PRCTICA ICP-MS

1.- Fundamento terico 2.- Descripcin de las partes del equipo 3.- Encendido del plasma. Visualizacin de parmetros 4.- Optimizacin (tunning). Parmetros de optimizacin 5.- Anlisis semicuantitativo 6.- Anlisis cuantitativo 7.- Prctica: 7.1- Anlisis Semicuantitativo 7.2- Creacin de un mtodo 7.3- Preparacin de una recta de calibrado 7.4- Crear una secuencia 7.5- Generar un informe. 7.6- Anlisis de espectros

1.- FUNDAMENTO TERICO :

Los componentes de la muestra se ionizarn por efecto de un plasma de argn (plasma: volumen de gas con parte de sus tomos o molculas ionizados). Estos iones producidos sern separados en base a su relacin masa/carga en un espectrmetro de masas y posteriormente cuantificados por un detector multiplicador de electrones. Esta tcnica tiene una amplia aplicacin en la determinacin de elementos de inters medioambiental, pudiendo analizar ms de 70 elementos de forma simultnea.

2.-DESCRIPCIN DE LAS PARTES DEL EQUIPO

1.- Introduccin de la muestra: - Nebulizador - Spray chambers 2.- Fuente de ionizacin: - Antorcha 3.-Interfase de extraccin - Cono sampler - Cono skimmer 4.- Celda de colisin/reaccin : Octapolo 5.- Lentes Inicas 6.- Espectrmetro de masas : Cuadrupolo 7.- Detector : Multiplicador de electrones

Nebulizador : La muestra lquida es introducida en la corriente de gas en forma de aerosol. La funcin del nebulizador es crear un aerosol con gotitas de tamao pequeo y uniforme, puesto que solo las gotitas pequeas se transportan al plasma.
Existen diferentes tipos de nebulizadores en funcin de sus caractersticas: 1. - Eficacia segn caudal de la muestra 2. -Tolerancia a slidos suspendidos o disueltos 3. -Tolerancia a cidos y bases fuertes y a solventes orgnicos. 4. - Diferentes posibilidades de que las muestras puedan causar efecto memoria. 5. - Capacidad de aspiracin.

Spray chambers: Separa y desecha las grandes gotas de disolucin

que se han formado, para que solo las pequeas se encuentren en suspensin en el flujo de gas y alcancen el plasma.

Antorcha: Consiste en tres tubos concntricos de cuarzo a travs de

los cuales fluyen corrientes de argon. La antorcha est rodeada por una espiral de 2-4 vueltas, la cual genera una radiofrecuencia, un campo electromagntico. En ella se genera el plasma y se produce la ionizacin de la muestra.

Un plasma es cualquier volumen de gas con parte de sus molculas o tomos ionizados, es una mezcla gaseosa conductora de la electricidad que contiene cationes y electrones. Se produce porque una chispa de alto voltaje provoca iones de Ar+ y e- en las paredes del tubo ms externo de la antorcha creando el plasma. La radiofrecuencia origina colisiones no elsticas entre Ar+ y e-, dando lugar a ms iones de Ar. La interaccin campo-iones-electrones genera movimiento de las especies en juego. La resistencia al movimiento genera calentamiento. En el ncleo del plasma se alcanzan temperaturas de 10.000K. El plasma de Ar excita los iones positivos de los tomos de la muestra. Conociendo la temperatura en el canal central y los valores de las primeras energas de ionizacin, se sabe que la mayora de los elementos se ionizarn. 3

Sistema de vaco : Los espectrmetros de masas trabajan a baja presin (alto vaco). El mantenimiento de una alta presin en la regin del analizador es esencial para reducir el fondo y los efectos de dispersin que causaran altos niveles de molculas residuales de gas.
La configuracin preferida es la de tres etapas diferenciadas por sistemas de bombas de vaco, que comprenden la zona de la interfase, la inmediata anterior al analizador y la zona del analizador, en las que las presiones son progresivamente ms bajas. El vaco en la interfase se consigue mediante una bomba rotatoria, que se desconecta cuando el equipo est en standby, lo cual permite el fcil acceso a esta zona para su mantenimiento. El vaco en las otras dos zonas se obtiene gracias al bombeo de dos bombas turbomoleculares separadas o por una sola bomba dual.

