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HISTORIA: EL INVENTO
Se inventó, hacia 1610, por Galileo, según los italianos, o por Jansen, en opinión de los holandeses EL NOMBRE • La palabra microscopio fue utilizada por primera vez por los componentes de la "Accademia dei Lincei“ • Micro=pequeño • Scopein=ver GALILEO GALILEI
• La “Accademia dei Linceii” era una sociedad
científica a la que pertenecía Galileo y publicaron un trabajo sobre la observación microscópica del aspecto de una abeja MALPIGHI
Las primeras publicaciones importantes aparecen en 1660 y 1665 cuando Malpighi observa los capilares sanguíneos y Hooke publica su obra Micrographia ANTONY VAN LEENWENHOEK
En el siglo XVII un comerciante holandés, utilizando microscopios simples de fabricación propia describió por primera vez protozoos, bacterias, espermatozoides y glóbulos rojos MICROSCOPIO DE LEEUWENHOEK MICROSCOPIO DE LEEUWENHOEK CARACTERÍSTICAS DEL MICROSCOPIO DE LEEUWENHOEK
El primitivo microscopio de Leeuwenhoek tenía dos lupas combinadas con las que llegó a alcanzar 260 aumentos, lo cual le permitió visualizar algunos protozoos e infusorios MICROSCOPIOS DEL SIGLO XVIII ERNST ABBE
Las mejoras mas
importantes de la óptica surgieron en 1877 cuando Abbe publica su teoría del microscopio CALR ZEISS
Mejora la microscopía de inmersión sustituyendo el agua por aceite de cedro lo que permite obtener 2000 aumentos FUNDAMENTO DE LA MICROSCOPÍA Cuando el observador se acerca el objeto se agranda Pero a menos de 25 cm no se ve con claridad Si se aumenta el ángulo visual se ve con claridad EVOLUCIÓN DEL MICROSCOPIO ESQUEMA DEL MICROSCOPIO
Un tubo cilíndrico aloja el
sistema óptico ocular/objetivo.
Una platina de original diseño
permite observar las preparaciones, que son iluminadas por un espejo cóncavo que concentra la luz sobre el objeto a estudiar. PARÁMETROS ÓPTICOS
Aumento Poder de resolución Nº de campo Profundidad de foco Contraste AUMENTO
Se calcula multiplicando el aumento del objetivo por el aumento del ocular CALCULO AUMENTO
El aumento de este microscopio puede calcularse como:
D= delta*25/(fob*foc) Donde delta es la distancia que hay entre el foco imagen del objetivo y la posición donde se forma la imagen. PODER DE RESOLUCIÓN
Distancia si dos puntos
se distinguen Mayor, cuando menor es la longitud de onda Mayor, cuanto mas grande es la apertura numérica Mayor, con aceite de cedro Número de campo
Es el diámetro de la imagen observada a través del ocular, expresado en milímetros PROFUNDIDAD DE CAMPO CONTRASTE
Diferencia de absorción de luz entre el objeto y el medio Puede aumentarse con las tinciones BUENOS PARÁMETROS MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO PARTE MECÁNICA QUE SE PUEDE DESMONTAR
Estativo
Tornillos Cabezal de la platina
Oculares
Condensador Objetivos SISTEMA DE SOPORTE O ESTATIVO
Tubo
Platina Brazo
Píe SISTEMA DE AJUSTE
Anillo de ajuste de los oculares
Tornillo que permite mover el cabezal
Tornillos del condensador
Tornillos Palanca de reguladores cierre del de la platina diafragma SISTEMA DE ENFOQUE
Freno
Tornillo macrométrico
Tornillo micrométric o PLATINA
Pinza
Escala PARTE ÓPTICA
Lentes: Oculares Objetivos
Sistema de iluminación: Condensador Diafragma Fuente de luz SISTEMA DE ILUMINACIÓN: FUENTE DE LUZ
Suele ser una lámpara
halógena de intensidad graduable Se enciende y apaga con un interruptor
En el exterior puede Filtro tener un filtro
Interruptor y graduación de la luz Lámpara CONDENSADOR Y DIAFRAGMA
