GUIDE DE BONNES PRATIQUES

Conseils pour prélever, conditionner et acheminer les prélèvements

en vue d’un diagnostic

DU BLOC OPÉRATOIRE AU
LABORATOIRE
D’ANATOMOCYTOPATHOLOGIE

? BLOC
LABO

AGEN ALBI CASTRES

MONTAUBAN MONTPELLIER
SERIGNAN VERNOUILLET

ACP-RI-INS.006 Guide de bonnes pratiques : Du bloc opératoire au laboratoire d’anatomocytopathologie Montpellier

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Sommaire
I. OBJET ET DOMAINE D’APPLICATION ........................................................................................................ 3
II. RESPONSABILITÉS ...................................................................................................................................... 3
III. DÉROULEMENT DE L’ACTIVITÉ .................................................................................................................. 3
1. HISTOLOGIE..................................................................................................................... 3
ETAPE 1 : PRELEVER ..................................................................................................................................... 3
ETAPE 2 : CONDITIONNER ET TRANSMETTRE ............................................................................................. 4
➔ Hygiène et sécurité ......................................................................................................................................... 4
➔ Conditionnement des échantillons ................................................................................................................. 4
➔ Mode opératoire ............................................................................................................................................. 5
ETAPE 3 : ACHEMINER, CONSERVER ET ELIMINER ...................................................................................... 7
2. IMMUNOFLUORESCENCE » (IF) – Cas particulier .............................................................. 7
1. Définition .............................................................................................................................................. 7
2. Mode opératoire .................................................................................................................................. 7
ETAPE 1 : PRELEVER et CONDITIONNER ...................................................................................................... 7
ETAPE 2 : ACHEMINER ................................................................................................................................. 7
3. CYTOLOGIE ...................................................................................................................... 8
ETAPE 1 : PRELEVER, CONDITIONNER, ACHEMINER et CONSERVER .......................................................... 8
ETAPE 2 : CONDITIONNER ET ACHEMINER (Informations complémentaires) ......................................... 10
ETAPE 3 : ACHEMINER, CONSERVER et ELIMINER .................................................................................... 10
4. MODALITES DE RENDU DE RESULTATS ............................................................................ 11
1. Délais .................................................................................................................................................. 11
2. Modalités de rendu résultats ............................................................................................................ 11
3. Contacts et renseignements .............................................................................................................. 11
4. Réclamations ...................................................................................................................................... 11

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 I. OBJET ET DOMAINE D’APPLICATION
Cette procédure informe des bonnes pratiques en matière de prélèvement et de conditionnement des échantillons
en vue d’un diagnostic histologique. Elle définit également les renseignements nécessaires au dossier patient, les
délais et les moyens de réponse.

II. RESPONSABILITÉS
Ces différentes étapes sont sous la responsabilité des prescripteurs, des préleveurs et du personnel des cabinets
médicaux ou des établissements de santé.

III. DÉROULEMENT DE L’ACTIVITÉ

1. HISTOLOGIE

ETAPE 1 : PRELEVER

En matière de recommandations de prélèvements, se référer à celles préconisées par les sociétés savantes.

QUELQUES EXEMPLES :

 Biopsies gastriques (quelle que soit l’indication : Tumeur, Recherche HP, …)

Cf. Recommandations : conseils pratiques SNFGE (Société Nationale Française de Gastro Entérologie)
1 biopsie angle petite courbure
2 biopsies corps gastrique (petite et grande courbure)
2 biopsies antre (petite et grande courbure)

 Biopsies duodénales Cf. Recommandations : USCAP San Diego 2014

Faire des biopsies multiples (compte tenu du caractère focal de la maladie cœliaque) au niveau de D2 ou D3
(pour éviter les distorsions dues aux glandes de Brunner et à une duodénite peptique).

 Biopsies pulmonaires Cf. Recommandations professionnelles : Cancer du Poumon - INC

Tumeur visible à la bronchoscopie : 3 à 5 biopsies, de taille suffisante pour permettre des analyses en biologie
moléculaire ultérieures (EGFR…) accompagnées d’un brossage, d’un lavage et d’une aspiration…

 Biopsie(s) prostatique(s)
Les biopsies doivent être auparavant placées entre 2 mousses puis dans des cassettes différentiées selon leur
localisation.

