71 de
conductividad eléctrica, con una textura de marga arenosa, arcilla 15, arena 56,
limo 29, ECC 26, MO 11.34, Fe extraíble con DTPA 1.99 y la concentración del
94
hidrocarburo tuvo 10.13mil de los cuales según el tratamiento logro semi
establecer todos los parámetros según la ECA, donde tuvo una degradación del
hidrocarburo en 45.18% todo esto fue realizada debido a la presencia de las
bacterias. Esto quiere decir que la presencia de las bacterias nativas es muy
precisa ya estas son la parte fundamental para el crecimiento de un cultivo, así
como estos actúan como los degradantes de un contaminante.
OE4: evaluar la dosis óptima del biocarbon de estiércol de gallina en la reducción

de la concentración del hidrocarburo total en las pilas de suelo contaminado
En la presente investigación se realizaron 4 pilas de 40kg suelos contaminado
con hidrocarburos totales de petróleo para el cual se utilizó el biocarbon de
estiércol de gallina como una enmienda, ya que el biocarbon fue aplicada en la
pila 3 y la pila 4 con una dosis de 2,4kg los cuales fueron homogenizadas con el
suelo, para luego analizar la concentración del hidrocarburo en 3 periodos donde
finalmente se tuvo una degradación de 46% de hidrocarburos en tiempo de 30
días.
Mierzwa-Hersztek, et al. (2018) produjo biocarbón con la cama de las aves,

los que fueron usados en la biorremediación de suelos contaminados por
hidrocarburos totales, el cual fue aplicado al suelo en una dosis de 2,5kg por
muestra donde finalmente tuvo una degradación de 34% de hidrocarburo total
de petróleo en un tiempo de 3 meses. A pesar de que su investigación tuvo más
tiempo de tratamiento no logro tener una buena degradación del hidrocarburo,
algo que fue totalmente lo contrario en la presente investigación, es decir se logró
degradar un porcentaje más alto y en poco tiempo.
95
VI: CONCLUSIÓN
OG: Evaluar la bioestimulación asistida por biocarbon de estiércol de gallinas en la

degradación de la contaminación de hidrocarburos totales de petróleo en el suelo
Lima- Jicamarca 2022
En cumplimiento de los trabajos de manera general se cumplió con la

determinación de la bioestimulacion asistida por el biocarbon de estiércol de gallina
para la degradación del hidrocarburo total de petróleo en el suelo, esto fue realizado
mediante el proceso de pilas aeróbicas ya que estas tuvieron una reducción de
hidrocarburos en cada cierto periodo donde se mantuvo fundamentalmente la
humedad de la pila para que esta pueda generar nuevos microorganismos que puedan
ayudar a la biodegradación del hidrocarburopresente en el suelo.
OE1: Analizar las propiedades físicas del biocarbon del estiércol de gallina para
reducir los hidrocarburos totales de petróleo en el suelo contaminado.
De acuerdo a las propiedades físicas del biocarbon de estiércol de gallina se

realizó una pirolisis para poder obtener el biocarbon los cuales fueron caracterizados en
sus parámetros físicos Humedad, materia volátil, ceniza, carbono fijo y capacidad de
adsorción los que nos dieron como resultado poder obtener una superficie bastante
pequeña de un milímetro para poder obtener mejor reducción del hidrocarburo total.
OE2: Analizar las presuntas bacterias presentes en el suelo contaminado de

En nuestro tercer objetivo lo que se realizo fue determinar los tipos de bacterias
que se generaron, donde inicialmente se realizó un análisis microbiológico para
determinar las bacterias y como este iba reduciendo el hidrocarburo ya que en tiempo
cero se tuvo 14.2462, los cuales en la primera etapa se redujo a 11.1001, en la
segunda etapa se redujo a 8.096 y finalmente logro una óptima reducción de 6.574 y
mejorando el suelo en sus parámetros físicos y químicos como la humedad, la
capacidad de intercambio catiónico, el carbono orgánico, la materia orgánico y el
nitrógeno y lo confirma la prueba cinética para aplicar la prueba de isoterma de
Langmuir y se corrobora la isoterma de Freundlich
96
OE3: Analizar las características físicas y químicas del suelo contaminado con
hidrocarburo antes y después del tratamiento con el biocarbon de estiércol de gallina
Las propiedades físicas y química se realizaron inicialmente caracterizando al

