Tema13-Expresión Genes.
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Tema13-Expresión Genes.
Una vez que se estableció la estructura del ADN y el mecanismo de replicación del mismo, faltaba por
descubrir cómo el mensaje genético del ADN se materializaba en unas características concretas del organismo.
Para ello hay que remontarse a 1902, cuando el médico inglés Garrod enunció que la alcaptonuria,
enfermedad de algunas personas que presentan la orina negra, se debía a un gen recesivo. Mediante análisis químicos
llegó a la conclusión de que las personas afectadas no consiguen catabolizar el ácido homogentísico o "alcaptón", que al
excretarse en la orina, se oxida en contacto con el aire, tomando un color negro. Se pudo pasar así de un paralelismo
entre gen y carácter, a un paralelismo entre gen y sustancia.
Posteriormente, en 1948, Beadle y Tatum fueron los primeros en establecer la existencia de una relación
directa entre la molécula de ADN y la secuencia de aminoácidos de una enzima, y propusieron la hipótesis de "un gen,
una enzima". Según la cual, un gen contiene la información para que los aminoácidos se unan en un determinado
orden y formen una enzima.
Para establecer esta hipótesis trabajaron con el moho común del pan, Neurospora crassa, al que sometieron a
elevadas dosis de rayos ultravioleta con el fin de provocar alteraciones en su ADN. Aparecieron mutantes que ya sólo
sobrevivían si además se añadía el aminoácido arginina, necesario para sintetizar sus proteínas. Habían perdido, por
tanto, la capacidad de sintetizar este aminoácido. Otros mutantes necesitaban o arginina o citrulina; y otros, o
arginina o citrulina u ornitina. A partir de aquí se dedujo que la síntesis de arginina debía seguir la siguiente ruta
metabólica:
Precursor --→ Ornitina --→ Citrulina --→ Arginina
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Biología. Transcripción y traducción
Mediante análisis bioquímicos se pudo confirmar que los diferentes mutantes carecían de determinadas
enzimas y que, en cada uno de ellos, aumentaba mucho uno de los componentes de la vía de la arginina. La
conclusión era obvia: al faltar una enzima, el metabolismo queda bloqueado en aquella sustancia sobre la cual debía
actuar. Los mutantes si podían vivir, si al medio se le añadía la sustancia que no podían sintetizar, o cualquiera de las
sustancias derivadas de ellas, ya que si tenían el resto de las enzimas.
Se estableció así un paralelismo entre genes y enzimas (un gen-una enzima). Al alterarse la secuencia de
nucleótidos de un gen, falta una enzima.
Posteriormente, puesto que no todas las proteínas son enzimas, esta hipótesis se matizó pasando a "un gen-
una proteína". Pero como muchas proteínas están formadas por varios polipéptidos, la hipótesis se transformó en "un
gen-una cadena polipeptídica".
Por lo tanto, el gen se define como aquella región del ADN que contiene la información necesaria
para sintetizar una molécula de polipéptido.
Una vez establecido por Beadle y Tatum, en 1948, el paralelismo entre genes y enzimas, surgió
otro problema: dado que la síntesis de proteínas se realiza en los ribosomas (situados en el citoplasma) y
que el ADN se encuentra en el núcleo, del que no sale, se necesita alguna molécula que actúe como
intermediario entre el ADN y los ribosomas. Este papel lo realiza un tipo de de ARN, el ARN mensajero.
El proceso de formación de los ARN se denomina transcripción.
En los ribosomas se pasa de una secuencia de ribonucleótidos del ARNm a una secuencia de
aminoácidos. Este proceso se denomina traducción, y en él intervienen otros dos tipos de ARN, el ARN
ribosómico, componente fundamental de los ribosomas, y el ARN de transferencia, que transporta los
aminoácidos hasta los ribosomas.
La síntesis de ARN se produce gracias a la acción de una enzima, la ARN polimerasa, la cual
necesita una cadena de ADN que actúe como molde para establecer la secuencia de bases del ARN que se
va a sintetizar gracias a la complementariedad que existe entre las bases nitrogenadas (sabiendo que la
base complementaria de la A es U en el ARN).
