UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

CLASE TEÓRICA N° 9
NÚCLEO, ÁCIDOS NUCLEICOS
Y REPLICACIÓN DEL ADN
Cátedra de Biología Celular y Molecular
 SITUACIÓN PROBLEMÁTICA
Acude a la Clínica de la piel, un paciente de 16 años de edad
acompañada de su madre, es estudiante, y manifiesta presentar
“manchitas cafés y blancas” cuando se expone a la luz solar.
La madre refiere que, desde los 3 meses de edad ha notado que
presenta “manchitas cafés”, un aspecto envejecido con piel seca, “labios
amorfos” y masas cutáneas y que esa condición se ha incrementado con
el paso de los años y es irreversible.
Actualmente, el paciente se retiró del colegio y trata de no salir de su
vivienda para evitar nuevas lesiones en la piel. El paciente refiere que
muy comúnmente cuando sale a lugares cotidianos como el centro
comercial o deambula por las calles de la ciudad atrae la atención de las personas que lo miran asombrados y
muchas veces temerosos. Es por ello que se considera “un niño de la luna” (children of the moon), debido a
que únicamente cuando la luz solar no está presente puede realizar actividades al exterior libremente sin el
estrés de que aparezcan nuevas lesiones en su piel. Debe usar protectores solares, uso de vestimenta
protectora, sombreros, gorros, guantes, lentes oscuros (estándar menos de 0.001% de paso de luz UVB y
menos de 0.01% de paso de luz UVA)
Analice el caso e interprete. ¿Qué presenta el niño? ¿A qué se sebe la aparición de manchas con la presencia
de luz solar? ¿Cuál sería la consecuencia de exposición frecuente a la luz solar?
https://www.bbc.com/mundo/noticias-46032222
 RESULTADO DE APRENDIZAJE Y CONTENIDOS
EXPLICA LA ESTRUCTURA DEL NÚCLEO, COMPOSICIÓN QUÍMICA DE LOS ÁCIDOS NUCLEICOS,
CROMOSOMAS Y SUS FUNCIONES

NÚCLEO. ESTRUCTURA Y FUNCIONES

CROMOSOMAS

ÁCIDOS NUCLEICOS

DOGMA CENTRAL

REPLICACIÓN DEL ADN

 NÚCLEO
Características generales

Forma Tamaño Número Posición Composición

Variable 5 a 10 nm 1 núcleo/célula Característico del DNA celular

• Redondos: cél • Constante dentro Excepciones: tipo de célula • DNA asociado a
isodiamétricas del mismo tipo • O núcleos • Central proteínas: cromatina
• Alargados, celular - eritrocitos • Basal • Gran nº de proteínas
fusiformes; • Ocupa el 10% del - c. córnea • Lateral - Estructurales
elipsoideo: volumen celular • 2 núcleos - Enzimas
musculares - Hepatocitos • Cantidad variable de
aplanadas, - Cél. Dogiel (ep. urinario) RNA
peismáticas • Multinucleados
• Lobulados: - osteoblastos
leucocitos - Cél. muscular • Envoltura nuclear
granulocitos - Megacariocitos (carioteca)
• Lámina Nuclear
• Cromatina –
Núcleo Aspecto del núcleo durante la interfase cromosomas
interfásico celular. • Compartimento
intercromatínico
Estructura • Cuerpos nucleares
Núcleo en Aspecto que presenta el núcleo en el
que se diferencian los cromosomas
división
NÚCLEO INTERFÁSICO
 FUNCIONES DEL NÚCLEO

• Almacenar la información genética en el ADN.

