ESPECTROSCOPIA DE

RESONANCIA MAGNETICA
NUCLEAR (RMN)
MACARENA ROJAS POBLETE

Porqu estudiar RMN?

Elucidacin
Estructural

Estudio de procesos
dinmicos

Productos
Naturales

Cintica de Reacciones

Estudios
Sntesis Orgnica

Estructurales 3D

Procesos de Equilibrio
Control de Calidad

Protenas

Anlisis de origen de
alimentos

ADN complejos

Falsificacin de patentes

Polisacridos
Diseo de Drogas

Relacin estructura actividad

Medicina Diagnstico por
Imgenes

RAYOS GAMMA

RAYOS X

UV

VISIBLE

LONGITUD
DE ONDA

10

13

10

11

10

10

FRECUENCIA

10

21

10

19

10

17

10

15

UV

10
10

13

INFRARROJO

10
10

IR

Grupos funcionales

11

10
10

10

MICROONDAS

ONDAS DE RA

10

10

10

10

10

10

10

10

RMN
Ncleos individuales

Como en otros mtodos

espectroscpicos
El fenmeno de RMN consiste en la
absorcin de energa de radiacin
electromagntica por parte de ncleos
que tienen un momento magntico
La absorcin ocurre a frecuencias
caractersticas que dependen del tipo
de ncleo (1H, 13C, 31P, etc) y del
entorno molecular en que se
encuentra.

A diferencia de otras
espectroscopas.
El fenmeno solo se manifiesta en
presencia de un campo magntico que
diferencia en trminos de energa a las
posibles orientaciones del momento
magntico nuclear.
Las cantidades de energa involucradas
son extremadamente pequeas y solo
son medibles cuando el campo
magntico es muy intenso. La
radiacin electromagntica utilizada
corresponde a las ondas de radio.

Qu observamos en RMN?
Espectroscopi
a

Origen

Informacin

UV - Visible

Transiciones
electrnicas

Cromforos

IR

Transiciones
vibracionales

Grupos
funcionales

Espectrometr
a de Masa

Ionizacin y
fragmentaci
n de
molculas

Relacin m/z
de
fragmentos

RMN

Ncleos
Atmicos

tomos
individuales
(entorno)

Origen del fenmeno de RMN

La imagen clsica de un
ncleo es de una esfera
cargada rotando sobre un
eje

Todo ncleo atmico

posee un momento
angular intrnseco P y un
momento magntico
asociado

Ambos momentos son

magnitudes
vectoriales

De acuerdo a la mecnica cuntica el

momento angular P est cuantizado:

P=

I (I + 1) h

I = nmero cuntico de spin o simplemente

SPIN
I representa el spin total del ncleo, es
mltiplo de y sus valores van de 0 a 6.
Si el n de masa (A) es impar I = n/2 con n
: impar
Si A es par y Z es impar I = n
Si A y Z son pares, I = 0

Si I = 0 el ncleo no tendr momento

magntico y no ser observable por RMN
Dos de los ncleos ms importantes en qumica
orgnica, 12C y 16O tienen I = 0

Los ncleos con I = son dipolos magnticos

Los ncleos con I > no presentan simetra esfrica
de carga

Ncleos cuadrupolares

Presentan mayores dificultades para su observacin

por RMN

Ncleo

Abundancia Natural

99.985 %

1/2

0.015 %

12

98.9 %

13

1.1 %

1/2

14

99.63 %

15

0.37 %

1/2

16

99.76 %

17

0.04 %

5/2

18

0.2 %

100 %

1/2

31

En ausencia de un campo
magntico externo, los de
los distintos ncleos pueden
asumir cualquier direccin
(como un imn)
Al colocar un ncleo con
momento angular P y
momento magntico en
un campo magntico
externo, el momento
angular se alinear
respecto al campo externo,
con un leve exceso
alineado a favor del
campo.

B0

Espin Nuclear
N

En ausencia de un
campo magntico los
espines nucleares no
tienen orientacin
N

N
S

Espin Nuclear
Ubicados en un campo
magntico,
los
espines
nucleares
se alinean en la
direccin del eje del campo
magntico aplicado.
La figura es una aproximacin
no correcta: El comportamiento
mecnico cuntico permite solo
algunas orientaciones discretas.

N
S

S
S
S

N
N
N
N
N

El

Bo

nmero de orientaciones
posibles es determinado por el
Nmero Cuantico de espin I

Espin Nuclear
No

todos los nucleos se alinean

paralelamente
El nmero de ncleos con
orientaciones
paralelas
y
antiparalelas es descrita por la
ecuacion de Boltzmann :

N
S
S
S

Nm = N o

N
N
N

N
N
N
N
N
S
S
S
S

Bo

-Em / kT

e
Nm
No
Em
k
T

-Em m / kT

: nmero de espines en el estado p m

: nmero total de espines
: energa del estado m
: constante de Boltzmann
: temperatura

Espin Nuclear
Cul

es la diferencia entre
espines
paralelos
y
antiparalelos?

