PROPOSAL PENELITIAN

IDENTIFIKASI BAKTERI PENYEBAB INFEKSI NOSOKOMIAL PADA

SARUNG TANGAN BEKAS PAKAI DI RUANGAN PERAWATAN PRIVATE
CARE CENTER (PCC) RS. WAHIDIN SUDIROHUSODO

Disusun dan diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Ahli Madya
Kesehatan

NURFAISAH ABDULLAH
17 3145453021

PROGRAM STUDI DIII TEKNOLOGI LABORATORIUM MEDIS

FAKULTAS TEKNOLOGI KESEHATAN
UNIVERSITAS MEGAREZKY
MAKASSAR
2020
 HALAMAN PERSETUJUAN
Proposal dengan judul:
“IDENTIFIKASI BAKTERI PENYEBAB INFEKSI NOSOKOMIAL PADA
SARUNG TANGAN BEKAS PAKAI DI RUANGAN PERAWATAN PRIVATE
CARE CENTER (PCC) RS. WAHIDIN SUDIROHUSODO”
Telah disetujui untuk dipertahankan dihadapan
Tim Penguji Proposal
Fakultas Teknologi Kesehatan
Universitas Megarezky
Pada hari Jum’at tanggal 17 Juli 2020

Pembimbing I Pembimbing II

(Ennycke Sari., S.Si., M.Kes) (Resi Agestia Waji., S.Si., M.Si)

NIDN. 09 070988 02 NIDN. 09 020883 03

Mengetahui,

Ketua Program Studi DIII Teknologi Laboratorium Medis

Universitas Megarezky

Resi Agestia Waji, S.Si., M.Si

NIDN. 09 020883 03

i
 HALAMAN PENGESAHAN

Pada hari Jum’at tanggal 17 bulan Juli tahun 2020 secara Virtual. Fakultas Teknologi
Kesehatan Universitas Megarezky, telah dilaksanakan Ujian Proposal sebagai salah
satu syarat untuk menyelesaikan pendidikan Program Diploma Teknologi
Laboratorium Medis terhadap mahasiswa atas nama:

Nama : Nurfaisah Abdullah

NIM : 17 3145 453 021
Program Studi : Teknologi Laboratorium Medis
Jenjang : Diploma 3 (DIII)
Judul KTI : “Identifikasi Bakteri Penyebab Infeksi Nosokomial Pada
Sarung Tangan Bekas Pakai Di Ruangan Perawatan
Private Care Center RS. Wahidin Sudirohusodo”

Yang telah disetujui oleh Tim Penguji Proposal, sebagai berikut:

Tim Penguji Tanda Tangan

1. Ennycke Sari, S.Si.,M.Kes ( …………………………… )

2. Resi Agestia Waji, S.Si.,M.Si ( …………………………… )

3. Handayani, S.Si., M.Kes ( …………………………… )

Mengetahui,

Dekan Ketua Program Studi

Prof. Dr. Asnah Marzuki, M.Si., Apt Resi Agestia Waji, S.Si., M.Si
NIP. 195612311987031022 NIDN. 09 020883 03

ii
 KATA PENGANTAR

Bismillahirrahmanirahim

Assalamu’Alaikum Warahmatullahi Wabarakatuh

Puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Allah Tuhan Yang Maha Esa,

yang telah melimpahkan rahmat dan karunia-Nya yang tak terhingga, sehingga

penulis dapat menyelesaikan penyusunan Proposal Peneltian dengan judul

“Identifikasi Bakteri Penyebab Infeksi Nosokomial Pada Sarung Tangan Bekas

Pakai Di Ruangan Perawatan Private Care Center RS. Wahidin Sudirohusodo”

yang merupakan salah satu persyaratan untuk mencapai gelar Ahli Madya pada

Program Studi DIII Teknologi Laboratorium Medis Fakultas Farmasi, Teknologi

Rumah Sakit dan Informatika Universitas Megarezky.

Pada proses penyelesaian proposal penelitian ini, ada kesulitan dan

hambatan yang dihadapi penulis, namun karena adanya kerjasama dan bimbingan

dari semua pihak yang membantu penulis, maka kesulitan dan hambatan tersebut

dapat terselesaikan. Oleh karena itu, dengan hormat dan kerendahan hati penulis

mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Ayahanda Abdullah

S,Pd, M.Si dan Ibunda Ahrawati S.Pd, yang dari penulis lahir selalu memberikan

kasih sayang, pengorbanan, dan doa yang tak terhingga, serta Adik terkasih Nur

Adin Abdullah dan Nurcahyani Abdullah yang selalu memberikan dukungan dan

semangat kepada penulis.

Selama proses penyelesaian Proposal Penelitian ini banyak kesulitan dan

hambatan yang penulis hadapi, namun atas bantuan bimbingan dan kerjasama dari

semua pihak yang terlibat di dalamnya sehingga hambatan dan kesulitan tersebut

iii
 iv

dapat teratasi dengan baik. Untuk itu perkenankanlah penulis dengan segala

hormat mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang sebesar-besarnya

kepada Ibu Ennycke Sary, S.Si.,M.Kes selaku Pembimbing I dan Ibu Resi Agestia

Waji., S.Si.,M.Si selaku Pembimbing II dengan penuh kesabaran, dan keikhlasan

meluangkan waktu, tenaga dan pikirannya untuk memberikan perhatian,

bimbingan dan arahan kepada penulis.

Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada :

1. Ibu Hj. Suryani, SH., MH., selaku Ketua YPI Megarezky Makassar.

2. Bapak Prof. Dr. dr. Ali Aspar Mappahya, Sp.PD. Sp.JP (K)., selaku Rektor

Universitas Megarezky Makassar.

3. Ibu Prof. DR. Dra. Hj. Asnah Marzuki, M.Si., Apt., selaku Dekan Fakultas

Teknologi Kesehatan.

4. Ibu Resi Agestia Waji, S.Si., M.Si., selaku Ketua Program Studi DIII

Teknologi Laboratorium Medis.

5. Ibu Handayani, S.Si., M.Kes., selaku penguji utama.

6. Bapak dan Ibu Dosen serta Staf Universitas Megarezky yang telah berperan

dalam mengajar ilmu pengetahuan kepada penulis sehingga memberikan

kemudahan bagi penulis dalam menyelesaikan pendidikan.

7. Rekan-rekan Mahasiswa Program Studi DIII Teknologi Laboratorium Medis,

Fakultas Teknologi Kesehatan angkatan 2017, dari Kelas 17 A-17 D, terkhusus

buat 17 A teman seperjuangan penulis yang tidak dapat disebutkan satu persatu

yang telah memberikan dukungan selama perkuliahan dan akhir perkuliahan.

 v

Penulis menyadari adanya kekurangan pada proposal penelitian ini, yang

masih jauh dari kesempurnaan, baik itu dari segi penyusunan maupun segi

pengetahuan, karena keterbatasan yang dimiliki penulis sehingga penulis sangat

mengharapkan adanya kritik maupun saran demi kesempurnaan proposal

penelitian ini.

Makassar, Juni 2020

Penulis
 DAFTAR ISI

HALAMAN PERSETUJUAN .......................................................................................i

HALAMAN PENGESAHAN.......................................................................................ii

KATA PENGANTAR..................................................................................................iii

DAFTAR ISI ................................................................................................................vi

DAFTAR TABEL ........................................................................................................ix

DAFTAR GAMBAR.....................................................................................................x

BAB I PENDAHULUAN .............................................................................................1

A. Latar Belakang ......................................................................................................1

B. Rumusan Masalah .................................................................................................4

C. Tujuan Penelitian...................................................................................................5

D. Manfaat Penelitian ................................................................................................5

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...................................................................................6

A. INFEKSI NOSOMIAL .........................................................................................6

1. Pengertian Infeksi Nosokomial ..........................................................................6

2. Pengaruh Infeksi Nosokomial ............................................................................7

3. Faktor Penyebab penularan Infeksi Nosokomial ...............................................8

4. Faktor Yang Menjadi Sumber Terjadinya Infeksi Nosokomial .........................9

5. Pengendalian Infeksi Nosokomial....................................................................10

6. Pencegahan Infeksi Nosokomial ......................................................................11

vi
 vii

B. BAKTERI............................................................................................................12

1. Pengertian Bakteri ............................................................................................12

2. Bakteri Patogen di Rumah Sakit ......................................................................13

3. Mikroorganisme Penyebab Infeksi Nosokomial ..............................................17

C. PRIVATE CARE CENTER................................................................................19

D. TEKNIK KULTUR BAKTERI ..........................................................................20

1. Isolasi atau Penanaman Mikroba......................................................................20

2. Teknik Isolasi dan Penanaman Mikroba Penanaman dari suspense ................22

3. Media Kultur ....................................................................................................27

E. Kerangka Konsep ................................................................................................36

F. Definisi Operasional ............................................................................................37

BAB III METODOLOGI PENELITIAN ....................................................................38

A. Jenis Penelitian....................................................................................................38

B. Lokasi dan Waktu Penelitian...............................................................................38

C. Fokus/Variabel Penelitian ...................................................................................38

D. Populasi dan Sampel Penelitian ..........................................................................38

E. Alat dan Bahan Penelitian ...................................................................................39

1. Alat Penelitian ..................................................................................................39

2. Bahan Penelitian...............................................................................................40

F. Alur Kerja Penelitian ...........................................................................................40

 viii

1. Pengambilan sampel.........................................................................................40

2. Isolasi Bakteri ke Medium BHIB.....................................................................40

3. Penanaman Pada Media NA dan Mac Conkey.................................................41

4. Pewarnaan Gram ..............................................................................................41

5. Identifikasi bakteri pada uji biokimia..............................................................42

6. Pengamatan ......................................................................................................46

7. Interpretasi Hasil ..............................................................................................46

G. Teknik Pengumpulan Data..................................................................................47

H. Teknik Analisis Data...........................................................................................47

I. Etika Penelitian.....................................................................................................47

DAFTAR PUSTAKA..................................................................................................48

LAMPIRAN ................................................................................................................53
 DAFTAR TABEL

Tabel 1.1 Kuman Penyebab Penyakit........................................................……17

ix
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 1.1.Teknik Spread Plate.......................................................................22

Gambar 1.2. Teknik Pour Plate .........................................................................23

Gambar 1.3. Teknik Transfer Aseptik Kultur Mikroba Dari Tabung Reaksi Ke

Cawan Petri.......................................................................................................24

Gambar 1.4. Tipe Goresan Sinambung ............................................................25

Gambar 1.5. Tipe Goresan T ............................................................................ 26

Gambar 1.6. Tipe Goresan Kuadran ................................................................27

x
 BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Rumah sakit sebagai sarana pelayanan kesehatan yang mempunyai fungsi

utama untuk menyediakan dan menyelenggarakan upaya kesehatan yang bersifat

penyembuhan penyakit (kuratif) dan pemulihan kesehatan (rehabilitative) baik

fisik maupun psikososial yang dilakukan secara terpadu bertujuan untuk

mewujudkan derajat kesehatan yang optimal bagi masyarakat (Ilkafah, 2017).

Menurut Peraturan Menteri Kesehatan RI Nomor 44 Tahun 2018 pasal 1 ayat

(1) menyebutkan bahwa Rumah sakit adalah tempat pelayanan kesehatan untuk

menyelenggarakan pelayanan kesehatan secara paripurna yang menyediakan

pelayanan rawat inap, rawat jalan, dan gawat darurat.

Pada kegiatan tersebut, rumah sakit memiliki resiko tinggi untuk menjadi

media pemaparan atau penularan bagi para pasien, petugas atau pengunjung oleh

komponen penyakit yang terdapat di dalam lingkup rumah sakit yang disebut

dengan infeksi nosokomial. Infeksi nosokomial atau Healthcare Associated

Infections (HAIs) adalah infeksi yang didapat dari rumah sakit dan menyerang

pasien yang sedang dalam proses perawatan atau ketika penderita itu dirawat di

rumah sakit.Infeksi ini timbul sekurang-kurangnya dalam waktu 3 x 24 jam (72

jam) sejak mulai di rawat di rumah sakit, dan bukan infeksi kelanjutan perawatan

sebelumnya (Nabillah, 2017).