suelo de manera inicial para saber cómo se encontraba el suelo hallando la
concentración inicial de hidrocarburo que el suelo tenía en donde se realizaron análisis
mediante cromatografía de gases y análisis gravimétrico por extracción Soxhlet de los
cuales el más representativo fue el análisis gravimétrico.
OE4: Analizar la dosis óptima del biocarbon de estiércol de gallina en la

reducción de la concentración del hidrocarburo total en las pilas de suelocontaminado
En los tratamientos por cada pila, ya que se tuvo 4 pilas de tratamiento donde se
obtuvo la reducción del hidrocarburo en un 465 siendo los siguientes resultados para
cada pila de tratamiento teniendo en la primera pila 10.537 para la segunda pila, 8.900
para la tercera pila 2, 7.573 y finalmente para la pila 4 que redujo a 6.574 mg/kg de
hidrocarburo, notoriamente.
97
VII: RECOMENDACIONES
Realizar el tratamiento del suelo contaminado con hidrocarburos totales

de petróleo en periodo más amplio para así tener buenos resultados que sean
más representativos.
Importante conservar la humedad del suelo contaminado con hidrocarburo

total de petróleo
Las bacterias sé que se le agrega para reducir el hidrocarburo debe ser

especificas es decir pseudomonas para así obtener buenos resultados.
Utilizar otros materiales más que ayuden en la degradación del

hidrocarburo presente en el suelo.
Se recomienda para conocer el tamaño de los poros utilizar un barrido

electrónico de microscopia que
Se recomienda usar una partícula más pequeña para poder tener buenos
resultados en la biodegracion.
98
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105
ANEXO
ANEXO N°1: INSTRUMENTOS DE RECOLECCION DE DATOS
Ficha 1: Recolección de la muestra

Bioestimulación asistida por biocarbon de estiércol de gallina para la remediación de suelos contaminados por
Título de la tesis hidrocarburos totales de petróleo Jicamarca-Lima 2022
Responsables -Curihuaman Luis, Eduard Gabriel - Félix Modesto Delsa

Asesor Mg. Rita Jaqueline, Cabello Torres
Línea de investigación Calidad y gestión de los recursos naturales
Lugar Jicamarca – distrito de Huarochirí - Lima

Fecha 05/10/2022 Hora
Muestras Ubicación Toma de muestras Peso de muestra
suelo
Georreferenciación
Protocolo de toma de
muestra
Materiales
Ficha 2: Las características físicas y químicas del suelo contaminado con hidrocarburo antes y después
Título del proyecto hidrocarburos totales de petróleo Jicamarca-Lima 2022

Línea de
Calidad y gestión de los recursos naturales
investigación
Muestra Características del suelo indicadores

Temperatura
°C
Potencial de hidrogeno
Acido/base
Conductividad eléctrica mS/cm
Potencial redox mV
Humedad %
Carbono Orgánico Total %
Materia Orgánica %
Capacidad de intercambio
Meq/100g
catiónico
Nitrógeno %
Ficha 3: bacterias presentes en el suelo contaminado de hidrocarburos totales antes y durante el proceso.

Línea de
investigación
Muestra Indicadores
Prueba de tinción gram
Análisis microbiológico
diferencial
mediante PCR (16s)
Recuento en placas Petri UFC/g
Ficha 4: Propiedades físicas y químicas del biocarbon del estiércol de gallina

Línea de
investigación
Muestra Parámetros físico químicos indicadores

Humedad
%
Materia volátil
%
Ceniza %
Carbono fijo %
Potencial de hidrogeno gramos
Conductividad eléctrica Acido/base
Potencial redox mV
Ficha 5: Dosis optima del estiércol de gallina para disminuir la concentración del hidrocarburo.