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Biología. Transcripción y traducción
La transcripción es monocatenaria., cuando se transcribe un gen, de las dos cadenas de ADN que
forman el gen, sólo una, la denominada hebra molde, se transcribe, por lo que la secuencia del ARN
transcrito es complementaria de una de las dos hebras del ADN. A la hebra complementaria a la hebra
molde se le denomina cadena codificante.
La transcripción es reiterativa, es decir, una misma región del ADN puede estar siendo
transcrita simultáneamente por varias ARN polimerasas, con lo que se obtienen múltiples copias.
El proceso en líneas generales, es el mismo en todas las células, aunque existen algunas
diferencias entre la síntesis de ARN en las células procariotas y las eucariotas.
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Biología. Transcripción y traducción
La enzima se desplaza por la hebra molde en sentido 3' 5', por lo que une nucleótidos mediante
enlaces fosfodiéster (nucleotídico), siempre en sentido 5' → 3' (antiparalela), por la adición de
ribonucleótidos trifosfato (ATP, GTP, CTP, y UTP).
Terminación: La ARN-polimerasa continúa añadiendo ribonucleótidos hasta que llega a una zona
del ADN, denominada señal de terminación, con unas secuencias de bases a las que reconoce,
liberándose del ADN. En procariotas las secuencias de terminación son aquellas que se leen igual
de derecha a izquierda, que de izquierda a derecha.
Maduración: Se refiere a las modificaciones que sufren los ARN después de sintetizarse. En
procariotas sólo maduran los ARN precursores de los ARN ribosómicos y transferentes. Los
ARNm no sufren proceso de maduración; según se transcriben, se les unen los ribosomas y se van
traduciendo. De hecho, la traducción suele comenzar sin que el proceso de transcripción haya
finalizado por completo.
Sin embargo, los ARNr o ARNt recién transcritos requieren un proceso adicional de maduración
para ser funcionales. Durante este proceso, se producen una serie de reacciones de metilación de bases y
eliminación específica de ciertos fragmentos de ARN, que permiten obtener los ARN definitivos
funcionales.
La transcripción en eucariotas tiene lugar en el núcleo de la célula, así como en las mitocondrias
y en los cloroplastos dónde se produce la transcripción de los genes presentes en dichos orgánulos.
La transcripción en eucariotas es más compleja que en procariotas, pues además de que el ADN
está unido a histonas, intervienen tres ARN polimerasas, que se encargan de sintetizar los distintos tipos
de ARN:
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Biología. Transcripción y traducción
La ARN polimerasa I sintetiza los precursores del ARN ribosómico (ARNr) (exepto el 5 S).
La ARN polimerasa II se encarga de la transcripción de los genes origen de los ARN mensajeros.
La ARN polimerasa III sintetiza los precursores del ARN transferente (ARNt) y el ARNribosómico
5S de la subunidad grande del ribosoma.
En eucariotas maduran todos los ARN. El proceso de maduración de los ARNr y ARNt es
semejante a procariotas, sin embargo en las eucariotas también se da maduración del ARNm:
En las células eucariotas los genes constan de fragmentos “con sentido” que llevan información
útil, llamados exones, y de fragmentos “sin sentido” intrones, que también se transcriben pero que son
posteriormente cortados y eliminados del ARN recién sintetizado, mediante un mecanismo que se conoce
con el nombre de splicing (del inglés, empalme).
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Biología. Transcripción y traducción
4. TRADUCCIÓN: SÍNTESIS DE PROTEÍNAS.
La traducción es el segundo proceso del proceso general de la expresión génica, mediante el cual
se sintetiza una proteína con la información proporcionada por la secuencia de bases de la molécula de
ARNm. Es decir, La secuencia de bases del ARNm contiene la información necesaria para determinar la
secuencia de aminoácidos de la proteína.