1
 2

Menurut Kemenkes RI (2017) presentasi infeksi nosokomial di rumah sakit

dunia mencapai sekitar 3 – 12% (rata-rata 9%) atau lebih 1,4 juta pasien di rumah

sakit seluruh dunia. Suatu penelitian yang dilakukan oleh World Health

Organization (WHO) tahun 2009 menunjukan bahwa prevalensi HAIs khususnya

Asia Tenggara sebanyak 10%. Survei prevalensi yang terbaru dilakukan WHO

tahun 2014, di 55 rumah sakit dari 14 negara yang mewakili empat Kawasan

WHO (Eropa, Timur Tengah, Asia Tenggara dan Pasifik Barat) menunjukkan

rata – rata 8,7% pasien rumah sakit mengalami infeksi nosokimial. Setiap saat

lebih dari 1,4 juta orang di seluruh dunia menderita komplikasi dari infeksi yang

diperoleh di rumah sakit. Data dari hasil survey World Health Organozations

(WHO) pada tahun 2016, menyatakan bahwa di Eropa prevalensi kejadian

infeksi nosokomial setiap tahunnya lebih dari 4 juta – 4,5 juta pasien, sedangkan

di Amerika Serikat prevalensi pasien terkena infeksi nosokomial pertahunnya

diperkirakan sekitar 1,7 juta pasien. Prevalensi ini mewakili 4,5% untuk 99.000

kematian (WHO, 2016).

Kebersihan ruang perawatan merupakan komponen dalam kewaspadaan

standar, mutlat dilakukan untuk mendukung proses penyembuhan pasien selama

masa perawatan dan menjalani pengobatan. Tetapi sebagian besar infeksi juga

dapat terjadi di ruangan perawatan yang dapat disebabkan oleh faktor eksternal,

yaitu penyakit yang penyebaran mikroorganismenya melalui benda yang steril

tercampur dengan benda yang tidak steril contoh seperti sarung tangan bekas

pakai bisa menjadi media perantara yang sangat mudah terkontaminasi,

 3

dikarenakan cara penularannya yang secara lansung kontak dengan bagian tubuh

yang memiliki resiko penularan penyakit infeksi oleh mikroorganisme yang

sangat tinggi. Banyak kuman yang terdapat pada sarung tangan bekas pakai

dimana jika sarung tangan steril yang dipakai lebih dari satu pasien setiap

melakukan tindakan, kemuadian membalut luka bekas operasi atau luka yang

bernanah dan tidak segera dibuang maka bisa menyebabkan infeksi nosokomial

(Devi dkk, 2019).

Data dari RSUP Dr. Wahidin Sudirohusodo sendiri yang merupakan salah

satu rumah sakit rujukan di Makassar penyebutkan bahwa total angka kejadian

infeksi nosokomial tahun 2018 adalah 3,75% sehingga untuk tahun 2019 infeksi

nosokomial cenderung berkurang, capaian infeksi nosokomial sebesar 3,25%

(LAK, 2019).

Menurut hasil penelitian dari (Ni Luh De Diyaningsih, 2019) infeksi

nosokomial dapat disebabkan oleh alat bedah miror dimana alat bedah

merupakan peralatan bedah sederhana yang digunakan dalam kegiatan operasi,

diantaranya seperti scalpel, gunting, forceps, pinset dan needle holder. Kejadian

infeksi pasca operasi, salah satunya dapat disebabkan oleh bakteri patogen yang

mengkontaminasi darah pada saat berlangsungnya operasi karena penggunaan

alat bedah yang tidak steril. Kontaminasi pada terjadi akibat penyimpanan yang

tidak tepat. Menurut penelitian (Ketrina Konoralma, 2019) infeksi nosokomial

juga dapat disebabkan melalui permukaan dinding, meja, lantai dan makanan.
 4

Penularannya dapat disebarkan oleh lalat, juga nelalui tangan yang kotor dan

makananan yang sudah terkontaminasi.

Menurut (WHO, 2016) infeksi nosokomial juga bisa disebabkan dari tangan

petugas yang kurang bersih akibat tidak mengimplementasikan panduan secara

baik dan benaruntuk hal tersebut sangatlah penting bila sterilisasi tetap

terpelihara.

Private Care Center adalah salah satu Instalasi rawat jalan/rawat inap RSUP

Dr. Wahidin Sudirohusodo yang konsumennya ditujukan kepada masyarakat

yang mampu, merupakan layanan prima dimana pasien dilayani secara paripurna

baik dari segi fasilitas gedung, sarana, lahan parkir khusus, tenaga dokter ahli,

petugas keamanan, dan tenaga paramedic. Dengan visi pelayanan prima dari

Instalasi ini maka diharapkan aspek pelayanan dan kebersihan juga menjadi

prioritas termasuk hal-hal yang berkaitan dengan infeksi nosokomial.

Dari uraian latar belakang tersebut maka peneliti tertarik untuk melakukan

penelitian tentang identifikasi bakteri penyebab infeksi nosokomial pada sarung

tangan bekas pakai di ruangan Perawatan Private Care Center RS Dr. Wahidin

Sudirohusodo.

B. Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang diatas, maka rumusan masalah penelitian yang

timbul yaitu apakah bakteri penyebab infeksi nosokomial pada sampel sarung

tangan bekas pakai di ruangan Perawatan Private Care Center RS Dr. Wahidin

Sudirohusodo.
 5

C. Tujuan Penelitian

Tujuan penelitian ini adalah untuk mengidentifikasi bakteri penyebab infeksi

nosokomial pada sampel sarung tangan bekas pakai di ruangan Perawatan

Private Care Center RS Dr. Wahidin Sudirohusodo.

D. Manfaat Penelitian

1. Manfaat Praktis

Petugas kesehatan dapat digunakan sebagai informasi dan masukan dalam

memberikan pelayanan perawatan yang komprehensif dan berbagai bahan

dalam meningkatkan kualitas pelayanan kesehatan serta membantu dalam

upaya menekan dan mengendalikan infeksi nosokomial. Dapat menambahan

literature atau bacaan di perpustakaan sebagai bahan kajian dan penambahan

informasi berkait dengan bakteri penyebab infeksi nosokomial di ruangan

perawatan Private Care Center RS Dr. Wahidin Sudirohusodo.

2. Manfaat Teoritis

Menambah informasi bagi perkembangan ilmu kesehatan dalam bidang

kesehatan dalam bidang Bakteriologi tentang bakteri penyebab infeksi

nosokomial di ruangan perawatan Private Care Center RS Dr. Wahidin

Sudirohusodo.
 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

A. INFEKSI NOSOKOMIAL

1. Pengertian Infeksi Nosokomial

Infeksi merupakan satu kumpulan jenis – jenis penyakit yang

disebabkan oleh mikroorganisme pathogen seperti virus, bakteri dan parasit

yang dapat menyerang tubuh dan dapat mampu menyebabkan sakit. Infeksi

merupakan salah satu masalah kesehatan yang paling utama di Negara –

Negara berkembang termasuk Indonesia dan salah satu penyebab kematian

dan kesakitan di rumah sakit dan fasilitas pelayanan kesehatan lainnya

(Ahmad dkk, 2015).

Infeksi yang terjadi dirumah sakit dan gelaja yang dialami pada

penderita – penderita yang sedang dalam proses asuhan keperawatan disebut

infeksi nosokomial. Infeksi nosokomial terjadi karena adanya transmisi

mikroorganisme patogen hal ini dikarenakan kuman – kuman, virus dan

sebagainya akan masuk dalam tubuh penderita yang sedang dalam proses

asuhan keperawatan dengan yang bersumber dari lingkungan rumah sakit dan

perangkatnya (Rizka dkk, 2016).

Infeksi nosokomial atau infeksi yang didapatkan dari rumah sakit adalah

infeksi yang tidak diderita pasien saat masuk ke rumah sakit melainkan

setelah kurang lebih 72 jam berada di tempat tersebut. Infeksi ini terjadi bila

6
 7

toksin atau penginfeksi menyebabkan infeksi lokal atau sistemik. Namun

perlu diketahui bahwa kriteria infeksi nosokomial antara lain tidak ditemukan

tanda-tanda klinis ketika pasien tersebut masuk ke rumah sakit (Ika dkk,

2016).

Salah satu infeksi nosokomial adalah infeksi luka infus atau phlebitis.

Phlebitis merupakan daerah bengkak, kemerahan, panas, dan nyeri pada kulit

sekitar tempat kateter intravascular dipasang (kulit bagian luar). Jika phlebitis

disertai dengan tanda-tanda infeksi lain seperti demam dan pus (keluarnya

nanah) yang keluar dari tempat tusukan, ini digolongkan sebagai infeksi

klinis bagian luar (Ika dkk, 2016).

2. Pengaruh Infeksi Nosokomial

Sebagaimana yang telah dijelaskan mengenai infeksi nosokomial

merupakan infeksi yang diperoleh selama pasien dirawat di rumah sakit.

Infeksi nosokomial timbul dikarenakan adanya transmisi mikroba patogen

yang bersumber dari lingkungan rumah sakit dan media-media lainnya.

Rumah sakit sendiri adalah tempat perawatan segala macam jenis penyakit

yang tidak mungkin terlepas dari keberadaan sejumlah mikroba patogen

(Agnes dkk, 2018).

Secara umum faktor yang mempengaruhi terjadinya infeksi nosokomial

terdiri atas dua bagian besar, yaitu faktor dari dalam (endogen) dimana faktor

ini meliputi usia pasien, jenis kelamin, riwayat penyakit, daya tahan tubuh

dan kondisi-kondisi tertentu. Sedangkan faktor dari luar (eksogen) meliputi

 8

petugas (dokter dan perawat), lama penderita dirawat, kelompok yang

merawat, alat medis, sterilisasi ruangan serta lingkungan rumah sakit (Agnes

dkk, 2018).

Selain faktor diatas terdapat juga faktor kurangnya pengetahuan

perawat, sikap atau perilaku tidak baik, fasititas perawatan, dan pengawasan

perawat dapat juga sebagai salah satu media penularan infeksi nosokomial

(Agnes dkk, 2018)

3. Faktor Penyebab penularan Infeksi Nosokomial

Penularan dapat terjadi karena bebarapa faktor yaitu :

a) Agen infeksius

Infeksi nosokomial disebabkan oleh beberapa macam agen penyakit

berupa mikroorganisme yaitu bakteri, virus, protozoa, jamur, dan macam-

macam agen penyakit ini ditentukan oleh patogenitas, daya invasi, dan

dosis infeksinya (Fitri, 2013)

b) Reservoir

Reservoir yang paling umum adalah tubuh manusia dimana reservoir

ini yaitu tempat patogen yang mampu bertahan hidup tetapi dapat atau

tidak dapat berkembang biak. Contohnya mikroorganisme yang hidup

pada kulit dan dalam rongga tubuh, cairan dan keluaran (Fitri, 2013).

c) Portal keluar

Setelah mikroorganisme sudah mendapatkan tempat untuk tumbuh

dan berkembang biak, mereka harus mencari jalan keluar dan masuk ke
 9

penjamu lain untuk dapat menyebabkan penyakit. Mikroooganisme

sendiri dapat keluar dari berbagai tempat, seperti kulit dan membran

mukosa, traktus urinarius, traktus gastrointestinal, traktus preproduksi dan

darah (Fitri, 2013).

d) Penularan

Mikroorganisme mempunyai banyak cara penularan dari reservoir ke

penjamu (host). Penyakit infeksi cendrung ditularkan secara lebih umum

melalui cara yang spesifik. Cara utama penularan mikrooganisme adalah

tangan dari pemberi layanan kesehatan. Hampir semua objek dalam

lingkungan tersebut dapat menjadi alat penularan patogen (Fitri, 2013).

e) Portal masuk

Didalam tubuh organisme dapat masuk melalui rute yang sama

dengan yang digunakan untuk keluar. Penurunan daya tahan tubuh adalah

salah satu faktor yang memperbesar kesempatan mikroorganisme patogen

masuk dalam tubuh (Fitri, 2013).

