TUBERCULOSI

S PULMONAR
Y
EXTRAPULMO
NAR
Laboratorio de
Salud Pública
MONICA ISABEL PRADO P.
PROFESIONAL UNIVERSITARIO
LUZ ARGENIS QUILINDO S.
CONTRATISTA LSP
PROGRAMA TB Y LEPRA PROGRAMA TB Y LEPRA
BIOSEGURIDAD

Es la aplicación de una combinación de: controles

administrativos, principios de contención, prácticas y
procedimientos de laboratorio, equipos de seguridad,
preparación para emergencias e instalaciones de
laboratorio que permitan a los trabajadores trabajar con
seguridad ante los microorganismos potencialmente
infecciosos

Los laboratorios deben identificar los riesgos en cada una

de las fases de los procesos y definir las prácticas que se
aplicarán para minimizarlos.
 IMPORTANCIA DE LA
BIOSEGURIDAD
• Cumplir con la normas de previene que el personal se
infecte con TB
• Previene la salida del microorganismo al medio
ambiente.
• El uso de equipos no remplaza las buenas practicas de
laboratorio.
• Siempre se debe usar equipo de protección personal
cuando se manipulen muestras clínicas de pacientes o
cultivos.
CLASIFICACION DE LOS
LABORATORIOS DE TB
Nivel de riesgo Actividades del laboratorio Evaluación del riesgo

Baciloscopia directa del esputo;

preparación de muestras para utilizarlas Bajo riesgo de generación de
aerosoles infecciosos a partir
Bajo en un cartucho de prueba automatizada
de amplificación de ácidos nucleicos de las muestras; baja
concentración
(ensayo Xpert MTB/RIF), Inoculación en
de partículas infecciosas
medio L.J.

Riesgo moderado de
Tratamiento y concentración de
muestras para la inoculación en medios generación de aerosoles
Moderado infecciosos a partir de las
de cultivo primarios; PSF (ensayos de
muestras; baja concentración
sonda en línea en muestras) de partículas infecciosas

Manipulación de cultivos para

Alto Alto riesgo de generación de
identificación; Prueba de Susceptibilidad a
(laboratorio de Fármacos aerosoles infecciosos a partir
contención de de cultivos; alta concentración
o ensayos de sonda en línea a partir de
tuberculosis) aislamientos. de partículas infecciosas
RESPIRADORES
• Deben utilizarse respiradores N95 (norma de los
EE.UU. NIOSH N95) o FFP2 (norma europea
EN149:2001).
• Son ligeros y desechables, cubren la nariz y la boca y
filtran el 94%–95% de las partículas de ≥ 0,3–0,4 µm
• Los respiradores deben quedar ajustados al rostro.
DIAGNOSTICO
DE
TUBERCULOSI
S POR
BACILOSCOPIA
 TUBERCULOSIS
GENERALIDADES:
Es una enfermedad infecciosa, causada por diversas
especies del género Mycobacterium, La más importante y
representativa, causante de Tuberculosis es el Mycobacterium
tuberculosis o bacilo de Koch
CLASIFICACION:
Clínicamente la tuberculosis se puede manifestar por signos
y síntomas pulmonares o extrapulmonares. De acuerdo a
esto se clasifica en:
• Tuberculosis pulmonar: sistema respiratorio
• Tuberculosis extrapulmonar: T. meníngea, T. ocular, T.
cardiovascular, T. del sistema nervioso central, T.
genitourinaria, T. ganglionar, T. osteoarticular, T. milliar.
 TUBERCULOSIS
SIGNOS Y SÍNTOMAS:
• Fiebre y sudoración nocturna
• Pérdida de peso.
• Tos con flema por mas de 15 días, a veces con sangre en
el esputo

TRANSMISION:
• La transmisión de la tuberculosis solo puede
realizarse por personas que tengan activa la
enfermedad
• La TB se transmite a través de partículas expelidas por el
paciente bacilífero.
TOMA DE MUESTRAS DE
ESPUTO – recipiente

De boca ancha
(alrededor de 5
cm de diámetro)
Cierre
hermético con
tapar rosca.