Condensado Concentra la luz de la lámpara en un punto de la preparación
Diafragma o iris Está dentro del condensador, si se cierra mejora el contraste, pero empeora la resolución LENTES: OBJETIVOS Están colocados en el revolver Tienen un sistema de amortiguación Un anillo coloreado indica los aumentos Son de 4, 10, 40 y 100 (inmersión) aumentos OBJETIVOS
Oculares Ajuste de la distancia interpupilar OCULARES: 10x; 15x; 20x TETRAOCULARES MATERIAL NECESARIO: PORTAS Y CUBRES ACEITE DE INMERSIÓN
Hoy no son de madera de
cedro, sino sintéticos Los hay de baja, media y alta viscosidad Su empleo es imprescindible con el objetivo de inmersión (100x) MANEJO DEL MICROSCOPIO
No poner la preparación al Mirando por fuera subir la
revés platina Regular la luz a intensidad Enfocar y ajustar media Pasar al siguiente Ajustar condensador y aumento y enfocar diafragma al medio Al acabar retirar la Empezar por poco preparación aumento Apagar la luz CONSERVACIÓN DEL MICROSCOPIO Ponerle su funda al guardarlo Limpieza de lentes con papel de gafas El exceso de xilol al limpiar las lentes desgasta el cemento Usar pincel y pera de aire TIPOS DE MICROSCOPIOS Microscopio Óptico Simple Lupa
Microscopio óptico M.O. Normal Microscopio Campo oscuro Óptico Contraste de fases Compuesto Tipos de Fluorescencia microscopio s
Transmisión Microscopio Barrido electrónico Digital Efecto túnel o cuántico PODER DE OBSERVACIÓN DEL MICROSCOPIO MICROSCOPÍA DE CAMPO OSCURO
Treponema pallidum MICROSCOPÍA DE CAMPO OSCURO
La microscopia de campo oscuro es una
técnica de iluminación especial que se caracteriza en la iluminación oblicua para realzar el contraste en las muestras que no son reflejadas bien bajo condiciones normales de la iluminación del campo claro, observándose partículas que aparecen como puntos brillantes sobre un fondo oscuro. MICROSCOPÍA DE CONTRASTE DE FASES
Células epiteliales 20 x MICROSCOPÍA DE CONTRASTE DE FASES
El ojo humano es capaz de observar diferencias de color y
de intensidades de color, no así diferencias de fases (producidas por distintos índices de refracción que tienen los objetos), por eso se recurre al microscopio de contraste de fase. La microscopia de contraste de fases hace posible observar células en estado vivo más fácilmente, ayudando así a evitar la creación de condiciones artificiales tales como las introducidas por la tinción MICROSCOPIA DE FLUORESCENCIA
Células epiteliales 200 x
MICROSCOPIA DE FLUORESCENCIA La fluorescencia es la propiedad que tienen ciertas sustancias de emitir luz de longitudes de onda larga, cuando son expuestas a una radiación de longitud de onda corta. Esta capacidad de fluorescencia puede ser débil o alta o que no la tengan; pero este último puede ser corregido con el coloreado con sustancias fluorescentes llamada fluorocromo que inducen fluorescencia que facilitan diferenciarlos. La microscopía de fluorescencia utiliza dispositivos especiales que permiten aprovechar este fenómeno para visualizar estructuras que con otro tipo de microscopía no se puede realizar. ERNST RUSKA
El microscopio electrónico de transmisión (T.E.M.) consiguió aumentos de 100.000 X. Fue desarrollado por Max Knoll y Ernst Ruska en Alemania en 1931 PRIMER MICROSCOPIO ELECTRONICO
Utilizó un haz de electrones en lugar de luz para enfocar la muestra. Posteriormente, en 1942 se desarrolla el microscopio electrónico de barrido (SEM). MICROSCOPIO ELECTRÓNICO MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE BARRIDO M.E. DE TRASMISIÓN