Espectrmetro 1.0 E-05 bar

Plasma 1 bar

1 mm

0.4 mm

Haz de iones

Vaco 1.0 E-02 bar

Interfase Plasma/Vaco: La interfase comprende una etapa de bajo

vaco localizada entre dos placas cnicas de metal conocidas como Cono Sampler (cono de muestreo) y Cono Skimmer (cono de separacin) que llevan perforados un pequeo orificio. El trmino interfase es aplicado a estos conos y al espacio formado entre ellos. El papel de la interfase es extraer una porcin representativa de la poblacin de iones del plasma y transferirla eficientemente a las regiones de

alto vaco, donde se encuentran las lentes de enfoque, el espectrmetro de masas y el detector. Cono Sampler: o cono de muestreo, es un cono de nquel con un pequeo orificio central (1 mm), a travs del cual pasa el plasma a una cmara con una presin de 10 mbar, all se produce una expansin rpida del gas que provoca su enfriamiento. Una fraccin del gas pasar al Cono Skimmer : o cono separador que es tambin de nquel y a travs del cual el plasma pasar a una cmara mantenida a la presin del espectrmetro de masas. En ella el gas es separado de los iones + y bombeado hacia fuera. Los cationes son enfocados al MS a travs de las lentes inicas.

Lentes Inicas : Las lentes inicas son placas electrostticas situadas

en la zona intermedia, que enfocan el haz de iones que proviene del skimmer, se les aplica un voltaje que har que los iones positivos del plasma sean atraidos y puedan ser manipulados en la trayectoria requerida. Adems de dirigir y enfocar los iones, el sistema de lentes inicas es responsable de separar los iones de las especies neutras y de los fotones gracias a los campos electrostticos creados.

Celda de Colisin Reaccin : La celda de colisin/reaccin consiste en un

octopolo (ORS) en el que se eliminarn las interferencias poliatmicas por el efecto de : Hidrgeno : gas reactivo, que reacciona con las interferencias Helio: gas inerte que colisiona con los interferentes.

La principal fuente de interferencias espectrales en ICP-MS son: 1.- Superposicin directa de un elemento diferente con un istopo de la misma masa nominal, es una interferencia isobrica. Sn-114 con Cd-114. 2.- Superposicin de un in poliatmico formado por la combinacin de especies derivadas del gas del plasma, disolvente de la muestra y/o matriz de la muestra. Ca 40O16 con Fe56 . 3.- Especies dobles cargadas formadas por la prdida de dos electrones en vez de uno. El cuadrupolo separa los iones en base a su relacin m/c, as un in doble cargado tendr la masa M/2. As 136Ba2+ se solapa con 68Zn+ .

Modos de trabajo celda de colisin/reaccin Modo Hidrgeno reaccin : Utiliza un gas reactivo el hidrgeno. Mecanismo de reaccin.

Especfico para la eliminacin de interferencias poliatmicas de Argn. Especfico para determinaciones de Ca ; Fe y Se.

Modo Helio Colisin : Utiliza un gas inerte el helio, que no reacciona con la matriz de la muestra y por ello no se producen nuevas interferencias. General, elimina mltiples interferencias. Puede ser aplicado a todas las matrices y a todas las muestras utilizando las mismas condiciones analticas. Modo Normal : Se opera sin gas aadido en la celda de colisin. El oct Apolo solo acta como gua del haz de iones. Este modo se utiliza para el anlisis de elementos de masas bajas no interferidos, como Li, Be y B. Tambin para elementos que no requieren eliminar interferencias tales como Pb, Tl y U.