 Biopsie(s) mammaire(s)
En cas de biopsies mammaires multiples identifier impérativement les flacons en fonction de la
localisation du prélèvement.
Cas particulier des mammotomes : les flacons doivent être différentiés selon la présence ou non de calcifications.

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ETAPE 2 : CONDITIONNER ET TRANSMETTRE

➔ Hygiène et sécurité
Précaution de manipulation du formol :

Ne jamais mélanger de produits chlorés avec du Formol.

Méthodes de ramassage / Nettoyage en cas de déversement accidentel

 De grandes quantités
• Port de gants / Ventiler la pièce +++
• Ramasser avec des matériaux spécifiques ou à défaut, avec de la terre ou du sable secs et déposer dans des
conteneurs pour résidus pour leur élimination postérieure, conformément à la législation en vigueur
• Nettoyer les restes à grande eau
 De petites quantités
• Port de gants
• Eponger avec un papier absorbant à déposer dans un conteneur pour résidus pour son élimination
postérieure
• Rincer abondamment à l’eau la surface contaminée

Elimination
• Ne pas jeter à l’évier.
Tous les flacons périmés doivent être détruits selon la directive 94/62/CE du Parlement Européen et du
conseil du 20 décembre 1994, relative aux emballages et aux déchets d’emballage.

➔ Conditionnement des échantillons

 Le temps d’ischémie froide, délai entre le prélèvement et la mise dans le

formol, doit être le plus court possible et ne pas excéder 1 heure afin de
préserver dans des conditions optimales les protéines, lipides, glucides et
sites antigéniques nécessaires aux techniques histologiques et
immunohistochimiques.
 Le temps minimum de fixation, délai entre la mise dans le formol et la prise en charge technique, est de :
• 6 heures pour les biopsies
• 24 heures pour les exérèses de petite taille
• 48 heures et plus selon la taille de la pièce pour les organes complexes
 En cas de flacons multiples, il est impératif de les différentier sur le flacon lui-même ainsi que sur les
demandes d’examen et d’indiquer le siège du prélèvement.

 Orientation des pièces opératoires : certaines pièces opératoires nécessitent

une orientation en bloc opératoire avant fixation au moyen de fils ou autres
moyens pérennes afin de garantir une analyse macroscopique dans
les conditions optimales (Par exemple : prostate, sein, …). AGEN ALBI CASTRES
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➔ Mode opératoire

 Les prélèvements sont conditionnés dans du Formol à 4% - Cf. Figure 1

 Choisir un contenant adapté à la taille du prélèvement

Seau 1L

Flacon 180 mL
Seau 5L
Flacon 60 mL

Flacon 10 mL

Seau 2L

Figure 1 - Les différents flacons et seaux de formol à 4 %

Flacon 10 mL - Conditionnement des biopsies et des exérèses de petite taille <5mm

Flacon 60 mL - Conditionnement des biopsies prostatiques, peaux, exérèses >5mm
Flacons de 180 mL - Conditionnement des exérèses et pièces opératoires de taille moyenne
Seaux de 1L, 2L et 5L – Conditionnement des pièces opératoires volumineuses

 Vérifier la date de péremption

 Identifier par le nom et prénom chaque flacon

 Différentier les flacons en fonction de la localisation dans le cas de prélèvements multiples

Le volume de formol du flacon doit représenter à minima 5 fois le volume de la pièce.

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 Choisir et remplir une demande d’examen en fonction de la nature du prélèvement

Date / Heure
Préconisations
prélèvement

Identité
patient

Prescripteur

Informations
prélèvement
Traitement Bon de commande
Antécédents

Réservé
laboratoire

Figure 2 – Demande d’examen recto : identification du Figure 3 – Demande d’examen verso : renseignements et
patient et du prélèvement préconisations de conditionnement et bon de commande

RAPPELS :

 Une attention particulière est à porter à des fins d’identitovigilance. Compléter impérativement les items
Nom de naissance /Prénom / Sexe /Date de naissance / N° Sécurité sociale.
 La date de prélèvement, l’heure de prélèvement ainsi que l’heure de mise en fixation revêtent une
importance capitale pour le suivi de la fixation des prélèvements et la réalisation de techniques
complémentaires.
 Les renseignements cliniques et les antécédents/traitements sont nécessaires à la réalisation et à une
bonne interprétation de la macroscopie et de l’histologie du prélèvement.
 Il est important d’informer le patient quant à sa volonté de transmission de ces renseignements cliniques
et/ou blocs et lames afin de recherche clinique ou d’étude par les centres de dépistage du cancer.