4. Faktor Yang Menjadi Sumber Terjadinya Infeksi Nosokomial

Menurut (Anindya dkk, 2018) ada beberapa faktor yang sering

menimbulkan terjadinya infeksi nosokomial antara lain :

a) Faktor genetik lebih mengarah pada kondisi pasien yang berkaitan dengan

asal usul keluarga, ras, suku, jenis golongan darah, dan sebagainya.
 10

b) Faktor pelayanan kesehatan dapat diartikan sebagai keterjangkauan

pelayanan kesehatan dan bagaimana kualitas pelayanan kesehatan yang

diberikan pada pasien.

c) Faktor lingkungan berhubungan dengan pasien dan petugas kesehatan

pemberi pelayanan, dalam hal ini adalah perawat. Perawat lebih sering

berinteraksi dengan pasien sehingga peran perawat sangat penting bagi

pasien, termasuk pengetahuan perawat dalam mengindentifikasi infeksi

nosokomial. Apabila perawat memiliki pengetahuan yang baik dalam

mengidentifikasi infeksi nosokomial, maka kejadian tersebut akan dapat

tertangani dengan cepat sehingga dapat mengurangi meningkatnya

kejadian infeksi nosokomial di rumah sakit

d) Faktor perilaku berhubungan dengan perilaku pasien dan pihak rumah

sakit sendiri. Rumah sakit harus melakukan tindakan agar dapat

mengendalikan angka kejadian infeksi nosokomial agar tidak mengalami

peningkatan. Salah satu strategi dalam pengendalian infeksi nosokomial

yaitu melakukan surveilans.

5. Pengendalian Infeksi Nosokomial

Masalah infeksi nosokimial merupakan masalah serius bagi rumah

sakit. Kerugian yang ditimbulkan sangat membebani rumah sakit dan pasien.

Pengendalian infeksi nosokomial merupakan upaya yang penting dalam

meningkatkan mutu pelayanan medis rumah sakit. Pengendalian infeksi

nosokomial di rumah sakit merupakan salah satu upaya peningkatan mutu

 11

pelayanan rumah sakit kepada masyarakat dengan menggunakan angka

kejadian infeksi nosokomial indikator (Sukfitrianty dkk, 2018).

Pengendalian infeksi nokosomial adalah dengan mencuci tangan

dengan dua cara cuci tangan yaitu handwash dan handrub, menggunakan alat

pelindung, penggunaan alat steril dan aseptik pada waktu pergantian balutan,

perawatan kebersihan kulit, dekontaminasi dan sterilisasi serta survalians

yang berkelanjutan terhadap infeksi nosokomial (Sukfitrianty dkk, 2018).

Menurut Timby (2003), kelalaian petugas – petugas rumah sakit untuk

mencuci tangan menyebab umum terjadinya infeksi yang diperoleh di rumah

sakit. Penularannya melalui cara tangan yang kurang bersih atau secara tidak

langsung melalui peralatan yang ditempatkan sebagai penyebab utama infeksi

nosokomial (Agnes dkk, 2018)

6. Pencegahan Infeksi Nosokomial

Salah satu upaya pencegahan infeksi nosokomial dengan melakukan

hand hygiene. Hand hygiene menurut Persatuan Pengendalian Infeksi

Indonesia yaitu suatu prosedur tindakan membersihkan tangan dengan

menggunakan sabun atau antiseptik di bawah air mengalir atau dengan

menggunakan handscrub yang bertujuan untuk menghilangkan kotoran dari

kulit secara mekanis dan mengurangi jumlah mikroorganisme (Riani dkk,

2019).

Hand hygiene merupakan ukuran yang paling penting dalam tindakan

pencegahan karena lebih efektif dan biaya rendah, diperkirakan dengan

 12

melakukan hand hygiene dapat mengurangi dampak terhadap infeksi

nosokomial sebesar 50% (Riani dkk, 2019).

Pelaksanaan hand hygiene sangat penting dilakukan karena

ketidakpatuhan dapat menimbulkan dampak antara lain:

a) Terhadap pasien, dapat memperpanjang hari perawatan dengan

penambahan diagnosa sehingga dapat menyebabkan kematian.

b) Terhadap mengunjung, dapat menularkan kepada orang lain setelah

meninggalkan rumah sakit.

c) Bagi perawat, akan menjadi barier (pembawa kuman) yang menularkan

kepada pasien lain dan diri sendiri.

d) Bagi rumah sakit, menurunkan mutu pelayanan rumah sakit sehingga

pencabutan izin operasional rumah sakit. Untuk menjaga keselamatan

pasien, pengunjung, perawat dan meningkatkan mutu rumah sakit (Riani

dkk, 2019)

B. BAKTERI

1. Pengertian Bakteri

Bakteri merupakan salah satu golongan mikroorganisme prokariotik

(bersel tunggal) yang hidup berkoloni dan tidak mempunyai selubung inti

namun mampu hidup dimana saja. Tes biokimia pewarnaan gram merupakan

kriteria yang efektif untuk klasifikasi. Hasil pewarnaan akan menunjukan

perbedaan dasar kompleks pada sel bakteri (struktur dinding sel), sehingga

dapat membagi bakteri menjadi 2 kelompok yaitu bakteri Gram positif dan
 13

bakteri Gram negative. Beberapa bakteri Gram positif dan bakteri Gram

negative merupakan flora normal pada tubuh manusia. Flora normal

merupakan mikrooganisme yang menempati suatu daerah tanpa

menimbulkan penyakit pada inang yang ditempati. Pada kulit normal

biasanya ditempati sekitar 102-106 CFU/cm2 bakteri (Michelle dkk, 2017).

Pada pewarnaan Gram, golongan bakteri Gram positif akan

memberikan warna ungu karena memiliki lapisan peptidoglikan setebal 20-80

nm sedangkan bakteri Gram negative memiliki lapisan peptidoglikan yang

tipis yaitu 5-10 nm dengan komposisi utama: lipoprotein, membrane luar dan

polisakarida (Michelle dkk, 2017)

2. Bakteri Patogen di Rumah Sakit

Rumah sakit merupakan tempat untuk mencari kesembuhan tetapi juga

menjadi sumber dari berbagai penyakit, yang berasal dar penderita maupun

dari pengunjung yang berstatus karier. Kuman penyakit ini dapat hidup dab

berkembang di lingkungan rumah sakit, seperti udara, air, lantai, makanan,

perabotan rumah sakit dan peralatan medis maupun non medis. Berbagai

jenis mikroba patogen sebagai sumber reservoir, dan wilayah yang

kemungkinan terjadi proses penularan baik secara langsung maupun tidak

langsung. Seorang pasien yang daya tubuhnya rendah akan mudah tertular.

Mikroba patogen biasanya berasal dari sebagaian penderita – penderita, baik

yang rawat jalan maupun rawat inap, berada di poliklinik maupun ruangan

atau bangsal perawatan (Claudya dkk, 2015).

 14

Sumber mikroba patogen adalah hasil berbagai kegiatan di rumah sakit

sebagai salah satu seperti sering melakukan tindakan invasive mulai dari

melakukan tindakan suntik sampai dengan tindakan operasi. Pasca operasi

salah satunya disebabkan oleh bakteri patogen yang terkontaminasi darah

pada saat berlangsungnya operasi karena alat – alat kamar operasi yang

belum sempurna saat disterilkan. Dalam hal tersebut adanya kontak lansung

antara pasien atau petugas dengan pasien, yang dapat menularkan kuman

patogen dan alat – alat medis yang terkontaminasi dengan kuman (Fairuz,

2018).

Menurut penelitian (Agung Cahya Pratama dkk, 2018) Jenis bakteri

patogen yang dapat ditemukan di rumah sakit antara lain: Staphylococcus sp,

Escherichia coli, Acinetobacter calcoaceticus, Enterobakter aerogenes,

Klebsiella sp, Proteus penneri, Pseudomonas sp, Staphylococcus

epidermidis, Micrococcus varians. Bakteri yang paling banyak di temukan

adalah bakteri Staphylococcus sp dan Staphylococcus epidermidis.

Bakteri Staphylococcus sp merupakan bakteri gram positif biasa

tersusun dalam kelompok seperti anggur yang tidak teratur. Bakteri inibanyak

ditemukan di udara dan dapat menyebab infeksi manusia. Beberapa tipe

Staphylococcus merupakan flora normal kulit dan membrane mukosa

manusia, tipe lainnya dapat menimbulkan supurasi, infeksi piogenik, dan

bahkan septicemia yang fatal. Staphylococcus sp dapat di transportasikan

 15

melalui droplet pengunjung, keluarga pasien atau pasien sendiri (Agung dkk,

2018)

Bakteri Staphylococcus epidermidis adalah salah satu spesies bakteri

dari genus Staphylococcus yang diketahui dapat menyebabkan infeksi

oportunistik (menyerang individu dengan system kekebalan tubuh yang

lemah). Beberapa karasteristik bakteri ini adalah fakultatif, koagulase negarif,

katalase positif, gram positif, berbentuk coccus, dan berdiamater 0,5 – 1,5 μ

m. Bakteri merupakan flora normal yang terdapat pada kulit manusia, saluran

pernafasan seperti hidung. Bakteri ini merupakan bakteri penyebab infeksi

nosokimial karena bakteri ini membentuk bioflm pada alat – alat medis di

rumah sakit dan menulari orang – orang dilingkungan rumah sakit yang

rentan atau imunitas rendah seperti pasien ktitis, pengguna obat terlarang

(narkotika), bayi yang baru lahir dan pasien rumah sakit yang dirawat dalam

waktu yang lama (Rosa, 2017)

Bakteri Acinetobacter calcoaceticus termasuk bakteri Gram negative,

bakteri yang bersifat aerob dan tidak bermotil. Bakteri ini tersebar luas di

dalam tanah dan air serta kadang – kadang dapat dibiakan dari kulit,

membrane mukosa, secret, dan lingkungan rumah sakit. Acinetobacter

merupakan patogen oportunistik yang paling sering berhubungan dengan

infeksi pada pasien yang sedang menderita sakit berat atau pada pasien yang

menjalani perawatan jangka panjang di rumah sakit. Acinetobacter

 16

calcoaceticus telah banyak menyebabkan infeksi nosokomial, termasuk

bakteremia, infeksi saluran kemih, dan meningitis sekunder, tetapi dominan

adalah sebagai agen pneumonia nosokomial, terutama pneumonia yang

disebabkan karena penggunaan ventilator (VAP) pada pasien di unit

perawatan intensif (Nyimas dkk, 2018)

Bakteri Klebsiella sp adalah bakteri gram negatif, bakteri ini

merupakan basil yang tidak berspora dan tidak memiliki flagel. Kebanyakan

strain dari Klebsiella sp sebagaian kecil dapat di temukan di tinja manusia

dan merupakan bagian flora normal saluran nafas bagian atas. Bakteri ini

dapat menyebabkan berbagai infeksi pada manusia seperti pneumonia

(Agung dkk, 2018)

Bakteri Pseudomonas sp merupakan bakteri yang berasal dari

lingkungan. Bakteri ini biasa hidup di air dan di tanah. Bakteri ini memiliki

resistensi yang tinggi terhadap banyak obat antimikroba (Anastashia dkk,

2015).

Bakteri Mcrococcus varians merupakan bakteri saporit yang dapat

mengkontaminasi kulit, mukosa, dan juga oropharynx bakterimia yang dapat

menyebabkan berbagai macam penyakit infeksi seperti abses intracranial,

arthritis septic, pneumonia, endokarditis dan meningitis (Agung dkk, 2018).

Bakteri Proteus penneri merupakan bakteri gram negatif dan biasa

ditemukan pada hewan, limbah, air, tanah, serta feses manusia dan hewan.

Proteus penneri termasuk bakteri patogen, sehingga dapat menyebabkan

 17

infeksi saluran kemih atau kelainan nanah seperti abses, dan jika masuk pada

luka dapat menyebabkan infeksi pada luka tersebut (Agung dkk, 2018).