• Recuperar la información almacenada en el ADN en la forma de ARN.
El núcleo tiene tres
• Ejecutar, dirigir y regular las actividades citoplasmáticas, a través del
funciones primarias, todas
producto de la expresión de los genes: las proteínas.
ellas relacionadas con su
contenido
de ADN:

• Duplicación del ADN y su ensamblado con proteínas (histonas) para

formar la cromatina.
En el núcleo se localizan • La transcripción de los genes a ARN y el procesamiento de éstos a sus
los procesos a través de
los cuales se llevan a cabo formas maduras, muchas de las cuales son transportadas al citoplasma
dichas funciones para su traducción
• La regulación de la expresión genética.
 Estructura de la
Envoltura nuclear

Membrana Membrana
nuclear nuclear
externa interna

Se continúa presentan
con el RE
Regulan el
Poros intercambio
nucleares de moléculas

• Entra;
- Nucleótidos,
El N° es variable
- Enzimas
depende de la
- Proteínas
actividad
estructurales, .
transcripcional
• Salen:
- ARNm, ARNt
- subunidades
ribosomales

http://biologia1rob-cm.blogspot.com/2014/11/iv12complejo-del-poro.html
INGRESO Y SALIDA
MOLECULAR EN EL
NÚCLEO

https://www.mun.ca/biology/desmid/brian/BIOL2060/BIOL2060-18/18_31.jpg
 Lámina nuclear o
Lámina fibrosa

• Mantiene la integridad de la
envoltura nuclear
• Sirve de anclaje a la cromatina

Enfer. de la lámina nuclear (laminopatías)

- Distrofia
muscular de Emery Dreifuss ligada al
cromosoma X, la proteína emerina está ausente.
- Distrofia muscular de Emery Dreifuss no ligada al sexo
se observan mutaciones en LMNA, el gen único que
codifica las láminas A y C
- En anomalía de Pelger-Huet existe mutación del
receptor para la lámina B (LBR)
 Cromatina

Está formada por

DNA Proteínas

HISTONAS:
Proteínas básicas ( cantidad de arginina y lisina).
• Son: H1, H2A, H2B, H3 y H4
• Son proteínas estructurales: empaquetan el DNA

NO HISTONAS:
• Enzimas de la replicación del DNA (DNA polimerasa)
• Enzimas para la transcripción del DNA (RNA pol)
• Proteínas con función reguladora: controlan que
determinadas regiones del DNA, expresen o no su
información genética.
CROMATINA: EUCROMATINA Y HETEROCROMATINA
Heterocromatina:
 Heterocromatina constitutiva
• Regiones que son siempre heterocromáticas
• Se encuentra de manera constante en todos los tipos
celulares
• Ej. cromatina de brazos cortos de cromosomas
acrocéntricos y de centrómeros.
 Heterocromatina facultativa
• Regiones que pueden interconvertirse en eucromatina
y heterocromatina.
• Ej.: cuerpo de Barr
 Histona acetil
transferasa
Histona deacetilasa reduce carga + ,
remueve grupos acetilo , Descondensa
Restablece carga + cromatina y permite
Cromatina se condensa expresión génica
 Partes del cromosoma
Bandas claras
• Ricas en GC
Telómero • Replica temprano en fase S
• Cromatina menos condensada
• Condensación tardía en ciclo celular
• Pobres en secuencias repetidas

Banda oscura (G)

• Ricas en AT
• Replicación tardía
• Cromatina condensada
• Condensación temprana en ciclo celular
Centrómero • Ricas en secuencias repetidas
• DNA repetitivo.

Fuente: https://www.clinicalkey.es/#!/content/book/3-s2.0-
B9780323341264000128

Telómero
NUCLEÓTIDOS
ÁCIDOS NUCLEICOS: ADN Y ARN

Replication movie
 Tipos de ARN
Clase de RNA Tipo celular Localización de la función en Función
las células eucariotas

ARN ribosómico (ARNr) Bacterias y eucariotas Citoplasma Componentes estructurales y funcionales del
ribosoma
ARN mensajero (ARNm) Bacterias y eucariotas Citoplasma Es portador del la información genética para
las proteínas
ARN de transferencia (ARNt) Bacterias y eucariotas Citoplasma Ayuda a incorporar los aminoácidos a la
cadena polipeptídica

ARN nuclear pequeño (ARNsn) Eucariotas Núcleo Procesamiento del ARNm

ARN nucleolar pequeño Eucariotas Núcleo Procesamiento y ensamblaje del ARNr

(ARNsno)

ARN citoplasmático pequeño Eucariotas Citoplasma Variable

(ARNsc)

Micro ARN (ARNmi) Eucariotas Citoplasma Inhibe la traducción del ARNm

ARN interferente pequeño Eucariotas Citoplasma Desencadena la degradación de otras

(ARNsi) moléculas de ARN.

