Practica 7

Instituto Tecnológico de Orizaba
INGENIERÍA QUÍMICA
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
Materia: Microbiología industrial
Clave: 7cLA
Maestra titular: M.C. Justina Ocampo Linares
Maestra auxiliar: M.C. Nancy Espíndola Apale
Integrantes del equipo 1 Numero de control:
Arano Dolores Evelyn Danaé 21010049
Diaz Mayoral Maely Dánae 20010637
Miranda Carrillo María José 21010071
Ramírez Castillo Jorge Miguel 21010077
Número y nombre de la practica: 7 “ AISLAMIENTO Y CONSERVACIÓN DE

CULTIVOS PUROS”
ORIZABA, VER
INSTITUTO TECNOLOGICO DE ORIZABA
Manual de Prácticas del Laboratorio de Microbiología
Microbiología industrial
(plan de competencias )
PRÁCTICA No. 7
AISLAMIENTO Y CONSERVACIÓN DE CULTIVOS PUROS
METODOLOGÍA 7
COMPETENCIA
El alumno obtiene a partir de un elevado número de bacterias, un número reducido de ellas

distribuidas individualmente sobre la superficie de la placa. Cada una de estas bacterias
originará una colonia. En la cual adquiere un cultivo puro de microorganismos
FUNDAMENTO
Un CULTIVO PURO es aquel que contiene una sola clase de microorganismos. Para obtenerlo
es necesario recurrir a las llamadas técnicas de aislamiento. Aunque existen otras, las técnicas
más utilizadas emplean un medio de cultivo sólido, en el que los microorganismos generan
colonias separadas.
Se puede demostrar que cada colonia procede de una sola célula o de un grupo de células del
mismo tipo si el microorganismo forma agregados. Por ello lo más correcto es hablar de
unidades formadoras de colonias (UFC) al referirnos al origen de una colonia. Por tanto,
todas las bacterias de una colonia son genéticamente iguales y constituyen un clon.
AISLAMIENTO DE UN CULTIVO PURO
Existe una gran variedad de técnicas por las cuáles diferentes especies pueden ser aisladas
ya sea de su entorno natural o de un cultivo mixto para ser desarrolladas como cultivo
puro. Una de las técnicas más comúnmente empleadas para lograr un cultivo puro es el
método llamado sembrado por estrías, este se logra tomando una pequeña cantidad de
material microbiano con el asa y luego se desliza muy suavemente sobre el agar en la Caja
petri, rayando tanto superficie como sea posible. Esto permite que las bacterias, al
Elaboró:
M.A Justina Ocampo L.
desprenderse del asa queden espaciadas individualmente. Se da por hecho que cada célula
individual da origen a una colonia (conjunto de células todas semejantes llamada clona).
La técnica de sembrado por estrías tiene numerosas variantes, pero el funcionamiento es
el mismo.
Hay que hacer notar que cuando se trabaja en el laboratorio de Microbiología y más aún
cuando se trata de aislar un microorganismo es necesario tomar las debidas precauciones
para evitar que haya una contaminación, es decir, aplicar la técnica aséptica. También hay
que tomar en cuenta que los microorganismos nunca se encuentran enterrados en el agar,
por lo que cuando se saca una muestra de cultivo o se siembra no se debe enterrar el asa
en el agar. La creencia de que para que la siembra sea exitosa se debe tomar gran cantidad
de cultivo es errónea, pues una colonia de bacterias del tamaño de un alfiler puede
contener varios millones de organismos. Por eso, con una pequeña cantidad de material
que se adhiera al asa es más que suficiente para garantizar una siembra exitosa.
Otra técnica es la llamada placa vertida o por dilución. Se basa en hacer diluciones a partir
de una suspensión original de microorganismos y transferirla con una asada en primer
término a un tubo con agar estéril (fundido y enfriado) y de este a un segundo tubo
(también con agar estéril fundido y enfriado) hasta un tercer tubo con las mismas
características de los dos primeros. Cada tubo así sembrado individualmente se vierte
dentro de cajas petri estériles. Se espera que una vez incubadas las cajas se perciban las
colonias aisladas en la tercera caja que fue la más diluida.
Para favorecer el aislamiento de cultivos de baja intensidad, se aplican métodos de cultivo