Capacidad de 30
a 50 ml
De material
plástico
desechable,
transparente y
resistente

Paredes
fáciles
de
rotular
TOMA DE MUESTRAS DE
ESPUTO – recolección
En el momento en que el paciente se despierta, lo
cual aumenta la positividad del diagnóstico

Primera muestra cuando se detecta al SR, en el

momento de la consulta. Segunda al despertar al día
siguiente. Tercera en el momento de entregar la
segunda muestra.

A las personas que viven en áreas de difícil acceso,

se les debe recoger las tres muestras de esputo el
mismo día, tratando que hayan intervalos de tiempo
de por lo menos treinta minutos.

En los laboratorios no debe haber horario para la

recepción
TOMA DE MUESTRA

Volumen de la muestra:
• La persona debe expectorar tres veces en el
recipiente para lograr obtener un buen
volumen y una cantidad representativa
• 3- 5 mililitros, se deben tomar tres muestra
Conservación:
• La muestra de esputo se debe procesar
inmediatamente
• En caso contrario, ésta puede ser conservada
a 4°C hasta por 24 horas
• Conserve las muestras protegidas de la luz
directa
 TOMA DE LA MUESTRA –
esputo inducido
El procedimiento se debe realizar en un sitio con buena
ventilación por personal entrenado para esto, se deben usar
respiradores N 95 – N 100 desechables
Volumen de la muestra:
• Se deben obtener muestras seriadas durante
tres días consecutivos
Conservación:
• La muestra de esputo se debe procesar
inmediatamente
• En caso contrario, ésta puede ser conservada a
4°C hasta por 24 horas
• Conserve las muestras protegidas de la luz
directa
REALIZACION DEL
EXTENDIDO
• Lavarse las manos
• Colocarse la bata (de manga larga y con botones) y
guantes (doble guante)
• Ubicar en la mesa, bandeja o papel humedecido con
hipoclorito de sodio al 1%
• Dejar sólo lo necesario para realizar el extendido
• Seleccionar la partícula útil (Mucoide, mucopurulenta)
• Extender homogéneamente suficiente cantidad de la
partícula útil, sin exceso en un pequeño ovalo centrado
en el portaobjetos 2cm

(2cm x 2cm o 2cm x 1 cm)

1cm
COLORACION DE ZIELH
NEELSEN
PASOS ZIELH NEELSEN
Coloración principal Fuscina
5 min

Decoloración Alcohol acido

3 min
Coloración de contraste Azul de metileno
1 min
LECTURA DE BACILOSCOPIA
El objetivo es determinar si en el extendido hay
BAAR y si los hay cuantificar aproximadamente el
numero de Bacilos
INFORME DE RESULTADOS
La siguiente es la escala adoptada internacionalmente para el informe de los resultados
de extendidos examinados por la técnica de Ziehl Neelsen:
HALLAZGO DE MENOS DE 9
BAAR
Debido a que pueden ser artefactos de coloración, se
recomienda:
• Ampliar la lectura a 200 campos.
• Si con esa lectura no se encuentran más bacilos, hacer
otro extendido de la misma muestra, tratando de
elegir partículas purulentas.
• Si la lectura del segundo extendido no modifica el
resultado del anterior la muestra debe informarse
con el número exacto de bacilos observados y solicitar
una nueva muestra.
• Siempre se deben cultivar estas muestras
ERRORES EN LA COLORACION
CONTROL DE CALIDAD
INTERNO DE LA COLORACION
Utilizar muestras positivas y negativas inactivadas con 10 gotas de
hipoclorito al 1% , Durante una hora para preparar con ellas
extendidos necesarios, para que puedan ser utilizados durante dos
meses
Controlar la calidad Si se realizan más de Si se realizan menos
de cada nuevo lote 10 baciloscopias por de 10 baciloscopias
de colorantes día, se debe hacer el por día se debe
control una vez por hacer el control
semana diariamente.

