COVID
COVID
COVID
www.elsevier.es/enfermeriaclinica
ARTÍCULO ESPECIAL
a
SOS Madrid, Madrid, España
b
Gerencia de Atención Primaria de Gran Canaria, Gran Canaria, España
c
Grupo de intervención a domicilio, Gerencia de Atención Primaria de Gran Canaria, Gran Canaria, España
d
Área técnica de suministros, Gerencia Atención Primaria de Gran Canaria, Gran Canaria, España
PALABRAS CLAVE Resumen En la actual crisis provocada por el SARS-CoV-2, surge la necesidad global de conocer
COVID-19; y combatir el virus. Una de las estrategias es rastrear y diagnosticar los casos con el fin de aislar
Infecciones por e interrumpir la cadena epidemiológica. Por ello, el objetivo de este artículo es describir las
coronavirus; distintas pruebas diagnósticas más utilizadas y analizar su validez e indicaciones de uso según
Virus del SARS; la evidencia científica y las principales recomendaciones de sociedades científicas y organismos
Diagnóstico; de referencia nacionales e internacionales. Desde el inicio de la pandemia, la disponibilidad de
Pruebas diagnósticas; test ha estado supeditada a las condiciones del propio mercado de fabricación y a las directri-
SARS-CoV-2 ces marcadas en cada país. Entre los tipos de test más utilizados cabe destacar la PCR, los test
de detección de anticuerpos (IgG e IGM) y anticuerpos totales (Ab), también conocidos como
test rápidos, y los test de detección de antígenos en exudado nasofaríngeo u otras muestras
respiratorias de vías altas/bajas. Para cada uno de estos test es necesario conocer sus reco-
mendaciones de uso y el procedimiento para la toma de muestras, siendo fundamental para
minimizar las alteraciones en los resultados debidas a una manipulación deficitaria. Asimismo,
es necesario determinar el momento más adecuado para la toma de muestras y la adecuada
interpretación de los resultados obtenidos, que siempre ha de ser considerada junto con la
sintomatología del paciente para la toma de decisiones clínicas.
© 2020 Publicado por Elsevier España, S.L.U.
https://doi.org/10.1016/j.enfcli.2020.10.001
1130-8621/© 2020 Publicado por Elsevier España, S.L.U.
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de infección por SARS-COV-2. Enferm Clin. 2020. https://doi.org/10.1016/j.enfcli.2020.10.001
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ENFCLI-1686; No. of Pages 9 ARTICLE IN PRESS
2 L. Gestoso-Pecellín et al.
KEYWORDS Recommendations for use of the diverse tests for detection of SARS-COV-2 infection
COVID-19;
Abstract In the current crisis caused by SARS-CoV-2, there is a global need to know and combat
Coronavirus
the virus. One of the strategies is to track and diagnose cases in order to isolate and interrupt
infections;
the epidemiological chain. Therefore, the aim of this article is to describe the different most
SARS virus;
used diagnostic tests and analyze their validity and indications for use according to scientific
Diagnosis;
evidence and the main recommendations of scientific societies and reference organizations at
Test;
national and international level. Since the beginning of the pandemic, the availability of tests
SARS-CoV-2
has been subject to the conditions of the manufacturing market itself and to the guidelines
set in each country. Among the most used types of tests, it is worth highlighting PCR, antibody
detection tests (IgG and IGM) and total antibodies (Ab), also known as rapid tests, and tests for
the detection of antigens in nasopharyngeal exudate or other upper/lower respiratory samples.
For each of these tests, it is necessary to know their recommendations for use and the procedure
for taking samples, which is essential to minimize alterations in the results due to poor handling.
Likewise, it is necessary to determine the most appropriate moment for taking samples and their
adequate interpretation of the results obtained, which must always be considered together with
the patient’s symptoms for clinical decision-making.