La traducción tiene lugar en el citoplasma, donde se encuentran los ribosomas. Estos orgánulos
interpretan la secuencia concreta de nucleótidos existente en el ARNm, la cual determina el orden en
que van a unirse los aminoácidos que van a constituir la proteína específica. Por tanto, ARNm con
secuencias de bases nitrogenadas distintas llevan información para síntesis de proteínas diferentes.
Una vez conocida la función de intermediario que realiza el ARNm entre el ADN y las proteínas,
quedaba por dilucidar cómo la secuencia de nucleótidos del ARN se podía traducir en una secuencia de
aminoácidos. El problema que se planteó fue cómo pasar de un lenguaje de 4 letras (A, G, C y U) a otro
formado por 20 letras (los 20 aminoácidos que forman las proteínas). Se necesitaba un "diccionario" con
el que poder realizar la traducción; este diccionario es el código genético.
¿Cuántas bases nitrogenadas del ARNm codificarán un aminoácido? Si fuera una base por
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aminoácido, sólo se podrían codificar 4 aminoácidos; con 2 bases por aminoácido, el resultado sería 4 =
16 aminoácidos, no es suficiente, aún quedarían aminoácidos sin codificar. Sin embargo, si 3 bases
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Biología. Transcripción y traducción
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codifican un aminoácido, las combinaciones posibles son 4 = 64 tripletes; sobran para los 20
aminoácidos. Evidentemente habrá aminoácidos que son codificados por más de un triplete. Los tripletes
de bases del ARNm reciben el nombre de codones. Experimentalmente* se comprobó que realmente eran
3 bases las que codifican un aminoácido.
Un codón es la secuencia de tres nucleótidos consecutivos en una molécula de ARNm que codifica
para un aminoácido específico de la cadena polipeptídica, durante la síntesis de proteínas.
Existen 61 codones codificadores de aminoácidos, un codón (AUG) que, además de codificar para
el aminoácido metionina, es la señal de inicio. Hay también tres codones sin sentido (UAA, UAG y UGA,
llamados codones de terminación que no se corresponden a ningún aminoácido y finalizan la síntesis de
proteínas.
Un anticodón es el triplete de bases del ARN transferente que se une específicamente a un
codón complementario del ARN mensajero.
* Severo Ochoa descubrió en 1955 la enzima polinucleótido fosforilasa, capaz de sintetizar ARNm a partir de
nucleótidos difosfato sin necesidad de un molde de ADN. Así, partiendo de un medio en el que sólo había UDP, se
sintetizaba un ARNm llamado poli-U (...UUUUUUUUU....). Basándose en estos trabajos Nirenberg, en 1961, dedujo
que el triplete de bases UUU codificaba para el aminoácido fenilalanina, el CCC para prolina y el AAA para lisina.
Posteriormente se descifró el resto de los tripletes , gracias a los investigadores Kornberg y Khorana.
Es universal (aunque con exepciones) Es el mismo código para todas las células de todos los
organismos conocidos (incluso los seres acelulares como los virus, emplean el mismo código
genético); así, por ejemplo, el codón UUG codifica para el aminoácido leucina, tanto en los
procariontes como en los eucariontes. Este hecho constituye una prueba más a favor del origen
de todos los seres vivos a partir de un precursor común.
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Biología. Transcripción y traducción
(Recientemente se ha descubierto que esta universalidad tiene excepciones: concretamente, las mitocondrias,
algunos protozoos y los micoplasmas (bacterias) utilizan u código genético ligeramente diferente ).
El código genético es degenerado (redundante). Este término indica que la mayor parte de los
aminoácidos, a excepción de la metionina y el triptófano, están codificados por más de un codón
(generalmente sólo se diferencian en la última letra). Esto supone una ventaja, puesto que un
cambio de un nucleótido (mutación), en muchas ocasiones, puede no alterar el orden de los
aminoácidos de una proteína.
Es un código sin solapamientos. Los tripletes están dispuestos de manera lineal y continua, sin
que entre ellos existan espacios y sin que compartan ninguna base nitrogenada.
Presenta un triplete de de iniciación AUG y tres tripletes sin sentido UAA, UAG, UGA o de
terminación.