Analizador de masas : Cuadrupolo: Son cuatro barras de metal que se encuentran paralelas y equidistantes, a las cuales se les aplica un potencial de corriente continua y un potencial de radiofrecuencia. La combinacin de estos campos hace que solo aquellos iones de una determinada relacin m/z tengan una trayectoria estable y lleguen al detector . Por lo tanto, el cuadrupolo separa los iones en base a su relacin m/z. Detector : Multiplicador de electrones: Cuando los iones chocan
con su superficie se originan electrones secundarios que se movern ,debido al cambio de potencial, hacia otras zonas donde originarn ms electrones secundarios, los cuales provocarn una seal elctrica.

3.ENCENDIDO PARMETROS

DEL

PLASMA.

VISUALIZACIN

DE

De forma habitual el equipo se mantiene en modo Standbye, es decir con el vaco conectado. Al comenzar una sesin de trabajo debemos conectar el plasma, pero antes debe estar encendido el sistema de refrigeracin y el extractor. Una vez encendida la antorcha el equipo pasar al modo anlisis y ya podemos empezar a trabajar. Es importante comprobar el estado de todos los parmetros en el panel de control : vaco : presin en la interfase y en el analizador agua de refrigeracin : flujo, temperatura presin y flujo del plasma gas y del carrier gas.

4.- OPTIMIZACIN (TUNING). PARMETROS DE OPTIMIZACIN

La sintona es una operacin bsica que se realiza antes de una sesin analtica. El objetivo es conseguir una seal estable y sensible usando una solucin de sintona de 1 ppb de Li, Y, Ce y Tl. Los parmetros de sintona a tener en cuenta son sobre todo la posicin de la antorcha, flujo de gas y posicin de las lentes extractoras e inicas.

Sensibilidad : Con Li-7 ; Y-89 y Tl-205 cubriremos prcticamente todo el rango de masas y podremos ver la seal obtenida ( cps: cuentas por segundo). La RSD% no puede ser mayor del 15%. Formacin de xidos : El nivel de xidos (MO+) se mide a partir de la relacin CeO/Ce , puesto que el CeO es muy estable en el plasma y tiene un fuerte enlace. Es deseable un bajo nivel de xidos en un ICP-MS y la medida del cociente CeO/Ce da una referencia sobre la robustez del equipo Formacin de especies dobles cargadas : Aquellos elementos con una segunda energa de ionizacin ms baja que la primera de Ar alcanzar un grado significativo de formacin de carga 2+. Estos elementos son los alcalino-trreos, metales de transicin y REE. Forma de los picos espectrales.

5.- ADQUISICIN E INTERPRETACIN DE DATOS

El ICP-MS proporciona dos tipos de medidas: 1.- Scanning : Realiza una exploracin de un rango de masas definido y el cuadrupolo camina secuencialmente a travs de todo el rango de masas definido. Es el mtodo de adquisicin ms adecuado para la investigacin de 7

muestras desconocidas, donde la matriz es desconocida y se precisa conocer la posible presencia de analitos que puedan originar interferencias en la medida de las muestras. 2.- Peak jumping : Donde el operador selecciona los istopos a ser medidos y las masas no seleccionadas son saltadas. Es el mtodo de medida utilizado cuando los analitos objeto de estudio son conocidos y no se requiere otra informacin adicional ( por ejemplo, la presencia o no de otros analitos).

5.- ANLISIS SEMICUANTITATIVO

CURVA DE RESPUESTA MOLAR

En un anlisis semicuantitativo, el equipo da unos valores de concentracin para La adicin de una serie una curva de respuestala muestra cada masa en base a de patrones internos a molar. permite construir la curva de respuesta molar del equipo.
1600000

