1. Definicin, clasificacin y nomenclatura de enzimas.

Especificidad. 2. Sitio activo y complejo enzima-sustrato. 3. Cintica y regulacin enzimtica. Coenzimas y grupos prostticos. 4. Inhibicin enzimtica. Clasificacin. 5. Factores que afectan la actividad de las enzimas. 6. Clasificacin y funcin de las vitaminas.

Definicin, clasificacin y nomenclatura de enzimas. Especificidad.

QUE ES UNA ENZIMA? Las enzimas son protenas de alto PM, sintetizados por los organismos vivos. Catalizadores biolgicos.
Aumentan la velocidad de reaccin: 108 -109

veces.

Eficiencia Especificidad Regulacin

CATALISIS
Ej: Oxidacin de azcares CATALIZADOR: Cualquier sustancia que aumenta la

velocidad de una reaccin consumida en la reaccin. 37o C y pH 7.0

qumica

sin

ser

SUSTRATO: Compuesto sobre el cual la enzima

acta. Ej: Protenas, lpidos, carbohidratos.

sustrato

Productos de la reaccin

enzima

Estructu ra globular

HCl \ Enzimas pH extremo Temperatura

Actividad biolgica

Inactiva

TEMPERATURA OPTIMA
ENZIMA TEMPERATURA OPTIMA 37 C Aprox. 100 C

MAMIFEROS BACTERIAS Y ALGAS BACTERIAS ARTICAS

Aprox. 0 C

Bacterias en una muestra de hielo.

NOMENCLATURA
La

mayora se denominan con la terminacin asa, basndose en el tipo de reaccin que catalizan y la identidad de los sustratos implicados. Histidina descarboxilasa, deshidrogenasa alcohol

Ej:

ureasa, oxidasas, quinasas, fosforilasas,

fosfatasas.

No.
1

CLASIFICACION
Clase
Oxidorreductasas

Tipo de reaccin que catalizan

Ejemplo
Deshidrogenasas Peroxidasa Oxidasas Oxigenasas Reductasas Kinasas Transaminasas Pirofosfatasa Tripsina Aldolasa (Sintasas) Descarboxilasa pirvica

De xido reduccin (transferencia de e-)

2 3

Transferasas Hidrolasas

Transferencia de un grupo intacto de tomos desde una molcula donadora a una receptora. Ruptura hidroltica de enlaces (participa el H2O ) Lisis de un substrato, generando un doble enlace, o Adicin de un substrato a un doble enlace de un 2o. substrato (Sintasa)

Liasas

Isomerasas

Interconversin ismeros.

Ligasas

diversos Mutasas Epimerasas Racemasas Formacin de enlaces C-C, C-S, C-O y C-N. Mediante Sintetasas reacciones de condensacin, acopladas a la ruptura del ATP

de

Oxidorreductasas: Catalizan reacciones de oxidacin-reduccin.

Transferasas: Catalizan la transferencia de grupos que contienen C, N o P.

Hidrolasas: Catalizan la ruptura de enlaces por la adicin de una molcula de agua.

Liasas: Catalizan la ruptura de enlaces C-C, C-S y C-N.

Isomerasas: Transforman un ismero de un compuesto qumico en otro.

Ligasas: Catalizan la formacin de enlaces C-C, C-S y C-N.

Que tipo de enzima cataliza cada una de las siguientes reacciones?

isomera sa
transamina sa

Lactato deshidrogenas a

isomera sa

hidrolas a

transferas a

Descarboxila sa liasas

Malato deshidrogenas a

Sintetas a ligasas

Medicina

Transaminasas

Industria Qumica Transformaci n de Alimentos Agricultura

Penicilina Fermentacio nes Quesos Vinos Rhyzobium

CARACTERISTICAS DE LAS ENZIMAS

Todas las enzimas son protenas globulares. Son inestables: Se desnaturalizan por temperaturas Proenzimas o zimgenos: Se activan cuando es necesario. Ej: enzimas digestivas (pepsina, carboxipeptidasa,

tripsina).

