LES PORPHYRIES

Pr Arame Ndiaye
Biochimie
 PLAN
I-GENERALITES

II CLASSIFICATION

III-DOSAGES

IV- VARIATIONS PATHOLOGIQUES

CONCLUSION
 I- GENERALITES
Altérations génétiques ou acquises dans l’activité des enzymes impliquées dans la voie de biosynthèse de
l’hème

liées accumulation porphyrines et précurseurs

excrétion accrue des porphyrines et précurseurs

Historique :
1890 : premières observations/ Ranking-Pardington
femmes avec des crises douloureuses abdominales, trbles nerveux, urine colorées rouge foncé

1911 : description porphyrie cutanée congénitale/ Gunther

1915 : mise en évidence de la structure des porphyrines (isolement uroporphyrine) /Fisher

 I- GENERALITES
Intérêt

 crise aigue de porphyrie est une urgence thérapeutique

prévalence porphyries faible (dans le monde 1,5 pour 100 000 habitants)

important pour les dermatologues et hépatologues, pour la prise en charge de

ces patients

Toutes les porphyries proviennent d’un déficit partiel d’une des enzymes de la
biosynthèse de l’hème
 I- GENERALITES
 Rappels : hème (biosynthèse des porphyrines)
Hème = partie non protéique de Hb

Hb = protéine à structure quaternaire (4 sous-unités polypeptidiques + hème)

 noyaux tétra pyrrolique = porphyrine : 4 noyaux pyrroles unis par des ponts
méthényles
 atome de fer (Fe++) relié aux 4 azotes au centre du noyau protoporphyrine

 fer = site de fixation de l’oxygène

 I- GENERALITES
 Rappels : hème (biosynthèse des porphyrines)

Groupements Hème

Chaîne b2 Chaîne b1

Structure hémoglobine

Chaîne a2 Chaîne a1
 I- GENERALITES
 Rappels : hème (biosynthèse des porphyrines)
 I- GENERALITES
 Rappels : hème (biosynthèse des porphyrines)
Hémoglobine
Globine

Hème Gly + Succinyl CoA

Fe
++
Protoporphyrine AAL AAL

(MITOCHONDRIE
Protoporphyrinogène

Coproporphyrin Uroporphyrinogène PBG

ogène III (CYTOSOL

biosynthèse s’effectue en plusieurs étapes, à partir de matériaux simples,

alternativement dans la mitochondrie et dans le cytosol
III
 I- GENERALITES
Rappels : hème (biosynthèse des porphyrines)
Formation du succinylCoA

Succinate + GTP + CoASH SuccinylCoA + GDP + Pi

enzyme = succinate thiokinase

- cycle de KREBS succinate

succinylCoA
 I- GENERALITES
Rappels : hème (biosynthèse des porphyrines)
Formation de l’acide δ-amino lévulinique (AAL)
COOH
CH2

CH2 COOH
CoA-SH COOH
CO SCoA CH2 CO2
CH2
Succinyl CoA
CH2
+ CH2
CH2 NH2 C CH NH2
C CH2 NH2
COOH O COOH
O
Glycine
Acide -amino -cétoadipique Acide -amino lévulinique (AAL)
 I- GENERALITES
Rappels : hème (biosynthèse des porphyrines)
Formation de l’acide δ-amino lévulinique (AAL)

 enzyme = δ-aminolévulinate synthase

 coenzyme: phosphate de pyridoxal, dérivé Vit B6

 activateurs : ATP, vitamine B1, biotine

 inhibiteurs : hémoglobine, hème, protoporphyrine

 I- GENERALITES

 Rappels : hème (biosynthèse des porphyrines)

