TUGAS MAKALAH

TEKNIK LABORATORIUM KIMIA ORGANIK

KROMATOGRAFI RADIAL

DISUSUN OLEH:

AHMAD MALDINI (H031 17 1023)

LA ODE EBET (H031 17 1027)

ERISKA REGITA CH. (H031 17 1309)

MUH. ARFADILA RUSTAM (H031 17 1

DEPARTEMEN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS HASANUDDIN
MAKASSAR
2019
 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Kromatografi merupakan suatu metode pemisahan yang dewasa ini telah

banyak digunakan, dibandingkan dengan metode yang lainnya seperti detilasi,

kristalisasi, pengendapan, ekstraksi, dan lain-lain mempunyai keuntungan dalam

pelaksanaan yang lebih sederhana, penggunaan waktu yang sangat singkat terutama

mempunyai kepekaan yang tinggi serta mempunyai kemampuan memisahkan yang

tinggi, Metode ini digunakan, jika dengan metode lain tidak dapat di lakukan

misalnya karena jumlah cuplikan sangat sedikit atau campurannya kompleks.

Meskipun dasar kromatografi adalah suatu proses pemisahan namun banyak

diantara cara ini dapat digunakan untuk analisi kuatitatif. Jenis-jenis kromatografi

yang bermanfaat dalam analisi kualitatif dan analisis kuantitatif adalah

kromatografi kertas, kromatigrafi lapis tipis (KLT), kromatografi kolom,

kromatografi gas, dan kromatografi cair kinerja tinggi serta kromatografi dengan

sistem radial.

Berbagai metode kromatografi memberikan cara pemisahan paling kuat.

Karena pemanfaatannya yang leluasa, dipakai secara luas untuk pemisahan analitik

dan preparatif. Biasanya, kromatografi analitik dipakai pada tahap permulaan untuk

semua cuplikan, dan kromatografi preparatif hanya dilakukan jika diperlukan fraksi

murni dari campuran. Pemisahan secara kromatografi dilakukan dengan cara

mengotak-atik langsung beberapa sifat fisika umum dari molekul. Pemisahan

senyawa biasanya menggunakan beberapa teknik kromatografi. Pemilihan teknik

kromatografi sebagian besar bergantung pada sifat kelarutan senyawa yang akan

dipisahkan. Berdasarkan uraian tersebut, maka akan membahas tentang metode

kromatografi sistem radial

1.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang, maka dapat ditarik sebuah rumusan masalah.

1. Apa yang dimaksud kromatografi radial?

2. Bagaimana prinsip kerja kromatografi sistem radial?

3. Apa kelebihan dan kekurangan dari kromatografi sistem radial?

1.3 Tujuan

1. Untuk mengetahui apa yang dimaksud kromatografi radial.

2. Untuk mengetahui bagaimana prinsip kerja kromatografi sistem radial.

3. Untuk mengetahui kelebihan dan kekurangan dari kromatografi sistem

radial.
 BAB II

ISI

2.1 Prinsip Kerja dan Gambar Alat

2.1.1 Prinsip Kerja Alat

Kromatotron memiliki prinsip sama seperti kromatografi klasik dengan aliran

fase gerak yang dipercepat oleh gaya sentrifugal. Kromatografi jenis ini

menggunakan rotor yang dimiringkan dan terdapat dalam ruang tertutup oleh plat

kaca kuarsa, sedangkan lapisan penyerapnya berupa plat kaca yang dilapisi oleh

silika gel. Plat tersebut dipasang pada motor listrik dan diputar dengan kecepatan

800rpm. Pelarut pengelusi dimasukkan ke bagian tengah pelarut melalui pompa

torak sehingga dapat mengalir dan merambat melalui lapis tipis karena gaya

sentrifugal. Untuk mengetahui jalannya proses elusi dimonitor dengan lampu UV

(Hostettmann, 1995).

Gas Nitrogen dialirkan kedalam ruang plat untuk mencegah pengembunan

pealrut pengelusi dan mencegah oksidasi sampel. Pemasukan sampel itu diikuti

dengan pengelusian menghasilkan pita2 komponen berupa lingkaran sepusat. Pada

tepi plat, pita2 akan terputr keluar dengan gaya sentrifugal dan ditampung dalam

botol fraksi, cek dg KLT (Hostettmann, 1995).

Sampel yang akan digunakan dipisahkan sebagai larutan, dekat pusat disk yang

berputar dilapisi dengan penyerap lapisan tipis. Elusi dengan bentuk pelarut

melingkar dari komponen terpisah yang berputar keluar dari tepi rotor bersama-

sama dengan pelarut.