Activacin por hidrlisis de enlaces peptdicos especficos

GRUPO PROSTETICO
COFACTOR:
Componente

no proteico (ion metlico o molcula orgnica) necesario para el funcionamiento adecuado de la enzima.

COENZIMAS: Cofactores orgnicos

Baja actividad

Mxima

COENZIMAS

Adenosine Triphosphate (ATP)

Coenzyme A (CoA)

Nicotinamide Adenine Dinucleotide (NAD+)

Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate

Flavin Adenine Dinucleotide

ESPECIFICIDAD DE LAS ENZIMAS

Una enzima puede actuar sobre un sustrato

o un grupo de sustratos relacionados pero no sobre otros. Cada enzima reconoce un SUSTRATO. Ej: Sacarasa: hidroliza la sacarosa.

Lipasas: Hidrolizan los enlaces ster en los lpidos.

ESPECIFICIDAD ABSOLUTA
ureasa

urea

tiourea

biuret

ESPECIFICIDAD ESTEREOQUIMCA
Las enzimas son molculas quirales.

Ismero cis

ESPECIFICIDAD

GRUPAL: Son menos selectivas. Actan sobre molculas que tienen los mismos grupos funcionales.

quimotripsin a

carboxipeptid asa

Especificidad de la tripsina

Especificidad de la trombina, un factor de coagulacin.

Las reacciones enzimticas ocurren en dos etapas:

1.

2.

DIAGRAMA DE ENERGIA PARA EL PROGRESO DE UNA REACCION QUIMICA

A- - - -B

A+B

Sin enzima

Con enzima

AB

La conformacin espacial de la parte proteica

es la responsable de la funcin que realiza la enzima. al CENTRO ACTIVO, gracias a:

Las sustancias que van a reaccionar se unen Uniones electrostticas Enlaces de H Interacciones de Van der Waals.
enzima

sustrat o

CARACTERISTICAS DE LOS CENTROS ACTIVOS

1. El 2. 3. 4. 5.

centro activo es una porcin relativamente pequea de la enzima. El centro activo es una entidad tridimensional. Los sustratos se unen a los enzimas por fuerzas relativamente dbiles. Los centros activos son hoyos o hendiduras. La especificidad del enlace depende de la disposicin de los tomos del centro activo.

A C

Kd Kr

B +

V =Kd [A] V = Kr [B]

MENTEN
Propusieron

un modelo para definir la relacin cuantitativa entre la velocidad de una reaccin enzimtica y la concentracin de sustrato (caractersticas cinticas).

(1) (2) (3)

La Vmax se lograr cuando ES sea mximo: Reagrupando (1)

(4)

(5)
Sustituyendo Km,

(6)

Sustituyendo (6) en (3) queda:

(7)

Segn (2)

(8 )

Reordenando y resolviendo para Vo:

ECUACIN CINTICA DE MICHAELISMENTEN

Cintica y regulacin enzimtica.

[E] cte.

Representacin de la velocidad de reaccin, V, en funcin de la concentracin de sustrato [S] para un enzima que obedece la cintica de Michaelis-Menten

GRAFICA DE LINEWEAVERBURK

REPRESENTACION GRAFICA DE 1/V FRENTE A 1/[S]

Significado de los valores de KM y Vmax

KM = 10-1 - 10-6 M. KM tiene dos significados: 1.Concentracin de sustrato a la cual la

mitad de los centros activos estn ocupados. 2.Se relaciona con la constante de velocidad de las etapas individuales en el sistema cataltico representado por:

Si K 2 >> K 3,

La constante de disociacin del complejo [ES] es:

Entonces Km = KES

KM es la medida de la estabilidad de complejo enzima sustrato (ES): Una KM alta indica una unin

Km de algunas enzimas
ENZIMA Catalasa Hexoquinasa SUSTRATO H2O2 ATP D-Glucosa D-Fructosa Anhidrasa carbnica Quimotripsina -Galactosidasa Treonina deshidrogenasa K m (mM) 25.0 0.4 0.05 1.5 9.0 108.0 2.5 4.0 5.0

HCO3
Gliciltirosinilglicina N-Benzoiltirosinamida D-Lactosa L-Treonina

Vmax.
Es

la expresin de la eficiencia del funcionamiento enzimtico. Cuando la enzima esta completamente saturada por el sustrato. el nmero de recambio de una enzima: Moles de sustrato transformados en producto por mol de enzima por unidad de tiempo (min o seg.).