especiales, en los que se utilizan medios que contienen nutrientes especiales, antibióticos,
altas concentraciones de sales y/o condiciones de pH, luz o temperatura para favorecer el
crecimiento de microorganismo de interés y se conocen como selectivos o de
enriquecimiento. En ocasiones se pueden agregar a los medios de cultivo otros
Elaboró:
componentes como: sangre, colorantes, indicadores, etc. Para distinguir especies

bacterianas diferentes por la forma en que metabolizan los sustratos que se manifiesta por
cambios en la apariencia o modificación del pH del medio de cultivo. Estos medios se
conocen como medos diferenciales y son de gran utilidad para la caracterización e
identificación de especies bacterianas.
CONSERVACIÓN DE CULTIVOS PUROS
Aun cuando en la mayoría de los métodos de conservación de cultivos se necesitan

condiciones especiales para preservarlos, los métodos más sencillos empleados son
aquellos que se basan en la resiembra periódica a medios frescos ó en la preservación de
cultivos con una capa de aceite mineral. La resiembra periódica consiste como su nombre
lo indica en la transferencia después de cierto tiempo de un cultivo a un medio fresco
estéril. La preservación con una capa de aceite mineral se emplea generalmente para
cultivos que no son empleados frecuentemente y consiste en cubrir el agar en que están
creciendo los microorganismos (generalmente tubos con agar inclinado) con aceite
mineral estéril.
Elaboró:
Fig. 5 Aislamiento de bacterias por técnica de la placa vertida
La técnica de la placa vertida se usa para el aislamiento de bacterias en cultivo puro. Ver fig. 4
Etapa 1. En el tubo A (agar fundido y enfriado) se pone una parte proporcional de la suspensión
original. Este tubo se pone entre las dos manos y se agita por rotación para mezclar el medio con
el inóculo. Se hacen transferencias similares del tubo A al B y del B al C.
Etapa 2. El contenido de cada uno de los tupos se vacía en cajas de petri distintas.
Etapa 3. Después de la incubación, las placas se examinan para buscar la que tenga colonias
aisladas. De esta placa se pueden aislar cultivos puros de bacterias sembrando una porción de
colonias aisladas en un tubo con medio estéril.
ACTIVIDADES
MATERIAL MATERIAL BIOLOGICO
Elaboró:
a. 2 cajas petri con agar nutritivo a Agua contaminada o cultivo con

b. 3 cajas petri estériles dos o más microorganismos.
c. 3 tubos de ensayo con agar nutritivo b Otros agentes (agua de la llave,
fundido y enfriado a 50º C. piel, saliva, cabello, agua del
d. Asa bacteriológica suelo).
e. Estufa de incubación c Agar nutritivo
MÉTODOS
a) AISLAMIENTO POR ESTRIAS

1. Sembrar con el inóculo la mitad de una caja petri por estrías.
2. Cuidadosamente y sin volver a tomar inóculo sembrar la otra mitad, según
instrucción del profesor procurando hacer una sola estría al final.
3. Incubar 24 hrs. a 37° C.
4. Hacer observaciones indicando las colonias aisladas.
b) PLACA VERTIDA
1. Tres asadas del inoculo elegido se siembran en un tubo con medio fundido y
enfriado a 50º C y se mezcla bien por sacudimiento y rotación.
2. De este tubo se toman tres asadas a un segundo tubo con medio de cultivo en las
mismas condiciones que el anterior, se mezc1a por rotación y sacudimiento.
3. Del segundo tubo se pasan tres asadas a un tercer tubo con medio también fundido
y enfriado mezclando por rotación.
4. Se flamean las bocas de los tubos y rápidamente se vierte el contenido en tres
cajas petri
5. respectivamente numeradas uno, dos, tres levantando ligeramente la tapa para
evitar la entrada de contaminantes.
6. Rotar cada caja petri en la mesa suavemente y dejar solidificar.
7. Incubar las cajas invertidas 24-48 horas a 17º C.
Elaboró:
8. Hacer observaciones y mostrar cajas al profesor.

c) CULTIVO ZONAL (PRÁCTICA DE ESTRÍAS)
1. Dividir una caja Petri con agar nutritivo en 6 secciones.