 Joindre la demande d’examen au(x) flacon(s) et les placer dans les

sachets dédiés : 1 Sachet / Examen

 Déposer les prélèvements ainsi conditionnés à l’endroit dédié

à l’acheminement au laboratoire

 Remplir les outils de traçabilité mis en place

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Figure 4 - Sachet avec poche ventrale MONTAUBAN MONTPELLIER
et code barre détachable pour plus SERIGNAN VERNOUILLET
de traçabilité

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ETAPE 3 : ACHEMINER, CONSERVER ET ELIMINER

 Conservation et acheminement à température ambiante ;

 Pas de délai de conservation maximal ;
 Au laboratoire les prélèvements sont conservés pour raison diagnostique 1 mois après macroscopie puis éliminés
selon les filières réglementaires.

2. IMMUNOFLUORESCENCE » (IF) – Cas particulier

1. Définition
L’immunofluorescence cutanée directe a pour objectif la détection des immunoglobulines (autoanticorps) ou du
complément déposé dans la peau. Cet examen a un intérêt dans trois situations :
• Le lupus : détection d’une bande lupique (Cf. « Lupus érythémateux disséminé ») ;
• Les maladies bulleuses auto-immunes ;
• Les vascularites cutanées pour la détection de complexes immuns dans les parois des capillaires
dermiques.

2. Mode opératoire

ETAPE 1 : PRELEVER et CONDITIONNER

 Prélever :
 Un prélèvement biopsique sur une bulle récente ou intacte, en périphérie du décollement, pour examen
histologique classique → Flacon formol 4%
 Un prélèvement biopsique en peau saine péri bulleuse, sans fixation pour examen en immunofluorescence
directe → Flacon avec sérum physiologique

 Conditionner :
 Remplir la demande d’examen comme pour une histologie
 Conditionner les 2 flacons dans un sachet avec la demande d’examen

ETAPE 2 : ACHEMINER

 Acheminer rapidement* à température ambiante

* En cas d’acheminement différé, conserver le flacon réservé à l’IF au frais.

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 3. CYTOLOGIE
ETAPE 1 : PRELEVER, CONDITIONNER, ACHEMINER et CONSERVER - (Tableau 1)

Conditions Délai de
Type de
Comment Préconisation / Mode de recueil acheminement et conservation
cytologie
conservation maximal
Apposition ou empreintes de pièce(s) Sur lames avec ou sans fixation
opératoire(s) (ex : ganglion)

Aspiration ou brossage par un orifice Mise en suspension dans flacon** avec fixateur
naturel effectué au cours d’une alcoolique spécifique
exploration fibroscopique ou
endoscopique

Frottis (hors FCU) ou Grattage de Etalement sur lames ou mise en suspension dans
revêtement d’une séreuse ou d’une flacon** avec fixateur alcoolique spécifique
muqueuse / Produit de sécrétion, Acheminement et
écoulement mamelonnaire / conservation à température 15 jours après
Cytologie Expectoration ambiante technique
exfoliatrice
Urines Recueillir la 2ème miction. Les urines de la
première miction du matin ou les urines de 24
heures ne sont pas recommandées
Recueillir les urines de préférence après un effort
physique modéré de 15-20 minutes (marche à
pied, montée d’escalier, …) après le petit
déjeuner
Flacon** avec fixateur alcoolique

Lavage bronchiolo-alvéolaire (LBA) Pot sec + Sachet mention Température Urgence /Acheminement 24h à 4°C 15 jours
réfrigérée dans l’heure à 4°C une fois fixé