Determinacin de Pb
1200000 Tb Tl

Th

800000

RM

Y 400000 Sc 0 0 50 100 150 200 250 Co In

Masa

RM = (Seal x Potencial ionizacin) / (Abundancia x Concentracin) m/z = masa/carga Originariamente, los fabricantes del equipo con una solucin multielemental de concentraciones conocidas elaboraron una curva de respuesta molar que es la que dispone el software del equipo. Al hacer un anlisis semicuantitativo, el cuadrupolo ir barriendo todo el espectro y para cada masa obtendremos una seal, es decir un nmero de cuentas o de cuentas por segundo, que aplicada a la curva nos dar una respuesta molar. Conociendo todos los trminos de la frmula despejar la concentracin. Pero debemos tener en cuenta que el estado del equipo vara cada da, por lo que las seales obtenidas sern diferentes y por lo tanto tambin lo ser la curva de respuesta molar. Una forma de obtener una curva real en cada momento es hacer un ajuste de la misma con patrones de concentracin conocida e inmediatamente despus realizar el anlisis de la muestra.

En la prctica, este mtodo sirve para conocer la matriz y para investigar en qu rango de concentraciones nos encontramos y nos da un error del 5 al 30%.

6.- ANLISIS CUANTITATIVO

La cuantificacin se obtiene a travs de la comparacin de las cuentas medidas de la muestra desconocida con aquellas de una sustancia que contiene una cantidad conocida del elemento o istopo de inters. Existen diversos mtodos para realizar un anlisis cuantitativo, utilizaremos el mtodo de calibracin externa con el uso de soluciones standards que cubran todo el rango de concentraciones esperado. Tambin emplearemos patrones internos que nos permitirn compensar la deriva de la seal y algunos efectos de la matriz. Como norma general, el patrn interno no debe estar presente en la muestra y debe poseer una masa y un potencial de ionizacin similar al elemento a determinar.

7.- PRCTICA : Determinacin de Mn, Cu, As, Cd, y Pb en una muestra

de suelo y de agua de riego. 7.1- Anlisis Semicuantitativo : 7.2- Creacin de un mtodo : En la tabla peridica marcaremos los istopos de los elementos a determinar y el modo de medida (normal, hidrgeno o helio) y haremos tres repeticiones de cada anlisis. El programa nos da la opcin de analizar todos los istopos de cada uno de los elementos, como norma general, marcaremos el istopo recomendado por el equipo que es el que menos interferencias presenta, aunque cuando sospechemos que el analito pueda estar interferido por iones poliatmicos procedentes de la matriz o del propio plasma, seleccionaremos varios istopos y analizaremos los espectros. 7.3- Preparacin de una recta de calibrado : A partir de soluciones patrn comerciales de 1000 ppm preparamos una solucin intermedia de 5 ppm.

Elemento Mn Cu As Cd Pb

Peso acumulado

Peso real

Concent. ppm

Peso volumen total Conc. ppm = ( peso real * 1000 ) / Peso volumen total 9

Conc. Ideal ppb P0 P1 P2 P3 P4 P5 P6 P7 0 2 5 10 25 50 100 200

Peso

Peso vol.total

Calcularemos la concentracin real de cada patrn : Conc ppb = (Peso patrn * ppm sol.interm. * 1000 ) / Peso vol.total

P1 Mn Cu As Cd Pb

P2

P3

P4

P5

P6

P7

Metemos los datos y despus de analizar los patrones preparados mediante una secuencia, ajustamos las rectas hasta obtener una buena regresin. Los estndares internos sern aadidos tanto a muestras como a patrones en igual concentracin. 7.4 Anlisis de las muestras : Creamos una secuencia y analizamos las muestras con el mtodo y la calibracin que se cre anteriormente. El equipo lo hemos programado para que haga 3 anlisis de cada muestra y para que nos de cmo resultado final el promedio de las tres medidas. 7.5 Anlisis de espectros : El espectro de masas es la representacin de la seal obtenida frente a la masa. Se puede analizar el espectro obtenido en un anlisis, mediante el acceso a la informacin contenida en la base de datos de los elementos que dispone el equipo. 7.6 Generacin de un informe : Todos los datos del anlisis.

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