Generar un registro interno que contenga la información de la lectura

obtenida en la muestra de esputo que se guardó como control, esto
con el fin de monitorear la calidad y conservación de las láminas
verificando que la cuantificación de bacilos coincida con la
inicialmente asignada
DIAGNOSTICO
DE
TUBERCULOSI
S POR CULTIVO
 IMPORTANCIA DEL CULTIVO
• Es el método de diagnóstico bacteriológico de
tuberculosis y micobacteriosis de mayor
sensibilidad.
• En la TB pulmonar permite captar mas pacientes
de los que podrían captar por baciloscopia.
• En la tuberculosis extrapulmonar es el mejor
método de diagnóstico.
• Permite detectar los casos antes que lleguen a ser
infecciosos (diagnóstico temprano).
• Es posible incrementar la detección de casos en
15 - 20%.
• Tiene 100% especificidad
IMPORTANCIA DEL CULTIVO
• Permite poner en evidencia
bacilos viables presentes en
escasa cantidad en una
muestra, identificarlos y conocer
si es sensible o resistente a
fármacos antituberculosos.
• Método de referencia con el que
se debe comparar todo nuevo
método diagnóstico para TB
• Puede evidenciar de 10 a 100
BAAR en una muestra.
DIAGNOSTICO POR CULTIVO

●
Procesar lo antes posible ,esta puede ser conservada a

MUESTRA ●

●
4° C hasta por 24 horas.
Neutralizar (orina , aspirado gástrico) con fosfato trisodico
Proteger de la luz directa

DESCONTA ●

●
Flora contaminante puede impedir el desarrollo del bacilo.
Tiempo de descontaminación estricto dependiendo del
método empleado.
MINACION ●
30-60% de los bacilos mueren

INCUBACIO ●

●
Temperatura ideal 37 °C aunque varia con otras especies de Micobacterias.
No crece por debajo de 34 °C
Muere por encima de los 40 °C
Como el proceso es prolongado, sé debe realizar en tubos de vidrio para

N MTB
●

evitar la desecación
MEDIOS DE CULTIVO PARA
DIAGNOSTICO

Caldo
CARACTERISTICAS OK LJ STG Middlebrook
7H9

pH 6.4 6.8 6.4 7.0

Glutamato
Fuente de carbono L-asparagina Piruvato de sodio OADC
de sodio

Método de Técnica de
Método de Técnica de N-acetil Lcisteina
petroff Kudoh
descontaminación Kudoh NaOH
modificado

Tiempo de desarrollo 20 – 30 días 20 – 30 días 20– 30 días 12 días

Sensibilidad 60-80% 60-80% 60-80% 70%-95%

INDICACIONES DEL CULTIVO
CIRCULAR 0058 DE 2009 – Protocolo de Vigilancia y
control de TB Sivigila)
• En caso de que las dos baciloscopias iniciales sean
negativas, se deberá cultivar la segunda muestra de
esputo.
• Todas las muestras de origen extrapulmonar (L J)
• Para diagnóstico de TB infantil.
• Poblaciones de alto riesgo (personal de salud, población
indígena, personas privadas de la libertad, habitante de
calle, pacientes inmunosuprimidos, entre otros).
• Todo paciente que haya sido diagnosticado por
cultivo.
INDICACION PARA REALIZAR
CULTIVO Y PRUEBAS DE SENS.
• Todos los casos sospechosos de ser resistentes a los
fármacos antiTB.
• Las muestras de los pacientes con diagnóstico de
VIH.
• Contactos de un caso índice de TB resistente o
multirresistente.
• Pacientes en tratamiento cuya baciloscopia de control de
segundo mes sea positiva.
• Pacientes de reingreso por abandono, recaída y fracaso.
TOMA DE MUESTRA
LAVADO GASTRICO
El procedimiento se debe realizar en un sitio de
toma de muestras con buena ventilación por
personal entrenado para esto. Se debe
hospitalizar la persona de 24 a 72 horas.