2. Sembrar en cada sección lo siguiente:
- Gota de agua de la llave
- Piel antebrazo
-Gota suelo
-Saliva Cabello humano
-Testigo sin inocular
3. Incubar las cajas invertidas 24 horas a 37° C
4. Hacer observaciones.
PRECAUCIONES:
 Poner el asa de siembra a la llama del mechero al rojo y enfriar de 10 a 1 5 seg

 Quitar el tapón de algodón con el mestique y calma de la mano y flamear la boca
del tubo.
 Tomar inóculo.
 Sembrar.
 Quemar la boca del tubo y poner el algodón.
 No enterrar el asa en el medio.
 Tomar una cantidad muy pequeña de inóculo (una colonia).
 Asa al rojo y enfriar de 10 a 1 5 seg.
 Flamear la boca de los tubos antes y después de usar.
 Incubar la caja invertida.
Elaboró:
Tipo de aislamiento: Observaciones a las 24 horas. Observaciones a las 48 horas.
Elaboró:
a) Aislamiento por estrías Caja Petri 1:
En base a su observación de las

En la caja 1 hubo mayor crecimiento de
48 horas hubo mayor
microorganismos pertenecientes a la
crecimiento en el estriado de la
salmonella donde se pudo destacar una
caja Petri 1 en donde se
pared gruesa debido a que se tomo mucha
encontraba el estriado
muestra al hacer el estriado.
concentrado donde se podía
observar mayor propagación de
Morfología de la caja Petri 1 -
colonias juntas, mientras tanto
concentrada:
en la parte diluida fue
Tamaño: Distribución completa
perdiéndose el estriado y se
Formas: Puntos circulares irregulares
comenzó a formar colonias
medianos y rugosos
circulares.
Bordes: Ligeramente dentado
Transparencia: opaca
En la caja Petri 2 siendo que se
Brillo: Sin brillo
tenía una mejor técnica en el
Color: blanco
estriado en la parte concentrada
Textura: Lisa y ligeramente rugoso
fue que se comenzó a observar
Elevación: plana
la separación de estrías y
formación de colonias
Morfología de la caja Petri 1 - diluida:
separadas circulares, mientras
Tamaño: Distribución del estriado grande
tanto en la parte diluida
Formas: Estriado con puntos circulares
solamente se vio más redondes
gruesos y rugosos
en las colonias separadas y
Bordes: Ligeramente dentado
mayor crecimiento de la
salmonella.
Brillo: Sin brillo
Color: blanco
Textura: Lisa y ligeramente rugoso
Elevación: plana
Caja Petri 2:
Elaboró:
En la caja 2 se percibió un mejor estriado

de la muestra, teniendo como resultado
una mejor distribución en el crecimiento
de microorganismos pertenecientes a la
salmonella.
Morfología de la caja Petri 2 -

concentrada:
Tamaño: Estriado mas uniforme
Formas: Estriado dentado y rugoso
Bordes: Dentado
Brillo: Sin brillo
Color: blanco
Textura: Lisa y rugosa
Elevación: plana
Morfología de la caja Petri 2 - diluida:

Tamaño: Distribución del estriado
Puntiforme y grande
Formas: Puntos circulares irregulares
gruesos y rugosos
Bordes: Dentados
Brillo: Sin brillo
Color: blanco
Textura: Lisa y rugoso
Elevación: plana
Aislamiento placa vertida Observaciones a las 24 horas. Observaciones a las 48 horas.
Elaboró:
b) Aislamiento placa vertida Caja Petri - Primera disolución
En la caja 1 hubo mayor crecimiento de