Aminoacil-ARNt- sintetasa
Aminoácido + ARNt + ATP ---------------------------→ Aminoacil-ARNt + AMP + PPi
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Biología. Transcripción y traducción
Una vez activados los aminoácidos tiene lugar la síntesis de proteínas, la traducción, proceso que se lleva
a cabo en tres etapas: iniciación, elongación y terminación.
La porción de ARNm cubierta por el ribosoma corresponde a dos codones. Sobre el primero de
ellos, AUG, ya está situado el aminoacil-ARNt correspondiente, en el lugar denominado sitio P
(de peptidil, ya que es el lugar donde se localiza el ARNt que lleva unida la cadena peptídica en
formación). La zona donde se encuentra el segundo codón es el sitio A (de aminoacil, ya que es el
lugar en el que se acopla cada nuevo aminoacil-ARNt).
El proceso de iniciación requiere la ayuda de unos factores proteicos de iniciación (FI) y precisa
energía, que se obtiene por la hidrólisis del GTP (formándose GDP + P).
El siguiente paso es la formación de un enlace peptídico entre los dos aminoácidos situados uno
en el sitio P y otro en el sitio A, gracias a la enzima peptidil transferasa, localizada en la
subunidad mayor del ribosoma. Se forma así un dipéptido que permanece unido al segundo
ARNt, localizado en el sitio A.
A continuación se produce la translocación del ribosoma, es decir, se desplaza a lo largo del
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Biología. Transcripción y traducción
ARNm en sentido 5' -> 3'. Como este desplazamiento es exactamente de tres bases, el primer
ARNt abandona el ribosoma, y el peptidil-ARNt, que todavía se mantiene unido a su codón, pasa
a ocupar el sitio P, quedando el sitio A libre. Sobre él se fijará un nuevo aminoacil- ARNt, y se
irá alargando la cadena proteica.
El proceso de elongación requiere unos factores de elongación (FE) y energía, que la proporciona
el GTP.
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Biología. Transcripción y traducción
La velocidad de síntesis proteica es alta (se pueden unir hasta 1400 aminoácidos por minuto) lo
que da idea de la eficacia del sistema. Por otra parte, tanto en procariotas como en eucariotas, Las
cadenas de ARNm suelen ser leídas por más de un ribosoma simultáneamente (polirribosomas), cada
ribosoma sintetiza un ejemplar de la proteína. Esto permite un ahorro de tiempo considerable en la
síntesis de muchas copias de la misma proteína.
En la medida que se van sintetizando las cadenas estas van adoptando su estructura secundaria
y terciaria, mediante enlaces por puentes de hidrógeno y puentes disulfuro. Algunas proteínas al
terminar la síntesis son activas. Otras proteínas para ser activas pierden al aminoácido iniciador y
precisan unirse a iones o coenzimas. En el caso de estar formadas por varias cadenas, estas se unen para
formar la estructura cuaternaria.
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Biología. Transcripción y traducción
Existe una separación entre el lugar de la transcrición (núcleo) y el de la traducción (citoplasma),
la membrana nuclear.
Los ARNm procarióticos suelen ser policistrónicos. Los ARNm eucarióticos son monocistrónicos, es
decir, cada uno de ellos solo contiene información para una proteína.
El extremo 5' de los ARNm eucariotas tiene metilguanosinatrifosfato para poder ser identificado
por el ribosoma.
Todas las células somáticas de un individuo contienen el mismo genoma, pero no todas fabrican
las mismas proteínas como consecuencia de una expresión diferencial del genoma: las diferentes células
de un individuo se especializan expresando proteínas diferentes.
En el ADN de cualquier célula de un individuo existe el mismo número de genes, pero no todos
los genes se expresan de manera simultánea. Es necesario que haya mecanismos de regulación, pues sin
estos mecanismos las células producirían continuamente grandes cantidades de proteínas. La regulación
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Biología. Transcripción y traducción
génica es el proceso que controla qué genes en el ADN de una célula se expresan en cada momento, para
obtener así unas determinadas proteína. Que en un momento dado se exprese o no un determinado gen
depende de las necesidades de cada célula en ese momento.