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Recomendaciones y uso de los diferentes tipos de test diagnósticos de SARS-COV-2 3
estudio estaba basado en la detección del genoma de los - Falsos positivos: errores en el etiquetado de la muestra
SARS-CoV y otros coronavirus relacionados con SARS9 . a lo largo del proceso, por contaminación cruzada entre
El procedimiento de PCR en laboratorio consta de dos muestras.
partes: 1) extracción de ácidos nucleicos y 2) reacción
de amplificación. Lo ideal es que ambos procesos estén ◦ Tipos de muestras
automatizados para disminuir errores y aumentar la rapi-
dez diagnóstica de todo el proceso5 . Los laboratorios de Muestras del tracto respiratorio:
microbiología clínica deben disponer de suficiente material
fungible compatible con la infraestructura de la que se dis- a. Superior: exudado nasofaríngeo/orofaríngeo en pacien-
pone en cada centro, con objeto de hacer un diagnóstico tes ambulatorios13 .
rápido y fiable10 . b. Inferior: preferentemente lavado broncoalveolar, esputo
La PCR es una técnica muy sensible y específica, que se (si es posible) y/o aspirado endotraqueal especialmente
realiza en los laboratorios de microbiología para el diag- en pacientes con enfermedad respiratoria grave10 .
nóstico de diversas enfermedades infecciosas. Por estos
motivos, actualmente la PCR es la técnica diagnóstica de Si un paciente no tiene signos o síntomas de infección
referencia. Según los datos recopilados, los hospitales y cen- del tracto respiratorio inferior o si la toma de muestras del
tros sanitarios españoles inicialmente realizan unas 15.000 tracto respiratorio inferior está clínicamente indicada, pero
PCR al día, cifra que ha ido adaptándose en función de la no es posible su recolección, se puede optar por estudiar
demanda. La realización de un número tan elevado de deter- solamente las muestras respiratorias de tracto superior.
minaciones conlleva la necesidad de suministrar de manera Si las pruebas iniciales son negativas en un paciente con
continuada no solo los kits de PCR, sino otros muchos mate- una alta sospecha clínica y epidemiológica para SARS-CoV-
riales necesarios, como torundas y medios de transporte 2, se puede sospechar de falso negativo4 (especialmente
para la toma de muestras, soluciones de inactivación, reacti- cuando solo se han recogido muestras de tracto respi-
vos de extracción y diferentes tipos de material plástico. Las ratorio superior o la muestra recogida inicialmente no
determinaciones analíticas con PCR siempre deben ser rea- estaba tomada adecuadamente). Se podrán extraer mues-
lizadas por personal experimentado y suelen tardar varias tras adicionales, como sangre, orina o heces10 . Según las
horas hasta ofrecer resultados11 . recomendaciones de la CDC europea, solo se podrá confirmar
En España hay capacitados 13 laboratorios para realizar que un paciente ha superado la enfermedad de COVID-19
las PCR validados por el Instituto de Salud Carlos III (ISCIII) cuando se obtengan 2 resultados negativos de rt-PCR pasa-
pertenecientes a 7 universidades y 6 centros de investi- das 24 h o más entre ambos14,15 .
gación, militares y veterinarios: Universidad de Alcalá de
Henares, Centro de Investigación en Sanidad Animal (CISA),
Universidad Complutense de Madrid, Centro Militar Veteri- Test de detección de anticuerpos (IgG e IGM)
nario de Madrid, Universidad de León, Laboratorio Regional y anticuerpos totales (Ab)
de Sanidad Animal de León, Centro Biolab-Arcelormittal de
I + D de Asturias, Universidad de La Laguna, Universidad de En respuesta a la creciente pandemia de COVID-19 y la
Valladolid, Fundación para el Fomento de la Investigación escasez de capacidad y reactivos de pruebas moleculares
Sanitaria y Biomédica de la Comunidad Valenciana (FISABIO), basadas en laboratorio, múltiples fabricantes de pruebas de
Universidad de Castilla-La Mancha, Laboratorio de Identifi- diagnóstico han desarrollado y comenzado a vender dispo-
cación Rápida (LABIR) de la Unidad Militar de Emergencias sitivos rápidos y fáciles de usar para facilitar las pruebas
(UME) y Universidad del País Vasco. Estos laboratorios, que fuera de los entornos de laboratorio16 . Estos kits de pruebas
según sus capacidades individuales realizan entre 50 y 450 simples se basan en la detección de anticuerpos humanos
PCR diarias, apoyan a los hospitales de su comunidad y, en generados en respuesta a la infección17 .
