ACTIVIDAD ENZIMÁTICA Y FACTORES QUE LA AFECTAN

(PRÁCTICA 6)
D. CASTILLO, J. RUIZ y S. SANTOS
Departamento de Ingeniería Agroindustrial
Universidad de Sucre
Sincelejo
RESUMEN
En este estudio se evaluó la actividad enzimática usando papa y agua oxigenada, observando cómo factores
como el pH, la temperatura y la concentración influyen en su funcionamiento. Al combinar la papa con agua
oxigenada, la catalasa reaccionó liberando burbujas de oxígeno. Además, se realizaron pruebas agregando HCl
al 10% a papa triturada y NaOH al 20% a trozos de papa, demostrando que tanto los ambientes ácidos como
básicos reducen o desnaturalizan las enzimas, afectando su actividad.

ABSTRACT:

In this study, the enzymatic activity was evaluated using potato and hydrogen peroxide, observing how factors such as pH,
temperature and concentration influence its functioning. When the potato was combined with hydrogen peroxide, catalase
reacted by releasing oxygen bubbles. In addition, tests were carried out by adding 10% HCl to crushed potato and 20%
NaOH to potato pieces, demonstrating that both acidic and basic environments reduce or denature enzymes, affecting their
activity.

1.INTRODUCCIÓN misma reacción no catalizada. La actividad de la

Las enzimas son moléculas orgánicas que actúan s enzimas puede ser afectada por otras moléculas.
como catalizadores de reacciones químicas, es decir, Los inhibidores enzimáticos son moléculas que
aceleran la velocidad de reacción. Comúnmente son disminuyen o impiden la actividad de las enzimas,
de naturaleza proteica, pero también existe de ácido mientras que los activadores son moléculas que
ribonucleico (ARN, ribozimas). Las enzimas incrementan su actividad. Muchos fármacos son
modifican la velocidad de reacción, en reacciones moléculas inhibidoras, activadoras o antagonistas de
energéticamente favorables. Las enzimas actúan enzimas. Muchos enzimas requieren cofactores para
sobre los sustratos de reacción, facilitando su su actividad catalítica. Su actividad se ve afectada
conversión en productos. Los sustratos se unen al por la temperatura, el pH, la concentración de enzima
centro activo del enzima, que es la parte del enzima y del sustrato, además de otros factores
dónde tiene lugar la catálisis, formada por un sitio de fisicoquímicos.
unión del sustrato y un sitio catalítico. Tras la unión Serrate, Cardona. “Los enzimas. Introducción a la
del sustrato al centro activo se forman los productos enzimología”(1)
de la reacción. Casi todos los procesos en las células
2.OBJETIVOS
necesitan enzimas para que ocurran a tasas
significativas. A las reacciones mediadas por OBJECTIVOS GENERALES
enzimas se las denomina reacciones enzimáticas. 1.Comprender la función y la importancia de las
Debido a que las enzimas son extremadamente enzimas: Entender cómo actúan las enzimas como
selectivas con sus sustratos y reacciones, el conjunto catalizadores biológicos y su papel en las reacciones
de enzimas de una célula, que viene determinado por químicas en los organismos vivos.
lo genes que expresa, determina el tipo de 2. Explorar la cinética enzimática: Estudiar los
metabolismo que tiene la célula. Como todos los factores que afectan la velocidad de las reacciones
catalizadores, las enzimas actúan disminuyendo la enzimáticas, como la concentración de sustrato, la
energía de activación (ΔG), acelerando la tasa de temperatura, el pH, entre otros.
reacción. Las enzimas no alteran el balance
energético, ni modifican el equilibrio de la reacción.
Una reacción catalizada por un enzima alcanza el OBJECTIVOS ESPECIFICOS
mismo equilibrio, pero mucho más rápido, que la 1.Analizar la estructura y función de una enzima:
Comprender la relación entre la estructura molecular de la forma los separarían. Esto les permite a las
enzima y su función catalítica, examinando cómo la moléculas interactuar usando menos energía.
alteración de las condiciones afecta la conformación de la  Las enzimas también son capaces de permitir
enzima. que las reacciones ocurran por caminos
diferentes, en los que se tiene una menor
3.MARCO TEORICO
FUNCIONAMIENTO DE LAS ENZIMAS
energía de activación.
El sitio activo es específico para los reactantes de las
Como todos los catalizadores, las enzimas reacciones bioquímicas que cataliza la enzima.
funcionan bajando la energía de activación de las Similar a como las piezas de un rompecabezas
reacciones. Esta energía es la que se necesita para calzan, el sitio activo solo puede unir ciertos
comenzar una reacción química. Esto se muestra en substratos.
la Figura siguiente .