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 Conditions Délai de
Type de
Comment Préconisation / Mode de recueil acheminement et conservation
cytologie
conservation maximal
15 jours après
technique pour les
Lésion(s) palpable(s) ou non Acheminement et prélèvements en
Etalement* sur lames ou mise en suspension
Cytoponctions d’organe(s) plein(s) (thyroïde, sein,
dans flacon** avec fixateur alcoolique
conservation à température flacon avec fixateur /
ganglion) ambiante Sans délai pour les
lames
24h à 4°C
Pot sec + Sachet mention Température Urgence / Acheminement
LCR Liquide de ponction lombaire (LCR) 15 jours une fois fixé
réfrigérée dans l’heure à 4°C
post analyse
Liquide articulaire / Contenu de kyste / Acheminement et
Ponctions Liquide épanchement / Liquide conservation à température 15 jours après
péritonéal / Liquide pleural / Péricarde Dans flacon** avec fixateur alcoolique
ambiante technique
etc….

Frottis cervico
Cf. Recommandations particulières « Guide de bonnes pratiques FCU et HPV »
utérins
* Techniques Déposer une goutte ** Flacon avec
d’étalement fixateur alcoolique

Figure 6 – Flacon alcool

Figure 5 - Techniques d'étalement

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ETAPE 2 : CONDITIONNER ET ACHEMINER (Informations complémentaires)

 Choisir et remplir la demande d’examen de cytologie non gynécologique

 Remplir la demande d’examen

Date / Heure
prélèvement

Identité Préconisations
patient

Prescripteur

Informations
prélèvement

Traitement
Antécédents
Bon de commande

Réservé
laboratoire

Figure 7 – Demande d’examen recto : identification du Figure 8 – Demande d’examen verso : renseignements et
patient et du prélèvement préconisations de conditionnement et bon de commande

 Consignes pour renseigner les demandes d’examen : Cf. « RAPPELS » p6

 Joindre la demande d’examen au(x) flacon(s) et les placer dans les sachets
dédiés : 1 Sachet / Examen

 Déposer les prélèvements ainsi conditionnés à l’endroit dédié au ramassage

 Remplir les outils de traçabilité mis en place

ETAPE 3 : ACHEMINER, CONSERVER et ELIMINER

Figure 9 - Sachet avec poche
ventrale et code barre
 Conservation / Acheminement / Délai de conservation : Cf. tableau 1. détachable pour plus
de traçabilité
 Au laboratoire les prélèvements après technique cytologique sont
conservés 15 jours pour raison diagnostique puis éliminés selon les AGEN ALBI CASTRES
filières réglementaires. MONTAUBAN MONTPELLIER
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 4. MODALITES DE RENDU DE RESULTATS

1. Délais

Biopsie : 3 jours Cytologies autres : 2 à 3 jours

Exérèse : 3 à 5 jours LCR : 1 jour
Pièces opératoires : 5 à 8 jours Immunofluorescence : 2 à 3 jours
Cytologies urinaires : 2 à 3 jours

Ces délais sont en jours ouvrés et sont susceptibles d’être allongés en fonction de demande de techniques
complémentaires nécessaires au diagnostic.

2. Modalités de rendu résultats

 Au patient
Aucun résultat ne sera adressé au patient en dehors d’une :
• Demande expresse du prescripteur lors de la transmission du prélèvement : envoi postal
• Demande du patient sur présentation d’un justificatif d’identité en présentiel : remise en main
propre

 Au prescripteur
Les résultats sont adressés par messagerie électronique sécurisée de type Apicrypt ou via le serveur de
résultats ou en main propre via les coursiers ou le service postal.

3. Contacts et renseignements

Nous sommes joignables de 8h00 à 18h :

• Sur appel téléphonique au : 04 67 61 10 15 (Numéro réservé aux professionnels)

• Par mail à : montpellier@inopath.fr

4. Réclamations

Toutes vos réclamations peuvent nous être adressées par voie téléphonique, par mail (Cf. ci-dessus) ou par courrier
à:

Inopath Montpellier
168 rue de la Taillade
34 070 Montpellier

Elles seront immédiatement traitées par notre équipe, une réponse vous sera adressée dans les plus brefs délais.

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