algunos casos, prestan apoyo a universidades, centros de Los test de anticuerpos o serológicos fueron prime-
referencia, residencias y Cuerpos y Fuerzas de Seguridad del ramente utilizados por la Duke-NUS Medical School en
Estado12 . Singapur. Las pruebas de anticuerpos son diferentes a las PCR
porque requieren conocimiento sobre las proteínas que for-
man la capa viral, específicamente, aquellas proteínas a las
◦ Potenciales errores diagnósticos con la PCR que el sistema inmunitario responde desencadenando la pro-
ducción de anticuerpos que pretenden marcar o neutralizar
La interpretación de la PCR se debe hacer con prudencia el virus18 .
dentro del contexto clínico, sobre todo cuando el resultado Los estudios de dinámica de generación de anticuerpos
es negativo. frente a SARS-CoV-2 han mostrado que estos comienzan a
producirse a partir del 6.o día del inicio de síntomas a la vez
que se observa un descenso de la carga viral. A los 7 días, casi
- Falsos negativos: pueden aparecer falsos negativos por la mitad de los casos tienen anticuerpos totales y a los 15
distintas circunstancias; por ejemplo: toma inadecuada de días casi el 100%, tanto en los casos leves como los graves16 .
la muestra, por retraso en el transporte, por error en el Basado en esto, las técnicas de anticuerpos buscan detec-
etiquetado de la muestra a lo largo del proceso. Además, tar la respuesta inmune de los pacientes, la cual aumenta
en caso de elevada sospecha clínica y resultado negativo según avanza la infección, y ofrecen por tanto la posibilidad
de la PCR su interpretación debe hacerse con prudencia, de detectar enfermedad activa de varios días de evolución.
y se recomienda repetir el estudio4 . La presencia de anticuerpos, por otro lado, no excluye la
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posibilidad de seguir siendo transmisor del virus11 ni tam- Tabla 1 Resumen general de interpretación de resultados
poco certeza que los mismos sean neutralizantes de cara a
futuras infecciones o que provean de inmunidad19 . PCR Ag IgM IgG Interpretación
Existen dos métodos para la detección de los mismos: + − − − Fase presintomática
+ +/− +/− +/− Fase inicial (aprox. 1-7 días)
+/− − + +/− 2.a Fase (8-14 días)
- Por inmunocromatografía lateral (lateral flow) +/− − ++ ++ 3.a Fase > 15 días
− − +/− ++ Infección pasada (inmune)
Son los denominados kits rápidos por digitopunción. Tie- Fuente: Ministerio de Sanidad19 .
nen la ventaja de su fácil uso, no requieren de personal
especializado ni para la extracción ni para la realización. Test de detección de antígenos en exudado
Hay diferentes tipos de kits, según detecten los anticuerpos
nasofaríngeo u otras muestras respiratorias de vías
totales (Ab) o específicos (IgG e IgM)20 .
altas/bajas
El resultado se puede dar en unos 15 min. La detección de
ambas inmunoglobulinas se interpreta como infección sub-
aguda en curso. Son test sencillos de hacer, pero deben ser Otro tipo de prueba de diagnóstico rápido (RDT) detecta la
interpretados con prudencia, en relación con el curso de la presencia de proteínas virales (antígenos) expresadas por
infección, sobre todo por la tasa de falsos negativos en la el virus COVID-19 en una muestra del tracto respiratorio
detección de IgM ya que la respuesta de IgM en un enfermo de una persona24 . Si el antígeno objetivo está presente en
COVID-19 puede tardar en aparecer desde varios días a 2 concentraciones suficientes, se unirá a anticuerpos especí-
semanas21 . ficos fijados a una tira de papel dentro de un cubículo de
Algunos estudios han mostrado que durante los prime- plástico generando una señal visualmente detectable a los
ros 7 días desde el inicio de síntomas, menos de un 40% 30 min. Los antígenos detectados se expresan solo cuando
de pacientes presentan anticuerpos IgM detectables. Así, el virus se replica activamente; por lo tanto, tales prue-
estas pruebas no deben ser usadas para descartar un caso bas están diseñadas para identificar infecciones agudas o
durante los primeros días de enfermedad (periodo ventana). tempranas17,19 .