ARN largo no codificante Eucariotas Núcleo y Citoplasma Control de la expresión genética de ARNm.
El Mundo de ARN
Molécula
Capacidad de
plegamiento
El Mundo
informativa
del ARN de ARN
“El ARN fue el centro de las
primeras estructuras
autorreplicantes
involucradas en el origen
de la vida en la Tierra.”

https://www.cell.com/fulltext/S0092-8674(09)00138-X
 Secuencia

ADN: Estructura de
nucleótidos
Estructura primaria en el ADN
Secuencia de nucleótidos. ADN A ADN B ADN Z
Representada por las letras: A, T, C, G.
Se obtiene mediante la secuenciación.

Estructura secundaria
Doble hélice antiparalela.
Una de las cadenas está dispuesta en dirección 3' a
5’. La hebra paralela presenta dirección 5' a 3’.
Formas de ADN: ADN B, ADN A, ADN Z.

ADN-B
Enrollamiento plectonémico, dextrógiro.
Surco mayor y surco menor formando.
2nm de diámetro de la cadena,
0.34nm de separación entre bases nitrogenadas.
3.4nm de giro entre bases.

Modelo de Doble Hélice del ADN

ADN: Estructuras de Orden Superior
El ADN es capaz de interactuar con proteínas
básicas.

En eucariotas forma la cromatina, una

estructura dinámica que permite mantener,
regular y utilizar la información genética.

La cromatina puede condensarse formando

los cromosomas durante la división celular.

Cromosoma mitótico Lodish, 2016.

 REPLICACIÓN DEL DNA
CARACTERÍSTICAS

 Semiconservativa
 Bidireccional
 Asimétrica
 Semidiscontinua
 Asincrónica
 Simultánea
 Secuencial
 Ordenada
 Multifocal en eucariotas
Monofocal en procariotas
 Requiere de cebadores
Dogma Central Propuesto por James Crick en
1957.
Expresión de la
enfermedad genética

Generación de una
molécula de ARN a partir
Generación de del ADN:
una copia de la Transcripción
molécula de
ADN: Generación de una
Replicación secuencia de aminoácidos a
partir del ARN:
Traducción
 Variantes del Dogma Central
Flujos de Información Alternativos: Interacción entre Moléculas

Replicación del ARN: ARN -> ARN ADN-ARN-Proteínas

Retrotranscripción del ARN: ARN -> ADN ADN-Proteínas (Factores de transcripción,

potenciadores, complejos de remodelación)
Traducción directa del ADN: ADN -> Proteínas
ARN-Proteínas (ARNasas, diversas enzimas y complejos
ribonucleoproteicos)
Traducción Directa
Replicación
ARN-ARN (ARNlnc, RNAsi, ARNsn)
Transcripción Traducción
ADN ARN Proteínas Proteínas-Enzimas

Priones PrPc PrPSc

Transcripción Replicación
Reversa de ARN Priones
Gen
• Existen genes para segmentos no
• Unidad básica de la herencia.
Factores de codificantes (ARNr, ARNt, ARNlnc,
• Codifican un carácter
transcripción: miARN, etc.).
biológico.
• Codifican proteínas con - Represión
- Inducción GEN: Segmento de ADN que codifica
diferentes funciones. Regulatory
regions: un producto.
insulators,
enhancers,
promoter Structural region: encodes a single protein
silencers. (DNA and preRNAm contain exons and introns).