3. Mikroorganisme Penyebab Infeksi Nosokomial

Secara umum, manusia berinteraksi dengan lingkungan yang penuh

dengan mikroorganisme seperti: bakteri, virus, fungi dan parasit, penyebab

utamanya adalah bakteri dan virus, kadang – kadang jamur dan jarang

disebabkan oleh parasit. Terdapat tiga jalan bagaimana bakteri maupun virus

memasuki tubuh manusia, yaitu melalui sistem pernafasan, pencernaan, dan

kontak kulit. Peranannya dalam menyebabkan infeksi nosokomial tergantung

dari pathogenesis atau virulensi dan jumlahnya (Isharyadi dkk, 2018)

Tabel 1.1 Kuman Penyebab Infeksi

Golongan Mikrooganisme

Coccus Gram positif Staphylococcus aureus, Streptococci

group A, B, C dan G, Enterococci,

Mikrococcus, Enterococcus

Anaerobic Bacilli Histotoxic clostridia, Clostridium

tetanii,

golongan bukan spora Gram

negative

Aerobic bacilli Gram negative Samonella, Shigella, E.coli, Proteus

vulgaris,Klebsiella, Pseudomonas
 18

aeruginosa,Acinetobacter,

Enteribacter spp, Serratia spp,

Flavobacterium meningosepticum,

Alcaligenesfaecalis, Vibrio cholera

Bakteri lain Corynebacterium diphteriae,

Listeria,Mycobacteriumtuberculosis,

Anonymous

mycobacteria, Bordetella pertussis

Virus Hepatitis, Chickenpox, Influenza,

Herpessimplex, Cytomegalovirus,

Measles, Rubella,rotavirus

Jamur Candida, Nocardia, Moulds,

Histoplasma, Coccidioides,

Cryptococcus

Parasit Pneumocytis, Toxoplasma

(Fitri, 2013)

Untuk mengeliminasi mikroba patogen sangat berkaitan dengan

pencegahan dan pengendalian infeksi noskomial. Penderita akan selalu

terancam oleh kehadiran mikroba patogen yang bersarang pada benda –

benda sekitarnya, seperti peralatan medis dan non medis yang ada di ruangan
 19

perawatan. Bahkan udara ikut memberikan kontribusi terjadinya infeksi

nosokimial, termasuk juga petugas yang merawat pasien (Wuny, 2015)

Keberadaan mikroba patogen berpotensi menimbulkan penyakit tidak

saja tergantung pada jumlah dan jenisnya, tetapi juga ditentukan lamanya

terpapar oleh mikroba tersebut. Kesadaran akan keberadaran dimana kondisi

bebas dari segala mikroba patogen, maka perlu upaya untuk mengeliminasi

mikroba patogen dari segala peralatan medis, terutama pelaratan yang

langsung digunakan pada tindakan medis serta mikroba patogen yang

melekat pada petugas dengan begitu tubuh penderita akan berisiko masuknya

mikroba patogen. Oleh karena itu untuk mencegah hal tersebut maka

diperlukan adanya antiseptic atau disinfektan (Wuny, 2015)

Antiseptik atau disinfektan merupakan suatu zat kimia yang sangat

penting dalam praktik kedokteran yang memiliki kerja untuk menghancurkan

mikroorganisme ataupun menghambat kerjanya, sehingga dapat mencegah

suatu infeksi. Antiseptik dapat dibedakan dengan disinfektan dari tempat

kerjanya, di mana antiseptik digunakan pada sesuatu yang hidup dan

disinfektan digunakan untuk benda yang mati (Yosi dkk, 2019).

C. PRIVATE CARE CENTER

Rumah sakit merupakan sarana pelayanan kesehatan yang mempunyai fungsi

utama menyediakan dan menyelenggarakan upaya kesehatan yang bersifat

penyembuhan penyakit dan memulihkan kesehatan baik fisik maupun psikososial

yang dilakukan secara terpadu. Keberhasilan pelayanan kesehatan di rumah sakit

 20

dipengaruhi oleh berbagai faktor, salah satu faktor tersebut adalah pelayanan

perawatan. Pelayanan perawatan mempunyai posisi yang sangat startegis dalam

menentukan mutu pelayanan karena pemberi pelayanan professional yang

terbanyak (60%) adalah perawat dan yang paling lama kontak langsung dengan

klien selama 24 jam (Ilkafah dkk, 2017)

Ruang perawatan Private Care Center merupakan pelayanan VIP (Very

Important Person) dan VVIP (Very Very Important Person) yang dilayani oleh

dokter DPJP yang sub Spesialis yang tersertifikasi mengedepankan privasi pasien

untuk menyembuhkan penyakit yang diderita dengan berorientasi kepuasan

pasien, serta fasilitas aklomodasi yang memadai. Disamping itu mengupayakan

pencegahan penyakit dan penyembuhan melalui pelayanan medical Check Up

Women Center, rawat inap VIP, Pelayanan penunjang medic, Hemodialisa dan

Rehabilitas medis, serta didukungan oleh fasilitas Kebugaran, Kecantikan,

Internet, layanan Perbankan dan Cafetaria.

Pelayanan ini merupakan pelayanan ekstra dimana pasien yang rawat ditempat

ini bisa memilih dokter yang di inginkannya, termasuk pemeriksaan laboratorium

dan penunjang lainnya bisa dikunjungi di tempat dia dirawat. Fasilitas ruangan

berstandar hotel atau kelas superior yang terdapat di lantai 2, 3, dan 4 dengan

jumlah tempat tidur 84 kamar.

D. TEKNIK KULTUR BAKTERI

1. Isolasi atau Penanaman Mikroba

 21

Untuk menanam suatu mikroba perlu diperhatikan faktor-faktor nutrisi

serta kebutuhan akan oksigen (gas, O2 atau udara). Mengisolasi suatu

mikroba didefensikan sebagai proses memisahkan mikroba tersebut dari

lingkungannya di alam dan menumbuhkannya sebagai biakan murni dalam

medium buatan. Macam – macam cara mengisolasi dan menanam mikrobia

adalah : Spread plate method (cara tebar/sebar), Streak plate method (cara

gores) dan Pour plate method (cara tabur) (Ulfah Utami dkk, 2018).

Namun demikian, untuk mengurangi kepadatan mikroba yang diperoleh

dari suatu sampel diperlukan adanya proses pengenceran bertingkat atau

serial dilution.

a) Teknik Preparasi Sampel

Sampel yang telah diambil perlu dipreparasi sehingga memudahkan

untuk proses isolasi mikroba. Tujuan teknik ini pada prinsipnya adalah

melarutkan atau melepaskan mikroba dari substraknya kedalam air

sehingga lebih mudah penanganannya (Ulfah Utami dkk, 2018)

b) Teknik Serial Dilutian (Pengeceran bertingkat/berseri)

Tujuan dari pengencaran bertingkat yaitu memperkecil atau

mengurangi jumlah mikroba yang tersuspensi dalam cairan. Penentuan

besarnya atau besarnya tingkat pengenceran tergantung kepada perkiraan

jumlah mikroba dalam sampel. Digunakan perbandingan 1 : 9 untuk

sampel dan pengenceran pertama dan selanjutnya, sehingga pengenceran

berikutnya mengandung 1/10 sel (Ulfah Utami dkk, 2018).

 22

2. Teknik Isolasi dan Penanaman Mikroba Penanaman dari suspense

Teknik penanaman ini merupakan lanjutan dari pengenceran bertingkat.

Pengambilan suspensi dapat diambil dari pengenceran mana saja tapi

biasanya untuk tujuan isolasi (mendapatkan koloni tunggal) diambil suspensi

dari beberapa tabung pengenceran terakhir (Ulfah Utami dkk, 2018)

a) Spread Plate Method (Metode cawan tebar/sebar)

Teknik Spread Plate merupakan teknik isolasi mikroba dengan cara

menginokulasi kultur mikroba serta pulasan/sebaran dipermukaan media

agar yang telah memadat (Gambar 1.1). (Ulfah Utami dkk, 2018).

Gambar 1.1 Teknik Spread Plate

Sumber : (Ulfah Utami dkk, 2018).

b) Pour Plate Method (Metode cawan tuang)

Tujun dari teknik ini untuk menyebarkan sel – sel bakteri tidak hanya

dipermukaan medium agar saja melainkan sel terendam dalam medium

(di dalam agar) sehingga terdapat sel yang tumbuh dipermukaan agar

yang kaya O2 dan ada yang tumbuh di dalam agar dengan kandungan
 23

oksigen yang sedikit. Teknik ini memerlukan agar yang belum padat

(>45oC) untuk dituang bersama cawan petri lalu kemudian dihomogenkan

dan dibiarkan memadat (Gambar 1.2). (Ulfah Utami dkk, 2018).

Gambar 1.2. Teknik Pour Plate

Sumber : (Ulfah Utami dkk, 2018).

c) Streak Plate Method (Metode cawan gores)

Teknik penanaman mikroba dengan goresan bertujuan untuk

mengisolasi mikroorganisme dari campurannya atau meremajakan kultur

ke dalam medium baru. Cara gores umumnya digunakan untuk

mengisolasi koloni mikroba pada medium-agar sehingga didapatkan

koloni terpisah dan merupakan biakan murni. Cara ini dasarnya ialah

menggoreskan suspensi bahan yang mengandung mikroba pada

permukaan medium-agar yang sesuai pada cawan petri. Setelah inkubasi

maka pada bekas goresan akan tumbuh koloni-koloni terpisah yang

mungkin berasal dari 1 sel mikroba, sehingga dapat dikultur lebih

lanjut(Ulfah Utami dkk, 2018).

 24

Penggoresan yang sempurna akan menghasilkan koloni yang terpisah.

Bakteri yang memiliki flagella seringkali membentuk koloni yang

menyebar terutama bila digunakan medium yang basah. Pencegahan

terjadinya penhyebaran koloni harus digunakan lempengan agar yang

benar-benar kering permukaannya (Gambar 1.3). (Ulfah Utami dkk,

2018).

Gambar 1.3. Teknik transfer aseptis kultur mikroba dari tabung reaksi ke

cawan petri

Sumber : (Ulfah Utami dkk, 2018).

Metode cawan gores dibagi menjadi beberapa tipe, diantaranya :

a. Goresan Sinambung

Goresan sinambung umumnya digunakan bukan untuk

mendapatkan koloni tunggal, melainkan untuk peremajaan ke cawan

atau medium baru

Cara kerja : Sentuhkan ujung ose pada koloni dan gores secara

kontinyu sampai setengah permukaan agar. Putar cawan 180o

 25

lanjutkan goresan sampai habis (Gambar 1.4). Tipe goresan

sinambung/kontinyu juga dilakukan pada media agar miring dalam

tabung reaksi.

Gambar 1.4. Tipe goresan sinambung

Sumber : (Ulfah Utami dkk, 2018).

b. Goresan T

Tipe goresan T diguankan untuk mendapatkan koloni tunggal

dengan membagi wilayah goresan menjadi 3.

Cara kerja : Tandai bagian luar-bawah cawan petri dengan membagi

cawan menjadi 3 bagian menggunakan spidol marker, inokulasi

daerah 1 dengan streak zig-zag. Panaskan jarum ose dan tunggu

dingin, kemudian lanjutkan streak zig-zag pada daerah 2. Cawan

diputar untuk memperoleh goresan yang sempurna. Lakukan hal yang

sama pada daerah 3 (Gambar 1.5).

 26

Gambar 1.5. Tipe goresan T

Sumber:(Ulfah Utami dkk, 2018).

c. Goresan kuadran

Tipe goresan kuadran hampir sama dengan goresan T namun pola

goresan dibagi ke dalam 4 bagian/wilayah. Pembagian 4 wilayah

diharapkan akan memisahkan koloni bakteri dengan lebih baik

sehingga diperoleh koloni tunggal bakteri. Tipe goresan kuadran

dapat dilakukan dengan menggores secara zig-zag maupun secara

terputus (Gambar 1.6)

 27

Gambar 1.6. Tipe goresan kuadran

Sumber : (Ulfah Utami dkk, 2018).