La toma de la muestra se hace antes que el

paciente despierte (para que no inicie
peristaltismo

Agregar a un tubo de centrifuga de 50 mililitros, que

contiene FTS al 10% (proporción de 2 ml FTS por cada 10
ml de muestra), para permitir la neutralización del pH
ácido del contenido gástrico, pues afecta la viabilidad de
las Micobacterias

Tubo de centrifuga, plástico de 50 mililitros y

con cierre hermético.
TOMA DE MUESTRA LAVADO
GASTRICO
Volumen de la muestra:
• La cantidad mínima recuperada debe ser de
20 ml.
• Se debe obtener muestras seriadas durante
tres días consecutivos, con el fin de aumentar
la posibilidad diagnóstica
Conservación:
• La muestra se debe procesar
inmediatamente.
• En caso contrario, ésta puede ser conservada
a 4°C hasta por 24 horas
• Conserve las muestras protegidas de la luz
TOMA DE MUESTRA
BIOPSIA PULMONAR
Recolección Muestras TB Pulmonar
Volumen de
Muestra Recipiente Recolección muestra Conservación
requerido

La biopsia debe
ser conservada a
Recipiente estéril 4°C y transportada
con tapa de Las biopsias deben en solución salina
Biopsia cierre hermético
pulmon que contenga ser tomadas por No aplica o agua destilada
ar solución salina o médico estéril fresca.
agua destilada especialista Enviar al
laboratorio
estéril fresca protegidos de la
luz directa.
TOMA DE MUESTRA LAVADO
O CEPILLADO BRONQUIAL

Obtenida mediante fibrobroncoscopia

Se utiliza xilocaina en aerosol en la región faríngea sin instilar en el

árbol bronquial ya que puede afectar la viabilidad de las
micobacterias

Aplique 100 ml de solución salina estéril en alicuotas de 20ml y

recolecte separadamente el lavado bronquial del broncoalveolar,
Procesar
se espera obtener una recuperación de 20 a 30 ml del lavado
inmediatamente
LIQUIDOS ESTERILES
• LCR, PLEURAL, PERICARDICO, ASCITICO Y SINOVIAL
ENVASE: Tubo estéril con tapa de cierre hermético
TOMA DE MUESTRA:
• Recolecte la totalidad del liquido extraído
• Reciba la muestra sobre oxalato de sodio a una
concentración
de 1mg/ml, EXCEPTO EL LIQUIDO
CEFALORRAQUIDEO
CONSERVACION: Los líquidos destinados para
cultivo se deben procesar inmediatamente
PROCEDIMIENTO PARA CULTIVO
DE ESPUTO – LOWENSTEIN J.
REPORTE DE CULTIVOS EN
MEDIO SOLIDO
Muestra Tiempo de reporte