salmonella donde se pudo destacar una
mayor formación de colonias distribuidas
en todo el medio de cultivo con un tamaño En base a su observación de las
grande. 48 horas hubo mayor
Morfología de la caja Petri 1 – Primera crecimiento en la disolución 1
disolución en donde se observar mayor
Tamaño: Colonias grandes y circulares propagación de colonias juntas
irregulares y grandes, mientras tanto en la
Formas: Colonias dentadas y rugosas parte disolución 2 y 3 el
Bordes: Dentado tamaños y el numero de
Transparencia: opaca colonias comenzaba
Brillo: Sin brillo disminuyendo.
Color: blanco
Elevación: plana
Caja Petri - Segunda disolución
En la caja 2 hubo un crecimiento de

salmonella donde se pudo observar
formación de pequeñas colonias
distribuidas en todo el medio de cultivo,
Elaboró:
con un tamaño mediano. Tenía menor

propagación de microorganismos que la
primera disolución.
Morfología de la caja Petri 2 – Segunda
disolución
Tamaño: Colonias pequeñas circulares
irregulares y puntiformes
Formas: Colonias dentadas y rugosas
Bordes: Dentado
Brillo: Sin brillo
Color: blanco
Elevación: plana
Caja Petri - Tercera disolución
En la tercera caja Petri, se pudo observar

pequeños puntos puntiformes de tamaño
pequeño pero notable indicando inicio de
crecimiento y desarrollo de pequeñas
colonias de salmonella. Aunque en menor
cantidad que la segunda disolución.
Morfología de la caja Petri 2 – Segunda
disolución
Tamaño: Colonias puntiformes
Formas: Pequeñas formaciones de colonias
dentadas y ligeramente convexas.
Bordes: Dentado
Brillo: Sin brillo
Color: blanco
Elevación: plana
Elaboró:
Tipo de aislamiento: Observaciones a las 24 horas. Observaciones a las 48

horas.
c) Aislamiento zonal.
1. Agua de la llave
2. Muestra de codo
3. Gota del suelo
4. Saliva
5. Cabello
6. Testigo
No hubo crecimiento de
En la caja 1 hubo solamente un pequeño pero notable bacterias en las otras
crecimiento en las zonas 3, 4 y 5 donde sembramos zonas, la morfología
muestras de suelo, saliva y cabello respectivamente. bacteriana no cambio,
solo aumentaron un poco
Morfología de la el número de colonias en
Colonia del cabello: ambas cajas petri.
Tamaño: Puntiforme
Formas: circular
Bordes: Entero
Brillo: Sin brillo
Color: Amarillo
Textura: Lisa
Elevación: plana
Morfología de la
Colonia de la saliva:
Tamaño: Puntiforme
Formas: Irregular
Bordes: Ondulado
Transparencia: Transparente
Brillo: Sin brillo
Color: Blanco
Textura: Lisa
Elevación: plana
Morfología de la
Elaboró:
Colonia del suelo:

Tamaño: Puntiforme
Formas: Irregular
Bordes: lobulado
Brillo: Sin brillo
Color: Blanco
Textura: Lisa
Elevación: plana
En la caja 2 solamente hubo solamente crecimiento de

colonias en las zonas 4 y 5 donde sembramos muestras
de saliva y cabello respectivamente.
Morfología de la
Colonia de la saliva:
Tamaño: Grande
Formas: Fusiforme
Bordes: Entero
Transparencia: Opaca
Brillo: Sin brillo
Color: Blanco
Textura: Lisa
Elevación: Convexa
Morfología de la
Colonia del cabelloo:
Tamaño: Pequeña
Formas: Fusiforme
Bordes: entero
Brillo: Sin brillo
Color: Amarillo
Textura: Lisa
Elevación: plana
Elaboró:
Observaciones:
Arano Dolores Evelyn Danaé
Comenzamos la práctica preparando el ágar nutritivo, en lo que preparábamos en ágar,