Línea de
investigación
Muestra Parámetros físico químicos Indicadores

Peso del biocarbón de
estiércol de gallina %
Cantidades de pilas del

suelo con tratamiento g
Peso del suelo g
Tiempo 10, 20, 30 días Días
Evaluación de hidrocarburos
suelo periodos
Peso del biocarbón de
estiércol de gallina g
ANEXO N° 2: VALIDACIÓN DE INSTRUMENTO
ANEXO N° 3. MATRIZ DE OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES
Variable Definición Conceptual Definición Operacional Dimensiones Indicadores Escala
El biocarbon es un El biocarbon fue realizado a Potencial de hidrogeno Acido/base
Indepe Potencial redox mV
compuesto orgánico que se base de estiércol de gallina, Propiedades físicas del biocarbon
ndiente: Pirolisis °C
del estiércol de gallinas
Biostim realiza de diferentes tipos el cual fue realizada a una Humedad %
ulacion Materia volátil %
de materiales los cuales se temperatura de 300°C
Ceniza %
asistida
realiza a altos grados de durante cinco horas en un Carbono fijo %
biocarb Ordinal
temperatura, los cuales son reactor aeróbico. Capacidad de adsorción (método
on de g
de isoterma de Langmuir y
estiérco utilizados como un material Freundlich)
l de
prima en una
gallina Dosis del estiércol de gallina para la
descontaminación de agua reducción de la concentración del
hidrocarburo total en las pilas de Peso del estiércol con el suelo %
y suelo (Shifang, et al., contaminado con HTP.
suelo contaminado
2022). Tiempos del tratamiento
Reducción optima en el tiempo.
Variable Definición Conceptual Definición Operacional Dimensiones Indicadores Escala

el suelo contaminado por para la biorremediación de Temperatura °C
Potencial de hidrogeno Acido/base
hidrocarburo en su gran en suelo contaminado de la
Depend Conductividad eléctrica mS/cm
iente: las grandes industrias como investigación se realizó Potencial redox mV
Remedi Las características físicas y Humedad %
los talleres mecánicos los mediante el uso de
ación químicas del suelo contaminado con Carbono Orgánico Total %
de cuales son contaminados biocarbon del estiércol de hidrocarburo antes y después. Materia Orgánica % Ordinal
Capacidad de intercambio catiónico meq/100g
suelo por las diferentes gallina el cual funciono
Nitrógeno %
con maniobras que realizan en como enmienda siendo un Relación C/N Adimensional
hidrocar Concentración de Hidrocarburo totales mgTHP/Kg
buros la zona para el cual se gran aporte para las
totales, utiliza en petróleo y otras bacterias presentes en el Prueba de tinción gram +o–
de Análisis bioquímico diferencial
sustancias que contengan suelo contaminado, los
petróleo Identificar las presuntas bacterias Recuento en placas Petri UFC/g
algún derivado del petróleo cuales degradaran el presentes en el suelo contaminado Preparación de las muestras de
de hidrocarburos totales antes y g Nominal
(Lei, et al., 2022). hidrocarburo total.
durante el proceso
cada pila
ANEXO N° 4: MUESTREO DE SUELO BAJO EL DECRETO SUPREMO 011-
2017 MINAM
PROBLEMA
HIPOTESIS OBJETIVOS VARIABLE
PG: ¿De que manera la bioestimulación HG: La bioestimulación Evaluar la
asistida asistida por biocarbón de bioestimulación asistida
por biocarbón de estiércol de gallina estiércol de gallina por biocarbón de
remedia los suelos contaminados por remedia de manera estiércol de gallina para
hidrocarburos totales de petróleo significativa los suelos remediar los suelos
Jicamarca-Lima 2022? contaminados por contaminados por
hidrocarburos totales de hidrocarburos totales de
petróleo Jicamarca-Lima petróleo Jicamarca-Lima
2022 2023
PE1: Cuales son las condiciones de HE1: Existen condiciones OE1: Analizar las VI: Bioesti
Bioestimulación asistida por biocarbón de Bioestimulación condiciones de
relacionadas cn las propiedaes del asistida por biocarbón Bioestimulación asistida
biocaron y el tratamiento en la optiimas relacionadas cn por biocarbón
remediacion de suelos contaminados las propiedaes del relacionadas con las
con hidrocarburos de petroleo -TPH? biocaron y el tratamiento propiedaes del biocaron
en la remediacion de y el tratamiento en la
suelos contaminados con remediacion de suelos
hidrocarburos de contaminados con
petroleo -TPH hidrocarburos de
petroleo -TPH
PE2: Que bacterias dominan los HE2: Diferentes bacterias PE2: Analizar las
procesos de remediacion de suelos dominan los procesos de bacterias dominantes en
contaminados con hidrocarburos de remediacion de suelos los procesos de
petroleo -TPH? contaminados con remediacion de suelos
hidrocarburos de contaminados con
petroleo -TPH hidrocarburos de
petroleo -TPH? VD: remedia
ANEXO N° 5: PREPARACION DEL BIOCARBON