4 semanas se informa, se incuba hasta las 8

Esputo
semanas

4 semanas se informa, se incuba hasta las 8

Líquidos
semanas

4 semanas se informa, se incuba hasta las 8

Biopsias
semanas, se requiere incubadora a 32°C

Se deben revisar de forma semanal para optimizar

el reporte y envió para pruebas de sensibilidad
MEDIOS DE CULTIVO PARA
MICOBACTERIAS
MEDIOS DE CULTIVO
• LJ, se utiliza para muestras de difícil obtención, jugo gástrico,
lavado bronquial y en todas las muestras extrapulmonares, el
jugo gástrico se siembra en LJ ya que esta muestra es de
carácter acido y los bacilos no crecen en medios como el OK
(medio acido).
Las muestras extrapulmonares nunca se deben sembrar
en
medio acido, ya que contienen pocos bacilos.
• MGIT, es un medio liquido para diagnostico de tuberculosis y
micobacteriosis, además sirve para realizar pruebas de
sensibilidad de M. tuberculosis a los fármacos
antituberculosos de primera y segunda línea.
 PRUEBAS DE
SENSIBILIDAD
 PRUEBAS DE SENSIBILIDAD A
LOS FARMACOS
Las PSF de Mycobacterium
tuberculosis a los fármacos
antituberculosos tienen tres
propósitos:
Pueden ser utilizadas como guía
para elegir un tratamiento adecuado.
Confirman la aparición de
resistencia cuando el paciente no
presenta una respuesta satisfactoria
al tratamiento.
Pueden estimar la prevalencia de
resistencia dentro de la comunidad.
TECNICAS UTILIZADAS EN
COLOMBIA
Xpert MTB/RIF LIPA Anyplex MGIT
PCR de punto final
Fundamento PCR en tiempo real PCR en tiempo real, Cultivo en medio líquido
(cualitativa) que
(cuantitativa) detecta los productos basada en el análisis de automatizado, que
de amplificación temperaturas de fusión permite detectar la
mediante hibridación viabilidad de M.
reversa tuberculosis expuesto a
los fármacos
Aplicación Detección del Detección del complejo Detección del complejo Detección de todas las
complejo M. M. tuberculosis y su M. tuberculosis y su micobacterias en cultivo
tuberculosis y su resistencia a H, R, resistencia a H, R, y PSF de M.
resistencia a R inyectables y FQN inyectables y FQN tuberculosis a fármacos
Identificación de otras de primera y segunda
micobacterias línea
Sensibilidad para Mayor que la Bk y Alta con muestras Bk +
detectar el bacilo menor que el y limitada con muestras Alta con muestras de Máxima, detecta más
de la TB cultivo Bk- esputo, cultivo, tejido casos que el cultivo
fresco, o lavados convencional en LJ
broncos alveolares de
pacientes sintomáticos

Tiempo de emisión
En el día (la 2 días
de resultados 1 día Entre 4 y 6 semanas
prueba se demora
2 horas) Alto
Nivel de
Bajo Alto Alto
bioseguridad
DIAGNOSTICO
POR PRUEBAS
MOLECULARE
S
Xpert® MTB/RIF
Aspectos a tener en cuenta
• Es más sensible que la baciloscopia pero no mas
que el cultivo, siempre debe ir acompañada de
cultivo.
• El cartucho Xpert® MTB/RIF Ultra es mas sensible
que el Xpert® MTB/RIF, especialmente con
muestras que contienen escasos bacilos, pero, a la
vez, es menos específico.
• No existe evidencia suficiente para usar este
método con heces, sangre ni orina.
• Para diagnosticar TB pleural es mejor utilizar biopsia
y no líquido.
• Muestras sanguinolentas o xantocrómicas de LCR
pueden generar falsos negativos.
Xpert® MTB/RIF
 Genotype®
Aspectos a tener en cuenta
• Investiga las mutaciones mas frecuentes, pero no
todas las que pueden ocurrir. Tiene mayor
sensibilidad para R que para las otras drogas.
• Genotype® Sl V2 investiga mutaciones que pueden
generar resistencia cruzada entre FQN y entre
inyectables. No determina sensibilidad a cada droga
individualmente.
• Este método puede detectar un cepa
heterorresistente o diferentes cepas en una muestra
con diferentes patrones de resistencia, un método
fenotípico puede o no detectarla dependiendo de la
proporción de clones mutados que haya en la
muestra investigada.
 DIAGNOSTICO, PRUEBAS
MOLECULARES

• Una de las limitaciones de las pruebas

moleculares es que no diferencian bacilos
muertos de bacilos vivos, lo que podría llevar
a falsos positivos por tanto el control se debe
realizar por medio del cultivo, cuando el
diagnostico se ha realizado por cultivo.
 FORMATOS
DEL
PROGRAMA DE
TUBERCULOSI
S
FORMATOS DEL PROGRAMA
DE TUBERCULOSIS
1. Formato de Evaluación Externa del desempeño
indirecta (EEDI) de baciloscopia de tuberculosis.