3. Media Kultur

Media merupakan bahan yang dapat digunakan sebagai tempat

pertumbuhan mikroorganisme seperti bakteri. Beberapa jenis bakteri dapat

hidup baik pada media yang sangat sederhana, yang mengandung garam

anorganik ditambah sumber karbon organic seperti gula. Namun ada bekteri

yang memerlukan suatu media kompleks selain mengandung sumber karbon

dan nitrogen juga perlu penambahan darah atau bahan – bahan kompleks

lainnnya, yang sangat terpenting media harus mengandung nutrisi yang

merupakan substansi dengan berat molekul rendah dan mudah larut dalam

air. Nutrisi dalam media harus memenuhi kebutuhan dasar mahluk hidup

(Yati dkk, 2016).

Macam – macam Media:

a) Berdasarkan bentuknya media dikelompokkan menjadi tiga yaitu:

 28

1) Media Padat

Media padat mengandung bahan pemadat atau agar sekitar 15%

sehingga bentuknya padat. Menurut bentuk dan wadahnya dibedakan

menjadi tiga jenis yaitu media tegak, media miring dan media

lempeng. Media ini pada umumnya dipergunakan untuk pertumbuhan

bakteri. Pada media lempeng agar pada umumnya digunakan untuk

mengisolasi mikroorganisme. Oleh karena itu pada media ini akan

tumbuh isolate atau koloni – koloni bakteri yang diduga ada dalam

sampel yang kita kultur. Dengan demikian kita dapat mengidentifikasi

secara makroskopik isolate mikroorganisme tersebut (Gusti dkk,

2017).

2) Media Semisolid (Setengah Padat)

Media semisolid merupakan media yang mengandung sekitar 0,3

– 0,4% agar sehingga konsistensinya menjadi kenyal atau tidak padat

atau tidak cair. Bakteri memiliki flagel yang digunakan untuk

bergerak. Pada media ini bakteri yang memiliki flagel terlihat

pertumbuhannya melebar sampai diluar bidang tusukan. Sebaiknya

bakteri yang tidak memiliki flagel pertumbuhannya terbatas pada

bidang tusukan pada waktu melakukan inokulasi (Gusti dkk, 2017).

3) Media Cair

Media cair merupakan media yang tidak ditambah oleh bahan

pemadat atau agar sehingga konsistensinya cair. Media cair ini pada
 29

umumnya dipergunakan untuk melihat sifat pertumbuhan bakteri

seperti keruh uniform, membentuk endapan berpasir atau membentuk

untaian rambut atau caput medusa (Gusti dkk, 2017).

b) Berdasarkan Komposisi

1) Media alami atau Non Sintetis

Media alami merupakan media ang disusun oleh bahan – bahan

yang alami yang komposisinya tidak diketahui secara pasti. Pada

umumnya media ini dibuat dari ekstrak dari bahan dasar sepeti

kentang, daging, telur tomat dan sebagainya (Gusti dkk, 2017).

2) Media Semi Sintesis

Media semi sintesis merupakan media yang tersusun dari bahan

– bahan alami dan sintetis. Media semi sintesis contohnya seperti

kaldu nutrisi, yang terdiri dari pepton, NaCl, ekstrak daging dan

aquades (Gusti dkk, 2017).

3) Media Sintetis

Media sintetis merupakan media yang tersusun dari senyawa

kimia dengan formulasi takaran dan jenis diketahui secara pasti.

Contohnya Salmonella Shigella agar, Mac Conkey agar dan

sebagainya (Gusti dkk, 2017).

c) Berdasarkan Fungsi

1) Media Umum
 30

Media umum adalah media yang digunakan untuk

menumbuhkan semua jenis bakteri baik Gram positif maupun Gram

negative. Pada media padat dalam bentuk lempeng agar isolate

mikroorganisme yang tumbuh membentuk koloni – koloni tertentu

yang dapat kita bedakan berdasarkan bentuk, warna, diameter dan tepi

koloni. Sebagai contohnya media umum adalah nutrient agar atau

nutrient cair (Gusti dkk, 2017).

2) Media Diferensial

Media diferensial merupakan media basal yang digunakan untuk

menumbuhkan bakteri serta bertujuan melihat sifat pertumbuhannya.

Contohnya Blood agar. Pada media Blood agar biasanya digunakan

untuk pertumbuhan bakteri secara umum, tetapi sangat ideal untuk

menumbuhkan bakteri Fastidious atau bakteri coccus, Haemophilus

dan sebagainya. Disamping itu media Blood agar juga digunakan

untuk melihat sifat hemolitik bakteri yang dikelompokkan menjadi

tiga yaitu alfa hemolitik atau zona hemolitik tidak sempurna, beta

hemolitik atau zona hemolitik sempurna dan gama hemolitik atau

tidak terbentuk zona hemolitik (Gusti dkk, 2017).

3) Media Diperkaya

Pada umumnya media ini digunakan untuk menumbuhkan

bakteri Salmonella dari sampel feces penderita. Sebagai contohnya

selenite broth dan tetrathionate broth. Pada media ini pertumbuhan

 31

bakteri Coliform yang terdapat dalam saluran pencernaan hewan

maupun manusia akan ditekan oleh selenite atau tetrathionate

sebaliknya Salmonella bisa tumbuh. Masa inkubasi optimum biakan

pada media diperkaya adalah 18 jam pada suhu 370C (Gusti dkk,

2017).

4) Media Selektif

Media selektif merupakan media yang digunakan untuk

menumbuhkan bakteri – bakteri tertentu saja. Oleh karena itu media

ini mengandung zat inhibitor yag menghambat pertumbuhan bakyeri

lainnya. Contohnya media Mac Conkey agat plate (MCA). Pada

media MCA tersebut mengandung zat inhibitor garam empedu (bile

salt) yag berfungsi untuk menekan pertumbuhan bakteri Gram positif

tetapi menumbuhankan Gram negative kecuali Pasteurella dan

Haemophilus. Pada umumnya media selektif digunakan untuk

menumbuhkan bakteri Gram negative yang tergolong dalam family

Enterobacteriaceae yang merupakan flora normal dalam saluran

pencernaan. Disamping media MCA ini juga ada beberapa contoh

media selektif lainnya seperti Salmonella-Shigella agar (SSA),

Brilliant green agar, Eosin methylen blue agar (EMBA), Bismuth

sulphite agar (BSA), dan sebagainya. Pada media selektif ini dapat

dibedakan koloni-koloni bakteri Enterobacteriaceae yang

memfermentasikan laktosa maupun tidak memfermentasikan laktosa.

 32

Pada media MCA dan SSA bakteri yang memfermentasi laktosa akan

tumbuh menjadi warna koloni pink, tetapi bakteri yang tidak

memfermentasi laktosa tidak berwarna. Hal ini disebabkan oleh

karena zat indikator neutral red pada media dalam suasana asam

berubah menjadi pink sedangkan dalam suasana basa tidak berwarna.

Pada media BGA koloni lactose-fermented berwarna kuning

sedangkan non lactose-fermented berwarna merah. Pada media

EMBA koloni Escherichia coli berwarna hijau metalik dan coliform

yang lain berwarna coklat gelap dan coklat kemerahan, sedangkan

bakteri yang tidak memfermentasikan laktosa tidak berwarna. Media

selektif yang ideal untuk mengisolasi Salmonella sp adalah SSA, BSA

dan BGA. Pada media SSA dan BSA koloni bakteri memproduksi

hydrogen sulfida (H2S) membentuk black spot (Gusti dkk, 2017).

5) Media Biokimiawi dan gula – gula

Media ini merupakan media yang digunakan untuk mengetahui

sifat – sifat karakteristik mikroorganisme dengan cara melakukan

inokulasi pada beberapa media tertentu. Secara konvensional media

ini digunakan untuk mengidentifikasi sifat – sifat biokimiawi yang

khas dari mikroorganisme tertentu (Gusti dkk, 2017).

a) Triple sugar iron agar (TSIA)

Pada umumnya media TSIA digunakan sebagai tahap awal

untuk melakukan identifikasi bakteri terutama yang tergolong

 33

Enterobacteriaceae. Dalam pembuatan media TSIA pada tabung

reaksi terdiri dari bagian tegak dan miring. Tujuan untuk

penanaman pada media TSIA ini yaitu untuk mengetahui sifat

fermentasi glukosa laktosa sukrosa, produksi H2S dan gas (Gusti

dkk, 2017).

Warna merah pada agar menunjukan reaksi basa, sedangkan

warna kuning menunujukan reaksi asam. Warna merah pada

permukaan dan kuning di bagian bawah tabung menunjukan

terjadinya fermentasi glukosa tetapi tidak laktosa dan sukrosa.

Warna kuning pada bagian permukaan dan bawah tabung

menunjukan terjadinya fermentasi glukosa, laktosa, dan

sukrosa.Warna kuning pada bagian permukaan dan warna merah

pada bagian bawah menunjukan fermentasi laktosa dan sukrosa.

Sedangkan warna merah pada bagian permukaan dan bawah

menunjukan bahwa ketiga gula tidak difermentasi. Pembentukan

H2S ditandai dengan perubahan warna menjadi hitam dan adanya

gas ditandai dengan terbentuknya rongga – rongga dibagian

bawah agar (Renji dkk, 2018).

b) Sulfide indol motility (SIM)

Media ini merupakan media yang berbentuk semisolid yang

mengetahui produksi H2S, indol dan motilitas atau pergerakan

suatu bakteri. Produksi indol dapat diketahui dengan meneteskan

 34

1-3 tetes reagen Kovacs atau Erlich ke dalam biakan bakteri. Hasil

positif pada bakteri ditunjukan adanya cincin merah pada bagian

ujiindolatas, hal ini disebabkan karena indol bereaksi dengan

aldehid (Renji dkk, 2018)

c) Media Methyl Red-Voges Proskauer (MRVP)

Uji Methyl Red (MR) bertujuan untuk mendeteksi kemampuan

mikroorganisme dalam memrpoduksi dan mempertahankan

produk akhir asam stabil dari fermentasi glukosa. Methyl Red

adalah indikator pH dengan hasil positif berwarna merah.

Sedangkan uji Voges Proskauer (VP) adalah tes yang digunakan

untuk mendeteksi acetonin dalam kultur cair bakteri. Warna

merah menunjukan hasil yang positif dan warna kuning atau tidak

berwarna merupakan hasil yang negatif (Renji dkk, 2018).

d) Citrate agar

Media citrate bertujuan untuk melihat kemampuan bakteri

dalam menggunakan sitrat sebagai satu – satunya sumber karbon

energy. Hasil positif ditunjukan dengan adanya perubahan warna

media dari hijau ke biru. Hal ini disebabkan karena pengunaan

sitrat oleh bakteri menyebabkan asam menghilang dari biakan

sehingga terjadi peningkatan pH dan mengubah warna media dari

hijau ke biru (Renji dkk, 2018)

e) Media gula – gula

 35

Pada umumnya bakteri memfermentasikan beberapa

karbohidrat tertentu dan penting dilakukan untuk dapat

mengetahui karakteristik bakteri. Pada pembuatan media gula –

gula biasanya dilengkapi dengan tabung Durham kedalam media

untuk mengetahui adanya produksi gas sebagai hasil dari prosos

fermentasi. Beberapa contoh media gula – gula diantaranya

glukosa, laktosa, dan sebagainya. Hasil positif ditandai dengan

perubahan warna dari biru menjadi kuning (Renji dkk, 2018).

f) Media Urea

Uji urea bertujuan untuk mengetahui kemampuan

mikroorgaisme dalam mendegradasi urea atau menghasilkan

enzim urease. Reaksi positif ditandai dengan perubahan medium

menjadi merah muda (sangat merah muda) perubahan warna dapat

terjadi terjadi saat enzim urease memutus ikatan karbon dan

nitrogen untuk amoniak. Adanya amoniak menyebabkan suasana

medium menjadi alkali/basa sehingga indikator phenol red akan

berubah menjadi merah muda pada medium, hal ini

mengindikasikan terjadinya reaksi postif atau dihasilkannya

urease (Renji dkk, 2018).

g) Uji katalase

Tujuan uji katalase untuk mengidentifikasi bakteri yang

menhasilkan enzim katalase yang digunakan untuk memecah

 36

hydrogen peroksida yang terbentuk dari proses respirasi aerob dan

bersifat toksit terhadap bakteri menjadi dihidrogen oksida (H2O)

dan oksigen (O2). Hasil positif jika terbentuk gelembung gas

(Renji dkk, 2018).