Asimismo, la detección de anticuerpos (IgG) después del día Son menos sensibles que la PCR. En pacientes con sín-
7 solo indica contacto previo con el virus, pero no es útil tomas y resultado negativo es preciso realizar una PCR de
para confirmar la presencia y excreción del virus, ni descarta confirmación. Fueron los primeros adquiridos por el Minis-
enfermedad COVID-19 activa mientras persisten IgM. Servi- terio de Sanidad y testados por el ISCIII detectando una
rían también para determinar si se genera inmunidad tras la sensibilidad muy baja en los test valorados. Son más sofisti-
infección. Este tipo de test se realiza en sangre capilar19 . cados desde el punto de vista del desarrollo y los testados
hasta el momento han presentado baja sensibilidad en vida
real. Existen numerosas empresas que los están desarro-
- Por técnica ELISA o inmunoquimioluminiscencia llando. Aún disponemos de pocos datos sobre la sensibilidad
y especificidad de la detección de antígeno de SARS-CoV-19
en frotis nasofaríngeo25 . Es más, la Organización Mundial de
Requieren personal especializado para la toma de la Salud no recomienda, por el momento, el uso de estos Ag
muestra sanguínea por venopunción y de equipamiento RDT17 .
específico. Tienen la ventaja que permiten conocer la clase En la figura 1 y tabla 1 se muestran los criterios para la
y subclase de inmunoglobulinas, así como la cuantificación interpretación de los distintos resultados según el tipo de
de las mismas. Estos son más adecuados para poder realizar prueba.
estudios cinéticos que permitan analizar de forma adecuada
la respuesta inmunitaria frente a SARS-CoV-2. Los resulta- Sistemas de recogida de muestras
dos pueden estar entre una y tres horas. Según la Sociedad
Española de Inmunología, se recomienda realizar este tipo La recogida de muestras puede darse en ámbito hospitala-
de test para el seguimiento de los pacientes infectados20 . rio o comunitario e instituciones residenciales. Se considera
Las pruebas para detectar respuestas de anticuerpos en imprescindible tener al menos 2 profesionales para la toma
la población son críticas para apoyar el desarrollo de vacu- de muestras: enfermera o médico en su ausencia, en con-
nas y para aumentar nuestra comprensión del alcance de tacto directo con el paciente y TCAE; esta última se
la infección. Pueden, por tanto, ser usadas en estudios encargará de verificar la correcta identificación de las mues-
epidemiológicos y de vigilancia, así como para identificar tras y forma de transporte y refrigeración.
pacientes que pueden convertirse en donantes de suero con- - En el hospital la recogida de muestra del paciente
valecientes para protocolos de tratamiento experimental22 . deberá ser preferentemente en su box o habitación evitando
Sin embargo, para el diagnóstico clínico, tales pruebas desplazamientos y posible infección cruzada. Las pruebas de
tienen una utilidad limitada porque no pueden diagnosti- PCR son las de elección en hospitales10,25 .
car precozmente una infección aguda17 . La limitación más - En el ámbito comunitario se realiza la toma de muestras
importante es su valor predictivo negativo bajo, por lo que en residencias y centros sociosanitarios del ámbito público
un resultado negativo no excluye posible infección23 y, por o privado. Se priorizará según el mayor número de perso-
lo tanto, no puede utilizarse como fundamento único para nas a cribar; se realizarán primero aquellos centros en los
las decisiones sobre tratamiento o manejo de pacientes18,22 . que haya habido algún caso positivo de COVID-19. Un equipo
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Recomendaciones y uso de los diferentes tipos de test diagnósticos de SARS-COV-2 5
Figura 1 Criterios de utilización e interpretación de los tests diagnósticos frente a la COVID-19. Fuente: Elaborada a partir del
documento: «Indicaciones y procedimiento de utilización de test diagnósticos de infección COVID-19»25 .