N
S
S
S

- N- = No DE /2kT

considerando:

Bo = 1 Tesla

(43MHz)

No = 2.000.000

N+ = 1.000.001

N- = 999.999

N
N
N

N
N
N
N
N
S
S
S
S

N+

Bo

Espin Nuclear
m=-1/2

N
N
N
N
N
N

S
S
S

N
N
N

S
S
S
S

E = h Bo

Bo
Bo

m=1/2

Los niveles de energia se llaman

niveles de Zeeman

Para un ncleo de I =

Dos estados energticos posibles: a favor o en contra del

campo Bo

Bo > 0
Bo = 0

E = h

La energa necesaria para pasar de un estado de

spin al otro est determinada por la siguiente
ecuacin:

E = h = h B0 / 2

0 = B0 / 2 ECUACIN DE LARMOR
0 = frecuencia de Larmor
Para imanes de campo magntico entre 2.35 y 18.6
Tesla, 0 se encontrar en el rango de 100 a 800 MHz, es
decir corresponder a una frecuencia de radio
rayos rayos x UV VIS

10-10

10-8

IR

-ondas radio

10-6 10-4
10-2
100
longitud de onda (cm)

102

En una molcula, cada ncleo magnticamente activo

tiene una frecuencia de Larmor definida y
caracterstica, es decir absorber radiacin
electromagntica de una frecuencia determinada para
cambiar de estado de spin.

E aumenta con B0
1 milln - 64

An as, el
exceso de
poblacin
con el que
se trabaja
es muy
pequeo

1 milln - 32

1 milln -8
2 millones

= 16

= 64

= 128

1 milln + 8

1 milln + 32

1 milln + 64

B0 (Tesla)

0T

2.35 T

9.4 T

(100 MHz) (400 MHz)

18.8 T
(800 MHz)

Frente a un campo magntico los niveles de Zeeman se desdoblan

de acuerdo a :
1
Hdesdoblamiento
E

El tipo de ncleo
Fuerza del campo magntico

13

Cdesdoblamiento
campo

1H tiene una ms alta frecuencia que 13C para la misma

fuerza de campo
1H es ms sensible que 13C a la misma fuerza de campo

400MHz = 9.395 T
(tesla)
= 9.395*104 G
(gauss)

Basics of NMR Spectroscopy

Nmero Cuntico de Espn 0
ncleos magnticamente activos

e.g. 1H,

13

C,

15

N,

19

F,

31

(I =

1/2)
Se observan a diferentes frecuencias
(separadas )
detecta un ncleo a la vez
N
19
F
15

13

31
1

Que se observa ?

Niveles de diferente energia tienen E

diferentes poblaciones

A
p 0

Poblacion en equilibrio (A)

Cuando se aplica un pulso de
radiofrecuencias se altera el sistema: E

Poblacion fuera del equilibrio (B)

Lo que se observa es el regreso de

las poblaciones a su estado de
equilibrio :
B A

B
p 0

Magnetizacin macroscpica de los

espines nucleares

m=-1/2

m=+1/2
E

Mo

Bo

Bo

Mo

Bo

Mo

B1

Bo

z
x

B1 off

B1

i
Transmitter coil (y)

(fuera de resonancia) y

Mxy

Mo

equilibrio..

x
y

o
y

Mxy

FID
En una muestra real se tienen muchos sistemas de espin con
diferentes frecuencias de resonancia a un campo B1
determinado (or carrier frequency). Puesto que el pulso
usado excita efectivamente todas las frecuencias en una
muestra, la combinacion de todas ellas es recibida en conjunto
FID (Free Induction Decay)):

0
t1

0.10

0.20

0.30

0.40

0.50

0.60

La FT de sta seal entrega el espectro de RMN

0.70

0.80

0.90

1.00
sec

Informacin
obtenida

Sample: Strychnine
Solvent: CDCl3
Spectrometer: AVANCE 400
Probehead: Inverse Broadband
with z-Gradients
Experiment: Conventional 1H
spectrum

Pulse program: zg30 (

Pulse Diagram)
Experiment Time: 50 seconds
Details: AVANCE Tutorial
Acquisition: Advanced use