Upstream Downstream
Regulatory
regions:
promoter, Structural region: encodes multiple proteins.
operator

Monocystronic
 PROTEÍNAS DE REPLICACIÓN EN PROCARIOTAS

PROTEÍNA FUNCIÓN EN LA HORQUILLA DE REPLICACIÓN

Proteínas Dna A Reconocimiento del origen de replicación
Helicasa (proteína dna B) Desenrolla la doble hélice parental. Usa ATP
Primasa (Dna G) Sintetiza RNA primer, actividad primasa
Prot. de unión a cadenas simples - SSB Mantienen las cadenas de DNA separadas
Topoisomerasa I, II (gyrasa) y IV Relajación de superenrollamientos, decatenación
Subunidad α de DNA pol III Sintetiza cadena líder y fragmentos de Okasaki
Proteína de enganche deslizante (sliding clamp), que une
Anillo β, trabaja con DNA Pol III
polimerasa al DNA molde
Complejo τ Proteína de enganche de carga (clamp loader)
RNAasa H, DNA Pol I Remoción de RNA primer
DNA polimerasa I Reemplazo de RNA con DNA
DNA ligasa Unión de fragmentos
DNA Topisomerasas
 DNA Polimerasas
• DNA pol tienen una larga hendidura
compuesta de 3 dominios que
asemejan a una mano.
• DNA corre a través de la “palma” en
una hendidura creada por los “dedos”
y el “pulgar.”

La incorporación de desoxiribonucleótidos
trifosfato o dNTPs (p.e. dATP, dCTP, dTTP
o dGTP depende del apareamiento de
bases con la cadena molde)
Hay dos propiedades: Fidelidad
y procesividad
La FIDELIDAD se refiere al
seguimiento exacto de la
secuencia que sirve como
molde. En promedio, las DNA
pol cometen 1 error/10-9 nts
La actividad exonucleasa 3’ → 5’
de la DNA pol (I y III) contribuye
a la fidelidad por la actividad
correctora (proofreading).
DNA Pol I tiene actividad
exonucleasa 5’ → 3’
La PROCESIVIDAD se refiere a la capacidad de una DNA polimerasa de elongar una cadena de
DNA por muchos nucleótidos antes de disociarse del complejo.
 La DNA pol I tiene una procesividad baja.
 La DNA pol III tiene una procesividad alta.
1. INICIACIÓN ETAPAS DE LA REPLICACIÓN
1. Replication begins at
origin (oriC)

2. ELONGACIÓN
2. Replication bubble 4. Second strand at each
forms. Replication forks fork is synthesized
progress in opposite discontinuously in Okazaki
directions. fragments 5’ to 3’ (lagging
strand).

3. TERMINACIÓN
3. One strand at each
fork is synthesized
5. Replication ends at
continuously 5’ to 3’
terminus at termination
(Leading strand).
(ter) sites.

31
SITIO Ori C
1. INICIACIÓN
CEBADORES (“PRIMER”).
2. ALARGAMIENTO DE LAS CADENAS.
 DNA replication Process 1 DNA replication Process 2

https://www.youtube.com/watch?v=BGzz712Z0n8&t=19s
3. TERMINACIÓN
• La horquilla de replicación se encuentra con el lugar de terminación, la región ter (τ ).
• La proteína tus se une a la secuencias de terminación. Esta proteína bloquea el movimiento de la helicasa.
• Las moléculas de DNA hijas se separan por la acción de una topoisomerasa IV.
 TELÓMEROS Y TELOMERASA
Cuando la cadena retrasada en
crecimiento alcanza el final de la
molécula de ADN, se remueve el
primer por la actividad 5-3
exonucleasa y el espacio no puede
llenarse porque no existe 3-OH.
Los telómeros son secuencias de
ADN repetitivo ubicado al final de los
cromosomas eucariotas, que los
protegen y son sintetizados por la
telomerasa.
 PROTEÍNAS DE REPLICACIÓN EN EUCARIOTAS

