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    Exposicion Analisis Instrumental

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    sergio andres
    Este documento resume tres técnicas espectroscópicas: la fluorescencia, la fosforescencia y la quimioluminiscencia molecular. La fluorescencia ocurre cuando las sustancias absorben luz y luego emiten luz a una longitud de onda más larga, la fosforescencia es similar pero la emisión de luz continúa después de quitar la fuente de excitación, y la quimioluminiscencia ocurre cuando reacciones químicas liberan energía en forma de luz. El documento también describe los equipos y aplicaciones analíticas de estas té

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    Exposicion Analisis Instrumental

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    sergio andres
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    Este documento resume tres técnicas espectroscópicas: la fluorescencia, la fosforescencia y la quimioluminiscencia molecular. La fluorescencia ocurre cuando las sustancias absorben luz y luego emiten luz a una longitud de onda más larga, la fosforescencia es similar pero la emisión de luz continúa después de quitar la fuente de excitación, y la quimioluminiscencia ocurre cuando reacciones químicas liberan energía en forma de luz. El documento también describe los equipos y aplicaciones analíticas de estas té

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    Exposicion analisis instrumental

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    Este documento resume tres técnicas espectroscópicas: la fluorescencia, la fosforescencia y la quimioluminiscencia molecular. La fluorescencia ocurre cuando las sustancias absorben luz y luego emiten luz a una longitud de onda más larga, la fosforescencia es similar pero la emisión de luz continúa después de quitar la fuente de excitación, y la quimioluminiscencia ocurre cuando reacciones químicas liberan energía en forma de luz. El documento también describe los equipos y aplicaciones analíticas de estas té

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    Este documento resume tres técnicas espectroscópicas: la fluorescencia, la fosforescencia y la quimioluminiscencia molecular. La fluorescencia ocurre cuando las sustancias absorben luz y luego emiten luz a una longitud de onda más larga, la fosforescencia es similar pero la emisión de luz continúa después de quitar la fuente de excitación, y la quimioluminiscencia ocurre cuando reacciones químicas liberan energía en forma de luz. El documento también describe los equipos y aplicaciones analíticas de estas té

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    ESPECTROSCOPIA DE

    FLUORESCENCIA, FOSFORESCENCIA
    Y QUIMIOLUMINISCENCIA
    MOLECULAR

    Integrantes:

    Jenny Paola Cardenas Bruges


    Harold Jose Rivero Ramos
    Sergio Andres Julio Rivas
    Elizabeth Castro Cardozo
    Cristian Angarita Morato
    Jose Carlos Arias
    FLUORESCENCIA
    ¿QUÉ ES?
    Fenómeno por el cual algunas
    sustancias tienen la capacidad
    de absorber luz a una
    determinada longitud de onda,
    por lo general en el rango
    ultravioleta, y luego emiten luz
    en una longitud más larga.
    APLICACIONES

    • Análisis cualitativo y
    Campo de estructural.
    aplicación • Análisis cuantitativo
    • Auxiliar en otras técnicas.

    Analito
    • Fluorescencia directa.
    Métodos fluorescente.
    analíticos Analito no
    • Fluorescencia indirecta. fluorescente.
    VARIABLES QUE AFECTAN LA
    FLUORESCENCIA

    DE LA MOLÉCULA DEL MEDIO

    Rendimiento cuántico. Temperatura.


    Estructura química Disolvente.
    (transiciones electrónicas).
    pH.
    Oxigeno disuelto.
    Concentración.
    EQUIPOS
    UTILIZADOS
    FLUORÍMETRO
    Es un dispositivo de
    laboratorio utilizado para
    medir los parámetros de
    la fluorescencia:
    su intensidad y la
    distribución de longitudes
    de onda del espectro de
    emisión después de la
    excitación por un
    cierto espectro de luz.
    Fuentes de radiación