Figura 2 ( comportamiento de la enzima)

Por otro lado, la catalasa es una enzima presente en
casi todas las células aeróbicas y tiene la función de
descomponer el peróxido de hidrógeno (H₂O₂) en
agua (H₂O) y oxígeno (O₂). Esta reacción es crucial
Figura 1 (Acción enzimática) porque el peróxido de hidrógeno es un subproducto
tóxico del metabolismo celular y puede dañar las
La reacción bioquímica que se muestra en la figura
células si no es eliminado de manera eficiente.
requiere tres veces más de energía sin la enzima que
con esta. La reacción catalizada por la catalasa es:
La reacción representada por este gráfico es una 2H2O22H2O+O2
reacción de combustión que involucra a las Características clave de la catalasa:
reactantes glucosas (C 6 H 12 O 6) y oxígeno (O 2 ). Distribución: Se encuentra en una variedad de
Los productos de la reacción son dióxido de organismos, incluidos animales, plantas y bacterias.
carbono (CO 2) y agua (H 2 O). También se libera Función protectora: Protege las células de los daños
energía durante la reacción. La enzima acelera la oxidativos causados por el peróxido de hidrógeno.
reacción al bajar la energía de activación que se Alta eficiencia: Es una de las enzimas más eficientes,
necesita para que comience la reacción. Compara la capaz de catalizar millones de reacciones por
energía de activación con y sin la enzima. segundo.
Ubicación en la célula: En células animales, se
Las enzimas generalmente bajan la energía de
encuentra en orgánulos llamados peroxisomas, donde
activación al reducir la energía necesaria para que
contribuye a la desintoxicación de sustancias
los reactantes se junten y reaccionen. Por ejemplo:
dañinas.
 Las enzimas juntan los reactantes para que
CK-12 Foundation(2)
no gasten energía moviéndose hasta que
choquen al azar. Las enzimas unen las
moléculas reactantes (llamadas substrato), Metodología
específica y fuertemente, en un sitio de la 1. Se tomaron 2 tubos uno con papa triturada y
enzima llamado sitio activo otro con papa en trozos, a cada uno se le
 Al unir reactantes en el sitio activo, las añadió 2 ml de agua oxigenada, se registró
enzimas también posicionan correctamente una temperatura inicial de 30°C en la papa
los reactantes para que estos no tengan que en trozos y en la papa triturada 31°C. Luego
superar fuerzas intermoleculares que de otra de unos minutos la temperatura aumentó
 aproximadamente 1 grado en cada tubo Papa en trozos y
(Papa en trozos 31°C y triturada 32°C triturada
2. Se tomaron 2 tubos al igual que el proceso sometida a baño
anterior y se llevaron a baño maría entre los maría:
70-90°C solo con la papa en trozos y Al poner los dos
triturada. Luego, pasado los 5 minutos se tubos de ensayo
retiran los tubos del baño maría y se añadió a (uno con papa en
cada tubo 2 ml de agua oxigenada. trozos y otro con
3. Al igual que el proceso anterior se tomaron papa triturada) en
los 2 tubos con papa triturada y en trozos y baño maría a 70-
se sometieron a bajas temperaturas (Agua 90°C y luego
con hielo). Se dejó por 5 minutos, y luego al añadir agua
tubo con papa triturada se le añadió 2 ml de oxigenada, la
HCL al 10% y al tubo con papa en trozos se reacción fue
le añadió NaOH al 20%. mínima o
inexistente. Esto
se debió a que el
Nelson, D. L., & Cox, M. M. (2017). calor
Lehninger Principles of Biochemistry (7th desnaturalizó la
ed.). W.H. Freeman. catalasa, la
enzima
Resultados responsable de
descomponer el
Tabla 1. peróxido de
Papa en trozos y hidrógeno, por lo
triturada: que prácticamente
no se formaron
burbujas en
Al añadir 2 ml de ninguno de los
agua oxigenada, la tubos.
papa triturada
generó más
burbujas Tabla 3
rápidamente
Papa en trozos y
debido a su mayor
triturada sometida
superficie. En
a agua con hielo:
cambio, la papa en
trozos tuvo una En el tubo con papa
reacción más lenta en trozos y NaOH, la
y menos intensa. reacción fue débil
porque el ambiente
básico afectó la
Tabla 2 catalasa. En el tubo
con papa triturada y
HCl, la actividad fue
aún menor, ya que el
ácido desnaturalizó
la enzima. En ambos
casos, se produjeron
muy pocas burbujas,
 lo que mostró cómo
tanto el pH ácido
como el básico
inhibieron la acción
de las enzimas.
Berg, J. M., Tymoczko, J. L., & Stryer, L. (2015).
REFERENCIAS
1. https://riunet.upv.es/bitstream/handle/
10251/146362/Cardona%20-%20LOS
%20ENZIMAS.%20INTRODUCCI
%C3%93N%20A%20LA%20ENZIMOLOG
%C3%8DA..pdf?
sequence=1&isAllowed=y. (1)
Consultado el 18 de octubre de 2024.

2. CK-12 Foundation. “CK12-

Foundation”. Ck12.org,
https://flexbooks.ck12.org/cbook/ck-12-
conceptos-biologia/section/1.18/primary/
lesson/funci%C3%B3n-de-las-enzimas/. (2)
Consultado el 18 de octubre de 2024.
3. Berg, J. M., Tymoczko, J. L., & Stryer, L.
(2015).
4. Nelson, D. L., & Cox, M. M. (2017).
Lehninger Principles of Biochemistry (7th
ed.). W.H. Freeman.
5.