PROTEÍNA FUNCIÓN EN LA HORQUILLA DE REPLICACIÓN

Compl. origen replic. (ORC) Forma el complejo de replicación en el origen de replicación
MCM 10 Recluta la MCM ADN helicasa y pol α/primasa a cromatina
MCM ADN helicasa Abre ADN doble cadena (DNAds) frente a la DNA pol.
Proteína de replicación A Estabiliza ADN simple cadena (DNAss) creada por la MCM ADN helicasa
Factor de replicación C Cargador del antígeno nuclear de células proliferantes, responsable de la unión de la ADN
(RFC) polimerasa.
Antígeno nuclear de células
Plataforma movible para la ADN polimerasa y otras proteínas de replicación
proliferantes (PCNA)
ADN topoisomerasas I y II Resuelve problemas topológicos del ADN en avance y después de la replicación
ADN polimerasa α/primasa ADN polimerasa iniciadora, puede sintetizar un corto ARN y pieza de ADN
ADN polimerasa δ ADN polimerasa elongante, probablemente la cadena retardada
ADN polimerasa ε ADN polimerasa elongante, probablemente la cadena líder
3’ → 5’ exonucleasa Proofreading de DNA polimerasas, parte de la DNA polimerasa δ y ε
Flap endonucleasa 1 (FEN1) Remueve ARN iniciadores y ADN en la cadena retardada de la horquilla de replicación
ADN ligasa I Une las piezas de ADN
REPLISOMA EUCARIOTA
 COMPARACIÓN DE REPLICACIÓN EN PROCARIOTAS VS. EUCARIOTAS

Procariotas Eucariotas
Citosol Núcleo
Histonas unidas a DNA, la replicación debe ser coordinada con
Sin histonas unidas a DNA
su síntesis
Un único origen de replicación Varios orígenes de replicación
5 polimerasas (I, V, III, IV, V) 5 polimerasas (α, β, δ, ε, γ)
Polimerasas son también exonucleasas No todas las polimerasas son exonucleasas
Fragmentos de Okasaki 1000-2000 de longitud Fragmentos de Okasaki 150-200 de longitud
Mayor velocidad de replicación: 103 nt/seg Menor velocidad de replicación: 103 nt/min
DNA pol de E. coli presenta un nucleótido incorrecto por DNA pol presenta un error por cada 109 nucleótidos
cada 104 nucleótidos polimerizados incorporados a una cadena creciente
Al ser ADN circular no se produce acortamiento porque Al ser el ADN lineal se acorta el extremo de la cadena en cada
no existen telómeros ciclo de replicación y actúa la telomerasa
La replicación del DNA de E. coli, tarda 42 minutos El DNA se replica en 8 horas.
Se replica una sola vez por ciclo celular Se replica una sola vez por ciclo celular
Se pueden solpara dos rondas de replicación Hay puntos de control estrictos, sólo ocurre en período S
ANTIBOIÓTICOS QUE AFECTAN REPLICACIÓN

Antibiótico Fuente Target

Sintetizado Dihidrofolato
Trimetropina
químicamente reductasa
Acido Sintetizado Subunidad gyrA de
nalidíxico químicamente girasa
Streptomyces Subunidad gyrB de
Noboviocina
sphaeroides girasa
Streptomyces Produce enlace
Mitomicina C
caespitosus cruzado DNA
INHIBIDORES DE LA REPLICACIÓN
INHIBIDORES DE LA REPLICACIÓN

Inhibidores de la síntesis de ADN

SITUACIÓN PROBLEMÁTICA
Luz UV

Dímero de Timina
REPARACIÓN DEL ADN
Reparación por Excisión de
Reparación Directa Nucleótidos (NER)
(en Bacteria)
Preguntas? Deben revisar los materiales, realizar
las tareas y subirlas en la plataforma.

Gracias por su atención………..