Kapasitas :mencapai 500 mg per komponen, 1-2 gram total, misalnya dimetil

dan dietil ftalat dalam heksana - etil asetat 9: 1 pada lapisan 4 mm

silika gel.

Sorbents :Silica gel, alumina dan silika gel - perak nitrat; tidak berguna

dengan RP sorben.

Pelarut :Kompatibel dengan semua pelarut kromatografi, termasuk asam

asetat; tidak cocok untuk digunakan dengan mineral

asam (Asian Journal of Pharmacy and Life Science, 2011).

Suatu metode pemisahan komponen kimia yang berdasarkan prinsip partisi

dan absorpsi, komponen kimia bergerak berdasarkan perbedaan kelarutan dan

kepolaran tiap-tiap komponen dalam cairan pengembang yang pemisahannya

dipercepat dengan gaya sentrifugal, dengan menggunakan lempeng kaca bundar

dengan diameter 24 cm. hasil pemisahan ditampung dalam vial sebagai fraksi, dan

fraksi tersebut dapat pula dikumpulkan melalui pengerukan.

2.1.2 Gambar Rangkaian Alat

Gambar I. Kromatotron
 Fase stasioner digunakan adalah penyerap dilapisi sebagai lapisan tipis pada

rotor yang digerakkan oleh motor. Sampel solusi untuk dipisahkan diterapkan pada

rotor melalui inlet dan sumbu. Pada saat elusi dilakukan dengan menggunakan fase

gerak, band konsentris terbentuk zat terpisah . Seperti pembangunan berlangsung,

band konsentris zat dipisahkan menuju ke tepi rotor dan meninggalkan rotor.

Saluran mengumpulkan eluat akan membawanya ke tabung luar. Berbagai

komponen instrumentasi termasuk wadah utama, pompa pelarut, rotor, tutup teflon,

sumbu dan pembuluh koleksi (Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry

2015).

Bagian-bagian alat dan fungsinya (Journal of Pharmacognosy and

Phytochemistry, 2015):

1. WadahUtama

Wadah utama terdiri dari polimer asetal. Setelah kromatografi selesai,

pelarut yang melunakkan atau membengkak asetal harus dicuci dengan

heksana. Asam asetat, trimetil amina dan amonia dapat digunakan sebagai

aditif fase mobile. Kerusakan pada bagian plastik kapal dapat dikurangi

dengan melewatkan nitrogen.

2. Pompa Solvent

Aliran fase gerak dapat diatur dengan pompa. Selain itu, dapat digunakan

untuk pengenalan larutan sampel. Laju aliran fase gerak dapat bervariasi

untuk berbagai ketebalan fase diam seperti yang diberikan dalam tabel 1.

Tabel 1: Laju aliran di ketebalan sorben yang berbeda Ketebalan Sorbent

Layer (mm) Flow Rate (ml / menit)

3. Rotor

Fase diam yang terdiri dari disk melingkar dilapisi dengan Lapisan penyerap

disebut sebagai rotor. Rotor memiliki lubang di pusat sehingga bisa

diperbaiki pada motor instrumen. Rotor dengan berbagai ketebalan lapisan

sorben yang tersedia dan berdasarkan ketebalan lapisan sorben; jumlah

sampel yang akan diambil bervariasi (Tabel 2).

Tabel 2: Contoh beban untuk ketebalan sorben yang berbeda. Sorbent

Lapisan Tebal (mm) Contoh Beban (mg)

4. Teflon tutup

Sebuah UV transparan yang tertutup di komponen utama yang

memungkinkan pengguna untuk mengawasi pergerakan Band.

5. Wick
 Fungsi utama dari sumbu adalah untuk membawa solusi sampel ke rotor.

Sumbu umumnya terdiri dari berbulu tipis tali polyester. Kapas jahit atau

benang tidakdirekomendasikan.

6. Koleksi wadah

Saluran koleksi yang dirancang khusus di pinggiran rotor mengumpulkan

fase gerak elut. Sebagai komponen utama wadah dipasang agak miring,

gravitasi memainkan peran dalam pengeringan eluen.

2.2 Uraian Alat

1. Uraian kromatotron

Sentrifugal kromatografi lapis tipis adalah teknik kromatografi preparatif

yang menggunakan gaya sentrifugal untuk pemisahan sistem multi-komponen.

Sebuah instrumen yang biasa digunakan dalam teknik ini diberi nama sebagai

kromatotron (Asian Journal of Pharmacy and Life Science, 2011).