E. Kerangka Konsep

Infeksi nosokomial Faktor Intrinsik : usia

pasien, status gizi
Faktor Ekstrinsik : lama pasien dan status
penderita dirawat, kelompok imunologis
yang merawat, peralatan
medis serta lingkungan

Peralatan medis : Sarung

Tangan Bekas Pakai

Pemeriksaan Laboratorium

Identifikasi Bakteri

Bakteri Gram Bakteri Gram

Positif Negatif

Staphylococcus Esherichia coli, Klebsiella

aureus, Staphyloccus pneumonia, Pseudomonas
epidermidis, aeruginosa.
Streptococcus sp
 37

Keterangan :

= Objek yang tidak diteliti

= Objek yang diteliti

F. Definisi Operasional

a) Bakteri adalah mahluk – mahluk kecil yang tidak kasat mata, yang bersifat

menguntungkan dan merugikan.

b) Idenfikasi bakteri adalah suatu penelitian untuk mengetahui ada tidaknya

bakteri tersebut yang terdapat dalam sampel.

c) Sarung tangan bekas pakai adalah salah satu bahan sekali pakai yang tidak

steril yang terdapat di rumah sakit.

d) Infeksi nosokomial merupakan infeksi yang didapat dari rumah sakit setelah

kurang lebih 72 jam berada di tempat tersebut.

 BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

A. Jenis Penelitian

Jenis penelitian ini adalah studi observasional dengan pendekatan deskriptif

untuk mengidentifikasi bakteri penyebab infeksi nosokomial pada sarung tangan

bekas pakai di ruangan Private Care Center RS Dr. Wahidin Sudirohusodo.

B. Lokasi dan Waktu Penelitian

Penelitian ini rencana dilakukan pada bulan Juli – Agustus 2020. Pengambilan

sampel dilakukan di ruangan perawatan lantai 4 PCC RS Dr. Wahidin

Sudirohusodo dan pengerjaan sampel dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi

Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin Makassar.

C. Fokus/Variabel Penelitian

a) Variabel Bebas

Variabel bebas atau variabel independen adalah variabel yang

mempengaruhi yaitu bakteri penyebab infeksi nosokomial.

b) Variabel Terikat

Variabel terikat atau variabel dependen yang akan dipengaruhi dalam

penelitian ini yaitu sarung tangan bekas pakai.

D. Populasi dan Sampel Penelitian

1. Populasi Peneitian

38
 39

Populasi dalam penelitian ini yaitu sarung tangan bekas pakai perawat di

ruang perawatan Privat Care Center lantai.4 RS Dr. Wahidin Sudirohusodo.

2. Sampel Penelitian

Sampel dalam penelitian adalah swab sarung tangan bekas pakai

perawat di ruang perawatan lantai 4 PCC RS Dr. Wahidin Sudirohusodo

dengan kriteria sebagai berikut:

a) Kriteria Inkulusi

1) Sarung tangan bekas pakai merawat pasien yang dirawat di ruangan

perawatan lantai 4 PCCRS Dr. Wahidin Sudirohusodo.

2) Semua sarung tangan perawat yang bekerja dalam satu shift kerja saat

pengambilan sampel

b) Kriteria Ekslusi

1) Sarung tangan bekas pakai merawat pasien yang tidak dirawat di

ruangan perawatan lantai 4 PCCRS Dr. Wahidin Sudirohusodo.

2) Sarung tangan perawat bukan bekas pakai merawat pasien

3. Teknik pengambilan sampel

Sampel sarung tangan bekas pakai diambil di ruangan perawatan lantai

4 PCC RS Dr. Wahidin Sudirohusodo. Dengan teknik total sampling.

E. Alat dan Bahan Penelitian

1. Alat Penelitian
 40

Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah rak tabung, tabung

reaksi pyrex, ose bulat, ose lurus, pipet tetes, gelas objek pyrex, lampu

spiritus, enkas, cawan petri pyrex, autoclave, mikroskop.

2. Bahan Penelitian

Bahan yang digunakan dalam digunakan dalam penelitian ini yaitu

sampel “sarung tangan bekas pakai”, kapas “swab” steril, larutan Phosphate

Buffer Saline (PBS), media Brain Heart Infusion Broth (BHIB) Merck, Mac

Conkey Agar (MCA) Merck, Nutrient Agar (NA) Merck, Triple Sugar Iron

Agar (TSIA) Merck, Simon Cittrat Agar (SCA) Merck, Motility Indole

Ornithine (MIO) Merck, Metil Red (MR), Voges Proskauer (VP), Media

untuk fermentasi karbohidrat (Glukosa, Lactosa, Manitol, Sukrosa), Bahan

Pewarnaan Gram terdiri dari: Kristal Violet (cat Gram A), larutan lugol (cat

Gram B), alcohol 95% (cat Gram C), safranin (cat Gram D), Reagen kovacs,

Reagen alfa-naftol, Reagen KOH 40%, Reagen Metol Red, H2O2 3%.

F. Alur Kerja Penelitian

1. Pengambilan sampel

Pengambilan sampel dilakukan dengan menggunakan kapas “swab”

steril yang telah dibahasi dengan larutan PBS, kemudian kapas tersebut

diusapkan pada sarung tangan bekas pakai kemudian dimasukkan kedalam

wadah steril.

2. Isolasi Bakteri ke Medium BHIB

a) Disiapkan alat dan bahan yang akan digunakan

 41

b) Dikeluarkan swab dari wadah steril

c) Ditanam pada media BHIB

d) Diinkubasi pada suhu 37oC selama 24 jam

e) Diamati perubahan yang terjadi, jika positif media akan terlihat keruh.

3. Penanaman pada media NA dan Mac Conkey

a) Diambil biakan bakteri yang tumbuh pada media BHIB menggunakan ose

steril.

b) Ditanam pada media NA dan Mac Conkey dengan teknik goresan zig-zag

c) Diinkubasi pada suhu 37oC selama1×24 jam

d) Di amati perubahan bentuk makroskopik dan di lanjutkan pewarnaan

gram.

4. Pewarnaan Gram

a) Alat dan bahan disiapkan.

b) Kaca objek dibersihkan dengan tissue untuk menghilangkan lemak yang

ada.

c) Kaca objek difiksasi di atas bunsen dan diberi label.

d) NaCl diambil dengan ose dan diteteskan diatas kaca objek secukupnya.

e) Biakan koloni yang tumbuh pada media Mac Conkey dan NA diambil

dan dibuat apusan pada objek hinggamerata. Apusan di fiksasi pada api

Bunsen.

f) Pewarnaan dilakukan dengan larutan warna kristal violet dan didiamkan

selama 1 menit, lalu dibilas dengan air mengalir

 42

g) Pewarnaan dilakukan dengan larutan lugol dan di diamkan selama 1

menit. Lalu dibilas dengan air mengalir.

h) Pembersihan zat pengganggu dilakukan dengan menggunakan alkohol

96% setetes demi setetes hingga aliran alkohol yang menetes hampir

jernih. Lalu dibilas preparat dengan air mengalir.

i) Pewarnaan dilakukan dengan larutan safranin dan didiamkan selama 45

detik kemudian dibilas dengan air mengalir dandikeringkan.

j) Preparat yang sudah jadi diamati dengan mikroskop perbesaran lensa

objektif 100x dengan penambahan oilimersi.

5. Identifikasi bakteri pada uji biokimia

a) Inokulasi pada media TSIA

1) Disiapkan alat dan bahan yang digunakan

2) Diambil biakan bakteri pada media MacConkey dengan menggunakan

ose steril.

3) Diinokulasi pada media TSIA dengan menggunakan metode gores

tusuk.

4) Diinkubasi kedalam inkubator selama 24 jam dengan suhu 370C.

5) Dilakukan pengamatan pada media TSIA

Interprestasi hasil : jika pada dasar (butt) media berwarna kuning

artinya bersifat asam (acid) dan pada lereng (slant) berwarna merah

artinya bersifat basa (alkali). Jika pada dasar (butt) media berwarna

kuning artinya bersifat asam (acid) dan pada lereng (slant) berwarna
 43

kuning artinya bersifat asam (acid).Jika pada dasar (butt) media

berwarna merah artinya bersifat basa (alkali) dan pada lereng (slant)

berwarna merah artinya bersifat basa (alkali). Jika pada lereng (slant)

terdapat warna hitam artinya terdapat sulphur pada media. Jika media

berpindah tempat dari dasar tabung ke tengah tabung artinya terdapat

gas pada media.

b) Inokulasi pada media sitrat

1) Disiapkan alat dan bahan

2) Diambil biakan bakteri dari media TSIA menggunakan ose steril.

3) Diinokulasi pada media sitrat dengan menggunakan metode gores

sinambung.

4) Diinkubasi kedalam inkubator selama 24 jam dengan suhu 370C.

5) Dilakukan pengamatan pada media sitrat.

Interpretasi hasil : positif (+) terjadinya perubahan warna dari hijau

menjadi biru, negatif (-) : tidak terjadinya perubahan warna.

c) Inokulasi pada media urea

1) Disiapkan alat dan bahan

2) Diambil biakan bakteri dari media TSIA menggunakan ose steril.

3) Diinokulasi pada media urea dengan menggunakan metode gores

sinambung.

4) Diinkubasi kedalam inkubator selama 24 jam dengan suhu 370C.

5) Dilakukan pengamatan pada media urea

 44

Interpretasi hasil : positif (+) : terjadinya perubahan warna media

dari orange menjadi ungu, negatif (-) tidak terkadinya perubahan

warna.

d) Inokulasi pada media MIO

1) Disiapkan alat dan bahan.

2) Diambil biakan bakteri dari media TSIA menggunakan ose steri.

3) Diinokulasi pada media MIO dengan menggunakan metode tusuk.

4) Diinkubasi kedalam inkubator selama 24 jam dengan suhu 370C.

5) Ditambahkan reagen kovaks 3-4 tetets (untuk pengamatan

indol/cincin merah pada media).

6) Dilakukan pengamatan pada media.

Interpretasi hasil : Motiliti : jika terdapat bekas tusukan

(bergerak/keruh) (+). Indol : jika terbentuk cincin merah pada

bagian atas tabung (+) setelah penambahan reagen kovaks. Ornitin :

jika media berubah warna dari ungu menjaadi kuning (+).

e) Inokulasi pada media MR

1) Disiapkan alat dan bahan yang akan digunakan.

2) Diambil biakan bakteri dari media TSIA menggunakan ose steril.

3) Diinokulasi pada media MR dengan menggunakan cara

dihomogenkan.

4) Diinkubasi kedalam inkubator selama 24 jam denga suhu 370C.

5) Ditambahkan reagen methyl red sebanyak 3-4 tetes.

 45

6) Dilakukan pengamatan pada media MR

Interpretasi hasil : positif (+) terjadi perubahan warna media

menjadi merah setelah penambahan methyl red , negatif (-) tidak

terjadi perubahan warna.

f) Inokulasi pada media VP

1) Disiapkan alat dan bahan yang akan digunakan.

2) Diambil biakan bakteri dari media TSIA menggunakan ose steril.

3) Diinokulasi pada media VP dengan menggunakan cara

dihomogenkan.

4) Diinkubasi kedalam inkubator selama 24 jam denga suhu 370C.

5) Ditambahkan reagen α naftol dan KOH 40%sebanyak 3-4 tetes.

6) Diamati media

Interpretasi hasil : positif (+) terjadi perubahan warna media

menjadi merah setelah penambahan α naftol dan KOH 40%,

negatif (-) tidak terjadi perubahan warna.

g) Inokulasi pada media gula-gula (glukosa, sukrosa, maltose, dan

manitol)

1) Disiapkan alat dan bahan yang akan digunakan.