Formation du porphobilinogène (PBG)
COOH
COOH
COOH CH
2
COOH CH
2 2H O
2 CH CH
2 2
CH CH
2 2
C C
CH O C
2
C CH
C CH
2
O CH HN
2
CH H N
2 2 G)
NH
2
NH
2
AAL + AAL P o r p h o b i lin o g è n e ( P BG)
 I- GENERALITES
 Rappels : hème (biosynthèse des porphyrines)
 Formation du porphobilinogène (PBG)

 enzyme porphobilinogène synthase ou ALA déhydrase

 enzyme de type allostérique

 régulée /concentration ALA

 activée /glutathion

 inhibée /EDTA
 I- GENERALITES
 Rappels : hème (biosynthèse des porphyrines)
Formation des dérivés tétrapyrroliques
condensation des 4 noyaux

enzyme = porphobilinogène désaminase

premier dérivé tétrapyrrolique = Uroporphyrinogène (UPG)

4 isomères dont I et III produits physiologiquement

UPG III = isomère retrouvé dans le métabolisme de l’Hb (UPG III constitue la voie
principale, quand elle est bloquée l’isomère I prend le relais)
 I- GENERALITES
Rappels : hème (biosynthèse des porphyrines)
Formation des dérivés tétrapyrroliques Propionate (P)

Acétate (A) COOH

HOOC CH2
H2 C CH2
C C
Structure UPG H2C C C CH2
C N
H C
(A) COOH CH2 C C CH2 COOH (A)
NH HN
(P) COOH H2C H2C C C CH2 CH2 COOH (P)
C H C
N
H2C C C CH2

A P A P
C C
CH2 CH2 A A
P A P P
A P (A)
CH2 C
HOO

P A COOH P A
(P) UPG-III
UPG-I
 I- GENERALITES
Rappels : hème (biosynthèse des porphyrines)
Formation des dérivés tétrapyrroliques

Uroporphyrinogène III (UPG III)

Uroporphyrinogène
décarboxylase
CO2

Coproporphyrinogène III
 I- GENERALITES
Rappels : hème (biosynthèse des porphyrines)
Formation des dérivés tétrapyrroliques

 retour dans la mitochondrie du coproporphyrinogène

décarboxylation et oxydation des deux chaînes latérales propioniques (P)

donnent vinyles (V) protoporphyrinogène III (PPG III)

OXYDASE

protoporphyrine III
 I- GENERALITES
Rappels : hème (biosynthèse des porphyrines)
Formation de l’hème

fixation Fe++

enzyme mitochondriale foie, moelle osseuse, et érythrocytes

enzyme = hème synthase ou ferrochélatase

activée / ascorbate, cystéine, glutathion

 I- GENERALITES
Rappels : hème (biosynthèse des porphyrines)
Au niveau des gènes (3 sortes de gènes)
Gène régulateur qui inhibe la transmission de l’information
Gène opérateur et Gènes de structure qui sont transcrits / ARNm pour donner les
enzymes nécessaires à la biosynthèse de l’hème

Au niveau cytoplasmique et mitochondrial ( synthèse proprement dite)

Avec le produit final de synthèse :

l’hème régule la biosynthèse des protéines enzymatiques en modifiant la structure
du répresseur produit / le gène régulateur
 II- CLASSIFICATION ET SIGNES CLINIQUES
Porphyries = maladies héréditaires monogéniques à transmission autosomique
dominante le plus souvent

 2 grandes classes
Classées en fonction de l’enzyme incriminée :

Porphyries érythropoïétiques (accumulation dans la moelle osseuse)

Porphyries autosomiques récessives (2 allèles mutés, activité enzymatique très
inférieure à 50% mais non nulle)

NB: sauf protoporphyrie érythropoïétique (1 seul allèle muté+ 1 allèle faible)

 II- CLASSIFICATION ET SIGNES CLINIQUES
Porphyries hépatiques (accumulation dans le foie)

Porphyries autosomiques dominantes (un allèle muté, activité enzymatique

voisine de 50%)

Fréquence sous estimée

 II- CLASSIFICATION ET SIGNES CLINIQUES
Porphyries érythropoïétiques
Protoporphyrie dominante liée à l’X
porphyrie érythropoïétique congénitale (maladie de Gunther)
protoporphyrie érythropoïétique

Porphyries hépatiques
Porphyries déficiente en ALA-déhydrase
porphyries aigues intermittentes
 porphyries cutanées tardives
Porphyries mixte (Variegata)
Coproporphyries héréditaires
 II- CLASSIFICATION ET SIGNES CLINIQUES