Ciri khas penyiapan kromatotron adalah sentrifugal dipercepat, radial, kromatografi

lapis tipis. Sampel yang akan dipisahkan digunakan, sebagai larutan, dekat dari

pusat disk yang berputar dilapisi dengan lapisan tipis dari sorben. Elusi dengan

bentuk pelarut band dari komponen terpisah yang berputar melingkar keluardari

tepi rotor bersama-sama dengan pelarut. Sebuah sistem pengumpulan baru

membawa eluat untuk satu output tabung (Asian Journal of Pharmacy and Life

Science, 2011).

2. Keuntungan

Keuntungan khusus(Asian Journal of Pharmacy and Life Science, 2011):

 Tidak ada "bercak" sampel atau gesekan band.

 Pemisahan selesai dengan cepat, biasanya dalam 20 menit.

 Sebuah UV tutup transparan memungkinkan pengamatan langsung

dari UV menyerap atau berwarna senyawa selama pemisahan.

 Ketebalan lapisan 1, 2, 4 atau 8 mm memberikan tinggi daya

tampung. Lapisan penyerap mudah diregenerasi di situ untuk untuk

digunakan kembali.

 Pelarut yang digunakan hemat. Elusi gradien mudah. Suasana

nitrogen mencegah oksidasi sampel.

 Compact (mudah dipindahkan dari laboratorium ke laboratorium),

beberapa kontrol, tidak ada tekanan tinggi.

 Senyawa tanpa kromofor terdeteksi di fraksi dielusi dengan TLC

konvensional.

 Koneksi ke indeks dan UV monitor bias tidak direkomendasikan.

 Bisa digunakan dengan kolektor fraksi meskipun tangan

Koleksi memadai.

Keuntungan:

 Cara kerja sederhana.

 Cepat pemisahan biasanya selesai dalam 30 menit.

 Tidak perlu mengerok pita.

 Pemakaian pelarut tidak boros.

 Rotor yang sudah dilapisi dapat diregenerasi.

 Pencemar yang terekstraksi dari penjerap lebih sedikit daripada

yang terekstraksi pada KLT preparatif.

 Penotolan sampel mudah.

  Dapat dilakukan pengembangan landaian bertahap.

 Kemungkinan oksidasi senyawa yang peka lebih kecil daripada

pada cara KLT preparatif.

 Perolehan kembali senyawa yang dipisah lebih besar daripada

KLT preparatif.

3. Kerugian

 Fase diam yang dapat dipilih terbatas.

 Rotor yang sudah dilapisi tidak ada dalam perdagangan.

 Daya pisah terbatas.

 Cara pendeteksian terbatas.

 Sistem pengumpul mungkin tercemari

4. Pembuatan plat kromatotron

(United StatesPatent Application Publication, Illias et al, 2014).

Pemisahan dengan kromatografi radial menggunakan plat kaca yang

berbentuk bundar dilapisi dengan bubur silika gel 60 PF254dan akuades dingin.

Ketebalan silika gel yang dipakai sesuai dengan banyaknya sampel yang akan
dipisahkan yaitu: 1 mm, 2 mm dan 4 mm. Perbandingan antara silika gel dengan

akuades dingin yang ditetapkan yaitu untuk 1 mm (45:90), 2 mm (65:130) dan 4

mm (115:200) (Repostury universitas of Riau, 2013).

Pembuatan plat kaca dilakukan dengan mencampurkan silika gel dan

akuades dingin sesuai perbandingan yang telah ditentukan. Bubur tersebutdiratakan

pada pelat kaca, padabagian pinggir atau tepi plat diberi selotip agar bubur silika

gel tidak tumpah kemudian bubur diratakan dengan suatu alatdengancara memutar

plat pada satu arah secara perlahan. Setelah plat selesai dibuat, platdapat

dikeringkan selama ± 24 jam atau dapat dikeringkan dalam oven pada suhu60-

70ºC(Repostury universitas of Riau, 2013).

Plat kromatografi radial (kromatotron) yang telah dibuat dipasang pada

poros listrik dan diputar pada 800 rpm. Ketebalan fasa diam 1-4 mm dan sampel

yang dapatdipisahkan sebanyak 0,1-1 g. Pada awal pemisahan pelarut yang

digunakan mulaidari kepolaran rendah kemudian ditingkatkan kepolaran secara

bergradien. Rotorterdapat dalam ruang yang tertutup dengan plat kaca kuarsa.

Penutup inimemungkinkan kita mengamati bercak tak berwama tetapi dapat

menyerap sinarUV dengan memakai lampu UV. Hasil pemisahan kromatografi

radial ditampung didalam vial(Repostury universitas of Riau, 2013).