2) Diambil biakan bakteri dari media TSIA menggunakan ose steril.

3) Diinkubasi pada media glukosa dengan cara dihomogenkan.

4) Diinkubasi kedalam inkubator selama 24 jam denga suhu 370C.

5) Perlakuan sama pada media sukrosa, maltose, dan manitol.

 46

6) Diamati media.

Interpretasi hasil : positif (+) terjadi perubahan warna media dari

merah menjadi kuning, negatif (-) tidak terjadi perubahan warna.

h) Identifikasi bakteripada uji katalase

1) Diteteskan H2O2pada objek glass

2) Diambil koloni pada media NA/MacConkey dengan ose steril

3) Dicampur H2O2dan koloni bakteri sampai homogen.

4) Diamati terjadinya koagulase.

Interpretasi hasil : terbentuk H2O2

6. Pengamatan

a) Dilakukan pengamatan dari Isolasi, Inokulasi, Pewarnaan Gram, dan Uji

Biokimia.

b) Interpretasi hasil (diketahui genus dan species bakteri patogen)

7. Interpretasi Hasil

a) Bakteri penyebab infeksi nosokomial pada sarung tangan bekas

pakai

Identifikasi bakteri penyebab infeksi nosokomial pada sarung tangan

bekas pakai dikategorikan sebagai berikut:

Positif : Apabila terdapat bakteri pada medium.

Negative : Apabila tidak terdapat bakteri pada medium.

b) Pewarnaan Gram
 47

Penenentuan morfologi bakteri berdasarkan pengamatan bentuk dan

warna bakteri yaitu sebagai berikut:

Bentuk batang/memajang dilaporkan sebagai basil, sedang bentuk bulat

dilaporkan sebagai coccus.

Gram positif berwarna ungu, sedangkan Gram negative berwarna merah.

G. Teknik Pengumpulan Data

Pengumpulan data pada penelitian ini diperoleh dengan cara melakukan

penelitian di Laboratorium Mikrobilogi Fakultas Kedokteran Universitas

Hasanuddin.

H. Teknik Analisis Data

Analisa data yang dilakukan delam penelitian ini adalah dengan

mendeskripsikan jenis bakteri yang ditemukan pada swab sarung tangan bekas

pakai di ruangan Private Care Center RS Dr. Wahidin Sudirohusodo.

I. Etika Penelitian

1. Menghormati harkat dan martabat manusia

2. Menghormati privasi dan kerahasiaan subjek peneliti

3. Keadilan dan Inkusivasi (Respect for justice and inclusiveness)

4. Memperhitungkan manfaat dan kerugian yang ditimbulkan (Balancing harms

and benefist).
 DAFTAR PUSTAKA

Ahmad Aniq Noor, Wiharto, Esti Suriany, 2015. Sistem Pakar Untuk Mendiagnosis

Penyakit Infeksi Menggunakan Forward Chaining. Jurnal Itsmart. Vol 4. No.

1. 2301-7201.

Anastashia Baharuddin, Fredine E.S Rares, Standy Soeliongan, 2015. Pola Bakteri

Penyebab Infeksi Nosokomial Pada Ruang Perawatan Intensif Anak di BLU

RSUP Prof. DR. R. D. Kandou Manado. Jurnal e-Biomedik (eBm). Vol. 3.

No. 1.

Anindya Putri Hapsari, Chatarina Umbul Wahyuni, Dwiono Mudjianto, 2018.

Pengetahuan Petugas Surveilans Tentang Identifikasi Healthcare-Associated

Infection Di Surabaya. Jurnal Berkala Epidemiologi. Vol. 6. No. 2. 130-138

Agnes Silvina Marbun, 2018. Faktor – faktor Yang Mempengaruhi Pencegahan

Infeksi Nosokomial di Ruang ICU dan Rawat Inap Lantai 3. Jurnal Online

Keperawatan Indonesia. Vol. 1. No. 2.

Agung Cahya Pratama, Elli Yane Bangkele, 2018. Identifikasi Bakteri Udara Di

Ruang Rawat Inap Raviliun Melatih RSUD Undata Palu. Medika Tadulako.

Jurnal Ilmiah Kedokteran. Vol. 5. No. 1.

Claudya Emma Sulistya, Olivia Waworuntu, John Porotu’o, 2015. Pola Bakteri Yang

Berpotensi Menjadi Sumber Penularan Infeksi Nosokomial Di Irina C

Ruangan Intermediate Care (IMC) BLU RSUP Prof DR.R.D Kandou

Manado. Jurnal e-Biomedik (eBm). Vol. 3. No. 1.

48
 49

Devi Nurmalia, Sarah Ulliya, Linawati Neny, Agnes Agustina Hartanty, 2019.

Gambaran Penggunaan Alat Pelindung Diri oleh Perawat di Ruang

Perawatan Rumah Sakit. Journal Of Holistic Nuesing and Health Science.

Vol. 2. No. 1. 45-53.

Fairuz Nabila Afia, 2018. Identifikasi Bakteri Pada Peralatan Medis Ruang Operasi

Di Rumah Sakit Bandar Lampung. Fakultas Kedokteran Universitas

Lampung.

Fitri Diana Dewi, 2013. Identifikasi Bakteri Penyebab Infeksi Nosokomial Pada

Peralatan Logam Yang Dipakai Berulang Kali Sebelum dan Sesudah

Sterilisasi di Ruang IGD RS. Dr. Wahidin Sudirohusodo Makassar. Fakultas

Farmasi Universitas Hasanuddin Makassar.

Gusti Ketut Suarjana, Nengah Kerta Basung, Ketut Tono, 2017. Modul Isolasi dan

Identifikasi Bakteri. Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana.

Ika Nur Jannah, Suhartono, Mateus Sakundarno Adi, 2016. Prevalensi Phlebitis Pada

Pasien Rawat Inap Dengan Infus di RSUD Tugurejo Semarang. Jurnal

Kesehatan Masyarakat (e-Journal). Vol. 4. No. 4. 2356-3346.

Ilkafah, Harniah, 2017. Perilaku Caring Perawat Dengan Kepuasan Pasien di Ruang

Rawat Inap Private Care Center RSUP DR. Wahidin Sudirohusodo

Makassar. Jurnal Ilmu Keperawatan Fakultas kedokteran Universitas

Hasanuddin. Vol. 8. No. 2. 2086-3071.

Isharyadi Putra, Muhammad Ikhtiar, Andi Emelda, 2018. Analisis Mikroorganisme

Udara Terhadap Gangguan Kesehatan Dalam Ruangan Administrasi Gedung

 50

Menara UMI Makassar. Windowof Health. Jurnal Kesehatan. Vol. 1. No. 2.

2614-5375.

Johan Harlan, Rita Sutjiati Johan, 2018. Metodologi Penelitian Kesehatan. Penerbit

Gunadarma. Jakarta.

Ketrina Konoralma, 2019. Identifikasi Bakteri penyebab Infeksi Nosokomial di

Rumah Sakit Umum GMIM Pancaran Kasih Manado.Jurnal Kesmas, Vol. 8.

No. 1. Januari 2019.

Laporan Akuntabilitas Kinerja (LAK), 2019. Dr. Wahidin Sudirohusodo Makassar

Leka Lutpiatina, 2017. Cemaran Staphylococcus aureus dan Psedomonas

aerogenosa pada Steteskop di Rumah Sakit. Jurnal Teknologi Laboratorium.

Vol. 6. No. 2. 2338-5634.

Michelle V. Holderman, Edwin de Queljoe, Sendy B. Rondonuwu, 2017. Identifikasi

Bakteri Pada Pegangan Eskalator di Salah Satu Pusat Perbelanjaan di Kota

Manado. Jurnal Ilmiah Sains Vol. 17 No. 1.

Nyimas Irina Silvani, Kemas Husni Samadin, Sri Nita, 2018. Pola Kepekaan Bakteri

Acinetobacter calcoaceticus Terhadap Antibiotik Pada Pasien Rawat Inap

RSUP Dr. Mohammad Hoesin Palembang. Biomedical Journal of Indonesia,

Vol. 4. No. 3.

Renji Mailis Wahyuni, Arman Sayuti, Mahdi Abrar, Erina, M. Hasan, Zainuddin,

2018. Isolasi dan Identifikasi Bakteri Enterik Patogen Pada Badak Sumatera

(Dicerorhinus sumatrensis) Di Suaka Rhino Sumatera (SRS), Taman Nasional

 51

Way Kambas (TNWK), Lampung. JIMVET E-ISSN: 2540-9492, 2(4): 474-

487.

Riani, Syafriani, 2019. Hubungan Antara Motivasi Dengan Kepatuhan Perawat

Melaksanakan Hand Hygiene Sebagai Tindakan Pencegahan Infeksi

Nosokomial Di Ruang Rawat Inap Rumah Sakit AH Tahun 2019. Jurnal Ners.

Vol. 3. No.2. Hal. 49-59.

Rizka Amalia, Laksmono Widagdo, Syamsulhuda BM. 2016. Faktor – Faktor Yang

Berhubungan Dengan Tingkat Kepatuhan Tenaga Kesehatan Melakukan Cuci

Tangan Studi Kasus di Instalasi Rawat Inap Rajawali RSUP DR. Kariadi

Semarang. Jurnal Kesehatan Masyarakat (e-Journal). Vol. 4. No. 3. 2356-

3346.

Rosa Dwi Wahyuni, 2017. Identifikasi Bakteri Udara Pada Instalasi Radiologi

Rumah Sakit Umum Daerah Undata Palu. Healthy Tadulako Journal. Vol. 3.

No. 1. 1-82.

Sukfitrianty Syahrir, Fitrahmadani Tirmanidhana, Sitti Raodhah, Emmi Bujawati,

2018. Analisis Pelaksanaan Pencegahan Dan Pengendalian Infeksi

Nosokomial Di ICU RSUD Labuang Baji Makassar. Jurnal Higiene. Vol. 4.

No. 2.

Ulfah Utami, Liliek Harianie, Nur Kusmiyati, Prilya Dewi Fitriasri, 2018. Buku

Petunjuk Praktikum Mikrobiologi Umum. Jurusan Biologi. Fakultas Sains Dan

Teknologi. Universitas Islam Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim.

 52

Wuny, 2015. Staf Pengajar FKIP Unpatti Ambon Studi Pendidikan Fisika, Tahun

XVII. Nomor 1.

Yati Supriatin, Muqni Rahayyu, 2016. Modification Of Carry-Blair Transport Media

For Storage Salmonella typhi. Jurnal Teknologi Laboratorium Vol. 5. No. 2.

72-73.

Yosi Kusuma, Komang Januarta Putra Pinatih, Made Agus Hendrayana, 2019. Efek

Sinergis Kombinasi Chlorhexidine Dan Alkohol Terhadap Daya Hambat

Pertumbuhan Staphylococcus aureus. E-Jurnal Medika Vol. 8. No. 3. 2303-

1395.
 LAMPIRAN

A. Alur Penelitian
Swab Sarung Tangan
Bekas Pakai

Isolasi pada media BHIB

selama 1x24 jam suhu 37oC

Penanaman Pada Media NA + Mac

Conkey selama 1x24 jam suhu 37oC

Dilakukan Pewarnaan
Gram

Bakteri Gram Positif Bakteri Gram Negative

Uji Biokimia
(uji TSIA, uji Urea, uji
Gula – gula, Mio, uji
Citrate, uji MRVP, Uji
Katalase)

Interpretasi Hasil

Analisis Data

53
 54

Pembahasan

Kesimpulan
 55

Komposisi dan cara pembuatan media dan reagen

1. Komposisi media Nutrient Agar (NA)

Media Nutrient Agar (NA)merupakan salah satu mediauniversal atau umum

yang dapat digunakan untuk menumbuhkan dan menghitung populasi berbagai

jenis bakteri. Adapun komposisi dari media Nutrient Agar (NA) yaitu peptone : 5

g, yeast extract : 2 g, sodium chloride : 5 g, agar : 15 g, dan ph : 7.