Types de porphyries
 II- CLASSIFICATION ET SIGNES CLINIQUES
Enzymes impliquées
Porphyrie Déficit enzymatique Type

Porphyrie déficit en ALA-Déhydratase ALA déshydratase Hépatique

Porphyrie aiguë intermittente PBG désaminase Hépatique

Porphyrie cutanée Uroporphyrinogène décarboxylase Hépatique

tardive

Uroporphyrinogène synthase Erythropoïétique

Maladie de Günther

Coproporphyrie Coproporphyrinogène oxydase Hépatique

héréditaire

Porphyrie variegata (PV) Protoporphyrinogène Hépatique

oxydase

Protoporphyrie érythropoïetique Ferrochelatase Erythropoïétique

 II- CLASSIFICATION ET SIGNES CLINIQUES
 Anomalies enzymatiques différents signes biochimiques et biologiques
MUTATION ADN

ANOMALIES DES ENZYMES

Accumulation ALA,PBG, Accumulation porphyrinogènes

Diminution hème cellulaire dans la peau et les tissus
et liquidien

Oxydation spontanée
porphyrinogènes et porphyrines
Signes neuro-psychiatriques

Photosensibilité
 II- CLASSIFICATION ET SIGNES CLINIQUES
Signes cliniques
représentés essentiellement par :
syndrome abdominal : inaugural, douleurs atypiques , atroces, crampes
épigastriques avec vomissements

syndrome neurologique : engourdissements, fourmillements, avec parfois

paralysie des membres et doigts pouvant atteindre les muscles respiratoires

 syndrome psychique : trouble du caractère, anxiété, irritabilité, agressivité

Syndrome cutané : éruption bulbeuse, pigmentation des régions exposées à la

lumière
 II- CLASSIFICATION ET SIGNES CLINIQUES
Données cliniques et fréquence des formes
Porphyries Clinique F. déclenchants Transmission Fréquence
(%)

Maladie de Gunther Syndrome cutanée, Erythrodontie, Photosensible Récessif 0,8

Splénomégalie (anémie hémolytique (apparition dès la petite
Hypertricose, hirsutisme enfance)

Protoporphyries Syndrome cutanée (urticaire géant avec Photosensible Dominant 1,8

érythropïétiques plaques d’érythème)

aigues intermittentes Syndrome abdominal, neurologique, Barbituriques Dominant 60

psychiatrique

cutanée tardive Syndrome cutané, diabète, Photosensible, alcool Acquise 37

hémochromatose Héxachlorobenzène

mixte (Variégata) Syndrome cutané, abdominal, Dominant Rare sauf en

neurologique Afrique du Sud

Coproporphyries Syndrome abdominal, parfois Barbituriques Dominant Rare

héreditaires neurologique
 II- CLASSIFICATION ET SIGNES CLINIQUES
Fréquence des signes cliniques
Douleurs abdominales et lombaires 98 %
Vomissements, constipation 72 %
Faiblesse musculaire 68 %

Tachycardie 62 %
Insomnie, anxiété, agitation 60 %
Poussées hypertensives 45 %
Convulsions 15 %

Paralysies 10 %

Urines colorées rouges 80 %

(au moins quand elles sont laissées à la lumière, 30 à 60 min après
l’émission)

Hyponatrémie 65 %
 III-DOSAGES
Dosages des composés porphyriques et de leurs précurseurs

Sang (sérum, érythrocytes)

Urines

Matières fécales
 III-DOSAGES
Prélèvement
questions à poser aux patients

 notion de porphyrie héréditaires ou des proches

 en cas de crise, enquête sur la prise de médicaments : inducteurs d’ALA-synthase

(barbituriques, quinolones de 1ére génération, allopurinol…….. =médicaments
porphyrinogèniques)

 Alcool ou régime hypocalorique

 III-DOSAGES
Prélèvement
 Sang

prélèvement sang veineux sur tube EDTA

conservé à l'abri de la lumière

acheminement rapide (< 48 h et à 4°C)