ANEXO N° 6: ANALISIS MICROBIOLOGICO
ANEXO N° 7: PREPARACION DE LAS PILAS DE TRATAMIENTO
ANEXO N° 8: RESULTADOS DEL LABORATORIO DE LA UNI
ANEXO N°9: RESULTADOS DEL LABORATORIO PACIF CONTROL
ANEXO N° 10: ESTANDAR DE CALIDAD AMBIENTAL (ECA) DE SUELO
D.S.011.2017
FACULTAD DE INGENIERÍA Y ARQUITECTURA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL
Declaratoria de Autenticidad del Asesor
Yo, CABELLO TORRES RITA JAQUELINE, docente de la FACULTAD DE INGENIERÍA Y

ARQUITECTURA de la escuela profesional de INGENIERÍA AMBIENTAL de la
UNIVERSIDAD CÉSAR VALLEJO SAC - LIMA ESTE, asesor de Tesis titulada:
"Bioestimulacion Asistida por Biocarbon (Estiercol de Gallina) para Remediar Suelos
Contaminados por Hidrocarburos Totales de Petróleo Jicamarca-Lima 2022", cuyos
autores son CURIHUAMAN LUIS EDUARD GABRIEL, FELIX MODESTO DELSA,
constato que la investigación tiene un índice de similitud de 11.00%, verificable en el
reporte de originalidad del programa Turnitin, el cual ha sido realizado sin filtros, ni
exclusiones.
He revisado dicho reporte y concluyo que cada una de las coincidencias detectadas no
constituyen plagio. A mi leal saber y entender la Tesis cumple con todas las normas para
el uso de citas y referencias establecidas por la Universidad César Vallejo.
En tal sentido, asumo la responsabilidad que corresponda ante cualquier falsedad,

ocultamiento u omisión tanto de los documentos como de información aportada, por lo
cual me someto a lo dispuesto en las normas académicas vigentes de la Universidad
César Vallejo.
LIMA, 14 de Diciembre del 2022
Apellidos y Nombres del Asesor: Firma
CABELLO TORRES RITA JAQUELINE Firmado electrónicamente

DNI: 08947396 por: RCABELLOTO15 el
14-12-2022 16:48:16
ORCID: 0000-0002-9965-9678
Código documento Trilce: TRI - 0487694

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FACULTAD DE INGENIERÍA Y ARQUITECTURA

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL

Bioestimulación asistida por biocarbón (Estiércol de Gallina)

TESIS PARA OBTENER EL TÍTULO PROFESIONAL DE:

LÍNEA DE RESPONSABILIDAD SOCIAL UNIVERSITARIA:

Desarrollo sostenible y adaptación al cambio climático

A mi mama y a mi hermano quienes me apoyan

Félix Modesto, Delsa

Le dedico el resultado de este trabajo a

Curihuaman Luis, Eduard Gabriel

A Dios por la vida, la salud y su infinito amor.

Félix Modesto, Delsa

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