Resep baru ini menggantikan resep 1 yang didasarkan pada gel silika PF

(Merck 7749). Saat ini sudah ada persyaratan untuk melindungi lapisan dari angin

selama pengeringan (Harrison Research, 2014).

Lapisan baru dapat dikeringkan dengan salah satu dari beberapa metode:

1. Exposure ke udara dengan atau tanpa kipas angin.

2. Heating dengan lampu 60 watt di atas rotor

 3. Oven pengeringan pada suhu tidak lebih tinggi dari 50 ° C .

Silica gel TLC kelas standar (berisi 254 nm indikator neon) adalah Sigma

- Aldrich item no . 288586. Kalsium hemihydrate sulfat (plester dari Paris, gypsum

kering) tersedia dari berbagai pemasok bahan kimia tetapi bahan dari toko hardware

biasanya dari kualitas yang lebih baik .Tutup lapisan dan memungkinkan untuk

mengatur selama setidaknya 1 jam sebelum pengeringan .

Untuk pencampuran mudah, tabung harus tidak lebih dari 70 % penuh

dengan sorben kering .

5. Faktor pertimbangan

Ada dua faktor yang dipertimbangkan dalam sentrifugal TLC: laju fase gerak

dan laju rotasi.

a. Laju fase gerak

 Seiring dengan resolusi, waktu pemisahan tergantung pada tingkat

fase gerak mengalir. Tingkat aliran tinggi mempercepat Proses

pemisahan tetapi membutuhkan volume yang lebih besar dari pelarut.

b. Laju rotasi

Laju elusi serta faktor pemisahan tergantung pada tingkat rotasi dari

sistem kromatografi. Itu pemisahan maksimum / resolusi dicapai pada

tingkat rendah rotasi sistem kromatografi. Resolusi tertinggi dapat

diperoleh pada laju alir menengah dan kecepatan putaran.

2.3 Cara Penggunaan Alat

Pembuatan plat kaca dilakukan dengan mencampurkan silika gel dan

akuades dingin sesuai perbandingan yang telah ditentukan. Bubur tersebut

diratakan pada pelat kaca, pada bagian pinggir atau tepi plat diberi selotip agar

bubur silika gel tidak tumpah kemudian bubur diratakan dengan suatu alat

dengancara memutar plat pada satu arah secara perlahan. Setelah plat selesai dibuat,

platdapat dikeringkan selama ± 24 jam atau dapat dikeringkan dalam oven pada

suhu60-70ºC(Repostury universitas of Riau, 2013).

Plat kromatografi radial (kromatotron) yang telah dibuat dipasang pada

poros listrik dan diputar pada 800 rpm. Ketebalan fasa diam 1-4 mm dan sampel

yang dapatdipisahkan sebanyak 0,1-1 g. Pada awal pemisahn pelarut yang

digunakan mulaidari kepolaran rendah kemudian ditingkatkan kepolaran secara

bergradien. Rotorterdapat dalam ruang yang tertutup dengan plat kaca kuarsa.

Penutup inimemungkinkan kita mengamati bercak tak berwama tetapi dapat

menyerap sinarUV dengan memakai lampu UV. Hasil pemisahan kromatografi

radial ditampung didalam vial (Repostury universitas of Riau, 2013).

BAB II

PENUTUP

A. Kesimpulan

1. Kromatotron merupakan suatu alat kromatografi yang digunakan untuk

memisahkan komponen-komponen kimia yang ada dalam suatu sampel

menggunakan gaya sentrifugal dengan kecepatan 800 rpm.

2. Prinsip metode ini dengan pemisahan komponen kimia yang berdasarkan

prinsip partisi dan absorpsi, komponen kimia bergerak berdasarkan

perbedaan kelarutan dan kepolaran tiap-tiap komponen dalam sampel.

 DAFTAR PUSTAKA

Asian Journal Of Pharmacy And Life Science, Naval Kulkarni Et Al,2011,

“Centrifugal Thin Layer Chromatography”

Harrison Research, 2014, http://www.sbwave.com/chromatotron/index.html

Repostury universitas of Riau, 2013, Perpustakaan Universitas Riau, Diakses Pada

United States Patent Application Publication, Illias Et Al, 2014, “Preparation Of

Pre-Coated Rp-Rotors And Universal Chromatorotors, Chromatographic
Separation Devices And Methods For Centrifugal Preparative
Chromatography”

Varsha Agrawal Et al, 2015,“Journal Of Pharmacognosy And Phytochemistry,

Centrifugally Accelerated Thin Layer Chromatography ForIsolation Of
Marker Compounds And Bioactives”