Aspect fluorescent due à l’uroporphyrine I

 III-DOSAGES
Prélèvement
 Urines
50 à 100 ml, premières urines du matin

Conservé à l’abri de la lumière

Acheminer rapidement (< 48 h à 4°C)

Coloration brune ou rosée avec fluorescence rouge (UP I, CPI, UPIII)

 III-DOSAGES
Prélèvement
 Selles
Echantillon de selles après 3 jours de régime sans viande saignante

Transport à l'abri de la lumière

Acheminer rapidement (< 48 h à 4°C)

Fluorescence rouge due à UP, CP I et III

 III-DOSAGES
Méthodes de dosage
+++ méthodes
Sang
détermination activité enzymatique
Détermination des porpyrines, protoporphyrines, coproporphyrines/

Spectrophotométrie

Spectrofluorimétrie
 III-DOSAGES
Méthodes de dosage
Principe de la spectrophotométrie
une lumière d’intensité I0 passe à travers une solution
une partie absorbée / le mélange
Intensité I transmise < I0 à une longueur d’onde donnée
permet de définir l’absorbance de la solution
Suivant la relation de Beer-Lambert qui décrit :
à une longueur d'onde donnée, l’absorbance d’une solution proportionnelle à
sa concentration, et à la longueur du trajet optique

D.O. = .I.C.  = coefficient d’absorption moléculaire de la substance

L = longueur du trajet optique
C = concentration de la substance
 III-DOSAGES
Méthodes de dosage
 Principe de la spectrofluorimétrie
basé sur l’analyse de la fluorescence d'un échantillon
utilisation d'un rayon de lumière (habituellement dans UV)
excitation de certains composés
suivi émission lumière de plus basse énergie (typiquement de la lumière visible)
molécules excitées de leur état fondamental vers un des nombreux niveaux
électroniques, par absorption d'un photon

retour à l’état fondamental s’accompagne d’une émission de fluorescence

proportionnelle à la concentration de molécule de départ
 III-DOSAGES
Méthodes de dosage

Urines :
 recherche PBG avec le réactif d’Ehrlich

 dosage ALA (après condensation à acétyl-acétone) et PBG /

chromatographie d’échange d’ions suivie d’une détection spectrophotométrique

 séparation de l’extrait urinaire à l’UV /chromatographie sur couche mince

 III-DOSAGES
Méthodes de dosage

Selles
dosage des porphyrines/HPLC en phase reverse avec détection fluorimétrique

séparation /ch. sur couche mince, des porphyrines dans un échantillon recueilli
pendant plusieurs jours et séché à 60°

moléculaire, par analyse de l’ADN

diagnostic de certitude
/mise en évidence de mutations au niveau des gènes qui codent pour les enzymes
 III-DOSAGES
Valeurs usuelles
à titre indicatif

Sang
Sérum :
Coproporphyrines : 0-10nmol/l
ALA : 0,8-10umol/l

Erythrocytes :
coproporphyrines < 150 nmol/l de globules rouges
protoporphyrines < 1900 nmol/l de globules rouges
 III-DOSAGES
Valeurs usuelles
Urines
porphyrines totales < 30 nmol/mmol de créatinine

coproporphyrines < 20 nmol/mmol de créatinine

uroporphyrines < 10 nmol/mmol de créatinine

ALA < 3,4 µmol/mmol de créatinine

PBG ≤ 1,10 µmol/mmol de créatinine

 III-DOSAGES
Valeurs usuelles
Selles
uroporphyrines traces

porphyrines totales < 200 nmol/g de poids sec de selles

coproporphyrines < 30 nmol/g de poids sec de selles

protoporphyrines < 100 nmol/g de poids sec de selles

NB: augmentation de copro et proto est importante dans une variante sud africaine
 III-DOSAGES
Détermination activité enzymatique

prélèvement sang total sur tube EDTA

méthodes enzymatiques

confirmation du type de porphyrie (diminution de 50 % de l’activité)

identification des porteurs pré-symptomatiques dans une famille de patients

 III-DOSAGES
Détermination activité enzymatique
PBG Désaminase /porphyrie aiguë intermittente

