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Microscopía Electrónica, Microscopía de Fuerza Atómica, Microscopía Virtual

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Microscopía Electrónica,

Microscopía de Fuerza
Integrantes:
Sugey Alveo 8-954-247,
Atómica, Microscopía
Virtual
Adrian Bernal 2-744-2089,
Marjorie Cando 8-951-1887
Ana Sofia Ruiz 8-958-1858,
Rosio Sanchez 2-744-1391
Objetivos
● llegar a distinguir los diversos mecanismos de funcionamiento de la microscopía
electrónica, virtual y nuclear.
● proporcionar un amplio espectro de las aplicaciones y usos en el desarrollo
profesional
● estimar los aumentos de cada microscopia
Microscopía
Electrónica
Hay dos tipos de microscopios electrónicos que
proporcionan datos morfológicos y analíticos en
las células y tejidos:
El microscopio electrónico de transmisión (MET)
y el microscopio electrónico de barrido (MEB).
partes del microscopio
electrónico
columna
Las partes principales de un microscopio electrónico
incluyen aquellos elementos utilizados para generar
electrones y dirigirlos hacia la muestra. Esto incluye:

● Fuente de electrones
● Lentes electromagnéticas

● Cámara de vacío

● Detector (Pantalla fluorescente)

A continuación, la información capturada por la


pantalla fluorescente es transmitida a un ordenador
que puede asignar colores artificiales a la imagen
obtenida.
MUESTRAS DEl ME

Filamento de Tungsteno (lo que tienen las


Plata y cobre Pelos de mosquito bombillas o focos para que hagan luz)

Moléculas de Hierro

Microfibras y microesferas Nano espejos


de fibra textil
Microscopía Electrónica
de Transmisión

● Permite la observación de muestra en


cortes ultrafinos
● Dirige el haz de electrones hacia el
objeto que se desea aumentar
Micrófago del microscopio
● Parte de los electrones rebotan o son electrónico (TEM) de la
transmisión que muestra varias
absorbidos por el objeto y otros lo fibras myelinated periféricas y
una célula de Schwann
atraviesan formando una imagen
aumentada del espécimen
Estructura del MET filamento de tungsteno

Las partes principales de un microscopio electrónico de transmisión


son:

● Cañón de electrones 80-120 KV

● Lentes magnéticas

● Sistema de vacío de 10-7 mmHg


● Placa fotográfica o pantalla fluorescente que se coloca detrás
del objeto a visualizar para registrar la imagen aumentada.

● Sistema de registro que muestra la imagen que producen los


• Una fuente de electrones (cátodo, cañón de electrones),
electrones
como un filamento de tungsteno calentado, emite electrones.
• Los electrones son atraídos hacia un ánodo.
• Una diferencia eléctrica entre el cátodo y el ánodo imparte
a los electrones un voltaje de aceleración de entre 20 000 y
200 000 voltios, generando el haz de electrones.
• El haz pasa a través de una serie de lentes
electromagnéticas que cumplen la misma función que las
lentes de cristal de un microscopio óptico.
Partes del MET
Cañón de electrones
filamento de tungsteno

sistema
de vacío

Inyector de muestra

Sistema de registro

Pantalla
fluorescente
Preparación de la muestra para el met https://
www.youtube.com/
watch?
v=TfbOez7gHXA&t=6
En la preparación de la muestra se emplean 4 pasos:
78s
1. fijación
● prefijación: Glutaraldehido da contraste a
● post fijación: Tetraóxido de osmio OsO4 la muestra
1. inclusión (lavado/deshidratación)
● buffer de veronal
● alcholes de dregradacion creciente 30°->50°->70°-
>90°->100°
● óxido de propileno->Resina de epoxi (Epon) = Epon
- propileno 1:1
● cápsula de epon
● polimerización en estufa 2 días a 60°C
1. corte
● Ultramicrotomo: 50 nm = 0,05 micras
1. contraste (tinción)
● acetato de uranilo
Microscopio
electrónico de barrido

