Práctica 01 Tipos Celulares

PRÁCTICA DE LABORATORIO No.
TIPOS CELULARES
OBJETIVOS
 Diferenciar células procariotas coloreadas con la tinción de Gram.
 Reconocer principales estructuras de células eucariotas vegetales y animales.
INTRODUCCIÓN
La célula contiene las moléculas fundamentales de la vida y de las que están
compuestos todos los seres vivos. Una sola célula es a menudo un organismo completo
en sí mismo, como una bacteria o levadura. Otras células adquieren funciones
especializadas a medida que maduran. Estas células cooperan con otras células
especializadas y se convierten en los bloques de construcción de grandes organismos
multicelulares, como los humanos y otros animales. Aunque las células son mucho más
grandes que los átomos, siguen siendo muy pequeñas. Las células más pequeñas
conocidas son un grupo de pequeñas bacterias llamadas micoplasmas; Algunos de
estos organismos unicelulares son esferas tan pequeñas como 0.2 μm de diámetro (1
μm = 0.001 mm), con una masa total de 10-14 gramos, igual a la de 8,000,000,000 de
átomos de hidrógeno. Las células de los humanos suelen tener una masa 400,000 veces
mayor que la masa de una sola bacteria micoplasma, pero incluso las células humanas
tienen solo unos 20 μm de diámetro. Se requerirían aproximadamente 10,000 células
humanas para cubrir la cabeza de un alfiler, y cada organismo humano está compuesto
por más de 30,000,000,000,000 de células.
Las células según su organización general, pueden ser procariontes o eucariontes

(figura 1). Las células procariontes se caracterizan por carecer de un núcleo distintivo y
otros organelos debido a la ausencia de membranas internas. Las bacterias se
encuentran entre los organismos procariotas más conocidos. La falta de membranas
internas en los procariontes los distingue de los eucariotas. La membrana celular
procariota está compuesta de fosfolípidos y constituye la barrera osmótica primaria de
la célula. El citosol contiene ribosomas, que llevan a cabo la síntesis de proteínas, y un
cromosoma de ácido desoxirribonucleico (ADN) bicatenario, que generalmente es
circular. Muchos procariotas también contienen moléculas de ADN circulares
adicionales llamadas plásmidos, con funciones celulares prescindibles adicionales,
como codificar proteínas para inactivar antibióticos. Algunos procariotas tienen flagelos.
Los flagelos procariotas son distintos en diseño y movimiento de los flagelos
encontrados en algunos eucariotas.
Las células eucariontes poseen un núcleo claramente definido. La célula eucariota tiene
una membrana nuclear que rodea el núcleo, en la que se encuentran los cromosomas
bien definidos (cuerpos que contienen el material genético). Las células eucariontes
también contienen organelos, incluidas las mitocondrias (intercambiadores de energía
celular), un aparato de Golgi (dispositivo secretor), un retículo endoplásmico (un sistema
de membranas tipo canal dentro de la célula) y lisosomas (aparato digestivo dentro de
muchos tipos de células).
Figura 1. Diferencias entre células eucariotas y procariotas.
BACTERIAS: TINCIÓN GRAM

La tinción de Gram es una técnica común utilizada para diferenciar dos grandes grupos
de bacterias en función de sus diferentes componentes de la pared celular. El
procedimiento de tinción de Gram distingue entre los grupos Gram positivos y Gram
negativos coloreando estas células de rojo o violeta (figura 2). Las bacterias Gram
positivas se tiñen de violeta debido a la presencia de una capa gruesa de peptidoglucano
en sus paredes celulares, que retiene el cristal violeta con el que se tiñen estas células.
Alternativamente, las bacterias Gram negativas se tiñen de rojo, lo que se atribuye a
una pared de peptidoglicano más delgada, que no retiene el cristal violeta durante el
proceso de decoloración.
La tinción de Gram implica tres procesos: tinción con un tinte soluble en agua llamado
violeta cristal, decoloración y contratinción, generalmente con safranina. Debido a las
diferencias en el grosor de una capa de peptidoglicano en la membrana celular entre las
bacterias Gram positivas y Gram negativas, las bacterias Gram positivas (con una capa
más gruesa de peptidoglicano) retienen la mancha de cristal violeta durante el proceso
de decoloración, mientras que las bacterias Gram negativas pierden la mancha de cristal
violeta y en su lugar se tiñen con safranina en el proceso de tinción final.
La coloración Gram, fue desarrollada por Christian Gram en 1884, requiere cuatro
soluciones:
1. Primer colorante: el cristal violeta es un colorante básico, que en contacto con
las células cargadas negativamente, reacciona con ellas coloreándolas.
2. Solución mordiente: el Lugol, que fija las tinciones y aumenta la afinidad entre
el colorante y las células.
3. Agente decolorante: es un disolvente orgánico, p.ej. alcohol-acetona
4. Colorante de contraste: es un colorante básico de distinto color que el primero,
p. ej. Safranina.
BACTERIAS GRAM POSITIVAS BACTERIAS GRAM NEGETIVAS
Figura 2. Identificación de bacterias mediante del procedimiento de tinción Gram. FUENTE:

https://bit.ly/2TATClO
BACTERIAS: FORMAS
Los miembros del Reino Monera (procariotas) comprenden un vasto y heterogéneo
grupo de organismos unicelulares, como las Eubacterias, o bacterias verdaderas, y las
Arqueobacterias. Las especies bacterianas se diferencian por una variedad de
características morfológicas, composición química (a menudo detectada por reacciones
de tinción), requerimientos nutricionales y actividades bioquímicas.
Las bacterias se clasifican en cinco grupos según sus formas básicas: esféricas (cocos),
varillas (bacilos), espirales (espirillas), comas (vibrios) o sacacorchos (espiroquetas)
(figura 3). Pueden existir como células individuales, en pares, cadenas o grupos.
Figura 3. Formas de las bacterias. Fuente: © ttsz / iStock
BACTERIAS: TAMAÑO
En general, el tamaño promedio de la mayoría de las bacterias está entre 0.2 y 2.0 µm.
Los estudios de investigación han demostrado que su tamaño juega un papel importante
en la supervivencia a lo largo del tiempo. Debido a su pequeño tamaño, las bacterias
pueden explotar y prosperar en varios microambientes. Estos incluyen entornos tales
como los gradientes verticales en sedimentos marinos intermareales en los que se han
encontrado varios tipos de bacterias. Debido a la ausencia de varios microorganismos
en tales entornos, las bacterias explotan con éxito los recursos disponibles y prosperan
en dichos entornos. El pequeño tamaño de las bacterias también es beneficioso para el
parasitismo y la oligotrofia (lugares con pocos nutrientes).
CÉLULAS EUCARIOTES: Diferencias entre las células animales y vegetales

Estructuralmente, las células vegetales y animales son muy similares porque ambas son
células eucariotas (figura 4). Ambos contienen organelos membranosos como el núcleo,
el retículo endoplásmico, el aparato de Golgi, los lisosomas y los peroxisomas. Ambos
también contienen membranas, citosol y elementos citoesqueléticos similares y
mitocondrias. Las funciones de estos orgánulos son extremadamente similares entre las
dos clases de células (los peroxisomas realizan funciones complejas adicionales en las
células vegetales que tienen que ver con la respiración celular). Sin embargo, las pocas
diferencias que existen entre plantas y animales son muy significativas y reflejan una
diferencia en las funciones de cada célula.
Las células vegetales pueden ser más grandes que las células animales. El rango
normal para una célula animal varía de 10 a 30 micrómetros, mientras que para una
célula vegetal se extiende de 10 a 100 micrómetros. Más allá del tamaño, las principales
diferencias estructurales entre las células vegetales y animales se encuentran en
algunas estructuras adicionales que se encuentran en las células vegetales. Estas
estructuras incluyen: cloroplastos, la pared celular y las vacuolas.
Célula animal Célula vegetal
Figura 4. Partes de las células eucariotas animal y vegetal. Fuente: Campbell (2007)
MATERIALES
- Microscopio compuesto
- 2 porta objetos
- 2 laminillas
- Hoja de bisturí
- Pinza de relojero
- Hisopo estéril
- Piceta
- Azul de metileno
- Puente de tinción
- Papel lente
- Aceite de inmersión
- Elodea sp.
- Allium cepa
- Láminas fijadas de bacterias Gram positivas y Gram negativas
PROCEDIMIENTO
A. Reconocimiento de células procariotas y eucariotas:

- En láminas coloreadas con la tinción de Gram, ubicar las formas y tipos
bacterianos. Observar las muestras con el objetivo de 100X.
- Con ayuda de la hoja de bisturí, retirar un fragmento de catáfila de cebolla y
colocarla sobre un portaobjetos.
- Adicionar unas gotas de azul de metileno, esperar aproximadamente 5 minutos
y retirar el exceso de colorante con agua destilada.
- Colocar un cubreobjetos y observar las muestras con los objetivos de 10X y 40X.
- Esquematizar las observaciones de ambas muestras.
B. Reconocimiento de principales estructuras de células eucariotas animal y
vegetal:
- Con un hisopo estéril tomar una muestra de la mucosa epitelial de la cavidad
bucal. Extienda la muestra sobre una lámina portaobjetos y dejar secar.
- Colocar la lámina sobre el puente de tinción, ubicado en el lavadero, y cubrir la
muestra con gotas de azul de metileno, dejar colorear por 5 minutos.
- Eliminar el excedente de colorante, lavando con agua destilada y dejar secar al
medio ambiente. Observar con el objetivo de 10 y 40X.
- Retirar una hoja de la planta de Elodea sp. Colocar la muestra en una lámina
portaobjetos, agregar una gota de agua y cubrir la muestra con la lámina cubreobjetos.
Observar la muestra en el microscopio con los objetivos 10X y 40X.
- Esquematizar las observaciones de ambas muestras.
C. Similitudes y diferencias entre célula procariota y eucariota

- Elabore un listado en su cuaderno de las estructuras presentes en una célula
procariota y eucariota por separado.
- En un diagrama de Venn indique las estructuras comunes en la intersección y
las no comunes donde corresponda.

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PRÁCTICA DE LABORATORIO No.

Las células según su organización general, pueden ser procariontes o eucariontes

Figura 1. Diferencias entre células eucariotas y procariotas.

BACTERIAS: TINCIÓN GRAM

BACTERIAS GRAM POSITIVAS BACTERIAS GRAM NEGETIVAS

Figura 2. Identificación de bacterias mediante del procedimiento de tinción Gram. FUENTE:

CÉLULAS EUCARIOTES: Diferencias entre las células animales y vegetales

A. Reconocimiento de células procariotas y eucariotas:

C. Similitudes y diferencias entre célula procariota y eucariota

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