2. Formato Único de Vigilancia de las Micobacterias

3. Libro de Registro Diario de Baciloscopia y Cultivos

(medio magnético).
CONTROL DE CALIDAD
EXTERNO
• Todas las láminas deben ser conservadas, porque
pueden ser solicitadas por el laboratorio de referencia
para su relectura

CONSERVAR LAMINAS
• Quitar el aceite de las laminas
• Comprobar que la numeración este visible en las
laminas
• Guardarlas en caja, envueltas individualmente en
papel
• Conservarlas en lugar fresco y seguro
(EEDI) de baciloscopia de TB
tuberculosis.
Relectura de láminas de rutina enviadas desde el
Laboratorio Clínico Local al Laboratorio de Referencia

• El método es sencillo y permite evaluar el

desempeño y la eficiencia de la lectura, e
indirectamente la calidad de la muestra,
extendido y coloración efectuadas en los
laboratorios durante su trabajo rutinario.
Método: (LQAS) Lot Quality
Assessment System
El cálculo de las láminas a releer depende de:
• Tasa de positividad de cada laboratorio
• Se calcula usando los registros de laboratorio del año
anterior
Esta metodología aplica a los Laboratorios con
positividad > 5 % y mas de 200 baciloscopias anuales
Sensibilidad: (detección de positivos) 80-85%

Especificidad: (detección de negativos) 99,9 – 100%

Grado confianza 95%

LABORATORIOS CON POSITIVIDAD <5%
Y/O <200 BACILOSCOPIAS ANUALES
Realizar relectura a la totalidad de las baciloscopias
realizadas en el mes, una vez por año, si el promedio
de la concordancia en la lectura de los últimos 3 años
es ≥ a 97%.
Frecuencia de la realización de la EEDD : ANUAL.

Realizar relectura a la totalidad de las baciloscopias

realizadas en el mes, dos veces por año, si el
promedio de la concordancia en la lectura de los
últimos 3 años es < a 97%.

Frecuencia de la realización de la EEDD: 1 vez al

semestre
PARAMETROS A EVALUAR EN
EEDI DE TB

Concordancia en la lectura de baciloscopia de > 99%

tuberculosis
Porcentaje de muestras mucopurulentas y > 75%
mucosas
Porcentaje de extendidos adecuados >80%
Porcentaje de coloraciones adecuada > 95%
FORMATO ÚNICO DE VIGILANCIA
DE LAS MICOBACTERIAS
LIBRO DE REGISTRO DIARIO
DE BK Y CULTIVO
LEPRA
 LEPRA
• La enfermedad de Hansen o lepra es una micobacteriosis
clasificada dentro de las enfermedades granulomatosas
crónicas, afecta principalmente la piel y los nervios
periféricos.
• Causada por un bacilo intracelular obligatorio:
Mycobacterium leprae, es un bacilo ácido alcohol
resistente, ligeramente curvado que mide 1-8 micras de
longitud y 0,3 micras de diámetro.
• El macrófago es la célula predilecta del bacilo; en ella se
agrega para formar conjuntos bacilares intracelulares
denominados globias.
CRITERIOS DE DIAGNOSTICO