Un operón es un conjunto de genes que codifican todas las proteínas necesarias para una función
específica. Es decir, todas las proteínas implicadas en una misma ruta bioquímica, se codifican juntas en
bloques llamados operones. (Por ejemplo, todos los genes necesarios para usar lactosa como fuente de
energía se codifican uno al lado del otro en el operón lactosa (o lac)).
Los principales elementos que constituyen un operón son el promotor, los genes estructurales, y el
operador.
El gen promotor (P). Está próximo a los genes estructurales y es aquella secuencia del ADN a la
que se une la enzima ARN polimerasa para iniciar la transcripción.
El gen operador (O). En un operón típico el operador se sitúa entre la región promotora y los
genes estructurales. Es una secuencia de ADN que actúa como sitio de unión del represor,
impidiendo el avance de la ARN polimerasa por lo que la transcripción se interrumpe. (Represión
génica).
Los genes estructurales (Gen 1, Gen 2...). Son los que llevan la información para traducir las
proteínas (enzimas) necesarias para una función celular específica. Los operones bacterianos
suelen contener varios genes estructurales, (policistrónicos) mientras que en eucariotas suelen
contener un solo gen estructural siendo (monocistrónicos).
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Biología. Transcripción y traducción
El gen regulador (R). Codifica la síntesis de una proteína represora (llamada represor). Este gen
es el que controla la expresión y puede estar localizado en cualquier lugar del cromosoma
bacteriano.
La bacteria Escherichia coli puede usa el disacárido lactosa como fuente de energía y de carbono
después de degradarlo en glucosa y galactosa con la enzima β-galactosidasa, pero no es su alimento
preferido. Si la glucosa está presente, la preferirán pues la glucosa requiere menos energía para
descomponerse que la lactosa. Sin embargo, si la lactosa es el único azúcar disponible, E. coli no dudará y
la utilizará como fuente de energía.
Para utilizar la lactosa las bacterias deben expresar los genes del operón lac, que codifican las
proteínas (Beta-galactosidasa, permeasa y la transacetilasa) que permiten que las bacterias utilicen la
lactosa del ambiente como fuente de energía. Así el operon lac se expresa solamente cuando la lactosa
está presente y la glucosa está ausente. De manera que no sintetiza todas las enzimas posibles al mismo
tiempo, sino solo aquellas que precisa y en las cantidades adecuadas.
El operón lac es un operón o grupo de genes con un solo promotor (transcrito como un solo ARNm).
El operón lac es un operón inducible típico y la regulación tiene lugar de la siguiente manera:
Si en el medio no hay lactosa. El gen regulador codifica una proteína represora con dos lugares
de unión, uno bloquea el operador y los genes estructurales por tanto no se transcriben.
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Biología. Transcripción y traducción
En resumen, la regulación de la expresión génica mediante operones permite a las
bacterias adaptarse rápidamente a cambios ambientales. La lactosa puede ser un nutriente excelente
para la bacteria E. coli. sin embargo, solo “engullirán” la lactosa cuando otros azúcares mejores, como la
glucosa, no están disponibles. Esto tiene sentido para la célula, porque sería energéticamente derrochador
crear las proteínas para procesar lactosa si la glucosa era abundante o no se disponía de lactosa.
En un mismo organismo pluricelular todas las células que lo forman provienen de única célula, el
cigoto, luego todas sus células contienen los mismos genes, los propios de su especie. Así en todas las
células de un mismo organismo algunos genes se expresan en todas ellas, sin embargo algunos genes se
expresan solo en determinados tejidos o en determinados momentos ante la llegada de señales externas
como es el caso de las hormonas (expresión diferencial).
En los eucariotas, la expresión de los genes puede ser regulada en uno o varios niveles desde el
ADN a las proteínas, así el control de la expresión puede tener lugar en diferentes etapas:
organización) puede regularse. La cromatina más abierta o “relajada” hace a un gen más
activación de la transcripción se produce por la unión a secuencias específicas del ADN cercanas a
transcripción a ARN.