del Servicio de Urgencias o un equipo especial formado antes de la toma de muestra28 . La enfermera realiza la toma
para intervención domiciliaria y toma de muestras COVID de muestra a través de la propia ventanilla del vehículo.
se desplazará hasta la institución. Las pruebas se realizarán Con estas dos maneras se agiliza la toma de muestras, se
al conjunto de residentes, trabajadores y/o colaboradores incrementa el número de test en menor tiempo y se optimiza
estables en la institución que pudiesen originar un riesgo de el equipo de protección individual (EPI).
transmisión en el centro. El protocolo de actuación en los
centros residenciales de mayores del Gobierno de Canarias
y avalados por los últimos datos científicos recogidos en la
Procedimiento para la recogida de muestra
literatura añade que se desaconseja el uso de test rápidos
en población asintomática, por lo que es conveniente rea- Según las recomendaciones del Ministerio de Sanidad del
lizar PCR y test rápidos conjuntamente26 . El único criterio Gobierno español, entendemos la recogida de muestras
de exclusión para la realización de las dos pruebas será en como una exposición de riesgo, por lo tanto es impres-
aquellas personas que ya hayan tenido una PCR positiva y cindible contar con EPI30 . Es tan importante la correcta
confirmada de COVID-19; en ese caso se realizará solamente colocación del EPI como la retirada. La enfermera que pro-
el test rápido26 . Si el paciente no puede desplazarse de su ceda a la obtención de muestra deberá llevar un EPI para
casa, el equipo de toma de muestras del Servicio de Urgen- prevenir la transmisión de la infección de acuerdo con el
cias o Atención Primaria lo hará en su domicilio. Si por el riesgo de exposición31 .
contrario el usuario puede desplazarse, la toma de mues-
tra se puede hacer en centros preparados para ello. En la Muestra PCR
comunidad autónoma de Canarias, por ejemplo, se puso ini-
cialmente a disposición un centro de exposiciones con la Se necesita para la muestra respiratoria hisopo de algodón o
capacidad de realizar hasta 1.080 pruebas al día27 . Algunas poliéster, un contenedor con medio líquido para transportar
comunidades como Galicia, Andalucía y Canarias a mediados el hisopo, un segundo embalaje que debe estar seco en su
de marzo adaptaron nuevos espacios de recogida de mues- interior y un tercer embalaje que pueda soportar golpes10,32 .
tra para usuarios en su propio vehículo, aportando grandes El procedimiento más común consistirá en la recogida de
ventajas. El usuario citado previamente acudía a hacerse exudado de acceso orofaríngeo o nasofaríngeo (preferible-
la prueba sin bajar de su coche, a esta forma se le deno- mente). Es necesario un hisopo seco con punta de algodón o
minó «auto-covid»28,29 . Las indicaciones que deben seguir fibra de poliéster; los hisopos de alginato cálcico hechos en
son las siguientes: acudir preferentemente solo en el vehí- material de madera no deben usarse pues podrían inactivar
culo con la ventanilla cerrada y mascarilla quirúrgica puesta. los virus y por tanto invalidar la PCR4,10,33 . La obtención de
Si no dispone de mascarilla se le entrega una en el punto de la muestra se realizará por ambas cavidades nasales con el
control de identidad dejándola a través de la ventanilla del mismo hisopo, insertándose en cada fosa nasal paralela al
asiento contiguo. El usuario llega al punto de muestra y sin paladar e introduciendo pasando las coanas hasta llegar a
bajar la ventanilla recibe de nuevo instrucciones mediante la pared nasofaríngea. Una vez allí se frota el hisopo con
carteles y pictogramas con el fin de informar y tranquilizar cuidado y es retirado con igual cuidado con movimientos
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rotatorios (fig. 2). Terminada la recogida, el hisopo se coloca También es necesario disponer de un reloj visible para
en un vial que contiene de 2-3 ml de medio de transporte y se controlar los 10 min además de formas de etiquetado de
desecha el resto del aplicador pudiéndose cerrar la muestra muestra como podría ser una pegatina donde anotar la iden-
correctamente10,13,32 . tificación del usuario y la hora de la toma de muestra25 .