elegimos las cajas con las que íbamos a trabajar, decidimos que trabajaríamos con 3 cajas
petris de vidrio y 4 de plástico. Subdividimos la práctica en tres partes: a) Placa por estrías,
b) Práctica Sonal y c) Placa Vertida, tomamos dos muestras de cada uno a excepción de
las vertidas que fueron tres. Vertimos el ágar en las cajas petris y dejamos que gelatinice,
mientras esperábamos en un tubo de ensaye esterilizado agregamos ágar, posteriormente
tomamos tres asadas del inoculo elegido (salmonella) y lo sembramos en un tubo con
medio fundido y se mezcla bien por sacudimiento y rotación. Después este tubo se
tomamos tres asadas a un segundo tubo con medio de cultivo en las mismas condiciones
que el anterior, se mezcla por rotación y sacudimiento, del segundo tubo se pasan tres
asadas a un tercer tubo con medio también fundido y enfriado mezclando por rotación,
flameamos las bocas de los tubos y de manera rápida se vierte el contenido en las cajas
Petris que habíamos elegido. Una vez gelatinizadas las cajas petris, las marcamos y las
dividimos (dos a la mitad y dos en 6 partes). Sembramos la salmonella en las dos petris
que estaban ala mitad con la técnica de estrías y en las que estaban en seis partes
sembramos: 1. Gota de agua de la llave, 2. Blanco (para ver si nuestro cultivo no estaba
contaminado, 3. Piel de antebrazo, 4. Gota de suelo, 5. Saliva y 6. Cabello. Después de
esto los sellamos y los marcamos para poder identificarlos de una manera fácil.
Elaboró:
Proceso de esterilización del material y residuos
Diaz Mayoral Maely Dánae:
Elaboró:
Miranda Carrillo María José:
Para el desarrollo de la práctica primero la maestra Justina nos enseñó las

técnicas que íbamos a utilizar, posteriormente al poner manos a la obra gracias a
la maestra Nancy pudimos avanzar con el desarrollo de la prácticas puesto que
ya nos tenía preparado el agar nutritivo y procedimos a depositarlos en 4 cajas y
3 tubos estériles.
Una vez ya el agar estaba listo para usarse procedimos a sembrar la bacteria de
salmonella por la técnica de estrías dividiendo la caja petri en 2 partes iguales y
siguiendo la técnica.
Elaboró:
Posteriormente sacamos las muestras correspondientes para hacer nuestra

placa zonal que dividimos en 6 partes iguales y sembramos según lo etiquetado:
Para la técnica de placa vertida utilizamos también la bacteria se salmonella que

depositamos 3 veces en un tubo de ensaye, de ahí de ese mismo tubo
agarramos muestra 3 veces y la sembramos en el segundo y lo mismo con el
tercero, una vez sembradas las muestras las depositamos inmediatamente en 3
cajas petri etiquetadas correctamente.
Finalmente procedimos a esterilizar nuestro material en una olla express.
Elaboró:
Ramírez Castillo Jorge Miguel:
Primeramente, antes de realizar el desarrollo de la práctica,

comenzamos con el lavado y secado de todo el material de
laboratorio.
Una vez que se terminó de lavar y secar manualmente con

Servitoalla, fue cuando empezamos a envolver las cajas Petri
con papel y las colocamos al horno para su correcta
esterilización.
 Siembre de caja Petri por método de aislamiento por estriado:
Primeramente, para este método comenzamos partiendo a

la mitad con una línea recta con ayuda de lápiz graso para
dividir la caja Petri, posteriormente a eso fue cuando
comenzamos a llenarlo de agar nutritivo donde después se
comenzaron a mover en círculos para una mejor dispersión
del agar y lo dejamos enfriando
Una vez que estaba solidificado fue cuando comenzamos a

tomar un inoculo de la muestra de salmonella y realizamos
una siembra de manera estriada con una sola asada y en la
otra mitad se continuo el sembrado sin tomar inoculo, con la
misma asada.
Posteriormente se guardó en la incubadora para su

observación durante 24 y 48 horas. Donde se explicará a
detalle en la tabla general de resultados.
Elaboró:
Una vez terminado la observación de 48 horas, el material

de las cajas Petri se llevó a un proceso de esterilización.
 Siembre de caja Petri por método cultivo zonal:

Primeramente, para este método comenzamos partiendo en 6
partes iguales con ayuda de lápiz graso para dividir la caja
Petri, posteriormente a eso fue cuando comenzamos a
llenarlo de agar nutritivo donde después se comenzaron a
mover en círculos para una mejor dispersión del agar y lo
dejamos que se solidificara.
Por otra parte, fue que se llevó la

localización de muestras donde
las clasificamos de la siguiente
manera:
1. Agua de la llave
2. Testigo
3. Antebrazo
4. Muestra de suelo
5. Saliva
6. Cabello
Posteriormente en el orden de las muestras fue que

empezamos a realizar el sembrado en las diferentes zonas
marcadas de la caja Petri de manera estriada
Posteriormente se guardó en la incubadora para su

observación durante 24 y 48 horas. Donde se explicará a
detalle en la tabla general de resultados.
Elaboró:
Una vez terminado la observación de 48 horas, el

material de las cajas Petri se llevó a un proceso de
esterilización.
 Siembre de caja Petri por método de placa vertida:
Primeramente, comenzamos preparando los 3 tubos de ensaye con

la muestra de agar llenándolo en un aproximado de 75%.
 Posteriormente, fue cuando realizamos en el primer tubo de
ensaye 3 asadas del inoculo de salmonella.
 En el segundo tubo se tomó 3 asadas del tubo 1
 En el tubo 3 se tomó 3 asadas del del tubo 2.
Una vez preparado las disoluciones en los tubos fue cuando se

colocó en su respectiva caja Petri de la siguiente manera:
 Tubo de ensayo 1 fue colocado en la caja Petri 1
Una vez clasificadas las disoluciones en orden con su

etiquetado se comenzaron a mover en círculos para una
mejor dispersión de microorganismos.
Posteriormente pasado el tiempo fue cuando se guardó en

la incubadora para su observación durante 24 y 48 horas.
Donde se explicará a detalle en la tabla general de
resultados.
Los tubos de ensaye fueron envueltos en papel aluminio

para su proceso de esterilización con todo el material que
se llegó a ocupar (cajas Petri, tubos de ensayo)
Elaboró:
PREGUNTAS:
1. ¿Qué método de preservación de microorganismos son comúnmente
empleados? Liofilización, Congelación
2. Explique si es posible aislar microorganismos en un medio líquido.
Sí, es totalmente posible aislar microorganismos en un medio líquido. De
hecho, la técnica de cultivo en medio líquido es una de las herramientas más
utilizadas en microbiología para el aislamiento, cultivo y estudio de
microorganismos.
3. Resuma con un cuadro los métodos que existen para aislar cultivos
puros.
4. ¿De qué manera podría usted aislar un solo microorganismo?
5. ¿Qué es un cultivo puro y por qué damos tanta importancia a la
obtención y mantenimiento de los cultivos puros? Un cultivo puro es una
población de microorganismos que contiene solo una especie o cepa de
microorganismo, sin contaminación de otros microorganismos. Los cultivos
puros permiten una identificación precisa de las características morfológicas,
fisiológicas, bioquímicas y genéticas de un microorganismo en particular. Esto
es fundamental para la clasificación taxonómica y para comprender su
función y papel en su entorno, son esenciales para realizar experimentos
reproducibles y controlados. Al eliminar la presencia de otros
microorganismos, se pueden estudiar las características específicas de una
sola especie o cepa, lo que facilita la comprensión de sus propiedades y
comportamiento en condiciones controladas, entre otros.
Elaboró:
CONCLUSIONES:
Arano Dolores Evelyn Danaé:
Con esta práctica se concluye que sembrar no es difícil, pero hay que tener
mucho cuidado a la hora de siembra, de igual manera si nuestro caldo NO está
preparado bien o no se prepara en condiciones específicas, nuestra siembra se
vería afectada y las colonias de bacterias no serían visibles.
Diaz Mayoral Maely Dánae
Miranda Carrillo María José:

En conclusión, al realizar esta práctica pudimos conocer de manera práctica
algunas de las técnicas para aislar cultivos puros y conocer las técnicas de
cultivo puro nos permite a los ingenieros químicos optimizar los procesos de
fermentación y cultivo, controlando las condiciones de cultivo para maximizar la
producción del producto deseado y minimizar la formación de subproductos no
deseados. En la industria microbiológica, el control de la contaminación es
esencial para evitar la proliferación de microorganismos no deseados que
pudieran competir con los microorganismos de interés o producir productos no
deseados. El cultivo puro permite identificar y controlar los contaminantes
potenciales. En el campo de la ingeniería química y la microbiología industrial, el
conocimiento y dominio de las técnicas de cultivo puro son fundamentales para el
diseño, la optimización y la operación de procesos de producción que involucran
microorganismos, asegurando la eficiencia, la calidad y la seguridad de los
productos obtenidos.
Elaboró:
Ramírez Castillo Jorge Miguel:

En conclusión, el empleo de técnicas de aislamiento y conservación de cultivos
puros, como el método estriado, la placa invertida y el cultivo zonal. Son métodos
importantes para la investigación microbiológica que nos proporcionan una
investigación detallada mediante el cultivo y estudio de los microorganismos, lo
que nos permite comprender su diversidad y función en diversos entornos.
Además, son vitales en la industria, especialmente en el control de calidad de
alimentos, garantizando productos seguros y de calidad para los consumidores.
El método estriado permite aislar microorganismos individuales en cultivos puros

a partir de muestras mixtas, facilitando la identificación y caracterización de
especies específicas. Por su parte, la técnica de placa invertida ofrece un
ambiente adecuado para el crecimiento de microorganismos en diferentes
disoluciones, lo que es esencial para estudios detallados de su comportamiento
sobre el tiempo de crecimiento que conlleva en diferentes medios. Además, el
cultivo zonal permite familiarizarnos en un entorno más común desde el estudio
que se llegara a presenciar en industria de alimentos, conocimiento de áreas
limpias o contaminadas y la higiene personal para cuestiones médicas.
 Disposición final y tratamiento de residuos

Todo material que se utilizó como tubos de ensaye y cajas Petri se esterilizaron
en una olla exprés.
 Bibliografía
Nombre del Libro, Nombre del autor, Edición y Páginas consultadas.
 CATALDI, M. S. (1941). Aislamiento en cultivo puro de Cianofíceas y Algas
monocelulares. Darwiniana, 228-239.
 Sirio, A. A., & Ávalos Llano, K. R. (2022). Aislamiento, identificación en cultivo puro de
Salmonella. 2 – 23
 https://www.ugr.es/~pomif/pom-bac/pb-iv/pb-iv-2-introduccion.htm
 https://www.youtube.com/watch?v=6NckVGCobwY
 https://docenciamicrobiologia.umh.es/indice-de-practicas/3-tecnicas-de-aislamiento-y-
recuento/
Elaboró:
PRACTICA No. 7
AISLAMIENTO Y CONSERVACIÓN DE CULTIVOS PUROS
LISTA DE COTEJO PARA EL REPORTE DE LA PRÁCTICA DE LABORATORIO
El reporte es un recuento breve de las actividades realizadas en la práctica, identificando los pasos
del método científico que se hayan aplicado, incluyendo los resultados y las conclusiones, junto
con las respuestas a las preguntas que se hayan planteado
Competencias Estándares Sí No Observaciones

1. Esteriliza material y prepara los
diferentes medios de cultivo para el
aislamiento de un cultivo puro
Científico 2. Aplica la técnica de asepsia para realizar
Técnicas aislamiento por estrías y placa vertida.
3. Utiliza la ropa de trabajo adecuadamente.
4. Cuidado y limpieza del instrumental
5. Sigue las indicaciones del docente al

respecto del manejo de algunos
productos peligrosos o delicados.
6. Secuencia lógica de los pasos a seguir
7. Capacidad de análisis e interpretación de

resultados
8. Correcta expresión, redacción y
Metodológicas ortografía; elaboración de un informe
final conforme a los pasos del método
científico; cuestionario contestado
correctamente.
9. Empleo de vocabulario técnico adecuado
10. Cumplimiento de la tarea en el tiempo
asignado
11. Consulta sus dudas de forma clara y
concisa
12. Mantenimiento del orden en el lugar de
trabajo
13. Comunicación con los integrantes del
Sociales
grupo de trabajo
14. Respeto por las normas de seguridad e
higiene
Elaboró:

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Instituto Tecnológico de Orizaba

Número y nombre de la practica: 7 “ AISLAMIENTO Y CONSERVACIÓN DE

AISLAMIENTO Y CONSERVACIÓN DE CULTIVOS PUROS

El alumno obtiene a partir de un elevado número de bacterias, un número reducido de ellas

AISLAMIENTO DE UN CULTIVO PURO

Para favorecer el aislamiento de cultivos de baja intensidad, se aplican métodos de cultivo

componentes como: sangre, colorantes, indicadores, etc. Para distinguir especies

CONSERVACIÓN DE CULTIVOS PUROS

Aun cuando en la mayoría de los métodos de conservación de cultivos se necesitan

Fig. 5 Aislamiento de bacterias por técnica de la placa vertida

MATERIAL MATERIAL BIOLOGICO

a. 2 cajas petri con agar nutritivo a Agua contaminada o cultivo con

a) AISLAMIENTO POR ESTRIAS

8. Hacer observaciones y mostrar cajas al profesor.

1. Dividir una caja Petri con agar nutritivo en 6 secciones.

 Poner el asa de siembra a la llama del mechero al rojo y enfriar de 10 a 1 5 seg

Tipo de aislamiento: Observaciones a las 24 horas. Observaciones a las 48 horas.

a) Aislamiento por estrías Caja Petri 1:

En base a su observación de las

En la caja 2 se percibió un mejor estriado

Morfología de la caja Petri 2 -

Morfología de la caja Petri 2 - diluida:

Aislamiento placa vertida Observaciones a las 24 horas. Observaciones a las 48 horas.

b) Aislamiento placa vertida Caja Petri - Primera disolución

En la caja 1 hubo mayor crecimiento de

Caja Petri - Segunda disolución

En la caja 2 hubo un crecimiento de

con un tamaño mediano. Tenía menor

En la tercera caja Petri, se pudo observar

Tipo de aislamiento: Observaciones a las 24 horas. Observaciones a las 48

Colonia del suelo:

En la caja 2 solamente hubo solamente crecimiento de

Comenzamos la práctica preparando el ágar nutritivo, en lo que preparábamos en ágar,

Proceso de esterilización del material y residuos

Diaz Mayoral Maely Dánae:

Miranda Carrillo María José:

Para el desarrollo de la práctica primero la maestra Justina nos enseñó las

Posteriormente sacamos las muestras correspondientes para hacer nuestra

Para la técnica de placa vertida utilizamos también la bacteria se salmonella que

Finalmente procedimos a esterilizar nuestro material en una olla express.

Ramírez Castillo Jorge Miguel:

Primeramente, antes de realizar el desarrollo de la práctica,

Una vez que se terminó de lavar y secar manualmente con

 Siembre de caja Petri por método de aislamiento por estriado:

Primeramente, para este método comenzamos partiendo a

Una vez que estaba solidificado fue cuando comenzamos a

Posteriormente se guardó en la incubadora para su

Una vez terminado la observación de 48 horas, el material

 Siembre de caja Petri por método cultivo zonal:

Por otra parte, fue que se llevó la

Posteriormente en el orden de las muestras fue que

Posteriormente se guardó en la incubadora para su

Una vez terminado la observación de 48 horas, el

 Siembre de caja Petri por método de placa vertida:

Primeramente, comenzamos preparando los 3 tubos de ensaye con

Una vez preparado las disoluciones en los tubos fue cuando se

Una vez clasificadas las disoluciones en orden con su

Posteriormente pasado el tiempo fue cuando se guardó en

Los tubos de ensaye fueron envueltos en papel aluminio

Diaz Mayoral Maely Dánae