CLINICO BACTERIOLOGICO HISTOPATOLOGICO

TRANSMISION Y PREVENSION
Modo de transmisión
Existen varias teorías sobre la transmisión de la
enfermedad, la principal se relaciona con la eliminación de
bacilos por vía respiratoria de personas enfermas y el
contacto directo de personas sanas con estos por tiempo
prolongado.
Prevención
Se debe disminuir su transmisión realizando un diagnostico
precoz de los casos de forma que se reduzca la
probabilidad de contagio. Además, promoviendo la
adherencia al tratamiento y cumplimiento del esquema,
por parte de los pacientes.
QUE HACER CON UN CASO
SOSPECHOSO
CASO SOSPECHOSO SINTOMATICO DE PIEL Y SISTEMA NERVIOSO PERIFERICO
EXAMEN CLINICO PARA LEPRA

NEGATIVO POSITIVO

DESCARTAR BK DE
CLASIFICACION

IB =0 IBC >0
BIOPSIA

NEGATIV POSITIVA
A

DECARTA
CASO CONFIRMADO
R DE LEPRA
MULTIBACILAR

PQT
CONTROL AL
TERMINO DEL
TRATAMIENT
O
 PROCEDIMIENTO DE TOMA
DE MUESTRA
Materiales:
• Dos laminas portaobjetos nuevas, previamente
desengrasadas con alcohol al 70%
• Aplicadores con algodón o escobillón
• Lápiz de punta de diamante para marcar las laminas.
• Lancetas, guantes y tapabocas
• Pinzas tipo Kelly, con las puntas recubiertas por cauchos,
esterilizadas en paquete individual.
• Alcohol antiséptico al 70%
Por cada paciente se debe utilizar una pinza Kelly estéril.
 PROCEDIMIENTO DE TOMA
DE MUESTRA
PROCEDIMIENTO
• La baciloscopia se toma por duplicado empleando laminas
portaobjetos nuevas y desengrasadas
• Identificar las laminas con un marcador punta diamante
• Obtener la muestra de liquido intersticial dejando
completamente libre de sangre el sitio donde se va a tomar
la muestra (isquemia)
• Si no se dispone de las pinzas se puede usar los dedos
índice y pulgar como pinza digital con buenos resultados
• Para lograr una mejor isquemia se puede frotar el sitio con
un escobillón seco siempre en una misma dirección hasta q
la zona se torne pálida.
PROCEDIMIENTO DE TOMA
DE MUESTRA

• Una vez lograda la isquemia se limpia con alcohol al 70%

y con una lanceta desechable se debe hacer un pinchazo
y realizar una pequeña excavación del área a partir del
punto de origen del pinchazo.
• En el momento que brote el liquido intersticial se debe
proceder a recogerlo junto con los restos del liquido de
tejido utilizando la misma lanceta y evitando que la
muestra se quede en la canaleta de la mitad.
PROCEDIMIENTO DE TOMA
DE MUESTRA
La muestra requerida para la clasificación es el líquido
intersticial proveniente de los sitios en que el bacilo de
Hansen habita por las bajas temperaturas y que por su
tolerancia inmunológica favorecen el desarrollo de la
enfermedad; estos deben ser mínimo 4 y máximo 6, dentro
de los cuales se encuentran en lesiones, lóbulos de las
orejas y codos.

Para las lesiones se debe tener en cuenta la información

proporcionada por el clínico en “Esquema corporal”
Las muestras se recolectan sobre una lámina porta objeto
nueva y desengrasada, realizando un frotis de cada una,
distribuyéndolas de la siguiente manera:
 DISTRIBUCIONES DE LAS
MUESTRAS
• La muestra obtenida se debe colocar en el sitio
correspondiente en la lamina según el esquema corporal,
ocupando un área de mas o menos un centímetro de
diámetro LOBULO DE
OREJA
LESION 1 ó LESION 3 ó
CODO CODO
IZQUIERDO IZQUIERDO IZQUIERDO
73

LOBULO LESION 2 LESION 4

DE OREJA ó CODO ó CODO
DERECHA DERECHO DERECHO
 BACILOSCOPIA
 Es la búsqueda microscópica de BAAR mediante
la coloración de ZN
 Se realiza en muestras de liquido intersticial y
de lesiones.
Para:
 Clasificación bacteriológica operativa
• MB: IB > 0
• PB: IB = 0
CONTROL BACTERIOLOGICO
DEL TRATAMIENTO