Las muestras de PCR se deberán almacenar individual- Por último, el contenedor rígido de residuos biosanitarios
mente con la identificación correcta del usuario en un lugar clase III será el adecuado para desechar el EPI usado y todo
a 4◦ C y según el protocolo del Ministerio de Sanidad, podrían residuo generado en cualquiera de ambas muestras10,32 .
estar refrigeradas a esa temperatura de 24 a 48 h10,32 .
Las muestras clínicas deben ser tratadas como potencial-
mente infecciosas y se consideran de categoría B: siguiendo Discusión y conclusiones
la normativa UN3733 deben ser tratadas como otras mues-
tras biológicas de este tipo y, si requieren transporte fuera Dada la alta especificidad y sensibilidad que posee, el test
del centro sanitario o domicilio a un laboratorio, serán trans- de preferencia para la confirmación diagnóstica de la COVID-
portadas en triple embalaje robusto y que soporte golpes10 . 19 es la rt-PCR, la cual, junto con los test de anticuerpos,
Para mayor seguridad y refrigeración, la guía de actuación nos pueden dar una idea de la fase infecciosa en la que se
que preparó el Gobierno de Canarias consideró un cuarto encuentran los pacientes. La recogida de dichas muestras es
embalaje en neveras transportables hasta los hospitales realizada por personal sanitario entrenado. Normalmente,
donde se encontraban los laboratorios de recogida28 . labor de las enfermeras.
La Organización Mundial de la Salud ha instado repeti-
damente a los gobiernos a que realicen pruebas y rastreo
Test rápidos de anticuerpos (totales o específicos (de la población). Singapur y Corea del Sur han utilizado con
de IgG/IgM) éxito este enfoque para contener sus brotes, mientras que
Alemania también ha continuado realizando el rastreo de los
Las muestras recomendadas para el diagnóstico por test contactos.
serológico son de sangre obtenida por extracción de sangre España protocolizó la realización de la rt-PCR a toda per-
vía venosa periférica o por digitopunción con lanceta25 . Este sona con cuadro de infección respiratoria hospitalizada o
tipo de recogida es más sencillo. La disposición del personal que cumpliera criterio de ingreso hospitalario, y persona con
será la misma que la toma de muestra de PCR. cuadro de infección aguda de cualquier gravedad que perte-
Para la toma de test rápido por capilaridad es necesario neciera a personal sanitario y sociosanitario y otros servicios
tener una gasa con suero fisiológico y otra seca para lim- esenciales.
piar el dedo donde realizar la digitopunción, una lanceta, Según los datos publicados en la Foundation for Innova-
pipeta para la recogida segura de la muestra, cassette del tive New Diagnostics (FIND) localizada en Ginebra, España
fabricante, campo donde depositar el cassette. ha pasado de realizar 37,4 test por cada 100.000 habitantes
Inmediatamente después, depositar el número de gotas (dato del 15 de marzo) a 1.989 test por cada 100.000 habi-
que aparezca en la ficha técnica del fabricante (fig. 3) y tantes (obtenido el 18 de abril) y 9.000 test en agosto de
esperar de 10 a 15 min el resultado de la misma. Pasado este 202034 .
tiempo no es recomendable considerar el resultado como La actual legislación española publica en el BOE del 14
válido. de abril que los test diagnósticos para la detección de la
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Recomendaciones y uso de los diferentes tipos de test diagnósticos de SARS-COV-2 7
COVID-19 se limitan a aquellos casos en los que exista pres- Conflicto de intereses
cripción previa por parte de un facultativo y se ajusten
a criterios establecidos por la autoridad sanitaria compe- Los autores no declaran ningún conflicto de intereses.
tente. Cualquier entidad pública o privada que con relación
a las pruebas diagnósticas de la COVID-19 adquieran hisopos
para toma de muestras, medio de transporte de virus, reac- Bibliografía
tivos de inactivación, kits de extracción de ácidos nucleicos,
rt-PCR, o test rápidos diagnósticos deberán ponerlo en 1. Sheridan C. Fast, portable tests come online to curb
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