    Lámpara de arco de Hg Lámpara de arco de xenón

    • Es común en fluorímetros de filtro.  Emiten radiación continua como


    resultado de la recombinación de
    • Produce líneas intensas a 254, 366, electrones con átomos de Xe
    405,436, 546,577,691 y 773 nm. ionizados.
    • Estas lámparas son útiles solo si las  Estos iones se generan por
    líneas de Hg corresponden a λ colisiones de los átomos de Xe con
    adecuadas para la excitación. los electrones que fluyen a través del
    arco.
    MONOCROMADORES
     Los monocromadores son
    empleados para dispersar la luz
    policromática o blanca en varios
    colores o longitudes de onda.
     Para fluorescencia, un
    monocromador debe tener bajos
    niveles de dispersión de la luz.
     Deben tener capacidad para
    detectar bajos niveles de
    radiación.
    Filtros
     Se emplean cuando las
    propiedades espectrales de un
    fluoróforo son conocidas.
     La máxima sensibilidad se
    obtiene empleando filtros en
    lugar de monocromadores.
    CELDAS
     Pueden ser de vidrio o sílice,
    y también de cuarzo.
     Trayecto óptico de 10 mm
    (capacidad de 3 ml).
     Las cuatro caras de la celda
    son transparentes.
    DETECTORES
     Se emplean tubos
    fotomultiplicadores.
     Un PMT es una fuente de
    corriente, y la corriente es
    proporcional a la intensidad
    de la luz.
     Responde a los fotones
    individuales.
    VENTAJAS DESVENTAJAS
     Ventaja principal: “alta sensibilidad”.  La fluorescencia puede ser susceptible a
    diversas condiciones mencionadas
     La fluorometría es más selectiva que la
    anteriormente, por ejemplo el pH, la
    espectrofotometría de absorción UV/VIS temperatura, o el disolvente. Otros
    por dos razones: materiales de interferencia, incluyendo
    1. Muchas moléculas absorben fuertemente detersorios, papel de filtro, y material del
    en el rango UV/VIS, pero no exhiben tejido pueden también alterar y afectar a la
    fluorescencia detectable. fluorescencia. La fluorescencia se puede
    también perder por la acción recíproca con
    2. En fluorometría, se necesitan dos otras moléculas y especialmente en
    longitudes de onda para que el proceso muestras concentradas.
    se lleve a cabo (excitación y emisión), a
    diferencia de la absorciometría la cual
    solo necesita una. longitud de onda de
    absorción.
    ¿QUÉ ES?
    • Es el fenómeno en el cual ciertas
    sustancias tienen la propiedad de
    absorber energía y almacenarla, para
    emitirla posteriormente en forma de
    radiación.
    • Propiedad que presentan algunos
    cuerpos especialmente el “fósforo” de
    continuar emitiendo luz por un cierto
    tiempo luego de haber sido iluminados.
    • Es la fotoluminiscencia que continua
    durante un periodo mayor al de la
    fluorescencia después de que se
    apaga la radiación de excitación
    COMO FUNCIONA…
    La fosforimetria ha sido utilizada para la
    determinación de una gran variedad de
    especies orgánicas y bioquímicas que incluyen
    sustancias como ácidos nucleicos,
    aminoácidos, purina y pirimidina, enzimas,
    hidrocarburos del petróleo y pesticidas.

    • necesidad de bajas temperaturas


    • pobre precisión de las medidas de fosforescencia
    • puedan llevarse a cabo a temperatura ambiente
    INSTRUMENTOS
    Fosforímetros

    Instrumentos que se utilizan para estudios de


    fosforescencia y son similares en diseño a los
    fluorimetros y a los espectroflurimetros antes
    considerados excepto en que requieren dos
    componentes adicionales.

    • dispositivo que alternativamente irradia la


    muestra y después de un tiempo adecuado,
    mide la intensidad de fosforescencia.
    • Se utiliza tanto dispositivos mecánicos como
    electrónicos.
    ¿QUÉ ES?

    Con el término quimioluminiscencia


    se entiende el fenómeno por el que,
    en algunas reacciones químicas, la
    energía liberada no solo se emite en
    forma de calor o de energía química,
    sino también en forma de luz
    Quimioluminiscencia
    directa e indirecta
    Ventajas: Desventajas:
     Mejor rendimiento • Alto consumo de
     Larga Vida reactivo
     Resultados más • Bajo rendimiento
    rápidos cuántico
     Fácil Adopción
    Equipos con tecnología quimio
    luminiscente

    Architect i1000SR IS 1200 ThunderBolt

    Hitachi CLA-1
    AccuLite TSH Bio-Flash
    APLICACIONES

    QUIMIOLUMINISCENCIA

    FOSFORESCENCIA

    FLUORESENCIA

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