COSY

-C-C--

13

H H

C- C - C - N - C

HSQC

HMBC

H H H

C-C-C-N-C-C-

Resumen
Los

nucleos poseen un espin que genera un campo

magnetico.
Debido al momento magntico el nucleo puede
orientarse frente a un campo magnetico generando
un
magnetizacion
llamada
magnetizacin
macroscopica (en z).
Esta magnetizacin puede ser perturbada por
pulsos de radiofrecuencias, creando un vector
magnetizacion en el plano x, y.
La magnetizacion rota en el plano x,y, induciendo
un voltage en el receiver coil!.
La seal inducida es procesada por FT (Fourier
transformation)

Para cada tipo de ncleo la frecuencia de

Larmor puede sufrir pequeas variaciones que
dependen del entorno molecular:

Los electrones de los

alrededores producen
pequeos campos
magnticos que se
agregan a B0
Los ncleos de los
alrededores con
momento magntico
dan lugar a
desplazamientos
simtricos de las
frecuencias

Desplazamiento
Qumico (ppm de
la frecuencia)

Acoplamiento
spin-spin: J (Hz)

Qu informacin se puede obtener de un

espectro RMN 11H?
Nmero de seales: relacionada con
nmero de 1H diferentes de la muestra

el

Frecuencia de las seales () : relacionada

con el entorno molecular del ncleo.
rea de las seales (integral): relacionada
con la cantidad de cada tipo de 1H.
Multiplicidad de cada seal: relacionada con
el nmero de 1H vecinos de cada tipo.
Constantes de acoplamiento
informacin estereoqumica.

(J):

brinda

Intercambio de 1H : indica la presencia de

cierto tipo de grupos funcionales (-COOH, -OH,
-NH2)

Apantallamiento en protones
Los protones en distintos entornos qumicos estn apantallados en
distintas cantidades. El protn hidroxilo no est tan apantallado como
los protones metilo, por lo que el protn hidroxilo absorbe a un campo
ms bajo que los protones metilo. Decimos que el protn est algo
desapantallado
por
la
presencia
de
tomos
de
oxgeno
electronegativos.

Cuando los protones se encuentran en distintos entornos de la

molcula y la molcula est expuesta a una frecuencia constante, los
protones absorbern la radiacin a distintas intensidades del campo
magntico. La RMN variar el campo magntico y representar un
grfico de la absorcin de energa como funcin de la intensidad del
campo magntico.

Los protones de metilo ms apantallados aparecen hacia la derecha del espectro

(campo ms alto); el protn hidroxilo menos apantallado aparece hacia la
izquierda (campo ms bajo).

En un espectro RMN el campo magntico aumenta desde la izquierda hacia la

derecha. Las seales del lado de la derecha estn en la parte ms alta del
espectro y las de la izquierda estn en la parte ms baja. Los protones
apantallado aparecen en la parte alta.

Escala delta () RMN.

Utilizacin de la escala con espectrmetros de 60 y 300
MHz. El desplazamiento del TMS se define como 0. La escala
aumenta de derecha a izquierda (hacia el campo ms bajo).
Cada unidad se diferencia 1 ppm del TMS: 60 Hz a 60 MHz
y 300 Hz a 300 MHz.

El desplazamiento qumico de los protones se mide en partes pos milln (ppm),

independientemente del campo y la frecuencia del instrumento utilizado. Cuanto
ms altas son las frecuencias des espectrmetro, ms detallado es el espectro

Espectro de RMN del metanol

Los protones metilo absorben a = 3.4 ppm y los protones
hidroxilo absorben a = 4.8 ppm.

Los tres protones metilo son equivalentes, por lo que producirn slo una seal.

Valores de algunos desplazamientos qumicos

Los alcanos absorben
en el campo alto
(hacia la derecha) del
espectro.
Los
carbonos
hbridos
sp2
absorben hacia la
izquierda
de
los
alcanos as como los
haluros de alquilo.
Los protones de
benceno se pueden
encontrar centrados
alrededor de 7.2 ppm
(campo bajo).
Los
cidos
carboxlicos y los
aldehdos
estn
aproximadamente
entre 9-12 ppm.

constantes de acoplamiento: J (Hz)

integrales

frecuencia
()
triplete

multiplete

triplete

Multiplicidad de seales

Integracin
Como

se ha observado en los ejemplos no todas

las lneas tienen igual altura.

La

razn es que la intensidad de una lnea

(peak) est determinada por el nmero de
protones contribuyentes.

En

trminos prcticos se puede decir que la

seal
de
la
intensidad
relativa
es
proporcional al rea bajo el peak.

Esta

rea se determina por un proceso llamado

Integracin.