Procesamiento del ARN mensajero. El proceso de corte y empalme, la adición del casquete y la
adición de un cola poli-A a una molécula de ARN pueden regularse, así como la salida del núcleo.
Se pueden producir diferentes ARNm del mismo pre-ARNm por el proceso de empalme
alternativo.
Estabilidad del ARN. El curso de vida de una molécula de ARNm en el citosol afecta cuántas
proteínas pueden hacerse de ella. Pequeños ARN reguladores llamados miARN pueden unirse al
ARNm y degradarlos.
Traducción. La traducción de un ARNm puede aumentarse o inhibirse por los reguladores. Por
ejemplo, los miARN a veces bloquean la traducción de sus ARNm objetivos (en lugar de
degradarlos).
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Biología. Transcripción y traducción
La actividad de la proteína. Las proteínas pueden someterse a una variedad de modificaciones,
tales como ser cortadas o etiquetadas con grupos químicos. Estas modificaciones pueden afectar
En eucariotas diferentes genes se regulan en diferentes etapas y no es poco frecuente que un gen
(particularmente uno importante) sea regulado en múltiples pasos.
a) Indique la composición y estructura de los distintos tipos de ARN [1]. b) Explique la función
biológica de cada uno de ellos [1]. Total 2 puntos.
Para cada uno de los siguientes procesos celulares, indique una estructura, compartimento u
orgánulo de las células eucarióticas en donde pueden producirse: a) síntesis de ARN ribosómico; b)
fosforilación oxidativa; c) digestión de sustancias; d) síntesis de almidón; e) ciclo de Krebs; f)
transporte activo; g) transcripción; h) traducción; i) fase luminosa de la fotosíntesis; j) glucólisis.
Total 2 puntos.
Indique dónde se localizan las siguientes funciones o procesos en una célula eucariótica: a) síntesis
de proteínas; b) glucólisis; c) ciclo de Krebs; d) ciclo de Calvin; e) transcripción; f) transformación
de energía luminosa en energía química; g) cadena respiratoria; h) digestión de materiales
captados por endocitosis; i) -oxidación de los ácidos grasos; j) síntesis de lípidos [2 puntos].
Explique qué se entiende por código genético [0,6]. Defina los términos codón y anticodón [0,5].
¿Qué son los codones sin sentido o de terminación? [0,4]. Describa dos características del código
genético [0,5].
Si comparamos una célula hepática con una célula renal del mismo individuo: a) ¿contendrá su
ADN la misma información genética? [0,5]; b) y las proteínas de ambas células, ¿serán las
mismas? [0,5]. Total 1 punto. Razone las respuestas.
a) ¿Cómo se puede explicar que una célula típica de nuestro cuerpo posea alrededor de 10.000
tipos diferentes de proteínas, si el número de aminoácidos distintos es solamente 20? [0,5]. b)
¿Cómo es posible que insertando el gen que codifica la insulina del ratón en un cromosoma
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Biología. Transcripción y traducción
bacteriano, la bacteria sintetice la insulina de ratón? [0,5]. Razone las respuestas. Total 1 punto.
La ricina es un potente veneno que se extrae de la planta Ricinus communis, cuyo mecanismo de
acción consiste en inutilizar la subunidad mayor (60S) del ribosoma. a) ¿Cuál será el efecto
negativo que tiene este veneno para el organismo? [0,4] b) Si un alga unicelular, un protozoo y
una bacteria se cultivaran en un medio rico en ricina, ¿cuál o cuáles de éstos organismos se
verían afectados? [0,6] Razone las respuestas.
¿Qué característica tiene el código genético que permite a los investigadores introducir y expresar
de forma correcta un gen de un organismo eucariota en uno procariota o viceversa? [1]. Razone
la respuesta.
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Biología. Transcripción y traducción
En relación con la figura de la pregunta anterior, responda a las siguientes cuestiones: Total 1
punto.
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Biología. Transcripción y traducción