Revela

K3 = Constante de catlisis o Kcat

Nmeros de recambio mximos de algunos enzimas.

Fuente: Stryer,

ENZIMAS REGULADORAS
Controlan la velocidad de flujo de una va metablica determinada, catalizando una etapa crucial dentro de ella.
Enzimas alostricas Enzimas moduladas covalentemente Zimgenos Isoenzimas

ENZIMAS ALOSTERICAS
Un centro activo en una

molcula enzimtica puede afectar a otro centro activo de la misma molcula enzimtica (sitio alostrico).
Su

actividad puede alterarse por la presencia de molculas reguladoras (activadores o inhibidores) que estn ligadas a centros

ENZIMAS MODULADAS COVALENTEMENTE

Su actividad puede regularse a travs de la

unin covalente de ciertas molculas (grupos fosfato). Irreversible Catalizada por enzimas Hormonas

fosforilacin

ZIMOGENOS
Macromolculas

proteicas o enzimas inactivas que por hidrlisis de enlaces peptdicos especficos se convierten en enzimas catalticamente activas. Ej: Enzimas proteolticas se sintetizan en el pncreas como zimgenos y se activan en el tracto digestivo.

AGA Institute. Copyright 2010

ISOENZIMAS
Son enzimas que difieren en la secuencia

de aminocidos pero que catalizan la misma reaccin qumica. Suelen mostrar diferentes parmetros cinticos o propiedades de regulacin diferente.
Ej: lactato deshidrogenasa en el msculo

esqueltico y cardaco.

Inhibicin enzimtica.
Inhibidor

Sustancia que impide la actividad de una

enzima. Desnaturalizan las enzimas. No son especficos. Agentes qumicos: Hg+2, Pb+2, Ag+. Mecanismo de control en los sistemas biolgicos. Ej: Medicamentos y agentes txicos.

CLASIFICACIN
REVERSIBLE No destruye la enzima. Competitiva: Puede revertirse aumentando la [S]. No competitiva: No puede ser revertida por altas [S] Drogas sulfa usadas para combatir infecciones IRREVERSIBLE El inhibidor queda unido covalentemente a la enzima.
Hg+2, Pb+2, AsO4-3,

CN-. Penicilina Aspirina

INHIBICION COMPETITIVA
El inhibidor competitivo se asemeja al sustrato.
Sustrat o Inhibidor

Enzima Sin inhibidor

Enzima Con inhibidor

Inhibicin competitiva

INHIBICION NO COMPETITIVA
El inhibidor y el sustrato pueden unirse

simultneamente a una molcula de enzima. Sus sitios de unin no se solapan. Se forma un complejo [EIS], no productivo.
Acta

disminuyendo el nmero de recambio del enzima en vez de disminuir la proporcin de molculas enzimticas que se han ligado al sustrato.

sustrato inhibido r

Inhibicin no competitiva

Inhibicin competitiva

Inhibicin no competitiva

INHIBICION ACOMPETITIVA
Ocurre cuando un inhibidor se combina reversiblemente solo con [ES] para formar [ESI], lo que no forma producto. Se da en reacciones enzimticas con dos o ms sustratos.

INHIBICION IRREVERSIBLE
El inhibidor queda unido covalentemente a

la enzima o ligado tan fuertemente que su disociacin de la enzima es lenta. Venenos: arsenatos. Cianuro, fluoruro, sulfuros,

Ej:

Factores que afectan la actividad de las enzimas.

Temperatura pH Concentracin de enzima Concentracin de sustrato

TEMPERATURA

pH

Pepsina: 1.5-2.5

CONCENTRACION DE LA ENZIMA

CONCENTRACION DEL SUSTRATO

ENZIMA SATURADA