• El paciente clasificado como multibacilar deberá

tener un examen de baciloscopia de control
semestral durante el tiempo que dure el
tratamiento y al finalizar el mismo para sacarlo a
vigilancia; es decir que se debe realizar un examen
de baciloscopia cada año durante 5 años y cuando
se observen nuevas lesiones.
• Para los pacientes paucibacilares se debe realizar el
examen de control al completar el esquema de
tratamiento.
PROCESO DE COLORACION ZN

MATERIALES Y REACTIVOS
• Laminas portaobjetos con las muestras control
• Muestras de los pacientes
• Fucsina fenicada
• Alcohol acido al 3%
• Azul de metileno
• Puentes de coloración
• Mechero
• Frascos dispensadores de colorantes
• Papel filtro
• embudo
TIEMPOS DE COLORACION
PASOS ZIELH NEELSEN
Coloración principal Fuscina
10 min
Decoloración Alcohol acido
5 min
Coloración de contraste Azul de metileno
10 min
ESCALA SEMICUANTITATIVA
ESTABLECIDA EN COLOMBIA
 INDICE BACILAR
 Es el promedio aritmético de las cruces encontradas en
cada una de las muestras leídas.
 Totalizar el número de cruces.
 Dividir por el número de muestras leídas
IB= 2+2+2+2+1+1 = 1.67 + +
6
++ ++
El rango de IB cuando es > 0 está
entre 0.16 y 3.0,
si se leen 6 muestras. ++ ++

Se informa en números arábigos. 59

OBSERVACION DE BAAR
NUMEROSOS BACILOS ESCASOS
BACILOS

Globias: Recuento imposible

de bacilos.

Su presencia en cualquiera de las

muestras indica una gran
cantidad de bacilos, se adjudicará
en escala de lectura tres cruces a
esa muestra
CONTROL DE CALIDAD DE LA
COLORACION

• Control positivo: vacuna de BCG

• Control negativo: cultivo de S. aureus

• INFORME DE RESULTADOS:
deberá incluir tanto el número de cruces en cada
una de las muestras examinadas, como el resultado
del índice bacilar de acuerdo a la escala
semicuantitativa utilizada en Colombia
FORMATOS DEL PROGRAMA
DE LEPRA
1. Formato de Evaluación Externa del desempeño
indirecta (EEDI) de baciloscopia de Lepra.

2. Solicitud del examen (esquema corporal)

3. Libro de Registro Diario de Baciloscopia de lepra

4. Informe Trimestral de Actividades de Lepra

 PARTICIPACION EN LA EEDI
Circular 042 de 2019

Se deben enviar, todas las baciloscopias de clasificación y

control, inmediatamente después de haber sido leídas, en
el formato establecido para ello, adicional, enviar el
esquema corporal.
Si no se han procesado Baciloscopias de lepra, debe de
enviarse el formato diligenciando el encabezado y
reportando cero Baciloscopias.
El condensado trimestral de actividades de lepra del
laboratorio, debe seguir enviándose de manera oportuna
(es decir 4 informes al año).
 SOLICITUD DEL EXAMEN
• Se toma linfa o liquido intersticial como muestra.
• La solicitud del examen debe ir acompañado del
esquema corporal donde el medico señala los sitios de
la toma de muestra.
LIBRO DE REGISTRO DIARIO
DE BACILOSCOPIA DE LEPRA
INFORME TRIMESTRAL DE
ACTIVIDADES DE LEPRA
CONDENSADO TRIMESTRAL

El condensado trimestral de actividades de lepra del

laboratorio se debe seguir enviando de manera
trimestral y oportuna (4 informes al año)

Si no se realizaron baciloscopias durante el trimestre

deberá enviarse la información reportando 0 (cero)
baciloscopias.