2. Cara pembuatan media Nutrient Agar (NA)

a. Di timbang serbuk Nutrient Agar (NA) sebanyak 19,5 gr

b. Di larutkan serbuk Nutrient Agar (NA) dengan 250 ml aquadest sambil diaduk

hingga larut

c. Di masukkan ke dalam erlenmeyer lalu tutup dengan kapas dan alumunium foil

d. Di sterilkan dalam autoclave pada suhu 121°C selama 15 menit

e. Di tuang ke dalam cawan petri.

3. Komposisi media MacConkey Agar (MCA)

Pada umumnya media selektif atau media MacConkey Agar (MCA)

digunakan untuk menumbuhkan bakteri Gram negatif. Komposisi media

MacConkey Agar (MCA) : 17 gram gelatin, 13,5 agar, 10 gram laktosa, 5 gram

NaCl, 1,5 gram garam empedu, 1,5 gram kasein, 1,5 gram daging hewan, 0,03

gram Neutral Red, dan 1 mg Crystal Violet.

4. Cara pembuatan media MacConkey Agar (MCA)

a. Di timbang serbuk MacConkey Agar (MCA) sebanyak 19,5 gr

 56

b. Di larutkan serbuk MacConkey Agar (MCA) dengan 250 ml aquadest sambil

diaduk hingga larut

c. Di masukkan ke dalam erlenmeyer lalu tutup dengan kapas dan alumunium foil

d. Di sterilkan dalam autoclave pada suhu 121°C selama 15 menit

e. Di tuang ke dalam cawan petri.

5. Komposisi media Triple Sugar IronAgar (TSIA)

Komposisi media Triple Sugar IronAgar (TSIA): 3 gram ekstrak daging

sapi, 3 gram ekstrak yeast, 20 gram pepton, 1 gram glukosa, 10 gram laktosa, 10

gram sukrosa, 5 gram NaCl, 0,2 gram ferri sulfat, 0,3 gram sodium thiosulfat,

0,024 phenol red, dan 13 gram agar.

6. Cara pembuatan media Triple Sugar IronAgar (TSIA)

a. Di timbang media sebanyak 3,9 gram yang diperoleh dari hasil perhitungan

65 𝑔𝑟 × 60 𝑚𝑙
= 3,9 𝑔𝑟𝑎𝑚
1000 𝑚𝑙

b. Di larutkan dengan aquades sebanyak 30 ml di dalam erlenmeyer

c. Di panaskan di atas hot plate sambil diaduk menggunakan batang pengaduk

hingga mendidih

d. Di sterilkan dengan autoclave hingga suhu 1210C

e. Di bagi media ke dalam lima tabung reaksi masing-masing 5 ml

f. Di simpan media dalam kulkas untuk digunakan pada identifikasi bakteri

7. Komposisi media Simons Citrat

 57

Komposisi mediaSimons Citrat: 0,2 gram magnesium sulfat, 1 gram

ammonium dihidrogen fosfat, 1 gram dipotasium fosfat, 2 gram sodium sitrat, 5

gram NaCl, 0,08 bromthymol blue, dan 15 gram agar.

8. Cara pembuatan media Simons Citrat

a. Di timbang media sebanyak 7,26 gram yang diperoleh dari haasil perhitungan

121 𝑔𝑟 × 60 𝑚𝑙
= 7, 26 𝑔𝑟𝑎𝑚
1000 𝑚𝑙

b. Di larutkan dengan aquades sebanyak 60 ml di dalam erlenmmeyer

c. Di panaskan di atas hot plate sambil diaduk menggunakan batang pengaduk

hingga mendidih

d. Di sterilkan dengan autoclave hingga suhu 1210C

e. Di bagi media ke dalam lima tabung reaksi masing-masing 5 ml

f. Di simpan media dalam kulkas untuk digunakan pada identifikasi bakteri

9. Komposisi media Urease

Komposisi media urease : 20 gram Urea, 5 gram sodium klorida, 1 gram

gelatin pepton, 1 gram dextrose, dan 0,01 gram phenol-red.

10. Cara pembuatan media Urease

a. Di timbang media sebanyak 1,26 gram yang diperoleh dari haasil perhitungan

21 𝑔𝑟 × 60 𝑚𝑙
= 1, 26 𝑔𝑟𝑎𝑚
1000 𝑚𝑙

b. Di larutkan dengan aquades sebanyak 60 ml di dalam erlenmmeyer

 58

c. Di panaskan di atas hot plate sambil diaduk menggunakan batang pengaduk

hingga mendidih

d. Di sterilkan dengan autoclave hingga suhu 1210C

e. Di bagi media ke dalam lima tabung reaksi masing-masing 5 ml

f. Di simpan media dalam kulkas untuk digunakan pada identifikasi bakteri

11. Komposisi media Sulfida Indol Motility(SIM) atau Motilitas Indol Ornithin

(MIO)

Komposisi media Sulfida Indol Motility(SIM) atau Motilitas Indol Ornithin

(MIO) : 10 gram tripton dan 5 gram NaCl

12. Cara pembuatan mediaSulfida Indol Motility(SIM) atau Motilitas Indol Ornithin

(MIO)

a. Di timbang media sebanyak 1,86 gram yang diperoleh dari haasil perhitungan

31 𝑔𝑟 × 60 𝑚𝑙
= 1,86 𝑔𝑟𝑎𝑚
1000 𝑚𝑙

b. Di larutkan dengan aquades sebanyak 60 ml di dalam erlenmmeyer

c. Di panaskan di atas hot plate sambil diaduk menggunakan batang pengaduk

hingga mendidih

d. Di sterilkan dengan autoclave hingga suhu 1210C

e. Di bagi media ke dalam lima tabung reaksi masing-masing 5 ml

f. Di simpan media dalam kulkas untuk digunakan pada identifikasi bakteri

13. Komposisi media MethylRed (MR) dan media VogesProskauer (VP)

 59

Komposisi mediaMethylRed (MR) dan media VogesProskauer (VP): 7 gram

pepton, 5 gram dextrose agar, dan 5 gram dipotasium fosfat.

14. Cara pembuatan media MethylRed (MR) dan media VogesProskauer (VP)

a. Di timbang media sebanyak 1,02 gram yang diperoleh dari haasil perhitungan

17 𝑔𝑟 × 120 𝑚𝑙
= 1,02 𝑔𝑟𝑎𝑚
1000 𝑚𝑙

b. Di larutkan dengan aquades sebanyak 120 ml di dalam erlenmmeyer

c. Di panaskan di atas hot plate sambil diaduk menggunakan batang pengaduk

hingga mendidih

d. Di sterilkan dengan autoclave hingga suhu 1210C

e. Di bagi media ke dalam dua belas tabung, enam tabung untuk media

MethylRed (MR) dan enam tabung untuk media VogesProskauer (VP) reaksi

masing-masing 5 ml

f. Di simpan media dalam kulkas untuk digunakan pada identifikasi bakteri

15. Cara pembuatan media gula-gula (glukosa, sukrosa, laktosa, dan maltosa)

a. Glukoasa

1) Di timbang media yang digunakan sebanyak 13 g dalam 1 liter

2) Di masukan media kedalam tabung erlenmeyer dan tuang aquades sesuai

kebutuhan dan tetesi reagen bronthymol blue sampai berubah warna

menjadi biru

3) Di homogenkan pada hot plate stirer menggunakan magnetic stirrer

 60

4) Di tuang kedalam tabung reaksi yang sudah berisi tabung durham dan di

sterilkan kembali pada autoclave selama 15 menit.

5) Di simpan media dalam kulkas untuk digunakan pada identifikasi bakteri

b. Sukrosa

1) Di timbang media yang digunakan sebanyak 13 g dalam 1 liter

2) Di masukan media kedalam tabung erlenmeyer dan tuang aquades sesuai

kebutuhan dan tetesi reagen bronthymol blue sampai berubah warna

menjadi biru

3) Di homogenkan pada hot plate stirer menggunakan magnetic stirrer

4) Dituang kedalam tabung reaksi yang sudah berisi tabung durham dan di

sterilkan kembali pada autoclave selama 15 menit

5) Di simpan media dalam kulkas untuk digunakan pada identifikasi bakteri

c. Laktosa

1) Di timbang media yang digunakan sebanyak 13 g dalam 1 liter

2) Di masukan media kedalam tabung erlenmeyer dan tuang aquades sesuai

kebutuhan dan tetesi reagen bronthymol blue sampai berubah warna

menjadi biru

3) Di homogenkan pada hot plate stirer menggunakan magnetic stirrer

4) Di tuang kedalam tabung reaksi yang sudah berisi tabung durham dan di

sterilkan kembali pada autoclave selama 15 menit

5) Di simpan media dalam kulkas untuk digunakan pada identifikasi bakteri

d. Maltosa
 61

1) Di timbang media yang digunakan sebanyak 13 g dalam 1 liter

2) Di masukan media kedalam tabung erlenmeyer dan tuang aquades sesuai

kebutuhan dan tetesi reagen bronthymol blue sampai berubah warna

menjadi biru

3) Di homogenkan pada hot plate stirer menggunakan magnetic stirrer

4) Di tuang kedalam tabung reaksi yang sudah berisi tabung durham dan di

sterilkan kembali pada autoclave selama 15 menit

5) Di simpan media dalam kulkas untuk digunakan pada identifikasi bakteri

16. Komposisi larutan pewarnaan gram

a. Larutan Kristal Violet

Kristal violet adalah reagen berwarna ungu yang bersifat basa sehingga

mampu berikatan dengan sel mikroorganisme yang bersifat asam. Komposisi

dari kristal violet yaitu kristal violet 2 gr, alkohol 95% 20 ml, aquadest 80 ml,

ammonium oksalat 0,8 gr.

b. Larutan Lugol

Larutan lugol adalah suatu larutan dari unsur iodium dan kalium iodide

dalam air. Komposisi larutan lugol yaitu 5% yodium murni (I2), 10% kalium

iodida (KI), 85% air murni (H2O).

c. Alkohol 96%

Alkohol 96% berfungsi sebagai peluntur pada pewarnaan gram.

Komposisi dari alkohol 96% yaitu alkohol 96 ml dan aquadest 4 ml.

d. Larutan Safranin
 62

Safranin adalah cairan kimia yang digunakan untuk pewarnaan gram.

Pada pewarnaan gram larutan safranin akan menghasilkan warna merah yang

menandakan bahwabakteri tersebut merupakan bakteri gram negatif.

Komposisi dari larutan safranin yaitu safranin 0,25 gr, Alkohol 95% 10 ml,

Aquades 90 ml.

17. Cara pembuatan pewarnaan gram

a. Larutan Kristal Violet

Kristal violet dicampur dengan ammonium oksalat kemudian dihaluskan

dengan stampler lalu di tambahkan aquadest dan alkohol.

b. Larutan Lugol

Larutkan 10 gram kalium iodida (KI) dalam 80 mL aquadest. Lalu aduk

sampai larut.Tambahkan 5 gram iodium (I2), aduk sampai sampai

rata.Encerkan larutan yang terbentuk sampai 100 mL.Simpan dalam botol

berwarna gelap. Jauhkan dari sinar matahari.

c. Alkohol 96%

Di siapkan alat dan bahan yang akan digunakan, dituang 96 ml alkohol

pada gelas ukur dan ditambahkan pelarut sebanyak 4 ml (aquadest).

d. Larutan Safranin

Di timbang safranin sebanyak 0,25 gram ditambahkan alokhol 95%

sebanyak 10 ml dan ditambahkan aquadest sebanyak 90 ml lalu

dihomogenkan.
 63

Atlas Pewarnaan Gram

64
 65

Gram Positif Coccus

Micrococcus luteus
Gram Negatif Coccus

Neisseria sp Veillonella sp
Gram Positif Bacilli

Bacillus cereus
 66

Actinomyces israelii
Gram Negatif Bacilli

Moraxella Brucella

Fusobacterium nucleatum Streptobacillus sp

Vibrio sp Psedomonas aeroginosa

Bagan Identifikasi Bakteri
67
68
69
70
71
72