permite el estudio 3D de superficie de células y


tejidos a gran aumento

● Crea una imagen ampliada de la superficie de un objeto


● No es necesario cortar el objeto en capas para observarlo
● Explora la superficie de la imagen punto por punto
● Examina una gran parte de la muestra cada vez
http://
www.pardell.es/
el-microscopio-
electronico-de-
barrido-sem.hml
Microscopio FUNCIONAMIENTO

electrónico de
barrido
Esta técnica de microscopía es muy útil para
observar los detalles de la superficie de
microorganismos. Es habitual realizar una
preparación de la muestra depositando primero
una capa de metal sobre la muestra. De esta
forma, existen más electrones secundarios que
pueden desprenderse cuando se aplica el haz
principal de electrones.
Diferencias
MICROSCOPIO ÓPTICO MICROSCOPIO
ELECTRÓNICO

Iluminación fuente de luz Haz de electrones

Lentes Vidrio electroimanes

Resolución* 0,1 micra 1mn a 0,001micra


hasta 2.000x hasta 1.000000x

Muestras las preparaciones son sencillas y se las preparaciones son complejas


pueden observar células vivas y se pueden observan células
muertas o material inerte
Aplicaciones Microscopía Electrónica
La capacidad de ver la estructura microscópica de un
espécimen en un más de alta resolución que cuál es
posible con microscopía electrónica se ve reflejada en las
áreas:

● Investigación científica
● Industria
● Geología y metalurgia Pétalo a
Tel
● Botánica, Biomedicina y Medicina
● Estudio de materiales

Wolframio
Microscopía de
fuerza atómica
Instrumento mecano-óptico
capaz de detectar fuerzas del
orden de los nanonewtons.
Ha sido esencial en el
desarrollo de la nanotecnología,
para la caracterización y
visualización de muestras a
dimensiones nanométricas.
Funcionamiento
El AFM está basado en el contacto mecánico entre una sonda (punta) y la
superficie de la muestra a estudiar; al tratarse de una técnica de barrido, la
punta escanea la superficie de la muestra y resuelve sus detalles
superficiales a nivel subnanométrico debido a que el extremo de la punta es
muy pequeña (5 nanómetros de radio aproximadamente).
A medida que el piezoeléctrico procede al escaneado en los ejes X-Y, la
palanca que sostiene la punta se deflexiona arriba o abajo (eje Z) y esta
deflexión es detectada mediante un láser que finalmente incide sobre la
superficie de un fotodetector, el cual se encarga de seguir la evolución de la
sonda del microscopio.
Óxido de grafeno Células sanguíneas humanas
(glóbulos rojos)
Bacteria E. Coli

autoensamblaje de una línea


Micropilares de resina
impresa de copolímero
Microscopio virtual
Un microscopio virtual dinámico (también
denominado interactivo) permite hacer zoom a la
imagen en tiempo real, y en algunos casos,
permitir el control del campo visualizado
mediante la manipulación remota de las
muestras un microscopio robotizado, el cual
consiste básicamente en un microscopio con un
sistema de captación de imágenes adosado (p.
ej., cámara digital) y conectado a una
computadora, con lo que es posible controlar los
parámetros del microscopio remotamente (ejes
x,y, y z, luz, diafragma, aumentos).
Microscopía Virtual

Un microscopio virtual puede ser estático o


dinámico.

Funcionamiento

La microscopía virtual implica la conversión


de secciones histológicas, las cuales se
encuentran montadas comúnmente entre
portaobjeto y cubre objeto de vidrio, en
imágenes digitales de alta resolución. A estas
imágenes digitales se las conoce como
preparados virtuales o virtual slides.
MUESTRAS DEL
MICROSCOPIO VIRTUAL
Biopsia
endocervical

Cuero
cabelludo
Piel de cuerpo humano
GRACIAS

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