URO III cosynthétase /Porphyrie érythropoïétique congénitale

URO décarboxylase/Porphyrie cutanée

COPRO oxydase/Coproporphyrie héréditaire

PROTO oxydase/Porphyrie Variégata

Ferrochélatase /Protoporphyrie érythropoïétique

 IV- VARIATIONS PATHOLOGIQUES
Maladie de Gunther
Sang et moelle : réticulocytes et érythrocytes fluorescents (diminution durée de vie
des GR)
Uroporphyrine I et Coproporphyrine I
Protoporphyrine dans les limites de la normale

Urines brunes ou rosées

Centaines de umol Uroporphyrine
Quelques umol Coproporphyrine I et Uro III éliminés
ALA et PBG dans les limites de la normale

Selles : fluorescence rouge

 IV- VARIATIONS PATHOLOGIQUES
Protoporphyrie érythropoïétique
La plus récemment décrite

Se présente comme un urticaire (avec plaque d’érythème, douloureux)

Apparaissant à l’exposition à la lumière solaire

Excès production protoporphyrine dans l’érythrocyte

son élimination dans les matières fécales
son accumulation dans le foie
 IV- VARIATIONS PATHOLOGIQUES
Protoporphyrie érythropoïétique

Sang : Protoporphyrine libre des érythrocytes aug.

Sérum : traces de Protoporphyrine et coproporphyrine

Urines normales

Matières fécales : augmentation des protoporphyrines et coproporphyrines

(pas d’uroporphyrines)
 IV- VARIATIONS PATHOLOGIQUES
Porphyrie aigue intermittente
Plus fréquente des porphyries

Maladie de l’adulte jeune

Plusieurs facteurs déclenchent les poussées :

Accouchement, traumatisme
Infections
Opération chirurgicale ( médicaments pré et post anesthésiques
Médicaments : diurétiques, Oestrogènes
 IV- VARIATIONS PATHOLOGIQUES

Porphyrie aigue intermittente

Sérum : passagère PBG et ALA (pas de porphyrines)

Urines : souvent coloration normale à l’émission (oxydation à la lumière et par

chauffage)
PBG et ALA (pas de porphyrines)

 Selles : légères aug. coproporphyrines et protoporphyrine

Uroporphyrine Nle
 IV- VARIATIONS PATHOLOGIQUES
Porphyries cutanées tardives
Porphyrie fréquente sans gravité, à photosensibilité cutanée
urines
 ALA , PBG, URO III et I
Copro I et III

 étude des porphyrines fécales/ HPLC dans les selles un pic caractéristique

sang aucune anomalie

 IV- VARIATIONS PATHOLOGIQUES
Constituants modifiés
porphyries Urines Selles Sang (sérum ou Perturbations
érythrocytes) métaboliques
Maladie de Gunther URO I, COPRO I URO I, COPRO I Se : URO I, COPRO I Aug ALA synthétase
Déficit PBG-isomérase
Coproporphyrie - - Er : Coproporphyrine Excés oxydation
érythrocytaire Coproporphyrinogène III
hérediataire Coproporphyrine
Porphyrie aigue PBG-ALA - PBG-ALA Aug ALA Synthase
intermittente (URO III) (URO III) Déficit UPG synthase

Porphyrie cutanée URO I et III URO I et III - Aug ALA Synthase

tardive COPRO I et III Déficit UPG décarboxylase
et CPG oxydase
Porphyrie mixte PBG-ALA URO - défaut régulation enseble
URO Protoporphyrine enzymes hépatiques
Coproporphyrie COPRO III COPRO III - CPG oxydase ??
héreditatire
 CONCLUSION

Porphyries = pathologies due à une accumulation de porphyrines au niveau de

l’organisme

mise en évidence dans le sang et dans les urines (ALA et PBG)

conduit à la mise en route d’un traitement précoce (hème-arginate en perfusion)

disparition de manière spectaculaire les symptômes