Ia

: Integral de Ha

Ib

: Integral de Hb

Ib

NPA : N protones en Ha
NPB : N protones en Hb

Ia

10

ppm

Normalmente es conocido (NPA+NPB), el nmero total de

protones en una formula molecular. En consecuencia se puede
aplicar,
NPA NPB NPA NPB

Ia Ib
Ia
Ib

Desdoblamiento Spin-Spin (Spin-Spin

Splitting)
En

la mayora de los espectros NMR las seales

aparecen desdobladas.

No

aparecen seales nicas como se ha observado

hasta ahora.
El desdoblamiento en un espectro de NMR
aparece por el efecto de protones vecinos
sobre los protones que componen una seal.

Ejemplo:

CH3CH2Br
quartet

triplet

7 Hz
7 Hz

10

ppm

Reglas de desdoblamiento
Si

existen n protones equivalentes en posiciones

adyacentes, la seal de un protn, en un espectro
NMR, se vera desdoblada en n+1 lneas.
En el ejemplo, se dice que CH3 y CH2 estn
acoplados.
El

espacio entre las lneas de una seal, medido en

Hz, se conoce como J, constante de acoplamiento.
Dos protones acoplados tienen la misma J.

El

desplazamiento
qumico
de
una
desdoblada se mide en el centro de la seal.

La

seal

intensidad de las lneas de una seal

desdoblada, sigue un esquema bien definido
entregado por el llamado tringulo de Pascal.

Triangulo de Pascal
Toda fila
empieza con 1

1
1
1

1
1

1 + 3 + 3
1

Toda fila
termina con 1

Los nmeros en el interior corresponden

a la suma de los predecesores

Las intensidades de las lneas cambian a medida que

los se asemejan, este fenmeno se conoce como
leaning.

Bases

fsicas del desdoblamiento

Una

molcula como R2CHa-CHbR2 tiene

dos protones adyacentes los que se
acoplan en el espectro NMR.
En un campo aplicado Ho, Se observa la
contribucin de spin del protn vecino:
Hs. Para el protn a, el campo que sufre
el protn a (Hp) es:
Hp

= Ho + Hs (Spin del protn b = + )

Hp

= Ho Hs (Spin del protn b = - )

Hs = +1/2

Hs = -1/2

Ho = Hp + Hs

Ho = Hp - Hs

Hp = campo en el protn a requerido

para absorcin.
2 Hs

Como

ejemplo
molcula,

se
H4

O2N

La

puede

mostrar

la

H3
N

Br

cual
presenta
dos
independientes interactuando,

protones

H4
O2N

H3
N

+1/2 - 1/2
J

H4

H3

Br

+ 1/2
- 1/2

- 1/2

+ 1/2

+ 1/2
H3 H4

- 1/2

se conoce como la constante de acoplamiento y es

independiente del campo aplicado. Ntese que para el
ejemplo anterior J para los dos grupos de seales es idntica,
J se mide en Hz aunque algunas veces se expresa en ppm.

 Modelo

para explicar el acoplamiento:

Cmo la influencia de un estado magntico se

transmite a un protn vecino?
Antecedentes
Los

espnes nucleares y electrnicos tienden a estar

pareados (tienen spines opuestos).
Los dos electrones de enlace entre los tomos (A y
B, carbonos vecinos) tienen tambin espines
opuestos.
Estos electrones tienden a estar en un momento
junto a un tomo (A) y luego junto al otro (B).
Los dos electrones cercanos al carbono en enlaces
diferentes tienden a ser paralelos (igual spin)

e-spins paralelos
H-spins opuestos

H y e-spins opuestos
H

e-spins opuestos

e-spins paralelos

e-spins opuestos

Como

el spin nuclear de los H`s es antiparalelo, se

dice que J > 0 (definicin)
Protones vecinales,
J < 0 Los spines
nucleares de los protones
son paralelos.
El nmero de lneas bajo
cada protn viene dado
por,

S 2n I 1

n = nmero de hidrgenos vecinales

I = spin nuclear (1/2 para H)

e-spins opuestos
H-spins paralelos
H

e-spins paralelos

En

consecuencia, se presenta el siguiente arbol de

desdoblamiento o malla de desdoblamiento para
CClHAHB-CHCCl2 .
Ha Cl
Hc

Cl

Cl
Hb Hc

Jcb
Jca

Jca

Ha,b
Jac
Jcb

b
Jbb`
Jbb`

Chemical schifts de b y b`
son muy prximos, pero para
efectos de claridad se
representan separados

b`
Jbb`
Jbb`

Representacin
no a escala
Jba

Jba

Jb`d
Jb`d

Jba
proyeccin de b`
proyeccin de b
representacin prxima

superposicin de seales
a

d
b

Jba

Jb`d